月季的花药培养详解
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课题2月季的花药培养.ppt
17
诱导丛芽或胚状体的培养基配方
在1000ml.MS培养基中添加GA 、IBA和BA,质 量浓度分别为 0.1mg/L 、0.5mg/L 和 1mg/L 。
GA 赤霉素 IBA 吲哚丁酸,生长素的一种。 BA 苄氨基腺嘌呤,一种细胞分裂素，如6— BA最为常见。
诱导丛芽或胚状体的培养基配方
在MS培养基各种成分量减半，但需添加IAA, 质量浓度为1. 5mg/L
6
注意：
①二核花粉粒：成熟的花粉粒中，只含花粉管细胞 核和生殖细胞核。（精子在花粉管中形成）
②三核花粉粒：有些植物的花粉，在成熟前，生殖 细胞进行一次有丝分裂，形成两个精子，这样的花 粉在成熟时，含有一个营养核和两个精子。
③两个精子和一个营养核的基因型相同。
④
4个花粉管细胞核
1花粉母细胞 减数分裂 4个小孢子 有数分裂
加 验氨发基现酸，、有酪蛋些白植水物解的物、愈酵伤母组提织取和物悬及椰浮子培汁养等物有机在附M加S
成 培分养。基与上其生它培长养得基比的B基5本培成养分基相上比，要M好S培，养而基另中一的硝些酸植盐、
钾 物和，铵在的B含5量培高养，基这上是它更的适明宜显。特点。
16
月季花药的MS培养基配方
在1000ml.MS培养基中添加以下成分别
2.4------D 0.4mgKT0.2mgIAA
4mg
调节pH至5.8
KT---激动素是一种非天然的细胞分裂素，化学名
称为6-糖基氨基嘌呤，主要生理作用：促进细胞分 化、分裂、生长；诱导愈伤组织长芽；解除顶端优 势；促进种子发芽、打破侧芽的休眠；延缓叶片衰 老及植株的早衰；调节营养物质的运输；促进结实； 诱导花芽分化；调节叶片气孔张开等。
课标领航
诱导丛芽或胚状体的培养基配方
在1000ml.MS培养基中添加GA 、IBA和BA,质 量浓度分别为 0.1mg/L 、0.5mg/L 和 1mg/L 。
GA 赤霉素 IBA 吲哚丁酸,生长素的一种。 BA 苄氨基腺嘌呤,一种细胞分裂素，如6— BA最为常见。
诱导丛芽或胚状体的培养基配方
在MS培养基各种成分量减半，但需添加IAA, 质量浓度为1. 5mg/L
6
注意：
①二核花粉粒：成熟的花粉粒中，只含花粉管细胞 核和生殖细胞核。（精子在花粉管中形成）
②三核花粉粒：有些植物的花粉，在成熟前，生殖 细胞进行一次有丝分裂，形成两个精子，这样的花 粉在成熟时，含有一个营养核和两个精子。
③两个精子和一个营养核的基因型相同。
④
4个花粉管细胞核
1花粉母细胞 减数分裂 4个小孢子 有数分裂
加 验氨发基现酸，、有酪蛋些白植水物解的物、愈酵伤母组提织取和物悬及椰浮子培汁养等物有机在附M加S
成 培分养。基与上其生它培长养得基比的B基5本培成养分基相上比，要M好S培，养而基另中一的硝些酸植盐、
钾 物和，铵在的B含5量培高养，基这上是它更的适明宜显。特点。
16
月季花药的MS培养基配方
在1000ml.MS培养基中添加以下成分别
2.4------D 0.4mgKT0.2mgIAA
4mg
调节pH至5.8
KT---激动素是一种非天然的细胞分裂素，化学名
称为6-糖基氨基嘌呤，主要生理作用：促进细胞分 化、分裂、生长；诱导愈伤组织长芽；解除顶端优 势；促进种子发芽、打破侧芽的休眠；延缓叶片衰 老及植株的早衰；调节营养物质的运输；促进结实； 诱导花芽分化；调节叶片气孔张开等。
课标领航
月季的花药培养(经典)
