补料分批发酵过程控制系统研究 黄 丽,孙玉坤,黄永红, 薛力红
Bacillus mucilaginosus SM-01补料分批发酵产胞外多糖

Bacillus mucilaginosus SM-01补料分批发酵产胞外多糖杨庆胜;闫玉洁;马洋;李会;史劲松【期刊名称】《食品与发酵工业》【年(卷),期】2015(041)006【摘要】在5L发酵罐上对Bacillus mucilaginosus SM-01发酵产胞外多糖的发酵工艺进行研究.通过分析分批发酵时不同初始葡萄糖浓度对菌体生长及多糖合成的影响,选取60 g/L为最适初始葡萄糖浓度.进一步研究初始葡萄糖浓度为30 g/L 时不同补料方式对产糖的影响,结果表明分批补料为最适补料方式.采用分批补糖发酵工艺,即初始葡萄糖浓度为30 g/L,发酵后期分批次补加剩余30 g/L葡萄糖,胶质芽孢杆菌胞外多糖的浓度可达到38.62 g/L,较分批发酵提高36.8%,葡萄糖转化率由47.0%提高至64.4%.【总页数】4页(P20-23)【作者】杨庆胜;闫玉洁;马洋;李会;史劲松【作者单位】江南大学药学院,江苏无锡,214122;江南大学药学院,江苏无锡,214122;江南大学药学院,江苏无锡,214122;江南大学药学院,江苏无锡,214122;江南大学药学院,江苏无锡,214122【正文语种】中文【相关文献】1.胶质芽孢杆菌(Bacillus mucilaginosus)胞外多糖的分离纯化 [J], 张蕾;赵春燕;祁丹;孙军德2.产抗氧化胞外多糖海洋细菌Bacillus subtilis OST23a的诱变育种 [J], 房耀维;刘姝;吕明生;焦豫良;陈丽;王淑军3.产胞外多糖菌株的筛选及胞外多糖结构分析 [J], 李彬;陈向楠;张建法;王世明4.胶质芽孢杆菌SM-01胞外多糖提取纯化工艺 [J], 郁莉; 付海田; 彭梦霞; 邓超; 陈敬华5.一株高产胞外多糖乳酸菌的分离鉴定及其产胞外多糖的研究 [J], 黄承敏;肖茜;王蓉蓉;刘成国;姚慧;周辉因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
阿舒假囊酵母摇瓶分批补料发酵产核黄素的研究

论文对阿舒假囊酵母摇瓶分批补料发酵产核黄素进 行了初步研究。
! !"#$%&’#()*$ +,’-.)) ) " 由本实 " 葡 萄 糖 !% 、 蛋白胨 验室保存; 斜面培养基 ( # $ ’) !% 、 ;5) <6* )4% 、 9#=6* !47 、 琼脂 )% , >5 74.?.4% ; 种子 培养基 ( # $ ’) " 葡 萄 糖 3% 、 蛋 白 胨 !7 、 玉 米 浆 7、 ;5) <6* !4% 、 9#=6* %4,7 , >5 74. ? .4% ; 发酵培养基 " 葡 萄 糖 7% 、 酵 母 膏 )% 、 玉 米 浆 )% 、 ;5) <6* ( # $ ’) )4% 、 9#=6* !4% 、 @ABC !4% , >5 .4%?,47 ; 核黄素标准品" 上海史瑞可生物科技有限公司; 玉米浆、 蛋白胨 " 江 西省国药有限公司惠赠; 酵母膏 " 北京奥博星生物 技术有限公司; 其它试剂" 均为国产分析纯。 摇床, 可见分光光度计, 电子天平等。
[. ] 优化配方。为了进一步提高核黄素的产量, 惠明等
表明, 核黄素还具有利尿、 降血脂和改善心脏功能等 作用。由于化学合成法较为复杂且成本高, 因此, 核
收稿日期: ’$$O0$&0$/( !通讯联系人 作者简介: 刘志文 ( !O./0 ) , 女, 本科, 实验师, 从事微生物研究。
提出, 适当减少 UTV 途径的碳架物质流而增加 RTV 途径的碳架物质与能量的代谢流, 将有利于核黄素
可有效地消除某些基质对产物合成所产生的阻遏或
[+ ] 抑制效应, 因此更有利于菌体生长和产物合成 。本
分批补料发酵(共10张PPT)

半稳态
分批补料发酵的应用
一、通过控制底物初始浓度水平来消除高浓度底物对生长 代谢的抑制作用或由于可被快速利用的碳源所引起的分解 阻遏作用,并且能使发酵对溶解氧的需求保持在发酵罐通 气能力范围之内;
变速流加
补料分批培养(fed-batch culture)
连续流加 补料分批培养(fed-batch culture)
