激素对血糖浓度影响及血糖浓度的测定
血糖的测定及激素对血糖浓度的影响

通过计算比较一下家兔注射前后血糖浓度的变 化情况。
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五 分析
(1) 对家兔而言血糖正常值:2.8-5.2 mmol/L, 验证是否在此范围。 (2) 从实验结果来验证胰岛素降低血糖以及肾上 腺素升高血糖的作用。
按表操作:
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加入物(ml) 测定管(注射前) 测定管(注射后) 标准管
去蛋白血滤液
0.5
0.5
处理后的葡萄糖
0.5
空白管
标准应用液
蛋白沉淀剂
酶酚混合试剂
3
0.5
3
3
3
混匀,置37℃水浴15分钟调波长为505nm,
以空白管调零,分别读取A测A标,根据标准管法求
测定管血糖浓度。
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四 结果与计算
葡萄糖越多,生成的醌类物质就越多,颜 色就越深,通过所讲过的比色法,求出它的葡 萄糖含量,即血糖浓度。(标准管法)
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三 操作
1.准备抗凝试管:首先放入试管一小勺抗凝剂 (草酸钠)。
2.分组。称重:Kg,共有四只兔子,两只注射 胰岛素,两只注射肾上腺素。兔子抓取方法: 一手抓取颈部皮肤,另一只手托臀部,把它放 在天平上称重。
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二 原理
(2) 显色原理 葡萄糖在葡萄糖氧化酶的催化下生成葡
萄糖酸,并产生过氧化氢,过氧化氢被过氧 化物酶(POD)催化释放初生态氧,氧又对 与色原性氧受体4-氨基安替比林偶联的酚氧 化,并与4-氨基安替比林结合生成红色醌类 化合பைடு நூலகம்。
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葡萄糖+O2+H2O GOD 葡萄糖酸+H2O2 4-氨基安替比林+酚+H2O2 POD 红色醌类 化合物 +4H2O
生化实验胰岛素、肾上腺素对血糖浓度的影响

操作步骤:
• 1.取预先饥饿一昼夜的家兔2只,分别作注射胰岛素和肾上腺素 标记,称重并记录之。 • 2.取血 固定家兔,用手轻柔耳缘,以二甲苯棉球涂擦耳翼背面, 使耳静脉血管扩张,用抗凝剂处理后的注射器从耳缘静脉远端 刺入血管,一次采血5~10ml,取血后用干棉球压迫耳静脉止血, 立即注入盛有抗凝剂的离心管内,并标明“胰前”、“肾前”, 轻轻摇匀以防血液凝固。冬天室温较低时,耳静脉采血往往失 败,因此可以心脏穿刺采血:左侧3~4肋间,触摸心跳最明显处, 消毒后穿刺进针取血。 • 3.注射激素 向家兔腹部皮下按1ml/kg分别注射胰岛素和肾上腺 素应用液。记录注药时间。 • 4.注射胰岛素50分钟,注射肾上腺素30分钟后,分别按上述方 法取血,标以“肾后”“胰后”。 • 5.3000r/min离心5分钟分离血浆备用。
实验器材
