槐米中芦丁提取工艺研究
Vol.7 No.1Feb. 2021生物化工Biological Chemical Engineering第 7 卷 第 1 期2021 年 2 月
槐米中芦丁提取工艺研究
蔡前超，杜鸿章，曹智威，冯亚莉*
（郑州工业应用技术学院药学与化学工程学院，河南新郑 451100）
摘 要：目的：探究从槐米中提取芦丁的最佳工艺条件。方法：以水作提取剂，采用碱提-酸沉法从槐米中提取芦丁，以芦
丁的提取率及含量为指标，探究提取时间、提取次数、pH值等因素对芦丁提取效果的影响。结果：将槐米粉碎至粗粉，碱提取
pH值为8，提取2次，每次20 min，酸沉淀pH值为4时，提取效果最好，芦丁粗品产率为25.73%，含量为90.2%。对芦丁粗品进
行纯化，其纯化产率为69%，含量为99.6%。结论：本实验采用单因素分析法对芦丁的提取工艺进行优化，不仅收率较高，且成本低、
易操作。
关键词：槐米；芦丁；提取；工艺研究；
中图分类号：R284.1 文献标识码：A
Study on the Extraction Technology of Rutin from Sophora Japonica
CAI Qianchao, DU Hongzhang, CAO Zhiwei, FENG Yali*
(School of Pharmacy and Chemical Engineering, Zhengzhou University of Industrial Technology, Henan Xinzheng 451100)
Abstract: Objective: to explore the optimum extraction conditions of Rutin from Sophora japonica. Methods: Rutin was extracted from Sophora japonica by alkali extraction acid precipitation method with water as extraction agent. The effects of extraction time, extraction times and pH value on Rutin Extraction were investigated with the extraction rate and content of rutin as index. Results: The results showed that the optimum extraction conditions were as follows: the pH value of alkali extraction was 8, the extraction time was 20 minutes, and the pH value of acid precipitation was 4. The yield and content of rutin were 25.73% and 90.2%, respectively. The crude rutin was purified, and the purified yield was 69% and the content was 99.6%. Conclusion: In this experiment, single factor analysis was used to optimize the extraction process of rutin, which not only has high yield, but also has low cost and easy operation.Keywords: Sophora japonica; rutin; extraction; technology research
随着科学技术的发展，人们逐渐认识到从天然产
物中获取化合物并应用于防病治病效果更好[1]。芦
丁（Rutin）又称芸香苷，属于生物类黄酮，具有多种
药理活性。芦丁归类为维生素P，可增加毛细血管的
韧性，调节其渗透性，具有降血脂、细胞保护、抗痉挛
作用及预防和治疗心血管疾病[2-3]。芦丁广泛存在于
植物界中，现已发现含芦丁的植物至少在70种以上，
如烟叶、槐花米、荞麦和蒲公英等。尤以槐花米[植物国槐（Sophora japonica L）未开放的花蕾]和荞麦
中含量最高，可作为大量提取芦丁的原料。本文对
槐米中提取芦丁的技术上进行新的探索，不断改善
优化，从而找到一种低成本、高效率、高含量的提取
工艺。
1 材料与方法