单一组分补料
最终D值的动态变化以可补用下加式的表培示:养基成分来区分
多组分补料
分批补料发酵动力学
在分批发酵中,生长会受到某一底物浓度的限制,在任何发酵时 间的菌体浓度可用下式表示:
以补加的培养基成分来区分
二、避免某些培养基组分高浓度下对微生物生长及代谢的抑制甚至毒副作用快,延速长流发酵加生产时间,特别是代谢产物的积累时间,以提高
发酵产量。 青霉素发酵[保障通气条件和生产能力]
流加方式
恒速流加
以CO2产生量作为补料发酵时的控制参数 补料分批培养(fed-batch culture)
自动测定发酵罐尾气中微 量乙醇含量
严格控制糖蜜补 入量
分批补料发酵的应用
青霉素发酵[保障通气条件和生产能力]
过量葡萄糖
缺乏葡萄糖
有机酸的积累
氧需求量>供氧力 pH下降
有机氮被消耗
pH上升
计算机控制补糖率, 生产期控制溶解氧
酶的发酵[消除分解阻遏作用]
株木霉
以CO2产生量作为补料发酵时的控制参数
补料分批发酵条件下对鸟苷产量的研究

【摘要】
鸟苷作为食品和医药产品的重要中间体有十分广阔的市场前景。本文通过
补料分批发酵方式下对鸟苷产量影响的研究。最终确定了葡萄糖、酵母粉和次黄嘌呤的最 优补料方式,使鸟苷产量达到32.05s/L,较分批发酵方式提高36.3%。 分批发酵
【关键词】
鸟苷;
补料分批发酵;
鸟苷(Guallosine)是广泛作用于食品和医 药产品的重要中间体.可用于合成食品增鲜剂
对鸟苷产量的影响
从图4可以看出,方式D为最佳流加方式. 产量最高。分次补料比一次补料的效果好,方 式C又优于方式B。间隔4小时补料比间隔12
・150・
补酵体积定为3mL。方式A。于发酵第24h.一 次性补加1.7%次黄嘌呤3mL:方式B。于发酵 第30h一次性补加1.7%次黄嘌呤3mL:方式
全国氨基酸生产技术交流会-论文集
在鸟苷的发酵生产中.补救途径亦具有重 要的功能.发酵后期各种营养成分的消耗所引
6
8 10
起的0『N比例的失调以及PH值的改变.会导 致全合成途径受阻.那么就需要在培养基中添 加适当的嘌呤类物质来启动补救途径继续合成 鸟苷。枯草芽孢杆菌能利用外部添加的次黄嘌 呤.本文对次黄嘌呤的流加量及流加方式进行 了研究。
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较丹批发酵方式的乌件产量23 5tg/L提高了
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图6次黄嘌呤流加方式对鸟苷产量的影响
从闭6可以看出,B优干A.D优于c.说 明从30小时后开始每4小时流加一次效果最 优产量有较大提高。 2.4》种物质流加时鸟苷产量的影响 根据上述结果.同时考虑鸟昔生产过程中 长菌期及产苷期所需营养物质的不同以及考虑
两性霉素b补料分批发酵工艺优化

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纳豆激酶分批补料发酵的研究

纳豆激酶分批补料发酵的研究吴燕;梁向峰;刘会洲;李英波;肖建辉【摘要】This paper studied the effect of nattokinase production from Bacillus subtilis LSSE-22 in shake flask and bioreactor.Glucose and soy peptone were identified as the optimal carbon source and nitrogen source through batch fermentation in shake flask,thus were used in this study.Furthermore,the effect of feeding substrate,method and time on the nattokinase production was also studied at optimized initial glucose and soy peptone concentration.The results showed that feeding method produced 1 437.34 IU/mL of nattokinase,which was 21.38% higher than that by batch culturing method.In the 7.5 L bioreactor,the maximum nattokinase concentration reached 2 046.47 IU/mL.