血糖的测定及激素对血糖浓度的影响
生化实验胰岛素、肾上腺素对血糖浓度的影响
操作步骤：
• 1.取预先饥饿一昼夜的家兔2只，分别作注射胰岛素和肾上腺素 标记，称重并记录之。 • 2.取血 固定家兔，用手轻柔耳缘，以二甲苯棉球涂擦耳翼背面， 使耳静脉血管扩张，用抗凝剂处理后的注射器从耳缘静脉远端 刺入血管，一次采血5~10ml，取血后用干棉球压迫耳静脉止血， 立即注入盛有抗凝剂的离心管内，并标明“胰前”、“肾前”， 轻轻摇匀以防血液凝固。冬天室温较低时，耳静脉采血往往失 败，因此可以心脏穿刺采血：左侧3~4肋间，触摸心跳最明显处， 消毒后穿刺进针取血。 • 3.注射激素 向家兔腹部皮下按1ml/kg分别注射胰岛素和肾上腺 素应用液。记录注药时间。 • 4.注射胰岛素50分钟，注射肾上腺素30分钟后，分别按上述方 法取血，标以“肾后”“胰后”。 • 5.3000r/min离心5分钟分离血浆备用。
实验器材
• 1.胰岛素注射液（市售胰岛素【40IU/ml】 0.3ml加灭菌注射用水7.7ml，混匀，使之成 1.5IU/ml浓度胰岛素应用液。） • 2.肾上腺素注射液 取1：1000的肾上腺素1.5ml 加热煮沸冷却后的生理盐水2.5ml，混匀即得 含原液0.375ml的肾上腺素应用液。 • 3.葡萄糖氧化酶法测定血液的相关试剂。 • 4.二甲苯棉球、干棉球、注射器。 •清） 葡萄糖标准液 （5.5mmol/L） 蒸馏水 空白 / / 20 标准 / 20 / 胰前 20 / / 胰后 20 / / 肾前 20 / / 肾后 20 / /
酶酚混合液
2.0
2.0
2.0
2.0
2.0
2.0
将各管分别混匀后，置37℃恒温水浴保温15min，冷却 至室温，分光光度计波长505nm处，空白管矫正吸光度值为 零，读取数值
胰岛素、肾上腺素对血糖浓度的影 响
血糖调节实验报告
一、实验目的1. 了解血糖调节的生理机制。
2. 掌握血糖测定方法。
3. 探究胰岛素和胰高血糖素对血糖浓度的影响。
二、实验原理血糖是人体重要的能量来源，其浓度维持在一定范围内对于维持人体正常生理功能至关重要。
胰岛素和胰高血糖素是调节血糖浓度的重要激素。
胰岛素由胰岛B细胞分泌，具有降低血糖浓度的作用；胰高血糖素由胰岛A细胞分泌，具有升高血糖浓度的作用。
三、实验材料与试剂1. 实验材料：家兔、血糖测定仪、胰岛素、胰高血糖素、生理盐水、葡萄糖等。
2. 试剂：血糖测定试剂盒、碘酒、酒精、棉球等。
四、实验方法1. 实验分组：将家兔随机分为四组，每组5只，分别为对照组、胰岛素组、胰高血糖素组和葡萄糖组。
2. 实验步骤：（1）对照组：正常饲养，不进行任何处理。
（2）胰岛素组：将家兔禁食12小时后，每只家兔腹腔注射胰岛素5单位。
（3）胰高血糖素组：将家兔禁食12小时后，每只家兔腹腔注射胰高血糖素0.5mg。
（4）葡萄糖组：将家兔禁食12小时后，每只家兔腹腔注射葡萄糖2g。
3. 血糖测定：注射处理后，分别于0小时、1小时、2小时、3小时、4小时、5小时、6小时、7小时、8小时、9小时、10小时、11小时、12小时测定各组家兔的血糖浓度。
五、实验结果与分析1. 对照组血糖浓度变化：实验结果显示，对照组家兔的血糖浓度在实验过程中保持相对稳定，波动范围在80-120mg/dl。
2. 胰岛素组血糖浓度变化：实验结果显示，胰岛素组家兔的血糖浓度在注射胰岛素后1小时内迅速下降，随后逐渐回升，但仍低于对照组。
