层析柱的一些总结

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过柱子的知识总结

过柱子的知识总结

过柱子的知识总结王宇通常有机反应得到的产物中会混有一定量的副产物和杂质,所以需要对产物进行纯化以得到我们需要的目标产物。

纯化的方法有多种,比如减压蒸馏、萃取、重结晶、色谱分离等等。

它们有各自不同的适用范围,本文就总结一下柱层析分离(即过柱子)的基本知识。

由于柱层析分离是色谱分离技术中的一种,所以首先介绍色谱法的一些基本概况。

1.色谱法的基本概况1.1 色谱法简介色谱法是利用不同的物质在不同相态的选择性分配,以固定相对流动相中的混合物来进行洗脱,混合物中不同的物质会以不同的速度沿固定相移动,最终达到分离的效果。

常用的色谱分离技术有柱色谱法、薄层色谱法、高效液相色谱法以及气相色谱法等。

1.2 色谱法的分类首先,按照“相”来分类,色谱法可分为气相色谱和液相色谱。

气相色谱包括气固色谱和气液色谱,液相色谱包括液-固色谱和液-液色谱。

按照固定相的形式来分类,色谱法可分为纸色谱、柱色谱和薄层色谱。

按照分离原理来分类,色谱法可分为吸附色谱法、分配色谱法、离子交换色谱法、排阻色谱法和亲和色谱法等。

1.3 色谱法的简要发展历史色谱法的发展起源于十九世纪末的俄国,最先由植物学家Tswett研究时发现,他提出了应用吸附原理分离植物色素的新方法,同时也被尊称为“色谱学之父”。

1941年Martin和Synge首先介绍了分配色谱法,并将蒸馏塔板理论应用于色谱分离中,使色谱方法在理论上向前推进了一步。

他们二人也因为对柱层析应用的贡献而获得了1952年的诺贝尔化学奖。

1952年Martin和Games开创了气—液色谱的新领域。

20世纪60年代末,法国的G·Aubouin和美国的Scott等人同时各自创立了高压液相色谱法,它与分光光度、库仑、电导、荧光等方法联用,可使分离和检测实现自动化。

到目前为止,各种色谱还在不断发展,色谱设备日益完善、操作技术不断突破,色谱分析法已成为近代化学中最重要的分离分析手段之一。

有关色谱法的整体概况这里不做重点介绍,接下来重点总结吸附柱层析分离技术的相关知识。

柱层析的一些心得

柱层析的一些心得

常说的过柱子应该叫柱层析分离,也叫柱色谱。

我们常用的是以硅胶或氧化铝作固定相的吸附柱。

由于柱分离的经验成分太多,所以下面我就几年来过柱的体会写些心得,希望能有所帮助。

1.吸附剂常用的吸附剂有氧化铝、硅胶、氧化镁、碳酸钙和活性炭等:吸附剂一般要经过纯化和活性处理,颗粒大小应当均匀。

对吸附剂来说粒子小、表面积大,吸附能力就高,但是颗粒小时,溶剂的流速就太慢,因此应根据实际分离需要而定。

供柱色谱使用的氧化铝有酸性、中性和碱性3种。

酸性氧化铝是用1%盐酸浸泡后,用蒸馏水洗至氧化铝的悬浮液pH为4,用于分离酸性物质;中性氧化铝的pH约为7.5,用于分离中性物质;碱性氧化铝的pH约为10,用于胺或其它碱性化合物的分离。

因硅胶略带酸性,只能用于对酸不敏感的化合物的分离。

常用300-400目的柱硅胶或H 硅胶。

若化合物的R f值相差较大,则可考虑使用200-300目硅胶以加快层析速度。

另:因吸附剂的比表面较大,天气潮湿时或长期放置中吸附的水分会对分离效果产生极大的影响(相当于大大增加了固定相的极性导致样品分不开),因此应将吸附剂放入90~100度烘箱内烘2小时后,取出在干燥器中冷却后再使用。

