实验十二 氨基转换反应的定性鉴定
转氨基运用实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 了解转氨基作用的基本原理和过程。
2. 掌握转氨基实验的操作步骤。
3. 观察并分析转氨基作用的结果，加深对转氨基作用的理解。
二、实验原理转氨基作用是指氨基在转氨酶的催化下，从一个氨基酸转移到另一个α-酮酸上的过程。
该过程不产生游离的氨，而是通过氨基转移酶将氨基从一个化合物转移到另一个化合物上。
转氨基作用在生物体内具有重要的生理意义，如氨基酸的合成、分解以及代谢等。
实验中，我们以丙氨酸和α-酮戊二酸为底物，在转氨酶的催化下进行转氨基反应，通过纸层析法观察反应结果，从而验证转氨基作用的实现。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：- 丙氨酸- α-酮戊二酸- 转氨酶- 水合氯醛- 硫酸铵- 氯化钠- 氨水- 纸层析纸- 展开剂2. 实验仪器：- 电子天平- 恒温水浴锅- 离心机- 研钵- 移液管- 试管- 滴管- 显微镜四、实验步骤1. 准备实验试剂：- 将丙氨酸和α-酮戊二酸溶解于水中，配制成一定浓度的溶液。
- 将转氨酶溶解于水中，配制成一定浓度的溶液。
2. 制备反应混合液：- 取一定量的丙氨酸溶液和α-酮戊二酸溶液，混合均匀。
- 加入适量的转氨酶溶液，混匀。
3. 水浴加热：- 将反应混合液放入恒温水浴锅中，加热至一定温度，保持一段时间。
4. 冷却反应混合液：- 将加热后的反应混合液取出，置于室温下冷却。
5. 纸层析：- 将制备好的反应混合液滴在纸层析纸上，待溶剂自然挥发后，用展开剂进行展开。
6. 观察结果：- 观察纸层析纸上各物质的迁移距离，分析反应结果。
五、实验结果与分析1. 结果观察：- 在纸层析纸上，观察到丙氨酸和α-酮戊二酸的反应产物，分别为丙酮酸和谷氨酸。
2. 结果分析：- 实验结果表明，在转氨酶的催化下，丙氨酸和α-酮戊二酸发生了转氨基反应，生成了丙酮酸和谷氨酸。
这验证了转氨基作用的实现。
六、实验总结通过本次实验，我们了解了转氨基作用的基本原理和过程，掌握了转氨基实验的操作步骤，并通过纸层析法观察到了转氨基作用的结果。
12-氨基十二烷酸 检测方法
12-氨基十二烷酸检测方法【原创实用版3篇】目录（篇1）I.十二烷酸检测方法概述1.十二烷酸的化学性质和结构特征2.十二烷酸的检测方法及其原理3.实验步骤和数据处理方法4.实验注意事项和安全措施II.实验步骤和数据处理方法1.十二烷酸的提取和净化2.十二烷酸的衍生化和分离3.十二烷酸的检测和分析4.数据处理和分析结果III.实验注意事项和安全措施1.实验操作注意事项2.实验设备和试剂的安全使用3.实验废液的处理和排放4.个人防护措施和紧急处理方法正文（篇1）12-氨基十二烷酸检测方法十二烷酸是一种常见的有机酸，广泛存在于自然界中。
由于其化学性质和结构特征，可以通过化学方法进行检测和分析。
以下是一种常用的12-氨基十二烷酸检测方法：一、十二烷酸检测方法概述十二烷酸的化学性质和结构特征：十二烷酸是一种含有羧基和氨基的有机酸，分子式为C12H22O4。
其结构中含有多个官能团，如羧基、氨基和烃基等，这些官能团对其化学性质和生物活性具有重要的影响。
十二烷酸的检测方法及其原理：12-氨基十二烷酸的检测方法主要包括衍生化、分离、检测和分析等步骤。
其中，衍生化是为了提高十二烷酸的稳定性、选择性和灵敏度，使其能够被高效液相色谱仪检测到。
目录（篇2）1.12-氨基十二烷酸介绍2.检测方法原理3.实验步骤4.结果与讨论5.结论正文（篇2）1.12-氨基十二烷酸介绍12-氨基十二烷酸是一种有机物，化学式为C13H25NO3。
它是一种白色至微黄色结晶粉末，有特殊的气味。
它微溶于水，易溶于醇。
它广泛用于制药、化妆品和香料等领域。