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月季花药培养的未来发展前景
提高育种效率
随着花药培养技术的不断优化和成熟， 未来月季育种将更加高效，能够快速 获得具有优良性状的新品种。
满足市场需求
促进相关领域发展
月季花药培养技术的发展和应用，不 仅能够推动花卉产业的发展，还能够 促进植物生物技术、药用资源开发等 相关领域的发展。
随着人们对花卉需求的不断增加，通 过花药培养技术大量繁殖高品质月季， 能够满足市场的多样化需求。
目的
通过花药培养获得月季的纯系或无性 系，用于育种、品种改良、繁殖和遗 传研究等方面。
月季花药培养的历史背景
起始时间
月季花药培养的研究始于20世纪50 年代，中国、日本和欧美等国家的研 究者开始探索这一领域。
重要里程碑
70年代初，研究者成功诱导月季花药 产生单倍体植株，标志着月季花药培 养技术的突破。此后，该技术在月季 育种和繁殖中得到了广泛应用。
再生植株的遗传稳定性
经过花药培养获得的再生植株具有较高的遗传稳定性，能够保持亲本的优良性状，为月 季新品种的培育提供稳定的基础。
花药培养对月季产业的影响
加速新品种的培育
花药培养技术为月季品种的快 速培育提供了有效途径，缩短了 育种周期，提高了育种效率。
丰富月季品种资源
通过花药培养技术，可以获得大 量具有不同优良性状和基因型的 月季新品种，丰富月季品种资源 库。
详细描述
在接种前，需要对花药进行消毒处理，以减少微生物的污染。常用的消毒方法有表面消毒和浸泡消毒等。消毒后， 需要去除雄蕊，以便更好地进行花药培养。这一步可以通过显微操作仪来完成，也可以手动去除。
花药的接种与培养
总结词
将处理好的花药接种在培养基上，控制温度、湿度和光照等条件，促进花药的发育。
2020-2021高二生物1学案：专题3课题2月季的花药培养含解析
2020-2021学年高二生物人教版选修1学案：专题3课题2月季的花药培养含解析课题2月季的花药培养知识点一被子植物的花粉发育过程1．被子植物的雄蕊通常包含花丝、花药两部分。
后者为囊状结构，内部含有许多花粉，花粉是单倍体的雄性生殖细胞.2．被子植物的花粉发育过程说明：花粉是小孢子母细胞先经过减数分裂再经有丝分裂形成的，因此,花粉是单倍体的生殖细胞。
两个精子和一个营养细胞的细胞核的基因型相同。
3．花药培养产生花粉植株（即单倍体植株)一般有两种途径注意：上述两种途径之间并没有绝对的界限，主要取决于培养基中激素的种类及其浓度配比。
1．被子植物花粉的发育过程被子植物花粉的发育要经历四分体时期、单核期（单核居中期、单核靠边期)、双核期等阶段.花粉母细胞(小孢子母细胞)先经减数分裂形成4个单核花粉粒(小孢子）,此时核位于细胞中央，获取营养,不断长大。
随着细胞扩大，细胞核由中央移至细胞的一侧，然后每个花粉粒的细胞核经有丝分裂形成双核的花粉粒，进一步形成一个营养细胞和一个生殖细胞。
一个生殖细胞再经过一次有丝分裂,形成两个精子.2．植物的花药培养在育种上的意义花粉粒经过培养发育成单倍体植株,单倍体植株经过人工诱导，其染色体数目加倍，重新恢复正常植株的染色体数目，这样的植株不仅能够正常生殖，而且每对染色体上的成对的基因都是纯合的，自交产生的后代不会产生性状分离，这就是单倍体育种。
