还原型谷胱甘肽的稳定性研究

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还原型谷胱甘肽治疗慢性肾衰竭疗效观察

还原型谷胱甘肽治疗慢性肾衰竭疗效观察

如果存在焦虑、抑郁、激怒等心理问题,则不利于疾病的恢复。

表2SCL-90评分情况(珋xʃs,分)项目抑郁患者非抑郁患者t P躯体化2.376ʃ0.9230.657ʃ0.5434.1090.000强迫2.917ʃ0.9150.458ʃ0.4515.3430.000人际关系2.436ʃ0.9100.537ʃ0.2724.5390.000抑郁2.662ʃ1.0120.763ʃ0.5235.9840.000焦虑2.722ʃ0.9640.620ʃ0.4855.5420.000敌对2.492ʃ0.1040.790ʃ0.6195.1040.000恐怖2.264ʃ1.0050.347ʃ0.4566.4420.000偏执2.462ʃ1.0420.361ʃ0.4316.1980.000精神病性2.265ʃ0.8720.455ʃ0.3715.8270.000其他2.528ʃ1.0010.615ʃ0.4814.5920.000本研究结果显示,进展期胃癌患者存在较高的抑郁风险,抑郁的检出率高达61.4%。

患者的性别、文化程度、职业、婚姻、经济状况、社会支持对进展期胃癌患者的抑郁状态有显著影响。

这可能与中国社会对恶性肿瘤的认知、社保水平等社会背景有关。

本研究还发现发生抑郁的进展期胃癌患者在躯体化、强迫、人际关系、抑郁、焦虑、敌对、恐怖、偏执、精神病性等方面存在病态倾向,说明进展期胃癌患者不良心理状态已经严重影响其生活各个方面,从而影响其远期疗效与生存。

由于时间与地域的关系,本研究入组样本量数较少,可能会偏倚,进而影响结论的正确性。

笔者将在后续的研究中进一步的补充、完善。

[参考文献][1]汪向东,王希林,马弘.心理卫生评定量表手册[M].北京:中国心理卫生杂志社,1999:109-115;194-197[2]邹建军,郑莹,许青,等.影响癌症病人抑郁状况的因素研究[J].肿瘤,2005,25(2):186-191[3]Kurtz MEGB,Kurtz JC,Given CW.The interaction of age,symp-toms,and survival status on physical and mental health of patientswith cancer and their families[J].Cancer,1994,74:2071-2078[4]Pitceathly C,Maguire P.The psychological impact of cancer on pa-tients’partners and other key relatives:a review[J].EuropeanJournal of Cancer,2003,39(17):1517-1524[5]Kurtz ME,Kurtz KJ,Given CW,et al.Depression and physical health among family caregivers of geriatric patients with cancer-a longitudi-nal view[J].Med Sci Monit,2004,10(8):447-456[收稿日期]2011-08-19还原型谷胱甘肽治疗慢性肾衰竭疗效观察邢瑞贤,郑栓(河南省驻马店市第一人民医院,河南驻马店463000)[摘要]目的观察还原型谷胱甘肽(GSH)治疗慢性肾衰竭的疗效和安全性。

还原型谷胱甘肽联合水飞蓟宾治疗抗痨所致药物性肝损害的疗效

还原型谷胱甘肽联合水飞蓟宾治疗抗痨所致药物性肝损害的疗效

还原型谷胱甘肽联合水飞蓟宾治疗抗痨所致药物性肝损害的疗效摘要】目的探讨还原型谷胱甘肽(阿托莫兰,TAD)联合水飞蓟宾胶囊治疗抗痨所致药物性肝损害的临床疗效。

方法选择诊断为抗痨所致药物性肝损害68例,均停用对肝脏有损害的抗痨药物,积极配合内科支持治疗的基础上进行分组治疗。

随机分成二组(治疗组和对照组)每组34例;对照组给予水飞蓟宾胶囊105mg,tid po。

治疗组予水飞蓟宾胶囊105mg,tid po和TAD1.5g+5%GS250ml联合治疗,每日一次静滴。

二组的支持治疗相同。

疗程均为2周。

治疗完成后进行评价。

结果二组治疗前后肝功能(SB、ALT)比较,治疗组肝功能改善显著(P<0.01),治疗组总有效率为94.12%,对照组总有效率为55.88%,二组间比较有显著性差异(P<0.01),治疗组的疗效更好。