使用的硅胶,不用时一定要密封,防止吸潮。

TLC所用的硅胶板一定要保存在干燥器里面,或使用前在红外烘箱里干燥一段时间。

2.溶质的结构与吸附能力的关系化合物的吸附性与它们的极性成正比,化合物分子中含有极性较大的基团时,吸附性也较强,氧化铝对各种化合物的吸附性按以下次序递减:酸和碱>醇、胺、硫醇>酯、醛、酮>芳香族化合物>卤代物、醚>烯>饱和烃3.柱子可以分为:加压,常压,减压。

压力可以增加淋洗剂的流动速度,减少产品收集的时间,但是会减低柱子的塔板数。

所以其他条件相同的时候,常压柱是效率最高的,但是时间也最长,比如天然化合物的分离,一个柱子几个月也是有的。

加压柱是一种比较好的方法,与常压柱类似,只不过外加压力使淋洗剂走的快些。

层析柱装填要点和要求

层析柱装填要点和要求

层析柱装填要点和要求
1. 嘿,一定要注意啊,装填层析柱的时候,颗粒大小可不能马虎呀!就像建房子,砖的大小得合适吧。

比如说用硅胶装填,颗粒太大或太小,效果能好吗?
2. 别忘了均匀装填呀!你想想,要是填得乱七八糟的,那不就像走在坑坑洼洼的路上,能顺顺畅畅吗?比如说填的时候东一块西一块的,那怎么行!
3. 要把气泡赶跑啊!气泡在里面就像个捣蛋鬼,会坏事的呀!就好比你吃饭的时候有颗沙子,多难受啊。

比如装的时候不小心混进了气泡,得想办法弄出去呀。

4. 压实也很关键呀!松松垮垮的可不行,这就好像搭积木不压实会倒一样。

比如说随便弄弄,那后续分离还能靠谱吗?
5. 速度不能太快也不能太慢啊!快了容易出问题,慢了又耽误时间。

就像开车,太快危险,太慢也急人。

比如填充的时候没把握好速度,那不就糟糕了。

6. 注意柱子的垂直哦!歪歪扭扭的可不像话,就跟站没站相一样。

比如说没放垂直,那后续操作能顺利吗?
7. 清洗干净也超级重要!脏兮兮的怎么用啊,就像你穿脏衣服出门一样。

比如装填前不认真清洗,那不是给自己找麻烦嘛。

8. 还有啊,多检查几遍呀!不检查怎么能放心呢,就像考试不检查会丢分一样。

比如说填完了就不管了,万一有问题呢!总之啊,装填层析柱这些要点和要求一定得认真对待,这样才能得到好的结果呀!。

柱层析方法经验归纳汇总

柱层析方法经验归纳汇总

1、选柱子:有玻璃柱和不锈钢柱两种,实验室常用玻璃柱。

径高比一般在1:5-10。

根据吸附剂用量(体积)确定柱子大小,一般吸附剂应填充到柱子体积的1/4~1/5。

柱子可以分为:加压,常压,减压。

压力可以增加淋洗剂的流动速度,减少产品收集的时间,但是会减低柱子的塔板数。

其他条件相同的时候,常压柱是效率最高的,但是时间也最长,比如天然化合物的分离,一个柱子几个月也是有的。

减压柱能够减少硅胶的使用量,感觉能够节省一半甚至更多,但是由于大量的空气通过硅胶会使溶剂挥发(有时在柱子外面有水汽凝结),以及有些比较易分解的东西可能得不到,而且还必须同时使用水泵抽气(很大的噪音,而且时间长)。

