输血科疑难交叉配血试验标准操作规程
输血科交叉配血操作流程
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交叉配血操作规范(凝聚胺法)
交叉配血操作规范（凝聚胺法）【操作人员】经批准人授权的同志【部门主管】【质量控制员】【目的】保证测试结果的准确性。
【适用仪器范围】双目显微镜、普通离心机。
【该SOP变动程序】该标准操作程序的更改，可由任一使用本程序的操作人员提出并报请专业主管及科主任签字后生效。
【应用范围】交叉配血（凝聚胺法）的手工操作。
【标本采集和处理】1．由临床科室采用真空负压EDTA K2抗凝管采集3ml-5ml，作好标记，立即送检。
备血使用的受血者标本必须是输血前三天之内的血样。
采血时要防止溶血及多量组织液混入（多发生在静脉穿刺不顺利勉强抽血时），在病人输液时采集标本，必须从未输液的一侧肢体抽取，绝不允许在输液管接头处采集。
2．非急症病人输血前，应事先采取血标本作血型鉴定，填写申请单配血单上，以便核对。
急症抢救输血，未能事先采血检测血型，则要求由专人核对、贴标签、采取血标本送检。
3. 检验人员认真核对患者姓名、性别、床号、检验目的以及标本是否与申请单一致。
确认无误后用专用记号笔在试管与申请单上编写对应数字序号。
并按日期索引进行登记。
4. 将标本置于台式离心机内，放置保证平衡，以1500转/min离心10分钟。
保证血浆于血球有效分离。
溶血标本应重采取、乳糜血及标本量不足应加以登记，溶血性疾病应注明。
【方法学原理】凝聚胺试验是利用低离子溶液促进红细胞抗原与血清（浆）中的抗体反应，再利用凝聚胺引起红细胞间非免疫性的凝集，让已有抗体（IgG）反应的红细胞间的距离缩短。
距离缩短后更能引起已反应的抗体和别的红细胞产生反应形成免疫性的凝集。
而由凝聚胺所引起的非免疫性红细胞凝集反应可被后来加入的复悬液所中和而散开，如有免疫反应，凝集就不会散开，为阳性反应。
如没有免疫反应，凝集就会散开，为阴性反应。
交叉配血试验是在盐水介质的基础上加入凝聚胺，检测供患之间是否相合，患者血清（浆）中是否含有具临床意义的红细胞异体抗体。
【试剂和材料】1．供血者血清（血浆）；2．受血者血清（血浆）；3．BASO凝聚胺（Polybrene）试剂盒。
交叉配血试验标准操作规程（微柱凝集法）
交叉配血试验标准操作规程（微柱凝集法）交叉配血试验标准操作规程（微柱凝集法）一、目的为保证临床输血的相容性，确保临床输血安全，对全血、红细胞悬液、洗涤红细胞、浓缩红细胞、少白细胞红细胞、冰冻红细胞、机采浓缩白细胞悬液等血液成分进行交叉配血试验。
二、方法采用微柱凝集法；三、原理将人红细胞血型抗原与相应的抗体发生的凝集反应在微柱检测系统中进行。
微柱检测系统的上端为反应室，将葡萄聚糖凝胶作为凝集反应的介质装入检测卡微柱凝集检测管中，微柱凝集检测管中的凝胶的间隙起分子筛作用。
凝集反应阳性的红细胞凝决留在微柱凝集检测管的上面或中间，反应阴性未凝集的红细胞将通过凝胶的间隙，沉积在微柱凝集检测管的底部。
四、适用范围适用于输血前需进行交叉配血试验的血液及血液成分。
五、仪器设备普通离心机；血型血清学多用离心机；37℃免疫微柱孵育器；六、试剂1、试剂名称：抗人球蛋白交叉配血卡（微柱凝集法）2、试剂生产厂家：长春博迅生物技术有限责任公司；3、批准文号：国药准字S2*******；4、包装规格：聚丙烯卡12卡×3检测人份/盒；5、贮藏条件；18-25℃避光保存。
6、有效期：自检定合格之日起12个月；七、检测样本要求1、标本类型：静脉血(EDTA抗凝剂:血液=1:10)。
