丙酮酸及系列产品的检测与应用

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丙酮酸耐量实验原理

丙酮酸耐量实验原理

丙酮酸耐量实验原理一、引言丙酮酸是一种有机化合物,化学式为C3H6O2,常见于生物体内,例如酒精代谢过程中产生的乙醛可以进一步氧化生成丙酮酸。

丙酮酸在生物化学、有机化学和药物化学等领域具有广泛的应用和研究价值。

为了更全面了解丙酮酸的性质和特性,科学家们开展了丙酮酸耐量实验,以便对其耐受性进行评估和分析。

二、实验原理丙酮酸耐量实验的原理是通过测定不同浓度的丙酮酸溶液对生物体生长、代谢和存活的影响,从而评估丙酮酸的耐受性。

实验中通常使用细胞培养技术或动物模型进行研究。

1. 细胞培养实验细胞培养实验是一种常用的评估丙酮酸耐受性的方法。

在实验中,科学家将不同浓度的丙酮酸溶液加入细胞培养基中,然后培养细胞一段时间。

通过观察细胞形态、生长速度和存活率的变化,可以得出不同浓度丙酮酸对细胞的影响程度。

通常会使用细胞存活率、细胞增殖率和细胞凋亡率等指标来评估丙酮酸的耐受性。

2. 动物模型实验动物模型实验是另一种评估丙酮酸耐受性的常用方法。

科学家通常选择小鼠或大鼠作为实验对象,将不同浓度的丙酮酸溶液注射或灌胃给动物,然后观察动物的行为、生理指标和组织病理学变化等。

通过对动物的观察和数据分析,可以评估丙酮酸对动物的影响程度,进而判断其耐受性。

三、实验步骤丙酮酸耐量实验的步骤根据实验目的和实验对象的不同而有所差异。

以下以细胞培养实验为例,介绍一般的实验步骤。

1. 细胞培养准备准备细胞培养所需的培养基、培养皿和细胞悬液。

将培养基倒入培养皿中,加入适量的细胞悬液。

2. 丙酮酸处理将适量的丙酮酸溶液加入培养基中,使得最终丙酮酸的浓度符合实验要求。

通常会设置不同浓度的丙酮酸处理组和对照组。

3. 细胞培养将处理好的细胞培养皿放入恒温培养箱中,控制适宜的温度、湿度和气体环境,培养一定的时间。

4. 观察和记录观察细胞的形态变化、生长速度和存活率等指标,并记录相关数据。

5. 数据分析根据观察和记录的数据,进行统计学分析,评估丙酮酸对细胞的影响程度。

丙酮酸的测定方法

丙酮酸的测定方法

丙酮酸的测定方法 Revised by Liu Jing on January 12, 2021实验七丙酮酸含量的测定一、实验目的掌握植物组织中丙酮酸含量测定的原理和方法。

二、实验原理植物样品中的组织液,用三氯乙酸去蛋白质后,其中所含的丙酮酸可与2,4—二硝基苯肼作用,生成丙酮酸—2,4—二硝基苯腙,后者在碱性溶液中呈樱红色,其颜色可用分光光度计测量,与已知丙酮酸标准曲线进行比较,即可求得样品中丙酮酸的含量。

三、实验器材与试剂1、.实验器材分光光度计;研钵;具塞刻度试管:20mL×8;容量瓶:100mL×2;移液管:1mL×15mL×4;量筒:10mL×1;离心机;天平;大蒜、大葱或洋葱2、试剂(1)8%三氯乙酸(当日配制置冰箱中备用)(2)1.5mol/L氢氧化钠(3)0.1%2,4—二硝基苯肼:称取2.4—二硝基苯肼100mL,溶于2mol/LHCl中配成100mL溶液,盛入棕色试剂瓶,保存于冰箱内。

(4)丙酮酸钠四、实验操作步骤1.丙酮酸标准曲线的制作:称取丙酮酸钠7.5mg于烧杯中,用8%三氯乙酸溶解,转入100mL容量瓶中,并用8%三氯乙酸定容,此液为60μg/mL的丙酮酸原液。

取6支试管,按下表数据配制不同浓度的丙酮酸标准液:1.5mol/L的氢氧化钠溶液,摇匀显色,在520nm波长下比色。

做标准曲线。

2.植物样品组织液的提取:称取植物样品(大蒜、大葱或洋葱)5g,于研钵中加入少许石英沙及少量8%三氯乙酸,仔细研成匀浆,再用8%三氯乙酸洗入100mL容量瓶中(沙留在研钵内),定容至刻度。

