可溶性淀粉合成酶试剂盒使用说明

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糖化酶(Glucoamylase) 试剂盒说明书

糖化酶(Glucoamylase) 试剂盒说明书

货号:MS2625 规格:100管/48样糖化酶(Glucoamylase) 试剂盒说明书微量法注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

测定意义:糖化酶,即葡萄糖淀粉酶(EC3.2.1.3),又称γ-淀粉酶,是一种外切型糖苷酶,它从淀粉的非还原性末端水解α-1,4糖苷键和α-1,6糖苷键,将淀粉完全水解为葡萄糖,因此广泛的应用于酒精、白酒、抗生素、氨基酸、有机酸,甘油,淀粉糖等工业中,是我国重要的工业酶制剂之一。

测定原理:糖化酶水解可溶性淀粉生成葡萄糖,与3,5-二硝基水杨酸生成红棕色化合物,在540nm 处有最大光吸收,在一定范围内反应液颜色深浅与葡萄糖的量成正比,可测定计算得糖化酶的活力。

自备实验用品及仪器:天平、低温离心机、研钵、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、恒温水浴锅。

试剂组成和配制:提取液:液体100mL×1瓶,4℃保存。

试剂一:液体10mL×1瓶,4℃保存。

试剂二:液体10mL×1瓶,4℃避光保存。

酶液提取:1.组织:按照质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g,加入1mL提取液)加入提取液,冰浴匀浆后于4℃,10000g离心10min,取上清置于冰上待测。

2.细胞:按照细胞数量(104个):提取液体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细胞加入1mL提取液),冰浴超声波破碎细胞(功率300w,超声3秒,间隔7秒,总时间3min);然后4℃,10000g离心10min,取上清置于冰上待测。

3.培养液或其它液体:直接检测。

酶活性计算公式:标准曲线:y = 0.2164x - 0.0182,R2 = 0.9992第1页,共3页a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下1. 按照蛋白含量计算酶活性定义:在40℃,pH4.6条件下,每毫克蛋白每分钟分解可溶性淀粉产生1mg葡萄糖所需的酶量为一个酶活力单位。

MEGAZYME直链淀粉试剂盒说明书

MEGAZYME直链淀粉试剂盒说明书

前言:谷类淀粉的许多特性决定其最终用途,这些取决于直链淀粉/支链淀粉的比率。

这些特性包括糊化和凝胶化,溶解度,抗性淀粉的形成以及整颗大米的烹饪和构造特性。

因此,淀粉中直链淀粉含量的测定是淀粉加工的一个重要的质量参数。

最常用的测定谷物淀粉中直链淀粉含量的方法是利用电势,电流测定或直链淀粉的碘结合能力比色测定直链淀粉-碘色合配合物。

然而,这些方法具有不确定性。

支链淀粉-碘复合物也可以形成,这样降低了利用非比色法测定的游离碘离子的浓度,并且用比色法测量时,该复合物可能和直链淀粉-碘复合物吸收相同波长的光。

这种复合物致使直链淀粉的测定含量超过实际含量,需要进行校正。

Gibson等详细列举了使用这些方法所遇到的许多其他问题。

支链淀粉结合ConA的特殊复合物为淀粉中直链淀粉的测定提供了一种替代方法,而且不存在不确定性问题。

在指定pH值,温度和离子强度的条件下,ConA特异性结合分支多糖并形成沉淀,这种结合以多个非还原性末端基团上的α-D-吡喃葡萄糖基或α-D-吡喃甘露糖基单位为基础。