加压柱是种比较好的方法,与常压柱类似,只是外加压力使淋洗剂走的快些。

压力的提供可以是压缩空气,双连球或小气泵。

特别在容易分解的样品的分离中适用。

压力不可过大,不然溶剂走的太快就会减低分离效果。

加压柱在普通的有机化合物的分离中是比较适用的。

柱子的尺寸为粗长的最好。

柱子越长,相应的塔板数就越高。

柱子越,上样后样品的原点就越小(反映在柱子上就是样品层比较薄),这样相对的减小了分离的难度。

无水无氧柱适用于对氧、水敏感,易分解的产品。

可以湿柱,也可以干柱。

不过在样品之前至少要用溶剂把柱子饱和一次,因为溶剂和硅胶饱和时放出的热量有可能是产品分解,毕竟要分离的是敏感的物质,小心不为过。

因为分离的物质比较敏感,所以接收瓶一定要用可密封的,遵循schlenk操作。

至于是加压、常压、减压,随需而定。

因为是schlenk操作,所以点板是个问题,如果样品是显色的,恭喜了,不用点板,直接看柱子上的色带就行了。

如果样品无色,只好准备几十个schlenk瓶,一瓶一瓶的点,不过几次之后就知道样品在哪,也就可以省些了。

无水无氧柱中用的比较多的是用氧化铝作固定相。

因为硅胶中有大量的羟基裸露在外,很容易是样品分解,特别是金属有机化合物和含磷化合物。

而氧化铝有碱性、中性和酸性的,选择余地比较大,但比硅胶要贵些。

层析柱的原理

层析柱的原理

层析柱的原理
层析柱是一种常用的色谱技术,它利用物质在固定相和流动相之间的分配行为
进行分离和分析。

层析柱的原理主要包括样品的吸附、分配和解吸过程。

首先,样品在固定相上发生吸附作用。

固定相是层析柱中的固体填充物质,它
能够吸附不同化合物的分子。

当样品混合物通过固定相时,不同成分的分子将以不同的速率被固定相吸附,从而实现分离。

其次,样品在固定相和流动相之间发生分配作用。

流动相是层析柱中的移动相,它可以是液体或气体。

当样品混合物通过固定相时,固定相吸附的成分会根据其在固定相和流动相之间的分配系数,以不同速率被分配到流动相中,从而实现进一步的分离。

最后,样品在流动相中发生解吸作用。

在流动相的作用下,被分配到流动相中
的成分将逐渐被释放出来,从而完成分离过程。

层析柱的原理可以用来解释各种类型的色谱技术,包括气相色谱、液相色谱和
超临界流体色谱等。

不同类型的色谱技术在固定相和流动相的选择上有所不同,但它们都遵循着样品的吸附、分配和解吸过程,以实现对样品混合物的分离和分析。

总的来说,层析柱的原理是基于样品在固定相和流动相之间的不同亲和性和分
配行为,利用固定相对样品混合物进行吸附和分配,最终实现对样品的分离和分析。

这种原理不仅在实验室中被广泛应用,也在工业生产和环境监测等领域发挥着重要作用。

通过深入理解层析柱的原理,可以更好地掌握色谱技术的应用和优化方法,为科研工作和实际应用提供有力的支持。

层析柱的一些总结

层析柱的一些总结

多数微生物碱性蛋白酶不耐热,碱土金属,特别是钙对碱性蛋白酶有明显的热稳定作用碱性蛋白酶是加酶洗涤剂的主要添加剂之一,在丝绸、制革工业中也有广泛用途热稳定性将酶液分别置于不同的温度条件下(30℃,40℃,50℃,60℃,70℃)保温10min 后,立即在0℃冰浴中冷却,然后在40℃下测碱性蛋白酶活力,以剩余的酶活性作为评价酶的热稳定性的指标。

测量三个重复求平均值,将最高的酶活力定义为100%,分别计算不同温度条件下蛋白酶的剩余酶活性与最高酶活性的比值。

以ph7的缓冲液为例,如果你的目标蛋白等电点小于7,呢就带负电荷,用阴离子交换的柱子,如果是大于7,那选择阳离子交换的柱子,如果等电点是7,那上样的缓冲液pH大于它的等电点用阴离子,小于7的用阳离子,如此类推就可以缓冲液的PH=pI值+1,上阴离子柱,=pI值-1,上阳离子柱,一般缓冲液ph范围在6.5~8.5之间,与PI值相差1个PH是比较理想的。