3. 胰高血糖素组血糖浓度变化：实验结果显示，胰高血糖素组家兔的血糖浓度在注射胰高血糖素后1小时内迅速上升，随后逐渐下降，但仍高于对照组。
4. 葡萄糖组血糖浓度变化：实验结果显示，葡萄糖组家兔的血糖浓度在注射葡萄糖后1小时内迅速上升，随后逐渐下降，但仍高于对照组。
六、实验结论1. 胰岛素具有降低血糖浓度的作用，而胰高血糖素具有升高血糖浓度的作用。
实验十一 激素对血糖浓度的影响
实验十一激素对血糖浓度的影响【目的】1.掌握血糖的测定原理及方法。
2.掌握血糖的正常范围及意义。
3.熟记胰岛素及肾上腺素对血糖浓度的影响并解释其作用机制。
【原理】人和动物体内的血糖浓度均维持在一定范围内。
这是由于体内存在多种激素及调节物质，在它们的共同作用下，使糖酵解、糖氧化、糖原合成与分解、糖异生、脂肪合成与分解等代谢途径协同进行。
胰岛素可通过以下几种途径降低血糖：①促进肌肉、脂肪细胞的载体转运葡萄糖人内；②抑制蛋白激酶A，继而使糖原磷酸化酶活性降低：激活糖原合酶脱磷酸酶，从而使糖原合酶活性升高，加速肌肉、肝脏的糖原合成；③通过第二信使间接激活丙酮酸脱氢酶，加速丙酮酸氧化脱羧生成乙酰CoA；④抑制磷酸烯醇式丙酮酸激酶活性，促进氨基酸进入肌肉合成蛋白质，从而降低糖异生；⑤抑制脂肪动员，促进糖有氧氧化。
肾上腺素的作用与胰岛素相反，起升高血糖的作用。
肾上腺素升高血糖的作用迅速而明显，它通过与肝和肌肉细胞膜受体结合而激活磷酸化酶，产生级联放大效应，从而加快糖原的分解、肝释放葡萄糖、肌肉输出乳糖供肝糖异生等，最终导致血糖升高。
本实验观察家兔在注射胰岛素和肾上腺素前后空腹血糖浓度的变化。
血糖含量的测定采用葡萄糖氧化酶法。
首先用钨酸钠及盐酸沉淀血清中的蛋白质，制备血滤液。
在葡萄糖氧化酶的催化作用下，血滤液中的葡萄糖被氧化成葡萄糖酸，并产生1分子过氧化氢；过氧化氢被偶联的过氧化物酶催化放出氧，氧将试剂中的4-氨基安替吡啉偶联酚(还原性氧受体)的酚氧化，生成红色的醌类化合物，其颜色深浅与葡萄糖的含量成正比，此溶液与经同样处理的标准葡萄糖溶液进行比色测定，即可求出血糖含量。
葡萄糖氧化酶葡萄糖——————>葡萄糖酸+H202过氧化物酶H20——————>H20+02O2+4-氨基安替吡啉偶联酚——————>醌类化合物（红色）葡萄糖氧化酶法测定血糖的特异性较高，能干扰测定结果的物质较少，如溶血样本血红蛋白浓度达lOg／L、黄疸样本胆红素浓度达342Um以及样本中所含的少量尿素、肌酐、甘油三脂等均不影响测定结果。
2. 胰岛素、肾上腺素对血糖含量的影响
A1
1.0 1.0 1.0 1.5
B1
1.0 1.0 1.0 1.5
B2
1.0 1.0 1.0 1.5
空白管
1.0 1.0 1.0 1.5
摇匀，置于沸水浴准确煮8min，取出时切勿摇动，置于冷水中冷却 混匀，放置3min后加水 混匀后，以空白管调零，在620nm处比色
吴宪-Folin法测定葡萄糖原理
无蛋白质血滤液中的葡萄糖在碱性溶液中
与硫酸铜共热，蓝色的二价铜被还原成砖红色
的氧化亚铜沉淀，氧化亚铜再使磷钼酸还原成 蓝色钼化合物 (钼蓝)，与同样处理的标准葡萄 糖溶液比色，即可算出葡萄糖的含量。
Na2CO3+H2O=NaOH+NaHCO3 2NaOH+CuSO4=Cu(OH)2+Na2SO4 C6H12O6+2Cu(OH)2=Cu2O↓+2H2O+C5H11O5COOH
