食品冷链品控专业《实验三十七、饼干中糖精钠的测定》
食品甜味剂糖精钠的检测方法探究
食品甜味剂糖精钠的检测方法探究摘要在食品的生产加工过程中，食品添加剂会经常被有意识的使用，常用的甜味剂主要有糖精钠、环已基氨基磺酯钠（甜蜜素）、天门冬酰氨酸甲酯（甜味素）等。
本文就糖精钠的高效液相色谱法、薄层色谱法检测法进行了详细的阐述。
关键词食品添加剂；检测方法；探究中图分类号ts2 文献标识码a 文章编号 1674-6708（2011）40-0115-02食品添加剂是为了改善食品品质和色、香、味以及为满足防腐和加工工艺的需要而加入食品中的化学合成物或者天然物质，是为增强营养成分而加入食品中的天然或人工合成的属于天然营养范围的食品添加剂。
甜味剂是赋予食品甜味的添加剂，可分为天然甜味剂和人工合成甜味剂。
我国批准并广泛使用的主要有糖精钠、环已基氨基磺酯钠（甜蜜素）、天门冬酰氨酸甲酯（甜味素）等。
1 高效液相色谱法1.1 原理样品加温除去二氧化碳和乙醇，调ph至近中性，过滤后进高效液相色谱仪经反相色谱分离后，根据保留时间和峰面积进行定性和定量分析。
1.2 试剂1）甲醇：经滤膜（0.5μm）过滤；2）氨水（１＋１）：氨水加等体积的水混合；3）乙酸铵溶液（0.02mol/l)：称取1.54g乙酸，加水至1000ml 溶解，经滤膜（0.45μm）过滤；4）糖精钠标准储备溶液（1.0mg/ml）：准确称取0.0851g经120℃烘干４小时后的糖精钠，加水溶解定容至1 000ml；5）糖精钠标准使用溶液（0.1mg/ml）：吸取糖精钠标准储备液10.0ml放入100ml容量瓶中，加水至刻度，经滤膜（0.45μm）过滤。
1.3 仪器高效液相色谱仪，紫外检测器。
1.4 分析步骤1）样品处理（1）汽水称取5.00g~10.00g样品，放入小烧杯中，微温搅拌除去二氧化碳，用氨水（1+1）调ph约为７。
加水定容至适当体积，经滤膜（0.45μm）过滤。
（2）果汁类称取5.00g~10.00g样品，放入小烧杯中，用氨水（1+1）调ph 约为７。
糖精钠的检测共9页文档
苯甲酸、山梨酸、糖精钠是衡量食品卫生质量的重要指标，苯甲酸、山梨酸的检测参照GB /T5009.29-2019，糖精钠的检测参照GB/T 5009.28-2019，即可开展实验。
苯甲酸、山梨酸、糖精钠虽是较常见的检测项目，但是要得到一个准确可靠的结果，也存在一定的难度，许多新手常出现因对方法理解发生偏差而检测出错的事故。
笔者根据自己多年该方面工作的实际经验出发，以苯甲酸、山梨酸为着重点，从样品前处理、检测仪器的选择、超标时的判断等几个易出问题的方面，进行了详细的阐述。
2 样品前处理的注意事项GB/T5009.28-2019和GB/T5009.29-2019 在文字结构上有缺陷，在涉及用仪器法测定苯甲酸、山梨酸、糖精钠时，只讲述了液体样品的前处理方法，没有涉及对固体样品的前处理。
食品样品往往含有大量的油脂、蛋白质，对提取极为不利；如处理不干净也会污染色谱柱，影响检测工作。
这类样品处理的关键在于如何找到一种较理想的沉淀剂，尽量排除待测样品中的油脂、蛋白质，且不影响待测物组分的回收率。
GB/T5009.29-2019使用5％硫酸铜溶液沉淀蛋白，对于蛋白质含量较低的食品尚可，对于豆粉、奶粉、月饼等高油脂、高蛋白样品则沉淀效果不理想。
如用10％钨酸钠溶液作为沉淀剂，效果好些；如用10％亚铁氰化钾溶液和20％醋酸锌溶液则效果更理想（这是笔者目前用过最理想的沉淀剂）。
