Waters高效液相色谱仪标准操作规程
Waters高效液相色谱系统操作规程
Waters高效液相色谱系统操作规程1. 目的规范Waters高效液相色谱系统的使用和维护。
2. 范围本规程适用于Waters高效液相色谱系统的使用和维护。
3. 职责质检室仪器分析员负责Waters高效液相色谱系统的日常使用和维护。
4. 系统组成本系统由Waters 600E多溶剂输送系统（有梯度控制器的高压输液泵）、Waters在线脱气机、Rheodyne 7725i 手动进样阀、Waters 2487双通道紫外检测器、Millennium32色谱工作站/电脑等组成，另外还包括打印机、断电保护器和通风柜等辅助设备。
5. 程序5.1. 准备5.1.1. 使用前应根据待检样品的检验方法准备所需的流动相（应足够；流动相必须用0.45μm滤膜过滤）、样品和标准溶液（也可在平衡系统时配制），更换合适的色谱柱（柱进出口位置应与流动相流向一致）和定量环。
5.1.2. 通电前应检查仪器设备之间的电源线、数据线和输液管道是否连接正常。
5.2. 开机和泵操作5.2.1. 开机5.2.1.1. 接通断电保护器的电源，依次打开断电保护器、脱气机、600E泵、2487检测器，待检测器自检结束显示测量状态时，打开打印机、电脑显示器、主机。
5.2.1.2. 打开Millennium32软件，按「Login...」，输入用户名和密码，按「OK」注册进入系统主界面。
在Project档内选择所需的项目，右击『Run Samples』图标，选择色谱系统“600_2487”后打开QuickSet窗口。
5.2.2. 更换溶剂5.2.2.1. 打开600E泵后，转动进口集合管阀手柄（以下简称手柄）至RUN位置；5.2.2.2. 将一塑料烧杯放在参照阀出口管下以收集分流的溶剂，向右打开参照阀（断开柱和进样器）；5.2.2.3. 按［Direct］键使其显示直接控制屏幕，设流速为1ml/min（梯度配比阀在0ml/min时不工作）；5.2.2.4. 选择欲使用的某一溶剂通道，设其比例为100%，其它为0%；5.2.2.5. 将输液管从原有溶剂瓶中取出，放入一干净的空瓶中；5.2.2.6. 逆时钟转动手柄至DRAW位置，用启动注射器从进口集合管阀的接口抽出约2ml溶剂；5.2.2.7. 再将输液管放入新溶剂瓶内，继续抽吸直到新溶剂出来并无气泡为止；5.2.2.8. 转动手柄至RUN位置，将启动注射器取下并排掉筒内的溶剂。
waters高效液相色谱
Waters高效液相色谱操作说明一．简介本高效液相色谱实验包括：waters1525泵+waters2487双波长检测器+色谱柱+电脑（breeze 图谱处理软件）+流动相二．操作流程0.准备工作确定色谱实验方法，处理好流动相1，换好流动相，确定色谱柱选择无误1.开机打开泵开关，听到两声“嘀”的响声之后，再打开波长检测器。
检测器进入预热阶段（此时检测器面板进入5min倒计时）这期间打开电脑，进入英文windows操作系统2，待检测器自检完毕（整个自检过程约6~7min），打开电脑桌面的（Breeze软件）。
待程序完全启动，整个开机过程结束。
系统默认进入上次使用的方案。
2.建立新方法和新方案2.1新建方案方案主要用来储存你的各个实验方法，数据等内容，你可以把它理解为一个文件夹。
2.1.1创建步骤选择→单击→单击"next"→在"project name"中输入方案名称（如abc），"comments"中可填注释，也可不填。
→单击"finish"2.1.2打开创建的方案在界面下→单击→在"project"中找到你创建的方案（如abc）→点击"OK",即进入到我们自己的方案中了2.2新建方法在新建的方案中，需要建立不同的试验方法。
试验方法主要设定的包括洗脱方式，检测波长等参数。