1.1 试验材料
槐米，采摘于河南省新郑市。硼砂，分析纯，天
作者简介：蔡前超（1999—），男，河南信阳人，本科在读，研究方向：药物制备与测定。通信作者：冯亚莉（1987—），女，河南新郑人，硕士，讲师，研究方向：天然产物有效成分提取、结构优化研究及教学。E-mail：
*****************。文章编号：2096-0387（2021）01-0093-03·94·生物化工2021年
津市风船化学试剂科技有限公司；氢氧化钙、盐酸，
分析纯，郑州派尼化学试剂厂。
1.2 试验仪器
FW177中药粉碎机，天津市赛斯特仪器有限公
司；SHSL调温电热套、FX202-2数显电热恒温干燥
箱，上海树立仪器仪表有限公司；SHZ-D循环水式
多用真空泵,天津华鑫仪器厂。
1.3 芦丁提取方法
称取槐米粗粉30 g于1 000 mL圆底烧瓶中，加
入已煮沸的0.4%硼砂水溶液200 mL，搅拌下加入饱
和石灰水调pH至8~9，加热冷凝回流，保持微沸提
取一段时间，趁热用四层纱布过滤，滤渣用同样的方
法再进行一次回流；合并两次滤液，在60~70 ℃搅拌
下加入浓盐酸调pH至3~4，逐渐析出沉淀，静置24 h
使沉淀完全，抽滤，将滤渣用适量蒸馏水洗涤2~3次，
抽干后放入60 ℃烘箱内干燥得芦丁粗品。
1.4 芦丁提取工艺优化
为了提高制得的芦丁粗品的产率，分别探究提取
时间10 min、20 min、30 min、40 min和50 min、提
取次数1次、2次、3次、4次、碱提取pH值6、7、8、
9、10及酸沉淀pH值1、2、3、4、5对提取效果的
影响，进而得出最佳的工艺路线。
1.5 芦丁粗品纯化方法
1.5.1 纯化方法
重结晶法是利用芦丁在冷、热溶剂中的溶解度不
同进行纯化的一种方法。通常芦丁在热溶剂中的溶
解度大于在冷溶剂中的溶解度[4]。
取芦丁粗品3 g置于烧杯中，加入适量溶剂，加
热煮沸约15 min，使之全部溶解，趁热抽滤，滤液静
置冷却、析出结晶，抽滤，放入60 ℃烘箱干燥得精制
芦丁。
1.5.2 纯化工艺优化
为提高芦丁纯化产率，分别探究不同溶剂（蒸馏
水、乙醇）以及溶剂用量对纯化产率的影响。溶剂用
量是根据芦丁在所选溶剂中完全溶解所需要的量而
定，即在热水中的溶解度为1∶200，在热乙醇中的
溶解度为1∶30。2 结果与分析
2.1 芦丁提取工艺优化结果
2.1.1 提取时间对提取效果的影响
如表1所示，提取时间从10 min增加到20 min，
提取产率和含量都得到了提高，但20 min后提取产
率和含量都降低，这可能是因为提取时间过长导致芦
丁被氧化，提取时间越长，被氧化的芦丁越多，产率
越低。因此，提取时间应控制在20 min为宜。
表1 提取时间对提取效果的影响提取时间/min提取产率/%样品百分含量/%1024.8756.82025.0385.53024.8078.44024.5369.95022.6039.5
2.1.2 提取次数对提取效果的影响
在其他实验条件不变的情况下通过改变提取次
数进行试验。如表2所示，随着提取次数的增加，提
取率虽有所提高，但从第二次以后增长趋势相对于前
两次已经不明显，且从第二次之后样品百分含量逐渐
降低，从能耗、时间和产率等综合因素考虑，提取两
次即可。
表2 提取次数对提取效果的影响提取次数提取产率/%样品百分含量/%121.8381.6224.4787.8324.9086.8425.6379.4
2.1.3 碱提取pH值对提取效果的影响
在其他实验条件不变的情况下通过改变碱提取
pH值进行试验。如表3所示，当pH为8时，提取产
率和含量都达到最大，提取效果最好。这是因为芦丁
分子中含有较多酚羟基，显酸性，能溶于碱性溶液，
在碱性条件下更有利于芦丁的提取，而碱性过强则会
导致芦丁分子的黄酮母核遭到破坏，致使芦丁提取率
和含量降低，因此碱提取的最佳pH值为8。此外，实
验中加入已煮沸的0.4%硼砂水溶液，一方面是因为
硼砂能与芦丁中的邻二酚羟基结合，保护其不被氧化
破坏，另一方面是因为硼砂在热水中的溶解度更大。第1期·95·蔡前超等：槐米中芦丁提取工艺研究
实验中用饱和石灰水调pH既能达到碱溶解提取芦丁
的目的，还可以除去槐米中含有的大量多糖粘液质。
表3 提取时间对提取效果的影响碱提取pH值提取产率/%样品百分含量/%624.2784.9724.6790.0825.2391.5924.9091.81019.5791.9
2.1.4 酸沉淀pH值对提取效果的影响
在其他实验条件不变的情况下通过改变酸沉淀
pH值进行试验。如表4所示，当pH小于4时，随着
pH的增加，提取产率和含量都逐渐升高，这可能是由
