口腔微生物学
口腔微生物学-XY
口腔微生物学一、名词解释1、牙菌斑生物膜：牙面上或牙周袋内的多种多样菌丛构成的生态系。
细菌在内生长、发育和衰亡。
其复杂的结构使它能包涵对氧不同敏感性的细菌，这些细菌嵌入在由多糖、蛋白质和矿物质组成的基质中。
细菌在其中的代谢活动，影响着细菌与宿主之间或细菌菌属之间的动态平衡。
Dental plaque：牙菌斑，存在于牙面或牙周袋内的一个细菌生态环境，细菌在其中生长、发育和衰亡，并进行着复杂的物质代谢活动，在一定的条件下，细菌及其产物将会对牙齿和牙周组织产生破坏。
2、oral ecosystem（研）：口腔生态系，口腔定植微生物与口腔组成的能独立进行物质、能量和信息交流的动态的生态系统。
生态区和微生物是生态系的主要组成部分。
Ecosystem：生态系，生物体与它们的自然环境连结成的一个整体结构，是能独立进行物质、能量和信息交流的动态的生态系统。
3、biofilm（研）：生物膜，指附着于有生命或无生命物体表面被细菌胞外大分子包裹的有组织的细菌群体。
生物膜是细菌在物体表面形成的高度组织化的多细胞结构，同一菌株的生物膜细菌和浮游生长细菌具有不同的特性。
4、gingipains（研）：牙龈素，即半胱氨酸蛋白酶，是牙龈卟啉单胞菌的重要毒力因子，其致病机制主要是影响菌毛的生物合成、作为粘附因子参与或调解细菌粘附、高度的溶蛋白和降解I型和II型胶原的作用、降低中性粒细胞活性及降解IgG、IgA和C3。
与牙周炎密切相关的有两种，分别是RgP（精氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶）和KgP（赖氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶）。
5、共位群：在代谢上相关的种群。
6、引菌作用：暂时性的菌血症引起的细菌在代谢障碍或创伤的牙髓组织的定植。
诱因：拔牙、洁治或根管治疗等可引起暂时性菌血症，细菌通过血流进入创伤的牙髓或根尖周周围组织，继而引发牙髓感染。
7、Orland无菌鼠实验：无菌鼠+细菌→龋；无菌鼠+高糖→无龋，第一次提出了只有在有细菌存在的条件下，才会发生龋齿。
口腔生物学总结2024
引言概述：口腔生物学是研究与口腔相关的生物学现象和过程的学科，包括口腔解剖学、组织学、生理学、微生物学等多个方面。
口腔生物学不仅涉及到口腔结构和功能的理解，还与口腔健康、口腔疾病的预防和治疗密切相关。
本文将以引言概述、正文内容、总结三个部分来详细阐述口腔生物学的内容。
正文内容：一、口腔解剖学1.口腔结构：牙齿、牙龈、舌、颌骨等。
2.口腔腔隙：颌骨、颞颌关节等。
3.口腔粘膜：种类、结构、功能。
二、口腔组织学1.牙齿组织：牙釉质、牙本质、牙骨质、牙髓等。
2.牙周组织：牙龈、牙槽骨、根膜等。
3.口腔黏膜：结构、功能、分类。
三、口腔生理学1.咀嚼与吞咽：口腔肌肉、涎液分泌等。
2.唾液：成分、分泌机制、功能。
3.酸碱平衡：口腔pH值调节机制。
4.牙本质过敏：机制、预防和治疗方法。
四、口腔微生物学1.口腔微生物群落：定植菌群、变态菌群等。
2.口腔菌群的平衡与失衡：口腔健康与疾病关系。
3.龋齿的微生物学机制：龋齿菌的种类、生物膜的形成等。
4.牙周疾病的微生物学机制：牙周炎、牙周病菌群等。
五、口腔健康与疾病1.龋齿：龋斑、龋洞的形成机制，预防和治疗。
2.牙周疾病：牙周炎、牙周病的定义、病因、临床表现及治疗方法。
3.口腔癌：危险因素、早期诊断和治疗。
总结：本文系统地介绍了口腔生物学的相关内容，包括口腔解剖学、组织学、生理学和微生物学等多个方面。