具体操作步骤如下：取一定量样品，捣碎，利用四分法原理称取样品5.0 克于50ml比色管中，加水20ml，浸泡、振荡均匀，加入氢氧化钠溶液(1mol/L)1.0 ml，加入9.5mL10%亚铁氰化钾溶液，9.5 0mL 20%乙酸锌溶液，定容，振荡使其充分混匀后,用滤纸初滤除去沉淀物, 初滤液过0.45μm微孔滤膜,收集滤液于样品瓶中，样品处理液和标准有溶液各进样5uL测定。
用这种方法简单易行，接触有机试剂少，重复性和回收率都令人满意；缺点是一定要用液相色谱法检测，有一定局限。
糖精钠的测定
实验七、甜味剂--糖精钠的测定－薄层色谱法GB/T 5009.28-2003糖精及其钠盐是使用较广的甜味剂之一，它的化学名是邻磺酰苯亚胺（O-sulfobenzolc acidimide）,分子式为C7H5SO3N,白色结晶或粉状，无臭或微有酸性芳香气，在水中溶解度极小，味极甜。
糖精钠进入人体后不分解，不供给热能，无营养价值，随尿排除体外。
我国《食品添加剂使用卫生标准》规定，糖精钠用于饮料、酱菜类、复合调味料、蜜饯、雪糕、配制酒、冰棒、糕点、饼干、面包等食品，最大使用量(以糖精计)为0.15g／kg；高糖果汁(果味)饮料按稀释倍数的80 %加入，瓜子的最大使用量为1.2g／kg；话梅、陈皮等的最大使用量为5.0g／kg。
测定糖精的方法较多，有薄层色谱法、纳氏比色法、硫代二苯胺比色法及紫外分光光度法等。
一、紫外分光光度法1. 原理样品经处理后，在酸性条件下用乙醚提取食品中的糖精钠，经薄层分离后，溶于碳酸氢钠溶液中，于波长270nm处测定吸光度，与标准液比较定量。
2. 试剂与仪器(1) 2 %碳酸氢钠溶液(2) 4 %氢氧化钠溶液(3) 6 mol/L HCl溶液(4) 乙醚（不含过氧化物）(5) 10 %硫酸铜(6) 无水硫酸钠(7) 0.02 mol/L氢氧化钠(8) 硅胶GF254(9) 聚酰胺，200目(10) 糖精钠标准溶液：准确称取0.0851 g经120 ℃干燥4 h后的糖精钠，加乙醇溶解，移入100 mL容量瓶中，加乙醇（95 %）稀释至刻度，此溶液每毫升相当于1 mg糖精钠（C6H4CONNaSO2.2H2O）。
(11) 展开剂：苯-乙酸乙酯-乙酸（12:7:3），硅胶薄层用。
(12) 展开剂：正丁醇-浓氨水-无水乙醇（7:1:2），聚酰胺薄层用(13) 显色剂：0.04%溴甲酚紫的50%乙醇溶液，用0.1mol/L氢氧化钠溶液调至PH值为8(14) 紫外光灯(波长253.7nm),紫外分光光度计(15) 薄层板10×20cm；展开槽(16) 微量注射器3.测定方法(1)样品提取1)饮料、冰棍、汽水类：取10 ml均样置100 ml分液漏斗中，加2 ml 6mol/L盐酸，用30、20、20 ml乙醚提取三次。
食品中糖精钠的测定方法
食品中糖精钠的测定方法1主题内容与适用范围本标准规定了食品中糖精钠的测定方法。
本标准适用于食品中糖精钠的测定。
最低检出量：高效液相色谱法取样量为10g，进样量为IOUL时，最低检出量为1.5ng0第一篇高效液相色谱法（第一法）2原理样品加温除去二氧化碳和乙醇，调PH至近中性，过滤后进高效液相色谱仪，经反相色谱分离后，根据保留时间和峰面积进行定性和定量。
取样量为10g,进样量为IOUL时最低检出量为1.5ng0 3试剂3.1 甲醇：经滤膜（0.5μm）过滤。
3.2 氨水（1+1）：氨水加等体积水混合。
3.3 乙酸铉溶液（0.02mol∕L）：称取L54g乙酸铁，加水至IoOOmL溶解，经滤膜（0.45Pm）过滤。
3.4 糖精钠标准储备溶液：准确称取0.0851g经120C烘干4h后的糖精钠（C6H4C0NNaS02∙2H20）,加水溶解定容至100.OmL0糖精钠含量LonIg∕mL,作为储备溶液。
3.5 糖精钠标准使用溶液：吸取糖精钠标准储备液10.OnlL放入IOOmL容量瓶中，加水至刻度。
