实验9 气相色谱、内标法测定蘑菇醇的含量
香菇 香菇多糖 提取 纯化 检测 含量测定及表征
09级应用化学
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目录流程图
香菇简介 香菇多糖含量测定 香菇多糖组成的测 定 结束
营养成分及药用价 值
香菇多糖提取方法 及比较
香菇多糖结构的鉴 定
营养成分及药用价 值
香菇多糖的应用
香菇多糖的纯化
主要参考文献
地理分布
香菇多糖的生物活 性
香菇多糖纯度鉴定
市场分布
香菇多糖简介
香菇多糖的脱色
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5.7.2主要的仪器分析方法主要有
高分辨率的核磁共振技术[7] 快速原子轰击质谱技术 电喷雾质谱 基质辅助激光解吸飞行时间质谱 串联质谱技术及各种色质联用技术[8] 紫外分光光度法 红外光谱法[9] 气相色谱法[10] 液相色谱法[11] 电泳法[12] 比旋光度法等
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4. 微波法提取香菇多糖
微波提取法是一种新型提取法，由于溶剂及细胞液吸收微波能， 微波射线辐射于溶剂并透过细胞壁内部时，细胞内部温度升高压力 增大，当压力超过细胞的承受能力时，细胞壁破裂，位于细胞内部 的多糖就从细胞中释放出来； 5. 超声波提取法 香菇多糖的超声波(20KHz一50MHz)提取一利用超声波的空化作 用分散破坏植物组织，加速植物多糖成分的浸出提取；另外超声波 产生的机械振动、乳化和击碎效应 等也能加速多糖成分的扩散释放 并充分与溶剂混合，提高香菇多糖的得率； 6.深层发酵培养提取法 目前，香菇多糖主要从香菇子实体中提取。人工培养香菇子实体， 生产周期长达半年以上，而深层培养发酵法获得香菇菌丝体和香菇 多糖，生产周期将缩短至一周左右；一般从鲜香菇中提取多糖，得 率为6.9％左右，从干香菇中提取多糖，得率是6.72％左右，差异不 大；而香菇菌丝体的多糖得率却明显高于香菇子实体，达7.3％左右。 因此在工业生产中，此法很具竞争优势；
气相色谱仪确定试样成分该怎么定量
气相色谱仪确定试样成分该怎么定量什么是气相色谱仪气相色谱仪是一种常用的分离和分析技术，其基本原理是利用样品分子在固定相和移动相之间的分配行为来实现分离和定量分析。
在气相色谱仪中，样品通常是以气态或液态形式输入，并通过气相色谱柱进行分离。
分离完成后，样品成分通过检测器进行分析，并转化为电信号输出。
从而可以对样品进行定量和鉴别分析。
气相色谱仪确定试样成分的方法标准添加法气相色谱仪在进行样品定量时，通常采用标准添加法。
标准添加法是将一定浓度的标准物质加入待测样品中，经过分析和计算，可以确定待测样品中的成分。
标准添加法需要注意以下几点：1.标准品需要选择与待测样品相近的性质，例如挥发性、沸点等。
2.标准品的浓度应该足够高，以确保精确的测量和分析。
3.在进行标定分析之前，需要先确定并正确设置色谱仪的工作条件。
内标法内标法是一种比较常用的样品定量方法。
采用内标法可以增加测量的准确性和可靠性，尤其是在复杂的样品分析中更为常用。
内标法的步骤如下：1.选取一个与待测物质大致相似的物质作为内标。
2.向待测样品和内标样品中分别加入相同量的内标液，使它们的浓度相同。
3.以相同的条件对待测样品和内标样品进行分析，从而测定待测物质的浓度。
内标法需要注意以下几点：1.内标需要选择与待测物质相近的化学性质和物理性质，以确保它们在分析中的表现非常相似。
2.内标的浓度也需要与待测物质浓度相似，以便于分析结果的准确性和可靠性。
3.在分析过程中，需要保持分析条件的一致性，以保证内标和待测物质分析结果的可靠性。
标准曲线法标准曲线法也是气相色谱仪确定试样成分的一种方法。
其原理是通过建立待测物质与标准品浓度之间的标准曲线，来确定待测物质浓度的方法。