• 1.胰岛素注射液(市售胰岛素【40IU/ml】 0.3ml加灭菌注射用水7.7ml,混匀,使之成 1.5IU/ml浓度胰岛素应用液。) • 2.肾上腺素注射液 取1:1000的肾上腺素1.5ml 加热煮沸冷却后的生理盐水2.5ml,混匀即得 含原液0.375ml的肾上腺素应用液。 • 3.葡萄糖氧化酶法测定血液的相关试剂。 • 4.二甲苯棉球、干棉球、注射器。 •清) 葡萄糖标准液 (5.5mmol/L) 蒸馏水 空白 / / 20 标准 / 20 / 胰前 20 / / 胰后 20 / / 肾前 20 / / 肾后 20 / /
酶酚混合液
2.0
2.0
2.0
2.0
2.0
2.0
将各管分别混匀后,置37℃恒温水浴保温15min,冷却 至室温,分光光度计波长505nm处,空白管矫正吸光度值为 零,读取数值
胰岛素、肾上腺素对血糖浓度的影 响
实验十一 激素对血糖浓度的影响

实验十一激素对血糖浓度的影响【目的】1.掌握血糖的测定原理及方法。
2.掌握血糖的正常范围及意义。
3.熟记胰岛素及肾上腺素对血糖浓度的影响并解释其作用机制。
【原理】人和动物体内的血糖浓度均维持在一定范围内。
这是由于体内存在多种激素及调节物质,在它们的共同作用下,使糖酵解、糖氧化、糖原合成与分解、糖异生、脂肪合成与分解等代谢途径协同进行。
胰岛素可通过以下几种途径降低血糖:①促进肌肉、脂肪细胞的载体转运葡萄糖人内;②抑制蛋白激酶A,继而使糖原磷酸化酶活性降低:激活糖原合酶脱磷酸酶,从而使糖原合酶活性升高,加速肌肉、肝脏的糖原合成;③通过第二信使间接激活丙酮酸脱氢酶,加速丙酮酸氧化脱羧生成乙酰CoA;④抑制磷酸烯醇式丙酮酸激酶活性,促进氨基酸进入肌肉合成蛋白质,从而降低糖异生;⑤抑制脂肪动员,促进糖有氧氧化。
肾上腺素的作用与胰岛素相反,起升高血糖的作用。
肾上腺素升高血糖的作用迅速而明显,它通过与肝和肌肉细胞膜受体结合而激活磷酸化酶,产生级联放大效应,从而加快糖原的分解、肝释放葡萄糖、肌肉输出乳糖供肝糖异生等,最终导致血糖升高。
本实验观察家兔在注射胰岛素和肾上腺素前后空腹血糖浓度的变化。
血糖含量的测定采用葡萄糖氧化酶法。
首先用钨酸钠及盐酸沉淀血清中的蛋白质,制备血滤液。
在葡萄糖氧化酶的催化作用下,血滤液中的葡萄糖被氧化成葡萄糖酸,并产生1分子过氧化氢;过氧化氢被偶联的过氧化物酶催化放出氧,氧将试剂中的4-氨基安替吡啉偶联酚(还原性氧受体)的酚氧化,生成红色的醌类化合物,其颜色深浅与葡萄糖的含量成正比,此溶液与经同样处理的标准葡萄糖溶液进行比色测定,即可求出血糖含量。
葡萄糖氧化酶葡萄糖——————>葡萄糖酸+H202过氧化物酶H20——————>H20+02O2+4-氨基安替吡啉偶联酚——————>醌类化合物(红色)葡萄糖氧化酶法测定血糖的特异性较高,能干扰测定结果的物质较少,如溶血样本血红蛋白浓度达lOg/L、黄疸样本胆红素浓度达342Um以及样本中所含的少量尿素、肌酐、甘油三脂等均不影响测定结果。
2. 胰岛素、肾上腺素对血糖含量的影响

A1
1.0 1.0 1.0 1.5
B1
1.0 1.0 1.0 1.5
B2
1.0 1.0 1.0 1.5
空白管
1.0 1.0 1.0 1.5
摇匀,置于沸水浴准确煮8min,取出时切勿摇动,置于冷水中冷却 混匀,放置3min后加水 混匀后,以空白管调零,在620nm处比色
