肉类中激素残留检测技术的研究进展

肉类中残留激素检测技术的研究进展

摘要：随着人们对肉类需求量的增加，畜牧业和养殖业中的激素种类和使用量也逐渐增加，肉中残留的激素会损害消费者的健康。本文重点讨论了当前肉类食品激素残留的几种样品前处理方法和激素检测技术，综述了这些技术的原理及其应用，并对肉类食品激素残留检测技术的发展方向进行了展望。

关键词：肉类食品残留激素前处理检测技术

近几年的食品安全问题，一直是消费者所担忧的，肉类产品是人类蛋白质的主要来源，现在也存在很多的安全问题，长期摄入含激素的肉，会使人体代谢发

生紊乱。因此，有必要对肉类中激素残留的检测技术进行研究，防止问题肉流入市场。

一、概述

人们用激素类药物（如生长激素，性激素等）作为畜禽养殖过程中的生长促

进剂，这样可以在短期内快速增加产量和肉的品质（瘦肉与脂肪的构成比例），

显著提高经济效益。

目前在饲养畜产品过程中一般会添加固醇类激素如性激素，催乳素等，这些

激素能够促进生长和增加蛋白质含量。但是这些激素会残留在肉类中，随着人体

的摄入在体内富集，长期食用会严重损害人的健康，比如我们所熟知的瘦肉精事

件。肉类作为人体蛋白质的主要来源，应该重视对其安全的监管，所以应该加大

对肉类中残留激素检测技术的研究。

二，研究中存在的问题

肉类食品中激素的残留水平比较低，同时内源性的干扰物质比较多，这就对

肉类中残留激素的检测带来了问题。高效的样品前处理是准确检测残留激素的关

键所在，各种检测方法的准确度，检出限，回收率都与样品在前处理过程中的纯

化分离效果密切相关。

随着畜牧业中添加的激素种类的增加，有些样品前处理方法已经不再合适，

并且难以满足现在检测技术高灵敏度，高自动化，快速的要求。所以，以后应该

加大对样品前处理方法的研究力度，使样品的分离效果更好，这样有利于激素的

检测。

三、样品前处理和检测方法的研究进展

1.样品前处理的方法

常用的前处理方法主要有液液萃取、固相萃取、固相分散萃取技术、免疫亲

和色谱、分子印迹、超临界流体萃取、功能化磁性纳米材料、凝胶渗透色谱、超

声波辅助提取等。

液液萃取、固相萃取、固相分散萃取技术使用的时间比较长，相关的文章也

比较多，本文主要介绍免疫亲和色谱、分子印迹、超临界流体萃取、功能化磁性

纳米材料。

1.1超临界流体萃取（SFE）

超临界流体萃取是以超临界状态下的流体为萃取溶剂分离混合物的过程，超临界流体萃取技术具有以下显著的优点: 速度快、效率高、选择性强、对环境污染小等优点，广泛应用于动物组织样品前处理中。

Zhou R等[1]采用超临界流体技术提取鹿茸中的活性性激素，提取条件为:75%乙醇为溶剂，萃取压力30兆帕，温度35℃，提取时间30min，在这些条件下，93.68%的活性物质被提取，实验表明，利用超临界CO2 与溶剂萃取，可以获得高含量的性激素。

1.2免疫亲和色谱（IAC）

其主要原理是将抗体与惰性微珠共价结合,然后装柱,将抗原溶液过免疫亲和柱,而非目标化合物则沿柱流下,最后用洗脱缓冲液洗脱抗原,从而得到纯化的抗原,用适当的缓冲液和合适的保存方法,柱可以再生备用。

IAC作为样品前处理方法最显著的优点是能高效，高选择性的保留待测物，所需处理时间少，过程简单，能够用于比较复杂样品痕量组分的净化与分离。在许多的检测方法中，IAC是激素分析的关键净化步骤。王建平等[2]制备了抗SAL的抗血清，提取纯化IgG制备免疫亲和色谱柱，测定了肝脏中的SAL和克伦特罗含量。

1.3分子印迹技术(MIP)

分子印迹技术的原理是仿照抗体的形成机理，在模板分子周围形成一个高度交联的刚性高分子，除去模板分子后，在聚合物的网络结构中留下了与模板分子在空间结构尺寸大小结合位点互补的立体孔穴，从而对模板分子表现出高度的选择识别性能。根据不同的目的制备不同的分子印迹聚合物可以满足在食品安全领域如在兽药检测方面、农药残留方面等各种不同的需要。

在样品前处理过程中，传统的固相萃取吸附剂与萃取物之间没有特异性，而且萃取和洗脱条件难于掌握。分子印迹合成的聚合物是按照模板分子定做的，可以特异性地识别萃取物，而且制取方法简单，性质稳定，环境适应能力强[3]。王培龙等[4]采用分子印迹聚合物固相萃取富集猪尿液中的盐酸克伦特罗分子经过衍生化利用毛细管气相色谱-质谱(GC-MS)联用方法定性和定量分析检出限(LOD) 为5.1×10- 4mg/L,该方法能够有效地消除尿液的基体干扰,具有较低的检出限和较高的精密度。

1.4功能化磁性纳米材料（MSPE）

磁性固相萃取技术因其具有操作简便快速、处理效率高、适用范围广等突出优势，为痕量分析物的预富集打开了一扇新的窗口，并在各种类型复杂样品前处理应用过程中显示出了良好的应用潜力。该技术的核心在于获取功能化的磁性材料，而该方面研究的重点又在于探索出新型有效的制备方法，使磁性吸附材料能够实现高效的样品前处理进而满足复杂样品分析的要求[5]。

近年来，分析工作者开始采用MSPE技术进行食物样品前处理，并取得了很好的应用效果。Rofouei.Ｍ.Ｋ[6]利用功能化磁性纳米材料对鱼肉中的汞离子进行了检测，检测结果很不错。

2肉类残留激素的检测方法

2.1快速检测方法

肉类残留激素的快速检测法主要有：酶联免疫吸附法，胶体金免疫层析法，生物传感器，高效液相色谱法等。

2.1.1 酶联免疫吸附法

酶联免疫分析法是免疫分析法中应用最广泛的一种分析方法。ELISA是把抗原抗体免疫反应的特异性和酶的高效催化作用有机结合起来的一种检测技术，一般将抗原或抗体吸附于固相载体进行免疫酶反应，经底物显色后用酶标仪进行检测。孙俐[7]建立了对动物源性食品中二苯乙烯类激素残留酶联免疫定量检测方法，己烷雌酚回收率90.1%－94%，己烯雌酚回收率达80.1%－86.3%，精密度己烷雌酚为5.4%－8.0%，己烯雌酚为7.2%－10.6%。

本方法可以满足动物源性食品残留监控的要求，也适应国内外对二苯乙烯类激素残留的测定要求。但是，该方法检测结果有假阳性的可能，因此初筛阳性结果必须用其他方法确证，现在ELISA已经成为用于激素残留检测的快速检测方法。

2.1.2胶体金免疫层析技术（GICA）

GICA是以胶体金为标记物的免疫层析方法，它多以条状纤维层析材料(通称试纸条)为固相载体，通过毛细作用使样品溶液在层析条上横向流动，并同时使样品中的待测物与层析材料上针对待测物的受体(如抗体或抗原) 结合，再通过胶体金结合物达到检测目的"该方法操作简单，可现场检测，成本低，不需仪器，几分钟即可出结果[8]。