静置30min,取10mL匀浆液离心(4000r/min)10min,取上清液备用。

3.组织液中丙酮酸的测定1.5mol/L氢氧化钠溶液,摇匀显色。

在520nm波长下比色,记录吸光度,在标准曲线上查得丙酮酸的含量。

五、结果处理式中:A—标准曲线中查得的丙酮酸克数。

丙酮酸检测试剂盒(二硝基苯肼比色法)

丙酮酸检测试剂盒(二硝基苯肼比色法)

丙酮酸检测试剂盒(二硝基苯肼比色法)简介:丙酮酸(Pyruvic acid)又称2-氧代丙酸,是参与整个生物体基本代谢的中间产物之一,可通过乙酰CoA 和三羧酸循环实现体内糖、脂肪和氨基酸间的互相转化,丙酮酸在三大营养物质的代谢联系中起着重要的枢纽作用。

丙酮酸检测试剂盒(二硝基苯肼比色法)检测原理是在酸性条件下,丙酮酸与二硝基苯肼反应,生成丙酮酸丙酮酸-二硝基苯腙复合物,后者经氧化呈樱桃红色,通过分光光度比色法测定520nm 处吸光度,据此通过与标准曲线对比可以计算出PA 水平。

该试剂盒可用于检测植物、细胞或组织、血浆、血清等样品中内源性的丙酮酸含量,尤其适用植物样品丙酮酸含量的检测。

该试剂盒仅用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。

组成:操作步骤(仅供参考):1、 准备样品:① 血浆、血清、尿液及其他体液样品:血浆、血清按照常规方法制备后可以直接用于本试剂盒的测定,尿液通常也可以直接用于测定,-20℃冻存。

② 细胞或组织样品:取2g 组织样品,加入组织匀浆液,仔细研磨,转移至新的离心中,清洗研磨器一并倒入离心管中,补组织匀浆液至,充分混匀,离心取上清,-20℃冻存,用于PA 的检测。

③ 高浓度样品:如果样品中含有较高浓度的PA ,可以使用原有的裂解液或PBS 等进行稀释,如鸡血清、血浆可稀释5~10倍后检测。

2、 配制标准品工作液:如果检测血清、血浆、尿液等样品,取丙酮酸标准(6mg/ml),按取丙酮酸标准(6mg/ml):蒸馏水=1:99的比例配制,使浓度达到60μg/ml 3、 检测血清、血浆、尿液等样品时,按下表操作:试管号/ml 0 1 2 3 4 5 丙酮酸标准(60μg/ml)0.30.60.91.21.5编号 名称TC0751 50T Storage试剂(A): 丙酮酸标准(6mg/ml) 1ml 4℃ 避光 试剂(B): 组织匀浆液 250ml RT 试剂(C): 苯肼显色液 30ml RT 试剂(D): PA assay buffer 150mlRT 使用说明书1份蒸馏水 1.5 1.2 0.9 0.6 0.3 0 丙酮酸浓度(μg/ml) 0 12 24 36 48 60检测组织样品时,按下表操作:试管号/ml 0 1 2 3 4 5 丙酮酸标准(60μg/m,匀浆液配制) 0 0.3 0.6 0.9 1.2 1.5组织匀浆液(检测组织样本时用) 1.5 1.2 0.9 0.6 0.3 0 丙酮酸浓度(μg/ml) 0 12 24 36 48 604、加样:按照下表设置空白管、标准管、测定管,溶液应按照顺序依次加入,并注意避免产生气泡。