吴宪-Folin法测定葡萄糖原理
无蛋白质血滤液中的葡萄糖在碱性溶液中
与硫酸铜共热,蓝色的二价铜被还原成砖红色
的氧化亚铜沉淀,氧化亚铜再使磷钼酸还原成 蓝色钼化合物 (钼蓝),与同样处理的标准葡萄 糖溶液比色,即可算出葡萄糖的含量。
Na2CO3+H2O=NaOH+NaHCO3 2NaOH+CuSO4=Cu(OH)2+Na2SO4 C6H12O6+2Cu(OH)2=Cu2O↓+2H2O+C5H11O5COOH
无蛋白血滤液的制备
3.5mL蒸馏水 + 0.1mL 抗凝血 + 0.2mL 0.33mol/L硫酸 + 0.2mL 10% Na2WO4(钨酸钠) 待清澈液出现,采用滤纸过滤,得滤液即为 无蛋白血滤液
样品葡萄糖浓度测定操作步骤
标准管
25mg/L 标准葡萄 糖溶液(mL) 无蛋白质血溶液 (mL) 蒸馏水(mL) 碱性铜试剂(mL) 磷钼酸试剂(mL) 蒸馏水(mL) A620nm 1.0 1.0 1.0 1.5
c血糖
样品葡萄糖浓度的计算
A测定管 A标准管
× C标准 × 稀释倍数 = 血糖浓度
ΔC血糖 × 100% = 血糖浓度变化 C血糖()注药前
注意事项
1. 剃兔耳毛时,先用水润湿后在剃毛,要求耳缘静脉四 周要剃干净,否则取血时不易收集;
血糖测定(葡萄糖氧化酶过氧化物酶法)及肾上腺素对血糖浓度的影响

因
1.肾上腺素
素
一、升高血糖 2.胰高血糖素
3.各种激素
3.糖皮质激素
二、降低血糖:胰岛素(体内唯一)
葡萄糖-6-磷酸酶只存在于肝、肾中,而不存在于肌肉中。 所以肌糖原不能分解成葡萄糖,只能进行糖酵解或有氧氧化。
生化教研室 朱欣婷
肾 肝+肌的细胞膜受体
上
腺
素
升 血 cAMP
加速糖原分解,
糖
使血糖升高!
选择皮肤较薄、皮下组织疏松 而血管较少的腹部,在注射局 部用消毒棉球将毛向四周分开, 以左手的拇指、食指和中指将 皮肤轻轻捏起,形成一个皱褶, 右手将注射器针头刺入皱褶皮 下,深约1.5-2厘米,药液注 完后,用酒精棉球按住进针部 皮肤,拔针,轻按进针部皮肤。
三.第二次取血(注射药物后30 min) 四.血糖测定操作(P55) 五.尿糖检测(P56)
选择皮肤较薄皮下组织疏松而血管较少的腹部在注射局部用消毒棉球将毛向四周分开以左手的拇指食指和中指将皮肤轻轻捏起形成一个皱褶右手将注射器针头刺入皱褶皮下深约152厘米药液注完后用酒精棉球按住进针部皮肤拔针轻按进针部皮肤
实验七
血糖测定(葡萄糖氧化酶-过氧化物酶 法)及肾上腺素对血糖浓度的影响
遵义医学院生物化学教研室 朱欣婷
实验安排
一.第一次取血(未施药) 二.皮下注射肾上腺素 三.实验内容的讲解 四.第二次取血(注射药物后30 min) 五.血糖测定操作(比较注射肾上腺素前后血糖水平) 六.尿糖检测
生化教研室 朱欣婷
1.掌握葡萄糖法测定血糖浓度的原理及方法; 2.观察肾上腺素对家兔血糖浓度的影响; 3.熟悉尿糖的半定量检测; 4.了解血糖测定的临床意义。
生化教研室 朱欣婷
激素对血糖的调节

激素对血糖的调节第一实验组一、【实验目的和原理】目的:本实验旨在通过对血糖浓度的测定掌握胰岛素、胰高血糖及肾上腺素对血糖浓度的影响,并了解血糖测定的方法。
原理:胰岛素是降低血糖的激素,胰高血糖素、肾上腺素等是体内升高血糖的激素。
本实验将小白鼠作为实验对象,其血糖浓度可用电化学血糖仪测定。