2、标本采集：见输血科标本管理标准化操作规程。
3、标本储存和运输：新鲜血2～8℃贮存时间不超过72小时。
4、标本拒收状态：标识不准确、标本稀释、细菌污染，严重溶血等不能测定。
八、操作步骤1、将受血者与献血者的红细胞血清分离；2、分别配制受血者与献血者0.5%-0.8%红细胞悬液3、将受血者血清50ul与献血者红细胞悬液50ul加入主侧管中；4、将受血者红细胞悬液50ul与献血者血清50ul加入次侧管中；5、将加样后的试剂卡置37℃免疫微柱孵育器中孵育15分钟；6、使用血型血清学多用离心机900rpm离心2分钟，1500rpm 离心3分钟，取出肉眼观察结果。
医院输血科交叉配血(盐水法)标准操作程序
输血科交叉配血（盐水法）标准操作程序
（原理）交叉配血主要是检查受血者血清中有无破坏供血者红细胞的抗体，故受血者血清加供血者红细胞相配的一管称为“主侧”，供血者血清加受血者红细胞相配的一管称为“次侧”，两者合称交叉配血。
交叉配血试验又称不配合性试验，是确保患者安全输血必不可少的试验，完整的操作规程应包括：①查阅受血者以前的血型检查记录，如与这次检查结果有所不同，应及时分析原因；②对收到的受血者血样应作ABO正反定型，RH(1)定型及血型抗体检测和鉴定；③选择预先进行血型检查的合格供血者作交叉配血试验。
交叉配血方法：
（一）盐水介质配血法
本法是目前最常用的配血方法，可以发现临床上最重要的ABO不配合性，当受血者和供血者细胞经混合并离心后，如有ABO不配合问题，就会很快显示出来，所以常称为“立即离心”配血试验。
[操作]
1、抽取受血者静脉血3-4ml，待凝固后分离血清，并配制2%-5%台红细胞盐水悬液。
2、将供血者血样以同样方法分离血清，并配制2%-5%红细胞悬液。
3、取洁净水试管2支，1支标明受血者血清（PS）+供血者细胞（DC）作“主侧”，另1支标明供血者血清（DS）+受血者细胞（PC）作“次侧”。
4、按标记“主侧”管如受血者血清2滴和供血者红细胞悬液1滴。
“次侧”管如供血者血清2滴和受血者红细胞悬液1滴混匀，以1000r/min离心1min，轻轻侧动试管，观察结果，冬季气温较低，应将试管保温，以防
冷凝集素引起的凝集反应影响结果判断。
ABO同型配血，“主侧”和“次侧”均无溶血及凝集表示无输血禁忌可以输血。
交叉配血试验标准化操作规程盐水法
落石出交叉配血试验标准化操作规程（盐水法）一、目的为保证临床输血的相容性，确保临床输血安全，对全血、红细胞悬液、洗涤红细胞、浓缩红细胞、少白细胞红细胞、冰冻红细胞、机采浓缩白细胞悬液等血液成分进行交叉配血试验。
二、方法采用盐水介质试管法； 三、原理交叉配血试验也称配合性试验,只是检查不配合性,使受、供者血液间没有可测的不相配合的抗原、抗体成分。
盐水介质交叉配血试验常称立即离心配血试验，将人红细胞血型抗原与相应的抗体发生的凝集反应在盐水介质中进行，只有在任何步骤中不产生溶液血或凝集时方可将供血者的血液或血液成分给受血者输注。
试验通常包括：主侧交叉配血试验：受血者血清对供血者红细胞，是检测受血者血清中是否存在与供血者红细胞发生反应的抗体；次侧交叉配血试验：受血者红细胞对供血者血清，是检测供血者血清中是否存在与受血者红细胞发生反应的抗体；自身对照试验：受血者红细胞对受血者血清，是检测受血者血清中是否存在抗自身红细胞抗体、直接抗球蛋白试验阳性及红细胞缗钱状假阳性的存在。
四、适用范围适用于输血前需进行交叉配血试验的血液及血液成分。
五、仪器设备普通离心机；血型专用离心机；六、试剂1、试剂名称：0.9%氯化钠注射液2、试剂生产厂家：湖南科伦制药有限公司；3、批准文号：国药准字H20050061；4、包装规格：500ml/瓶；5、贮藏条件；18-25℃避光保存。