2.2.1新建方法步骤单击→单击→单击（Flow选项卡）→在programmed flow中设定你的洗脱方式（此步在2.2.2详述）→单击→单击（channel 1选项卡）→在"wavelength"框内设定你的检测波长（如265nm,280nm,215nm等等）→（设定结束，保存）：单击→输入方法名称如（abc 1）→单击"save"32.2.2洗脱方式的设定（重要）在programmed flow中可看到。
waters超高效液相色谱仪操作步骤
第一部分：仪器准备1. 确保waters超高效液相色谱仪处于正常工作状态，检查仪器是否连接电源，是否有故障指示灯显示。
2. 打开色谱仪软件，检查仪器参数设置是否符合实验要求，包括流速、温度、检测波长等。
3. 准备所需的色谱柱、色谱柱连接器、进样器以及其他实验所需的耗材。
第二部分：样品准备1. 准备实验所需的样品，确保样品已经滤过或者处理过以去除杂质。
2. 根据实验要求，将样品溶解在适当的溶剂中，并进行稀释或者稀释。
第三部分：超高效液相色谱仪操作步骤1. 开始操作前，先进行系统平衡。
具体操作步骤为：将色谱柱连接至色谱柱连接器上，然后连接至色谱仪，用洗脱液平衡色谱柱。
2. 设置色谱仪的操作参数，包括流速、温度、检测波长等。
3. 进行样品进样，具体操作步骤为：将进样器连接至色谱仪，将稀释好的样品注入进样器中，设置好进样量。
4. 开始进行实验，监控色谱图谱的变化，记录实验数据。
5. 实验结束后，对色谱柱和色谱仪进行清洗和维护，确保仪器干净、整洁。
第四部分：数据处理和分析1. 对实验获得的数据进行处理和分析，比对标准曲线，计算样品中所含物质的浓度或者纯度。
2. 对实验结果进行统计分析，进行数据呈现，如绘制色谱图谱、制作数据统计图表等。
3. 通过数据处理和分析，得出实验结论，对实验结果进行解释和讨论。
第五部分：实验安全及注意事项1. 在操作过程中，注意个人安全，避免发生化学品溅泼或者接触有害物质。
2. 操作过程中需严格按照实验要求和操作规程进行，如有疑问请及时向实验指导老师或专业人士请教。
3. 实验结束后，及时清理实验台面和仪器设备，妥善存放试剂和耗材。
通过以上步骤的操作，可以保证在使用waters超高效液相色谱仪进行实验时，能够得到准确、可靠的实验结果，为科研工作和学术研究提供有力支持。
第六部分：精密控制与调试1. 在进行实验操作前，要确保色谱仪的各项参数已经精确调试完毕。
这包括流速、温度、压力、检测波长等参数的精准控制。
新waters操作规程
目的：建立高效液相色谱仪标准操作规程，规范操作。
范围：Waters高效液相色谱仪职责：操作人员。
规程：一、开机1、依次开启电脑、泵、检测器电源。
1.1 泵（2695）自检完成后出现以下画面：.按右侧按键面板上的Menu/Status 出现以下画面：按会出现选择图片中的3WetPrime点OK以替换系统中的溶剂。
选4PurgeInjector以新流动相替换样品定量环和注射器中的旧流动相。
完成此操作后即可设定流速走流动相。
1.2 紫外检测器（2489）自检完成后检测器面板显示如下：按数字键输入待测波长后按 Enter 即可。
1.3 蒸发光散射检测器（2424）自检完成后检测器面板显示如下：按数字键设定Gain (增益)，按箭头键移动光标同法设定 psi (气体压力)，每项设定均需按Enter 。
Neb (喷雾器温度)，Tube(漂移管温度)设定时需先按键再同前项方法进行设定。
二、检测2.1数据采集Empower工作站点击桌面上的图标出现只有在用户名及密码处输入操作人的用户名及密码才可进入工作站进行样品检测及数据处理先点击配置系统设置泵及将用检测器的连接，如下图设置完成后退出，再点击运行样品进行样品检测，如下选择所要运行的仪器连接及所保存的项目名点确定后出现下图点击创建方法组编辑样品检测方法文件，如下图设定流速，流动相，温度，波长等检测条件并保存方法。
如下图操作示例点击下图中的箭头处选定所设定的方法，并点击设置仪器即按所设方法运行，如想查看基线则点击监视器即可。