于酸性太大会导致芦丁形成盐而增加了水溶性，导致
提取产率和含量低；当pH大于4时，提取产率和含
量开始下降；这可能是由于酸性太小不能使芦丁完全
析出；因此酸沉淀pH为4时沉淀析出效果最佳，提
取效果最好。
表4 酸沉淀pH值对提取效果的影响酸沉淀pH值提取产率/%样品百分含量/%117.2781.6223.7381.8325.6386.1425.7390.2523.7386.2
2.2 芦丁粗品的纯化
2.2.1 溶剂种类对纯化效果的影响
如表5所示，在完全溶解条件下，乙醇重结晶所
得的纯化产率比相同条件下水重结晶所得的纯化产
率高，但含量没有水重结晶的含量高，且乙醇重结晶
时很难冷却析出，必须使乙醇挥发完全才能得到精制
芦丁，时间相对较长。
表5 溶剂种类对纯化效果的影响溶剂种类溶剂用量/mL纯化产率/%样品百分含量/%蒸馏水60069.0099.5乙醇9078.3396.3注：溶剂用量是根据芦丁在该溶剂中完全溶解所需要的量而定，即溶解1 g的芦丁需要热水200 mL或热乙醇30 mL。3.2.2 溶剂用量对纯化效果的影响
如表6所示，以芦丁在热水中的溶解度为标准的
加水量所得的纯化产率比适当减少加水量所得的纯
化产率低，这可能是由于溶液体积较大，使得趁热抽
滤的时间相对延长，溶液温度降低，芦丁提早析出导
致纯化产率降低，但以溶解度为准的加水量纯化所得
的芦丁含量更高。
表6 溶剂用量对纯化效果的影响溶剂种类溶剂用量/mL纯化产率/%样品百分含量/%蒸馏水40075.0088.0蒸馏水60069.0099.6
3 结论
槐米中芦丁的最佳提取工艺条件：将槐米粉碎成
粗粉，加入约7倍量的煮沸的0.4%硼砂水溶液，加饱
和石灰水调pH至8，提取2次，在60~70 ℃下调pH
至4，静置24 h后抽滤、干燥得芦丁粗品，粗提产率
为25.73%，含量为90.2%；粗提物纯化产率为69%，
槐米中芦丁的提取
OHOOHOOOHOHOHOOHCH2HOOOHOHHOOH3C 槐米中芦丁的提取、提纯和鉴定
一、实验目的
1．掌握芦丁提取和提纯的基本原理和方法。
2．掌握重结晶及过滤等基本操作。
3．学习芦丁及槲（hū）皮素的鉴定方法。
二、实验原理
芦丁（Rutin）亦称芸香苷，广泛存在于植物组织中，其中以槐花米和荞麦叶含量较高，槐米中含量高达12~16％，是提取芦丁的最佳原料。芦丁有减少毛细血管通透性的作用，临床上用作毛细血管止血药和高血压病的辅助治疗药物。近年来，芦丁及槲皮素作为抗癌药物的研究，取得了大量成果。芦丁属黄酮苷，其结构如下：
芦丁为淡黄色针状结晶，含有三分子结晶水（C27H36O16· 3 H2O）， 熔点为177～178 ℃，无水物熔点为190~192 ℃，难溶于冷水，微溶于冷乙醇，可溶于热水和热乙醇中。此外，还难溶于乙酸乙酯、丙酮，不溶于苯、氯仿、乙醚及石油醚等溶剂。易溶于碱性溶液中呈黄色，酸化后又析出。本实验利用芦丁在冷热水和冷热乙醇中溶解度的差异进行提取与精制。
芦丁在不同溶剂中的溶液度：
水 CH3OH CH3CH2OH 吡啶
冷 0.0013 l.0 0.36 8.5
热 0.55 11.2 3.5 易溶
芦丁的紫外吸收波长（CH3OH溶液）：λmax = 259mm，266nm sh，299nm sh，359nm。
槲皮素（Quercetin）是芦丁水解得到的黄酮苷元，是芦丁药用功能的主要部分，大多数黄酮类物质都具有较高的药用价值。
槲皮素为黄色结晶，含两分子结晶水（C15H10O7·2 H2O），熔点313~314 ℃，无水物熔点为316 ℃。可溶于甲醇、乙酸、吡啶、丙酮、乙酸乙酯等溶剂，不溶于水、乙醚、苯、氯仿、石油醚。在沸腾的无水乙醇中溶解度为4.4 ，在室温下乙醇中的溶解度为0.35 。可利用槲皮素在冷热乙醇中的溶解度差进行提纯。槲皮素的结构式如下：
槐米中芦丁的提取 2
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槐米中芦丁的提取
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一、实验目的
1．掌握芦丁提取和提纯的基本原理和方法。
2．掌握重结晶及过滤等基本操作。
3．学习芦丁及槲（hū）皮素的鉴定方法。
二、实验原理
芦丁（Rutin）亦称芸香苷，广泛存在于植物组织中，其中以槐花米和荞麦叶含量较高，槐米中含量高达12~16％，是提取芦丁的最佳原料。芦丁有减少毛细血管通透性的作用，临床上用作毛细血管止血药和高血压病的辅助治疗药物。近年来，芦丁及槲皮素作为抗癌药物的研究，取得了大量成果。芦丁属黄酮苷，其结构如下：