标准曲线法需要注意以下几点：1.标准曲线需要根据待测物质的特性进行建立，同时需要使用至少5个不同浓度的标准样品来建立曲线。
2.在建立标准曲线的过程中，需要保证色谱仪的一致性和数据的准确性。
3.在测量过程中，需要根据标准曲线来计算待测物质的浓度值，并进行校正和修正。
气相色谱_内标_法测定酒中甲醇_杂醇油含量
汽 化 室 220℃； 检 测 器 温 度 300℃； 柱 温 40℃ （2 min） 以 20℃ ／ min 升至 100℃ （2 min）， 再以 45℃ ／ min 升至 190℃。
氮 气 流 量 1 ml ／ min； 氢 气 流 量 40 ml ／ min 空 气 流 量 400 ml ／ min； 进样体积 1 μl； 尾吹气流量 60 ml ／ min； 分流比 10︰1。 1.4 测定方法
500 mg， 用 60%乙醇定容至 100 ml， 于冰箱内保存。
1.4.1.3 标准使用液 分别吸取 10 ml 标准溶液 （1.4.1.2） 及 1
ml 乙 酸 正 戊 酯 标 准 溶 液 （1.4.1.1） 于 100 ml 容 量 瓶 ， 用 60%
乙醇定容至刻度， 此液中甲醇、 异丁醇、 异戊醇的浓度均为
［ 12 ］ P.Schuphbach， J. R， Neeser， M. Golliard， et al. Incorporration of caseinoglycomacropeptide and caseinglycomacropeptide and caseinophosphopeptide into the salivary pellicle inhibits adherence of mutans Streptococci ［J］. J Dent Res， 1996， 75 （ 10） ： 1779 1788.
图 1 标准使用液色谱图
2.2 内标物的选择 选择乙酸正戊酯作为内标物， 有以下几个因素： ① 酒中
不含有乙酸正戊酯。 ② 不与待测物发生化学反应。 ③ 其保留 时间与待测组分相近， 但分离完全。 2.3 方法检出限
QuEChERS-气相色谱串联质谱法测定香菇中13种农药残留
QuEChERS-气相色谱串联质谱法测定香菇中13种农药残留作者：任金萍赫嘉伟来源：《甘肃农业科技》2021年第09期摘要：建立基于QuEChERS-气相色谱串联质谱法（GC-MS/MS）快速检测香菇中13种农药残留的分析方法。
香菇样品经前处理后，气相色谱分离，多反应离子监测模式（MRM）进行质谱检测，用外标法定量。
结果表明，在0.01、0.10、0.50 mg/kg三个添加水平下，回收率范围为75.4%～110.6%。
用重复性限反映精密度，均符合标准GB 23200.113—2018的要求。
QuEChERS-气相色谱串联质谱法快速、高效、可靠，适用于香菇样品中的农药残留检验检测。
关键词：香菇;农药残留;QuEChERS;气相色谱串联质谱法中图分类号：S481 文献标志码：A 文章编号：1001-1463（2021）09-0046-05doi：10.3969/j.issn.1001-1463.2021.09.011Determination of 13 Pesticide Residuesin Lentinus edodes by QuEChERS-GC-MS/MSREN Jinping 1， HE Jiawei 2（1. Pingliang Center for Quality and Safety of Agricultural Products， Pingliang Gansu 744000;2. School of Mathematics and Computer Science， Shaanxi University of Technology， Hanzhong Shaanxi 723000， China）Abstract：A