单倍体育种不仅缩短了育种周期，也为新品种的培育开辟了新途径.【典题精练1】关于被子植物花粉的形成,下列说法正确的是(）A．花粉是花粉母细胞经有丝分裂形成的B．花粉的发育要经历四分体时期、单核期和双核期等C．花粉发育经历的四分体时期与减数第一次分裂的四分体时期含义相同D．花粉母细胞形成花粉粒中的精子的过程是减数分裂的过程【答案】B【解析】花粉是由花粉母细胞经减数分裂形成的,共经历了四分体时期、单核期和双核期等发育阶段；四分体时期是指4个单倍体细胞连在一起，而减数分裂的四分体时期是指同源染色体配对后，1个四分体中含4条染色单体的阶段；花粉粒内的生殖细胞经有丝分裂得到2个精子。
月季的花药离体培养
特点：1 明显缩短育种年限 2 后代植株都为纯合子。
一、被子植物的花粉发育 雄蕊
花丝 花药：囊状结构，内有很多花粉
花粉 花粉粒是由花粉母细胞经过减数分裂而形 成，因此，花粉粒是单倍体的生殖细胞。
被子植物花粉的发育要经历：
四分体时期、单核期和双核期等阶段。
造孢细胞
小孢子四分体
单核
双核
花粉母细胞 （小孢子母细胞）
⑦花药培养时间
一般月季的花药培养时间选在5月初到5月的中 旬，即月季的初花期。初花期的花蕾营养状态 及生理状态会比较好，可提高花粉的诱导成功 率。
月季花药培养时的花粉粒最好是（ A、四分体时期 B、单核居中期
C）
C、单核靠边期
2、培养基：
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
D、二核或三核花粉粒
花药培养基所采用的培养基可能因植物的不同 而有所变化小麦为N6培养基，马铃薯、月季 为MS培养基，油菜为B5培养基。
4、鉴定和筛选 在花药培养中，特别是通过愈伤组 织形成的花粉植株，常常会出现染 色体倍性的变化（主要原因是营养 细胞核和生殖细胞核融合造成的）。
5、植物组织培养技术与花药培养技术的异同点：
项目 相同点 不同点
植物组织 离体的植物组 外植体为体细胞，染色 培养技术 织经脱分化形 体数无需加倍。 成愈伤组织， 花药培养 再分化成丛芽， 取材为花药，培养的为 诱导出根，然 单倍体幼苗，植株弱小， 技术 后进行移栽。 高度不育，必须用秋水 仙素处理，使染色体加 倍，恢复正常植株的染 色体数，而且为纯种。
细胞核和生殖细胞核。（精子在花粉管中形成） ②三核花粉粒：有些植物的花粉，在成熟前， 生殖细胞进行一次有丝分裂，形成两个精子， 这样的花粉在成熟时，含有一个营养核和两个 精子。 ③两个精子和一个营养核的基因型相同。
月季的花药培养
【思考6】单倍体性细胞产生的花粉胚,也可发育成为 单倍体植株，这和植物的体细胞克隆有区别吗？
有区别。单倍体性细胞发育成的单倍体植株表现 为高度不育，植物的体细胞克隆的植株可育。
(三)影响花药培养的因素 P39
1.影响花粉植株成功与否和成功率的主要因素：
和
等。
材料的选择 培养基的组成
2.材料的选择:
将细胞核染成 红 色和 蓝黑 色。
2.在使用焙花青－铬钒溶液时，需要首先将花药用
处理20min。该试剂的配制方法
是卡将诺氏固定液
按体积比为
的比例
混合无均水匀酒。精和冰醋酸
3:1
（二）材料的消毒
花蕾 (70% 酒精 )大约
30s (无菌吸水纸 )吸干水 分
( 无菌水 )冲 洗
(无菌水 )清 洗 (质量分数为 )2～ 40m.1i%n的氯化汞
愈伤组织必须从培养基中获得( )(
)和
小分子有机物等营养物质。 (２)要促进花粉细胞的分裂分化,培养基中应有( 生长素 )
(细胞分裂素)两种激素。愈伤组织分化是指愈伤组织
形成芽和根，由芽发育成叶茎。这一过程必须给予
光照，其原因是( )利用光能制造有机物促进 试管苗生长发育。叶
(３)试管苗的细胞核中有( )条脱氧核苷酸链。
花的结构:
植物的花药培养在育种上有什么意义？
