中药血清药理学研究方法探讨与思考

２０℃，２个月）后药效显著降低（Ｐ《０件易
控裁，可以排除律态干扰，健蠢于俸志外酶环境不 同，体内外的细胞功能不完全相同。如果离体实验
与在体实验搁配合，能从深层次上阐明复方制剂的
药墩清在保存过程中其中药有效成分会发生分解等
变纯，致使药效成分含量显著降低，即使低瀑冷冻保
握好给药剂量及采皿时间；④不同个体，会出现含药
血清差异，增加了研究难度。
３
孛药盘潘药理学研究方法懿Ａ点设慧
３．１含药血清和中药粗制品协同研究大多数试 验表明，食药血清疗效较好。中药粗体物无效，也有 糖反豹结论，还有两者均有臻用。这表噗中药盎清
《酷塞３释处理方法荠不熊去掉盎清静所有正常活性； ②有可能去掉或减弱血清中中药的作用。这些情况
（ＰＲＰ）的比值为ｌ：４时血清抗血小板释放５２ＨＴ作
用最强。～般认为，以ｌＯ％的擞清添加燕为宣¨纠； 血清中含有许多活性物质，它们当中太多会对药效 结果产生一定的影响，为排除实验当中的此类干扰 因素，实验过程中宓籍设立严榱的空自盥清对照组。 ２存在阀题与研究的难点
中药ｍ清药理学起步较晚，现仍处于探索阶段， 越不可完全替代传统中药药理实验方法。①血清本 身内源性成分复杂，给中药血清药理学研究带来了 极大困难；②不同种属、不同年龄的动物对药物吸
田代真一．“血清药理学”Ｅ“血清药化学”一汉方刃药理 学护ｋ、始丧一）允药物血中浓度测定力新Ｌ ｏ、世界．ＴＤＭ 研究，１９８８，（５）：５４
科、呼吸科、骨科、心血管科、’肾内科、外科等，对处方
中抗菌药物的使用种类、途径、频率、联合用药及合
理性进行综合统计和分析。 ２结果 ２．１抗茵药物的使用率、使用途径４２００张处方 中，抗菌药物处方１２４８张，占２９．７ｌ％。１２４８张处 方中单一使用抗菌药物处方１０２４张，占８２．０５％；二 联抗菌药物处方２０７张，占１６．５９％；三联及其以上 抗菌药物处方１７张，占１．３６％。 在抗菌药物的使用途径中，口服抗菌药物处方 ９５０张，占７６．１２％；注射用抗菌药物处方２００张，占 １６．０３％；夕｝、用抗菌药物处方９８张，占７．８５％。 ２．２抗茵药物的种类抗菌药物以头孢菌素类最 多，占３８．７８％；其次为大环内酯类，为２０．６７％；使 用最少的是氨基糖苷类，仅为０．２４％，见表１。
应体系孛含药愈涛的热入量对实验结果的影响。实 验驻示，当头风饮含药血清与寓含血小板血浆
万方数据
３２１
的依据，所以，中药血清药理学的研究应与中医辨证 施治结合起来，既体现中医特色，又符合临床需要。
参考文献
ｌ
提出了一些抗菌药物合理应用的干预措施。 １资料与方法 从我院２００７年１１月一２００８年４月的６个月门 诊处方中，随机抽取处方共计４２００张，包括妇科、儿
的高峰期。蒙一纯【ｌｌＪ认为，根据实验动物消化生理 特点和中药吸收转化特点确定取血时间范围是合理
的。如大鼠一般ｌ一２小时可达血药浓度峰值，此 时血清即为含药血清；时间延长将有部分药物组分
发生转化，成为药物代谢血清。一般采血时间多集 中在末次给药后３０ｒａｉｎ一３小时间。由于中药复方
用注射、皮肤、粘膜、呼吸等给药途径来试验制备含 药血清。一般在制备含药血清时，供体动物的给药
兔和大鼠应为首选。 １．１．２离体组织（细胞）选择体外培养细胞的供 体动物与含药血清的供体动物应同种属。因为实验 是要在体外尽可能准确的再现在体实验时药物与机 体相互作用的整个过程，所以应尽可能减少因动物
种属差异而造成的免疫反应。因此，在体外培养实 验中宜采用同种单一血清，既为细胞提供营养，又为 药物载体，还避免了多种血清的干扰ＨＪ。 １．２动物给药方案 １．２．１给药途径一般多用Ｉ＝ｌ服（灌胃）给药方式 制备含药血清，由于中药新型制剂不断产生，也可以
作用机铡，并且能更好的与临床实验褶符，从两增加
实验设计的说服力。
存仍影响其药效。故进行血清药理学试验时宜使用
毅鲜灭活或保存时间较短的含药虫清。 ｌ。Ｓ含药血清加入量和对照纽秘设立驮实验设
３．３血渍药理学、血清药化学、药物动力学同步迄
今含药血清试验方法偏重予药效研究，没番对盎清中
计的角度考虑血清药理学实验方法时，应控制好实 验结果的真实性和可比性，基本原则是：一是研究含 药斑清的加入量来评价血清中药物的真实有效浓 度；二是设立难常血清空白对照组来排除血清本身
科学方法，势必加速巾药研究的发展。
