产气荚膜梭菌
产气荚膜梭菌菌落特征
产气荚膜梭菌菌落特征
产气荚膜梭菌是一种革兰氏阳性菌，常见于土壤、水、食品等环境中。
其特征是产生荚膜和气泡，因此得名“产气荚膜梭菌”。
产气荚膜梭菌的菌落特征是圆形或不规则形状，呈灰白色或淡黄色。
其表面光滑，有时会出现凹凸不平的现象。
在培养基上，产气荚膜梭菌会产生气泡，使培养基呈现明显的气体产生现象。
此外，其还会在培养基表面形成厚实的荚膜，这种荚膜具有一定的粘性，可以固定在培养基表面。
产气荚膜梭菌的荚膜是其生存、繁殖和抵御外界环境侵袭的重要保护层。
荚膜能够抵御化学和物理性质上的损害，同时还能够帮助菌体吸附营养物质和附着于固体表面。
产气荚膜梭菌的荚膜主要由多糖和蛋白质组成，因此具有一定的抗原性，可以用于制备疫苗和诊断试剂。
产气荚膜梭菌除了在环境中广泛存在外，还是一些食品的污染菌。
例如，它常常被检测出在肉制品、蔬菜、奶制品和水产品等食品中。
这些食品中的产气荚膜梭菌可能会引起人类的食物中毒，导致腹泻、呕吐、发热等症状。
因此，在食品生产和加工中必须采取严格的卫生措施，以防止产气荚膜梭菌的污染。
产气荚膜梭菌是一种常见的革兰氏阳性菌，其菌落特征是圆形或不规则形状，呈灰白色或淡黄色，并能够产生荚膜和气泡。
其荚膜具
有重要的生物学意义，可用于制备疫苗和诊断试剂。
同时，产气荚膜梭菌也是一些食品的污染菌，必须采取严格的卫生措施以防止食品中毒的发生。
产气荚膜梭菌
简介
简介
人类气性坏疽的主要病原菌。1892年,美国病理学家W.H.韦尔奇等自一尸体分出本菌,因而又称韦氏梭菌。 菌体较大，大小为(0.9～1.3)×(3.0～9.0)微米,无鞭毛，有荚膜。芽孢椭圆形,位于次级端。厌氧不严格。菌 落直径2～5毫米，血琼脂平板上有溶血圈。糖发酵能力强，产酸产气。本菌的特征之一是在牛乳培养基中呈暴烈 发酵现象。形成的毒性物质有12种，可损伤细胞膜、血管内皮细胞并使糖类分解，导致细胞坏死、组织水肿、充 气等病变。根据产生毒素种类和致病性的不同,本菌有A、B、C、D、E、F6个型。有些菌株产生肠毒素，可引起食 物中毒。DNA中的G+C克分子含量为24～27%。本菌广泛存在于土壤、人和动物的肠道以及动物和人类的粪便中， 会散发臭味。常因深部创伤而感染。导致气性坏疽的病原菌还有诺维氏梭菌、腐败梭菌、溶组织梭菌、产芽孢梭 菌等。此外，产气荚膜梭菌能引起羔羊痢疾和羔羊、牛犊、仔猪、家兔、雏鸡等的坏死性肠炎；诺维氏梭菌引起 羊、牛的传染性坏疽性肝炎；腐败梭菌引起牛、羊、猪等家畜的肠型坏疽“快疫”(braxy);肖维氏梭菌引起牛、 羊气肿疽等。
分型 根据本菌产生外毒素种类之不同，可将产气夹膜梭菌分成A、B、C、D、E5个毒素型。5型中对人致病的主要 是A型和C型，A型最常见，引起气性坏疽和胃肠炎型食物中毒；C型能引起坏死性肠炎。
致病条件
致病条件