口腔结构、组织和生理功能的了解有助于理解口腔健康和疾病的机制，并为疾病的预防和治疗提供了科学依据。
口腔微生物学的研究揭示了口腔微生物群落的平衡与失衡对健康和疾病的影响。
口腔健康与疾病的内容涵盖了龋齿、牙周疾病和口腔癌等常见口腔疾病。
希望通过对口腔生物学的学习，能够加深对口腔健康的认识，提高口腔健康的意识，做好口腔健康管理。
口腔微生物实验讲义
（二）几种常见标本的采集方法
1.唾液：
最佳采集时间为晨间起床后，刷牙洗漱前或两餐之间。（10：00 am或4：00pm）。在采集标本前令受检者用温开水清漱口中的食物残渣，然后自然排出唾液于无菌容器中，至少采集0.5—1ml。然后塞好管口，立即送检。
复染：沙黄染液，1-2滴，1分钟，水洗，吸水纸吸干。
三、变链球菌的分离和鉴定
目的要求
1.初步掌握变链球菌分离、鉴定的主要程序和方法。
2.掌握变链球菌的菌落特点、菌细胞形态及革兰染色特征。
材料
1.菌种：变链球菌斜面培养物
2.培养基：（1）分离培养用培养基：MS琼脂平板或血琼脂平板
（2）生化反应用培养基：4.5%NaCl、甘露醇、乳糖、七叶苷
2.牙菌斑：
按菌斑的位置可分为龈上菌斑和龈下菌斑两大类。龈上菌斑指牙颈部龈缘以上牙面的牙菌斑，龈下菌斑指牙龈缘内侧被牙龈所覆盖牙面上的菌斑。
（1）龈上菌斑的采集：
适用于牙龈炎和早期牙周炎的细菌分离。受检者用温开水漱口后，用菌斑指示剂显示出龈上菌斑，然后在无菌纱球局部隔湿的情况下，用无菌匙形器采集，转至有还原转移液的无菌试管中送检。
目的要求：观察口腔微生物的基本形态和一些微生物的动力。
1.不染色检查方法：标本不染色，直接在显微镜下观察。
（1）压滴法
材料
①菌种：变形杆菌，葡萄球菌12小时肉汤培养物。
②其他：载玻片，盖玻片等。
方法
①用接种环取变形杆菌菌液2-3环，置于洁净载玻片中央。
口腔微生物学试题及答案
口腔微生物学试题及答案一、选择题（每题2分，共20分）1. 口腔微生物群落中最常见的细菌是：A. 乳酸菌B. 链球菌C. 螺旋体D. 放线菌答案：B2. 口腔微生物的主要栖息地是：A. 牙齿表面B. 口腔黏膜C. 舌背D. 所有选项答案：D3. 口腔微生物群落中，以下哪种微生物与龋齿的发生关系最密切？A. 乳酸菌B. 链球菌C. 螺旋体D. 放线菌答案：A4. 口腔微生物群落的组成和稳定性受以下哪个因素影响最大？A. 饮食B. 口腔卫生习惯C. 唾液分泌D. 以上都是答案：D5. 口腔微生物群落中，哪种微生物与牙周病的发生关系最密切？A. 乳酸菌B. 链球菌C. 螺旋体D. 放线菌答案：D6. 口腔微生物群落中，以下哪种微生物与口臭的发生关系最密切？A. 乳酸菌B. 链球菌C. 螺旋体D. 放线菌答案：B7. 口腔微生物群落中，以下哪种微生物与口腔癌的发生关系最密切？A. 乳酸菌B. 链球菌C. 螺旋体D. 放线菌答案：C8. 口腔微生物群落的组成和稳定性受以下哪个因素影响最小？A. 饮食B. 口腔卫生习惯C. 唾液分泌D. 年龄答案：D9. 口腔微生物群落中，以下哪种微生物与口腔黏膜炎的发生关系最密切？A. 乳酸菌B. 链球菌C. 螺旋体D. 放线菌答案：B10. 口腔微生物群落中，以下哪种微生物与口腔感染的发生关系最密切？A. 乳酸菌B. 链球菌C. 螺旋体D. 放线菌答案：D二、填空题（每空1分，共20分）1. 口腔微生物群落中，乳酸菌主要通过_________作用导致龋齿的发生。
答案：产酸2. 口腔微生物群落的组成和稳定性受多种因素影响，其中_________是影响最大的因素之一。