经滤膜（0.45μm）过滤。
该溶液每亳升相当于0.1Omg的糖精钠。
4仪器高效液相色谱仪，紫外检测器。
5分析步骤5.1 样品处理5.1.1 汽水：称取5.00〜10.00g,放入小烧杯中，微温搅拌除去二氧化碳，用氨水（1+1）调PH约7。
加水定容至适当的体积，经滤膜（0.45μm）过滤。
5.1.2 果汁类：称取5.00〜10.00g,用氨水（1+1）调PH约7,加水定容至适当的体积，离心沉淀，上清液经滤膜（0.45μm）过滤。
5.1.3 配制酒类：称取10.0g,放小烧杯中，水浴加热除去乙醇，用氨水（1+1）调PH约7,加水定容至20ml,经滤膜（0.45μm）过滤。
5.2 高效液相色谱参考条件5. 2.1色谱柱：YwG-CI84.6mmX250mml0um不锈钢柱。
6. 2.2流动相：甲醇：乙酸铉溶液（0.02mol∕L）（5+95）°7. 2.3流速：lmL∕minβ5. 2.4检测器：紫外检测器，波长230nm,灵敏度0.2AUFS。
食品中糖精钠测定方法的研究
食品中糖精钠测定方法的研究文章建立了两种食品中糖精钠的测定方法，研究了食品中糖精钠的荧光分光光度测定方法，最后对这两种方法的准确度进行了比较。
标签：糖精钠；荧光光度法；亚甲基蓝糖精钠，是最古老的甜味剂。
在各种食品生产过程中都很稳定[1]。
但糖精的安全性一直存在争议。
1977年，加拿大的一项多代大鼠喂养实验发现，大量的糖精可导致雄性大鼠膀胱癌。
但是糖精至今在我国和许多国家仍广泛用作食品和药物制剂中的人工非营养甜味添加剂，为了避免过量使用，许多国家已先后设置了容许限量。
因此研究其可靠、方便的检测方法，对于打击假冒、伪劣食品和药品，保护消费者的权益和健康，为食品、药品生产厂家和各级产品质量监督机构等部门提供科学、可靠、方便的检测方法，具有广泛的实际意义。
糖精钠的测定方法有多种，本次研究中主要研究了荧光分光光度法和次甲基蓝法，并对其各自的回收率，精密度及某些影响因素进行了测定，并对这两种方法的精密度进行了比较。
1 材料1.1 荧光光度法测定饮料中糖精钠含量1.1.1 仪器及试剂仪器：荧光分光光度计主要试剂：糖精钠标准溶液、0.03mol/L碳酸钠溶液其他试剂如无水乙醚、盐酸、磷酸、氯化钠等均为分析纯。
1.2 次甲基蓝分光光度法1.2.1 仪器及工作条件723-分光光度计1.2.2 主要试剂糖精钠标准溶液、次甲基蓝溶液：4×10-3mol/L、硫酸溶液：0.2mol/L、氯仿。
以上试剂均为分析纯，试验用水为蒸馏水。
2 结果与分析2.1 荧光光度法2.1.1 荧光配合物的激发与发射波长的选择和确定荧光光度法是基于糖精钠能碳酸钠形成荧光配合物而设计的[2]。
启动荧光分光光度计，对糖精（钠）与碳酸钠所形成的荧光配合物进行激发与发射光谱扫描，其结果是：激发波长为251nm，发射波长为500.8nm；起始波长分别为250～300nm和300～500nm。
2.1.2 标准曲线的绘制从50μg/mL的荧光配合物溶液中分别移取0.1，0.2，0.5，1.0，2.0，4.0，6.0，8.0mL于10mL容量瓶中，依次测定其荧光强度，绘制标准曲线其结果见图1。
食品中糖精钠含量快速分析方法的探讨
食品中糖精钠含量快速分析方法的探讨近年来随着人们生活水平日益提高，对于食品安全性也越来越重视。
各种食品添加剂被广泛使用，特别是人工合成的添加剂越来越受到人们的关注，食品添加剂中的糖精钠作为甜味剂是用来增强食品的感官性状。
适当使用是允许的，但要求使用量应控制在最低有效量的水平，否则会给食品带来毒性，影响食品安全，危害人体健康。