2.检测方法原理12-氨基十二烷酸的检测方法主要是通过测定其含量来完成的。
其原理是根据12-氨基十二烷酸的特性，利用高效液相色谱法（HPLC）进行测定。
3.实验步骤实验步骤主要包括样品的制备、标准溶液的制备、测定条件的确定、样品的测定和结果计算等步骤。
首先，需要将样品进行前处理，将其制成可供测定的溶液。
转氨基反应及GPT活性测定
转氨基反应及GPT活性测定一、实验目的：1、掌握转氨基反应的过程。
2、掌握层析分离的原理和方法。
3、了解茚三酮能使游离氨基酸显色。
二、实验原理：1.转氨基反应转氨基反应是氨基酸代谢和嘌呤合成过程中的重要反应。
指的是一种α-氨基酸的α-氨基在转氨酶的催化下，转移到α-酮酸的酮基上，生成相应的α-氨基酸；而原来的α-氨基酸则转变为相应的α-酮酸。
谷丙转氨酶（GPT）催化的转氨基反应：2.层析层析分离技术是一种物理的分离混合物的方法。
在互相接触的两相中，混合物各组分的物理化学性质的不同（如分子大小、结构、极性、吸附力等），导致各组分在两相中的分配系数各不一样。
当混合物随着流动相流动时，由于各组分在两相中分配系数不一样，导致不同的组分在固定相中“静止”的时间不一样，这样就表现为随流动相运动速度不一样。
谷氨酸的相对分子质量为167,丙氨酸的相对分子质量为89，谷氨酸带有负电荷，极性更强。
根据相似相容原理，谷氨酸的分配系数相对小于丙氨酸的分配系数。
所以谷氨酸迁移慢。
本实验使用纸层析。
某种组分在固定相中的移动速度可用Rf值来表示：3.氨基酸的茚三酮反应茚三酮可与脯氨酸反应显黄色，与其它所有天然氨基酸反应显紫色。
常用此反应检测氨基酸的存在。
三、实验步骤：1.肝匀浆制备取新鲜大白鼠肝脏1 g，在瓷研钵中用剪刀剪碎，逐步加入9 mL冰冷的0.01mol/L pH7.4磷酸缓冲液，迅速研磨成匀浆。
2.GPT催化的转氨基反应取干燥洁净的小试管2只，按下表操作：混匀后置37℃水浴半小时。
然后立即将测定管放入沸水浴中10min以终止反应。
取出冷却后，两管同时离心，将上清液分别转移至干燥小试管中。
3.层析①取直径为12 cm的圆形滤纸一张，用圆规作半径为1cm的圆，过圆心作2条垂直的直线。
在滤纸圆心处打一小孔（铅笔芯大小）②用毛细滴管在1、3处点测定和对照管上清液各2-3滴。
注意斑点小于0.5cm，每点一滴，要用电吹风吹干后才能点后一滴。
【优质】转氨基实验报告word版本 (10页)
本文部分内容来自网络整理，本司不为其真实性负责，如有异议或侵权请及时联系，本司将立即删除！== 本文为word格式，下载后可方便编辑和修改！ ==转氨基实验报告篇一：实验六纸层析法观察转氨基作用实验报告实验六纸层析法观察转氨基作用【实验名称】：纸层析法观察转氨基作用09救援一班第三大组李岚宇 201X222336室温：28°（一）实验目的：1、学习氨基酸纸层析的基本原理。
2、掌握氨基酸纸层析的操作原理。
（二）实验原理：转氨基作用是氨基酸代谢过程中的一个重要反应，在转氨酶的催化下，氨基酸的а-酮酸与α-酮基的互换反应称为转氨基作用。
转氨基作用广泛地存在于机体各组织器官中，是体内氨基酸代谢的重要途径。
氨基酸反应时均由专一的转氨酶催化，此酶催化氨基酸的α－氨基转移到另一α－酮基酸上。
各种转氨酶的活性不同，其中肝脏的丙氨酸氨基转移酶（ALT）催化如下反应：α—酮戊二酸 + 丙氨酸谷氨酸 + 丙酮酸本实验以丙氨酸和α-酮戊二酸为底物，加肝匀浆保温后，用纸层析法检查谷氨酸的出现，以证明转氨基作用。
纸层析属于分配层析。
以滤纸为支持物，滤纸纤维与水亲合力强，水被吸附在滤纸的纤维素的纤维之间形成固定相。
有机溶剂与水不相溶，把预分离物质加到滤纸的一端，使流动溶剂经此向另一端移动，这样物质随着流动相的移动进行连续、动态的不断分配。