rapid method for the determination of 13 pesticide residues in Lentinus edodes was established based on QuEChERS-gas chromatography-mass spectrometry（GC-MS/MS）. After pretreatment， the Lentinus edodes samples were separated by gas chromatography， detected by mass spectrometry in the multi-reaction ion monitoring mode（MRM）， and quantitatively analyzed with the external standard method. The results showed that the 13 pesticides had good linearity in the ra nge from 0.01 μg/mL to 0.8 μg/mL， and the correlation coefficients R2>0.99. The average recovery ranges were mainly from 75.4% to 110.6% at the three spiked concentration levels （0.01、0.10、0.50 mg/kg）. The repeatability limit is used to reflect the precision， which all were accepted the requirements of standard GB 23200.113 — 2018. The method is rapid， efficient and reliable， which is suitable for the detection of pesticide residues in Lentinus edodes samples.Key words：Lentinus edodes;Pesticide residues;QuEChERS;GC-MS/MS香菇又稱“中国蘑菇”，是我国著名的食用菌之一，被誉为“菇中皇后”，兼具食用和药用价值[1 - 4 ]，是目前市场上主要的食用菌品种。
气相色谱串联质谱法测定香菇中几种氨基甲酸酯农药残留量
气相色谱串联质谱法测定香菇中几种氨基甲酸酯农药残留量韩梅;侯雪【摘要】A gas chromatography-tandem mass spectrometry(GC-MS/MS) method has been developed for determining 6 carbamate pesticide residues, i.e., metolcarb, fenobucarb, carbofuran, pirimicarb, 3-hydroxycarbofuran and carbaryl in Shiitake mushroom samples. Acetonitrile was used for extracting pesticides from samples and the extract was cleaned up by gel permeation chromatography (GPC), and the pesticide residues were identified and quantified using gas chromatography mass spectrometry detector. In the linear range (0.010-0.500mg/L) of 6 pesticides, the correlation