如果不清楚PI值,可以将蛋白溶到PH梯度的缓冲液里,然后分别试阳离子和阴离子填料(50ul左右得体积就够了),看那个PH下挂得好。

强离子交换剂: 在宽pH范围内载量稳定,所以他的优点是不同pH下载量恒定,可控性好,平衡过程快速、简单。

弱离子交换介质的缺点:适用的pH范围比较小,随着pH不同载量发生变化。

但是大部分蛋白等电点在5.5 ~ 7.5 。

因此强/弱离子交换介质都可以使用弱离子交换介质(DEAE、ANX、CM)优点在于:和强离子交换介质的选择性不同,因此我们一般先使用强离子交换,如果优化条件还是达不到理想的分离效果,可以尝试弱离子交换,用选择性不同的介质尝试一下。

因此弱离子交换与强离子交换由于选择性不同,可以说是对不同蛋白的结合力有差异。

S技术规格离子交换剂类型Q Sepharose FF 季氨基,强阴离子DEAE Sepharose FF 二乙基氨基乙基,弱阴离子ANX Sepharose 4FF 二乙基氨基丙基,弱阴离子SP Sepharose FF 磺丙基,强阳离子CM Sepharose FF 羟甲基,弱阳离子离子容量Q Sepharose FF 0.18-0.25mmol(Cl-)/mlDEAE Sepharose FF 0.11-0.16mmol(Cl-)/mlANX Sepharose 4 FF 0.13-0.18mmol(Cl-)/mlSP Sepharose FF 0.18-0.25mmol(H+)/mlCM Sepharose FF 0.09-0.13mmol(H+)/ml动态载量Q Sepharose FF 120mg HSA/ml 填料DEAE Sepharose FF 110mg HSA/ml 填料ANX Sepharose 4 FF 5mg 甲状腺球蛋白/ml 填料SP Sepharose FF 70mg RNAase/ml 填料CM Sepharose FF 50mg RNAase/ml 填料压力/流速Q Sepharose FF 400-700cm/h,100kpa,XK50/30层析柱,柱床高15cmDEAE Sepharose FF 300-600cm/h,100kpa,XK50/30层析柱,柱床高15cmANX Sepharose 4 FF 至少200cm/h,100kpa,XK50/60层析柱,柱床高25cmSP Sepharose FF 400-700cm/h,100kpa,XK50/30层析柱,柱床高15cmCM Sepharose FF 300-600cm/h,100kpa,XK50/30层析柱,柱床高15cm平均颗粒大小 90um(45-165um)基质Sepharose FF 高度交联琼脂糖,6%Sepharose 4 FF 高度交联琼脂糖,4%PH稳定性Q Sepharose FF 1-14(短期),2-12(长期)DEAE Sepharose FF 1-14(短期),2-13(长期)ANX Sepharose 4 FF 2-14(短期),3-13(长期)SP Sepharose FF 3-14(短期),4-13(长期)CM Sepharose FF 2-14(短期),4-13(长期)化学稳定性在所有常用的水溶液缓冲液中稳定:8M尿素、6M盐酸胍、70%乙醇、1M NaOH和1M醋酸20%乙醇(Q , DEAE,ANX,CM ),含0.2M醋酸钠的20%乙醇(SP)保存保存温度4℃-30℃l 1M NaOH和醋酸仅在清洗时使用Phenyl-Sepharose HP产品名称:苯基-琼脂糖凝胶6FF性状:白色微球凝胶类型:疏水层析介质粒径:45-165µm工作PH值:3-13应用:疏水层析介质,快流速,适合生物大分子和疫苗的分离纯化等产品名称:苯基-琼脂糖凝胶H.P.性状:白色微球凝胶类型:疏水层析填料粒径:24-44µm工作PH值:3-13应用:疏水层析介质,高分辨率,适合生物大分子和疫苗的分离纯化等产品名称:苯基-琼脂糖凝胶CL-4B性状:白色微球凝胶类型:疏水层析填料粒径:45-165µm工作PH值:3-13应用:疏水层析介质,适合生物大分子和疫苗的分离纯化等。