芦丁为淡黄色针状结晶，含有三分子结晶水（C27H36O16· 3 H2O）， 熔点为177～178 ℃，无水物熔点为190~192 ℃，难溶于冷水，微溶于冷乙醇，可溶于热水和热乙醇中。此外，还难溶于乙酸乙酯、丙酮，不溶于苯、氯仿、乙醚及石油醚等溶剂。易溶于碱性溶液中呈黄色，酸化后又析出。本实验利用芦丁在冷热水和冷热乙醇中溶解度的差异进行提取与精制。
芦丁在不同溶剂中的溶液度：
芦丁的紫外吸收波长（CH3OH溶液）：λmax = 259mm，266nm sh，299nm
sh，359nm。
槲皮素（Quercetin）是芦丁水解得到的黄酮苷元，是芦丁药用功能的主要部分，大多数黄酮类物质都具有较高的药用价值。
槲皮素为黄色结晶，含两分子结晶水（C15H10O7·2 H2O），熔点313~314 ℃，无水物熔点为316 ℃。可溶于甲醇、乙酸、吡啶、丙酮、乙酸乙酯等溶剂，不溶于水、乙醚、苯、氯仿、石油醚。在沸腾的无水乙醇中溶解度为4.4 ，在室温下乙醇中的溶解度为0.35 。可利用槲皮素在冷热乙醇中的溶解度差进行提纯。槲皮素的结构式如下： 槲皮素的紫外吸收波长（CH3OH溶液）：λmax = 259nm，266nm，299nm ，359nm。
槐米中芦丁的提取及含量测定
题 目: 槐米中芦丁的提取及含量测定
1
目录
摘要 ................................................................... 3
关键词 ................................................................. 3
前言 ................................................................... 3
1 槐米的简介 ........................................................... 3
2 芦丁的简介 ........................................................... 4
1 实验材料、仪器与试剂 ................................................. 5
1.1 实验材料 ......................................................... 5
1.1 实验仪器 ......................................................... 5
1.2 实验试剂 ......................................................... 5
2 实验原理及实验条件 ................................................... 5
2.1 实验相关原理 ..................................................... 5
2.2 实验条件的选择 ................................................... 7
槐花中芦丁的提取工艺研究
时珍国医国药２００８年第１ ９卷第４期ＬＩＳＨＩＺＨＥＮ ＭＥＤＩＣＩＮＥ ＡＮＤ ＭＡＴＥＲＩＡ ＭＥＤＩＣＡ ＲＥＳＥＡＲＣＨ ２００８ ＶＯＬ．１９ ＮＯ．４
槐花中芦丁的提取工艺研究
雷泞菲，桑世华，彭书明，宋雷霆
（成都理工大学材料与化学化工学院，四川成都６１００５９）
摘要：目的探讨槐花中黄酮类化合物芦丁的提取工艺和槐花的炮制储存对槐花中芦丁的影响。方法考察单因素水平
基础上进行正交设计提取槐花中芦丁；比较分析不同地点槐花、市售储藏槐花与槐花炭中芦丁的含量。结果槐花中芦
丁提取最佳工艺条件是：Ａ Ｂ Ｃ３，即２倍量６０％乙醇回流３次，２ ｈ／次。比较不同生长地点槐花与槐花炭中芦丁含量表
明，光照好的东风渠边槐花中芦丁含量最高（１３．２４％），新鲜槐花中芦丁含量普遍比市售储藏槐花高，烘干品比阴干品中
高，炮制后的槐花炭中含量最低（２．３４％）。结论槐花采摘后应立即高温１１０℃杀青有利于芦丁的保护，储藏期间尽量通
风干燥。栽培种植宜选择阳光好的空旷地。该实验结果为进一步开发和利用槐花提供了理论依据。
关键词：槐花； 芦丁； 醇回流法； 正交实验； 储藏栽培
中图分类号：Ｉ：｛２８４．２ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００８－０８０５（２００８）０４－０８６０－０２