coefficient was higher than 0.99. When the spiked levels were 0.020, 0.040, and 0.100 mg/kg in the samples, the mean recoveries of 6 carbamate pesticides from the Shiitake mushroom were obtained from 84.0%-123.9% , the relative standard deviation values (RSDs) ranged from 0.3% to 7.7%(n =5). Under optimized conditions, the limit of detection (LOD) of the pesticides in samples were in the range of 0.046-6.4 μg/kg (3S/N), and the sensitivity, accuracy and precision of this method can meet the requirements of the pesticide residue analysis, so it can be applied to determine 6 carbamate pesticide residues in the Shiitake mushroom.%建立凝胶渗透色谱净化,气相色谱串联质谱法测定香菇中速灭威、仲丁威、抗蚜威、克百威、三羟基克百威、甲萘威等6种氨基甲酸酯类农药残留的方法.样品用乙腈提取,凝胶渗透色谱净化,经毛细管柱(VF-5MS,30m×0.25 mm×0.25 μm)分离,采用串联质谱法进行定性定量分析.6种农药在0.010～0.500 mg/L时与峰面积有良好的线性关系(r2＞0.99),在3个添加浓度水平(0.020,0.040,0.100 mg/kg)上,农药的平均回收率在84.0％～123.9％之间,相对标准偏差为0.3％～7.7％(n=5),检出限(3 S/N)为0.046～6.4 μg/kg.该方法操作简单准确、灵敏度高、重现性较好,满足农残分析的需要,可用于检测香菇中6种氨基甲酸酯类农药残留.【期刊名称】《中国测试》【年(卷),期】2013(039)001【总页数】4页(P52-55)【关键词】凝胶渗透色谱(GPC);气相色谱串联质谱法;氨基甲酸酯农药;香菇【作者】韩梅;侯雪【作者单位】四川省农科院测试中心,四川成都610066;四川省农科院测试中心,四川成都610066【正文语种】中文【中图分类】S646.1+2;O657.7+1;O657.63;TS207.5+30 引言氨基甲酸酯类农药是一种高效、广谱型杀虫剂，母体结构为含氮合成的氨基甲酸酯衍生物，能抑制昆虫体内乙酰胆碱酯酶，阻断正常的神经传导，使昆虫中毒死亡[1]。
实验9 气相色谱、内标法测定蘑菇醇的含量
内标法测定蘑菇醇的含量【摘要】气相色谱法（GC）分离效率、选择性、灵敏度都很高，适用于热稳定性好、易挥发的物质。
外标法通过配置标准溶液来制作工作曲线，但使用溶液体积很少时误差较大，可以通过加入内标物减小误差。
本实验通过内标法和气相色谱法来测定未知物中的蘑菇醇含量。
【关键字】气相色谱内标法蘑菇醇【实验目的】1、了解气相色谱法的基本原理及仪器结构。
2、了解气相色谱基本仪器操作。
3、掌握内标法的配样与计算方法。
【基本原理】原理概述：气质联用仪（GC-MS）近年来在有机化学领域起到越来越重要的作用，其原理是利用气相色谱的分离能力，将样品各组分分离开，然后对各组分进行质谱分析，得出组分信息。
再利用内标法制作工作曲线来计算未知物浓度。
•气相色谱法（GC）：是利用气体作流动相的色层分离分析方法。
优点：分离效率、选择性、灵敏度都很高。
缺点：只适用于热稳定性好、易挥发的物质。