柱平衡完成后即可进样，进样可选择单进样，在下图中输入相关项目点击完成进样。
也可编辑样品组进样，点击出现下图按项目编辑完成保存后点击运行样品组即可对样品进行采集。
（样品的所有信息，如名称，批号都可以在“样品名称”项中体现）2.2数据处理访问数据的查看界面在下图中点击浏览项目选择目标项目出现下图点通道即可查看采集完成的样品（如未看到想要查看的样，点即可）使用向导建立处理方法处理方法中的峰宽参数处理方法中的阈值参数处理方法中的时间参数处理方法中的其他参数处理方法中的校正参数2.3数据输出选中所需输出的样品，如下图操作三、关机检测完成后，执行关机程序清洗仪器，全部完成后关闭工作站及仪器电源即可。
Waters超高效液相色谱仪操作规程f
浙江省制药工程重点实验室超高效液相色谱仪安全操作规程一、自检开主机和二极管阵列检测器（PAD），仪器进入自检阶段，自检完成后打开Empower软件。
二、配置系统管理数据（相当于新建文件夹），鼠标右键选新建，设定项目名（设定后将出现在运行样品中）。
三、运行样品在采集数据项目栏中选定项目（即将此次实验数据选择存放位置）→确定左栏可以设置有关样品的信息（样品名，功能，方法组，样品瓶，进样体积，运行时间）右栏出图，左下栏给出仪器信息，最下栏显示仪器状态。
步骤：创建方法组→选择仪器方法（新建→编辑仪器方法，包括主机和选定的检测器的参数的设置→设置好选另存为保存此仪器方法→关闭）此时上述编辑的仪器方法出现在列表中→下一步→出现“缺省方法项”对话框，点下一步→出现“命名方法组”，设置方法名（与刚才的仪器方法名相同）对话框→完成。
返回“运行样品”对话框，选方法组和仪器方法。
选定好仪器方法后即可监视基线，基线稳定后→中断按钮→仪器空闲后→点运行按钮，出现运行样品组对话框，设置好后点运行。
（运行过程中可以点中断按钮，也可在编辑下拉菜单中选“改变正在测试的样品”）→运行完后点文件中的“退出”。
四、数据处理点开“浏览项目”，选定要要浏览的项目，确定后进入的界面中有如下内容：样品组、进样、通道、方法、结果组、结果等。
“通道”里存的是原始的数据，这些数据要经过处理后才能得到“结果”，有结果才能打印报告。
PDA数据处理点“通道”→双击要处理的原始数据（点查看图标）→进入查看主窗口（此时点窗口中的工具栏可以看到等高图或3D图）→提取光谱图，找到最大吸收波长→提取色谱图→点“处理方法向导”图标→新建处理方法→用建立的处理方法处理→点“方法组”图标，选好后点“文件”下的“另存为”→“方法组”，设定即可。
至此选好处理方法。
注意事项：每隔24至48小时制备一次新鲜的水溶性流动相；样品进样前要用0.2µm的滤膜过滤以充分去除颗粒杂质；如果所使用的流动相中含有缓冲盐，用10倍柱体积的95%乙腈水溶液冲洗柱子；1。
Waters高效液相色谱仪
1目的规范Waters高效液相色谱仪使用操作。
2适用范围Waters高效液相色谱仪的使用操作。
3责任者质管部QC检验人员。
4内容4.1 系统进入4.1.1 依次开UPS电源、检测器、泵、打印机、电脑主机电源。
4.1.2 电脑进入自检，自检完成后，进入“ Program Ma nager ”窗口。
4.1.3 在“ Program Man ager” 窗口，双击“ Mille nn ium ”图标，进入相应窗口。
4.1.4 在“Millennium ”窗口，双击“ Session Manage” 图标，进入“ Millennium V2.10 ”窗口，进行内存自检。
4.1.5 内存自检完成后，进入“Millennium Login —Version2.10 ”窗口，在“User Name 输入“system”，在“Password”输入“manager”，按“ Login ” 进入“Millinniam Versi on 2.10 —Sessi on Man age—User System” 窗口，双击所选“ Project ”图标，即进入“ Project ”窗口。