由于物质分配系数的差异，而使移动速度就不一样，在固定相中，分配趋势较大的组分，随流动相移动的速度就慢，反之，在流动相分配趋势较大的成分，移动速度快，最终不同的组分彼此分离，物质在纸上移动的速率可以用比值Rf表示： ????ALT物质在一定的溶液中的分配系数是一定的，故比值Rf也相对稳定，因此在同一层析体系中可用Rf值来鉴定被分离的物质。
（三）实验材料与仪器：试剂：1、0.01mol/L pH 7.4磷酸盐缓冲液。
2、0.2mol/L Na2HPO4溶液81ml与0.2mol/L NaH2PO4溶液19ml混匀,用蒸馏水稀释20倍。
实验十二转氨作用(精)
实验十二 转氨作用【实验目的】1．通过实验掌握水平方向滤纸层析原理和技术 2．了解转氨作用过程。
【实验原理】转氨基作用是由转氨酶（氨基转移酶）催化的，在这个反应中，α-氨基酸的氨基与α-酮酸的酮基之间交换，α-氨基酸转变成相应的α-酮酸，α-酮酸变成新的一种α-氨基酸。
转氨基作用是一种可逆反应。
每个转氨基反应均由专一的转氨酶所催化，在不同的生物有机体中均有转氨酶分布。
本实验是将丙氨酸和α-酮戊二酸与肝匀浆一起水浴反应，肝中的丙氨酸氨基转移酶（ALT ，又称谷丙转氨酶GPT ）含量丰富，该酶可将丙氨酸的氨基转移给α-酮戊二酸，产生丙酮酸和谷氨酸。
利用圆盘纸层析鉴定谷氨酸的存在，并且验证组织中的转氨作用。
在肝脏谷丙转氨酶(GPT)催化的转氨基作用，反应方程式如下：CHCOOH CH 2NH 2CH 2COOH ++COCOOH CH 3CHCH 3COOH NH 2CCOOH CH 2OCH 2COOH 谷氨酸丙氨酸丙酮酸α‐酮戊二酸【实验材料】1． 实验器材培养皿；表面皿；滤纸；匀浆器；试管；试管架；恒温水浴锅；毛细管；移液管；喷雾器；剪刀；铅笔；格尺。
2． 实验试剂⑴ 0.01M pH7.4磷酸缓冲液：0.2MNa 2HPO 4溶液81ml , 0.2MNaH 2P04溶液19ml 混匀，蒸馏水稀释20倍。
⑵ 0.1M 丙氨酸溶液：称取丙氨酸0.891克先溶于少量0.01MpH7.4磷酸缓冲液中，以1MNa0H 仔细调节至pH7.4后，用磷酸盐缓冲液加至100ml 。
⑶ 0.01M ａ-酮戊二酸溶液：称取ａ-酮戊二酸1.461克先溶于少量0.01M pH7.4磷酸缓冲液中，用1M Na0H 仔细调节至pH7.4后，用磷酸盐缓冲液加至100ml 。
⑷ 0.1M 谷氨酸溶液：称取谷氨酸0.735克先溶于少量0．01M pH7.4磷酸缓冲液中， 以1MNa0H 仔细调节至pH7.4后，用磷酸缓冲液加至100ml 。
氨基移换反应及其产物的鉴定
实验报告课程名称：生物化学实验（甲） 指导老师： 成绩： 同组学生姓名：一、实验目的和要求 三、实验材料和主要仪器 五、实验数据记录和处理 七、实验讨论和心得 二、实验内容和原理 四、实验方法和步骤 六、实验结果和分析一、实验目的和要求1、学习鉴定氨基移换反应的简便方法及其原理；2、学习纸层析的原理和操作技术。
二、实验内容和原理1.氨基移换反应：在氨基移换酶（转氨酶)的催化下，氨基酸的α-氨基和α-酮酸的α-酮基之间发生的互换反应。
转氨酶的种类很多，任何一种氨基酸进行转氨作用时都由其专一的转氨酶催化。
转氨酶的最适pH 接近7.4，在各种转氨酶中，谷丙转氨酶（GPT ）和谷草转氨酶（GOT ）的活性最强。
转氨酶广泛存在于机体的各种组织中。
在肝、心、肾等组织中谷丙转氨酶（GPT ）、谷草转氨酶（GOT ）活性较高。
GPT 催化下的转氨基反应为：L －谷氨酸脱氢酶在体内特别是在肝细胞内含量丰富，活性高，催化L －谷氨酸氧化脱－NH2，加碘乙酸能抑制其活性，从而可以保护氨基移换反应的产物L －谷氨酸。
本实验用纸层析法，检查由丙氨酸和α—酮戊二酸在肝细胞谷丙转氨酶（GPT) 的作用下所生成的谷氨酸，证明组织内的氨基移换作用。
2. 纸层析原理：滤纸层析是以滤纸作为惰性支持物的分配层析。
利用不同物质在两个互不相溶的溶剂中分配情况（溶解度）的不同来分离混合物的一种技术。