此类血糖仪的原理是通过测量血液中的葡萄糖与试纸中的葡萄糖脱氢酶反应产生的电流测量血糖。
二、【实验对象】小白鼠三、【实验器材和药品】哺乳动物手术器械一套注射器、生理盐水、加盖的箱子戊巴比妥钠溶液、鼠源胰岛素溶液5:100000肾上腺素、鼠源胰高血糖素溶液四、【实验步骤和项目】1、随机分组:选身体健康、体重相近、品系相同的小鼠8只,随机分成A、B两组,每组分别编号1、2、3、4,并对每只小鼠称重并记录;2、麻醉处理:由A组小鼠尾端注射2%的戊巴比妥钠,0.005ml/g,待动物麻醉后仰卧固定在手术台上,在剑突右侧腹部打开腹腔,切除胰腺,缝合伤口;B组在和A组做手术的部位做同样的伤口,然后缝合伤口,测量每只小鼠血糖浓度,记录实验数据;3、药物处理在小白鼠安静后,分别给A、B两组1号小鼠注射胰岛素0.1ml/10g体重;2号小鼠注射胰高血糖素0.5ml,3号小鼠注射肾上腺素0.5ml,4号小鼠注射生理盐水0.5ml;4、记录数据将小白鼠放在加盖的箱子里,每2分钟用血糖仪测量一次,记录试验数据;5、绘制曲线实验结束后作小鼠血糖浓度变化标准曲线。
五、【注意事项】实验的给药方式是静脉注射,应当注意正确的捉拿动物的手势和注射的部位,同时要注意给药的剂量,包括药物的配液和注射器的定量。
此外,注射完药品后通常要放在一个加盖的箱子里观察小鼠的反应,反应除了受剂量影响外,还与周围的温度相关联,温度越高反应发生的比例也越高。
六、【预期结果】1、以未注射激素前小鼠的血糖浓度作为参照;2、A组1号小鼠血糖浓度明显降低至低于参照浓度, 2号和3号小鼠血糖浓度明显升高至高于参照浓度,4号小鼠血糖浓度略微下降;3、B组1号小鼠血糖浓度逐渐降低然后回复至参照浓度,2号和3号小鼠血糖浓度逐渐升高然后恢复至参照浓度,4号小鼠血糖浓度没有明显变化。
实验五胰岛素、肾上腺素对血糖浓
6.取4支试管按下表操作(单位:ml)
空白管
标准管 样品管1(空腹)
样品管2(用药)
蒸馏水 1.0
-
-
-
标准液
-
1.0
-
-
血滤液
-
ห้องสมุดไป่ตู้
-
1.0(空腹)
1.0(用药)
邻甲苯
胺试剂 2.5
2.5
2.5
2.5
混匀,100℃水浴8分钟,冷却。630nm比色,读取光密度。
计算
血糖mg/dl =
(mg%)
测定管吸光度 标准管吸光度
4.邻甲苯胺具有毒性和腐蚀性,操作时要注意。
临床意义 1.血糖升高:病理性主要见于糖尿病,其
他内分泌疾病如肾上腺皮质机能亢进,垂体 前叶机能亢进等。
2.血糖降低:病理性如胰岛细胞瘤、胰岛 素分泌过多,过量胰岛素治疗,肾上腺皮质 功能减退等。
本次实验报告已论文形式书写
标题 作者 单位 邮编 【摘要】目的: 方法: 结果: 结论: 【关键词】3-5个 正文 简介 材料与方法 1 实验材料 1.1仪器 1.2试剂 2 实验方法 详述实验步骤(如给药、取血等) 结果 各管OD值,给药前后OD及计算 讨论 参考文献 作者(3人以上就写等) 标题 杂志名 年,卷(期):页码(起-止)
激素对血糖浓度的影响及血糖浓度的测定
激素对血糖浓度的影响及血糖浓度的测定周雅琳武汉科技大学医学院预防医学1101班湖北武汉430065【摘要】目的:探讨胰岛素及肾上腺素对血糖浓度的影响并解释其作用机制方法:邻甲苯胺法。