4.2 进样4.2.1 在“ Project ”窗口下，按“ Tools ”图标群中“ Quickset ”图标进入“System-open” 窗口，选择“ PCM-410”。
4.2.2 按“OK加以确认，该窗口自动退出，进入自检。
4.2.3 自检完毕，进入“ Quick Set”窗口，按“ Mode'选择“ Quick Start ”进入“ Method Set ”窗口，选择“ Using Exiting Method ”自动进入“ Quick Set Acquisition ”窗口，按“ Set Up Instrument ”，进入仪器安装状态。
4.2.4 安装完毕，按“ Can cel”，退出“ Quick Set Acquisiti on ”窗口，在样品登记表上填写样品名、类别、进样体积、运行时间。
Waters1525-2489高效液相色谱仪操作规程
编写：审核：批准：日期：日期：日期：生效日期：1.目的：规范Waters1525型高效液相色谱仪的操作，确保检测设备安全稳定的运行。
2.范围：适用于Waters1525型高效液相色谱仪的操作使用。
3.职责：检验员负责本规程的执行。
4.操作步骤4.1开机前检查流动相对应泵单元放置，检查电源线接口连接完好4.2色谱柱的安装安装待测样品所需的色谱柱，注意色谱柱方向。
打开柱温箱电源开关，设置柱温箱温度。
4.3开机4.3.1泵单元打开泵电源，待自检通过后排气泡。
（注：上泵是B泵，一般放置水系流动相；下泵是A泵，一般放置有机系流动相。
）拧开上泵排液（空）阀螺旋，用注射器抽去管道及泵头内气泡，然后立即拧紧排液（空）阀螺旋。
下泵排气泡操作与上泵相同。
4.3.2打开检测器电源等待自检通过，大约5min。
4.3.3打开色谱工作站打开计算机电源，点击桌面图标，进入Breeze2 色谱工作站，用户名输入breeze，点击确定按钮，操作的项目选择“hd”，色谱系统选择“1525/2489”，点击确定。
4.4建立分析方法点击（调用方法组编辑器向导）图标，点击对话框中的“新建”，在电脑下方任务栏中出现（仪器方法编辑器），点开，设置波长等条件，再点击，设置A、B两泵的流速，然后点击保存图标，在对话框中输入此方法的名称，比如“亚麻酸方法”，再点击保存。
在“新方法组”的对话框中点击图标，选择“亚麻酸方法”，点击两次下一步，再点击完成。
4.5平衡仪器点击(平衡系统/监视基线图标)，在对话框中，选择方法如“亚麻酸方法”，点击设置。
等待仪器设置反应，再次点击（平衡系统/监视基线）。
等待基线平衡（一般约30-40min）。
4.6进样与数据采集：基线平衡后（30-40min），点击（中断正在运行的样品组或单进样）图标，结束平衡。
点击（单进样）图标，编辑样品名称、进样体积和运行时间，选择方法组，点击进样即可开始进样。
4.7谱图处理：点击图标，点，再点，双击所要查看的谱图。
Waters液相色谱仪操作规程doc
Waters液相色谱仪操作规程1、开机：打开脱气机、泵、检测器和电脑开关（如需控制温度，还要打开柱温箱开关）2、脱气：点击Setup键，—clirect键进入isocratic窗口，拔掉废液出口堵头，接上废液杯，打开排气阀，设定流速5ml/min，调流动相比例，按光标键“▲”至光标出现在A%（甲醇）下方，按数字键，输入输入数字如80，按Enter键，光标出现在B%（水）的下方，按数字键，输入数字如20，按Enter键继续按Enter键，一直到使光标出现在左下角的OFF为止，进行排气（若气泡太多，短时间内排不完就用针管抽气：将旋钮旋至DRAW位，抽气至气泡没有为止，然后将旋钮旋至RUN位），排完气泡后，将流速调至0，关闭排气阀，然后将流速设置为1ml/min。