层析溶剂是由有机溶剂和水组成。
滤纸纤维上羟基具有亲水性，因此吸附一层水作为固定相，而通常把有机溶剂作为流动相。
进行分离时，由于被分离物质的组分在两相中的分布不同，随着流动相的移动，物质将在两相间进行连续的、动态的不断分配，从而造成不同组分移动的速度也不相同。
易溶于流动相中的组分移动快，在固定相中溶解度大的组分移动慢，于是得到分离。
专业： 姓名： 学号：日期： 地点： 装订线实验名称：_ __________________姓名：学号：溶质在滤纸上的移动速率用Rf 值表示：Rf=X/Y在一定的条件下某种物质的Rf 值是常数。
转氨基实验报告结论(3篇)
第1篇一、实验概述本次实验通过纸层析法观察转氨基作用，旨在学习氨基酸纸层析的基本原理，掌握氨基转移反应的过程和条件，以及通过纸层析法分析转氨基反应的结果。
实验过程中，我们使用了多种氨基酸作为底物，转氨酶作为催化剂，通过观察层析板上氨基酸的迁移情况，分析了转氨基作用的效率及其影响因素。
二、实验结果与分析1. 氨基酸纸层析原理纸层析法是一种常用的分离和鉴定化合物的方法。
在本次实验中，纸层析法用于分离混合氨基酸，并观察转氨基反应的结果。
层析原理基于不同物质在固定相（滤纸）和流动相（层析溶剂）中的分配系数不同，导致物质在层析过程中的迁移速率不同，从而实现分离。
2. 转氨基反应的观察实验中，我们选取了多种氨基酸作为底物，包括丙氨酸、甘氨酸、谷氨酸等。
在转氨酶的催化下，这些氨基酸发生转氨基反应，生成相应的α-酮酸和新的氨基酸。
通过观察层析板上氨基酸的迁移情况，我们可以分析转氨基反应的效率。
（1）丙氨酸转氨基反应：实验结果显示，丙氨酸在转氨酶的催化下，发生转氨基反应生成丙酮酸和新的氨基酸。
层析板上丙氨酸的斑点明显减少，丙酮酸的斑点明显增多，表明转氨基反应发生。
（2）甘氨酸转氨基反应：实验结果显示，甘氨酸在转氨酶的催化下，发生转氨基反应生成甘酮酸和新的氨基酸。
层析板上甘氨酸的斑点明显减少，甘酮酸的斑点明显增多，表明转氨基反应发生。
（3）谷氨酸转氨基反应：实验结果显示，谷氨酸在转氨酶的催化下，发生转氨基反应生成α-酮戊二酸和新的氨基酸。
层析板上谷氨酸的斑点明显减少，α-酮戊二酸的斑点明显增多，表明转氨基反应发生。
3. 影响转氨基反应的因素（1）pH值：实验结果显示，不同pH值条件下，转氨基反应的效率有所不同。
在适宜的pH值范围内，转氨基反应的效率较高。
因此，pH值是影响转氨基反应的一个重要因素。
（2）温度：实验结果显示，不同温度条件下，转氨基反应的效率有所不同。
在一定温度范围内，随着温度的升高，转氨基反应的效率逐渐提高。
氨基化反应的定义
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氨基化反应的定义
一、氨基化反应的定义
嗨，小伙伴们！今天咱们来唠唠氨基化反应的定义哈。
氨基化反应呢，简单来说，就是在一个化学反应里，有氨基（-NH₂）这个基团参与进去，然后和其他的物质发生反应，让这个物质带上氨基这个小标签啦。
比如说，有些化合物原本没有氨基，经过氨基化反应之后呢，就有了氨基这个部分。
从化学的角度更细致地看呀，氨基化反应有很多种情况呢。
有的是氨直接和别的东西反应，氨里的氮原子就会和其他物质连接起来，形成新的化学键，这样就完成了氨基化的过程。
还有的呢，是含有氨基的化合物，像一些胺类物质，和其他的反应物进行反应，也能让被反应的物质带上氨基的特性。
这氨基化反应在化学的世界里可重要啦。
在有机化学领域，它常常被用来合成各种有机化合物。
比如说合成一些药物分子的时候，氨基化反应可能就是其中一个关键的步骤哦。
要是没有这个反应，很多药物可能就没办法合成出来，那生病的人可就惨啦。
在工业上呢，氨基化反应也有用武之地。
像是生产某些塑料或者纤维的时候，氨基化反应能改变原料的性质，让它们变得更适合加工成我们需要的产品。