苠，其含药盘清与正常巍清比分别先ｌ：５翻ｌ：ｌ，！毽 芪ｌ：５组促进ＣＦＵ２Ｅ和ＢＦＵ２Ｅ的增殖的作厢要明
显强于１：ｌ组（Ｐ＜０．０１）。严永杰等¨纠探讨了反
３．４血清药理学的研究与中医辨证施治结合辨 证施治是中医诊治疾病的方法和特点，实验医学却 往往忽视中医的内涵，多采取辨癔论治瓣方式。由 于辨证可以反映疾病内在规律，疾病又怒辨证施治
物的种属和年龄；③因给药剂量、采血时间不同，ｍ
清中含药成分及其含量也不尽槌圊，故妊须充分把
浴上蒸发，除去乙醇；③熬湿法：弱℃永浴上效置
３０ｍｉｎ。这３种方法主要去除了血清中的大部分蛋白 质、糖及部分电解质，血清的正常生理活性基本丧失， 容易突出蛊清中中药的绺震。同时。扶实验孛可看 到，灭活血清不易起泡沫，对实验干扰较小。赵万红 等¨刘认为，在对含药血清进行灭活时还要考虑两点：
收有一定差异，跌霹影嚷到盘清中含药成分及其含 量。因此，开展中药血清药理学研究有待于规范动
通常有３种方法。①丙酮法：向血清内加入４—５倍
量丙酮，混匀，予３０００ ｒ／ｒａｉｎ离心，取上渍液溆水浴
上蒸发，除去丙酮；②乙醇法：向斑清内加入４—５倍
９５％乙醇，混匀，于３０００ ｒ／ｒａｉｎ离心，取上清液温水
中药血清药理学是指将中药或中药复方经口给 动物灌服一定时间后采集动物血液，分离血清，用含 有药物成分的血清进行体外实验的一种实验技术。 １９８８年日本学者田真代一…提出了血清药理学的概
念和实验方法。国内２０世纪９０年代初开始探索，近
ｌＯ年来此法越来越多地应用于中药药理的研究。
１
中药血清药理学研究方法现状
３１９
・药学园地・
径的不同带来结果的差异［５Ｊ。 １．２．２给药剂量血清药理学很重要的一个问题 是给药剂量的确定，合适的给药剂量，对保证实验的 成功很重要。给药剂量目前尚无统一标准。因含药 血清加入反应体系后，浓度被稀释，使反应体系的浓 韩林 度达不到在体条件下的药物浓度。王力倩等叫发 现，以参考公式：给药剂量＝临床常用量×动物等 效面积系数×培养基内血清稀释度，计算给药剂量， 得到的含药血清对肿瘤细胞体外生长有抑制作用， 而比上述参考公式计算的给药量小１倍量的含药血
所禽干扰性物质对实验结果的影响。张玮函等¨４１ 研究了当归补血汤及其含药血清对小鼠红系造血褴 细胞克隆的影响。结果显示，等剂掇的２组当归、黄
有效成分作更深层次的分析，尚缺乏对血清中所含药 物成分的定性、定量分析，其在体内的代谢过程也未 知。若煞以空自血清做对照，借助光谱圈、色谱图等 分析技术，对药物血清做综合技术评定，同时监测多 静成分的瞧药浓度变化及其药效变化，建立药效一药 动一时间三维模型，研究其榴关性，血清药理学、血清 药化学、药物动力学同步进行，系统研究，寻求和探索
中药血清药理学研究方法 探讨与思考
成都中医药大学２００６级硕士研究生成都６１００７５ 贾波石含秀沈涛由凤呜 成都中医药大学基础医学院 关键词 中 药 血清药理学研究方法
清无明显作用。在这种情况下，如果反应体系出现 阴性反应，并不能排除药物浓度过低而出现的假阴 性反应。李仪奎等ｏ¨提出两种方法：一是增大给药 剂量，即给药剂量＝在体实验的给药剂量×反应体 系中被稀释倍数（同上述王力倩所提参考公式）。 然而，其不足之处是给药剂量与血药浓度并不是呈 等比增加，况且受到灌胃药物浓度和体积的限制。 二是按新药药理研究的技术要求设计剂量给药，将 含药血清制成冷冻干燥粉，以冻干粉形式加入反应 体系使其达到所需浓度。其优点是：根据需要提高 体外反应体系中的含药浓度或形成等容，有利于血 清的储藏保存。王宁生等［８ ３认为，给药剂量以整体 模型动物的有效剂量８一１８倍为宜。笔者认为，实 验给药剂量，最好通过预实验解决。 １．２．３给药次数与时间间隔 目前常用的方法有：１ 次给药或间隔２～４小时给药，或ｌ天ｌ～３次，连续３ ～ｌＯ天。根据药代动力学理论，以固定给药时间间 隔，相同剂量多次重复给药后血药浓度达到稳态。并 将在稳态下不同采血时间取得的含药血清进行实验， 均表现较高而且相似的药理作用强度。孟李一１就复 方丹参血清对中性粒细胞释放活性氧的影响，探讨含
表１ 门诊处方抗茵药物种类及联用情况
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没有统一的解决办法。 ｌ。４．２含药斑清的保存爱明震等搽列以含头藏饮 血清抗血小板释放５２ＨＴ和阻滞内皮细胞钙通道作