紫外分光光度法测定丙酮酸

紫外分光光度法测定丙酮酸

紫外分光光度法测定丙酮酸
紫外分光光度法是一种常用的分析方法,可以用于测定丙酮酸的浓度。

测定步骤如下:
1. 准备样品:将待测溶液中的丙酮酸转移至紫外光度计量筒中。

如果样品浓度较高,可以适当稀释。

2. 设置仪器:将紫外光度计设置在适当的波长,通常在190-400nm 之间选择一个合适的波长。

同时进行零点校准,即不加入样品的情况下记录光吸收。

3. 测量样品:将样品加入光度计量筒中,记录下吸光度值。

4. 计算浓度:根据比尔定律,计算出丙酮酸的浓度。

比尔定律表示吸光度与浓度之间呈线性关系。

需要注意的是,测定时要避免其他物质的干扰,确保样品中只含有丙酮酸。

同时,还需要注意选择适当的波长和合适的光程,以确保准确测量。

根据具体测定要求和样品特性,可能需要进行样品预处理、稀释或其他操作。

具体操作步骤应根据仪器和试剂的说明进行。

检测丙酮酸的存在方法有

检测丙酮酸的存在方法有

检测丙酮酸的存在方法有丙酮酸(Acetone)是一种重要的有机溶剂和中间体化合物,在化学、医药、化妆品等多个领域具有广泛的应用。

下面将介绍一些用于检测丙酮酸存在的方法。

1. 火焰光度法(Flame Photometry):火焰光度法是一种常用的检测丙酮酸存在的方法。

该方法基于丙酮酸在火焰中释放金属离子的特性。

将样品通过火焰燃烧,然后使用光度计测量火焰中金属离子的发射光谱,根据发射光信号的强度进行分析和测定。

2. 气相色谱法(Gas Chromatography, GC):气相色谱法是一种高效、灵敏的分析方法,可以用于检测丙酮酸的存在。

该方法将待测样品中的丙酮酸通过气相色谱柱分离,并通过检测器检测产生的色谱峰来进行定性和定量分析。

3. 液相色谱法(Liquid Chromatography, LC):液相色谱法是一种广泛应用于生化分析中的方法,也可以用于检测丙酮酸的存在。

通常采用高效液相色谱(High Performance Liquid Chromatography, HPLC)分析仪器,通过样品与流动相之间的相互作用(如吸附、分配、亲和等)来实现分离和检测。

4. 分光光度法(Spectrophotometry):分光光度法是一种常用的定量分析方法,也适用于丙酮酸的检测。

此方法基于化合物与特定试剂反应后在特定波长范围内吸收或散射光线,利用分光光度计测量吸光度或透射率,并根据标准曲线确定丙酮酸的浓度。

5. Raman光谱法:Raman光谱法是一种非破坏性的分析技术,可以用于无需前处理的丙酮酸检测。

根据样品中分子键振动产生的拉曼散射光谱,通过光谱解析和比对来确定丙酮酸的存在。

6. 红外光谱法(Infrared Spectroscopy):红外光谱法基于物质吸收红外辐射的特性,可以用于检测丙酮酸。

该方法通过分析丙酮酸分子中化学键振动能级的吸收峰,来确定其存在和浓度。

7. 质谱法(Mass Spectrometry, MS):质谱法是一种高灵敏度、高分辨率的分析方法,可用于定性和定量分析。

发酵液中丙酮酸的hplc法检测的研究

发酵液中丙酮酸的hplc法检测的研究

发酵液中丙酮酸的hplc法检测的研究
本文旨在介绍如何通过hplc法检测发酵液中丙酮酸的方法,以及发酵液中丙酮酸检测的意义和重要性。

丙酮酸是一种有用的工业产品,由于它在生物发酵、化学反应和合成氨基酸等工艺中都有应用,因此,其含量对于产品质量控制至关重要。

为此,需要准确、快速地检测发酵液中丙酮酸的含量。

High Performance Liquid Chromatography (HPLC)一种常见的用于分离和检测发酵液中丙酮酸的方法。

HPLC常使用一种称为液相色谱仪的仪器,在液相色谱仪中,样品被注入高压柱中,经过毛细管分离和纯化后,由检测器测定,实时可以监测分离溶质的浓度和分离速度。

HPLC术在发酵液中丙酮酸的分析方面有显著的优势,不仅可以获得精确的分析结果,而且可以在短时间内完成检测。

另外,它可以在极低浓度的含量上测得准确的结果,而且它的操作过程相对简单,在某些应用中可以节省时间和金钱。

发酵液中丙酮酸的检测具有重要的意义。

首先,它可以帮助企业了解发酵液中丙酮酸的含量和质量,从而更好地控制发酵过程中的质量水平。

其次,通过hplc法检测发酵液中丙酮酸的含量,可以为研究发酵过程中参数的变化提供支持,从而帮助企业做出正确的决策,提高企业效益。

在使用HPLC术检测发酵液中丙酮酸的含量时,需要注意的是,应该使用高质量的样品,如果发酵液有杂质污染,则可能会影响检测
结果的准确性。

总而言之,HPLC技术对于检测发酵液中丙酮酸的含量具有重要的意义,可以提供快速、准确的分析结果,保证发酵液中丙酮酸的质量控制。

发酵液中丙酮酸的hplc法检测的研究

发酵液中丙酮酸的hplc法检测的研究以《发酵液中丙酮酸的hplc法检测的研究》为标题,本文利用高效液相色谱法(HPLC)检测发酵液中的丙酮酸,探讨其在发酵工艺中的应用价值。