3、双击桌面上的Empower图标，输入用户名和密码①创建新项目：双击“配置系统”—新项目（选择菜单“文件—新建—项目）—选择父项目（选”项目”文件夹）—“下一步”—表空间100，不选“支持，全面审计追踪”—“下一步”—“下一步”（接受默认选项）—“下一步”（接受默认选项）—“下一步”（接受默认选项）—输入项目名—“完成”②运行样品双击“运行样品”—选“项目名***”—“确定”输入样品名：***功能：方法组：样品瓶：进样体积：进样时间：点击“创建方法组”—“新建”（出现仪器方法编辑器）点击“W600”图标—“流量”—泵模式：等度；流量比例设定—“事件”—启用事件监视—点击“W2998”图标，—点“通用”—启用3D数据设定“采样速度1—2”—“2D通道”—选“通道1”设定波长（编辑完成后保存）击“文件”—“另存为”—输入仪器方法名称—“保存”关闭“仪器方法编辑器”窗口选中所要的“仪器方法”—单击“下一步”—“下一步”—完成在“运行样品”页选中刚建立的“仪器方法”—点“监视器”（观察基线平滑无毛刺）待系统平衡后，即基线平滑无毛刺时，单击“终止监测”图标，（此时屏幕下边显示”系统空闲”),点击“进样图标”，屏幕下部出现“正在设置”—“等待进样”—这是扳动进样阀可以进样—进样后屏幕下边出现“正在运行”③数据处理A 双击“浏览项目”—项目—“确定”B在“通道”中查看，选中要处理的数据C选择“工具”—“查看”—打开（出现“查看”主窗口）D单击菜单中“文件”—“新建”—“处理方法”（出现新处理方法对话框）选使用处理方法向导—“确定”（出现“积分—峰检测1”）—设定“峰宽”—“下一步”（出现“积分—峰检测2”）—设定“阈值”（50）—“下一步”（出现“积分—积分区域”），输入保留时间：“开始时间—结束时间”—“下一步”（出现“积分—剔除峰”）—设定最小面积，最小高度，（或不做任何改动）—“下一步”—“下一步”，选择“否”，在“名称”栏中输入组分的名称（或不改动）—“下一步”—“下一步”输入“方法名”—”完成“。
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XXXXXXXXXX部仪器设备标准操作规程
1 目的：建立Waters高效液相色谱仪标准操作规程。
2 范围：Waters高效液相色谱仪。
3 责任：化验室操作者。
4 规程：
4.1 型号与主要性能指标
4.1.1 型号
4.1.1.1 主机Waters2695分离单元、Waters2489紫外/可见光检测器。
4.1.1.2 工作站Empower2。
4.2 主要技术指标:
4.2.1 泵流量设定：0.000和0.010到10.000毫升/分，增量为0.001毫升/分。
流量准确度：±1%或10μL/分，取其中的较大值（0.200到5.000毫升/分），反压为600psi下的脱气甲醇。
４.2.2 检测器：光源：氘灯。
波长范围：190～700nm
波长精度：±1nm
4.2.3 柱温箱：温度设定范围：20～60℃，间隔：1℃
控温精度：±5℃
4.2.4 工作站计算机：Dell OPTIPLEX330（操作系统Windows XP）。
4.2.5 打印机：HP LaserJet P1008打印机。
5 操作条件：
5.1 电源要求：950VA（最大值）
线电压：85到132Vac或180到250Vac
频率：47到63Hz
5.2 环境条件：温度：4～40℃，相对湿度：20～80%。
5.3 机房内应清洁无尘，无易燃、易爆和腐蚀性气体，室内排风良好。
5.4 仪器应平稳放置在工作台面上，便于操作，周围无强烈的机械震动和电磁干扰，仪器接地应良好。
6 操作前准备:
6.1 配制所需流动相。
6.2 配制和制备所需的对照品溶液和供试品溶液。
6.3 将色谱柱连接到色谱仪管路系统上。
7 操作步骤：
7.1 打开交流稳压电源开关，稳压电源上电压表指示并稳定至220V。