%在摇瓶和发酵罐上研究了分批补料发酵对枯草芽孢杆菌LSSE-22发酵生产纳豆激酶的影响.通过摇瓶分批发酵,确定最优碳源和氮源分别为葡萄糖和大豆蛋白胨.在优化初始葡萄糖和大豆蛋白胨浓度的基础上,进一步研究了补料底物、补料方式和补料时间对产酶的影响.结果表明,采用分批补糖发酵工艺,纳豆激酶产量可达到1 437.34 IU/mL,比分批培养提高了21.38%.在7.5L发酵罐上进行分批补料发酵放大实验,纳豆激酶产量可达2 046.47 IU/mL,明显优于分批培养.【期刊名称】《食品与发酵工业》【年(卷),期】2018(044)001【总页数】7页(P126-132)【关键词】纳豆激酶;枯草芽孢杆菌;分批补料发酵;分批发酵【作者】吴燕;梁向峰;刘会洲;李英波;肖建辉【作者单位】遵义医学院附属医院,医药生物技术研究所,贵州遵义,563003;中国科学院过程工程研究所,中国科学院绿色过程与工程重点实验室,北京,100190;中国科学院青岛生物能源与过程研究所,中国科学院生物基材料重点实验室,山东青岛,266101;中国科学院过程工程研究所,中国科学院绿色过程与工程重点实验室,北京,100190;中国科学院过程工程研究所,中国科学院绿色过程与工程重点实验室,北京,100190;遵义医学院附属医院,医药生物技术研究所,贵州遵义,563003【正文语种】中文纳豆激酶(nattokinase, NK)是一种由纳豆枯草杆菌(Bacillus subtilis natto)分泌的具有强大溶栓活性的丝氨酸蛋白酶[1]。
鸟苷补料分批发酵的研究

【 图分 类 号 ] T 9 01 9 914 中
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sye o t e u n sn p o u t i r s d e . M e h d : Us g fd- ac fr e tt n tl s g a o i e o c n r t n tls n h g a o i e r d ci t we e t i d vy u to s i e b th e n m na i s e , u n sn c n e t i o y ao i e e t d b oh wa ee i e i t o s o a e t e eu i n c l r t . Re u t : T e o t lf d b th fr n f r n e r t s d tr n d w t me h d f p p r mo l l t o o me r m m h l o i y sl s h pi e — ac e. ma me tt n o d t n wa d tr n d y lwi g t e a b n o r e a d i g n s u c . T e r d ci i o u n s e n na i c n i o s ee mi e b f n h c r o s u c n nt e o r e h p u t t f g a o i i - o i o o r o vy n c a e o 3 . 5 / .w ih i c e s d b 6 3 o h ac e e tt n e r s d t 50 g L h c n r a e y 3 . % f te b th fr n ai .Co c u i n T e a e t o i e e t f d b th m o n lso : h f c s f d f r n e - a c f r e tt n sy e n t e g a o ie p o u t i e ey i o t n. e m n ai tls o h u n sn r d ci t w r v r mp r t o vy e a
红曲色素发酵分批补料工艺研究

