植物基因组学复习资料-(下)
植物遗传育种学复习题
植物遗传育种学复习题一、名词解释1、杂种优势：杂种在生长势、生活力、繁殖力、抗逆性、产量和品质等方面优于双亲的现象。
2、基因工程：按照人们的愿望，进行严密的设计，通过体外 DNA 重组和转基因等技术，有目的地改造生物种性，使现有的物种在较短时间内趋于完善，创造出更符合人们需求的新的生物类型。
3、细胞质遗传：由细胞质内的基因即细胞质基因所决定的遗传现象和遗传规律。
4、基因突变：基因内部发生了化学性质的变化，与原来的基因形成对性关系。
5、染色体组：指配子中所包含的染色体或基因的总和。
6、选择育种：利用现有品种或类型在繁殖过程中自然产生的变异，通过选择淘汰的手段育成新品种的方法。
二、填空题1、植物的繁殖方式分为（有性繁殖）和（无性繁殖）。
2、杂种优势利用中，选育杂交种的基本程序是（选育自交系）、（配合力测定）和（制种）。
3、基因突变具有（稀有性）、（随机性）、（平行性）和（重演性）等特征。
4、染色体结构变异包括（缺失）、（重复）、（倒位）和（易位）。
5、多倍体的类型有（同源多倍体）和（异源多倍体）。
三、选择题1、下列属于质量性状的是（）A 株高B 产量C 花色D 千粒重答案：C2、杂种优势表现最明显的是在（）A F1 代B F2 代C F3 代D 以后各代答案：A3、减数分裂过程中，同源染色体的联会发生在（）A 细线期B 偶线期C 粗线期D 双线期答案：B4、下列哪种方法不能用于创造新的变异（）A 杂交B 诱变C 选择D 以上都不是答案：C5、基因工程中常用的载体不包括（）A 质粒B 噬菌体C 病毒D 线粒体答案：D四、简答题1、简述杂交育种的基本原理。
答：杂交育种的基本原理是基因重组。
通过杂交，将两个或多个亲本的优良基因组合在一起，再经过选择和培育，获得具有双亲优良性状的新品种。
杂种后代会产生遗传变异，为选择提供了丰富的材料。
同时，基因的分离和重组使得杂种后代的性状出现分离和重新组合，从而有可能选出符合要求的优良个体。
基因组学考试资料 整理版
基因组学考试资料整理版第一章一、基因组1、基因组：生物所具有的携带遗传信息的遗传物质的总和,是指生物细胞中所有的DNA，包括所有的基因和基因间区域。
2、基因组学：指以分子生物学技术、计算机技术和信息网络技术为研究手段，以生物体内全部基因为研究对象，在全基因背景下和整体水平上探索生命活动的内在规律及其内外环境影响机制的科学。
基因组学包括3个不同的亚领域结构基因组学(structural genomics) ：以全基因组测序为目标功能基因组学(functional genomics)：以基因功能鉴定为目标比较基因组学(xxparative genomics)二、基因组序列复杂性1、C值是指一个单倍体基因组中DNA的总量，以基因组的碱基对来表示。
每个细胞中以皮克(pg，10-12g)水平表示。
C 值悖理：指基因内部被一个或更多不翻译的编码顺序即内含子所隔裂。
3、异常结构基因分类重叠基因：编码序列彼此重叠的基因，含有不同蛋白质的编码序列。
基因内基因:一个基因的内含子中包含其他基因。
反义基因: 与已知基因编码序列互补的的负链编码基因，参与基因的表达调控，可以干扰靶基因mRNA转录与翻译。
4、假基因：功能基因但已失去活性或者改变原来活性功能的DNA序列. 四、基因组特征比较真核生物基因组的特征：复杂性较高的生物基因组结构松弛，在整个基因组范围内分布大量重复顺序；含有大量数目不等的线性DNA分子，并且，每个长链DNA都与蛋白质组成染色体结构；含有细胞器基因组原核生物基因组的特征 :原核生物基因数目比真核生物少，大小在5 Mb以下; 原核生物基因组结构更紧凑;第二章一、为何要绘制遗传图与物理图？1)基因组太大,必需分散测序,然后将分散的顺序按原来位置组装,需要图谱进行指导。
2)基因组存在大量重复顺序,会干扰排序,因此要高密度基因组图。