致病条件与全国各地破伤风梭菌相似。产气荚膜梭菌既能产生强烈的外毒素，又有多种侵袭性酶，并有荚膜， 构成其强大的侵袭力，引起感染致病。毒素的毒性虽不如肉毒毒素和破伤风毒素强，但种类多，外毒素有α、β、 γ、δ、ε、η、θ、ι、κ、λ、μ、ν等12种，和具有毒性作用的多种酶，如卵磷脂酶、纤维蛋白酶、透明 质酸酶、胶原酶和dna酶等，构成强大的侵袭力。根据细菌产生外毒素的种类差别，可将产气荚膜梭菌分成a、b、 c、d、e5个型。对人致病的主要是a型，引起气性坏疽和食物中毒。c型则引起坏死性肠炎。在各种毒素和酶中， 以α毒素最为重要，α毒素是一种卵磷脂酶，能分解卵磷脂，人和动物的细胞膜是磷脂和蛋白质的复合物，可被 卵磷脂酶所破坏，故α毒素能损伤多种细胞的细胞膜，引起溶血、组织坏死，血管内皮细胞损伤，使血管通透性 增高，造成水肿。此外，θ毒素有溶血和破坏白血球的作用，胶原酶能分解肌肉和皮下的胶原组织，使组织崩解， 透明质酸酶能分解细胞间质透明质酸，有利于病变扩散。本菌能引起人类多种疾病，其中最重要的是气性坏 疽。
食品卫生微生物学检验产气荚膜梭菌
观察接种点的变化。产气英膜梭菌产生卵磷脂酶，分
解卵黄中的卵磷脂，接种点的底部及周围形成乳白色
的混浊带。
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产气荚膜梭菌的检验
菌数计算 根据黑色菌落的计数和确证试验的结果，
计算每克（毫升）食品检样的含菌数。
例如：10-4稀释液的平板长有黑色菌落100个， 而供做确证试验的10个菌落中有7个被确证为
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产气荚膜梭菌纯培养的镜下形态 医电学镜ppt 下的产气荚膜梭菌（C.perfringens）5
产气荚膜梭菌的生物学性状
2.培养特性 生长活跃，代谢迅速。 血琼脂平板：双层溶血环（靶形溶血）
内环完全溶血 外环不完全溶血 含铁牛奶培养基： “汹涌发酵” （stormy fermentation）
2.食物中毒 食入被大量细菌污染的食物（肉类） 临床表现：剧烈腹绞痛、腹泻；可自愈
3.坏死性肠炎
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三、产气荚膜梭菌的流行病学
在世界各地出现，但血清型分布不同。 可以引起地区性流行，也有散发性报道。 中毒最常发生于儿童和老人。 多发生在夏、秋季。
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四、产气荚膜梭菌的检验
设备和材料
冰箱：0 ℃-4℃。 恒温培养箱：36℃士1℃ 恒温水浴锅：46℃士1℃ 显微镜：10×～100 × 均质器或灭菌乳钵
厌氧培养装置：常温催化除氧式或碱性焦性没石子酸除氧式
灭菌吸管：1mL（具0.01mL刻度），10mL（具0.1mL刻度） 灭菌试管：16mmX160mm 灭菌平皿：直径90mm 灭菌锥形瓶：500mL
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产气荚膜梭菌的检验
培养基和试剂
1.疱肉培养基：GB/T4789.28-2003中4.67 2.亚硫酸盐一多粘菌素一磺胺嘧啶琼脂(SPS) ：
产气荚膜梭菌
页眉内容产气荚膜梭菌产气荚膜梭菌是厌氧芽孢梭菌属中能引起人类严重疾病的重要致病菌。
1．生物学和病原学特点产气荚膜梭菌为厌氧革兰阳性粗大芽孢杆菌，无鞭毛，不运动，孢子卵圆，次端生，在一般培养基上稀少。