红曲色素发酵分批补料工艺研究顾澄琛;张朝晖;包莹玲;刘银兰;嘉晓勤【摘要】为了提高红曲菌(Monascus purpureus) FM-4000的红色素色价,采用优化种龄和接种量的方法,探索了分批补料发酵基质对红色素色价的影响.结果表明,最佳种龄为6h二级种子液,接种量10%(V/V),在发酵48 h时补加20g/L黄豆粉,在发酵84h时补加0.5 mol/L氨水,在发酵96 h时补加60g/L米粉.在此工艺条件下,摇瓶发酵红曲菌FM-4000的红色素色价达到135.61 U/mL,相对初始摇瓶红曲菌FM-4000的红色素色价提高了37.25%;在5L发酵罐中对红曲菌FM-4000进行分批补料发酵培养,红色素色价可达145 U/mL.【期刊名称】《中国酿造》【年(卷),期】2016(035)006【总页数】5页(P133-137)【关键词】红曲菌;红色素;分批补料发酵【作者】顾澄琛;张朝晖;包莹玲;刘银兰;嘉晓勤【作者单位】浙江工业大学生物工程学院,浙江杭州 310014;浙江工业大学生物工程学院,浙江杭州 310014;浙江工业大学生物工程学院,浙江杭州 310014;浙江工业大学生物工程学院,浙江杭州 310014;浙江工业大学生物工程学院,浙江杭州310014【正文语种】中文【中图分类】TQ92红曲色素是红曲菌(Monascus)代谢过程中产生的一系列聚酮类化合物,其特点是色泽鲜艳、耐热性强、安全性高等[1]。
随着人们对食品安全问题的日益重视,天然色素正受到人们越来越多的关注。
目前对红曲色素的固态发酵有大量的报道[2-3]。
而液态发酵有利于扩大化、自动化生产,并且发酵时间短、生产消耗少、产品纯度高,因此液态发酵红曲色素成为近年来的研究热点[4-5]。
但目前对液态发酵红曲色素的补料工艺研究甚少[6],邱鹏等[7]通过单因素试验对红曲菌发酵条件进行了优化,付荣霞等[8]利用正交试验设计,研究不同碳源、氮源、pH、装液量对红曲霉色价及菌体干质量的影响。
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补料分批发酵过程控制系统研究黄 丽,孙玉坤,黄永红, 薛力红(江苏大学 电气信息工程学院, 江苏 镇江 212013)摘 要:发酵过程是一个复杂的生化反应过程,笔者从系统的角度分析了补料分批发酵过程的特点及主要影响因素。
在此基础上,提出了一套适合于现场的控制策略,设计了一个能够对生物发酵生产过程中的温度、压力、溶解氧、PH值及补料进行自动控制,以Motorola 公司的MC68HC08GP32芯片为核心的计算机控制系统。
关键词:补料分批发酵;温度控制;溶解氧控制;PH值控制;模糊控制中图分类号:TP273 文献标识码:AStudy of Control System About Batch Feed Ferment ProcessHuang Li, Sun Yukun, Huang Yonghong, Xue Lihong(School of Electrical and Information Engineering , Jiangsu University , Zhenjiang 212013 , China) Abstract: Fermentation is a very complicated biochemistry reaction process. According to the characteristic and central influencing factors, a suit of control system that is adaptive to scene is designed. The system was set up for microbe fermenting and producing process by temperature control , pressure control, DO,PH automatic control and automatic adding nutriment .And MC68HC08GP32 of Motorola is the core of this computer control system.Key words: fed-batch fermentation; temperature; dissolved oxygen; PH; fuzzy control1 引言近年来,生物技术迅速发展,生化反应过程,如发酵工业越来越引起科技界、工业界的重视。