明显缩短育种年 限,为新品种的 培育开辟了新途 径。
花粉粒(1N)
单倍体植株(1N)
二倍体纯合子植株 (2N)
一、基础知识：
花丝
雄蕊
花药：囊状结构,内有很多花粉
P37
（一）被子植物的花粉发育 1.被子植物的花粉是在 花药
中由
花粉母
有区别。单倍体性细胞发育成的单倍体植株表现 为高度不育，植物的体细胞克隆的植株可育。
(三)影响花药培养的因素 P39
1.影响花粉植株成功与否和成功率的主要因素：
和
等。
材料的选择 培养基的组成
2.材料的选择:
将细胞核染成 红 色和 蓝黑 色。
2.在使用焙花青－铬钒溶液时，需要首先将花药用
处理20min。该试剂的配制方法
是卡将诺氏固定液
按体积比为
的比例
混合无均水匀酒。精和冰醋酸
3:1
（二）材料的消毒
花蕾 (70% 酒精 )大约
30s (无菌吸水纸 )吸干水 分
( 无菌水 )冲 洗
(无菌水 )清 洗 (质量分数为 )2～ 40m.1i%n的氯化汞
愈伤组织必须从培养基中获得( )(
)和
小分子有机物等营养物质。 (２)要促进花粉细胞的分裂分化,培养基中应有( 生长素 )
(细胞分裂素)两种激素。愈伤组织分化是指愈伤组织
形成芽和根，由芽发育成叶茎。这一过程必须给予
光照，其原因是( )利用光能制造有机物促进 试管苗生长发育。叶
(３)试管苗的细胞核中有( )条脱氧核苷酸链。
花的结构:
植物的花药培养在育种上有什么意义？
明显缩短育种年 限,为新品种的 培育开辟了新途 径。
花粉粒(1N)
单倍体植株(1N)
二倍体纯合子植株 (2N)
一、基础知识：
花丝
雄蕊
花药：囊状结构,内有很多花粉
P37
（一）被子植物的花粉发育 1.被子植物的花粉是在 花药
中由
花粉母
月季花药培养知识点
《月季的花药培养》1．生殖细胞和体细胞一样，在离体条件下，也具有全能性。
2．填写下列月季育种流程图：1．被子植物的花粉是在花药中由花粉母细胞经过减数分裂形成的。
2．3．被子植物的花粉的发育要经历四分体时期，单核期和双核期等阶段。
在正常情况下，一个小孢子母细胞可以产生8个精子；在一枚花药中可以产生很多个花粉。
1．产生花粉植株（单倍体植株）的途径：花粉通过胚状体阶段发育为植株，二是通过愈伤组织阶段发育为植株。
这两条途径取决于培养基中激素的种类及其浓度的配比。
2．填写培育花粉植株的途径图解：3．胚状体的结构及其发育过程与种子胚相似，所以把胚状体到丛芽的过程称为分化，而把从愈伤组织到从芽的过程称为再分化。
1．影响花粉植株的主要因素：材料的选择和培养基的组成等。
2．材料的选择：从花药来看，应当选择初花期的花药；从花粉来看，应当选择单核期的花粉；从花蕾来看，应当选择完全未开放的花蕾。
3．影响花粉诱导成功率的因素还有哪些？植物种类、亲本生长条件、材料的低温处理、接种密度、培养基组成、培养条件等。
【思考】花瓣松动会给材料消毒带来困难，原因是外界微生物容易侵入到花药中。
二、实验操作1．选择花药时一般通过镜检确定花粉发育时期，对花粉细胞核进行染色最常用的染色剂有醋酸洋红溶液和焙花青－铬钒溶液，它们分别可以将细胞核染成红色和蓝黑色。
2．在使用焙花青－铬钒溶液时，需要首先将花药用卡诺氏固定液处理20m in。
该试剂的配制方法是将无水酒精和冰醋酸按体积比为3：1的比例混合均匀。
3．填写下列流程图：1．剥取花药：要在无菌条件下剥取花药，一注意不要损伤花药，原因是受伤部位容易产生愈伤组织；二要彻底除去花丝，原因是花丝不利于愈伤组织或胚状体的形成。
2．接种花药：剥取的花药接种到MS培养基上，每个培养瓶接种7～10个花药。