无外孢子壁，无附属丝：表面菌落直径2～5mm，圆形，有时边缘扩展、突起，呈淡灰黄色，半透明，表面有光泽，可在20～50℃生长，最适生长温度45℃，所有菌株均发酵葡萄糖、麦芽糖、乳糖及蔗糖，产酸产气；多数菌株能还原硝酸盐为亚硝酸盐，能将亚硫酸盐还原为硫化物，在含亚硫酸盐及铁盐的琼脂中形成黑色菌落。
产气荚膜梭菌见图3～11。
该菌能分泌强烈的外毒素和侵袭性酶，具有强烈致病性和侵袭力，在人和动物体内可形成荚膜。
产气荚膜梭菌在自然界的土壤、水和空气中广泛存在，人和动物的肠道是其重要的寄居场所，一般各类粪便每克含量可达102～109个之多，但不经肠道感染宿主，只是污染外环境。
由于产气荚膜梭菌是正常肠道菌群的一部分，人体肠道对其无天然特异免疫力，所有人群均为易感者，以婴儿和年老体弱者病情更重。
经口食人是其主要传染途径，也可由伤口感染，夏秋季节多见。
2．致病性和临床表现产气荚膜梭菌的致病物质为外毒素、肠毒素和荚膜。
外毒素根据性质和致病性不同，分为A、B、c、D、E 5个类型，其中A型菌株是人类最重要的致病菌，外环境中的分离株80％以上属A型，此型可致气性坏疽、食物中毒和坏死性结肠炎；C、D型也是人类的病原菌，C型的部分菌株能引起人的坏死性肠炎；其他为兽类病原菌。
摄食被A型或某些C型菌株污染的食物，引起的食物中毒，潜伏期为8～24h，发病时下腹部剧烈疼痛、腹泻，但为自限性感染，一般1～2d内可自愈，老弱患者和营养不良儿童偶可致死。
另一种食物中毒的表现是坏死性肠炎，由C型菌β毒素引起，潜伏期不到24h，起病急，有剧烈腹痛、腹泻，肠黏膜出血性坏死，粪便带血，可并发周围循环衰竭、肠梗阻、腹膜炎等，病死率高达40％。
3．食品安全危害产气荚膜梭菌在污水、土壤、垃圾、人和动物的粪便以及食品中均可检出，土壤中的检出率达100％。
产气荚膜梭菌的防治原则
产气荚膜梭菌的防治原则哎呀，今天我们聊聊一个有点“神秘”的小家伙——产气荚膜梭菌。
听名字就让人觉得挺吓人的，但其实这个小家伙也就是个细菌，然而在某些情况下，它可真是个麻烦的“客人”。
咱们先来聊聊这家伙为什么要“来搅局”，再说说怎么防治，大家可别小看了这小东西哦。
产气荚膜梭菌可不是吃素的。
它在缺氧的环境里特别能折腾，比如肠道里、伤口里，甚至是一些腐烂的食物中。
嘿，这家伙一进入就开始发酵，搞得肚子咕噜咕噜响，真是吓人。
产气荚膜梭菌还会释放毒素，搞得咱们肚子痛、拉肚子，严重的甚至还可能危及生命。
听着是不是有点毛骨悚然？所以说，防治这家伙可是势在必行。
防治的原则第一条，那就是预防为主。
大家都知道，病从口入，咱们吃的东西可得格外注意。
市场上那些新鲜的食材，一定要认真挑选。
水果要洗得干干净净，肉类一定要煮熟透，不然可就给这家伙可乘之机。
家里的厨房得保持卫生，切菜板、刀具可别让细菌有可乘之机，得时不时消毒一下，像打仗一样严防死守。
这样才能让产气荚膜梭菌无处藏身，嘿嘿。
咱们说说伤口护理。
小伙伴们，受伤了可别大意。
伤口一定要及时清洗，必要时还得去医院处理。
这可是给产气荚膜梭菌提供了一个“温床”，伤口感染可就麻烦了。
因此，伤口包扎要严格，尤其是户外活动多的朋友，更要注意保护自己，别给细菌留下机会。
除了这些，咱们还得讲讲健康饮食的重要性。