答案：唾液分泌3. 口腔微生物群落中，放线菌与牙周病的发生关系密切，主要通过_________作用导致牙周组织的破坏。
答案：产生毒素4. 口腔微生物群落中，螺旋体与口腔癌的发生关系密切，主要通过_________作用导致口腔黏膜的癌变。
口腔生物学实验教程
第二节 口腔生物化学实验
实验六 龈沟液中碱性磷酸酶活性的测定 实验七 唾液钙和磷含量的测定 实验八 唾液分泌情况的测定
内容目录
第三节 口腔疾病分子生物学
第一节 口腔微生物学实验
实验方法：
菌斑 采集 和处 理
染色
漱口、隔湿→ 刮取牙面菌斑
可摘式取菌器或灭菌纸尖 吸取龈沟或牙周袋菌斑
立即置转送液中密闭
震荡、分散菌斑团块
涂片
革兰负性染色
观察
观察细菌形态
分类
分类
第一节 口腔微生物学实验
①龈沟内采集法
②牙周袋内采集法
龈沟或牙周袋的龈下菌斑采集法
第一节 口腔微生物学实验
红色+、浅黄色-
红色+、黄色-
黄色+、无色-
桔黄色+、浅黄色-
黑色+、无色-
浅黄色+、紫蓝色碳粒沉于管底+， 碳粒和明胶混合褐色絮状沉淀+，无沉淀或沉 淀易溶解黑色+、不变色生明显气泡+，无气泡或产生 少量气泡2min内出现蓝色+，不变色-
第一节 口腔微生物学实验
反应板微量快速生化实验：
利用细菌产生的预成酶（胞外酶），在37℃普通孵箱中与生化试剂基质产 生特异的酶反应，通过各种指示剂或特殊的显色产物即可在4小时～24小 时观察到结果。反应板微量快速生化实验的生化鉴定系统包括30个生化实 验基质与相关指示剂、磷酸盐缓冲液（PBS）、细菌标准浊度管以及8个鉴 定系列,可根据细菌的形态、染色性及耐氧实验结果选择不同的系列生化 基质进行鉴定。这8个鉴定系列是：
口腔微生物学
口腔微生物学口腔微生物学是研究口腔内微生物的科学，它涵盖了口腔内微生物的组成、功能、相互作用以及与口腔健康和疾病的关系。
口腔微生物在口腔健康和疾病发生中起着重要作用，了解口腔微生物学对于预防和治疗口腔疾病至关重要。
正常口腔内有数百种微生物，其中包括细菌、真菌、病毒等。
这些微生物组成了口腔微生物群落，形成了复杂的生态系统。
口腔微生物群落的平衡对于口腔的健康至关重要。
当口腔内的微生物群落失去平衡，有害微生物可能会获得优势，导致口腔疾病的发生。
糖与口腔微生物密不可分。
口腔内的病原菌，例如蛀牙菌，可以利用糖类作为其生长和代谢所需的营养物质。
当我们进食含糖食物时，口腔中的糖浓度会增加，从而为有害微生物提供了生存和繁殖的条件。
有害微生物会产生酸性物质，腐蚀牙齿表面的牙釉质，导致蛀牙的形成。
因此，控制口腔内的糖摄入量对于口腔健康至关重要。
除了糖外，口腔卫生也与口腔微生物的平衡有密切关系。
不良的口腔卫生习惯会导致牙菌斑的堆积，进而破坏口腔微生物的平衡。
牙菌斑是一种透明的黏性细菌聚集物，它可以在牙齿表面形成，并吸附有害微生物，对牙齿和牙龈组织产生不良影响。
定期刷牙、使用牙线和漱口水等口腔卫生习惯可以有效清除牙菌斑，维持良好的口腔微生物平衡，预防口腔疾病的发生。
牙齿编码也是口腔微生物学中重要的研究领域之一。
通过分析演化树和微生物群体的遗传学差异，研究人员可以了解不同微生物的功能和相互作用。
这种了解有助于开发新的口腔抗菌药物和治疗方法，为口腔健康的维护和口腔疾病的治疗提供指导。
总之，口腔微生物学是一个生动且全面的学科，它研究口腔内微生物的组成、功能、相互作用以及与口腔健康和疾病的关系。
控制口腔内的糖摄入量、保持良好的口腔卫生习惯以及进行牙齿编码分析都是预防和治疗口腔疾病的重要手段。
通过持续的研究和实践，口腔微生物学将为人们提供更多关于口腔健康的指导。
口腔生物学-口腔正常微生物