因此,ConA可以有效结合淀粉中的支链淀粉成分,但是不能结合线性为主的直链淀粉成分。

此方法是Yun和Matheson改进的ConA方法。

分析之前用乙醇预处理去除脂质。

原理:淀粉样品通过加热完全地溶解在二甲基亚砜(DMSO)里。

用乙醇沉淀淀粉去除其中的脂质,回收沉淀的淀粉。

用醋酸/盐溶液溶解沉淀的样品,加入ConA,特异性沉淀支链淀粉,离心去除沉淀。

单位体积上清液中的直链淀粉用酶水解为D-葡萄糖,然后用葡萄糖氧化酶/过氧化物酶试剂进行测定。

另外一份单位体积醋酸/盐溶液中的总淀粉同样用酶水解为D-葡萄糖,然后加入葡萄糖氧化酶/过氧化物酶,用比色法测定。

根据ConA沉淀样品的上清液和与总淀粉样品中的GOPOD在510 nm处的吸光光度值之比判断直链淀粉在总淀粉中的含量。

该方法适用于所有的纯淀粉和谷物粉。

精确性样品如为纯淀粉,相对标准偏差为<5%。

α-淀粉酶检测试剂盒(速率法)产品说明书

α-淀粉酶检测试剂盒(速率法)产品说明书

α-淀粉酶检测试剂盒(速率法)说明书[产品名称] 通用名称:α-淀粉酶检测试剂盒(速率法)英文名称:α-Amylase Aassay Kit(α-Amy)[包装规格] R:2×20ml;R:3×20ml;R:6×20ml;R:6×60ml;R:4×25ml。

[预期用途] 用于体外定量检测人血清中的α-淀粉酶的活力。

[检验原理]α-AMYGal-G2-α-CNP Gal-G2 + CNPCNP(2-氯-4-硝基苯酚)的生成在波长405nm处吸光度上升,上升的速率与α-AMY活力成正比。

[主要组成成份]由试剂R组成。

试剂R:2-氯-4-硝基苯-α-半乳糖-麦芽糖苷(Gal-G2-α-CNP)、三羟甲基氨基甲烷(Tris)缓冲液。

[储存条件及有效期] 试剂盒在2℃~8℃、无腐蚀性气体条件下避光储存,有效期为12个月,开瓶后2℃~8℃条件下保质期30天。

备注:生产日期及失效日期见外盒或瓶标签。

[适用仪器]日立7170、奥林巴斯AU640、贝克曼LX-20全自动生化分析仪。

[样本要求]使用新鲜的非溶血血清。

[检验方法](1)单试剂无需配制,直接使用。

(2)试验条件:样本(S):5 µl 试剂 (R) :250 µl 温度:37 ℃测定类型:速率法主波长:405 nm 副波长:660nm 反应方向:上升方法:先将样本与R1混合,37 ℃测定2分钟至4分钟之△A/min 。

0 2 4 10 (反应时间:10min)37℃样本:5 µlR:250 µl(3)校准程序:每天进行试剂空白测试。

(4)质量控制程序:选用适当的质控品进行质量控制。

各实验室建立各自的质控频率和可接受范围值。

当测定结果超出可接受范围时,有必要采取相应措施。

(5)计算△A / min × Vt × 1000 △A/ min × 0.255 × 1000α-AMY(U/L)= ————————————— = ———————————————— Lp ×ε× Vs 1.0 × 13.4 × 0.005= △A / min × 3806Vt:反应总体积 0.255 mlVs:样品体积 0.005 mlε:摩尔吸光系数13.41000:将 U/ml 转换成了U/LLp:比色光径(1.0 cm)[参考区间] 血清:< 220 U/L (建议各实验室建立自己的正常参考范围。

淀粉含量检测试剂盒说明书__ 微量法UPLC-MS-4133

淀粉含量检测试剂盒说明书__ 微量法UPLC-MS-4133

淀粉含量检测试剂盒说明书微量法UPLC-MS-4133100T/96S试剂名称规格保存条件试剂一液体65mL×1瓶2-8℃保存试剂二液体65mL×1瓶2-8℃保存试剂三粉剂×2瓶2-8℃保存标准品粉剂×1支2-8℃保存溶液的配制:1、标准品:临用前加入1mL 蒸馏水使其溶解,制备10mg/mL 葡萄糖标准液,2-8℃保存两周。

2、工作液的配制:临用前取1瓶试剂三加入2.625mL 蒸馏水后,缓慢加入14.875mL 浓硫酸,不断搅拌,充分溶解,待用,用不完的试剂可以2-8℃保存一周。

淀粉是植物中糖的主要储存形式,其含量测定对于评价食品营养价值和调查植物体内糖代谢都有重要意义。

利用80%乙醇可以把样本中可溶性糖与淀粉分开,进一步采用酸水解法分解淀粉为葡萄糖,采用蒽酮比色法测定葡萄糖含量,即可计算淀粉含量。

StarchH 2SO 4Glucose H 2SO 45-Hdroxymethylfurfural AnthroneFurfural Derivatives最低检出限:0.0074mg/mL 线性范围:0.008-0.7mg/mL注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。

如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、可调式移液器、微量玻璃比色皿或者96孔板、研钵、冰、浓硫酸(不允许快递)、蒸馏水。