日常饮食得保证营养均衡，多吃点新鲜蔬菜水果，增强抵抗力。
尤其是肠道健康，直接影响着咱们的免疫系统。
记住，身体是革命的本钱，只有把自己养得棒棒的，才能抵挡住细菌的侵袭。
适量运动也能提升免疫力，保持心情愉快，笑一笑十年少，细菌自会不敢靠近。
咱们也不能忽视医疗手段。
遇到问题时，及时就医，切莫拖延。
大病小病都别怕，找医生咨询，总比自己瞎折腾要强。
现代医学对产气荚膜梭菌的认识已经相当深入，医生们会根据具体情况给出合适的方案，真的是很靠谱的。
产气荚膜梭菌这个“小家伙”虽然不容易处理，但只要咱们做好日常的预防，保持良好的生活习惯，就能把它远远地挡在门外。
产气荚膜梭菌检验标准操作程序
产气荚膜梭菌检验标准操作程序产气荚膜梭菌（Clostridium perfringens）是一种产生有毒代谢产物的革兰氏阳性厌氧菌，常见于土壤、粪便和人体肠道中。
其毒素可引起严重的食物中毒和其他感染性疾病，因此对产气荚膜梭菌的监测和检验至关重要。
1.引言产气荚膜梭菌是一种广泛分布且致病力强的细菌，在食品安全和公共卫生领域具有重要意义。
为了确保食品的安全性和卫生标准，需要对食品、环境和临床标本中的产气荚膜梭菌进行检验。
本文将介绍产气荚膜梭菌检验的标准操作程序，并探讨其中的关键步骤和注意事项。
2.标本采集在进行产气荚膜梭菌检验之前，首先需要采集样本。
对于食品样品，可以直接将样品取样放入含有富集培养基的袋子中。
对于环境样品和临床样本，应当使用消毒的采样器具采集，并立即送至实验室进行处理。
3.富集培养采集到的样品需要进行富集培养，以增加产气荚膜梭菌的数量。
将样品转移到含有适当营养物质的培养基中，利用合适的条件（如温度、气氛）进行培养。
通常，产气荚膜梭菌在厌氧条件下生长较好，因此富集培养应当在无氧或低氧环境中进行。
4.筛选经过富集培养后，需要进行筛选，以确定样品中是否存在产气荚膜梭菌。
常用的方法包括置换培养、差异培养和生化试剂检验。
通过观察菌落形态、产气能力和代谢产物等指标，可以初步筛选出产气荚膜梭菌。
5.鉴定对于筛选出的潜在产气荚膜梭菌菌株，需要进行进一步的鉴定。
主要包括形态学观察、生理生化特性检验和分子生物学方法。
通过对其细胞形态、营养需求和基因序列等特征的分析，可以准确鉴定产气荚膜梭菌。
6.毒素检测产气荚膜梭菌引起食物中毒的主要机制是其产生的毒素。
因此，在检验过程中，还需要对样品中的毒素进行检测。
常用的方法包括毒素中和试验、免疫测定和PCR检测。
通过这些方法，可以确定样品中毒素的种类和含量。
7.结果分析最终，根据样品中产气荚膜梭菌的数量和毒素水平，对检验结果进行分析。
根据相关标准和法规，确定样品是否符合卫生安全要求。
产气荚膜梭菌
产气荚膜梭菌
• 生物学特性 • 鉴定依据 •致病力 • 药敏试验 • 临床意义 • 防治原则
生物学特性 形态特征：
•涂片革兰染色：革兰阳性粗短大杆菌，两端纯圆，呈单或双排列， 芽胞体于菌体中央或次极端，不大于菌体，镜下不易观察到。动 力阴性。 •在人工培养中很少形成芽胞，这是本菌的特点之一。
涂片找到粗大杆菌 产气荚膜梭菌感染
产气荚膜梭菌