6、有效期：自检定合格之日起二年；七、检测样本要求1、标本类型：静脉血(EDTA抗凝剂:血液=1:10)。
2、标本采集：见输血科标本管理标准化操作规程。
3、标本储存和运输：新鲜血2～8℃贮存时间不超过72小时。
4、标本拒收状态：标识不准确、标本稀释、细菌污染，严重溶血等不能测定。
八、操作步骤1、将受血者与献血者的红细胞血清分离；2、分别配制受血者与献血者红细胞配成2%盐水悬液；3、取洁净小试管（10mmx60mm）2支，1支标明主侧：受血者血清（PS）+供血者细胞（DC）；另1支标明次侧：供血者血清（DS）+受血者细胞（PC）。
输血科交叉配血操作规程
类另小操作规程部n ：输血科名称：输血科交叉配血试验标准作规程 新 增：交叉配血标准操作规程【目的】检测供血者与受血者之间的输血相容性，包括主侧配血与次侧配 血，确保受血者输血安全。
【范围】所有输血前需要进行交叉配血的血制品。
【职责】配血岗位负责交叉配血试验。
【原理】交叉配血试验是指受血者血清与供血者红细胞及受血者红细胞 与供血者血清之间的混合凝集试验，分为主管（或称主侧）及次管（或称次侧）。
主管是受血者血清与供血者红细胞，次管是受血者红细胞 与供血者血清。
凝聚胺法利用多聚季胺盐类一一凝聚胺携带很多正电荷，中和 红细胞表面的负电荷，使红细胞之间距离减少，引起正常红细胞可逆 性凝集。
无抗体致敏的红细胞被凝聚胺凝集，当加入中和液后，则凝 集消散，而抗体致敏的红细胞被凝聚胺凝集，则不能消散，以此来判 断供、受者间血液的相容性。
生效日期：2014. 10 修改日期：2014. 09【标本采集和处理】1、标本采集：EDTA抗凝静脉血2ml。
2、标本保存：室温放置不超过6小时，4℃保存不超过72小时，无溶血及明显乳糜。
【设备与试剂】1、凝胶胺介质试剂盒①包装规格：150Tests∕盒。
②试剂组成：低离子溶液，凝聚胺溶液，悬浮液。
③储存条件及有效期：未开封试剂应贮存于2℃-25℃、相对湿度不大于80%；已开封试剂应贮存于相对湿度不大于80%室温环境，试剂用后应及时拧紧瓶盖保存；未开封试剂有效期为二年，在有效期内的已开封试剂应在开封后6个月内使用完。
2、红细胞悬液：取标本离心后压积红细胞与生理盐水配制3%-5%红细胞悬液。
3、BaSo2005-2> BaSo2002-2型医用低速离心机：珠海贝索生物技术有限公司。
【方法】1、盐水介质法a）取小试管（内径10 mm×60 mπι）2支，分别标明“Ps+Dc”和“Pc+Ds”，前者为主管，后者为次管。
其中Ps=受血者血清，Pc=受血者红细胞，Ds=供血者血清，De二供血者红细胞。
交叉配血试验标准化操作规程盐水法
落石出交叉配血试验标准化操作规程（盐水法）一、目的为保证临床输血的相容性，确保临床输血安全，对全血、红细胞悬液、洗涤红细胞、浓缩红细胞、少白细胞红细胞、冰冻红细胞、机采浓缩白细胞悬液等血液成分进行交叉配血试验。
二、方法采用盐水介质试管法；三、原理交叉配血试验也称配合性试验,只是检查不配合性,使受、供者血液间没有可测的不相配合的抗原、抗体成分。
盐水介质交叉配血试验常称立即离心配血试验，将人红细胞血型抗原与相应的抗体发生的凝集反应在盐水介质中进行，只有在任何步骤中不产生溶液血或凝集时方可将供血者的血液或血液成分给受血者输注。
试验通常包括：主侧交叉配血试验：受血者血清对供血者红细胞，是检测受血者血清中是否存在与供血者红细胞发生反应的抗体；次侧交叉配血试验：受血者红细胞对供血者血清，是检测供血者血清中是否存在与受血者红细胞发生反应的抗体；自身对照试验：受血者红细胞对受血者血清，是检测受血者血清中是否存在抗自身红细胞抗体、直接抗球蛋白试验阳性及红细胞缗钱状假阳性的存在。