无蛋白血滤液的制备
3.5mL蒸馏水 + 0.1mL 抗凝血 + 0.2mL 0.33mol/L硫酸 + 0.2mL 10% Na2WO4(钨酸钠) 待清澈液出现,采用滤纸过滤，得滤液即为 无蛋白血滤液
样品葡萄糖浓度测定操作步骤
标准管
25mg/L 标准葡萄 糖溶液（mL） 无蛋白质血溶液 （mL） 蒸馏水（mL） 碱性铜试剂（mL） 磷钼酸试剂（mL） 蒸馏水（mL） A620nm 1.0 1.0 1.0 1.5
c血糖
样品葡萄糖浓度的计算
A测定管 A标准管
× C标准 × 稀释倍数 = 血糖浓度
ΔC血糖 × 100% = 血糖浓度变化 C血糖()注药前
注意事项
1. 剃兔耳毛时，先用水润湿后在剃毛，要求耳缘静脉四 周要剃干净，否则取血时不易收集；
激素对血糖的调节
激素对血糖的调节第一实验组一、【实验目的和原理】目的：本实验旨在通过对血糖浓度的测定掌握胰岛素、胰高血糖及肾上腺素对血糖浓度的影响，并了解血糖测定的方法。
原理：胰岛素是降低血糖的激素，胰高血糖素、肾上腺素等是体内升高血糖的激素。
本实验将小白鼠作为实验对象，其血糖浓度可用电化学血糖仪测定。
此类血糖仪的原理是通过测量血液中的葡萄糖与试纸中的葡萄糖脱氢酶反应产生的电流测量血糖。
二、【实验对象】小白鼠三、【实验器材和药品】哺乳动物手术器械一套注射器、生理盐水、加盖的箱子戊巴比妥钠溶液、鼠源胰岛素溶液5：100000肾上腺素、鼠源胰高血糖素溶液四、【实验步骤和项目】1、随机分组：选身体健康、体重相近、品系相同的小鼠8只，随机分成A、B两组，每组分别编号1、2、3、4，并对每只小鼠称重并记录；2、麻醉处理：由A组小鼠尾端注射2%的戊巴比妥钠，0.005ml/g,待动物麻醉后仰卧固定在手术台上，在剑突右侧腹部打开腹腔，切除胰腺，缝合伤口；B组在和A组做手术的部位做同样的伤口，然后缝合伤口，测量每只小鼠血糖浓度，记录实验数据；3、药物处理在小白鼠安静后，分别给A、B两组1号小鼠注射胰岛素0.1ml/10g体重；2号小鼠注射胰高血糖素0.5ml,3号小鼠注射肾上腺素0.5ml,4号小鼠注射生理盐水0.5ml；4、记录数据将小白鼠放在加盖的箱子里，每2分钟用血糖仪测量一次，记录试验数据；5、绘制曲线实验结束后作小鼠血糖浓度变化标准曲线。
五、【注意事项】实验的给药方式是静脉注射，应当注意正确的捉拿动物的手势和注射的部位，同时要注意给药的剂量，包括药物的配液和注射器的定量。
此外，注射完药品后通常要放在一个加盖的箱子里观察小鼠的反应，反应除了受剂量影响外，还与周围的温度相关联，温度越高反应发生的比例也越高。
六、【预期结果】1、以未注射激素前小鼠的血糖浓度作为参照；2、A组1号小鼠血糖浓度明显降低至低于参照浓度， 2号和3号小鼠血糖浓度明显升高至高于参照浓度，4号小鼠血糖浓度略微下降；3、B组1号小鼠血糖浓度逐渐降低然后回复至参照浓度，2号和3号小鼠血糖浓度逐渐升高然后恢复至参照浓度，4号小鼠血糖浓度没有明显变化。
血糖实验
题目激素对血糖浓度的影响及血糖浓度的测定系部医学院专业临床班级临床1004学号200909155140姓名刘兴志指导教师赵雪花完成日期2011 年9 月16日【摘要】目的:（1）掌握血糖测定的原理和方法。
（2）掌握血糖正常的范围和意义。