发酵过程是一个非常复杂的生物化学变化过程,生物发酵有两个核心:一是涉及获得特殊反应或过程所需的最良好的生物细胞(或酶);二是选择最精良的发酵设备,开发最优技术,创造充分发挥生物细胞(或酶)作用的最佳环境。
其中第二个核心部分涉及到微生物细胞发挥作用的系统或反应器方面的问题,其首要问题是提供使微生物能够最优生长、最优形成产物的可控系统和环境。
例如,提出各环境参数的控制策略,提供设备设计及仪表装置,以使温度、通气、PH值等物理、化学条件得到有效的维持和控制,从而使微生物细胞呈现出最佳的性能,生成和积累大量产物。
补料分批发酵(fed-batch fermentation)是介于分批发酵和连续发酵之间的过渡类型。
这种发酵是指分批发酵中间间歇地或连续地补加一种或多种成分新鲜培养基,但所需产物不到某一时刻不从罐内放出的一种与分批发酵相似的发酵方法。
这种方法几乎遍及整个发酵工业,如生产酵母、氨基酸、抗生素、霉制剂、维生素等。
它兼有分批发酵和连续发酵的优点,而且克服了两者的缺点,是目前发酵工业中较有代表性的一种发酵工艺。
补料分批发酵过程主要分为以下两个阶段:准备阶段 包括菌种培养;培养基配制;消毒灭菌。
发酵阶段 包括接种;分批发酵;补料。
基金项目:江苏省高新项目(1191140002)作者简介:黄丽(1977-),女,甘肃天水人,教师,主要研究方向:智能控制;孙玉坤(1958-),男,江苏靖江人,教授,博导,主要从事智能控制及应用、电力电子技术应用方面的研究。
2 参数控制方案发酵过程具有时变性、多样性、耦合性和不确定性,采用传统的PID控制方法往往不能够满足实际的控制要求,本文针对这一问题提出了发酵过程中各参数的控制策略。
2.1 温度对于特定的微生物,都有一个最适宜的生长温度,发酵温度低于最适温度,菌体生长缓慢;但若高于最适温度,机体的重要组成部分可能会被破坏。
因此,发酵过程中的罐温是一个十分重要的微生物生长的环境参数,必须严格加以控制。
影响发酵温度的因素很多,如微生物发酵热,电机搅拌然,冷却水本身的温度变化以及周围环境温度的改变等。
要想建立精确的数学模型比较困难,加之发酵温度对象时滞大,惯性大,根据以上特点,我们通过控制加热器开关及调节冷却水流量对发酵温度进行控制。
采用Fuzzy-PID复合控制,如图1所示。
图 1 Fuzzy-PID控制框图其中,S:系统的设定值;,deedt:系统的偏差与偏差的变化率;E、E C:经模糊化处理后,偏差与偏差变化率转换成的模糊量;u: 控制量;Y:系统输出值Fuzzy-PID复合控制的实质是,应用fuzzy集合理论和方法将操作人员(或专家)的整定经验和技术知识总结成为fuzzy规则模型,形成计算机的查询表格及解析式。
计算机根据系统的实际响应情况,运用fuzzy推理来实现对PID的三个参数Kp、Ki、Kd的最佳调整。
2.2 压力在发酵过程中发酵罐的罐压必须保持正压,如果罐压为零或负,则会造成充气染菌倒罐;若罐压过高,发酵液中溶入过多的二氧化碳而造成菌体中毒。
因此,在整个发酵过程中有必要对罐压进行控制。
影响发酵罐的压力主要是供给的消毒空气的压力变化和进气流量的变化。
通常是通过调节排出的气体的量来控制发酵罐的压力,采用传统的PID控制一般即可达到控制要求。
2.3 溶解氧发酵过程中需要大量溶于发酵液中的氧,以满足菌体生长和发酵代谢的需要。
在耗氧型发酵中,氧是作为微生物生长必须的原料,若供氧不足,将会抑制微生物的生长和代谢的进行,为此,在发酵过程中,要保持一定的溶氧浓度。
影响溶解氧的因素很多,培养基浓度的增加、发酵温度的上升、发酵罐内的压力下降、空气湿度的增加、搅拌转速的下降及通气量的减少等变化都会引起溶解氧浓度的下降。
一般,发酵过程中保持罐压恒定及搅拌转速不变,而温度如前所述采用Fuzzy-PID复合控制,可以稳定于设定值,故主要通过调节通气量(供给的空气量)来控制溶解氧浓度。
可采用溶解氧和通气量组成串级控制系统(图2),溶解氧为主控制回路,通气量为副控制回路。