•内标法：在分析测定样品中某组分含量时，加入一种内标物质以校准和消除出于操作条件的波动而对分析结果产生的影响，以提高分析结果的准确度。
内标物的选择要求： 1、是能得到纯样的己知化合物；2、和被分析的样品组分有基本相同的物理化学性质（化学结构、极性、挥发度及在溶剂中的溶解度等）、色谱行为和响应特征，最好是被分析物质的一个同系物；3、不与样品中各组分充分分离发生反应；4、既可被色谱柱所分离，又不受试样中其它组分峰的干扰，原理：只要测定内标物和待测组分的峰面积与相对响应值，即可求出待测组分在样品中的百分含量：m ：样品的质量；ms ：待测样品中加入内标物的量； As ：待测样品中内标物的峰面积；f s,i ：组分 i 与内标物的校正因子之比，称为相对校正因子。
•蘑菇醇：即1-辛烯-3-醇 分子式：C 8H 16O ； 分子量：128.21应用：用于日化和食用香精；作为化学合成原料，应用於制药领域；作为蚊虫引诱剂，应用于杀蚊制品。
【仪器与试剂】1、 仪器：Agilent7890N 气相色谱仪，10μl 进样针，1000μl 移液枪。
气相色谱实验—内标法测定正丁醇的含量
气相色谱实验（2）内标法测定正丁醇的含量实验目的：1．了解气相色谱仪的基本结构和使用毛细管色谱柱操作要点；2．学习启动、调试气相色谱仪的主要步骤和方法；3． 学习归一化法和内标法测定组分含量；4． 了解内标法的定量原理以及选择内标物的原则。
预习要点：1．毛细管色谱柱的特点；2．归一化法、内标法及校正因子；实验原理： 对于试样中少量杂质的测定，或测定试样中某些组分时，可采用内标法定量，用内标法测定时，需在试样中加入一种物质作内标，而内标物质应符合下列条件：1、应是试样中不存在的物质2、峰的位置位于被测组分附近3、物理及物理化学性质于被测组分相近4、加入的量于被测组分相近选择适宜的物质作为欲测组分的参比物，定量加到样品中去依据欲测组分和参比物在检测器上的响应值（峰面积或峰高）之比和参比物加入的量进行定量分析的方法称为内标法。
参比物又称内标物。
内标物应是原样品中不存在的纯物质，该物质的性质应尽可能与欲测组分相近，不与被测样品起化学反应，同时要能完全溶于被测样品中。
内标物的峰应尽可能接近欲测组分的峰，或位于几个欲测组分的峰中间，但必须与样品中的所有峰不重叠，既完全分开。
内标物的量应与欲测组分相近。
当试样中有的组分不出峰，或有的峰难以定性，或只要求测定试样中某个或某几个组分时，可用此法定量。
分析时先将试样准确称重，再加入适量的内标物准确称量，混合均匀后即可取样进行色谱分析，出峰后分别测得内标物与欲测组分的峰面积，并按下式计算欲测组分的含量：%i W =%100 Wf A W f A S S S i i （1） 式中：W i %------欲测组分的百分含量；A i 、A s ------分别为欲测组分及内标物的峰面积；f i 、 f s ------分别为欲测组分及内标物的重量校正因子；W S 、W----分别为内标物及试样质量；校正因子可查手册或通过实验测定。
在内标标准曲线法中，一般都加入相同的内标物量，标准溶液和被测试样也都取固定量，因此f i m s /f S m为一常数，则式（3-21-2）可简为作标准曲线时，先将被测组分的纯物质配置成不同浓度的标准溶液，取固定量的标准溶液和内标物，混合后进样，绘出色谱图，用峰高乘半峰宽求出其峰面积。
气相色谱法测定食用菌4种栽培料中的农药残留
ＦＰＤ检 测 器 ，ＤＢ一１７ ３０ｍ￣０．５３ｒ ａｍ￣１．０１．ｚｍ毛细 柱 ，程 序升 温 ：１５０＇Ｅ保 持 ２ｒ ａｉｎ，后 以 ８￣Ｃ／ｍｉｎ，升 到 ２５０￣Ｃ，保持 １５ｍｉｎ。不分流 ，载气 ８ｍＬ／ｍｉｎ，尾吹 ６０ ｍＬ／ｍｉｎ，氢 气 ７０ ｍＬ／ｍｉｎ，空 气 １００ ｍＬ／ｍｉｎ，进 样 量