• 产气荚膜梭菌（Clostridium perfringens) 是一类厌氧或微需 氧的粗大芽胞杆菌，是临床上引起气性坏疽的病原菌中最多见的 一种梭状芽孢杆菌，因能分解肌肉和结缔组织中的糖，产生大量 气体，导致组织严重气肿，继而影响血液供应，造成组织大面积 坏死，加之本菌在体内能形成荚膜，故名产气荚膜梭菌。
临床意义
• 产气荚膜梭菌感染可形成局灶性蜂窝织炎，局部或扩散性肌炎， 或最为严重气性坏疽
• 气性坏疽潜伏期短，一般仅为8-48小时，病菌产生的毒素和组织 坏死的毒性产物被吸收入血，引起毒血症、休克，死亡率高达 40%-100%。
临床意义
气性坏疽： •常继发于开放性骨折、大块肌肉撕裂及组织的严重坏死等。多见 于战伤，交通事故及各种严重创伤之后。 •本病多为两种或两种以上的厌氧菌（主要为产气荚膜梭菌）引起 的混合感染。 •本病以局部剧痛、水肿、胀气，按压有捻发音、组织迅速坏死， 分泌物恶臭，伴有全身毒血症为特征的急性感染。
产气荚膜梭菌
产气荚膜梭菌
学习重点：
掌握： 1.涂片找粗大杆菌的临床意义。 2.产气荚膜梭菌的鉴定流程（直接镜检、分离培养、鉴定药敏）。
熟悉： 1.产气荚膜梭菌的致病力，治疗原则。
为什么进手术室要先做涂片找粗大杆菌？
clsi产气荚膜梭菌的折点判读法
clsi产气荚膜梭菌的折点判读法摘要：1.产气荚膜梭菌的概述2.产气荚膜梭菌的检测方法3.折点判读法在产气荚膜梭菌检测中的应用4.折点判读法的优势和局限性5.结论正文：一、产气荚膜梭菌的概述产气荚膜梭菌（Clostridium perfringens）是一种革兰氏阳性杆状厌氧菌，因其能分解肌肉和结缔组织中的糖类而产生大量气体，并在体内形成荚膜而得名。
该菌广泛分布于人类和其他脊椎动物的肠道、昆虫和土壤等处。
产气荚膜梭菌是气性坏疽病原菌中最常见的一种梭菌，对低浓度的游离氧具有耐性，最适培养温度为37℃。
二、产气荚膜梭菌的检测方法产气荚膜梭菌的检测方法包括传统的微生物学检测方法和现代的分子生物学检测方法。
传统的微生物学检测方法主要包括涂片镜检、细菌培养和分离、生化试验等。
现代的分子生物学检测方法主要包括PCR、LAMP 和CRISPR-Cas 等。
三、折点判读法在产气荚膜梭菌检测中的应用折点判读法是一种基于PCR 技术的分子生物学检测方法，通过设计特异性的引物，将目标DNA 片段进行扩增，并通过电泳观察扩增产物的迁移情况，从而判断目标菌是否存在。
在产气荚膜梭菌的检测中，折点判读法具有较高的灵敏度和特异性，能够快速、准确地检测出产气荚膜梭菌。
四、折点判读法的优势和局限性折点判读法在产气荚膜梭菌检测中的优势主要表现在：1.灵敏度高，能够检测出低浓度的产气荚膜梭菌；2.特异性强，能够准确地区分产气荚膜梭菌与其他细菌；3.操作简便，结果快速、可靠。
然而，折点判读法也存在一定的局限性，如对PCR 仪器和试剂的要求较高，扩增产物的迁移速度受电泳条件影响较大等。
五、结论产气荚膜梭菌是一种重要的病原菌，对其进行准确、快速的检测对于临床治疗和疾病防控具有重要意义。
折点判读法作为一种分子生物学检测方法，在产气荚膜梭菌检测中具有较高的灵敏度和特异性，能够为临床实验室提供有效的技术支持。
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4.抵抗力