7.2 将“2695分离单元”电源开关（位于左侧面板的面板顶部）推到（开）I 位置即可启动“2695分离单元”, 启动诊断程序将启动。
启动诊断程序的初始部分成功后，前面板上将显示Main（主）屏幕。
启动诊断程序将继续执行，将初始化：针头、注射器和阀门；样品转盘托架；溶剂管理系统。
诊断运行时，Main（主）屏幕的标题区内将显示这些机械诊断测试的状态。
如果启动诊断程序不成功，则排除故障。
当启动诊断程序完成后，“分离单元”将进入“空闲”模式。
仪器开始自检（4-5分钟），待屏幕上方出现“idle”字样表示自检成功。
7.3 将输液泵上的烧结不锈钢过滤器及吸液管放入流动相中，使导管内充满溶剂。
打开在线脱气，使其伪on,设定柱温，一般为35℃，清洗柱塞杆1～2分钟（Prime seal wash），将每一个会用到的管道进行排气一次（Wet prime），注射器排气泡及清洗（Purge injector）,清洗注射针（Prime needle wash）。
7.4 打开“2489紫外/可见光检测器”电源开关至ON(1)的位置，画面即刻出现自我诊断检查字样：Startup Diagnostics, 注意是否有任何故障讯息出现。
接着出现Waters 2487 Dual λAbsorbance Detector, 并开始执行“热机”检查，出现Warmup Time倒数时间画面。
待“热机”检查完毕无误，画面之上排显示吸收讯号数字，下两排显示前一次关机时之波长与AUFS设定值。
欲设定使用之波长λ,将游标移至λ位置，输入波长数字，Enter即可。
等系统平衡稳定后，于注入检体前，按一下Autozero键，使检测器自动归零，再开始进样做分析检测。
7.5 打开计算机电源，在计算机上运行液相色谱工作站软件Empower，双击电脑桌面上的Empower图标，或点击“开始﹥Empower﹥Empower”，出现Empower 登录窗口。
输入用户名和密码，单击确定，出现Empower Pro界面窗口。
单击Pro界面的“运行样品”窗口，即可进入“运行样品”界面。
在左侧选择项目，右侧选择对应的色谱系统，然后单击“确定”，进入“运行样品”窗口。
选择“创建方法组”，调用方法组编辑器向导，分别设定流量、检测波长、柱温箱温度等，保存仪器方法，然后在“仪器方法”中选择刚建立的仪器方法，并点击“监视器”，平衡系统，观察基线。
等系统达到平衡状态，终止观察基线，系统空闲后，写入样品名称，选择对应的方法组，确定运行时间，然后选择菜单“进样-进样”，或者单击“单进样”，开始采集数据。
如果需要在采集数据的同时，放大查看数据，可单击“传送数据到查看”来进行具体的查看，乃至于数据的处理。
7.6 分析结束后，打印色谱分析报告。
8 关机：
8.1 分析完毕后，应先退出色谱工作站软件，以断开计算机与系统控制器的连接通道。
然后关闭检测器、分离单元电源。
8.2 关闭计算机，再关闭稳压电源开关。
9 注意事项：
9.1每次开机自检一定要等到界面上出现“idle”时方可进行下一步的操作。
每天
开机后必须进行溶剂系统前处理。
9.2 高效液相色谱仪具有自诊断故障功能，在开机或运行中出现故障，会出现相应的错误信息提示，根据出现的错误信息作相应的处理。
9.3 建议做分析检测前，至少须让检测器或D2灯源“热机”30分钟以上。
9.4 各流动相需经脱气并过滤，特别是当有离子对试剂时，必须要进行过滤。
换流动相的时候，应对滤头进行清洗，以免两种流动相发生混淆，影响实验。
9.5流动相中含有无机盐，分析工作结束后应先用水清洗整个管路系统中的无机盐成分，然后再用有机溶剂（如甲醇等）替换管路系统中的水。
盛放各种溶液的瓶子需隔一段时间进行清洗，且每次开机之前观察各瓶的滤头是否在溶液液面一下，如不在应将其置于液面之下。
9.6 对照品溶液和供试品溶液须经0.45μm或更小孔径的滤膜过滤。
9.7 仪器设备长时间不使用，应每周开机一次，每次两小时，并用甲醇或异丙醇清洗管路系统。