四、适用范围适用于输血前需进行交叉配血试验的血液及血液成分。
五、仪器设备普通离心机；血型专用离心机；六、试剂1、试剂名称：%氯化钠注射液2、试剂生产厂家：湖南科伦制药有限公司；3、批准文号：国药准字H；4、包装规格：500ml/瓶；5、贮藏条件；18-25℃避光保存。
6、有效期：自检定合格之日起二年；七、检测样本要求1、标本类型：静脉血(EDTA抗凝剂:血液=1:10)。
2、标本采集：见输血科标本管理标准化操作规程。
3、标本储存和运输：新鲜血2～8℃贮存时间不超过72小时。
4、标本拒收状态：标识不准确、标本稀释、细菌污染，严重溶血等不能测定。
八、操作步骤1、将受血者与献血者的红细胞血清分离；2、分别配制受血者与献血者红细胞配成2%盐水悬液；3、取洁净小试管（10mmx60mm）2支，1支标明主侧：受血者血清（PS）+供血者细胞（DC）；另1支标明次侧：供血者血清（DS）+受血者细胞（PC）。
交叉配血标准操作规程
交叉配血标准操作规程(一)检验目的检测供血者与受血者之间的输血相容性，包括主侧配血与次侧配血，确保输血安全。
(二)检验原理1.凝聚胺法利用多聚季胺盐类——凝聚胺携带很多正电荷，中和红细胞表面的负电荷，使红细胞之间距离减少，引起正常红细胞可逆性凝集。
无抗体致敏的红细胞被凝聚胺凝集，当加入中和液后，则凝集消散，而抗体致敏的红细胞被凝聚胺凝集，则不能消散，以此来判断供、受者间血液的相容性。
2.微柱凝胶法微柱凝胶卡的微管中装填有葡聚糖凝胶颗粒和抗人球蛋白试剂，红细胞表面抗原与其对应的IgG抗体结合以后，在离心力的作用下不断向管底沉降，并与抗人球蛋白结合形成红细胞凝集，凝胶颗粒具有分子筛的作用，可以阻滞凝集的红细胞在离心力的作用下通过凝胶颗粒，使其悬浮在凝胶上端，未凝集的红细胞则可以通过凝胶颗粒到达微管底部。
3.玻璃珠微柱法微柱卡的每一个微管中装填有直径均一的玻璃微珠和抗人球蛋白试剂(抗-IgG和抗补体C3)，红细胞表面抗原与其对应的IgG抗体结合以后，在离心力的作用下不断向管底沉降，并与抗人球蛋白结合形成红细胞凝集，玻璃微珠具有分子筛的作用，可以阻滞凝集的红细胞在离心力的作用下通过玻璃微珠，使其悬浮在玻璃微珠层的上端，未凝集的红细胞则可以通过玻璃微珠之间的微小空隙到达微管底部。
(三)适用范围适用于手工凝聚胺法、全自动微柱凝胶法、全自动玻璃珠微柱法交叉配血试验。
(四)设备性能参数各种交叉配血检测系统性能指标参见相应检测系统说明书。
(五)器材与试剂1.器材KA-2200血清学专用离心机、B600-A型低速离心机、WADiana全自动血型配血系统、SWING-SAXO血型配血系统、Techno全自动血型配血系统、Othro Au-toVuelnnova全自动血型及配血系统、阅片灯箱、光学显微镜、塑料软试管、塑料硬质试管(100m m×l2mm和75m m ×l2mm)、试管架、一次性塑料滴管、记号笔。
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输血科疑难交叉配血试验标准操作规程
1.目的
为规范疑难交叉配血试验操作，保证临床输血安全有效，依据《输血实验室管理程序》4.1.7(2)条款的要求制定本规程。
2.适用范围
适用于医疗机构输血科对临床疑难交叉配血受血者，主要是对红细胞ABO血型鉴定困难、红细胞不规则抗体筛选阳性及自身免疫性溶血性贫血(AlHA)患者的交叉配血试验。
3.职责
医疗机构输血科技术人员负责疑难交叉配血试验。