反正就是说呢，氨基化反应就是一种让物质带上氨基或者让氨基参与反应的化学过程，在化学、工业、医药等好多领域都发挥着超级重要的作用呢！
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氨基转换反应
试管号 酶液 15%三氯乙酸 1 2 10d 10d 10d,10min
1%Glu 10d 10d
1%丙酮酸 10d 10d
0.1%碳酸氢钾 0.05%碘乙酸 10d 10d 5d 5d
37℃-40℃反应1.5小时，经常摇动确保反应进行完全。保温 后取出第2号试管，加入15%三氯乙酸10d，沉淀蛋白终止反 应。将两只试管中的内容物转移到离心管中，2500rpm/min 离心5min，将上清转移到干净的试管中备用。
3、氨基转换反应的定性鉴定
学习一种鉴定氨基转换反应的简便方法 掌握纸层析的原理和操作技术 体外氨基转换反应原理
实验原理
• 转氨酶能催化α -AA的氨基与α -酮酸的α-酮基互换，生成 一种新的氨基酸和新的α-酮酸，这种反应称为转氨作用。 它在体内蛋白质合成与分解等中间代谢中，在糖、脂肪、 蛋白质之内物质代谢的相互关系、相互转化上都起着重要 作用。 • 任何一种氨基酸的转氨基反应都由专一的转氨酶催化，其 最适pH接近7.4。其中Glu-草酰乙酸转氨酶及谷氨酸-丙酮 酸转氨酶活力最强。当机体发病时，如肝炎、心肌梗塞等， 血清中转氨酶活力显著增加。测定转氨酶活性的方法有分 光光度法、纸上层析、光电比色法。 • 为防止丙酮酸被组织中其它酶氧化或还原，可加碘乙酸或 溴乙酸以抑制酵解或氧化作用。
纸层析检测
纸层析是以滤纸为载体，用一定的溶剂系统展开而达到分 离、分析目的的层析方法。此法可用于定性，亦可用于分离制 备微量样品。
20ml展层剂饱和20min
点样
展层2小时左右
显色
Rf值的定义
物质分离后在图谱上的位置，可用比移值 Rf来表 示，Rf值的定义是：从溶质层析的起点(原点)到 层析斑点中心的垂直距离与从原点到溶剂流动的 前沿的垂直距离的比值：
Rf=原点到层析点中心的距离/原点到溶剂前沿的距离
两相体积比在同一实验情况下是不变的，所以 Rf 值的主要决定因素是分配系数 (α)。对于每一 物质在一定条件下α值是固定的，因此Rf值为其特 征常数，可做为定性鉴定的参考数值。
影响 Rf值的主要因素
1.物质结构对于Rf值的影响 2.溶质与溶剂间的相互作用对Rf值的影响 3.pH对Rf值的影响 4. 滤纸对Rf值的影响 5.温度对Rf值的影响
纸层析检测原理
• 滤纸层析法是以滤纸作为惰性支持物的分配层析。 滤纸的成份是纤维素，纤维素的— OH基为亲水 性基团，因此可吸附一层水或其它溶剂作为固定 相。通常把有机溶剂作为流动相。当将溶质样品 (被分离物)点在滤纸的一端后，该物质溶解在吸 ( ) 附于支持物上的水分子或其它溶剂分子的固定相 中，有机溶剂自下而上移动，称为上行层析。流 动相流经支持物时与固定相对溶质进行连续的抽 提，物质在两相间不断分配的结果即得到分离。
转氨基反应的定性鉴定原理
• 无色物质的层析图谱可用光谱法 (如核苷酸类物质用紫外 光照射)或显色法鉴定。氨基酸纸上层析图谱常用的显色 剂有茚三酮、吲哚醌。 • 本实验采用茚三酮为显色剂。茚三酮显色反应受温度、 pH，时间影响较大。如果要使结果重复，必须严格控制 上述条件。样品中如含有大量盐酸会使氨基酸不显出颜色。 样品中含大量盐时显色点上会出现白斑，空气中其它的杂 质如氨，硫化氢或酚等皆会影响显色结果。铜离子可以与 氨基酸-茚三酮显色物形成络合物，颜色较稳定，用硫酸 铜乙醇溶液洗脱层析后的显色斑点，可以通过比色法定量 测定氨基酸含量。
转氨基反应的定性鉴定原理
37℃保温1.5小时 氨+还原茚三酮 氨+还原茚三酮
水考
• 影响转氨基作用的因子有哪些？ • 实验过程中应注意些什么？ • 网上查询有关转氨酶的研究动态。