用 １００ｍｇ／Ｌ的混合标 样贮 备液 配制 ０．０５、０．１、 ０．５、１．０、２．０ｍ舡 基质标样工作溶液 ，制作标准曲线。 １，５ 样 品前处 理 方法 １．５．１ 提 取 准 确 称 取棉 籽 壳 、麸 皮 、稻 草 、木 屑 样 品各 １０．００ｇ于 ２５０ｍＬ烧 杯 中 ，加 入 ２ｍＬ蒸 溜 水 ，加 入 ５０ｍＬ乙酸 乙酯 ，高速匀浆 ２ｍｉｎ，提 取液过盛 有 ５０ｇ无 水 硫 酸钠 的 三 角 漏 斗 ，收集 于 ２５０ｍＬ茄 型烧 瓶 中，用 ２５ｍＬ乙酸乙酯淋洗烧杯 的残渣 ，重复 １次 ， 合 并 滤液 ，于 旋转 蒸 发仪 是浓 缩 近干 。 加 入 ２ｍＬ丙 酮 ，转移到 １０ｍＬ容量瓶 中，用丙酮定容至 １０ｍＬ。 １．５．２ 净 化 有 机 磷 农 药 ，取 ２ｍＬ提 取 液 ，过
准 确 称 取 棉 籽 壳 、麸 皮 、稻 草 、木 屑 各 ２００ｇ￣３ 份 ，每个 品 种 的 ３个称 样分 别加 入 ２ｍＬ、ｌｍＬ、２００ｐ￣Ｌ 的 １００ｍｇ／Ｌ混合标样贮备液 ，充分搅拌均匀 ，配成含 农 药 水 平 分 别 为 １．０ｍｇ／ｋｇ、０．５０ｍｇ／ｋｇ、０．１０ｍｇ／ｋｇ的 添 加 样 品 。按 １．５样 品前 处 理 方 法 进 行 样 品前 处 理 ，每个样品前处理 ６个平行 ，气相色谱检测分析。
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内标法测定蘑菇醇的含量【摘要】气相色谱法（GC）分离效率、选择性、灵敏度都很高，适用于热稳定性好、易挥发的物质。
外标法通过配置标准溶液来制作工作曲线，但使用溶液体积很少时误差较大，可以通过加入内标物减小误差。
本实验通过内标法和气相色谱法来测定未知物中的蘑菇醇含量。
【关键字】气相色谱内标法蘑菇醇【实验目的】1、了解气相色谱法的基本原理及仪器结构。
2、了解气相色谱基本仪器操作。
3、掌握内标法的配样与计算方法。
【基本原理】•原理概述：气质联用仪（GC-MS）近年来在有机化学领域起到越来越重要的作用，其原理是利用气相色谱的分离能力，将样品各组分分离开，然后对各组分进行质谱分析，得出组分信息。
再利用内标法制作工作曲线来计算未知物浓度。
•气相色谱法（GC）：是利用气体作流动相的色层分离分析方法。
优点：分离效率、选择性、灵敏度都很高。
缺点：只适用于热稳定性好、易挥发的物质。
•内标法：在分析测定样品中某组分含量时，加入一种内标物质以校准和消除出于操作条件的波动而对分析结果产生的影响，以提高分析结果的准确度。
内标物的选择要求：1、是能得到纯样的己知化合物；2、和被分析的样品组分有基本相同的物理化学性质（化学结构、极性、挥发度及在溶剂中的溶解度等）、色谱行为和响应特征，最好是被分析物质的一个同系物；3、不与样品中各组分充分分离发生反应；4、既可被色谱柱所分离，又不受试样中其它组分峰的干扰，原理：只要测定内标物和待测组分的峰面积与相对响应值，即可求出待测组分在样品中的百分含量：m ：样品的质量；ms ：待测样品中加入内标物的量；As ：待测样品中内标物的峰面积；f s,i ：组分i 与内标物的校正因子之比，称为相对校正因子。
•蘑菇醇：即1-辛烯-3-醇分子式：C 8H 16O；分子量：128.21应用：用于日化和食用香精；作为化学合成原料，应用於制药领域；作为蚊虫引诱剂，应用于杀蚊制品。
【仪器与试剂】1、仪器：Agilent7890N 气相色谱仪，10μl 进样针，1000μl 移液枪。
2、试剂：蘑菇醇储备样（10.107mg/ml），内标物（10.140mg/ml），蘑菇醇未知样，乙腈溶液。
【实验步骤】1、配制标准溶液：以移液枪分别移取200、400、600、800、1000μl 蘑菇醇储备液和400、400、400、400、400μl 氯苯储备液与5ml 容量瓶中，用乙腈定容到刻度。
2、配制未知溶液：以移液枪量取200μl 蘑菇醇未知液和400μl 氯苯储备液与5ml 容量瓶中，用乙腈定容到刻度。