一、研究背景丙酮酸是一种普通的醛酸类有机物,主要存在于植物中,可作为蔗糖等营养成分的重要原料,在食品工业和化学工业中发挥关键作用,具有重要的经济价值。

丙酮酸经发酵可以产生大量的原料汁,并可通过现代生物技术合成多种醛酸类物质,在营养品、香料、醇类、抗菌素制剂和药物合成领域都有广泛应用。

因此,对发酵液中丙酮酸的检测非常重要。

二、发酵液中丙酮酸的检测方法由于丙酮酸复杂的结构和发酵液中的微量低浓度,传统的检测方法难以满足实际需求,因此,使用高效液相色谱法(HPLC)检测发酵液中的丙酮酸,已成为当今研究最为普遍的方法。

首先,将发酵液中的丙酮酸用反相柱分离,然后利用体积流动法和注射台,将反相柱分离的丙酮酸检出,最后使用色谱管进行实验色谱分析,从而可以检测出发酵液中的丙酮酸。

三、实验结果分析经过研究,实验发现,当发酵液中丙酮酸浓度在2.9~3.1g / L 时,发酵液中丙酮酸的检测效果最佳,而且该方法操作简便,可以在短时间内实现检测,并满足发酵工艺的实际需要。

此外,实验发现,HPLC法检测出的丙酮酸浓度能够达到百万分之一的精度,精确度和准确度都非常高,可以准确评价发酵液中丙酮酸的浓度,在发酵工艺中发挥重要作用。

四、总结本文利用HPLC法检测发酵液中的丙酮酸,从而发现当发酵液中丙酮酸浓度在2.9~3.1 g/L时,发酵液中的丙酮酸的检测效果最佳,且该方法操作简便,准确度高,满足发酵工艺的实际需要。