3培养花药：幼苗形成之前不需要（需要、不需要）光照。
培养20－30d 后，花药开裂，长出愈伤组织或释放出胚状体。
《月季花药培养》课件
适宜的温度、光照和湿度 有利于花药分化和植株生 长。
常见问题及解决方法
花药变黑
可能是由于细菌或真菌感染，应立即更换无菌培养基。
花药不分化
可能是培养基配方不合适，尝试调整培养基成分。
植株生长缓慢
可能是环境条件不适宜，调整温度和光照条件。
培养花药的注意事项
• 进行花药培养前，确保所有实验器具和培养基无菌。 • 选择健康的花药，避免使用受伤或感染的花朵。 • 注意花药的培养温度和光照条件，保持适宜的湿度。
总结和展望
通过学习花药培养的方法和技巧，我们能够更好地繁殖月季植株并提高繁殖 效率。未来，我们可以进一步研究优化花药培养条件，以及利用花药培养技 术改良月季植株和育种。
1
收集花药
选择健康的花朵，剪下花药并放入无菌培养基。
2
培养花药
置于合适的温度和光照条件下，观察花药的生长和分化。
3
分化植株
将花药中的愈伤组织分离培养，培养出月季植株。
影响花药培养效果的因素
1 花药质量
健康的花药有更好的分化 和生长能力。
2 培养基配方
3 环境条件
合适的培养基成分和浓度 对花药培养效果至关重要。
《月季花药培养》PPT课 件
探讨月季花药培养的方法和技巧，介绍培养花药的重要性，步骤，影响培养 效果的因素，解决常见问题，以及花药培养的注意事项。
花药培养的重要性
花药培养是一种重要的植物繁殖方法，可以大大提高繁殖效率和遗传多样性。 通过花药培养，我们可以快速繁步骤
月季的花药培养图文详解
防止褐变
褐变是月季花药培养中常见的问题之一，主要是由于多酚氧化酶的活性引起的。为了防止褐变，可以 在培养基中加入适量的抗氧化剂或抑制剂，如维生素C、柠檬酸等。此外，保持适宜的温度和湿度也 能减少褐变的发生。
05
月季花药培养的应用与前景
在月季育种中的应用
创造新种质
通过花药培养，可以获得单倍体植株，进而通过染色体加倍技术 获得纯合二倍体，为月季育种提供新的种质资源。
克服远缘杂交不亲和性
利用花药培养技术，可以克服不同种、属间杂交的不亲和性，实现 远缘杂交育种。
缩短育种周期
通过花药培养获得单倍体植株后，经染色体加倍可迅速获得纯合品 系，大大缩短了育种周期。
在月季快繁中的应用
快速繁殖
利用花药培养技术，可以在短时间内 获得大量遗传背景一致的植株，实现 月季的快速繁殖。
月季花药培养的原理
月季花药培养是植物组织培养的一种，其原理是利用月季花 药中的花粉粒作为外植体，通过诱导其脱分化形成愈伤组织 ，再经过再分化形成完整植株。
在月季花药培养中，需要选择适宜的培养基和激素配比，以 诱导花粉粒的脱分化和再分化。同时，还需要控制培养条件 ，如温度、光照、湿度等，以保证培养的成功。
月季花药培养的重要性
01
02
03
获得纯合基因型
通过花药培养可以获得纯 合的基因型，为月季育种 提供重要的遗传材料。
加速育种进程
花药培养可以大大缩短育 种周期，提高育种效率。
创制新种质
通过花药培养可以创制新 的种质资源，丰富月季的 基因库，为月季育种提供 更多的选择。
02
月季花药培养的基本原理
植物组织培养概述
植物组织培养是一种利用植物细胞的全能性，通过无菌操作分离植物体的一部分 （如茎尖、根尖、花药、叶片、嫩芽、幼胚等），接种到培养基上，在人工控制 的条件下进行培养，使其长成完整的植株或生产具有经济价值的其他产品的技术 。