结果:注射胰岛素的家兔血糖浓度降低,注射肾上腺素的家兔血糖浓度升高。
结论:胰岛素使血糖浓度降低,肾上腺素血糖浓度升高。
【关键词】胰岛素;肾上腺素;血糖所谓血糖就是指血液中的葡萄糖。
正常情况下空腹血糖水平相对恒定,在神经激素调节下血糖的来源和去路达到动态平衡的结果。
调节血糖的激素有:胰岛素,肾上腺素,胰高血糖素,肾上腺皮质激素,生长素和甲状腺素等。
胰岛素是体内唯一能使血糖降低的激素,其他激素均能使血糖浓度升高。
1.材料与方法1.1药物和化学试剂:肾上腺素(1㎎/ml);胰岛素(5单位/ml);碘酒、消毒酒精;饱和硼酸溶液;邻甲苯胺-硼酸(O-toluidine-Boric acid,O-TB)试剂;5%三氯醋酸;饱和苯甲酸;标准葡萄糖贮存液(1.0ml=10㎎葡萄糖);标准葡萄糖应用液(1ml=0.1㎎葡萄糖)1.2实验仪器与设备:低速离心机;722分光光度计;恒温水浴锅;注射器;1.3 实验步骤:(1)取正常家兔两只,实验前使其预先饥饿14~16小时,从耳缘静脉取血使血液滴入盛有草酸钠抗凝剂的小烧杯中,边收集边摇匀以防血液凝固;(2)取空腹血后给其中一只家兔注射胰岛素(剂量为5单位/公斤体重),记录时间半小时后再从耳缘静脉取血。
分别测定注射胰岛素前后血糖浓度;(3)给另一只家兔皮下注射肾上腺素(剂量0.5㎎/每只动物)。
记录注射时间,并与半小时后采血。
分别测定注射肾上腺素前后血糖浓度;(4)三氯醋酸无蛋白血滤液的制备:去抗凝血0.4 m,用滤纸擦净粘附于吸管尖端外表面的血,然后放入以洁净的小试管中(要求吸管内壁不要粘附血液),并用吸耳球将管尖剩余血液吹入试管中。
再加入5%三氯醋酸3.6 ml,边加边摇匀。
3000rmp离心5分钟,上清液极为无蛋白血滤液。
血糖实验
题目激素对血糖浓度的影响及血糖浓度的测定系部医学院专业临床班级临床1004学号200909155140姓名刘兴志指导教师赵雪花完成日期2011 年9 月16日【摘要】目的:(1)掌握血糖测定的原理和方法。
(2)掌握血糖正常的范围和意义。
(3)熟记胰岛素和肾上腺素对血糖浓度的影响,并解释其作用机制。
方法:取正常家兔两只,饥饿14-16小时,各空腹取血10ml,在相同的实验条件下,其中一只注射胰岛素(5单位/公斤),另一只注射肾上腺素(0.5mg/只),半个小时后再次取血。
测量血糖浓度。
结果:注射胰岛素的家兔,血糖浓度降低,注射肾上腺素的家兔,血糖浓度升高。
结论:胰岛素可以降低血糖,肾上腺素可以升高血糖。
【关键词】胰岛素,肾上腺素,血糖浓度。
材料与方法1.实验材料与试剂正常家兔两只。
肾上腺素(1mg/ml),胰岛素(5单位/ml),碘酒,消毒酒精,棉球,饱和硼酸溶液(6g溶于100ml蒸馏水中摇匀后放置过夜后过滤即可),邻甲苯胺-硼酸,5%三氯醋酸溶液,饱和苯甲酸溶液,标准葡萄糖贮存液,标准葡萄糖应用液。
2.实验对象正常家兔3.实验方法步骤3.1取正常家兔两只。
实验前预先饥饿14-16h,称其体重并记录(2-3公斤为宜)。
3.2药前取血。
先用剪刀剪去家兔耳缘的兔毛,然后用酒精擦拭,使其耳缘静脉充血,再用干棉球擦干。
碘酒,酒精消毒后用7号针头穿刺耳缘静脉,然后用盛有抗凝剂(草酸钠,2mg/ml血)的小烧杯收集10ml左右的血液。
收集时注意摇匀以防血液凝固。