Ｓｔｕｄｙ ｏｎ ｔｈｅ Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ｏｆ Ｒｕｔｉｎ ｆｒｏｍ Ｓｏｐｈｏｒａ ｊａｐｏｎｉｃａ．Ｌ
ＬＥＩ Ｎｉｎｇ—ｆｅｉ，ＳＡＮＧ Ｓｈｉ—ｈｕａ，ＰＥＮＧ Ｓｈｕ－ｍｉｎｇ，ＳＯＮＧ Ｌｅｉ—ｔｉｎｇ
（Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｍａｔｅｒｉａｌｓ ａｎｄ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ＆Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，Ｃｈｅｎｇｄｕ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｃｈｅｎｇｄｕ
６１００５９，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ ｔｈｅ ｂｅｓｔ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ｏｆ ｒｕｔｉｎ ａｎｄ ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ ｓｔｏｒａｇｅ．Ｍｅｔｈｏｄｓ Ａ ｓｉｎｇｌｅ ｆａｃｔｏｒ ａｎｄ ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ ｄｅｓｉｇｎ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ ｗａｓ ｐｅｒｆｏｒｍｅｄ ｔｏ ａｎａｌｙｚｅ ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ ｒｕｔｉｎ ｆｒｏｍ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｌｏｃａｔｉｏｎｓ，ｃｏｍｍｅｒｃｉａｌ ｓｔｏｒａｇｅ ａｎｄ ｐａｇｏ— ｄａｔｒｅｅ ｆｌｏｗｅｒ ｃａｒｂｏｎ．Ｒｅｓｕｌｔｓ Ｔｈｅ ｏｐｔｉｍａｌ ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ ｗａｓ Ａ２ Ｃ２ Ｂ３，ｔｈａｔ ｉｓ，ｔｗｉｃｅ ｖｏｌｕｍｅ ｏｆ ６０％ａｌｃｏｈｏｌ ａｎｄ ｒｅｆｌｕｘｉｎｇ ｔｈｒｅｅ ｔｉｍｅｓ，ｔｗｏ ｈｏｕｒｓ ｏｎｃｅ．Ｃｏｍｐａｒｉｎｇ ｗｉｔｈ ｄｉｆｉｅｒｅｎｔ ｓｉｔｅｓ，ｓｔｏｒａｇｅｄ ａｎｄ ｐａｇｏｄａｔｒｅｅ ｆｌｏｗｅｒ ｃｈａｒｃｏａｌ，ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ １３１一 ｔｉｎ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ Ｄｏｎｇｆｅｎｇ Ｒｉｖｅｒ ｗａｓ ｔｈｅ ｈｉｇｈｅｓｔ（１ ３．２４％）．Ｒｕｔｉｎ ｃｏｎｔｅｎｔ ｉｎ ｆｒｅｓｈ ｆｌｏｗｅｒ ｗａｓ ｈｉｇｈｅｒ ｔｈａｎ ｔｈａｔ ｉｎ ｃｏｍｍｅｒｃｉａｌ ｐｒｏｄ— ｕｅｔｓ，ｄｒｙｉｎｇ ｉｎ ｔｈｅ ｏｖｅｎ ｈｉｇｈｅｒ ｔｈａｎ ｉｎ ｔｈｅ ｓｈａｄｅ．Ｐａｇｏｄａｔｒｅｅ ｆｌｏｗｅｒ ｃｈａｒｃｏａｌ ｗａｓ ｔｈｅ ｌｏｗｅｓｔ（２．３４％）．Ｓｏ ｔｈｅ ｓｔｏｒａｇｅ ｏｆ Ｓｏｐｈｏｒａ ｊａｐｏｎｉｃａ Ｌ．ｓｈｏｕｌｄ ｆｉｘ ａ ｈｉｇｈ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ ｏｆ ｌ Ｉ Ｏ￣Ｃ ｉｍｍｅｄｉａｔｅｌｙ ａｆｔｅｒ ｐｉｃｋｉｎｇ ａｎｄ ｖｅｎｔｉｌａｔｉｏｎ ｄｒｙ ｓｔｏｒａｇｅ，ｐｌａｎｔｉｎｇ ｏｐｅｎ ｌａｎｄ ｏｆ
【方案】槐米 芦丁的提取
一、概述
槐花米为豆科槐属（Sophora japonica L.）植物的花蕾。具有清热、凉血、止血的功效，用于治疗便血、痔血，尿血、血淋，崩漏，赤血痢下，风热目赤，痛疽疮毒，还可用于预防中风。近年来被用作治疗高血压的辅助药物。
药理实验证明，槐花米具有调节毛细管的渗透作用，抗炎作用，解痉、抗渍疡作用，影响脂质代谢，抗菌等多种生物活性。槐花米中主要含有黄酮苷，皂苷、甾醇和鞣质等成分，其中芦丁(Rutin)含量最高，达12～16%。
本实验利用芦丁可溶于热水，不溶于冷水的性质进行提取，用聚酚胺干柱色谱法和硅胶干柱色谱法制备芦丁纯品，用化学法和光谱法鉴定其结构。
