金黄色葡萄球菌分子流行病学研究

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重庆某医院重症监护室耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的分子流行病学

ＣｏｎｃｕｓｏｌｉｎｓＰｒｖｌｎｅｏｅｔｉｙｐｓｏｃｐｏｉｉＲＳｓｒｉｏｌｃｄｔｐｉｅｃｏｔｒａＡｌｅａｅｃｆｃｒａｎｔｅｆｍｅＡｓｔｖｅＭＡｔａｎｓｃｕｄ１ａｏｅｄｍｉｕｂｅｋ．】
ｍｃＡ引物参照Ｊ等报道设计（ｎａｓ０３）：Ｆ：
５’ ＡＡＡＡＴＣＧＡＴＧＧＴＡＡＡＧＧＴＴＧＧＧ．．３，Ｒ：５． ’ ＡＧＴＴＣＴＧＣＡＧＴＡＣＣＧＧＡＴＴＴＧＣ一 ’ ３。
素、左氧氟沙星、克林霉素均耐药，对利福平、万古霉素、替考拉宁和利奈唑胺均敏感。ＰＧＥ型２株ＭＲＡ有４Ａ～，以Ｆ分６Ｓ型（Ｄ）
Ａ型流行株为主。结论重庆市某医院２０年９ｏ８月至２０年６ｏ９月神经外科Ｉｕ和中心Ｉｕ病房ＭＲＡ分离率较高，ＭＲＳｃｃｓＡ菌株为多
ＣＳ２０（）ＬＩ０８２版判断标准。
ＭＲＳ，到２世纪７年代末随着抗生素的广泛应Ａ）００用以至滥用，导致ＭＲＡＩ感染急剧增多，医疗Ｓ￣床费用增加，死亡率上升。耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的感染率有逐年增加的趋势，且多重耐药严重，以致万古霉素等糖肽类抗生素成为治疗ＭＲＳＡ感染的最后一道防线。但继ｌ９年目本出现了对万古霉９６素不敏感金黄色葡萄球菌（ａｃｍｙｉ．ｔｒｄａｅｖｎｏｃｎｉｅｍｅｉｔｎ以ｈｌｃｕｕｅｓＶＳ）后，美国在２０年又分ｙｏｏｓａｒｕ，ＩＡ之０２离出了第１株耐万古霉素金黄色葡萄球菌（ａｃｍｙｉｖｎｏｃｎ

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌研究进展

试验研究ＬＩＶＥＳＴＯＣＫＡＮＤＰＯＵＬＴＲＹＩＮＤＵＳＴＲＹＮｏ．１，２０２１耐甲氧西林金黄色葡萄球菌研究进展黄显晔１，谢宇庭２，张鹏宇３通信作者（１．黑龙江省大庆市杜尔伯特县畜牧技术服务中心，黑龙江大庆１６３０００；２．黑龙江省齐齐哈尔市畜牧总站，黑龙江齐齐哈尔１６１００６；３．黑龙江省农业科学院畜牧兽医分院，黑龙江齐齐哈尔１６１０００）摘　要：近年来，抗生素的滥用导致了细菌耐药性情况越来越严重。

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌是一个典型的例子，成为了在临床上较难治愈的细菌。

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌在动物上可分离出来，对动物的健康造成了消极的影响，也对公共卫生安全造成了威胁。

就耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌的临床特性、耐药情况以及治疗情况进行综述。

关键词：耐甲氧西林金黄色葡萄球菌；耐药性；万古霉素；中药ｄｏｉ：１０．１９５６７／ｊ．ｃｎｋｉ．１００８－０４１４．２０２１．０１．００５　引言随着抗生素的广泛使用，细菌的耐药性问题逐渐显现出来。

其中，耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（ＭｅｔｈｉｃｉｌｌｉｎＲｅｓｉｓｔａｎｔＳｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓａｕｒｅｕｓ，ＭＲＳＡ）是耐药细菌中的典型代表。