糖精（2-benziso thiazol-3(2H)-one-1,1-dioxide）为白色粉末，化学名称为邻苯甲酰磺酸亚胺，其钠盐称做糖精钠或可溶性糖精，易溶于水，稀水溶液的甜味约为蔗糖的400-500倍，无营养价值。
目前，国内研究报告报道的我国食品中糖精钠检验方法的主要技术路线是高效液相色谱法、气相色谱法、薄层层析法，目前已有的高效液相色谱特异性较强，仪器多不普及加之分析方法繁琐、费时并耗用大量有机溶剂，使其应用受到限制。
所以在实际工作中我们引进应用次甲基蓝快速测定糖精钠地方法，该法的试剂、操作方法和实验条件简便，可以广泛用于基层在食品中的糖精钠的测定，而且操作简单、快速、灵敏度高。
1 材料与方法1.1 原理糖精钠在酸性缓冲溶液中可与次甲基蓝生成蓝色缔合物,被有机溶剂萃取进行定量测定。
1.2 仪器和试剂分光光度计;60ml 分液漏斗;磷酸氢二钠—柠檬酸缓冲溶液;0.01%次甲基蓝溶液;糖精钠标准溶液:准确称取1.0000g干燥纯糖精钠,溶解后加水至100ml ,临用时稀释成使用液;分析纯氯仿。
1.3 检测方法根据检样适当取量5～10ml（测定前除去二氧化碳、酒精等气体）于60ml分液漏斗中;②另取标准使用液溶液0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0ml入分液漏斗中各加水至10ml;③于样品和标准系列中各加入缓冲溶液5ml 摇匀,加次甲基蓝溶液2ml摇匀,再各加氯仿10ml 振摇萃取,静止分层,氯仿层通过0.5g无水硫酸钠脱水,于722型分光光度计650nm波长,2cm比色皿,以零管调节零点,测定标准和样品的吸光度。
食品中糖精钠的测定
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五、所用仪器和试剂
1、试剂 乙醚：不含过氧化物。 无水硫酸钠。 无水乙醇及乙醇（95%）。 聚酰胺粉：过200目筛。 盐酸（1+1）：取100mL盐酸，加 水稀释至200mL。
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展开剂：正丁醇-氨水-无水乙醇
（7+1+2）；异丙醇-氨水-无水乙醇 （7+1+2）。 显色剂：溴甲酚紫溶（0.4g/L）。
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醚提取液，用5mL盐酸酸化的 水洗涤一次，弃去水层。乙 醚层通过 无水硫酸钠脱水后，挥发乙 醚，加2.0mL乙醇溶解残留 物，密塞保 存，备用。
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2、薄层板的制备 聚酰胺粉板：称取3.2g聚酰胺粉， 加0.8g可溶性淀粉，加约12mL 水， 研磨3min～5min，立即涂成0.25～ 0.30mm 厚10cm×20cm的薄层板，室 温干燥后，在80℃下干燥1h。置于 干燥器中保存。 硅胶板：称取3.2g硅胶J，加 0.8gCMC，加约12mL 水，研磨 3min～5min，立即涂成0.25～ 0.30mm 厚10cm×20cm的薄层板，室 温干燥后，在80℃下干燥1h。置于 干燥器中保存。
食品中糖精钠 的测定
一、实验目的与意义
糖精钠俗称糖精，是广泛使用 的一种人工甜味剂常用食品如酱菜、 冰淇淋、蜜饯、糕点、饼干、面包 等，均可以糖精钠作甜味剂来提高 其甜度。糖精钠的定量分析方法有 高效液相色谱法、薄层色谱法、离 子选择电极法及紫外分光光度法等。 目前使用较多的是高效液相色谱法。 本次实验所使用的方法是薄层色谱 法。
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二、实验原理