口腔正常菌群-获得与发展
• 发展-乳牙列时期（5-24月） 乳牙列为微生物的定植增加了新生境，厌氧菌明 显增加：韦荣氏菌、放线菌、乳酸菌、罗斯菌等， 可以分离到牙龈卟啉单胞菌和放线杆菌。 变异链球菌，血链球菌开始定植牙面。
口腔正常菌群-获得与发展
• 发展-窗口感染期（19-36月） 变异链球菌最易定植在牙面
口腔正常菌群-分类
• 原则 只确定属名，未确定种名的某一株细菌，其拉丁 学名可在属名之后加sp.（species）（正体字）， 如果同属未定种名的若干菌株，则用spp.取代sp.； 如果是新种，在新种的拉丁文学名之后还要加上 “sp. nov.”，nov是novel的缩写。
口腔正常菌群-分类
• 原则 属:是具有共性的若干种的组合，应与其他属有明 显的差异。不同属之间的16SrRNA序列有较大的 差异，应大于5-7%。 种：微生物学分类的最基本单元，种可以认为是 一群性质相似的菌株，与其他菌株群体有明显差 异，根据16S核糖体RNA序列的异同可以作为定种 的依据，凡是16SrRNA序列同源性大于97%的两 株细菌，即可确定为同一种。
口腔正常菌群-获得与发展
• 发展 口腔内微生物获得是一个有序的过程，是有选择 性的定植在特定的生境，并受局部微环境影响。
口腔正常菌群-获得与发展
• 发展-无牙时期 定植于粘膜的先驱菌（pioneer species）是唾液链 球菌、轻缓链球菌、口腔链球菌等； 三个月后口腔内可有一些专性厌氧菌，普氏产黑 色素菌、具核梭杆菌、韦荣氏菌等。
例子
细菌
Bacteria
细菌
Bacteria
厚壁菌门 Firmicutes
杆菌
Bacilli
乳酸菌目 Lactobacillales
微生物学支原体(口腔)
(二)、致病性
致病性 通过以下机制引起细胞损伤： ①从细胞膜获得脂质和固醇作为养料； ②产生有毒的代谢产物； ③溶脲脲原体能粘附精子，影响精子的运动， 且与人类精子膜有共同抗原，可因免疫损伤导 致不育； ④穿透支原体能粘附并侵入CD4+T淋巴细胞引 起免疫损伤。
（一）、肺炎支原体
经空气飞沫传播，引起人类支原体肺炎，症 状较轻，仅有发热、咳嗽等呼吸道症状。肺 炎支原体的诊断方法依靠分离培养和血清学 检查。
支原体的营养要求较高，培养基中一般加入 10~20%血清。最适生长PH值为6.0~6.5，兼性 厌氧，生长缓慢，在含1.4%琼脂的固体培养基 上培养2~3d后出现菌落，典型菌落为荷包蛋样 （核心较厚，向下长入培养基，周边为一层薄 薄的透明颗粒区）。
荷包蛋样菌落
细菌L型与支原体的比较
生物学性状与致病性
1.分离培养 取标本接种在含血清和酵母浸
膏的培养基中，由于支原体生长缓慢，分离 需较长时间，菌落呈典型荷包蛋样。
2.血清学检查 冷凝集试验 非特异性
3.分子生物学检测
（二）、泌尿生殖道感染支原体
引起泌尿生殖道感染的支原体主要有溶脲 脲原体、人型支原体和生殖器支原体。都 为性传播性疾病的病原体。
支原体的顶端结构在泌尿生殖道的感染中 起重要的粘附作用，生殖道的支原体感染 对自然流产、出生缺陷、死胎和不孕（育） 有一定关系。
支原体
支原体是一类没有细胞壁的原核细胞型微生物。 细胞膜含固醇，能通过0.45um滤菌器，呈二分裂 繁殖，含DNA与RNA。是目前所知能在无生命培养 基中繁殖的最小微生物。
一、 概 述
支原体属Mycoplasma
支原体科
支原体
脲原体属Ureaplasma
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动物。 其中的小鼠、大鼠、豚鼠，国外一些发达国家已能大量生 产，并比较方便地应用于日常研究中了。