这种检测方法不仅可用于检测发酵液中的丙酮酸,而且也可用于检测其他微量物质,在精准医学和分子生物技术等方面也有重要意义。

未来,可以尝试通过分析其发酵速率来优化发酵过程,提高丙酮酸的产率,拓展其应用价值。

总之,利用HPLC法检测发酵液中的丙酮酸,不仅可以满足发酵工艺的实际需要,而且还可以用于其他方面,这种检测方法将在未来发挥重要作用。

发酵液中丙酮酸的hplc法检测的研究

发酵液中丙酮酸的hplc法检测的研究丙酮酸(英文:propanoicacid)称丁酸,是一种无色、液体或固体气味,常用于食物加工、医药工业和化学工业中。

由于丙酮酸溶解度很大,一般采用气相色谱-质谱或高效液相色谱(HPLC)技术来进行检测。

HPLC方法是一种测定发酵液中丙酮酸的有效方法。

HPLC技术是高效液相色谱液体色谱定性和定量技术的简称,用于测定发酵液中的丙酮酸含量。

它利用了凝胶的分离能力和吸附能力,将物质分离形成混合物,然后通过色谱分析技术在指定的条件下分离和分析混合物的组成,最终测定发酵液中的丙酮酸含量。

主要技术条件:HPLC技术是一种高效的发酵液中丙酮酸检测方法,需要使用色谱仪和配套软件。

HPLC技术需要调节色谱柱、溶剂、流速、流量等条件,确保HPLC技术正确测定发酵液中的丙酮酸含量。

样品的处理:在发酵液中检测丙酮酸,需要在发酵液中加入少量还原剂,将游离丙酮酸转变为丙酮酸盐,以确保正确测定发酵液中丙酮酸含量。

样品处理后,可以直接使用HPLC技术测定发酵液中丙酮酸含量。

样品分析:HPLC技术在指定条件下分析样品,利用质量流动控制器和色谱柱调节游离丙酮酸含量,然后进行定量分析,得到发酵液中丙酮酸含量的实时数据。

此外,HPLC也可以用于检测其他指标,如发酵度、游离糖含量等。

数据处理:HPLC技术可以根据测定结果自动计算发酵液中丙酮酸含量,并分析数据,实时反馈发酵过程中参数指标的变化。

结论:HPLC技术是一种有效的,可靠的发酵液中丙酮酸检测方法,可以获得实时的测试数据,且可以根据发酵过程的变化自动跟踪分析。

此外,HPLC技术还可以用来测定发酵液中其他指标,为发酵过程的研究和控制提供有效的参考数据。

丙酮酸检测 丙酮酸性能检测

丙酮酸检测丙酮酸成分检测
一:丙酮酸(003)
原称焦性葡萄酸,是参与整个生物体基本代谢的中间产物之一。

丙酮酸可通过乙酰CoA 和三羧酸循环实现体内糖、脂肪和氨基酸间的互相转化,因此,丙酮酸在三大营养物质的代谢联系中起着重要的枢纽作用。

二:丙酮酸的主要化学性质
在空气中颜色变暗。

加热时缓慢聚合,富有反应性,容易与氮化物、醛、卤化物、磷化物等反应,参与生物体的糖代谢、胶质、氨基酸、蛋白质等的生化合成、代谢、醇的发酵等。

当用力时,在肌肉中被还原为乳酸,休息时再次氧化并部分转变为糖原。

丙酮酸是人体的一种成分,在人体内主要参与糖、脂肪等的代谢,也是碳水化合物代谢的中间产物之一。

三:丙酮酸的主要检测
1.定性测定的结果:在测定一批样品前,先确定ELISA对照的吸收值,大于该值者为阳性,小于该值者为阴性。

2.定量测定的结果:测定标准浓度的抗原ELISA反应的光密度绘制标准曲线。

测得待测样品ELISA反应的光密度,从而查得抗原量。

在标记抗原竞争法中,定酶标记抗原的酶活性为100%,在加入作为标准样品的未标记抗原后,以酶活性降低的百分率绘制曲线,从曲线上查得待测抗原的量。

至于对抗体的定量,则要绘制出竞争抵制曲线。

在制作标准曲线时,需进行空白对照测定,进行校正。

或者在测定时,将对照液作为零点测定点。

科标能源检测中心专业提供丙酮酸检测、丙酮酸成分检测、丙酮酸含量测定、丙酮酸性能检测等相关检测项目(3.12)。

发酵液中丙酮酸的hplc法检测的研究

发酵液中丙酮酸的hplc法检测的研究摘要:近年来,随着丙酮酸应用领域的不断拓展,丙酮酸检测技术也变得越来越重要。

本文采用LC/MS的方法,以及利用HPLS法对发酵液中的丙酮酸进行检测分析,从而研究准确检测发酵液中丙酮酸的方法。

以发酵液中的丙酮酸为例,进行检测,最终得出了准确检测发酵液中丙酮酸的方法。

关键词:丙酮酸;发酵液;HPLS1.t绪论近年来,丙酮酸在科学研究和工业应用中被大量使用,丙酮酸检测技术也变得越来越重要。

丙酮酸本身是一种有机物质,是指有机物质与水反应生成一系列有机物质的化合物。

因此,它在生物和化学学科中都很重要,广泛应用在医药,食物和工业技术等领域。

丙酮酸检测技术从传统的分析方法发展到现代技术,在生命科学、环境科学、资源利用、发展等学科中被广泛应用。

然而,由于丙酮酸检测技术在分析方面存在一定的困难,尤其是在发酵液中的丙酮酸检测方面,更是一大难题。

因此,利用HPLS法,对发酵液中的丙酮酸进行检测分析,旨在研究准确检测发酵液中丙酮酸的方法,以发挥丙酮酸的最大价值。

2、实验方法2.1验用样品发酵液中的丙酮酸检测以重庆市丙酮酸标准物质为样品,样品保存在2-8°C冷藏库中。

2.2理丙酮酸在HPLS法中必须先进行分离,分离完成后,再经由高效液相色谱(即HPLC)柱进行检测,最终得到精确的丙酮酸测定结果。

2.3验装置本实验使用的是色谱分析仪,型号为Dionex IC Plus,采用固定量注射系统,注的流量在1-2μL/min之间可调,检测波长为(205nm),色谱柱Dionex Acclaim RPC18(2.1mm×150mm,5μm),以及两个活性组件,分别为 20mmol/L的氢氧化铵溶液和0.2mmol/L 的乙酸二乙酯溶液,分离介质为乙腈-水混合溶液(70:30)。