（3）熟记胰岛素和肾上腺素对血糖浓度的影响，并解释其作用机制。
方法：取正常家兔两只，饥饿14-16小时，各空腹取血10ml，在相同的实验条件下，其中一只注射胰岛素（5单位/公斤），另一只注射肾上腺素（0.5mg/只），半个小时后再次取血。
测量血糖浓度。
结果：注射胰岛素的家兔，血糖浓度降低，注射肾上腺素的家兔，血糖浓度升高。
结论：胰岛素可以降低血糖，肾上腺素可以升高血糖。
【关键词】胰岛素，肾上腺素，血糖浓度。
材料与方法1.实验材料与试剂正常家兔两只。
肾上腺素（1mg/ml）,胰岛素（5单位/ml）,碘酒，消毒酒精，棉球，饱和硼酸溶液（6g溶于100ml蒸馏水中摇匀后放置过夜后过滤即可），邻甲苯胺-硼酸，5%三氯醋酸溶液，饱和苯甲酸溶液，标准葡萄糖贮存液，标准葡萄糖应用液。
2.实验对象正常家兔3.实验方法步骤3.1取正常家兔两只。
实验前预先饥饿14-16h，称其体重并记录（2-3公斤为宜）。
3.2药前取血。
先用剪刀剪去家兔耳缘的兔毛，然后用酒精擦拭，使其耳缘静脉充血，再用干棉球擦干。
碘酒，酒精消毒后用7号针头穿刺耳缘静脉，然后用盛有抗凝剂（草酸钠，2mg/ml血）的小烧杯收集10ml左右的血液。
收集时注意摇匀以防血液凝固。
取血完毕，用干棉球压迫止血。
3.3 注射胰岛素和肾上腺素。
取血完毕后，给其中一只家兔注射胰岛素（5单位/公斤为宜），另一只注射肾上腺素（0.5mg/只为宜）。
注射完毕后，稳定家兔情绪，放回兔笼。
3.4药后取血。
药后半小时，再次从耳缘静脉取血。
方法同3.2。
3.5制备无蛋白学滤液。
用微量加样器取抗凝血0.4ml，滤纸擦净粘附于吸管尖端外表的血液，缓慢注入洁净小试管。
胰岛素和肾上腺素对血糖浓度的影响
激素对血糖浓度的影响及血糖浓度的测定刘峡汛11. 武汉科技大学医学院临床1105班湖北武汉430065[摘要]目的：观察家兔注射肾上腺素或胰岛素前后血糖水平的变化方法：采用邻甲苯胺法测血糖浓度。
结果：注射胰岛素的家兔空腹血糖含量为182mg/dL，药后血糖含量为129mg/dL；注射肾上腺素的家兔空腹血糖含量为81mg/dL，药后血糖含量为119mg/dL。
结论：胰岛素会使血糖浓度降低，肾上腺素会使血糖浓度升高。
[关键词]血糖浓度胰岛素肾上腺素引言：正常情况下，血糖浓度在各种因素调解下，维持相对恒定，但现如今糖尿病可谓是医学界的一大顽症，目前并无良药可医，对于此种病当以预防为主。
因此身为医学生，掌握激素对血糖浓度的影响及如何测量血糖浓度显得有为重要。
原理：1.血糖浓度即指血液中的葡萄糖浓度。
血糖水平相当恒定，维持在80—120mg/dL之间。
空腹血糖水平的相对恒定是在神经激素调节下血糖的来路和去路达到动态平衡的结果，其中激素调节站主导地位。
调节血糖的激素有：胰岛素，肾上腺素，胰高血糖素，肾上腺皮质激素，生长素和甲状腺激素。
胰岛素是体内唯一能使血糖降低的激素，其他激素均使血糖升高。
2.葡萄糖在热的冰醋酸溶液中可脱水生成5-羟甲基-2-呋喃甲醛，后者与邻甲苯胺缩合，生成蓝绿色的西夫氏碱，其色泽的深浅与葡萄糖浓度成正比。
1.材料与方法1.1材料仪器：722型分光光度计试剂：1.正常家兔(实验前预先使其饥饿14—16小时)两只。
称体重，一只为2.55kg，另一只为1.8kg。
2.肾上腺素（1mg/1ml）3.胰岛素（5单位/ml）4.碘酒,消毒酒精5.饱和硼酸溶液：取硼酸6g,溶于100ml蒸馏水中，摇匀，放置过夜后过滤，即可应用。