有关柱层析的一些心得

有关柱层析的一些心得

有关柱层析的一些心得柱层析是一种常见的分离和分析技术,广泛应用于化学、生物、环境等领域。

我最近在研究中也运用了柱层析技术,并且收获了一些心得体会。

以下是我对柱层析的一些心得,进行了详细的总结。

首先,柱层析技术在样品分离和纯化方面具有很高的分离效率和选择性。

通过选择合适的固定相材料、流动相和操作条件,可以有效地分离复杂样品中的组分。

特别是使用高效液相色谱仪(HPLC)进行柱层析,不仅分离效果好,而且分析速度快,能够提高实验效率。

其次,柱层析技术在药物分析和毒理学研究中具有重要的应用价值。

通过柱层析技术可以准确测定药物的含量和纯度,为药物制剂的质量控制提供了可靠的方法。

另外,柱层析技术还可以用于检测和分析药物在人体内的代谢产物,了解其代谢途径和体内药代动力学特征。

在毒理学研究中,柱层析技术可以用于分析毒物在体内的分布和代谢情况,为毒物学评价提供可靠的数据支持。

再次,柱层析技术需要在操作中注意一些关键的因素。

首先是选择合适的柱层析柱和固定相材料。

不同的固定相材料对不同组分具有不同的亲疏水性和分离效果,选择适合样品特性的柱层析柱可以提高分离效率和选择性。

其次是合理选择流动相和操作条件。

流动相中添加适量的有机溶剂可以改变溶剂极性,调节柱层析的分离能力。

根据样品的特性选择合适的操作条件,比如流速、温度和检测波长等。

此外,保持仪器设备的良好状态,定期进行维护和校准,以保证柱层析的准确性和可重复性。

最后,柱层析技术需要进行数据处理和结果分析。

柱层析仪器通常配备有数据采集和数据处理软件,可以自动记录和处理实验数据。

在柱层析数据处理过程中,需要对峰形和峰面积进行分析,并对结果进行定量和定性的解释。

此外,还需要进行样品的质量控制和方法验证,以保证分析结果的准确性和可靠性。

在我的研究中,我运用柱层析技术成功实现了对样品中多个组分的分离和分析。

通过合理选择固定相、流动相和操作条件,我能够达到较好的分离效果和选择性,并获得准确的分析结果。

硅胶柱层析注意事项

硅胶柱层析注意事项

硅胶柱层析注意事项
1. 在操作硅胶柱层析之前,应当充分了解并熟悉相关实验室操作规程和安全操作要求,并戴好实验手套和口罩等个人防护装备。

2. 在使用硅胶柱层析进行分离纯化时,应选取合适的溶剂体系和流速,以保证分离效果和纯度。

3. 在装填硅胶柱层析柱时,应先将硅胶柱层析剂固定在柱内,并严密密封,以防止溶剂流失和杂质的进入。

4. 在进行样品的吸附和洗脱过程中,应控制好溶剂的流速和温度,以避免硅胶柱层析柱破裂和溶剂挥发带走干燥样品。

5. 硅胶柱层析柱的操作过程中,应避免剧烈振荡和撞击,以免柱内填充物移位或破碎。

6. 在层析过程中应注意观察样品和洗脱液的颜色和透明度变化,及时调整溶剂类型和浓度,以确保分离效果。

7. 在分离纯化后,应及时冻干或浓缩洗脱液,避免其再次污染或挥发。

8. 操作硅胶柱层析时,要注意保持实验室环境的清洁和卫生,以防止杂质的污
染和误差的产生。

9. 在操作过程中,要随时关注实验仪器和设备的运行状态,确保实验安全和数据准确。

10. 在结束实验后,要对硅胶柱层析柱进行彻底的清洗和维护,以保证下次使用时的质量和效果。

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多数微生物碱性蛋白酶不耐热,碱土金属,特别是钙对碱性蛋白酶有明显的热稳定作用碱性蛋白酶是加酶洗涤剂的主要添加剂之一,在丝绸、制革工业中也有广泛用途热稳定性将酶液分别置于不同的温度条件下(30℃,40℃,50℃,60℃,70℃)保温10min 后,立即在0℃冰浴中冷却,然后在40℃下测碱性蛋白酶活力,以剩余的酶活性作为评价酶的热稳定性的指标。

测量三个重复求平均值,将最高的酶活力定义为100%,分别计算不同温度条件下蛋白酶的剩余酶活性与最高酶活性的比值。

以ph7的缓冲液为例,如果你的目标蛋白等电点小于7,呢就带负电荷,用阴离子交换的柱子,如果是大于7,那选择阳离子交换的柱子,如果等电点是7,那上样的缓冲液pH大于它的等电点用阴离子,小于7的用阳离子,如此类推就可以缓冲液的PH=pI值+1,上阴离子柱,=pI值-1,上阳离子柱,一般缓冲液ph范围在6.5~8.5之间,与PI值相差1个PH是比较理想的。