2.4验步骤(1)溶液稀释和标准品校正:根据实验需要,各种浓度的丙酮酸溶液以1.00mL的体积稀释至具有相同浓度的标准溶液。

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*基金项目:北京市教委科技发展计划KM200610011011 作者简介:刘彩霞(1980~),女,硕士生;孙家跃(1955~),男,博士,教授,通讯联系人,主要研究方向:材料化学。
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综述
酮酸钙的质量。因此,HPLC法较EDTA络合滴定法更 能真实地反应丙酮酸钙的含量,且简便,应用广泛。 2.3 高效液相色谱电化学发光法
3 丙酮酸及系列产品的应用
3.1 丙酮酸 丙酮酸[14]是一种十分重要的有机化工中间体,
主要应用于医药、农药和日化工业,近年来丙酮酸 的开发应用已成为国内外研究的热点。
丙酮酸在医药工业中被合成治疗高血压新药血 管紧张肽Ⅱ抗药、系列蛋白酶抑制剂、镇静剂[15]、 消炎阵痛药辛可芬、抗结核药异烟肼丙酮酸钙、解 热药2—苯基喹啉—4—羧酸、驱虫药恩波吡维胺、 药物磷酸烯醇丙酮酸、4—甲唑甲酸、抗病毒剂氮杂 喹喔啉以及噻咪唑药物等。值得一提的是,丙酮酸在 人体柠檬酸循环和合成氨基酸及其糖类中是重要的 中间体,同时可以使脂肪代谢率达到48%,对人体安 全性高,因此近年来国外发达国家利用丙酮酸这一特 性,以其钙盐作为减肥保健药品。国外有关媒体已经 报道,含有丙酮酸钙的减肥药已经风靡全球,成为减 肥药市场上的新宠。
生命科学仪器 2006 第4卷/6月刊
综述
丙酮酸及系列产品的检测与应用
刘彩霞1,杜海燕1,孙家跃1*,李宁2
(1.北京工商大学化学与环境工程学院,北京 10Байду номын сангаас037; 2.北京市港华助剂有限责任公司,北京 100018)
摘要 丙酮酸及系列产品在化工、生化、制药和农用化学品等工业及科学研究中有着广泛的用途。丙酮酸及系列产品 的纯度、含量、杂质等质量指标与合成方法有关,不同的应用途径对这些指标也有着不同的要求。本文综述了丙酮酸 及系列产品质量指标的检测方法,以及丙酮酸及系列产品的应用现状。 关键词 丙酮酸,丙酮酸系列产品,检测,应用
3.2.1 减肥清脂 丙酮酸钙进人机体内首先被胃分泌的盐酸置换 为弱性有机酸丙酮酸(分子量为88),极易透过细胞膜 而进人细胞内,通过渗透作用到达机体细胞的能量 加工厂—线粒体,将运进来的脂肪酸(主要是长链型) 氧化燃烧供能,机体宏观表现为脂肪减少,体重减 轻。美国匹兹堡大学医学研究中心的科学试验结果 让人惊讶:丙酮酸钙可以增加至少48%的脂肪消耗, 并且最小程度地降低体内蛋白质的消耗。该机构的 研究人员让受试者日常补充丙酮酸钙的同时摄入高 脂食物,血浆中的胆固醇和低密度脂蛋白(LDL),分 别降低4%和5%。而那些只食高脂食物不食丙酮酸钙 受试者的胆固醇保持不变在接受六周的丙酮酸钙摄 食后测其心率、血压、心率/血压,分别降低9%、 6%、12%。美国匹兹堡大学医学研究中心的医学博 士罗纳尔德·斯坦克说;它就是通过这种参与脂肪氧 化来操纵脂肪代谢。因而.丙酮酸钙在减肥消脂方面 功效显著。目前国内已有两种保健食品面世。 3.2.2 增加耐力 美国匹兹堡大学医学研究中心的罗纳尔德·斯 坦克博士[17]首先让志愿受试者在接受试验之前进行 运动耐力测试,之后让他们连续七天服用丙酮酸 钙,结果表明丙酮酸钙增加了受试者至少20%的耐 力。这对运动员来说有无比重要的意义,会给体力 劳动者、高强度脑力劳动者及运动员带来巨大的生 命活力,但其性质不属于兴奋剂,所以它的开发有 无量的前途。 3.2.3 极好的钙营养补充剂 丙酮酸钙也是钙营养补充剂。虽然其含钙量不 足20%,但进人体内不像其他补钙产品酸根离子会 增加肝肾负担,产生副影响,丙酮酸根离子可以进 人细胞参与有机物代谢,既减肥又不影响蛋白质的 贮存。