3)遗传图和物理图各有优缺点,必须相互整合校正。
二、基因组测序方法、原理及特点：1. 克隆重叠群法：先构建遗传图，再利用几套高度覆盖的大片段基因组文库获得精细的物理图，选择合适的BAC 或PAC克隆测序，利用计算机拼装。
植物生物技术复习资料
植物生物技术复习资料一、名词解释4．花粉的二型性：在花药/花粉培养时，由于对培养条件的反应不同，花粉在形态上形成两种类型，一类是具胚性的，在烟草和大麦中，花粉小，染色浅，为胚性的；另一类为花粉大，染色深，朝成熟花粉方向发展。
这种现象即花粉的二型性。
6． Ti质粒：Ti质粒是根癌农杆菌染色体外的遗传物质，为双股共价闭合的环状DNA分子。
8．分子标记：指在分子水平上可标识的遗传多态性。
主要也指DNA(或核苷酸序列)的多态性。
9．植物细胞工程: 指以细胞为基本单位,在体外条件下进行培养、繁殖，或人为地使细胞某些生物学特性按人们的意愿生产某种物质的过程。
10．脱分化：一个成熟细胞转变为分生状态的过程11．体细胞胚胎发生：指从体细胞进行的类胚结构的生产。
12．双单倍体：由单倍体加倍形成的纯合系。
13．体细胞杂交：指不同种类的原生质体不经过有性阶段，在一定条件下融合创造杂种的过程。
14． T-DNA: T-DNA是农杆菌侵染植物细胞时，从Ti质粒上导入植物细胞的一段DNA。
16．遗传标记：指可以稳定遗传的、易于识别的特殊的遗传多态性形式。
21．原生质体：指采用机械或酶解法去掉细胞壁的裸露细胞。
22．植板率：即形成愈伤组织的原生质体数量占所培养原生质体总数的百分比。
23．对称杂种: 指杂种中具有融合双亲全部的核遗传物质28． CPW13M：分离原生质体使用的含有13%甘露醇的CPW盐溶液29．对称融合: 是亲本原生质体在融合前未进行任何处理的一种融合方式。
31. QTL：数量性状座位或者数量性状基因座，它指的是控制数量性状的基因在基因组中的位置 32. 主效基因：贡献率较大，显著影响个体表型的基因33. 遗传图谱：某一物种的染色体图谱，显示所知的基因和/或遗传标记的相对位置，而不是在每条染色体上特殊的物理位置。
34. DNA限制性内切酶：生物体内能识别并切割特异的双链DNA序列的一种内切核酸酶。
35.同尾酶：一类识别DNA分子中不同核苷酸序列，但能酶切产生相同黏性末端的限制性内切酶。
植物基因工程复习整理资料
《植物基因工程》复习资料整理第一部分概述植物基因工程：采用工程设计的方式，通过体外DNA重组技术，将特定的外源基因导入受体植物细胞内，由此获得的转化植物可以表现出预期的遗传特性，具有上述特点的科学被称之为植物基因工程。
第二部分转化系统1.植物转化：外源DNA通过载体﹑媒体或其他物理﹑化学方法导入植物细胞并得到整合及表达的过程。
实现这一过程的途径称之为“植物转化系统”。
2.转化：外源DNA通过载体﹑媒体或其它物理﹑化学方法导入细胞并得到整合及表达的过程。
——Transformation3.T-DNA是农杆菌侵染植物细胞时，从Ti质粒上切割下来转移到植物细胞的一段DNA，称为转移DNA。
4.Ti质粒致瘤原理：5.T-DNA的结构特点：a.Ti质粒T-DNA区的长度约为23kb。
b.T-DNA仅存在于植物肿瘤细胞的核DNA中；T-DNA 含有激发和保持肿瘤状态所必需的基因；T-DNA和植物DNA之间没有同源性。
c.在T-DNA的5´端和3´端都有真核表达信号。
如TATAbox、AATAAbox及polyA等。
e.T-DNA的两端左右边界各为25bp的重复序列，即边界序列（border sequence），分别称之为左边界（BL或TL）和右边界（BR或TR）。
该25bp边界序列属保守序列,但通常右边界（TR）序列更为保守，左边界(TL)序列在某些情况下有所变化。
其核心部分是14bp，可分为10bp(CACG ATATAT)及4bp(GTAA)两部分,是完全保守的。