ＭＲＳＡ是指能抵抗甲氧西林以及其他β－内酰胺类药物的一类金黄色葡萄球菌。

在临床上由于其严重的耐药性，出现医治困难的情况，对人及动物安全造成较大影响，给公共卫生安全事业带来了不小的挑战。

近年来，在动物源，尤其是乳房炎以及子宫内膜炎病例中，经常分离出ＭＲＳＡ菌株，对畜禽养殖行业造成了不小的经济损失［１］。

科研人员对ＭＲＳＡ菌株进行了研究，探索其临床特性以及耐药机制，并不断寻找对其的治疗方法。

本文对ＭＲＳＡ菌株的流行病学、耐药机制以及防治研究进展进行综述。

　流行病学甲氧西林于２０世纪５０年代在临床使用，由于其对青霉素酶稳定，曾有效控制住了耐青霉素金黄色葡萄球菌的流行。

但是，随着其广泛的使用，金黄色葡萄球菌对其的耐药性逐渐产生。

50株临床分离金黄色葡萄球菌分子流行病学及药物敏感性分析

ｔｙｐｉｎｇａｎｄｄｅｔｅｃｔｉｏｎｏｆｔｈｅｌｕｋＳｇｅｎｅｅｎｃｏｄｉｎｇＰＶＬ．Ｉｎａｄｄｉｔｉｏｎ，ＳＣＣｍｅｃｔｙｐｉｎｇｗａｓｐｅｒｆｏｒｍｅｄｆｏｒｍｅｔｈｉｃｉｌｌｉｎ－ｒｅｓｉｓｔａｎｔＳ．ａｕｖｅ￣ｔｓ（ＭＲＳＡ）ｉｓｏｌａｔｅｓ．Ｔｈｅａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌａｃｔｉｖｉｔｉｅｓｏｆ１４ａｇｅｎｔｓｉｎｃｌｕｄｉｎｇｃｅｆｔａｒｏｌｉｎｅａｎｄｔｉｇｅｃｙｃｌｉｎｅａｇａｉｎｓｔＭＲＳＡｉｓｏｌａｔｅｓｗｅｒｅｆｕｒｔｈｅｒｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄｂｙａｇａｒｄｉｌｕｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄ．ＲｅｓｕｌｔｓＴｈｉｒｔｙ－ｔｈｒｅｅｓｔｒａｉｎｓｗｅｒｅｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄａｓＭＲＳＡａｍｏｎｇｔｈｅ５０Ｓ．ａｕｒｅｕｓ
Ｚ０ｃ０ｃｃ “ ｓａｕｒｅｕｓ
ｓｔｒａｉｎｓｉｓｏｌａｔｅｄｆｒｏｍＢｅｉｊｉｎｇＥｌｅｃｔｒｉｃＰｏｗｅｒＨｏｓｐｉｔａｌｄｕｒｉｎｇｔｈｅｐｅｒｉｏｄｆｒｏｍＯｃｔｏｂｅｒ２００９ｔＯＭａｒｃｈ２０１０．ＭｅｔｈｏｄｓＡｔｏｔａｌｏｆ