二、实验目的
1．学习黄酮类化合物的提取分离方法。
2．学习苷类化合物的一般鉴定程序。
三、实验内容
（一） 总黄酮的提取
称取槐花米15g，在乳钵中研碎，放入烧杯中，加入250ml沸水，煮沸1h，经棉花过滤；滤渣在以200ml煮沸0.5h，棉花过滤。合并两次提取液，放置，析出沉淀。倾出上清液，抽滤沉淀，得总黄酮粗品。
（二） 黄酮的分离
1．聚酰胺干柱色谱
① 装柱：采用干法装柱。取30×2.5cm的玻璃柱一根，一端用橡皮塞塞紧，装入200目色谱用聚酰胺约30g，并轻轻墩匀。
② 上样：采用干法上样。
a. 拌样：甲醇8ml溶解后，吸附在800mg聚酰胺粉上，挥去溶剂。
b. 上样：将伴好样品的聚酰胺粉加入装好聚酰胺的色谱柱内，轻轻墩匀后，加聚酰胺粉至上沿，加一片滤纸，再用纱布包裹好。
③ 展开：采用上行展开法。将装好的色谱柱倒置在500ml三角烧瓶内，用95%乙醇120ml上行展开，展开剂到达顶端后取出色谱柱。
④ 定位：采用可见光和UV法。于UV灯下观察色谱带，并结合可见光下的色谱带，划出色带Ⅰ和Ⅱ。
⑤ 切割：分别取出色带Ⅰ和色带Ⅱ。 ⑥ 洗脱：待色带Ⅰ和Ⅱ挥干溶剂后，置洗脱柱中，用甲醇洗脱，收集洗脱液，回收溶剂即得产品。
槐米中芦丁的提取及抗氧化活性研究
１６ ２０１５年８月 第３６卷第１５期 食品研究与再ｊＩＩ Ｆｏｏｄ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ａｎｄ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ 基础研究
ＤＯＩ：１０．３９６９￣．ｉｓｓｎ．１００５－６５２１．２０１５．１５．００５
槐米中芦丁的提取及抗氧化活性研究
洪军，胡晓稳，王佩。李丹丹
（河南城建学院生命科学与工程学院，河南平顶山４６７０３６）
摘要：为了进一步开发利用来自槐米中的芦丁，采用碱提酸沉法获得芦丁粗提物，并通过普鲁士蓝法、水杨酸法、 邻苯三酚法和ＡＢＴＳ法分别探讨了槐米中芦丁提取物对Ｆｅ 的还原能力，以及对・ＯＨ、０２－・和ＡＢＴＳ自由基的清除能
力。结果表明：与Ｖ 相比，槐米中芦丁提取物在质量浓度为０．２ｍｇ／ｍＬ－Ｉ．０ｍ＃ｍＬ时的还原能力和对・ＯＨ自由基的清 除能力较强；对０２－・和ＡＢＴＳ自由基的清除能力较弱。
关键词：槐米；芦丁粗提物；抗氧化活性
Ｒｕｔｉｎ Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｆｒｏｍ Ｓｏｐｈａｒａ Ｊａｐｏｎｉｃａ ａｎｄ Ｉｔ Ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ Ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ
ＨＯＮＧ Ｊｕｎ，ＨＵ Ｘｉａｏ—ｗｅｎ，ＷＡＮＧ Ｐｅｉ，ＬＩ Ｄａｎ－ｄａｎ
（Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，Ｈｅｎａｎ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｕｒｂａｎ Ｃｏｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎ，Ｐｉｎｇｄｉｎｇｓｈａｎ ４６７０３６，
Ｈｅｎａｎ，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ￣Ｔｏ ｆｕｒｔｈｅｒ ｔｈｅ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ａｎｄ ｕｔｉｌｉｚａｔｉｏｎ ｒｕｔｉｎ ｆｒｏｍ ｓｏｐｈａｒａ ｊａｐｏｎｉｃａ，ｒｕｔｉｎ ｃｒｕｄｅ ｅｘｔｒａｃｔ ｗａｓ
ｏｂｔａｉｎｅｄ ｕｓｉｎｇ ａｌｋａｌｉｎｅ ａｃｉｄ ｓｉｎｋｉｎｇ ｍｅｔｈｏｄ．Ｓｃａｖｅｎｇｉｎｇ ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ ｏｆ ｒｕｔｉｎ ｆｒｏｍ ｓｏｐｈａｒａ ｊａｐｏｎｉｃａ ｏｎ Ｆｅ¨
槐米中芦丁的提取,分离与鉴定实验报告
槐米中芦丁的提取,分离与鉴定实验报告
一、实验目的
1、通过芦丁的提取与精制掌握碱酸法提取黄酮类化合物的原理及操作。
2、通过芦丁结构的鉴定，了解苷类结构研究的一般程序和方法。
二、实验原理
芦丁:浅黄色针状结晶，mp174℃-178℃。溶解度:
1:8000;热水1:200;冷乙醇1:300;热乙醇1:30;冷甲醇1:100:热甲醇1:10.