褐变是月季花药培养中常见的问题之一，主要是由于多酚氧化酶的活性引起的。为了防止褐变，可以 在培养基中加入适量的抗氧化剂或抑制剂，如维生素C、柠檬酸等。此外，保持适宜的温度和湿度也 能减少褐变的发生。
05
月季花药培养的应用与前景
在月季育种中的应用
创造新种质
通过花药培养，可以获得单倍体植株，进而通过染色体加倍技术 获得纯合二倍体，为月季育种提供新的种质资源。
克服远缘杂交不亲和性
利用花药培养技术，可以克服不同种、属间杂交的不亲和性，实现 远缘杂交育种。
缩短育种周期
通过花药培养获得单倍体植株后，经染色体加倍可迅速获得纯合品 系，大大缩短了育种周期。
在月季快繁中的应用
快速繁殖
利用花药培养技术，可以在短时间内 获得大量遗传背景一致的植株，实现 月季的快速繁殖。
月季花药培养的原理
月季花药培养是植物组织培养的一种，其原理是利用月季花 药中的花粉粒作为外植体，通过诱导其脱分化形成愈伤组织 ，再经过再分化形成完整植株。
在月季花药培养中，需要选择适宜的培养基和激素配比，以 诱导花粉粒的脱分化和再分化。同时，还需要控制培养条件 ，如温度、光照、湿度等，以保证培养的成功。
月季花药培养的重要性
01
02
03
获得纯合基因型
通过花药培养可以获得纯 合的基因型，为月季育种 提供重要的遗传材料。
加速育种进程
花药培养可以大大缩短育 种周期，提高育种效率。
创制新种质
通过花药培养可以创制新 的种质资源，丰富月季的 基因库，为月季育种提供 更多的选择。
02
月季花药培养的基本原理
植物组织培养概述
植物组织培养是一种利用植物细胞的全能性，通过无菌操作分离植物体的一部分 （如茎尖、根尖、花药、叶片、嫩芽、幼胚等），接种到培养基上，在人工控制 的条件下进行培养，使其长成完整的植株或生产具有经济价值的其他产品的技术 。
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【课题重点】
Ø1.被子植物花粉发育过程。 2.花药离体培养过程。
【课题难点】 Ø花药离体培养过程。
【导学案反馈】
v 1.优点：书写认真，整体完成情况较好。
v 2.不足： ①探究能力有待提高 。 ②解决实际问题的能力较弱。 ③部分同学预习不充分，答题欠思考。
v 3.改进措施：认真研读课本，理清思路，注重分析， 养成好的自学习惯。
分化
胚状体
丛芽
②
花药中 的花粉
脱分化
再分化
愈伤组织
丛芽
诱导
体 变细为胞与胚合（子胚发状育体成）的：胚在非组常织相培似养的移过结程构栽中，，发某育些过细程胞亦在与形合生态子根上胚转类
似
原因：培养基中的激素种类及浓度配比
胚状体发育途径 烟草花药培养
部分花药通过胚状体途径形成小植株
愈伤组织发育途径 水稻花药培养
• 花合瓣适开的花始粉松发动育，期给（材单核ห้องสมุดไป่ตู้居消中毒期带与靠来边困期之间）
• 2长、难调培困节③养激难挑素基；选）的单组成核（期花MS培药养方基法+不：同应比例当的选植物生
•此择易外完消，植全毒株未。生开长条放件的、花材蕾料低，温微预生处理物、少接，种密度等
实验操作
一、材料的选取 二、材料的消毒 三、接种和培养
双核期等阶段 • D、花粉粒在发育过程中，核先位于细胞一侧，再移到
细胞中央
注：花粉母细胞经减数分裂形成4个单核花粉粒，每个花粉粒的 细胞核进行一次有丝分裂形成1个花粉管细胞核和1个生殖细胞 核，每个生殖细胞核再进行一次有丝分裂生成2个精子。
雌蕊 的结构
（二）产生花粉植株的两种途径
花药中 脱分化 ① 的花粉
2 花粉的概念:由花粉母细胞经过减数分裂形成
的单倍体的生殖细胞.