如果不清楚PI值,可以将蛋白溶到PH梯度的缓冲液里,然后分别试阳离子和阴离子填料(50ul左右得体积就够了),看那个PH下挂得好。

强离子交换剂: 在宽pH范围内载量稳定,所以他的优点是不同pH下载量恒定,可控性好,平衡过程快速、简单。

弱离子交换介质的缺点:适用的pH范围比较小,随着pH不同载量发生变化。

但是大部分蛋白等电点在5.5 ~ 7.5 。

因此强/弱离子交换介质都可以使用弱离子交换介质(DEAE、ANX、CM)优点在于:和强离子交换介质的选择性不同,因此我们一般先使用强离子交换,如果优化条件还是达不到理想的分离效果,可以尝试弱离子交换,用选择性不同的介质尝试一下。

因此弱离子交换与强离子交换由于选择性不同,可以说是对不同蛋白的结合力有差异。

S技术规格离子交换剂类型Q Sepharose FF 季氨基,强阴离子DEAE Sepharose FF 二乙基氨基乙基,弱阴离子ANX Sepharose 4FF 二乙基氨基丙基,弱阴离子SP Sepharose FF 磺丙基,强阳离子CM Sepharose FF 羟甲基,弱阳离子离子容量Q Sepharose FF 0.18-0.25mmol(Cl-)/mlDEAE Sepharose FF 0.11-0.16mmol(Cl-)/mlANX Sepharose 4 FF 0.13-0.18mmol(Cl-)/mlSP Sepharose FF 0.18-0.25mmol(H+)/mlCM Sepharose FF 0.09-0.13mmol(H+)/ml动态载量Q Sepharose FF 120mg HSA/ml 填料DEAE Sepharose FF 110mg HSA/ml 填料ANX Sepharose 4 FF 5mg 甲状腺球蛋白/ml 填料SP Sepharose FF 70mg RNAase/ml 填料CM Sepharose FF 50mg RNAase/ml 填料压力/流速Q Sepharose FF 400-700cm/h,100kpa,XK50/30层析柱,柱床高15cmDEAE Sepharose FF 300-600cm/h,100kpa,XK50/30层析柱,柱床高15cmANX Sepharose 4 FF 至少200cm/h,100kpa,XK50/60层析柱,柱床高25cmSP Sepharose FF 400-700cm/h,100kpa,XK50/30层析柱,柱床高15cmCM Sepharose FF 300-600cm/h,100kpa,XK50/30层析柱,柱床高15cm平均颗粒大小 90um(45-165um)基质Sepharose FF 高度交联琼脂糖,6%Sepharose 4 FF 高度交联琼脂糖,4%PH稳定性Q Sepharose FF 1-14(短期),2-12(长期)DEAE Sepharose FF 1-14(短期),2-13(长期)ANX Sepharose 4 FF 2-14(短期),3-13(长期)SP Sepharose FF 3-14(短期),4-13(长期)CM Sepharose FF 2-14(短期),4-13(长期)化学稳定性在所有常用的水溶液缓冲液中稳定:8M尿素、6M盐酸胍、70%乙醇、1M NaOH和1M醋酸20%乙醇(Q , DEAE,ANX,CM ),含0.2M醋酸钠的20%乙醇(SP)保存保存温度4℃-30℃l 1M NaOH和醋酸仅在清洗时使用Phenyl-Sepharose HP产品名称:苯基-琼脂糖凝胶6FF性状:白色微球凝胶类型:疏水层析介质粒径:45-165µm工作PH值:3-13应用:疏水层析介质,快流速,适合生物大分子和疫苗的分离纯化等产品名称:苯基-琼脂糖凝胶H.P.性状:白色微球凝胶类型:疏水层析填料粒径:24-44µm工作PH值:3-13应用:疏水层析介质,高分辨率,适合生物大分子和疫苗的分离纯化等产品名称:苯基-琼脂糖凝胶CL-4B性状:白色微球凝胶类型:疏水层析填料粒径:45-165µm工作PH值:3-13应用:疏水层析介质,适合生物大分子和疫苗的分离纯化等。