图 2 DO控制框图其中,Dor: 设定溶氧值;Do:实际溶氧输出2.4 PH值PH值是微生物生长的另一个重要环境参数,它影响微生物的生长繁殖和代谢产物的合成。
PH值的变化是发酵过程中代谢平衡,特别是碳、氮代谢平衡的反映。
一般,PH值上升多是由于碳代谢不足,可适当增加糖的补加量来调整;PH值下降主要是由于碳源过量或者氮源不足引起的,可通过补加氨水的方法使其回升。
由于PH对象特性具有时变性、不确定性(影响因素多所致)、较大的时滞性等特点,在PH值控制中,可选择PH值和设定值之差作为过程输入,蠕动阀开、关为过程输出,通过改变蠕动阀的开关频率和开关脉冲宽度来调节氨水的加入量,使PH值逐步逼进设定值,以达到控制精度。
PH值控制流程如图3所示。
图 3 PH值控制流程图图中,I:PH值的设定值; V:PH值的采样值。
2.5 补料控制补料控制的目的在于控制中间代谢,使菌丝保持在半饥饿状态,促使它大量地分泌和合成代谢产物,及时对培养液中菌丝的变化、培养液主要成分的含量进行调节控制,使发酵沿着有利于提高质量的方向发展。
在此,补料控制可采用基于尾气反馈的控制方法,利用尾气分析所得信息来控制补料速率。
早期的连续补料控制系统是计量杯式补料系统,但由于执行机构计量杯存在的问题,没有得到成功应用。
现在普遍采用的是计量罐式补料系统,该系统由一个不锈钢计量罐、一对液位电极、两个波纹管截止阀和两个电磁阀组成,如图4所示。
其原理是计算机通过调整计量罐滴加装置的工作频率来实现补料控制。
例如,采用5L的计量罐,补料速率为500L/h,则每小时要补入100罐营养剂(5升/罐×100罐=500升)。
计算机控制计量罐滴加装置把100罐营养剂在1小时内(3600s)等间隔地加入发酵罐内,即每36s加入一罐料液(5L)。
补料时,通过计算机输入补料速率或补料量等参数,补料执行机构在等时间间隔把营养剂一罐一罐地加入发酵罐。
从每罐加料的方式看是脉冲方式补料(间歇补料),但从整个发酵过程看则是连续滴加补料,故称之为“脉冲滴加”方式。
一个完整的补料过程如图4所示,其中E1、V1构成入料阀,E2、V2构成出料阀,计算机控制系统通过定时或外部脉冲控制E1、E2动作并联动V1、V2进行补料,计量罐液位电极T控制补料过程。
补料时控制系统首先打开进料阀V1使料液进入计量罐,当计量罐内液位接触到电极T时,进料阀V1自动关闭,出料阀V2开启,将计量罐内料液排至发酵罐,料液排空后关闭出料阀,完成了一个补料周期,再等待下一个补料周期。
图 4 计量罐式补料系统其中,E1、E2:电磁阀(二位三通式);V1、V2:气动波纹管阀;G:计量罐;T:计量罐液位电极。
3 系统组成本系统下位机以Motorola 公司的MC68HC08系列中的芯片:MC68HC08GP32为核心,包括主机模块、输入模块、输出模块和显示模块。
上位机采用普通的PC机控制,以Visual C++ 6.0为平台,结合MySQL 4.1.14数据库和Matlab6.5建立了友好的人机界面。
通过CAN总线实现上下位机的实时通讯。
4 结束语虽然近年来生物发酵过程控制越来越受到人们的关注和重视,但由于发酵过程是一个非常复杂的化学变化和生理变化的综合过程,微生物生长过程的动态变化及高度的非线性、时变性,关键变量如菌体浓度、产物浓度又不可在线测量,使得发酵过程的模型化、优化控制都存在着不少难题。
笔者提出了发酵过程中一些重要参数的控制思想及其实现方法,如温度控制、溶解氧控制等。
今后随着神经元网络的不断深入研究,利用其在模式识别、噪声数据分类及工业生成过程建模的强大功能,可获得真实的生化反应过程信息,从而可对发酵过程实行完整的闭环控制和优化控制,提高发酵产物的生成率。
参考文献:[1]肖应旺,徐保国. 补料分批发酵过程计算机控制系统的设计与应用[J]. 计算机测量与控制,2004,12(6):529~543.[2] 王宇智. 微生物发酵过程建模及控制开发环境的研究 [D]. 天津:天津科技大学,2003.[3] 李艳. 发酵工业概论[M]. 北京:中国轻工业出版社,1999.[4] 陈冠胜,许勇. 链霉素发酵过程的计算机控制[J]. 工业仪表与自动化装置,1995.1:33~35. [5] 盛金辉,庄诚,林红权. 啤酒发酵温度控制算法的设计及模型化[ J ]. 微计算机信息,2005. 21(4): 32~33本文作者创新点:1、温度控制算法。