f.左边界（TL）缺失突变仍能致瘤,但右边界（TR）缺失则不再能致瘤,几乎完全没有T-DNA的转移,这说明右边界(TR)在T-DNA转移中的重要性。
6.T-DNA在植物细胞中的整合过程（原理）：T-DNA在植物染色体中的插入是随机的，可以插入任何一条染色体，但插入的位点有以下特点：a. T-DNA优先整合到转录活跃的植物基因位点。
植物学期末复习资料重点
植物学（下）期末复习材料一、名词解释：1、种：一个种的所有个体的各部器官（尤其是繁殖器官）具有十分相似的形态结构，生理生化特征。
野生种有一定的自然分布区。
同一种植物的不同个体间可以繁殖出正常的能育后代。
不同种生殖隔离。
2、孑遗植物：在地质历史的较老时期曾经非常发达，种类很多，分布很广，但到了较新时期或现代，则大为衰退，只一、二种孤立地生存于个别地区，并有日趋绝灭之势的植（动）物。
如仅产于我国的大熊猫及原来仅产于我国的银杏、水杉等都是著名的孑遗生物。
3、花图式：是用花的横剖面简图来表示花各部分的数目，离合情况，以及在花托上的排列位置，也就是花的各部分在垂直于花轴平面所作的投影。
4、植物分类学：植物分类学（PlanttaXOnomy）是植物学中主要研究整个植物界不同类群的起源、亲缘关系以及进化发展规律的一门基础学科，也就是把极其繁杂的各种各样植物进行鉴定、分群归类、命名并按系统排列起来，以便于认识，便于研究和利用的科学。
5、裸子植物：是介于蕨类植物和被子植物之间的一类维管植物。
它和苔辞、蕨类植物的相同之处是具有颈卵器。
能产生种子，但种子裸露，没有果皮包被，因胚珠和种子裸露而得名。
6、活化石：广义的概念：凡地质历史上所发生的，至现代还生存着的生物，都可叫活化石。
狭义的概念与孑遗生物相近，现代孑遗生物一定都是活化石。
7、双受精现象：即两个精细胞进入胚囊以后，1个与卵细胞结合形成受精卵（合子，二相染色体，2n）,发育为胚；另1个与2个极核融合后，发育为三相染色体（3n）的胚乳。
8、花程式：是借用符号及数字组成一定的程式来表明花的各部分的组成、排列、位置以及它们彼此的关系。
二、填空：1、植物分类的基本单位：门、纲、目、科、属、种。
2、双名法的构成：瑞典植物学家林奈倡导，采用拉戊文或其他文字拉戊化来书写。
组成：属名+种加词+（命名人）（属名：各级分类群种重要的等级，常为植物的形态特征、特性及用途等。
是植物成分命名的基础。
植物组培复习资料
1、愈伤组织：原指植物在受伤之后于伤口表面形成的一团薄壁细胞，在组培中则指人工培养基上由外植体长出来的一团无序生长的薄壁细胞。
2、植物细胞全能性：任何具有完整细胞核的植物细胞，都拥有形成一个完整植珠所必须的全部遗传信息和发育成完整植株的能力。
3、胚状体：是指在组织培养中起源于一个非合子细胞，经过胚胎发生和胚胎发育过程形成的具有双极性的胚状结构。
4、体细胞杂交：完全不经过有性过程，只通过体细胞融合制造杂种的方法称为体细胞杂交。
快速繁殖(微繁殖)：用组织培养的方法，使植物的部分器官、组织迅速扩大培养，并移到温室或农田繁殖出大量幼苗的繁殖方法。
6、再分化：愈伤组织形成不定芽或不定根或胚状体。
7、原生质体融合（体细胞杂交）：就是使分离下来的不同亲本的原生质体，在离体条件下通过诱导发生的质膜融合进而细胞核融合，像性细胞受精作用那样互相融合成一体的现象。
8、脱毒苗：是指不含该种植物的主要危害病毒，即经检测主要病毒在植物内的存在表现阴性反应的苗木。
9、愈伤组织培养:是指将母体植株上的外植体，接种到无菌的培养基上，进行愈伤组织诱导、生长和发育的一门技术。
10、外植体：在植物组织培养过程中，由植物体上切取的根、茎、叶、花、果、种子等器官以及各种组织、细胞或原生质体等统称为外植体。
11、热处理脱毒：利用病毒和植物细胞对高温忍耐性不同，选择适当的高温处理染病植株，使植株体内的病毒部分或全部失活，而植株本身仍然存活。
12、平板培养法：是把单细胞悬浮液与融化的琼脂培养基均匀混合，平铺一薄层在培养基底上的培养方法。