3、设定气相色谱参数：进样口：气化温度：250℃，分流比：10:1；色谱柱：流速：2.0ml/min；柱温箱：120℃（保持1min），10℃/min 升到200℃；图1蘑菇醇结构式%100m f m x si s,i s i ⨯⨯⨯⨯=A A检测器：基座温度250℃，H 2：45ml/min，Air：450ml/min，N 2：40ml/min。
保存。
4、进样：以以上方法测定标样及未知样，记录实验数据（保留时间及峰面积）。
5、做出内标标准曲线，以内标法计算未知样中蘑菇醇含量。
【注意事项】1、配制溶液时要注意不要将溶液滴到容量瓶外面，否则会大大影响测量的结果；移液枪的使用要规范，每种溶液用各自的枪头。
2、GC 中手动进样技术的熟练与否，直接影响到分析结果的好坏，正确的进样手法是：取样后，一手持注射器(防止气化室的高气压将针芯吹出)，另一只手保护针尖（防止插入隔垫时弯曲）。
先小心地将注射针头穿过隔垫，随即快速将注射器插到底，并将样品轻轻注入气化室（注意不要用力过猛使针芯弯曲），同时按start 键，拔出注射器，注射样品所用时间及注射器在气化室中停留的时间越短越好。
2、在进多个不同样品时，每次进样前都要将进样针润洗干净，确保洗针溶剂不干扰样品检测。
在测定标样以绘制标准曲线时，由于进样的浓度是梯度升高的，在测定前只用每次的待测液润洗即可。
若先进高浓度溶液样品再进低浓度溶液样品则还得用溶液（乙腈）洗净。
【数据处理与实验结果分析】1、试剂浓度与测量数据：蘑菇醇储备样10.107mg/ml；内标物10.140mg/ml。
2、内标法：由可知，以c 蘑菇醇/c 内标横坐标，为A 蘑菇醇/A 内标纵坐标作内标法曲线，曲线拟合如下：t 内标（min）t 蘑菇醇（min）A 蘑菇醇A 内标A 蘑菇醇/A 内标c 蘑菇醇/c 内标标样11.72.2546.81105.60.49460.4984标样21.82.21093.31012.1 1.08020.9967标样31.82.21498.8968 1.5483 1.4951标样41.82.22235.31082.9 2.0642 1.9935标样51.82.22738.41053.4 2.5996 2.4919未知物 1.8 2.2665.510390.6405表1标样与未知物保留时间与峰面积数据%100m f m x si s,i s i ⨯⨯⨯⨯=A A由图可得，拟合的直线为y =0.9586x +0.00221，R =0.99952。
由测定数据计算得，未知样的峰面积之比为0.6405，代入上述拟合直线进行计算得x =0.6659，即c 蘑菇醇/c 内标=0.6659。
可计算得未知样蘑菇醇的浓度为：3、外标法：以c 蘑菇醇/c 内标横坐标，为A 蘑菇醇纵坐标作外标法曲线，曲线拟合如下：图2内标法工作曲线ml mg ll ml mg /504.13200400/140.106659.0c =⨯⨯=μμ未知样图3外标法工作曲线由图可得，拟合的直线为y =1062.99066x -32.9604，R =0.99642。
由测量数据得：A 蘑菇醇=665.5，带入上述拟合曲线进行计算得x =0.6571，即c 蘑菇醇/c 内标=0.6571。
可计算得未知样蘑菇醇的浓度为：由拟合曲线的数据可以看出：外标法的相关系数比内标法的相关系数小，说明内标法确实优于外标法。
【思考题】1、你做出来的标准曲线相关系数是多少？你觉得操作过程中有哪些地方会带来误差？有哪些操作或参数还可以优化？答：1.内标法R =0.99952，线性关系较好，外标法R =0.99642，线性关系也较好，但比内标法稍差。
内标法优于外标法。
2.在如下几个方面可能存在实验误差：1试剂本身的误差：由于样品长时间使用，可能会分解、挥发等，造成浓度与刚配置时有一定误差，不过应该影响不大；相对可能影响较大的是，在测量的过程中标液在量取后，溶液中的氯仿可能挥发（氯仿沸点低），造成浓度变化。