医院获得性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的分子流行病学研究

件（Ｃｍｅ）ＳＣｃ分型。方法
ＭＲＡ对苯唑西林的ＭＩ；多重ＰＲ方法对ＭＲＡ染色体盒ｍｃ元件的结构及其变异情况进行分型分析，Ｓｃ值用ＣＳｅ对ＭＲＡ进行分子分型。结果Ｓ对红霉素、四环素、甲氧苄啶／磺胺甲嗯唑、克林霉素的耐药率分别为９％、５４％及４％，万古霉素全部敏２９％、５７对感；２１２株ＭＲＡ中有１５株属于ＳＣｅ一Ⅲ型，Ｓ１Ｃｍｃ４株属于ＳＣｃＣｍｅ一ⅢＡ亚型，株属于ＳＣｃ—Ｉ，株属于１ＣｍｅＶ型１ＳＣｅ — Ｉ，株属于未定型株（ＴＳＣｅ）Ｃｍｃ型１ＮＣｍｃ型。结论多数ＭＲＡ菌株对所用抗生素呈多药耐药；Ｓ用多重
流行病学研究木
马为徐邦牢王蓉包品红
广东省广州市第一人民医院呼吸内科（１１０５０８）
【摘要】目的
对２００３年以来连续收集的１２２株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（ＲＡ进行染色体盒ｍｃＭＳ）ｅ元
用Ｋ—Ｂ法药敏试验常规进行抗生素敏感试验；ＮＣＳ标准，按ＣＬ用琼脂板稀释法测定１２株ＭＲＡ对青霉素及环丙沙星均耐药，２Ｓ苯唑青霉素的ＭＩＣ为６４～１２／４ｍｓＬ，０
Ｇａｇｈｕ５０１０，ｈｎｕｎｚｏ１８Ｃｉａ
．
【ｂｔｃ】Ｏｊｔｅｏｅｏｐ２ｒｎｏｍｔｃｌ — ｅｓｎＳｐｙｃｃｓｕｕ（ＲＡｏｅｔＡｓａｔｒｂｅｉＴｎｔｅ１２ｓａｓｆｅｉｌｒｉａｔｔｈｌｏｕｒｓＭＳ）ｃｌ－ｃｖｇｙｔｉｈｉｎｓｔａｃａｅｉｏｌｃ

重症监护病房金黄色葡萄球菌耐药性与流行病学分析

ｌｉａｃｎｉｏｓｅｅｅｔｄｗｔＲＰ（ａｄｍａｐｉｅｏｙｏｐｉＤＡ）ｈｓｔｃａｏｆ２ＳｔｉｓｏｃｌｏｄｔｎｒｔｓｉＡＤｒｎｏｍｌｄｐｌｍｒｈｃＮ．ＴｅｒｉａｅｒｔＡｓａｇｉｗｅｈｉｆｅｓｎｉｏ４ｒｎ
Ｄｒ－ｓｓａｎｄＥｐｉｅｉｌｇｃｌＡｎａｙｉｆｕｇＲｅｉｔｎｔａｄｍｏｏｉａｌｓｓｏＳａｙｌｃｃｕｕｅｓｉＣＵａｄｔｐｈｏｏｃｓａｒｕｎＩＷｒｓ
ＺＮｅｚｉ，ＭＯＰｎＡｕｊｎ，ＨＥＧＬ — ｈｉｇ，ＮＲ－ＷＡＮｉａｕＧＬ．ｙ
ｓ，株为甲氧西林敏感的葡萄球茵（Ｓ，万古霉素外，Ｓ对其他９种抗生素的耐药率比ＭＳＡＡ）７ＭＳＡ）除ＭＲＡＳ高，２株金黄色葡萄球茵经ＲＰ分型分为５个基因型，中Ｉ、 Ⅲ 、、型分另４ＡＤ其 Ⅱ、 Ⅳ Ｖｑ占３．％、８１、１０３．％
（．Ｄｅ．ｏ１ｐｆＮｕｓｇ．Ｄｅ．ｏＩＵ；．ＤｐｆＣｉ．Ｌｂ；ＴｅＸａｇａＨｓ．ｅｔｏｔＵｉ．ｈｎｓａ４０１）ｒｎ；２ｉｐｆＣ３ｅ．ｏｌｎａ．ｈ３ｉｎｙｏ，Ｃｎ．Ｓｕｈｎｖ。Ｃａｇｈ１０３ｐ
维普资讯
微生物学杂志２０年５０８月第２卷３ＪＵＮＬＦＩＯＩＬＧａ２８ｏ２Ｎ．８期ＯＲＡＣＢＯＯＹＭｙ０１８ｏＯＭＲ０Ｖ．３

耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌(MRSA)