槲皮素:黄色结晶，mp313℃-314℃，能溶解于冷乙醇，易溶于沸乙醇，可溶于甲醇、乙酸乙酯等;难溶于水，实验室以稀硫酸水解，乙醇重结晶制得。
本实验主要是利用芦丁分子中含有较多的酚羟基，显弱酸性，可溶于碱中，加酸酸化后又可析出结晶的性质，采用碱溶酸沉法提取，并用芦丁对冷、热水的溶解度相差悬殊的特性进行精制。
三、药品材料
槐米、石灰乳、盐酸、广泛PH试纸
四、实验操作
芦丁的的提取和精制
芦丁的提取:取槐米20g置500ml烧杯中，加入沸水400ml及1g硼砂，搅拌下加入石灰乳调至PH8-9,保持微沸30分钟，并随时补充蒸发掉的水分，趁热用双层纱布滤过，收集滤液，药渣再用200ml水按同样的操作再提取20分钟，合并两次滤液。浓缩至1/2体积，滤液在60℃-70℃再用盐酸调至PH4-5，静置一周，析出芦丁。
五、实验说明及注意事项
1、本实验采用碱溶液酸沉法从槐米中提取芦丁，收率稳定，且操作简便。在提取前应注意将槐米捣碎，使芦丁易于被热水溶出。槐花中含有大量粘液质，加入石灰乳使生成钙盐沉淀除去。PH应严格控制8-9，不得超过10,。因为在强碱条件下煮沸，时间稍长可促使芦丁水解破坏，使提取率明显下降。酸沉淀时PH4-5，不宜过低，否则会使芸香苷成烊盐溶于水，降低了收率。
2、提取过程中加入硼砂作用:保护芦丁分子中的邻二酚羟基不被氧化，亦保护邻二酚羟基不与钙离子络合，使芦丁不受损失。
槐花米中芦丁的提取、分离与鉴定
槐花米中芦丁的提取、分离与鉴定
槐花米中芦丁的提取与鉴定
背景知识
芦丁（Rutin）又称芸香苷，广泛存在于植物界中，现已发现含芦丁的植物至少在70种以上，如烟叶、槐花、荞麦和蒲公英中均含有。尤以槐花米（为植物Sophora japonica L 的未开放的花蕾）和荞麦中含量最高(含量可达12-16%)，可作为大量提取芦丁的原料。芦丁是由斛皮素（Quercetin）3位上的羟基与芸香糖（Rutinose）〔葡萄糖（Glucose）与鼠李糖（Rhamnose）组成的双糖〕脱水形成的苷。
芦丁为浅黄色粉末或极细的针状结晶，含有3分子的结晶水，熔点为174~178℃，无水物188~190℃。溶解度：冷水中为1:10 000；沸水中1:200；冷乙醇1:650；热乙醇1:60；冷吡啶1:12。微溶于丙酮、乙酸乙酯，不溶于苯、乙醚、氯仿、石油醚，溶于碱而呈黄色。 芦丁分子中具有较多酚羟基，显弱酸性，易溶于碱液，酸化后又可析出，因此，本实验采用碱提取酸沉淀法提取芦丁。
芦丁具有维生素P样作用。能维持血管的正常通透性，减低血管的脆性，缩短流血时间，可作为高血压病的辅助治疗剂。亦可用于防治因缺乏芦丁所致的其他出血症。
一、实验目的
通过芦丁的提取与精制掌握碱-酸法提取黄酮类化合物的原理及操作；熟悉芦丁、槲皮素的结构性质和检识方法。
二、实验要求
独立完成实验，从槐花米中提取出芦丁并进行鉴定。
三、实验原理
芦丁属黄酮类化合物，分子中有较多酚羟基，具弱酸性，易溶于热碱中，酸化后又析出，因此可以用碱溶酸沉的方法提取芦丁，又利用芦丁在冷水和热水中溶解度相差较大的特性进行重结晶精制。
四、实验材料和器皿
【器皿】
烧杯（500ml）2个，试管2个，布氏漏斗1个，玻璃棒1根，抽滤瓶1个，滴管，移液管（10ml）1根，洗耳球1个，滤纸，pH试纸，电热炉，真空抽滤机。
【材料】
槐米花30 g，饱和石灰水，0.4%硼砂水溶液，镁粉，pH试纸，浓盐酸，95%乙醇，10% α萘酚乙醇溶液，浓硫酸，蒸馏水。
实验槐米中芦丁的提取分离和鉴定
实验一 槐米中芦丁的提取、分离和鉴定
一、概述
槐米系豆科植物槐树（Sophora japonica L.）的花蕾（槐米）。具有清热、凉血、止血的功效，用于治疗便血、痔血，尿血、血淋，崩漏，赤血痢下，风热目赤，痛疽疮毒，还可用于预防中风。近年来被用作治疗高血压的辅助药物。