结论 TAD联合水飞蓟宾胶囊治疗抗痨药物所致药物性肝损害临床疗效确切,安全有效。

【关键词】药物性肝损害阿拓莫兰水飞蓟宾胶囊【中图分类号】R453 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752(2012)22-0158-02我科2009年3月1日致2012年8月1日采用还原型谷胱甘肽(阿拓莫兰,TAD,重庆药友制药)联合水飞蓟宾胶囊(天津天士力药业有限公司)治疗抗痨药物所致药物性肝损害34例,取得满意疗效,现报告如下。

资料与方法1.一般资料本组68例患者均符合药物性肝损害的诊断标准(2004,DDW Japan)[1],将其随机分成二组,治疗组34例,男20例,女14例,年龄18~67岁,对照组34例,男22,女12例,年龄18~60岁,二组性别、年龄及病情程度等一般情况比较均无显著性差异(P>0.05),具有可比性。

2.主要临床症状本组病例使用抗痨药物后出现肝功能损害时间为1周~5个月,均出现不同程度的乏力、纳差、腹胀、厌油、尿黄、肝功能损害排除病毒性肝炎及其他原因所致的升高者。

3.治疗方法首先停服抗痨药物,对照组予水飞蓟宾胶囊105mg,tid po;治疗组予水飞蓟宾胶囊105mg,tid po和TAD1.5g+5%GS250ml联合治疗,每日一次静滴。

还原型谷胱甘肽用于预防和降低奥沙利铂周围神经毒性的研究

还原型谷胱甘肽用于预防和降低奥沙利铂周围神经毒性的研究

中华肿槠防治杂志 2010 年丨2 月笫 17 卷笫 2.丨期 CHIN J CANCER PREV TREAT ,December 2010. Vol. 17 No. 24 • 2057 •还原型谷胱甘肽用于预防和降低奥沙利铂 周围神经毒性的研究庞丹梅,邓燕明,蓝晓珊,冯卫能,梁剑苗,徐绮华 佛山市第一人民医院肿瘤内科,广东佛山528041 Efficacy of reduced glutathione in preventing and reciucing neurotoxicity of oxaliplatinPANG Dan-mei % DENG Yan-ming, LAN Xiao-shan % FENG Wei-neng t LIANGJian-mia 〇t XV Yi-hua Department of Medical Oncology* First People* s Hospital of Foshan City y Foshan 528041, P. R. China 【摘要】 目的:观察还原型谷胱甘肽 (GSH )预防和降低奥沙利铂周围神经毒性 的作用。

方法:将78例肠癌术后和胃癌术 后准备进行FOLFOX 4或mFOLFOX 6方案 化疗的患者,随机分为GSH 组40例和对照 组38例,GSH 组在奥沙利铂化疗每周期 同时给予GSH 1.8 g /d ,l 次/d •加入生理盐 水100 mU 共3 d (化疗前1 d 、当日和第2 天)。

对照组在化疗每周期同时给予生理盐 水100 mU 共3 d (化疗前1 d 、当日和第2 天>,在治疗前、化疗4个周期后、化疗8个 周期后及化疗12个周期后分别记录临床感 觉神经系统检查結果,并记录奥沙利铂周围 神经毒性级别•有神经毒性症状的患者随 访1年•每3个月复查1次临床感觉神经系统检查。

结果:在治疗前、化疗4个周期、化 疗8个周期后GSH 组与对照组的周围神经 毒性发生率差异无统计学意义,F >0. 05。

注射用还原型谷胱甘肽不良反应监测分析

注射用还原型谷胱甘肽不良反应监测分析

还原型谷胱甘肽是临床常用保肝药物,是人体细胞质中自然合成的含有巯基的三肽,由谷氨酸、半胱氨酸、甘氨酸残基组成,广泛分布于机体各器官,参与体内多种重要的生化代谢[1],主要生理功能有:在人体内活化氧化还原系统,作为甘油磷酸脱氢酶的辅基及乙二醛酶、磷酸丙糖脱氢酶的辅酶,参与体内三羧酸循环和糖代谢,促进体内产生高能量;激活体内的巯基酶,促进糖、脂肪及蛋白质的代谢,以调节细胞膜的代谢过程;与多种外源性、内源性有毒物质结合生成减毒物质,起到解毒作用,减轻组织损伤,促进细胞修复[2]。