13、消毒：指杀死、消除或充分抑制部分微生物，使之不再发生危害作用。
14、玻璃化现象：在长期的离体培养繁殖时，有些试管苗的嫩茎、叶片呈现半透明水渍状，这种现象称为玻璃化。
15、初代培养基：是指用来第一次接种外植体的培养基。
16、脱分化：一个已停止分裂的成熟细胞转变为分生状态，并形成未分化的愈伤组织的现象。
17、液体培养：指在进行培养时，培养基中不加琼脂等凝固剂，一般需要通过振荡等方法解决培养基的通气情况。
基因组学复习资料
为什么说基因组学是生命科学的前沿学科？基因组学已成为生命科学的前沿学科，已渗透到各个科学领域，出现了结构基因组学，功能基因组学，蛋白组学，功能蛋白组学，功能酶学，生物信息学，生物计算机，药物基因组学，疾病基因组学等基因研究方向。
1、启动子：细菌中RNA聚合酶结合并启动转录的DNA序列。
2、转录因子：是转录起始过程中RNA聚合酶所需的辅助因子。
3、RNA聚合酶：是能够特异性地与启动子结合并启动转录的蛋白质。
4、转录因子（transcription factor，TF）：是转录起始过程中RNA聚合酶所需的辅助因子。
按功能可分为两类： 1.普遍性转录因子（general transcription factor）是转录起始复合物的组成成员，将RNA聚合酶定位在核心启动子上。
2.激活转录因子：对转录起始复合物的组装及转录速率施加影响，决定某一基因是否表达。
5、RNA编辑（RNA editing）:改变原有mRNA碱基序列组成的修饰。
有两种方式：①将mRNA分子中某些碱基进行代换，使原有mRNA密码子的含义发生改变②在mRNA分子内部插入某些核苷酸，使mRNA原有的读码框发生大范围的改变6、转录物组（transcriptome）:基因组在整个生命过程中所表达的全部转录物的总和。
7、翻译（translation）:按照mRNA密码子的排列顺序在核糖体上依次连接对应氨基酸合成多肽链的过程。
8、密码子摆动性（wobble）:密码子的第3个碱基选择不同碱基配对的现象。
出现的原因：反密码子位于环化的tRNA序列内，是反密码子的第一个核苷酸与密码子第三个核苷酸不能形成标准的碱基配对。
9、密码子（codon）:mRNA分子中每相邻的三个核苷酸编成一组，在蛋白质合成时，代表一种氨基酸。
61个氨基酸密码子，3个终止密码子。
10、移码（frame shift）：如果翻译时出现反密码子与正密码子的配对间断或重叠，将改变后续的编码信息，这一现象称为移码。
植物学下册考点
引言（二）植物界分类的依据：1 形态学依据：依据形态结构特征分类。
优点是：直观、简便。
2 细胞学依据：以植物细胞中染色体的数目和性质来作为植物分类的依据。
3.化学依据：植物的化学组成随种类而异，因而化学成分可以作为分类的一项重要指标，如植物碱、酚、萜、糖、蛋白质、DNA等等。
常用的有血清学方法和电泳分析法。
4.分子生物学依据：在染色体DNA结构上寻求分子水平差异，作为分类的依据。
5. 超微结构和微形态学依据：利用电镜技术研究植物在超微结构的差异作为分类依据。
（三）植物命名法每种植物都有自己的名字，但在命名上十分混乱，往往存在同物异名的现象，如番茄，南方称为番茄，北方称为西红柿，英语称tomato ；马铃薯，南方称为洋芋，北方叫土豆，英语叫potato,此外还有同名异物的现象，如黄瓜香，可能是荚果蕨，也可能是地榆（蔷薇科）。
双名法(binomial nomenclature)：1753年，瑞典植物学家林奈在巨著«植物种志»中，提出了为植物命名的双名法。
双名法由两个拉丁词或拉丁化的词为植物命名。
属名 + 种加词 + 命名人缩写属名：一般为拉丁名词，词首大写。
种加词：一般是形容词，也可以是名词，形容词一般与属名在性、数、格上一致，开头字母小写。
命名原则：1、优先律原则：植物新种名称的发表有优先权，符合法规的最早发表的名称为正确名词。