药理实验证明，槐花米具有调节毛细血管的渗透作用，抗炎作用，解痉、抗渍疡作用，影响脂质代谢，抗菌等多种生物活性。槐花米中主要含有黄酮苷，皂苷、甾醇和鞣质等成分，其中芦丁(Rutin)含量最高，达12～20%。
主要化学成分的结构及理化性质：
芦丁（rutin）：C27H30O16·3H2O，浅黄色针状结晶，mp174～178℃（含三分子水）；188℃（无水物）。难溶于冷水（1：8000～10000），可溶于热水（1：180～200），热甲醇（1：10），冷甲醇（1：100），热乙醇（1：60），冷乙醇（1：650）；难溶于乙醚、三氯甲烷、石油醚、乙酸乙酯、丙酮等，易溶于碱液。
槲皮素（quercetin）：C15H10O7·2H2O，黄色结晶，mp313～314℃（2分子结晶水），316℃（无水物）。能溶于冷乙醇（1：290），易溶于沸乙醇（1：23），可溶于甲醇、乙酸乙酯、冰醋酸、吡啶、丙酮等；难溶于水、苯、石油醚等溶剂。
二、实验部分
（一）实验目的
1、通过芦丁的制备，掌握黄酮类化合物提取分离的原理和操作。
2、掌握酸水解将芦丁生成槲皮素的方法。
3、掌握芦丁与槲皮素的鉴别方法，聚酰胺薄膜的操作方法，电子天平的使用方法。
（二）实验原理
1、芦丁的提取原理：芦丁中含有多个酚羟基，具有酸性，故用碱提酸沉法。
2、芦丁的分离原理：芦丁在沸水中溶解，在冷水中析出。
3、芦丁的鉴定原理：芦丁与槲皮素分别为黄酮类化合物的苷与苷元，用Molish反应可以进行鉴别，也可以利用聚酰胺的氢键吸附性质进行定性分析，Rf值也应不同。
（三）实验药材、仪器与试剂
槐米中芦丁的提取和精制实验报告
槐米中芦丁的提取和精制实验报告
实验报告：槐米中芦丁的提取和精制(2024)
一、引言
芦丁是一种天然的生物活性化合物，具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤等多种生物学活性。槐米是指槐树的种子，其中富含芦丁。本实验旨在通过提取和精制的方法，从槐米中提取出高纯度的芦丁。
二、实验方法
1.实验材料
槐米、乙醇、甲醛、无水醚、浓盐酸、浓硫酸、无水酒精、过滤纸、试管、量筒、烧杯等。
2.实验步骤
(1)槐米的提取
将槐米研磨成粉末状，并将其移至烧杯中，用无水醇提取槐米中的芦丁。取1g槐米粉末，加入适量的无水酒精，加热回流提取2小时，过滤得到槐米提取液。
(2)槐米提取液的精制
将槐米提取液中的乙醇去除，得到芦丁的浸取液。将槐米提取液加热至60℃，倒入漏斗中，再用冷水冷却至室温，反复漂洗槐米提取液，使其几乎不含乙醇。
(3)芦丁的结晶 将芦丁的浸取液用乙醇溶解，加入三倍体秤量的甲醛，静置24小时，得到芦丁结晶沉淀。收集芦丁结晶沉淀，并用无水醚进行提纯。
(4)芦丁的鉴定
将芦丁纯品与样品进行比色反应，并在紫外光下检测其吸收波长，以确定所提取的物质是否为芦丁。
三、结果分析
经过提取和精制处理，从槐米中成功提取到了芦丁。通过比色反应和紫外吸收波长检测，证实所提取的物质为芦丁。经过精制后，芦丁的纯度提高，获得了较高纯度的芦丁结晶。
四、讨论与总结
本实验成功地从槐米中提取出芦丁，并通过精制得到高纯度的芦丁结晶。提取过程中采用了无水醇作为提取剂，乙醇和甲醛用于精制过程。
然而，本实验还存在一些问题和改进的空间。首先，在提取过程中可以尝试使用其他有选择性的溶剂，以提高提取效率和纯度。其次，在提纯过程中可以进一步优化步骤和条件，提高芦丁的纯度。此外，可以采用其他分析方法验证芦丁的纯度和结构。
总之，本实验通过提取和精制的方法，成功提取到了槐米中的芦丁，并得到高纯度的芦丁结晶。这对于进一步研究芦丁的生物学活性和应用具有重要意义。