取血完毕,用干棉球压迫止血。
3.3 注射胰岛素和肾上腺素。
取血完毕后,给其中一只家兔注射胰岛素(5单位/公斤为宜),另一只注射肾上腺素(0.5mg/只为宜)。
注射完毕后,稳定家兔情绪,放回兔笼。
3.4药后取血。
药后半小时,再次从耳缘静脉取血。
方法同3.2。
3.5制备无蛋白学滤液。
用微量加样器取抗凝血0.4ml,滤纸擦净粘附于吸管尖端外表的血液,缓慢注入洁净小试管。
胰岛素和肾上腺素对血糖浓度的影响
激素对血糖浓度的影响及血糖浓度的测定刘峡汛11. 武汉科技大学医学院临床1105班湖北武汉430065[摘要]目的:观察家兔注射肾上腺素或胰岛素前后血糖水平的变化方法:采用邻甲苯胺法测血糖浓度。
结果:注射胰岛素的家兔空腹血糖含量为182mg/dL,药后血糖含量为129mg/dL;注射肾上腺素的家兔空腹血糖含量为81mg/dL,药后血糖含量为119mg/dL。
结论:胰岛素会使血糖浓度降低,肾上腺素会使血糖浓度升高。
[关键词]血糖浓度胰岛素肾上腺素引言:正常情况下,血糖浓度在各种因素调解下,维持相对恒定,但现如今糖尿病可谓是医学界的一大顽症,目前并无良药可医,对于此种病当以预防为主。
因此身为医学生,掌握激素对血糖浓度的影响及如何测量血糖浓度显得有为重要。
原理:1.血糖浓度即指血液中的葡萄糖浓度。
血糖水平相当恒定,维持在80—120mg/dL之间。
空腹血糖水平的相对恒定是在神经激素调节下血糖的来路和去路达到动态平衡的结果,其中激素调节站主导地位。
调节血糖的激素有:胰岛素,肾上腺素,胰高血糖素,肾上腺皮质激素,生长素和甲状腺激素。
胰岛素是体内唯一能使血糖降低的激素,其他激素均使血糖升高。
2.葡萄糖在热的冰醋酸溶液中可脱水生成5-羟甲基-2-呋喃甲醛,后者与邻甲苯胺缩合,生成蓝绿色的西夫氏碱,其色泽的深浅与葡萄糖浓度成正比。
1.材料与方法1.1材料仪器:722型分光光度计试剂:1.正常家兔(实验前预先使其饥饿14—16小时)两只。
称体重,一只为2.55kg,另一只为1.8kg。
2.肾上腺素(1mg/1ml)3.胰岛素(5单位/ml)4.碘酒,消毒酒精5.饱和硼酸溶液:取硼酸6g,溶于100ml蒸馏水中,摇匀,放置过夜后过滤,即可应用。
6.邻甲苯胺试剂:取冰醋酸(AR)940ml,加入硫脲(AR)1.5g,溶解后加入邻甲苯胺60 ml混匀,置棕色瓶中,室温保存。
新配试剂应放置24小时后(待老化)使用。
此试剂腐蚀性极强,应避免与皮肤接触而造成灼伤。
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生物化学实验
实验名称:激素对血糖浓度影响及血糖浓度的测定
时间:2014年6月9日星期一
姓名:
学号:201312201202003
指导老师:毛水龙老师
一,实验目的
掌握血糖的测定原理和方法;掌握血糖的正常范围及意义;熟悉调节血糖的激素对血糖浓度的影响。
二,实验原理
家兔动物实验。
获取家兔注射激素前后的血液样本并对其;进行血糖测定。
邻苯甲胺方法测定血糖浓度。
实验采取前后对照的方法,对家兔注射肾上腺素和胰岛素,并通过耳缘静脉采血,获取激素注射前后的血液样本,采用邻甲苯胺法处理样本,最终与标品比色得出结论。
1.调节血糖的激素有:胰岛素、肾上腺素、胰高血糖素、肾上腺皮质激素、生长素和甲状腺素等。