2、单一原则：每种植物只有一个合法的正确名称。
第四章苔藓植物（B r y o p h y t a）第一节苔藓植物的一般特征1小型，多细胞的绿色植物，生于阴湿环境。
2有假根和类似茎、叶的分化，无输导组织。
3有明显世代交替，配子体发达，孢子体寄生于配子体上。
4多细胞的生殖器官，雌性为卵颈器，雄性为精子器。
5精子有鞭毛，受精离不开水。
6有胚。
第二节苔纲（H e p a t i c a e）以地钱（Marchantia polymorpha）为例：1、形态：绿色分叉叶状体，雌雄异株，上表皮有斜方格网纹，中间白点为气孔，下部有假根和鳞片，凹入处为生长点。
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15. 简述 TAIL‐PCR 的技术要点？ 根据已知 DNA 序列，分别设计三条同向且退火温度较高的特异性引物（SP Primer），与经过 独特设计的退火温度较低的兼并引物（可以设计多条，AP1、AP2、AP3……）， 进行热不对称 PCR 反应。通常情况下，其中至少有一种兼并引物可以与特异性引物之间利用退火温度的差异 进行热不对称 PCR 反应，一般通过三次嵌套 PCR 反应即可获取已知序列的侧翼序列。
25. 何谓直向同源物？何谓横向同源物？
直向同源物：一个祖先物种分化产生两种新物种，那么这两种新物种共同具有的由这个祖先 物种继承下来的基因就称为直向同源基因；通常编码生命必需的酶、辅酶或关键性的调控蛋 白，具有功能保守，进化缓慢，变化速度可覆盖整个进化历史，且序列变化速度与进化距离相 当等特征。
横向同源物：是指由于基因重复而产生的同源基因。基因重复后，进化选择压力变小、其中 一条基因丢失或发生沉默都是促使横向同源基因分化产生新特性或新功能的原因。
一、问答题
1. 何谓基因的表达？
基因表达（gene expression）是指细胞在生命过程中，把储存在 DNA 顺序中遗传信息经过转 录和翻译，转变成具有生物活性的蛋白质分子。
2. 何谓分子杂交？
分子杂交（molecular hybridization）确定单链核酸碱基顺序的技术，其基本原理是待测单 链核酸与已知序列单链核酸（探针）间通过碱基配对形成可检出的双螺旋片段。
采用携带你的融合构建的质粒 DNA 轰击洋葱表皮细胞，在观察洋葱表皮细胞就可以了，如果不 太幸运的话，必须通过转基因的手段在转基因株中观察融合蛋白在哪里。
比较高的境界是体外合成你的基因所编码的蛋白，比如在酵母或者在大肠杆菌中合成你的蛋 白，再把蛋白纯化与底物反应，看看情况如何
14. 模式植物必须具备哪些优势？
30. 核小体的结构，每个组蛋白上缠绕的 DNA 通常有多长？
核小体结构：核小体由组蛋白和缠绕其上的 DNA 构成；组蛋白又可分为物种亚基，分别为： H、H3、H2A、H2B、H4。
每个组蛋白上缠绕的 DNA 通常为 147bp 长。
31. 异染色质与常染色质的特征？
异染色质：在细胞周期中，间期、早期或中、晚期，某些染色体或染色体的某些部分的固缩 常较其他的染色质早些或晚些，其染色较深或较浅，具有这种固缩特性的染色体称为异染色 质。它具有强嗜碱性、染色较深。
16. 突变体表型分析时常遇到什么问题，如何解决？
①由于冗余基因的大量存在许多突变体没有可以鉴定的明显的表现型。 解决办法：制造“双突变体”
②与营养吸收有关的某些基因在特定的生理条件下才能表达出来某些功能。 解决办法：尝试在多种环境条件下鉴定它的功能表现型：如养分缺失条件下加以鉴定
17. TILLING 分析的英文全称？TILLING 技术有一些什么优势？
28. 详述异源多倍体油菜基因组的特征（Chalhoub et al., 2014. Science 435:950‐ 953）
29. 何谓表观遗传修饰？表观遗传因素有哪些？