第二节
资料仅供参考,不当之处，请联系改正。
牙菌斑和生物膜
1.基本概念 2.牙菌斑的生物学作用 3.牙菌斑的形成过程 4.牙菌斑的分类 5.牙菌斑的成分
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pH a、口腔pH的特点：口腔可提供给微生物相对恒定的
pH环境（5.0-8.0） b、影响口腔pH的因素：
外源性物质：饮料、食物等； 细菌发酵： 唾液缓冲：碳酸盐是刺激唾液重要的缓冲系统
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❖ 宿主因素： 口腔粘膜表面的光滑程度 不同性别、不同年龄、不同饮食习惯的人口腔内
菌动物的盲肠占体重的2-3%，恢复正常喂 养，盲肠可占体重的15-40%） 营养功能（肠道菌群可提供Vk、B6、B2和生物
素等）
❖ 损害作用：
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导致内源性感染
为外源性感染提供条件
a、正常菌群可为外源细菌提供碳源和氮源
b、正常菌群营造的pH和Eh可适于某些菌生长
c、正常菌群可产生青霉素酶等利于外源菌生长
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一、基本概念
❖ 牙菌斑（plaque）：堆积在牙表面或修复体表面， 不能被中等速度的水冲去的细菌团块。
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❖ 生物膜(biofilm)：由对氧不同敏感性的细菌（需氧 菌、兼性厌氧菌或绝对厌氧菌等）嵌入多糖、 蛋白质和矿物质组成的基质中共同构成的膜 性结构。是龋病和牙周病的主要病因。
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氧张力
a、口腔内氧张力的特点：在口腔各个部位上氧的浓
度有很大的差别，氧张力也有很大差别，氧
化还原电势（Eh）也不同。
舌前部表面 氧张力为16.4% 适于需氧菌生长
牙周袋
氧张力为0% 适于厌氧菌生长
·
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b、根据细菌对氧的敏感度不同分为： 绝对需氧菌 绝对厌氧菌 兼性厌氧菌 耐氧厌氧菌 微嗜氧菌
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附注：牙菌斑显示剂
❖ 简介：牙菌斑显示剂安全无毒，含有食用色素。通 常有液剂和片剂两种，专业人员一般使用液剂蘸湿 后给患者使用，患者使用片剂。
❖ 用法：放入口中，用双侧牙齿将其充分嚼碎，用舌 尖舔食内外侧，吐出口内残余物，充分漱口，照镜 观察红染部位。
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d、正常菌群可降解保护性抗体
使宿主致敏：正常菌群可引起肌体产生免疫反应，
可能对宿主造成损害。
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3、影响口腔生态系的因素 ❖ 物理化学因素：
温度 a、口腔内温度变化的特点：平均温度37℃ b、按照口腔微生物在不同温度范围内生长分为：
嗜冷微生物：25以℃下生长 嗜热微生物：45以℃上生长 嗜温微生物：25-37℃以下生长
的清除牙齿邻接面的牙菌斑； 5.冲洗器 冲洗器的高压水柱可将牙面及牙间隙的食物残渣和