6.邻甲苯胺试剂：取冰醋酸（AR）940ml,加入硫脲（AR）1.5g，溶解后加入邻甲苯胺60 ml混匀，置棕色瓶中，室温保存。
新配试剂应放置24小时后（待老化）使用。
此试剂腐蚀性极强，应避免与皮肤接触而造成灼伤。
胰岛素、肾上腺素对血糖浓度的影响
实验五胰岛素、肾上腺素对血糖浓度的影响教学目的与要求：1、观察胰岛素和肾上腺素对家兔血糖浓度的影响。
2、掌握血糖浓度的测定方法。
3、掌握葡萄糖氧化酶法测定血糖浓度的原理和方法。
4、掌握血糖浓度的正常参考值，了解血糖测定的临床意义。
一、实验原理（一）胰岛素、肾上腺素对血糖浓度的影响激素是调节机体血糖浓度的重要因素。
胰岛素能降低血糖，肾上腺素等激素能升高血糖。
本实验给两只家兔分别注射胰岛素或肾上腺素，取注射前、后兔的静脉血，测定血糖含量，观察注射前后血糖浓度变化，从而了解胰岛素和肾上腺素对血糖浓度的影响。
（二）葡萄糖氧化酶法测定血清葡萄糖本实验是葡萄糖氧化酶(GOD)和过氧化物酶(POD) 相偶联发生的偶联反应。
第一步：葡萄糖氧化酶利用氧和水将葡萄糖氧化为葡萄糖酸，并释放过氧化氢。
第二步：过氧化物酶在色原性氧受体存在时将过氧化氢分解为水和氧，并使色原性氧受体4-氨基安替比林和酚去氢缩合为红色醌类化合物(苯醌亚胺非那腙)。
二、操作步骤（一）胰岛素、肾上腺素对血糖浓度的影响1、动物准备：取正常家兔两只，实验前预先饥饿16小时，称体重(—般为2-3kg)。
2、注射激素前取血：—般多从耳缘静脉取血：剪去耳毛，用二甲苯擦拭兔耳，使其血管充血，再用干棉球擦干，于放血部位涂一薄层凡士林，再用粗针头或刀片刺破静脉放血。
采用葡萄糖氧化酶—过氧化物酶法时，则将静脉血收集于干净试管中,静置至血清析出。
取血完毕，用干棉球压迫血管止血.3、注射激素：—只兔子注射胰岛素；皮下注射，剂量为0.75U/kg 体重。
另一只兔子注射肾上腺素：皮下注射，剂量为0.4mg/kg 体重。
分别记录注射时间。
4、注射激素后取血：方法同上；取血时间：肾上腺素注射后30分钟；胰岛素注射后1小时。
从注射胰岛素的兔子取血后，应立即用10ml 250g/L 葡萄糖做腹腔内或皮下注射，以防家兔发生胰岛素休克(低血糖休克)。
5、测定血糖：分别测定各血样的糖含量，方法请见实验四“血糖测定”。
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血糖的测定及激素对血糖浓度的影响
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一 实验目的
掌握GOD-POD法测定血糖的原理及方法。
观察胰岛素，肾上腺素对血糖浓度的影响。
了解动物实验的基本知识和兔耳缘静脉取血 的方法。
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二 原理
(2) 激素对血糖浓度的影响 葡萄糖在葡萄糖氧化酶的催化下生成葡
萄糖酸，并产生过氧化氢，过氧化氢被过氧 化物酶（POD）催化释放初生态氧，氧又对 与色原性氧受体4－氨基安替比林偶联的酚氧 化，并与4－氨基安替比林结合生成红色醌类 化合物。
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按表操作：