表观遗传因素：任何不是由于 DNA 序列改变而引起的稳定的遗传因素，成为表观遗传因素。
表观遗传因素包括：DNA 甲基化与去甲基化[DNA (de)methylation]、组蛋白乙酰化与去乙酰 化[histone (de)acetylation]、组蛋白甲基化与去甲基化[histone (de)methylation]、组蛋 白变体[histone variants]
23. 何谓基因关联？何谓基因互作？
基因关联：在相同的代谢途径中发挥作用的基因倾向于处在基因组中的相近位置的现象。 基因互作：某两个基因 A 和 B 在许多基因组中是独立存在的，但是他们在某些基因组中以混 合蛋白的方式出现的现象。
24. 何谓同源性？何谓相似性？
同源性：某些基因或者是基因组片段具有共同的祖先（或者说源头） 。 相似性：某些基因或者是基因组片段具有共同的碱基序列。
5. 在全基因组层面研究基因的表达，又有些什么样的技术手段？
DD（differential display）、cAFLP、SSH（Suppression Subtractive Hybridization）； SAGE（serial analysis of gene expression）； MPSS（massively parallel signature sequencing）； 基因芯片； RAN-seq；
细菌、或者酵母双杂交法 蛋白质复合体的吸附纯化 • 用大规模分光测定来鉴定蛋白质
20. 何谓 2‐D 胶？第一维、第二维分别是什么？
第一维是等电聚焦电泳 IEF:蛋白在 pH 梯度中迁移，在 pI （等电点）点停止迁移（在试管 中进行）
第二维是 SDS‐PAGE:通常用这个技术可以分辨 1000 个蛋白
8. 在基因芯片分析中电脑技术可以起到哪些作用？
①基因系列的选择 ②探针的设计 ③扫描杂交结果图像的分析 ④芯片、样本等的标准化设定等 ⑤基因的聚类分析：哪些基因似乎在同一个网络
9. 研究作物基因的表达有很多环境因素，具体有哪些环境因素？
温度、光照、矿质养料、水分、栽培措施、CO2 浓度
10. 在全基因组层面，温度通过很多基因影响油料作物种子脂肪酸的积累，这 些基因可以归纳成哪些类别？
18. CRISPA/CAS9 是使基因获得功能还是失去功能？
失去功能
19. 蛋白组学有些什么研究内容？
• 在二度空间（胶上）蛋白质表达的差异显示 用于突变体研究、基因敲除、不同的环境条件等
• 蛋白质的鉴定 吸附纯化 蛋白质芯片，用抗体处理
• 蛋白质的修饰 磷酸化、糖基化 ….
• 蛋白质与蛋白质的相互作用
光和体系、种子生长发育、代谢作用、生物/非生物逆境、调控体系
11. 何谓正相遗传学？何谓反ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ遗传学？
传统的遗传学的也称为正向遗传学，它是已知基因功能的前提下，去寻找基因（序列）的， 亦即“从功能到基因”。
功能基因组学正好相反，它是在已知基因（序列）的前提下，去寻找基因功能的，亦即“从 基因到功能”，所以也称为反向遗传学。
Targeting Induced Local Lesions IN Genomes (TILLING)是在传统的 EMS 化学诱变的基础 上，通过高通量、低成本的技术来检测基因的一种技术。
优点如下： （1）几乎适用于所有的农作物品种，不必借助于转基因技术、也没 有转基因而引发的 GMO 食品安全问题； （2）高通量、高效率：应用标准的方法，一次（跑胶、或过柱子） 可以检测 75 万个碱基对（ DNA 片段平均长度 1kb 计算）、一个工 作日可以检测 200 万个碱基对（或 2300 个样品） （3）除了基因功能分析外，所测得的多态性还可以用来构建高密度 的遗传图谱； （4）可以全面地、客观地分析某个物种内部基因的差异（ genetic variation ）程度。诱变而引起的序列多态性.