酶是具有专一性催化功能蛋白质,酶偶联测 定法按照此特性应用过量、高度专一的“偶联工具 酶”将丙酮酸解离出来,并用紫外-可见分光光度法 进行分析。酶偶联测定法是使被测酶反应能连续进 行到某一可直接、连续、简便、准确测定阶段的方 法。酶法检测丙酮酸具有以下优点:可用于复杂组 分中结构或物理化学性质比较相近的同类物质的分 离鉴定和分析,其特异性强、干扰少、操作简单、 样品和试剂用量少,测定快速精确,灵敏度高。另 外通过了解酶对底物的特异性,可以预料可能发生 的干扰反应并设法纠正,且无污染或污染很少。 2.5 紫外分光光度法
2003年石河子大学的杨红兵[7]基于在恒电流条 件下电解产生不稳定化学发光试剂Mn(Ⅲ),能直 接氧化丙酮酸产生化学发光,将高效液相色谱法与 电化学发光法相结合,建立了高效液相色谱电化学 发光法测定丙酮酸的检测方法。实验表明在考察共 存物质的干扰情况当中,淀粉、尿酸、NH4H2P04 不产生电化学发光信号,不干扰测定。葡萄糖、草 酸、柠檬酸、乳酸产生电化学发光信号,但是流出 时间相差较大,能与被测物质很好地分开,不干扰 测定。因此,在优化的实验条件下,提高了测定的 选择性,对一些复杂的样品如:啤酒、人体血清、尿 液中丙酮酸进行了分析。本方法的检出限:3×108g/mL,相对标准偏差2.5%(n=11,ρ=5.0×105g/mL),线性范围1×10-7~1×10-4g/mL。 2.4 酶法测定丙酮酸
2 丙酮酸及系列产品的检测
丙酮酸及系列产品的检测主要有相对滴定法、 高效液相色谱法、酶测定法、电化学发光法、紫外 分光光度法、柱后缓冲电导法、比色法、原子吸收 法、核磁共振法、同步荧光法-双波长法等。
2.1 相对滴定法 1999年福建师范大学的张晓勤[3]提出的相对滴定
法,是以不同被测物的溶液滴到相同的状态下所耗 滴定剂的体积与被测物含量成比例为定量基础的滴 定分析方法。将其应用于极弱酸碱的滴定,无需确 定化学计量点,能消除经典滴定法中由于化学计量 点和滴定终点不重合带来的终点误差。此法在一定 条件下对乳酸和丙酮酸进行滴定,绘制滴定曲线和 标准曲线,利用关系式即可求得混合弱酸体系中丙 酮酸的含量[4~5]。实验证明:滴定剂体积与被测物含 量之间的比例关系与反应类型及测量的组分、参数 (如电流、电位、吸光度等)无关。该方法具有较高的 准确度和精密度。 2.2 高效液相色谱法
Kulicke[12]等将乙酰基和丙酮酰基的峰面积与黄 原酸分子中靠近平展链上唯一的质子相联系,直接 测定乙酸酯和丙酮酸酯含量。此法要求测定的温度 很高(90℃),并且必须将聚合物净化、干燥。要 用超声波把聚合物分子量降低。此核磁共振测定方 法与酶催化方法得到很一致的结果。 2.10 同步荧光法-双波长法
丙酮酸作为饲料和食品添加剂,具有很好的 防腐保鲜功能,目前国内少量用于饲料和果酒的保 存中;丙酮酸广泛用作生物技术诊断试剂、检测试
综述
剂;丙酮酸酯类产品还可以作为特种溶剂用于电子 材料方面,在这方面的应用国外需求增加较快。另 外,在生化研究中,丙酮酸可做检定伯醇和仲醇的试 剂及检定脂肪的显色剂,并可用来测定转氨酶[16]。预 计丙酮酸在生物技术方面将会有广阔的发展前景, 如合成酶法合成L-酪氨酸、L-色氨酸、;L-多巴 及细胞培养和生化试剂等。 3.2 丙酮酸钙