临床上主要用于各种原因引起的肝、肾损伤;放化疗患者;低氧血症;病毒性、药物毒性、乙醇毒性及各种化学物质毒性引起的肝脏损害;有机磷、硝基、胺基化合物中毒的辅助治疗等[3]。

本文收集某三甲医院注射用还原型谷胱甘肽不良反应报告4例,回顾性分析临床病例资料和不良反应发生的特点及规律,以期为临床安全用药提供参考。

1资料与方法1.1一般资料:回顾性收集某三甲医院上报国家药品不良反应监测系统注射用还原型谷胱甘肽致不良反应报告4例。

1.2方法:对4例注射用还原型谷胱甘肽不良反应报告中有关信息进行整理和统计分析,包括药品生产厂家,患者年龄、性别、病情、用药情况、临床表现、治疗与转归等。

2结果与分析2.1一般资料:4例发生注射用还原型谷胱甘肽不良反应的患者中男性3例,女性1例;年龄39~72岁,平均年龄55岁。

2.2药品:4例发生注射用还原型谷胱甘肽不良反应的药品3例来自重庆药友制药有限责任公司(阿拓莫兰),1例来自昆明积大制药股份有限公司(松泰斯)。

2.3治疗与转归:4例注射用还原型谷胱甘肽不良反应分别发生在用药后4h ,用药第6、8、10日,经积极抢救和对症治疗,均好转或痊愈出院。

2.4临床表现:4例注射用还原型谷胱甘肽不良反应中2例为皮肤及其附件损害(50%);2例为全身性严重损害(50%),见表1。

表1不良反应类型及主要临床表现(n=4) 2.5注射用还原型谷胱甘肽不良反应病例报告:患者1,男,72岁,体重52kg ,诊断左肺腺癌并颅脑、肾上腺转移IV 期,否认药物或食物过敏史。

还原型谷胱甘肽的稳定性研究

还原型谷胱甘肽的稳定性研究

919还原型谷胱甘肽的稳定性研究朱义福(星湖生物科技股份有限公司,广东肇庆 526040)摘要:本文研究了pH 、温度、光照以及外加抗氧化剂等因素对还原型谷胱甘肽(GSH)纯品溶液稳定性的影响。

结果表明,GSH 水溶液在pH=2.0~4.0范围内最为稳定;在30 ℃以下,24 h 内自身氧化较少;应避光处理或保存;外加抗氧化剂在pH=6.0时,保护作用明显。

关键词:谷胱甘肽;稳定性;抗氧化剂 文章篇号:1673-9078(2011)8-919-923Stability of Reduced Glutathione under Different ConditionsZHU Yi-fu(Star Lake Bioscience Co., Inc., Zhaoqing 526040, China)Abstract: The effects of pH, temperature, sunlight and antioxidant on the stability of reduced glutathione (GSH) solution were studied in this paper. Results indicated that GSH solution was relative stabile under the following conditions: pH 2.0~4.0 and temperature <30℃. And it should be kept in dark place. Besides, the GSH solution showed the highest stability in the presence of antioxidant at pH 6.0.Key words: glutathione; stability; antioxidant谷胱甘肽(Glutathione ,GSH ),即γ-L-谷氨酰-L-半胱氨酰-甘氨酸,是由L-谷氨酸、L-半胱氨酸和甘氨酸经肽键缩合而成的生物活性三肽化合物。

还原型谷胱甘肽(GSH)治疗慢性肾衰竭的疗效和安全性分析

还原型谷胱甘肽(GSH)治疗慢性肾衰竭的疗效和安全性分析

还原型谷胱甘肽(GSH)治疗慢性肾衰竭的疗效和安全性分析发表时间:2018-08-04T13:59:46.280Z 来源:《中国医学人文》(学术版)2018年3月第6期作者:吴佳玲[导读] 还原性谷胱甘肽(GSH)治疗慢性肾衰竭效果良好,安全性高。