21. 质谱分析的主要原理是什么？
气态样品通过导入系统进入离子源，被电离成分子离子和碎片离子，由质量分析器将其分离 并按质核比依次进入检测器，信号经放大、分析得到质谱图。
22. 何谓核心基因？何谓特殊基因？
核心基因是指在所有物种中均有且高度保守，序列几乎完全一致的基因； 特殊基因是指具有种属特异性，序列各有不同程度的变化的基因；
6. 数量 PCR 的原理是什么？
7. 原位杂交试验一般用作何种用途？
①细胞特异性 mRNA 转录的定位，可用于基因图谱，基因表达和基因组进化的研究； ②感染组织中病毒 DNA/RNA 的检测和定位，如 EB 病毒 mRNA、人类乳头状瘤病毒和巨细胞病 毒 DNA 的检测； ③癌基因、抑癌基因及各种功能基因在转录水平的表达及其变化的检测； ④基因在染色体上的定位； ⑤检测染色体的变化，如染色体数量异常和染色体易位等； ⑥分裂间期细胞遗传学的研究，如遗传病的产前诊断和某些遗传病基因携带者的确定，某些 肿瘤的诊断和生物学剂量测定等。
3. 何谓译后加工？
译后加工（postranslational processing）：从核糖体上释放出来的多肽需要进一步加工修 饰才能形成具有生物活性的蛋白质。翻译后的肽链加工包括肽链的切断，某些氨基酸的羟基 化、磷酸化、乙酰化、糖基化等。
4. 研究（单个基因的表达）有一些什么常规技术手段？
RT-PCR、RT-qPCR、Northern Blot、报告基因（GUS、GFP）、原位杂交
12. 制造突变体库，最常见的方法是什么？插入突变又有哪两种手段？
插入突变，缺失突变、物理诱导突变； T-DNA 插入突变、Ac/Ds 转座子插入突变
13. 如何全面地研究一个突变体或者相关基因的功能？
①Phenotyping：观察各突变体有别于野生型的性状 ②Association with the gene and the phenotype：观察到的突变性状是否是由被 T-DNA 插 入而遭到破坏的那个基因位点所引起的，关联分析不外乎以下三种分析手法，好的杂质需要 2 种或 2 种以上手段互相印证： ·等位变化：你的手头在某个基因位点上拥有包括野生型在内的数个等位突变体，这些等位变 化是否不同程度地引起某种突变性状？这样比较（特别是对于数量性状）的前提是，等位突变 体与野生型的遗传背景高度一致，遗传背景一致要通过不断的回交来到达，一般要回交 3 代， 单株系谱选择； ·互补实验：简单地说就是从野生型中把某个基因克隆出来，再通过转基因手段转到突变体中 去，看突变体是否能恢复到与野生型一样，当然过程细节并不是那样简单； ·回复实验：这个实验适用 Ac/Dc 插入系统，简单地讲就是拿突变体与 Ac 亲本进行杂交，看 Ds 跳开之后，突变性状能否回复正常。 ③Analysis of gene expression： 你所研究的那个基因在什么发育阶段或者在某个阶段的 哪种组织中表达，研究基因表达的手段有： ·RT‐PCR 与数量 RT‐PCR：PCR 技术基础上的表达分析有时不靠谱，因为采集组织的过程中只 要有一点点污染，假阳信号会被 PCR 无限扩大； ·RNA Northern Blot：可以做到不同组织之间，无法更加精细地定位基因在局部区域的表达细 节； ·RNA 原位杂交：可以非常精细地定位到你的基因在哪几层细胞内表达，非常有价值但技术水 准要求很高的一种基因表达分析实验； ·报告基因：通常把你的基因的启动子序列与 GUS 或者 GFP 这样的报告基因序列连在一起，然 后转化野生型，通过观察 GUS 或者 GFP 荧光信号来确定你的基因在什么组织中表达，精细程度 介于 Northern 与原位杂交之间。以上表达分析都是在 RNA 层面上的，在蛋白质层面上的表达研 究更加可靠： ·Western Blot：与 NorthernBlot 手段差不多，但探针是蛋白质抗体 ·免疫金沉淀：也是原位杂交实验，与 RNA 原位杂交区别在于探针是蛋白质抗体 ④Analysis of protein function： 如果你的基因编码某种酶，你要从突变体中提取它并看看它催化某种底物反应的能力是否与野 生型存在差别？ 如果你的基因编码转录因子，通过分子构建做一个（带报告基因）融合蛋白，看看融合蛋白 是否真的可以定位到细胞核？如果你的基因是一个激酶或信号肽，看能否定位到细胞膜上？如 果你的基因与呼吸作用相关，能否定位到线粒体中去？…………….如果你幸运的话，直接可以