胰岛素是体内唯一能使血糖降低的激素,其他激素均使血糖升高。
2.肾上腺素升高血糖的机制主要作用于肝细胞膜受体,通过cAMP-蛋白激酶系统激活肝磷酸化酶,同时抑制糖原合成酶,导致肝糖原分解加速。
胰岛素降低血糖的机制是:降低肝细胞cAMP水平,从而抑
制肝磷酸化酶,激活糖原合成酶,促进肝糖原的合成;胰岛素诱导糖酵解关键酶类的合成,阻遏糖异生关键酶的合成;胰岛素促进葡萄糖进入红细胞、肌肉等组织的异化扩散,促进糖的利用。
3.血液中的葡萄糖,在热的冰醋酸溶液中可脱水生成5-羟甲基-2-呋喃甲醛(或称羟甲基糠醛)。
后者在与邻甲苯胺缩合,生成蓝绿色的西夫式碱(Schiffbase)。
其色泽的深浅与葡萄糖浓度成正比。
与同样处理的标准葡萄糖溶液比色,即可求得待测血液中葡萄糖的含量。
三,实验材料
1.材料:家兔两只,刀片,草酸钠,小烧杯。
2.试剂:①肾上腺素(1mg/lml)②胰岛素(20单位/ml)③碘酒、消毒酒精④饱和硼酸溶液⑤邻甲苯胺-硼酸⑥5%三氯醋酸溶液⑦饱和苯甲酸溶液⑧标准葡萄糖贮存液⑨标准葡萄糖应用液
四,实验方法
1.取健康正常家兔一只,实验前饥饿14~16h左右,称体重。
2.耳缘静脉采血。
小刀刮去耳缘的毛,用酒精棉球擦拭使其充血,再用干棉球擦干。
刀片划开耳缘静脉,使血液滴入成有足够草酸钠的小烧杯中,注意收集期间要不断地晃动烧杯防止血液凝固。
采集完毕后干棉球压迫血管止血。
3.给家兔注射肾上腺素(0.5mg/只),半小时后同样方法采得血液。
4.缓缓放入洁净试管内,加5%三氯醋酸3.6ml,同时摇动使之充分混匀。
3000rpm离心5min,制得无蛋白血滤液(上清液)。
5.取四支试管,分别加入2.5ml邻甲苯胺试剂。
并向试管1加入1ml
蒸馏水,试管2加入1ml标准葡萄糖应用液,试管3加入1ml注射激素前的血液的无蛋白滤液,试管4加入1ml注射激素后的血液的无蛋白滤液。
6.混匀后沸水加热8min,取出并用自来水冲洗试管使之冷却。
而后置于722型分光光度计630nm比色,空白管校正零点。
7.表加试剂如下表:
同理,对家兔进行肾上腺素注射(剂量为5单位/公斤体重)并进行上述步骤,最终得出结果。
五,实验结果
据试验,在注射胰岛素实验中,家兔重量为2.95公斤,依照比例注射15单位的胰岛素。
在注射肾上腺激素的实验中,家兔重量为2.90公斤,注射1mg的肾上腺激素。
血糖测定:(葡萄糖标准液浓度为5.50m m o l/L)
由此得出:
注射胰岛素前血糖浓度为14.79mmol/L。
注射胰岛素后血糖浓度为4.73 mmol/L。
注射肾上腺激素前血糖浓度为12.83 mmol/L。
注射肾上腺激素后血糖浓度为20.70 mmol/L。
得出结论:注射胰岛素可有效的降低血糖。
2.注射肾上腺素能使血糖上升。
六,讨论
实验中要注意如下问题:
1.采血及注射激素时,应尽量使家兔保持安静。
家兔不安静的情况下,肾上腺素分泌增多,血糖浓度升高,对实验结果有影响。
2.采血后要及时分离出血浆,避免溶血。
溶血时红细胞内糖类扩散到血浆中,会对实验结果有影响。
3.采血量要准确,不能采得太少不够实验需要的血量,也不能采得太多伤及家兔。
4.由于血细胞不断从血浆摄取葡萄糖加以利用,因此, 采血后及时进行检测,否则血糖浓度将逐渐降低。