细菌冲洗干净。
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二、牙菌斑的生物学作用★
口腔正常菌群的相对恒定。 溶菌酶、乳铁蛋白、乳过氧化物酶：对多种菌有非特
异性溶菌作用。 唾液素：碱性四肽物质，含量很少。
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❖ 细菌因素： a、抵抗宿主防御系统的能力大小 b、对所附着的粘性表面或牙体表面的亲和力大小 c、细菌间的协同或拮抗作用 d、对口腔内营养物质的利用能力不同导致菌群的 不同分布
❖ 牙菌斑的清除方法：
1.刷牙 如果刷牙得当，就可以使牙齿表面的牙菌斑量大为减 少，因此我们必须养成每天早晚刷牙的好习惯，并掌 握正确的刷牙方法；
2.牙线 能有效清除牙齿邻接面的牙菌斑，减少邻面龋的发生； 3.牙签 在牙龈萎缩、牙与牙之间出现间隙的情况下，可借助横
断面呈三角形牙签来清除邻接面的牙菌斑； 4.牙间刷 牙间刷也适用于牙齿之间出现间隙的情况，能有效
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第一节 口腔生态系及其影响因素
1.基本概念★ 2.口腔生态系
组成 影响因素★
一、基本概念
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❖ 生态系（ecosystem）：生物与生物之间以及生物与环境 之间的相互关系。
❖ 生态学（ecology）：研究生物与环境的相互依赖、相互制 约的科学。
❖ 微生态学（microecology）：利用细胞水平研究技术或分子 水平的研究技术，对生态学的内容进行研究，该学科体
系即为微生态学。
❖ 口腔生态系(oral ecosystem)：口腔正常菌群之间以及它们 与宿主之间的相互作用称为口腔生态系。
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二、口腔生态系
1、组成 颊上皮生态系统：以G+链球菌为主 舌背部生态系统：以G+纤毛菌为主 龈上牙菌斑生态系统：以兼性厌氧菌为主 龈下牙菌斑生态系统：以厌氧菌为主
正常菌群的构成不同 宿主唾液和龈沟液中不同的物质组成 a、抗体：SIgA和IgG
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SIgA：分泌型抗体，是唾液中的主要抗体 IgG：由血清中的浆细胞合成并分泌，是龈沟液中的 主要抗体，能保持龈下菌丛的稳定。 b、唾液中的其他蛋白组份 唾液粘蛋白：对口腔细菌的生长具有选择性，维持
❖ 宿主的可控制因素：饮食习惯、口腔卫生
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附注：无菌动物
❖ 无菌动物（Germ free animals）是指机体内外均无任何寄生
物（微生物和寄生虫）的动物。此种动物在自然界中并不存 在，必须用人为的方法培育出来。 ❖ 应用：无菌动物所具有的独特优越性使其成为一种新型的实
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2、作用 ❖ 收益作用：
竞争营养物质 产生抑制性代谢产物（乳酸杆菌分泌乳酸盐抑制白色念
珠菌生长） 占据空间（轻链菌的生长抑制化脓性链球菌、肺炎球菌
的生长） 减低口腔PH 对宿主免疫系统的刺激 正常菌群有助于组织和器官的正常发育（例：无