三角紫叶酢浆草的组织培养
３号 ４号
５号
８号 ９号
１ ０号
１ ３号 １ ４号
１ ５号
１ ８号 １ 号 ９
２ ０号
加其繁殖效率 ， 其应用 范 围的拓广 具有 巨大 的价值 。 为 由于酢浆草主要 培养和栽 培研究局 限于安徽一带 ， 和北
方物候差异较大 。所 以， 对其组 织培养 的研究 主要集 中
摘
要： 以三 角紫叶酢浆草 （ ｘ ｌ ｉｎ ｕａｉ Ｓ ｂ ｇｔ ａｇ 的叶片 、 Ｏ ａｉｔ ａ ｇ ｌｒ ｕ ｅ．ｒ ｎ ） ｓｒ ｓ ｉ 叶柄 为外植体 进行 组
织快繁研 究。通过正 交试验设计并结合方差 分析 ， 讨 了三 角紫叶酢浆草 离体 培养 的最佳 外植 探
体及 培养基 ， 其试验结果表 明 ：１ 叶 片为最佳外植 体， （） 以叶 片为外植体 ， ＋６Ｂ ． ／ ＋ ＭＳ 一 Ａ １０ｍｇ Ｌ
ＮＡ ． ４ Ｌ＋蔗糖 ３ ／ Ａ ０２ｍｇ ／ Ｏｇ Ｌ＋琼脂 ０９ ． ％为愈 伤诱 导的最佳培养基 ， 其诱导率为 ９． 。（） ３３／ ２ ９ ６
生根培养 中以 １ ２ＭＳ Ａ ． ／ ／ ＋Ｎ Ａ ０２ｍｇ Ｌ＋蔗糖 ３ Ｌ＋琼脂 ０８ 为最好 ， Ｏ ． 生根 率 ９． 。 ３８
关键 词 ： 三角紫叶酢浆草 ； 组培快繁 ； 愈伤组织 中图分类号 ： ８ ． 文献标识码 ： 文章编号 ：０ １ ００ （０ ８Ｏ 一Ｏ ７ ～Ｏ Ｓ６ １９ Ａ １０ － ０ ９２０ ）６ ｌ６ ３ 三 角 紫 叶 酢 浆 草 （ ｘ ｌ ｉｎ ｕ ｒ ｕ ｅ． ｒ Ｏ ａｉ ｔ ａ ｇ ｌ ｉ Ｓ ｂｇ Ｔｉ ｓｒ ａｓ — ａｇ 又名感应 草 、 紫花酢 浆草 ， 酢浆草科 酢浆 草属 ｎ） 浅 为 植物， 多年生 草本植 物 ， 产 热带美 洲 ， 色为深 紫色 ， 原 叶 叶片 中有人 字形浅玫瑰红斑 纹 ， 白天似翩翩起 舞的紫色 蝴蝶 ， 晚上叶 片合拢 ， 又似 困倦 的少女抱膝而眠 ， 独具特 色 ， 味无穷 。其花淡雅 清香 ， 趣 花期 ４ １ ， ～１ 月 长达 ８个 月， 其艳丽 的色彩及 奇特 的 叶形 ， 适作盆 花及 地栽 于林 缘， 布置 花坛 、 花台 、 草坪等 。三角紫 叶酢浆草繁殖 多采
收稿 日期 ：Ｏ ８ ２ ２ ２ ０ 一Ｏ 一Ｏ
ｌ ７６
保湿并时常喷雾加湿 ， 活后移入盆 中。 成
２ 结果 与分析
２ １ 消毒 时间对外植体无 菌系建 立的影 响 ．
取叶片与叶柄 ， ４组 ， 分 每组 清水 冲洗 时间和酒 精 浸泡时间相 同， 升汞浸 泡时间不 同。观察 效果在接 种第 ｌ 天进行 ， ３ 不 同消毒 时 间外植 体 污染 和启 动情 ５ 表 为
表 ｌ 不同浓度 ６ Ａ及 Ｎ Ａ 培养基组合 － Ｂ Ａ Ｉ
用切分块茎 的方 法 ， 繁殖速度慢 ， 但 也可用种子繁殖 ， 但
其结种率低 ， 周期 长。因此 ， 通过对其进 行离体培养 ， 增
０１ ，
０５ ．
１ 号
２号
６号
７号
１ １号
１ ２号
１ ６号
ｌ ７号
１０ ． １５ ．
２００ｌ ０ ｘ左右 ， 光照时间为 ｌ ／ 。 ２ｈ ｄ
表 ２ 不 同 浓 度 ＩＡ 或 Ｎ Ａ 培 养 基 组 合 Ｂ Ａ
２ 号 １ ２ ２号 ２ ３号 ２ ４号 ２ ５号