被子植物花粉的发育过程
小孢子母细胞
减数分裂
4个小孢子
(小孢子四分体时期)
小孢子(单核居中期)
小孢子(单核靠边期)
小孢子 有丝分裂 生殖细胞核+花粉管细胞核 （花粉粒的双核期）
生殖细胞将再进行一次有丝分裂，形成两个精子
小孢子母细胞（2n） 减数分裂
小孢子时期（n）
4×2个精子(n) 有丝分裂
4个生殖细胞（n） 4个营养细胞（n）
四分体时期（n） 单核期（n）
4个生殖细胞核（n） 4 个 花 粉管细 胞 核 （n ）
有丝分裂
双核期
注意：
①二核花粉粒：成熟的花粉粒中，只含花粉管细胞核和生殖细 胞核。（精子在花粉管中形成）
②三核花粉粒：有些植物的花粉，在成熟前，生殖细胞进行一 次有丝分裂，形成两个精子，这样的花粉在成熟时，含有一个 花粉管细胞核和两个精子。
花药（在卡诺氏固定液中处理20min）→取出，置于载玻片上 →焙花青－铬矾溶液染色→盖上盖玻片→镜检（花粉粒的细胞核 被染成蓝黑色）
月季花药培养时的花粉粒最好是（ C）
A、四分体时期
B、二核或三核花粉粒
C、单核期
（二）材料的消毒
1、花蕾用体积分数为70%的酒精浸泡30秒 2、无菌水清洗
3、无菌吸水纸吸干花蕾表面的水分
知识回顾
• 单倍体育种的过程？
正常植株（2N）
花药离体培养（N） 单倍体植株（N）
植株（2N）
秋水仙素处理， 使染色体翻倍
特点：1 明显缩短育种年限
2 后代植株都为纯合子。
花的结构
花托 花萼 花瓣 雄蕊
雌蕊
花药
花丝 柱头 花柱 子房
一、基础知识
（一）被子植物的花粉发育
1 雄蕊
花丝 花药：囊状结构，内有很多花粉
接种在平板上的水稻花药
部分花药产生愈伤组织
愈伤组织转接种到再生培养基
愈伤组织分化形成再生植株
(三注)、意影：响选择花最药合培适养的的花主粉要发因育素时期:
• 1、材料的选择 单核期
• 不同①植不物选的择诱单导核成功期率之不前同花. 药原因：
•
花同药一质植物地的幼不嫩同，生容理易状破况碎也对；诱导成功率有 直接的②影不响选. 择（一单般核选期月季之的后初花花药期）原因：
例题1：两个精子和花粉管细胞核的基因型相同？
③
减数分裂
1花粉母细胞
4个小孢子
有丝分裂
4个花粉管细胞核 N
2N
N
4个生殖细胞核
有丝分裂
N 8个精子
• 1、关于被子植物花粉发育的说法，不正确的是（BD） • A、花粉粒是在花药中的花粉囊里形成的 • B、被子植物精子的形成是直接减数分裂的结果 • C、被子植物的花粉的发育要经历四分体时期、单核期、
一般经过20-30天培养后，会发现花药开裂，长出造愈成伤的组织 或释放出胚状体。将愈伤组织及时转移到分化培养基上，以便 进一步分化出再生植株。
4 进一步鉴定和筛选：常常会出现染色体倍性的变化
植物组织培养技术与花药培养技术的比较
1 、离体培养的外植体 为体细胞。
4、放入质量分数为0.1%的氯化汞溶液中2～4分钟 （质量分数为1%的次氯酸钙溶液或饱和漂白粉溶液）
5、无菌水冲洗3～5次
花药的外面有花萼、花瓣保护，通常处于无菌状态
为什么花瓣松动会给 为什么花瓣松动会给 材料的消毒带来困难？ 材料的消毒带来困难？
答：花瓣松动后，微 生物就可能侵入到花药， 给材料的消毒带来困难。
（一）材料选取
1、从花药看：月季的初花期 从花粉看：单核期 从花蕾看：完全未开放的
2、通过镜检来确定是否处于适宜的发育期。 方法：醋酸洋红法(将染色体染成红色)
花药（载玻片上）→1%的醋酸洋红1滴→用镊柄将花药捣碎， 盖上盖玻片→镜检（花粉粒的细胞核被染成红色）
焙花青-铬矾法(花粉细胞核染成蓝黑色)。
（三）接种和培养
1 灭菌后花蕾，要在无菌条件 下除去萼片和花瓣， 并立即将花药接种到培养基上。
2 在剥离花药时，要尽量不损伤花药（否则接种后， 容易从受伤部位产生二倍体的愈伤组织），同时还要彻 底 去除花丝，因为与花丝相连的花药不利于愈伤组织或 胚状体的形成。
3 通常每瓶接种花药 7-10个，温度控制在主花要粉25原管℃因核左是和 右，不需要光照。幼小植株形成后才 需要光照生。殖核融合
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花中皇后月季又称“月月红”，自然花期5至11月 ，开花连续不断 ，通常扦插就可以成活。
课题2 月季的花药培养
【课题目标】
Ø1.识记被子植物花粉发育的过程。 Ø2.通过学习花药培养的基本技术， 培养设计试验、动手操作、分析解 释实验现象的能力。