2配制溶液中的人为误差：移取溶液、定容不可避免的会有人为误差，可能造成某个标准溶液的配置准确度较差；另外，溶液混匀可能不充分，对测定也有一定影响；配制溶液时使用移液枪，虽精度较高，但可能存枪老化等问题导致其精密度下降，而内标法对溶液浓度的要求较高，故可能导致误差的出现。
3进样时的误差：量取 1.00μL 注入气相色谱仪的量可能有误差（对外标法有较大影响）；另外，GC 中手动进样技术的熟练与否也影响到分析结果的好坏。
4仪器本身的误差：峰出现拖尾、分裂等情况会对峰面积计算有影响，且有噪音影响，而且同一个样品测量结果也会有不小的误差，说明仪器本身有一定的误差。
3.优化方式：1操作方面，用较为准确的微量注射器或者移液枪来移取溶液，提高配制溶液的浓度准确度；或者增加梯度浓度组，提高线性相关度，减小误差。
2样品方面，将待测的未知样品中蘑菇醇的浓度提高一些，使之落在标准工作曲线正中间，提高准确性。
ml mg ll ml mg /326.13200400/140.106571.0c =⨯⨯=μμ未知样3仪器方面：若实验时发现样品中各物质的峰分离不完全，可选择降低柱箱升温速率，减少色谱柱流量，增大进样口分流比，或减小进样量，若还是无法分离，则需考虑改换极性更强的色谱柱。
实验时应根据具体情况进行调整2、比较归一化法，外标法和内标法各自的优缺点。
答：1.归一化法：优点：①与进样的准确性无关，与仪器和分析条件有关；②操作条件略有变动或进样量控制不十分精确对分析结果影响都很小缺点：①定量计算必须先知道各成分的校正因子，校正因子的得出较麻烦；②所有有效组分必须出峰，且所有组分必须在一个分析周期内流出色谱峰；2.外标法：优点：①简便，适用范围广；②只关注待测成分出峰，不需要所有成分出峰。
缺点：①必须有被测组分的纯品作为标准对照物；②此方法准确性受进样重复性和实验条件稳定性的影响；③若响应值与试样的浓度或含量没有线性关系，则需要大量的校正数据且误差较大。
3.内标法：优点：①定量测量较准确，其结果与进样量重复性无关；②只需要内标物与被测物出峰，达到一定的分离度即可；③常用于未知样品的GC定量检测以及微量成分含量检测。
缺点：①内标物需要跟待测组分在同样条件下出峰，且分离度较好，所以内标物的选择较困难；②配置较麻烦；3、你对本实验有什么意见或建议吗？答：①由于内标法对样品制备的要求较高，在配置标准溶液时可以配置两组，进行平行实验，可以增加实验结果的可靠度；②实验中所用到的氯苯、乙腈等试剂有一定的毒性，在实验过程中应注意操作规范和实验安全，配置溶液时应在通风橱中进行，提供手套口罩等；③本实验的溶液配制及仪器操作均较较简单，在实验过程中有很长的等待时间，仪器的操作一人即可完成，实验室有4台仪器，可以考虑将仪器全部投入使用，可以使小组四位同学均在实验中得到锻炼。
【讨论与体会】气相色谱法是化学学科特别是有机化学中分离、表征物相的基本表征手段之一，实验原理较简单，操作也较轻松，但想要得到良好的线性内标曲线并不容易。
通过气相色谱技术，定性、定量分析了奶茶中的香兰素的含量。
下面是本实验的一些经验和体会：1、本实验主要是上机操作，所以实验前最好预习相关操作，在助教老师讲解时认真听讲、熟悉操作过程；2、进样时要特别注意：取样后，一手持注射器，另一只手保护针尖，防止插入隔垫时弯曲）。
先小心地将注射针头穿过隔垫，随即快速将注射器插到底，并将样品轻轻注入气化室，同时按start 键，拔出注射器，注射样品所用时间及注射器在气化室中停留的时间越短越好；3、在进多个不同样品时，每次进样前都要将进样针润洗干净，确保洗针溶剂不干扰样品检测，并且针外壁应擦试干净，减少干扰；4、注射器的插入与取出既要迅速又要小心谨慎，不要用力过猛使针芯弯曲在探头中。
本实验在配置和移取溶液的过程中，锻炼了我们认真耐心、一丝不苟的态度，巩固了基础分析化学的相关操作；在两人配合上样的过程中，提高了团结合作、相互配合的能力；在处理数据和作图的过程中，提高了处理数据和定性分析的能力。