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 - 易感人群
1、长期住院使用抗生素患者； 2、ICU患者； 3、皮肤病患者； 4、烧伤病房患者； 5、糖尿病（胰岛素依赖型）； 6、长期腹膜透析/血液透析。
耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 - 危害 1、感染率越来越高，且病情严重； 2、治疗更加困难； 3、感染其他住院病人； 4、不仅存在于医院，监狱和学校也有出现。
耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 - 流行病学传染源——MRSA定植者和感染者传播途径——接触传播（医护人员、器械传播）
耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 - 特性不均一耐药性 MRSA菌落内细菌存在敏感和耐药两个亚群，即一株MRSA中只有一小部分细菌约10－4～10－7，对甲氧西林高度耐药，在50 μg/ml甲氧西林条件下尚能生存，而菌落中大多数细菌对甲氧西林敏感，在使用抗生素后的几小时内大量敏感菌被杀死，但少数耐药菌株却缓慢生长，在数小时反又迅速增殖。广谱耐药性 MRSA除对甲氧西林耐药外，对其它所有与甲氧西林相同结构的 β-内酰胺类和头孢类抗生素均耐药，MRSA还可通过改变抗生素作用靶位，产生修饰酶，降低膜通透性产生大量PABA等不同机制，对氨基糖苷类、大环内酯类、四环素类、氟喹喏酮类、磺胺类、利福平均产生不同程度的耐药，唯对万古霉素敏感。
耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 - 感染病情 1、MRSA是引起不少深部感染的主要致病菌，如肺部感染、脓毒性关节炎、心内膜炎、败血症等； 2、MRSA能引起许多皮肤、皮肤结构与软组织感染，如脓疱病、烧伤感染、创伤感染、烫伤样皮肤综合征、中毒性休克综合征（TSS）； 3、MRSA引起的感染具有很高的发病率和病死率。[2]
耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 - 治疗对策 1、万古霉素，替考拉宁 2、利奈唑烷 3、链阳霉素 4、TMPCo 5、利福平

太原地区耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的随机扩增多态DNA分型及流行病学研究

中国药物与临床２１年２月第１卷第２期ＣｉｅｅＲｍｄｅ＆ＣｉｉｓＦｂｕｒ００ｖ１ｌ．０１１ｈｎｓｅｅｉｓｌｃ，ｅｒａｙ２１ ’ｏ．，２ｎ１Ｎｏ
・
调查研究・
太原地区耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的随机扩增多态ＤＡ分型及流行病学研究Ｎ
解ＭＲＡ在这３医院的流行情况。Ｓ所
１材料和方法
ＰＲ模板；②ｍｃＣｅＡ基因ＰＲ引物序列为：１５－ＴＣＡＣＰ：＇ＣＧＴ —
ＣＡＧＧＴＡＴＣＣＧＴＧＡＡＴＡ一３Ｐ２：５一ＴＴＧＴＡＴＹＧＡＣＴＧＴＡＴＣＴＣ－
ＴＴＧ３产物长为５７ｂ￣。③ ＰＲ扩增：ＩＧＡ一６ｐ］２Ｃ通过ＰＲ对Ｃ
ａ，５ｒｎ５１ｎ７ｉ，２℃１ｍｉ，环３ｍｉｎ循０周期，２℃延伸１ｉ７０ｒｎａ
的条件下进行ＰＲ反应。取１ｌＣＣ０ＩＲ产物点人含ＥｘＰＢ的ｌ％琼脂糖凝胶，．ｘＢ０５ＴＥ为电泳缓冲液，用水平式电泳槽稳压１０Ｖ，１电泳４ｉ，０ｍｎ凝胶成像系统观察结果成像。
趋势，已引起全世界重视。ＭＲＡ不仅对８内酰胺类抗生素Ｓ一
耐药，常对喹诺酮类、基糖苷类和大环内酯类等抗菌药还氨
物耐药。由于其多重耐药性，易造成医院感染的爆发流行，全
身感染的病死率高达５％以上。已成为临床抗感染治疗的一０
ｍｃ基因进行扩增，阳性对照为ＡＣ４３０阴性对照ｅＡＴＣ３０，

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌研究进展

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌研究进展本文从网络收集而来，上传到平台为了帮到更多的人，如果您需要使用本文档，请点击下载按钮下载本文档（有偿下载），另外祝您生活愉快，工作顺利，万事如意！金黄色葡萄球菌是造成医院和社区获得血流感染、皮肤及软组织感染的主要致病菌。

自耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（methicillin-resistant Staphylococcus aureus，MRSA)检出以来，其耐药范围的扩大和耐药程度的曰益加重，给临床治疗带来较大困难，被称为“超级细菌”。

了解MRSA现状可更好治疗和避免传播。

本文对MRSA的流行病学、危险因素、耐药机制等研究进展综述如下。

1MRSA概念根据2014年CLSI诊断标准，“耐甲氧西林”或“耐苯唑西林”指表达mec或对青霉素酶耐药，当头孢西丁对金黄色葡萄球菌抑菌圈直径4 mg/L时可将其判定对苯唑西林耐药。

近年来，随着抗生素的广泛应用，逐渐出现了对万古霉素中介或耐药MRSA，分别称为VISA(vancomycirr intermediate Staphylococcus aureus )和VRSA (vancomycin—resistant Staphylococcus aureus )。

VISA和VRSA定义为金黄色葡萄球菌对万古霉素的最低抑菌浓度分别为4〜8mg/L和> 16 mg/L。

MRSA具有毒性强、耐药谱广和耐药机制复杂及传播速度快的特点，可分为社区获得性MRSA (community-acquired MRSA，CA-MRSA)和医院获得性MRSA(hospital-acquired MRSA，HA-MRSA)。

CA-MRSA是患者院外无感染MRSA 危险因素和入院72 h 内获得MRSA[1]。

CA-MRSA 是与HA- MRSA不同的表型和基因型一种病原体[2]。

HA- MRSA指在接触过医疗机构的个体间相互传播的MRSA菌株，HA-MRSA感染可在医院内发病，也可在社区内发病。

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MLST分型
MLST分型的主要优势是监测结果精确，分辨力强，并且已经建立了国际数据库网站，各实验室的研究资料可以在网上进行比对，使不同时间、不同实验室的检测结果间有可比性，适用于大规模和长期的流行病学监测。
MLST与SA遗传背景分析
MLST与SCCmec分型
27 19 2 2 2 2 2 1 1
43.55 30.65 3.22 3.22 3.22 3.22 3.22 1.61 1.61
25
182 1226 1296
IV
I IV I
25
182 25 8
1
1 1 1
1.61
1.61 1.61 1.61
住院患者h-VRSA菌株MLST分型
菌株 ST型 SCCmec CC 株数构成比(%)
研究结果
ICU病区MRSA监测结果
标本来源及数量 *人群（28例，79份） *环境（52）阳性数阳性率（％） 30.38 阳性个体个体带菌率 (%) 数 16 57.14
24
7
13.46
/
/
空气（15）
0
0.00
/
/
ICU病区分离的MRSA 菌株RAPDPCR扩增电泳图谱
结果分析
结果分析
研究表明：MRSA存在医、患和物品之间相互传播的现象；也可通过手－鼻途径自身接种、并定植，使MRSA长期存在，难以清除接触传播是主要传播途径，其重要性远远大于空气传播。
预防MRSA传播—手卫生Βιβλιοθήκη 英国预防MRSA传播的新措施
SCCmec分型多重PCR扩增产物电泳图谱
M为DL100DNAmarker，I，II，III，IV，V分别为NCTC10042（SCCmecI型）、N315 （SCCmecII型）、85/2080（SCCmecIII型）、JCSC4744（SCCmecIV型）、HS663 （SCCmecⅤ型），1为SCCmecIII型，2为SCCmecIV型。
分子流行病学研究方法
以测序为基础的方法：多位点序列分型（MLST），选择7个管家基因分别用PCR扩增，然后进行测序, 比较多态位点的不同，得到不同的等位基因谱，再由专业软件进行分析和分型。由于每一个管家基因都有很多等位基因，由7个管家基因排列的等位基因谱可达到2×1010个，所以不同菌株间具有相同的等位基因谱的可能性极小，也就是说具有相同等位基因谱的细菌被认为是来源于同一个祖先的细菌。