一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)1、称取约0.03g 样本于研钵中研碎,加入0.6mL 试剂一,充分匀浆后转移到EP 管中,80℃水浴提取30min ,3000g ,常温离心5min ,弃上清,留沉淀。

2、沉淀中加入0.3mL 双蒸水,放入沸水浴中糊化15min (盖紧,以防止水分散失)。

3、冷却后,加入0.6mL 试剂二,放入沸水浴中提取15min ,振荡3-5次。

4、冷却后,8000g ,常温离心15min ,取上清液待测。

可溶性淀粉合成酶(Soluble starch synthase,SSS)试剂盒说明书

可溶性淀粉合成酶(Soluble starch synthase,SSS)试剂盒说明书

货号:QS3404-50 规格:50管/48样可溶性淀粉合成酶(Soluble starch synthase,SSS)试剂盒说明书紫外分光光度法正式测定前务必取 2-3个预期差异较大的样本做预测定测定意义:SSS(EC 2.4.1.21)通常以游离态存在于质体基质中,催化淀粉链延长,主要负责支链淀粉的合成。

测定原理:SSS催化ADPG与淀粉引物(葡聚糖)反应,将葡萄糖分子转移到淀粉引物上,同时生成ADP,在反应体系中添加的丙酮酸激酶、己糖激酶和6-磷酸葡萄糖脱氢酶依次催化NADP+还原为NADPH,NADPH生成量与前一步反应中ADP生成量呈正比,340nm下测定NADPH增加量即可计算SSS活性。

自备实验用品及仪器:紫外分光光度计、水浴锅、台式离心机、移液器、1 mL石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制:提取液:液体60mL×1瓶,4℃保存;液体一:7mL×2瓶,4℃保存;液体二:4mL×2瓶,4℃保存;液体三:8mL×2瓶,4℃保存;粉剂一:2支,4℃保存;粉剂二:2支,4℃保存;粉剂三:2支,-20℃保存;粉剂四:2支,4℃保存;粉剂五:2支,4℃保存;粉剂六:2支,-20℃保存;粉剂七:2支,-20℃保存;粉剂八:2支,4℃保存;粉剂九:2支,4℃保存;粉剂十:2支,-20℃保存;试剂一:液体×1支,-20℃保存;临用前加入500μL蒸馏水,充分溶解备用;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

试剂二:粉剂×1支,-20℃保存;临用前加入500μL蒸馏水,充分溶解备用;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

反应液Ⅰ的配制:临用前取液体一、粉剂一、粉剂二和粉剂三各一支,依次把粉剂一、粉剂二和粉剂三转移到液体一中混合溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

反应液Ⅱ的配制:临用前取液体二、粉剂四、粉剂五、粉剂六和粉剂七各一支,依次把粉剂四、粉剂五、粉剂六和粉剂七转移到液体二中混合溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

植物可溶性糖含量试剂盒(分光光度法)使用说明

植物可溶性糖含量试剂盒(分光光度法)使用说明

植物可溶性糖含量试剂盒(分光光度法)使用说明货号:BC0030规格:50T/48S产品简介:糖类物质是构成植物体的重要组成成分之一,也是新陈代谢的主要原料和贮存物质。

总糖是指样品中的还原单糖及在本法测定条件下能水解成还原单糖的蔗糖、麦芽糖和可部分水解为葡萄糖的淀粉。

检测原理为蒽酮比色法。

可用于可溶性单糖、寡糖和多糖的含量测定,具有灵敏度高﹑简便快捷﹑适用于微量样品的测定等优点。

试验中所需的仪器和试剂:可见分光光度计、水浴锅、可调式移液器、1ml玻璃比色皿、浓硫酸、研钵和蒸馏水。

产品内容:试剂一:粉剂×1瓶,4℃避光保存;试剂二:10ml×1瓶,4℃保存;操作步骤:一、样品中可溶性糖的提取:称取约0.1~0.2g样本,加入1ml蒸馏水研磨成匀浆,倒入有盖离心管中,沸水浴10 min(盖紧,以防止水分散失),冷却后,8000g,常温离心10min,取上清液于10ml试管中,用蒸馏水定容至10ml,摇匀备用。