无锡市锡山人民医院肾内科 214200【摘要】目的:分析还原型谷胱甘肽(GSH)治疗慢性肾衰竭的疗效和安全性。

方法:选取我院2016年12月至2017年12月期间收治的慢性肾衰竭患者98例,按照入院的先后时间将其分为对照组(49例)和观察组(49例),所有患者均给予慢性肾衰竭的常规治疗,观察组在此基础上给予静脉注射GSH,剂量为1500mg/d,治疗周期均为4周,观察两组患者治疗前后的尿蛋白、血红蛋白、尿素氮、血肌酐水平及不良反应情况。

结果:两组患者的各项指标都得到了优化,肾功能有所缓解,而观察组的疗效明显优越于对照组(P <0.05),不良反应无明显差异。

结论:还原性谷胱甘肽(GSH)治疗慢性肾衰竭效果良好,安全性高。

【关键词】还原型谷胱甘肽;慢性肾衰竭;安全性慢性肾衰竭是由于各种原因导致的肾脏慢性进行性损害[1],病情发展严重者需要进行透析治疗甚至换肾,给患者家庭带来了严重的经济负担。

还原型谷胱甘肽作为抗氧化剂可抑制自由基、过氧化物等对人体的伤害[2],在肝脏疾病中应用较多,而在肾病治疗中应用较少,本文主要通过临床治疗探讨还原型谷胱甘肽(GSH)治疗慢性肾衰竭的疗效和安全性。

1资料与方法1.1资料选取2016年12月至2017年12月期间我院收治的慢性肾衰竭患者98例,按照患者的入院先后顺序分为对照组(49例)和观察组(49例),对照组男26例,女23例,年龄35~67岁,平均(52.13±3.21)岁,病程10个月~4年,平均(2.75±0.54)年;观察组男27例,女22例,年龄32~68岁,平均(53.17±2.21)岁,病程8个月~5年,平均(2.85±0.74)年,两组患者的性别年龄和病程方面无明显差异。

高效液相色谱法测定注射用法罗培南钠中还原型谷胱甘肽的含量

高效液相色谱法测定注射用法罗培南钠中还原型谷胱甘肽的含量

高效液相色谱法测定注射用法罗培南钠中还原型谷胱甘肽的含量沈庆钦;刘军;张长军;贾可;刘杰;苏芳【摘要】目的:建立注射用法罗培南钠中还原型谷胱甘肽的含量测定方法。

方法:采用高效液相色谱法,C18色谱柱,以辛烷磺酸钠磷酸盐缓冲溶液-甲醇(90∶10)为流动相;DAD 检测器,210nm 波长处测定。

结果:还原型谷胱甘肽与其他成分均完全分离,在考察的浓度范围内线性关系良好(r =0.9997),回收率符合规定。

结论:该方法专属性好,准确度高,可作为注射用法罗培南钠中还原型谷胱甘肽的含量测定方法。

%Objective :An accurate method to determine the content of reduced glutathione in faropenem sodium forinjection .Methods :A C18 column was used for the separation .The mobile phase was octane-sulfonic acid sodium - phosphate buffered solution and methanol (90 ∶ 10) .The wavelength of DAD was 210nm .Results :The linearity was good in each range of concentration (r = 0.9997) .The recoveries were all accorded with prescribe .Conclusion :The method is accurate and specific for determination of reduced glutathione in faropenem sodium for injection .【期刊名称】《分析仪器》【年(卷),期】2014(000)005【总页数】4页(P50-53)【关键词】还原型谷胱甘肽;高效液相色谱法;含量;注射用法罗培南钠【作者】沈庆钦;刘军;张长军;贾可;刘杰;苏芳【作者单位】鲁南制药集团股份有限公司,临沂 276005; 山东新时代药业有限公司,费县 273400;鲁南制药集团股份有限公司,临沂 276005; 山东新时代药业有限公司,费县 273400;鲁南制药集团股份有限公司,临沂 276005; 山东新时代药业有限公司,费县 273400;鲁南制药集团股份有限公司,临沂 276005; 山东新时代药业有限公司,费县 273400;鲁南制药集团股份有限公司,临沂 276005; 山东新时代药业有限公司,费县 273400;鲁南制药集团股份有限公司,临沂 276005;山东新时代药业有限公司,费县 273400【正文语种】中文法罗培南钠(Faropenem Sodium)是一种新型的青霉烯类抗生素,既可以制成口服制剂又可供注射用,对需氧及厌氧性菌均显示出较高的活性,可通过阻止细菌细胞壁合成而显现抗菌、杀菌作用,具有独特的药动学性质,是临床上治疗各种敏感菌所致的感染性疾病的有效药物[1-3]。