在酸性条件下，食品中的糖 精钠用乙醚提取、浓缩、薄层色 谱分离、显色后，与标准比较， 进行定性和半定量测定。
液相色谱法测定食品中的糖精钠、安赛蜜、苯甲酸、山梨酸
食 品 很 容 易 因 为 温 湿 度、 环 境 等 出现变质，给企业带来巨大经济损失， 也会制约食品行业发展。防腐剂的添 加很好地延长了食品的保质期，因此 被广泛添加到食品中。目前常添加的 有苯甲酸及其钠盐、山梨酸及其钾盐、 丙酸及其盐、脱氢乙酸等。甜味剂能 够改善口感进而增加食欲，常用的甜 味剂有糖精钠、安赛蜜、阿斯巴甜、 纽甜与阿力甜等 [1]。近些年的研究表 明食品添加剂超量使用也会危害人体 健康，食品安全国家标准对防腐剂和 甜味剂的添加量作出明确规定，以保 证食品安全 [2]。本文采用液相色谱法 同时测定食品中所添加的苯甲酸及其 钠盐、山梨酸及其钾盐、糖精钠和安 赛蜜。 1 试验部分 1.1 仪器与试剂
件为：甲醇 + 乙酸铵溶液 =8+92。
次， 结 果 表 明 样 品 的 平 均 回 收 率 在
2.2 标准曲线的建立与分析
78.3% ～ 117.4%， 相 对 标 准 偏 差
准确称取标准品（精确到 0.000 1 g）， （RSD）在 1.6% ～ 4.1%。
0.60
自动标尺色谱图
AU 安赛蜜-10.680 苯甲酸-12.412
管中，加入 25 mL 水涡旋振荡，加入 以空白样品为基质制备基质空白标准
2 mL 10.6% 的 亚 铁 氰 化 钾 溶 液 涡 旋 溶液，用空白标准基质配制成梯度为 1、
20 s 混匀，再加入 2 mL 22% 的乙酸 5、10、25、50、100 mg/L 与 200 mg/L
锌溶液涡旋 1 min 后定容至刻度线， 的 混 合 系 列 标 准 工 作 液 , 使 用 前 配
0 -1×106
校正曲线图
0.00 0.02 0.04 0.06 0.08 0.10 0.12 0.14 0.16 0.18 0.20 含量
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实验三十七、饼干中糖精钠的测定〔高效液相色谱法〕
一、原理
试样加温除去二氧化碳和乙醇，调滤膜过滤。
氨水〔11〕：浓氨水加等体积水混合。
乙酸铵溶液〔L〕：称取乙酸铵，加水至1000mL溶解，经μm 滤膜过滤。
糖精钠标准储藏溶液：准确称取经12021干4h后的糖精钠〔C6H4CONNaSO2·2H2O〕，加水溶解定容至100mL。
糖精钠含量mL，作为储藏溶液。
糖精钠标准使用溶液：吸取糖精钠标准储藏溶液10mL放入100mL容量瓶中，加水到刻度，经μm滤膜过滤，该溶液每毫升相当于糖精钠。
三、仪器
高效液相色谱仪，紫外检测器。
四、操作步骤
〔一〕试样处理
称取~试样，用氨水〔11〕调滤膜过滤。
〔二〕高效液相色谱参者条件
柱：YWG-C18×250mm 10μ不锈钢柱。
流动相：甲醇-乙酸铵溶液〔L〕〔595〕。
流速：1mL/min。
检测器：紫外检测器，波长230nm，。
〔三〕测定
取处理液和标准使用液各10μL 〔或相同体积〕，注入高效液相色谱仪进行别离，以其标准溶液峰的保存时间为依据进行定性，以其峰面积求出样液中被测物质的含量，供计算。
五、结果计算
试样中糖精钠含量按下式计算：
2
1A
X V m V
式中，X ——试样中糖精钠含量，g/g ；
A ——进样体积中糖精钠的质量，mg ；
V 1——试样稀释液总体积，mL ；
V 2——进样体积，mL ；
m ——试样质量，g 。
计算结果保存三位有效数字。
六、允许差
在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。