Enright等将MLST分型与SCCmec分型结合对MRSA的遗传学特征和耐药基因盒特征进行综合描述，用该方法对来自20个国家的 359株MRSA进行研究,发现主要有5个基因型流行。
SCCmec 分型与结构
我们的研究内容
ICU病区MRSA病原学监测分子流行病学研究
–随机引物扩增DNA（RAPD）：比较分离菌之间的同源性关系 –多位点序列分型（MLST）：比较本地流行株与国际流行株之间的关系
金黄色葡萄球菌分子流行病学研究
研究背景
耐药菌的传播是不分国界的！
分子流行病学研究方法
以电泳为基础的方法：随机扩增DNA多态性（RAPD），重复序列PCR（rep-PCR），脉冲场凝胶电泳（PFGE），限制性酶谱（REA），扩增片段长度多态性(AFLP) 方法简单方便，成本较低但一般仅适用于对同一批标本的检测结果进行比较，不能与其他实验室的结果进行比较，不能了解不同地区流行的菌株之间是否有亲缘关系
141株MRSA SCCmec分型与抗生素耐药性比较
100 90 80 70 60 50 40 30 20 10 0 II型 n=34 III型 n=102 IV型 n=5
VAN LNZ QDA RIF SXT TCY LVX GEN CLI ERY CZO OXA AMP PEN
结果分析
141株MRSA SCCmec分型结果显示，Ⅲ型 102株（占72.3％），Ⅱ型34株（24.1%）， Ⅳ型5株（2.8％）；细菌耐药率分析显示 Ⅲ型> Ⅱ型> Ⅳ型。 MRSA多重耐药表型与 SCCmec基因盒的结构相关。
门诊患者MSSA菌株MLST分型
菌株 ST型 CC 株数构成比(%)
121 121 6 60.00
MSSAOP （10株）
88 221
88 5
3 1
30.00 10.00
住院患者MSSA菌株MLST分型
菌株
MSSA-IP （10株）
ST型 88
7
CC 88
7
株数
2 2
构成比(%)
20.00 20.00 10.00 10.00 10.00 10.00 10.00 10.00
–79份医、患人员标本中，有24份分离出MRSA，检出率为30.4%。 –52份环境标本中有7份检出MRSA（13.5%） –15份空气标本中未检出MRSA。
ICU病区MRSA监测结果表明：MRSA在人群中的定植远远高于环境；人是MRSA的主要储菌库。
结果分析
–RAPD分型结果显示，MRSA主要分为3个型别 –第一型：20株细菌，来自10名医护人员，2名患者和3份环境标本 –第二型：4株细菌，1株来自医师， 3株来自源于同一患者 –第三型：7株细菌，3株来自患者， 3株来源于环境
239
88 h-VRSA （13株）
Ⅲ
Ⅲ
8
88
7
2
53.85
15.38
241
5 121
Ⅲ
II Ⅲ
8
5 121
2
1 1
15.38
7.69 7.69
结果分析
门诊患者感染的MSSA主要基因型为ST121 （60％）；而住院患者感染的MSSA基因型复杂多样，没有优势基因型流行，说明在医院环境中MSSA不能长期存活，不易造成传播和流行，多表现为散发感染。
59
188
59
1
1
1
398
6 20 30
398
6 20 30
1
1 1 1
住院患者MRSA菌株MLST分型
菌株 ST型 SCCmec CC 株数构成比(%)
MRSA-IP （62株）
239 5 1 88 398 307 399 6 15
Ⅲ II IV II II Ⅲ Ⅲ II II
8 5 1 88 398 * 121 6 15
讨论与小结
住院患者感染的MRSA，以ST239型（属国际流行株 Brazilian/ Hungarian株）和ST5 型（属国际流行株NewYork/Japan株）两个国际流行株为主，分别占43.5%和30.6%。说明住院患者感染的MRSA不是由于MSSA 在治疗过程中产生的耐药，而是由于MRSA 流行株的克隆传播，是由医院感染所引起的