还原型谷胱甘肽的作用机制

还原型谷胱甘肽的作用机制

还原型谷胱甘肽的作用机制( 摘要)肝脏疾病是临床常见疾病,研究还原型谷胱甘肽( Glutathione,GSH) 在肝细胞中的作用机制,进而描述氧化应激在肝细胞损伤中的作用,着重讨论了还原型谷胱甘肽的本质及其作用机制。

结果表明GSH作为抗氧化剂和细胞代谢剂,成为临床中重要的治疗和辅助治疗药物。

(关键词) 氧化应激还原型谷胱甘肽肝损伤(Abstract) liver disease is common clinical disease of reduced glutathione (Glutathione, GSH) in the mechanism of liver cells, and then describe the oxidative stress in the liver cell injury, focusing on the prototype of glutathione also glycylglycine nature of its mechanism. The results showed that GSH as an antioxidant and cell metabolism of drugs, to become an important clinical treatment and adjuvant drugs.(Key words) oxidative stress; reduced glutathione; liver injury还原型谷胱甘肽(Glutathione,GSH)是由谷氨酸、半胱氨酸及甘氨酸组成的一种三肽,广泛存在于哺乳动物体内,参与体内三羧酸循环及糖代谢,使人体获得高能量,是细胞内主要的巯基(—S H)和含量最丰富的低分子多肽,是细胞内主要的代谢调节物质,其对生物体氧化还原系统和巯基酶有活化作用,可清除组织中的氧自由基。

肝脏是体内GSH主要的合成和消耗场所,其受有毒物质或射线等损害时,可诱导产生大量氧自由基;GSH可提供活性巯基或在酶催化下直与自由基结合,保护和恢复肝细胞功能。

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919还原型谷胱甘肽的稳定性研究朱义福(星湖生物科技股份有限公司,广东肇庆 526040)摘要:本文研究了pH 、温度、光照以及外加抗氧化剂等因素对还原型谷胱甘肽(GSH)纯品溶液稳定性的影响。

结果表明,GSH 水溶液在pH=2.0~4.0范围内最为稳定;在30 ℃以下,24 h 内自身氧化较少;应避光处理或保存;外加抗氧化剂在pH=6.0时,保护作用明显。

关键词:谷胱甘肽;稳定性;抗氧化剂 文章篇号:1673-9078(2011)8-919-923Stability of Reduced Glutathione under Different ConditionsZHU Yi-fu(Star Lake Bioscience Co., Inc., Zhaoqing 526040, China)Abstract: The effects of pH, temperature, sunlight and antioxidant on the stability of reduced glutathione (GSH) solution were studied in this paper. Results indicated that GSH solution was relative stabile under the following conditions: pH 2.0~4.0 and temperature <30℃. And it should be kept in dark place. Besides, the GSH solution showed the highest stability in the presence of antioxidant at pH 6.0.Key words: glutathione; stability; antioxidant谷胱甘肽(Glutathione ,GSH ),即γ-L-谷氨酰-L-半胱氨酰-甘氨酸,是由L-谷氨酸、L-半胱氨酸和甘氨酸经肽键缩合而成的生物活性三肽化合物。

GSH 是许多酶反应的辅基,在生物体内具有清除体内自由基、解毒等多种重要的生理功能,特别是对于维持生物体内适宜的氧化还原环境具有重要意义[1]。

国内外关于GSH 的研究主要集中在菌种选育[2]、培养条件优化[3]、分离纯化[4]和临床应用上[5],其工业化生产技术一直被国外极少数发达国家所垄断,国内尚未实现工业化生产,从而造成GSH 的市场价格居高不下,影响了GSH 的推广和应用。