4.原理
本规程中疑难交叉配血是指受血者ABO血型鉴定困难、红细胞不规则抗体筛选阳性或受血者是自身免疫性溶血性贫血患者等情况下的交叉配血试验。
配血前需确定受血者的ABO血型或红细胞不规则抗体的特异性,选择ABO血型相容的红细胞或红细胞不规则抗体对应抗原阴性的红细胞进行交叉配血试验。
5.所需设备和试剂
普通离心机，血型血清学专用离心机，水浴震荡仪，普通显微镜等。
6.检测环境条件
室温应控制在18-27°C,湿度应保持30%-70%°
7.步骤与方法
7.1交叉配血前受血者ABO血型鉴定不确定者执行《ABO疑难血型鉴定标准操作规程》，确定ABO血型后，再选择ABO血型相
同或相容的献血者血液进行交叉配血试验。
7.2红细胞不规则抗体筛选阳性时
7.2.1随机与库存血中多袋血液进行交叉配血试验，选择交叉配血相合的血液输注。
7.2.2我院库存血中无相合的血液时，应立即联系临床医生说明情况：①上述实际情况；②应送市血液中心进行“疑难配血”，会产生费用，存在配血不成功的可能：③详细告知家属，决定是否送市血液中心。
7.2.3家属同意后，由医生填写“免疫学申请单”，并抽取血样EDTA抗凝血5-10ml,送输血科。
7.2.4输血科联系血液中心，并送血样。
7.3冷型自身抗体或冷型AIHA患者交叉配血试验：执行7.2.2-7.2.4程序
8.交叉配血结果判定
主侧、次侧交叉配血均无溶血、无凝集，表示配血相合。
对于AlHA患者，已经排除同种抗体的存在，而所有交叉配血又都不相和时，可选择凝集强度弱于自身凝集的血液输注。
9.质量控制8.1用于试验的所有试剂都在有效期内使用，使用前进行质量控制试验，不合格的试剂不能使用。
8.2严格试验操作，设置必要的阴阳性对照，结果符合预期才可判定试验结果。
10.注意事项
10.1遇到交叉配血不合时，应根据具体情况先进行初步分析，再
有针对性地解决问题。
10.1.1主侧交叉配血不相和的原因有：①受血者或献血者ABO血型错误或二者的ABO血型不配合：②受血者血清（血浆）中存在与献血者红细胞血型不相和的同种抗体，或可与献血者红细胞抗原反应的非特异性抗体；③献血者红细胞已被致敏，导致抗球蛋白法交叉配血试验呈阳性；④患者血清异常如白蛋白/球蛋白比例异常引起缗线状凝集，血清中存在高分子聚合物的血浆扩容剂也可引起假阳性（可用生理盐水添加试验解决）；⑤试验系统被污染。
10.1.2次侧交叉配血不相和的原因：①献血者血清（血浆）中存在针对患者红细胞抗原的抗体；②受血者与献血者的ABo血型不相和；③受血者红细胞已经被致敏，DAT阳性。
10.2引起交叉配血困难的原因很多，而且解决疑难交叉配血问题常需完成多项复杂的试验，因此对可能引起交叉配血困难的受血者应尽早做相关检测。
10.2.1对可能输血治疗的患者在入院时应尽早进行ABO和RhD血型鉴定，血型鉴定存在疑问时尽早查明原因，明确ABO和RhD血型。
10.2.2对有输血史、妊娠史并可能输血治疗的患者，在入院时即进行红细胞不规则抗体筛选试验，结果阳性者应尽早鉴定抗体特异性。
10.2.3对溶血性贫血的患者应尽早做抗球蛋白试验，并正确鉴定ABO和RhD血型。
10.3有冷凝集素的患者需紧急输血时，可先采用37℃预温交叉配
血技术来解决无临床意义的冷抗体引起的交叉配血不配合。
10.4对温型AIHA患者在贫血状态未危急生命的情况下应尽量避免输血。
10.5对重型地中海贫血等需要长期输血治疗者，每次输血应选择Rh系统D、C、E、c、e相同,尽可能Kidd（Jk a,Fyb）系统和Duffy （Fy a,Fyb）系统抗原相同的献血者红细胞，以尽量减少同种免疫性抗体产生的几率。