二、测定操作表:分光光度计预热30min以上,调节波长至620nm,蒸馏水调零。

调节水浴锅至95℃。

工作液的配制:在试剂一中加入5ml试剂二,充分溶解后使用,如较难溶解,可加热搅拌。

加样表(在EP管中反应):试剂(μl)空白管测定管样本200蒸馏水400200工作液100100浓硫酸10001000混匀,置95℃水浴中10min(盖紧,以防止水分散失),冷却至室温后,于620nm处,分别读取空白管和测定管吸光值,ΔA=A测定管-A空白管。

注意:空白管只要做一管。

如果ΔA大于1,需要将样本用蒸馏水稀释,计算公式中乘以相应稀释倍数。

由于浓硫酸具有强腐蚀性,请谨慎操作。

可溶性糖含量计算:1、标准条件下测定的回归方程为y=8.55x-0.07;x为标准品浓度(mg/ml),y为吸光值。

2、按样本鲜重计算:可溶性糖(mg/g鲜重)=〔(ΔA+0.07)÷8.55×V1〕÷(W×V1÷V2)=1.17×(ΔA+0.07)÷W3、按样本蛋白浓度计算:可溶性糖(mg/mg prot)=〔(ΔA+0.07)÷8.55×V1〕÷(V1×Cpr)=0.117×(ΔA+0.07)÷CprV1:加入样本体积,0.2mL;V2:加入提取液体积,10mL;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/ml;W:样本鲜重,g。

ELISA 检测试剂盒 说明书

ELISA 检测试剂盒 说明书

本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断小鼠小鼠((MouseMouse))肿瘤坏死因子可溶性受体肿瘤坏死因子可溶性受体ⅠⅠ(TNFsR-TNFsR-ⅠⅠ)ELISA检测试剂盒使用说明书检测原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。

往预先包被肿瘤坏死因子可溶性受体Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。

用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的肿瘤坏死因子可溶性受体Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。

样品收集、处理及保存方法1.血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

2.血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。

3000转离心30分钟取上清。

3.细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。

4.组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。

3000转离心10分钟取上清。

5.保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

自备物品1.酶标仪(450nm)2.高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3.37℃恒温箱操作注意事项1.试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20分钟。

从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用。

2.实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。

3.浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白;按照说明书操作时样本已经稀释5倍,最终结果乘以5才是样本实际浓度。

4.严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。

5.所有液体组分使用前充分摇匀。

直链 支链 总淀粉含量(酶法)试剂盒说明书

直链 支链 总淀粉含量(酶法)试剂盒说明书

直链/支链/总淀粉含量(酶法)试剂盒说明书(货号:G0548F分光法48样)一、产品简介:常用直链淀粉测定方法有电位测定法、旋光分析法或碘与直链淀粉结合力的比色法,然而这些方法存在不确定性。

因为支链淀粉-碘复合物在此过程中同样会形成,导致直链淀粉含量的高估,因此需要修正。

本试剂盒利用伴刀豆球蛋白A只与支链淀粉结合而不与直链淀粉结合的特性,使其分离,再用仅水解淀粉的酶复合物使淀粉水解为葡萄糖,通过检测葡萄糖含量得到直链、支链和总淀粉的含量。

二、试剂盒的组成和配制:试剂名称规格保存要求备注试剂一粉体g×1瓶4℃保存用前加100mL蒸馏水溶解,并用50%的乙酸(1mL 蒸馏水+1mL冰乙酸)逐滴加入约40μL,务必核定PH为6.4,(不能低于6.4,否则重新配置)试剂一稀释液:30mL试剂一+70mL蒸馏水混匀试剂二粉剂mg×1瓶-20℃保存用前甩几下使试剂落入底部,再加5.5mL的试剂一稀释液溶解备用。

试剂三液体50mL×1瓶4℃保存试剂四粉剂mg×1瓶-20℃保存用前甩几下使试剂落入底部,再加5.5mL的试剂三溶解备用。

试剂五粉剂mg×瓶-20℃保存用前甩几下使试剂落入底部,再加8.2mL的蒸馏水溶解备用。

试剂六液体56mL×1瓶4℃保存标准品粉剂mg×1支4℃保存用前甩几下使试剂落入底部,再加2mL的试剂三溶解,即为1mg/mL葡萄糖。

三、所需的仪器和用品:可见分光光度计、1mL玻璃比色皿(光径1cm)、水浴锅、可调式移液器、研钵、冰、二甲基亚砜(DMSO)、乙醇、乙酸和蒸馏水。

四、淀粉含量测定:建议正式实验前选取2个样本做预测定,熟悉实验流程,避免实验样本和试剂浪费!1、样本制备:①取1-5g样本烘干(50℃)至恒重,磨碎并过筛(如0.5mm筛)得到待检均匀粉末样本;取10mg粉末样本至2mL的EP管中,加入0.5mL的DMSO并涡旋振荡使样本分散悬浮于液体中(勿沉积于管底或块状悬浮)。