产品名称:丁基-琼脂糖凝胶4FF性状:白色微球凝胶类型:疏水层析介质粒径:45-165µm工作PH值:3-13应用:疏水层析介质,快流速,适合生物大分子和疫苗的分离纯化等产品名称:丁基-琼脂糖凝胶H.P.性状:白色微球凝胶类型:疏水层析介质粒径:24-44µm工作PH值:3-13应用:疏水层析介质,高分辨率,适合生物大分子和疫苗的分离纯化等产品名称:丁基-琼脂糖凝胶4B性状:白色微球凝胶类型:疏水层析介质粒径:45-165µm工作PH值:4-8应用:疏水层析介质,适合生物大分子和疫苗的分离纯化等产品名称:辛基-琼脂糖凝胶4FF性状:白色微球凝胶类型:疏水层析介质粒径:45-165µm工作PH值:3-13应用:疏水层析介质,快流速,适合生物大分子和疫苗的分离纯化等产品名称:辛基-琼脂糖凝胶H.P.性状:白色微球凝胶类型:疏水层析介质粒径:24-44µm工作PH值:3-13应用:疏水层析介质,高分辨率,适合生物大分子和疫苗的分离纯化等产品名称:辛基-琼脂糖凝胶CL-4B性状:白色微球凝胶类型:疏水层析介质粒径:45-165µm工作PH值:3-13应用:疏水层析介质,适合生物大分子和疫苗的分离纯化等HPLC内容:1、反相柱子:一般适用范围比较大。

分离极性比较小的物质。

极性强的物质先出柱。

ODS就是C18柱子。

RP-8和RP-18分别是C18柱子和C8柱子。

C18柱子和C8柱子是柱子的碳链的长度不一样的。

碳链增长了,也增加了键合相的非极性作用的面积,对保留值和选择性都有影响,随烷基碳链的增长对溶质分离的选择性也增强了.但是对单一或简单组分确实看不出太大区别。

2、正相柱子:一般分离光学异构体和反相柱子不能分离的极性比较大的物质。

APS为NH2柱子另外diol 代表的是球形硅胶邻二羟基丙基醇基柱,正相柱,极性强的物质后出。

硅胶柱子的特点是可分离异构体,柱子的载样量大,用于制备分离,不污染收集的流分了,缺点是分析应用不方便,如流动相的含水量应该严格控制,再现性较差,需较长的平衡时间,不适用于梯度洗脱。