GSH 易溶于水、稀醇、液氨和N,N-2甲基甲酰胺,而微溶于或不溶于醇、醚和酮。

GSH 的固体较稳定,而水溶液在外界环境中受温度、pH 、光照等条件影响,易氧化,产生氧化型谷胱甘肽(即GSSG ),GSSG 是由两分子GSH 脱氢后通过二硫键相连的二聚体,其反应如下:氧化型GSSG 不具有生理活性,只有还原型GSH 才能发挥重要的生理功能。

GSH 的不稳定性是造成较难分离纯化、产品纯度不高的重要原因。

因此,本文通过大量的试验对GSH 稳定性进行研究,为国内GSH 的工业化生产提供参考。

收稿日期:2011-03-26作者简介:朱义福(1976-),男,工程师,研究方向:生物医药分离纯化技术1 材料与方法1.1 材料与试剂GSH 纯品(纯度>98%):日本Kyowa 公司。

四氧嘧啶(Alloxan ):美国sigma ; 二硫苏糖醇(DTT ):上海生工所;抗坏血酸(Vc ):广州化学试验厂;保险粉(Na 2S 2O 4):上海国药集团化学试剂公司;其它试剂为国产分析纯。

1.2 主要仪器SC-15数控超级恒温槽:宁波新芝生物科技公司;CR21G 高速冷冻离心机:日本Hitachi 公司;752型紫外可见光分光光度计:南京第四分析仪器公司;S40 pH 精密测量仪,AB54-S 分析天平:瑞士METTLER TOLEDO 公司;RW20D 搅拌器:德国IKA 公司;Agilent LC1100液相色谱仪:美国HP 公司。

1.3 分析方法GSH 含量测定采用四氧嘧啶Alloxan 试剂法 [6]:(1)标准曲线的制作:准确称取6.146 mg 的GSH 标准品,用40%乙醇溶解,定容至100 mL ,得到浓度为200 µmol/L 的标准液。

取0 mL 、0.2 mL 、0.4 mL 、0.6 mL 、0.8 mL 、1.0 mL 上述标准液于试管中,补加去离子水至1.0 mL ,配成浓度为0 µmol/L 、40 µmol/L 、80 µmol/L 、120 µmol/L 、160 µmol/L 、200 µmol/L 的GSH 溶液。

然后依次加入pH 7.6的磷酸缓冲液2.5 mL ,0.1 mol/L 的甘氨酸溶液0.5 mL ,以及Alloxan 试剂1.0 mL ,反应20min。

以空白管校正零点,于305 nm处测定吸光值A,以A值为横坐标,浓度为纵坐标,作GSH标准曲线;(2)GSH含量的测定:取2支试管,分别加入3.5 mL磷酸缓冲液和0.5 mL甘氨酸溶液,2支试管中分别加入1 mL 待测液,然后一支试管中加入1 mL去离子水,另一支试管中加入1 mL Alloxan试剂,反应20 min,以前者为空白,于305 nm处测定吸光值A,根据A值即可以从标准曲线上查得样品GSH的浓度。

GSH纯度测定采用高效液相色谱法[7],并经本实验室改进:色谱柱:Agilent C18-HC (150 mm×4.6 mm×5 µm);流动相:磷酸盐缓冲溶液与甲醇以体积比95:5混合;流速:1.0 mL/min;检测波长:210 nm;柱温箱:30 ℃。

1.4 试验方法GSH纯品溶液制备:用分析天平准确称取纯品GSH,用纯净水溶解,用容量瓶定容,准确配制成含量为5 g/L GSH的水溶解,避光冷藏保存。

温度对GSH稳定性试验:选取工业生产中常见的三种不同浓缩操作温度:30 ℃、45 ℃、60 ℃作为考查点,将新鲜配制的GSH纯品溶液用5 N HCl或5 M NaOH调pH=3.0,各取50 mL分装到带塞的棕色玻璃三角瓶中,同时放入不同设定温度的恒温水浴槽中,开始计时,在预定时间分别取样测定不同温度的GSH溶液的含量。

pH值对GSH稳定性试验:将新鲜配制的GSH纯品溶液各取50 mL分装到带塞的棕色玻璃三角瓶中,分别用5 N HCl或5 M NaOH调至给定pH值;在室温(25 ℃~30 ℃)条件下,敞口放入水浴振荡器中以50 r/min轻微晃动,开始计时,于不同时间分别取样测定不同pH值的GSH溶液的含量。