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可溶性淀粉合成酶试剂盒使用说明
分光光度法注意:正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
货号:BC1850
规格:25管/24样
产品说明:
SSS(EC2.4.1.21)通常以游离态存在于质体基质中,催化淀粉链延长,主要负责支链淀粉的合成。

SSS催化ADPG与淀粉引物(葡聚糖)反应,将葡萄糖分子转移到淀粉引物上,同时生成ADP,在反应体系中添加的丙酮酸激酶、己糖激酶和6-磷酸葡萄糖脱氢酶依次催化NADP+还原为NADPH,NADPH生成量与前一步反应中ADP生成量呈正比,340nm下测定NADPH 增加量即可计算SSS活性。

需自备的的仪器和用品
紫外分光光度计、水浴锅、台式离心机、移液器、1mL石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。

产品组成:
提取液:液体30mL×1瓶,4℃保存;
液体一:7mL×1瓶,4℃保存;
液体二:4mL×1瓶,4℃保存;
液体三:8mL×1瓶,4℃保存;
粉剂一:1支,4℃保存;
粉剂二:1支,4℃保存;
粉剂三:1支,-20℃保存;
粉剂四:1支,4℃保存;
粉剂五:1支,4℃保存;
粉剂六:1支,-20℃保存;
粉剂七:1支,-20℃保存;
粉剂八:1支,4℃保存;
粉剂九:1支,4℃保存;
粉剂十:1支,-20℃保存;
试剂一:液体×1支,-20℃保存;临用前加入250μL蒸馏水,充分溶解备用,用不完的试剂4℃保存;
试剂二:粉剂×1支,-20℃保存;临用前加入250μL蒸馏水,充分溶解备用,用不完的试剂4℃保存;
反应液Ⅰ的配制:临用前取液体一、粉剂一、粉剂二和粉剂三各一支,依次把粉剂一、粉剂二和粉剂三转移到液体一中混合溶解。

反应液Ⅱ的配制:临用前取液体二、粉剂四、粉剂五、粉剂六和粉剂七各一支,依次把粉剂四、粉剂五、粉剂六和粉剂七转移到液体二中混合溶解。

反应液Ⅲ的配制:临用前取液体三、粉剂八、粉剂九和粉剂十各一支,依次把粉剂八、粉剂九和粉剂十转移到液体三中混合溶解。

操作步骤:
一、粗酶液制备
按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液),进行冰浴匀浆。

10000g4℃离心10min,取上清,置冰上待测。

二、测定步骤
1、分光光度计预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。

2、在EP管中按顺序加入下列试剂
试剂名称(μL)测定管
样本150
反应液Ⅰ270
混匀,30℃保温20min,置沸水浴中1min(盖紧,防止水分散失),冰浴冷却
反应液Ⅱ150
混匀,30℃保温30min,置沸水浴中1min(盖紧,防止水分散失),冰浴冷却,10000g 25℃离心10min,取上清液
上清液450
反应液Ⅲ300
试剂一10
试剂二10
混匀后立即在340nm波长下记录初始吸光度A1和2min后的吸光度A2,计算Δ
A=A2-A1。

注意:反应液Ⅰ如有沉淀,加入之前要使之充分溶解混匀。

三、SSS活性计算
1、按样本蛋白浓度计算:
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟催化产生1nmol NADPH定义为一个酶活力单位。

SSS(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(Cpr×V样)÷T×稀释倍数
=522×ΔA÷Cpr
此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

2、按照样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟催化产生1nmol NADPH定义为一个酶活力单位。

SSS活性(nmol/min/g鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样÷V样总×W)÷
T×稀释倍数=522×ΔA÷W
V反总:反应体系总体积,5.7×10-4L;ε:NADPH摩尔消光系数,6.22×103L/mol/cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.15mL;V样总:加入提取液体积,1mL;T:反应时间,2min;稀释倍数:1.71;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量。

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