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加入物（ml） 测定管（注射前） 测定管（注射后） 标准管
去蛋白血滤液
0.5
0.5
处理后的葡萄糖
0.5
空白管
标准应用液
蛋白沉淀剂
酶酚混合试剂
3
0.5
3
3
3
混匀，置37℃水浴15分钟调波长为505nm，
以空白管调零，分别读取A测A标,根据标准管法求
10 测定管血糖浓度。
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5．制备无蛋白血虑液:这是注射前的血液，在胰岛素等待 一个小时，肾上腺素等待半个小时期间制备注射前无蛋 白血虑液。方法：蛋白沉淀剂4ml＋全血0.2ml混匀，室 温放置7分钟后，在漏斗上过滤，这时标记为注射前无 蛋白血滤液。
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操作
6．注射后再次取血 7．再制备无蛋白血虑液:标记为注射后 8．比色：最后我们用标准管法来测定血糖浓度，
四 结果与计算
C测（mmol/l）= （A测/A标）×5 mmol/L (5为葡萄糖标准应用液浓度值)
通过计算比较一下家兔注射前后血糖浓度的变 化情况。
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五 分析
(1) 对家兔而言血糖正常值：2.8－5.2 mmol/L， 验证是否在此范围。
(2) 从实验结果来验证胰岛素降低血糖以及肾上 腺素升高血糖的作用。
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二 原理
(2) 显色原理 葡萄糖在葡萄糖氧化酶的催化下生成葡
萄糖酸，并产生过氧化氢，过氧化氢被过氧 化物酶（POD）催化释放初生态氧，氧又对 与色原性氧受体4－氨基安替比林偶联的酚氧 化，并与4－氨基安替比林结合生成红色醌类 化合物。
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葡萄糖＋O2+H2O GOD 葡萄糖酸＋H2O2 4－氨基安H2O
葡萄糖越多，生成的醌类物质就越多，颜 色就越深，通过所讲过的比色法，求出它的葡 萄糖含量，即血糖浓度。（标准管法）
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三 操作
1．准备抗凝试管：首先放入试管一小勺抗凝剂 （草酸钠）。
2．分组。称重：Kg，共有四只兔子，两只注射 胰岛素，两只注射肾上腺素。兔子抓取方法： 一手抓取颈部皮肤，另一只手托臀部，把它放 在天平上称重。
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操作
3. 注射前取血:一般多以心脏取血的方式进行。
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操作
4．注射激素:抓住兔子，肚皮朝上，在腹部的皮下注射， 注意要抓紧兔耳以免被咬住，方法是掂起皮肤，刺入皮 下有落空感，然后缓慢注入激素。首先注射胰岛素0.75 mg/kg（注意记录时间）然后注入肾上腺素0.5 mg/kg， 并记录时间。