碱性化合物在氨基和二醇柱上的保留强,而偶极化合物在腈基柱子上的保留强。

建议您看看色谱分析等专业书籍有帮助的。

ODS-AODS-A液相色谱柱是国际上是销售最好的一种传统色谱柱,同时也是HPLC中应用最广泛的应用。

YMC ODS-A液相色谱采用高度封端的表面结构和具有适当的疏水性,广泛地应用于多种化合物的分离。

在严格质量控制体系下,对50个以上的参数进行严格控制,保证了稳定的质量。

其通常作为液相色谱标准柱。

ODS-AMODS-AM液相色谱柱是一种高碳含量的C18柱,具有和ODS-A液相色谱柱相似的选择性。

二者的主要区别是ODS-AM液相色谱柱采用的是专利的封端技术,采用十分严格的生产技术规范,可提供优良的峰对称性和更高分离效果的重现性,从而改善较难分离组分的峰形。

ODS-AQODS-AQ液相色谱填料具有中等强度的疏水性和氢键键合相色谱填料,由于其具有相对高的疏水性,其与ODS-A相比有不同的保留行为,其主要用于碳水化合物的分离,如寡聚多糖类、葡萄糖苷类、药物和天然化合物的分离。

ODS-ALODS-AL液相色谱柱不仅具有疏水基团的相互作用,而且还具备由硅醇基产生的第二级相互作用,这使其与传统的ODS不同的选择性。

当离子间相互作用被优化后,特别推荐用于流动相中含有缓冲液的色谱分离,可以获得高重现性的色谱图。

YMC-Pack ODS-AL液相色谱柱采用的是没有封端的高碳含量单层C18相,其只能在残存的硅醇基活性有利于色谱分离时使用,由于容易发生拖尾峰,不推荐在分析胺类或含碱性基团的化合物中使用。

ODS H80, M80, L80ODS液相色谱填料是一种以硅胶为载体的三种配基覆盖率不同的ODS填料,不同配基覆盖率将影响馏出物中疏水组分的保留行为,馏出物的官能基团或三级结构将决定分离行为的结果。

J'sphere ODS液相色谱填料几乎不需要考虑疏水性和氢键键合相之间的相互作用,如离子或相互作用,其多用于分离条件的测定。

色谱柱考虑的问题首先是填料的问题,大多数用于HPLC分离的柱填料使用硅胶填料,基于多孔聚合物担体与键和的有机表层(如C18&C8),应用范围较广,颗粒的大小(粒度)在HPLC中极为重要,约5um 的微粒直径兼顾了分析柱的柱效,反压和寿命。

更小的多孔微粒对快速分离很有用。

小至1.5um的薄壳微粒对极快速地分离蛋白质等大分子较有用。

较窄地粒度分布能保证填充床地稳定、高效和压力降最小。

总的来说,3或5um全多孔微球填充HPLC色谱柱,能满足大多数分离地需要。

色谱柱地性能指标主要考虑:理论塔板数,峰不对称因子(AS),两种不同溶质地选择性,色谱柱地反压,保留值地重现性,键和相浓度,色谱柱地稳定性。

有几点看法:1)本人认为,C18是连接了18烷基碳链的反相固定相的总称.ODS 是以硅胶为基质键合的C18填料,而C18还包括其他基质的填料,比如高聚物小球为基质,氧化铝为基质,氧化锆为基质等键合C18链形成的反相固定相,这些可以称为"C18",但是不是ODS.2)RP- 18也是C18中的一种,不同的公司对C18填料有不同的商业名称,本质应该都是一样的.Merck公司的填料喜欢叫RP-18. 比如Merck 的LiChrospher RP-18, Superspher RP-18,Purospher RP-18. 因此,我认为说"RP-18"是改进型的不妥当.Merck的改进表现在前边的名字上,比如LiCHrospher, Superspher, Purospher表现的是不同的性能.3) "普通ODS分析酸性、中性或弱碱性化合物时均可以获得较佳的峰不对称度。

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