光照对GSH稳定性试验:将新鲜配制的GSH纯品溶液用5 N HCl或5 M NaOH调pH=3.0,各取50 mL分装到带塞的无色和棕色玻璃容量瓶中,置于光橱内(4500±500lx),室温(25 ℃~30 ℃)照射24 h,在预定时间分别取样测定其含量。

抗氧化剂对GSH稳定性试验:选取三种常用的抗氧化剂二硫苏糖醇(DTT)、抗坏血酸(Vc)、保险粉(Na2S2O4),取新鲜配制的GSH纯品溶液各50 mL,分别用5 N HCl或5 M NaOH调pH值至1.0、3.0和6.0,分别加入浓度0.1 wt.%的抗氧化剂、混匀后分装到带塞三角瓶中,并置于预设不同温度的恒温水浴槽中,于不同时间点取样,测定其含量。

2 结果与讨论GSH是一种具有生物活性的三肽化合物,其结构中含有一个活泼的巯基-SH,易被氧化脱氢,具有还原作用,这一特异结构使其成为体内主要的自由基清除剂,保护细胞内含巯基酶的活性。

防止GSH分子间的-SH形成二硫键,阻止产生没有生物活性的GSSG,在微生物发酵法制备GSH的分离纯化工艺过程中,保持GSH的稳定性是工业化大生产的前提和研究方向。

2.1 GSH标准曲线的测定采用Alloxan法测定得到的标准曲线见图1,回归方程为:y=399.15x+0.5448,相关系数R2=0.9999。

图1 GSH标准曲线Fig.1 Calibration curve of GSH2.2 温度对GSH稳定性的影响避光、pH=3.0条件下,温度对GSH稳定性的影响的实验结果见表1。

由表1可知,当温度超过室温时,GSH含量随时间的增加而明显减少,温度越高,下降趋势越明显。

温度为30 ℃时,GSH水溶液避光保存72 h 后其检测量仍可稳定在90%以上;温度为45 ℃时,24 h 内,GSH纯品含量下降了10%;温度为60 ℃时,24 h 内,GSH纯品含量下降了80%以上。

可见,低温有利于GSH自身稳定性,在30 ℃以下工业化操作处理,才能保证纯化手段达到预期的效果。

表1 温度对GSH稳定性(残存率/%)的影响Table 1 The effect of temperature on the stability of GSH solution 温度/℃取样时间/h0 6 12 24 48 7230 100 100 99.6 98.6 91.290.245 10098.494.9 87.0 70.462.760 10079.138.5 16.8 3.0 0.1 2.3 pH值对GSH稳定性的影响pH值影响着溶液中各物质的带电性质,两性离子所带电荷因溶液的pH值不同而改变,当外界溶液的pH 大于两性离子的pH值,两性离子释放质子带负电。

当外界溶液的pH小于两性离子的pH值,两性离子质子化带正电。

当两性离子正负电荷数值相等时,溶液的pH 值即其等电点pI (isoelectric point)。

pI是氨基酸和多肽类物质的重要特征参数,GSH的带电性质与pI有关,对920于GSH的等电点这一特征性参数,一些文献资料的报道相差较大,有的文献报道的是5.96[8],而另一些文献则是2.83[9],是通过不同的方法计算出来的。

GSH在溶液中存在复杂的解离平衡:GSH+=GSH±+H+,pK1(COOH)=2.12GSH±=GSH-+H+,pK2(COOH)=3.59GSH-= GSH2-+H+,pK(NH3+)=8.75GSH2-=GSH3-+H+,pK(SH)=9.65GSH±是等电pH时的主要存在形式,以理论近似计算:pI=[pK1(COOH)+pK2(COOH)]/2=2.86而根据Handerson-Hasselbalch公式:pH=pK++lg[质子受体]/[质子供体],以及所给的pKa等数据,可以推算出在一定pH条件下各种离子的解离分离率(见图2)。

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