东北红豆杉成分含量研究报告

东北红豆杉有效成分含量研究报告东北红豆杉（Taxus cuspidata Sieb. et. Zucc.）是红豆杉科（Taxaceae）红豆杉属植物，是我国东北分布的珍贵第三纪孑遗树种、国家I级重点保护的野生濒危植物种类。

紫杉醇（paclitaxel，商品名taxol）及三尖杉宁碱（cephalomannine）均为红豆杉属植物中含有的二萜类化合物，具广谱抗肿瘤活性和独特的抗癌作用机理。

本实验探讨了不同部位、不同生长时期东北红豆杉枝叶中的紫杉醇和三尖杉宁碱含量的分布规律，结果表明多数树冠部位的当年生枝叶中两种物质的含量低于两年生和三年生枝叶，而两年生和三年生枝叶中两种物质含量差异不显著；阳面树冠的3个层次的两种物质含量无明显差异，阳面的含量稍高于阴面。

天然东北红豆杉当年生枝叶中紫杉醇含量在休眠期达到最高，花期和果期含量无太大差异；三尖杉宁碱含量在休眠期也最高，部分植株的当年生枝叶中三尖杉宁碱含量为花期低于果期，但有个别植株中二者含量差异不显著；每个植株个体之间紫杉醇和三尖杉宁碱含量均差异显著。

Variation in Paclitaxel and Cephalomannine contentsin nature Japanese yewAbstractThe Japanese yew (Taxus cuspidata Sieb. et. Zucc.) is a survivor tertiary species and national level endangered species which belongs to Taxaceae.Paclitaxel and cephalomannine are both diterpenoid in Taxus with special anticancer mechanism and antitumous activity.This experiment have determined the paclitaxel and cephalomannine contents in branches and leaves of Japanese yew in different parts and periods. The results indicated that most parts of paclitaxel and cephalomannine contents in branches and leaves of current year were lower than those of biennial and perennial, but paclitaxel and cephalomannine contents in branches and leaves had no conspicuous difference between biennial and perennial; there were no conspicuous difference in three hierarchical，but the contents of the two materials in sunny side were slightly higher than the overcast side. Paclitaxel contents of current branches and leaves were highest during dormancy stage, but it had no signficant difference between flower season and fruit season. The contents of cephalomannine was highest during dormancy stage too, and the cephalomannine contents in flower season were lower than fruit season of parts of samples trees, but some had no significant difference, individual variation was significant.Key words：Taxus cuspidata；paclitaxel；cephalomannine；ultrasonic extraction method；HPLC1 绪论 (1)1.1 植物次生代谢 (1)1.2 东北红豆杉 (1)1.2.1 东北红豆杉生物学特征 (1)1.2.2 东北红豆杉资源的利用价值 (2)1.2.3 东北红豆杉资源及现状 (2)1.3 紫杉醇和三尖杉宁碱 (3)1.3.1 东北红豆杉枝叶中的化学成分 (3)1.3.2 紫杉醇 (3)1.3.3 三尖杉宁碱 (4)1.3.4 研究进展 (5)1.4 立题依据 (6)2 实验材料及方法 (7)2.1 实验材料 (7)2.2 仪器与试剂 (7)2.2.1仪器.............. ........................................................................................... . (7)2.2.2试剂 (7)2.3 实验方法 (7)2.3.1 样品制备 (7)2.3.2 色谱条件 (8)2.3.3 标准溶液配制 (8)2.3.4 标准曲线绘制 (8)3 结果与分析 (9)3.1 天然东北红豆杉不同树冠部位枝叶中紫杉醇及三尖杉宁碱的含量 (9)3.1.1 天然东北红豆杉不同树冠部位叶中紫杉醇及三尖杉宁碱的含量 (9)3.1.2 天然东北红豆杉不同树冠部位枝中紫杉醇及三尖杉宁碱的含量 (10)3.2 天然东北红豆杉当年生枝叶中紫杉醇及三尖杉宁碱含量的生长时期变化规律 (10)3.2.1 当年生叶中紫杉醇及三尖杉宁碱含量的生长时期变化规律 (10)3.2.2 当年生枝中紫杉醇及三尖杉宁碱含量的生长时期变化规律 (12)4 讨论 (14)4.1 天然东北红豆杉不同树冠部位枝叶中紫杉醇及三尖杉宁碱的含量 (14)4.2 天然东北红豆杉当年生枝叶中紫杉醇及三尖杉宁碱含量的生长时期变化规律 (14)5 结论 (15)东北林业大学毕业论文不同部位和季节东北红豆杉枝叶中有效成分含量变化1 绪论1.1 植物次生代谢植物的次生代谢（plant secondary metabolism）是相对于初生代谢而言的，这个概念最早是由Kossel于1891年明确提出的[1]。