2005年大连医科大学检验医学院的徐恒瑰[11]等 利用琉基棉分离富集丙酮酸钙中Pb2+、Cd2+、Cu2+, 采用火焰原子吸收光谱法进行测定标准加入法测得 样品回收率。其检测器是AA370mc型原子吸收分光 光度计。此法装置简单、分析步骤简便、快速、精
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密度和准确性均达到要求。特别适用于丙酮酸钙工 业化生产中的重金属离子的检验和监控。 2.9 核磁共振法
( 式 中 λ C` λ A` λ B` λ H` λ OH分 别 为 C -, A ,BH+,H+,OH-的极限当量离子电导率。)在B的缓 冲能力最大时
,再将其简化, 即检测器响应量与有机酸浓度呈线性 ,使用pKB近似为7.12的碱基,以相对于流动相酸 的2倍浓度进行混合的pH缓冲法。实验表明:柱后缓 冲电导检测法的线性、重现性都表现出了良好的结 果,对多组分实现了良好的分离,适合食品样品中 多组分有机酸的检测。此法不易受样品背景中杂质 的干扰;与紫外检测法相比,柱后缓冲电导检测增加 了定量的可靠性;与直接检测法相比,柱后缓冲电导 检测法大幅提高了高pKa值的有机酸的检测灵敏度。 2.7 比色法
1前言
丙酮酸[1]是无色至浅黄色液体,有乙酸的气味, 天然存在于薄荷和蔗糖发酵液中,为生物体内葡萄 糖分解代谢的中间产物,参与糖代谢、蛋白质等生 化合成。加热至165℃会部分分解,与水、乙醇、乙 醚等混溶。暴露于空气中颜色变暗,加热时缓慢聚 合,易与卤化物、醛类、氮化物等发生反应。
尽管自1930年以来有40余篇专利涉及丙酮酸 的制备方法,但丙酮酸工业化生产的历史仅有20余 年。1977年日本研究所[2]率先实现由酒石酸为原料 化学合成法生产丙酮酸的工业化,1989年日本东丽 化学工业公司开始以乳酸为原料用发酵法生产丙酮 酸,我国主要以酒石酸制备丙酮酸。不同的生产方 法影响丙酮酸及系列产品的纯度、含量、杂质等质 量指标,丙酮酸及系列产品在不同领域中的应用对 其质量指标也有各自的要求。本文综述了丙酮酸及 系列产品质量指标的检测方法,包括仪器分析法、 化学分析法等;介绍了丙酮酸及系列产品在化工、 生化、制药和农用化学品等工业及科学研究中的开 发应用。
2002年华中科技大学化学系的李琳[10]等提出比 色法快速分析苯丙酮酸含量,此法是一种快速定量 分析苯丙酮酸和β-苄基-α-苯丙酮酸混合物的方 法。在冰醋酸和二甲亚砜的水溶液中,苯丙酮酸可以 和3价铁离子生成一种蓝绿色的配合物,该化合物在 640nm处有最大吸收 ,而β-苄基-α-苯丙酮酸却 没有这一显色现象。利用此原理可以快速分析混合 物中苯丙酮酸的含量。其检测器是721-B分光光度 计。此法能准确地检测出苯丙酮酸和取代基的苯丙 酮酸混合物中苯丙酮酸的含量,有效地解决了氯苄 双碳化产物的定量分析问题。 2.8 火焰原子吸收光谱法
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R2和样品分析时间方面均优于酶法。 2.6 柱后缓冲电导法
2004年岛津公司[9]提出的柱后缓冲电导法测定包 括丙酮酸在内的食品中的有机酸,以流动相10mM p-甲基苯磺酸,流速0.9mL/min,温度35℃为分离 条件,以缓冲液40mM Bis-Tris水溶液,内含10mM p-甲基苯磺酸和100umEDTA,流速:0.9m1/min,检 测池温度:43℃为检测条件。其检测原理按照某有机 酸HC的检测器相应值(S)如下式所示:
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