• 本菌在含糖的厌氧肉肝汤中，因产酸几周 后死亡，而在无糖厌氧肉汤中能生存几个 月。芽孢在90 ℃ 30min或者100 ℃ 5min死 亡。
5.抗原性与致病性
• 依据主要致死性毒素与抗毒素的中和试验可将此 菌分为A、B、C、D、E五个型，A、C、D能产生 肠毒素。
• A型菌主要引起人的气性坏疽和食物中毒的病原， 也引起动物的肠毒血症；B型主要引起羔羊痢疾； C型主要是绵羊猝狙病原，也引起羔羊仔猪的肠 毒血症和坏死性肠炎；D型菌主要引起羔羊、牛、 灰鼠的肠毒血症。
产气荚膜梭菌
梭菌属属于革兰氏阳性产芽孢杆菌，有 以下特点 ⑴.菌体呈杆状 ⑵.厌氧呼吸 ⑶.不还原硫酸盐成硫化物
产气荚膜梭菌旧名魏氏梭菌或产气荚膜 杆菌，引起仔猪红痢。
由于芽孢的形状位置不同，芽孢体表现出 各种不同的形状，当芽孢体位于菌体中央 而膨大时，则芽孢体形如梭状，梭菌名称 由此而来，但并非梭菌属的细菌均为梭形。
• “勋章”样菌落和双层溶血样菌落
3.生化特性
• 在牛乳培养基中，培养8-10小时，能分解乳中的 糖而产酸，将酪蛋白能凝固，同时产生大量气体， 气体穿过凝固的络蛋白，使之变成海绵状，气势 汹涌，称为“汹涌发酵”或“暴风雨现象”；可 用于本菌的快速诊断。
• 对糖的分解能力很强，大多数菌株发酵葡萄糖， 麦芽糖和乳糖，蔗糖， 可产生H2S。
• 鉴定本菌要点：厌氧生长，有双层溶血环，引起 牛奶的爆裂发酵，肌注小鼠过夜死亡并在胸肌涂 片见有荚膜的菌体。
• 有效微生物诊断方法是肠内容物毒素的检 查，取肠内容物，适量灭火生理盐水稀释， 离心沉淀取上清液分两份，一份不加热， 一份加热，分别静注小鼠，如有毒素存在， 不加热组常在10分钟至10小时内死亡，加 热组不死亡。
1. 形态及染色特征
• 菌体直杆状，两端钝圆，但在或成双，G+ • 芽孢大而卵圆，位于菌体中央或两端，使
菌体膨胀，但在一般条件下很难形成芽孢
• 多数菌株形成荚膜
2. 培养特性
• 本菌对厌氧程度的要求并不严； • 对营养的要求也不苛刻，普通培养基就能生长； • 菌株生长温度范围20-50℃，因此可用高温快速培养法
进行选择分离； • 在鲜血琼脂平板上，可形成圆形、边缘整齐、灰色至灰
黄色、表面光滑半透明、圆屋顶的菌落 ，有时发生双重 溶血，即内环完全溶血而透明，外环变暗但不溶血； • 在葡萄糖血清琼脂上形成中央隆起或圆盘状的大菌落， 菌落表面有放射状条纹，边缘呈锯齿状、灰白色、半透 明，外观就是典型的“勋章”样； • 在PYG肉汤中培养呈均匀浑浊，或有粘稠沉淀物；同时 在PYG深层培养可产生大量气体；
7.免疫防治
• 加强饲养管理，防治由于饲养原因使肠道 正常菌群大量滋生产生毒素。
• 预防羔羊痢疾，猝狙，肠毒血症以及仔猪 肠毒血症可用三联疫苗或者五联疫苗。
• 实验动物以小鼠最易感，以液体培养物0.11.0mol/L肌注或皮下注射，常在12-24小时引起死 亡。
6.微生物诊断
• 主要依靠细菌分离鉴定，各型所致的疾病，均因 为细菌在肠道内生产毒素所致，细菌本身不一定 侵入机体，同时正常畜禽肠道内也存在此菌，在 非本菌致死的动物也容易在死后本菌的感染，因 此从病料中检出此菌也不能说明它就是病原。所 以当分离到毒力强大的此菌时才具有一定的参考 意义。