绿色植物及藻类因为有叶绿素，可以通过光合作用将二氧化碳和水转化成糖类，并放出氧气，生成的糖则进一步通过不同途径（如磷酸戊糖途径，糖酵解途径，三羧酸循环），产生核酸合成的原料如核糖等，脂类合成的原料如丙二酸单酰辅酶A（malmyl CoA）等，并通过固氮反应得到一系列的氨基酸（合成肽和蛋白质的重要原料），此过程因为对维持植物生命活动过程来说是不可缺少的，且几乎存在于所有的绿色植物中，故习惯上称为初生代谢（primary metabolism），相应地糖、蛋白质、脂类和核酸等这些对植物有机体生命活动来说是不可缺少的物质，则称为初生代谢产物（primary metabolites）[2]。

次生代谢产物在植物中的合成与分解过程称为植物次生代谢[3]。

次生代谢产物包括生物碱、糖苷、萜类、甾类、皂苷、多炔类和有机酸等。

它在维护植物自身的生存和发展具有重要的作用。

我国植物种类繁多，植物资源丰富，对植物次生物质对植物自身作用的研究，除学术价值外，对这些次生物质的进一步开发利用也极具启发指导意义[4]。

1.2 东北红豆杉东北红豆杉（Taxus cuspidata Sieb. et. Zucc.）是红豆杉科（Taxaceae）红豆杉属植物，又名紫杉、赤柏松，是我国东北分布的珍贵第三纪孑遗树种、国家I级重点保护的野生濒危植物种类[5]，起源于古老的第三纪，曾广泛分布于北半球，第四纪冰川时期其分布范围大大缩小。

亿万年来，地质构造的运动和地势地形的变化，使一部分红豆杉在特殊的环境中得以保留下来，形成了明显的地理种群隔离。

由于红豆杉种群竞争力弱、天然更新缓慢和地理分布局限等客观因素，导致红豆杉属植物早在20世纪80年代就被列入国家Ⅱ级保护植物。

90年代以来，随着抗癌新药紫杉醇的开发利用，红豆杉原料供需矛盾日益突出，人类掠夺式的生产经营活动，加剧了其濒危程度，1999年我国将红豆杉属物种列入Ⅰ级保护植物。

红豆杉被称为植物王国里的“活化石”，是世界珍稀树种[6]。

1.2.1 东北红豆杉生物学特征东北红豆杉为常绿乔木，高10~17 m，胸径10~13 cm，树冠倒卵形或宽卵形，大枝平展。

树皮红褐色或灰红褐色，片状剥裂。

叶条形，有短柄，生于主枝上者为螺旋状排列，生于侧枝上者叶柄基部左右扭转，成不规则羽状排列，约成45°角斜展，柔软，先端凸尖，基部渐狭，上面光绿色，下面灰绿色，两面中脉隆起，背面有两条灰绿色气孔带，长1.5~2.5 cm，宽2 mm 左右。

枝互生，幼时深绿色，老时红褐色。

雌雄异株；球花单生于前年枝的叶腋；雄蕊6~14枚，集生成头状，花药5~8裂，淡黄色；雌花具1胚珠，卵形淡红色。

种子坚果状，卵圆形稍扁，有2~3条棱线，红褐色，有光泽；假种皮杯形，淡红色。

肉质，富浆汁，基部有数对黄色鳞片。

花期5~6月，果期7~8月，种子9月成熟[7-9]。

东北红豆杉性喜凉爽湿润气候，幼树时喜荫庇，7~8年后喜光，抗寒性强，可耐-30℃以下的低温，最适温度20℃~25℃，属阴性树种。

喜湿润，怕涝，适于疏松、微酸性、湿润（土壤含水率40%~60%）、排水良好的砂质土壤，忌积水和沼泽地。

种子发芽后幼苗生长较慢。

4月中旬芽开始膨大，4月下旬为芽的开放期，5月上、中旬为新芽展叶期，老叶脱落更新多在5~6月[10]。

1.2.2 东北红豆杉资源的利用价值1.2.2.1 药用价值东北红豆杉提取物中的主要化学成分具有多种药用价值，其中紫杉醇等紫杉烷二萜类次生代谢产物具有独特机理的抗癌作用，被认为是癌症治疗的重大进展之一，对食道癌、肺癌、卵巢癌、结肠癌、肝癌[7]、鼻咽癌、膀胱癌、前列腺癌及急性白血病有特殊的防治效果，特别是对晚期卵巢癌和转移性乳腺癌治愈率达33%，总有效率在75%以上[9]，对大肠癌、黑色素瘤、头颈部癌、淋巴瘤、非小细胞肺癌、头颈部口腔癌[11]也有一定疗效，据报道紫杉醇还可用于治疗若干种慢性炎症性疾病，其中包括继发性进行性多发性硬化症、风湿性关节炎以及外用治疗牛皮癣和特应性湿疹等[12]。