１ 材 料 与
研究 取 自盆栽 的三 角紫 叶酢浆 草 ， 以叶片和叶柄作 为外植体 。
维普资讯
・
生物技术 ・
北 方 园 艺 ２ ８ ）７ １ ｏ （ ：６ ７ ｏ ６ １～ ８
三 角 紫 叶 酢 浆 草 的 组 织 培 养
胡 国 富，李 凤 兰，胡 宝 忠
（ 北农 业大 学 生命 科 学学 院 ， 龙江 哈 尔滨 １０３） 东 黑 ５００
１２ ３ 不定芽的生根培养 ．．
以 １２ＭＳ为基 本培养基 ， ／
在长江以南地 区Ｌ 引， ｌ 而对 于北方 地 区酢浆 草 的快 繁
体系建立 ， 还未见报道 。研究 利用组织培养建立 适应北
方物候 的三角紫 叶酢浆草快速 繁殖体 系 ， 为三角 紫叶酢 浆草在北方 园艺 的绿 化 和妆扮 中发挥 更大 的优势 提高 依据 。
分别添加 了 ０ １ ０ ２ ０ ５ｍｇ Ｉ ． 、． 、． ／ 的 ＮＡ 或 ０ １ ０ ２ Ａ ． 、． 、 ０５ｍｇ Ｌ ＩＡ， ６ ． ／ 的 Ｂ 共 组培 养基见 表 ２ 。上 述培养基 均 附加糖 ３ Ｌ 琼脂 ０ ８ ｐ ５８ Ｏ ， ． ％，Ｈ ． 。培 养条件 ， 均采用 光 照 培 养 ， 养 的 温 度 控 制 在 ２ ～ ２ ℃ ， 照 强 度 培 ２ ５ 光
１２ 试 验方 法 ．
１２４ 驯化与移栽 ．．
取盆栽紫 叶酢浆 草
当不定芽长 出的 ４ 条 的健壮的 ～５
１２ １ 外植 体及 消毒 时问的筛选 ．．
不定根 时 ， 温下 进 行 练苗 ， 室 然后 移 栽 ， 所用 的土 壤 是
１ ２草炭土加 １ ２ 以及 少量有机肥 。一周 内罩塑料布 ／ ／ 沙
叶片与叶柄 ， 将每片叶剪成 ３ 片、 小 叶柄切成 ３ 小 ～５ｃ ｍ 段， 采用 ｌ ６ 汞溶 液 进行 消毒 ， 升 ９ ／ 时间 分别 为 ０ ５ ｌ ２ ． 、、、
第 一作 者简 介 ： 国富 （９４）男 ， 士 ， 胡 １７一， 博 副教 授 ， 主要 从 事植 物 学
与 分子 生物 学研 究 工作 。Ｅ ｎ ｉ ｇ ｏｕ ２ ０ ＠ｙ ｈ ｏ ｃ ｒ ｃ 。 － ｍｌ ｕ ｆｈ ０ ３ ａｏ ．ｏ ．ｒ ： ｎ ｌ 通讯 作 者 ： 宝 忠 。 胡
３ｍ ｎ切成 １５ｍ ｉ， ． ｍ×１５ｍｍ小 块 ， ． 上表皮 向下接种 在
诱导培养基上 。 １２２ 愈伤诱 导和分化培 养基 筛选 以 ＭＳ为基本 培 ．． 养基 ， 分别添加 了不 同浓度 的 ６Ｂ 和 Ｎ Ａ， －Ａ Ａ 处理 如表 ｌ 。并 以空 白的基本 培养基 ＭＳ作 为对照 。重复 ３ 次。
三角紫叶酢浆草ISSR反应体系的建立与优化
片 常年 为紫红 色 ， 叶型奇 特 ， 形似 飞舞 的紫 蝴蝶 ， 花期 长达 数 月 ， 花朵 白色 点 缀 于紫 叶之 上 别致 醒 目 ， 一种 极 具 是 观 赏价值 的彩 叶植 物 。酢浆 草属 是一 个世 界性 大属 ， 主要 分 布于 非 洲和 南 美洲 。国外 对酢 浆 草 属植 物 的研 究 报
表 ２ ＩＳ Ｓ Ｒ反 应 体 系 Ｌ ５ ） 交 实 验 设 计 （ 正
Ｔ ｂｅ２ Ｌ２（ ）ｏ ｔ ｏ ｏ ａ ｅｉｎ ｆｒＩＳ ａ ｌ ５ ５ ｒｈ ｇ ｎ ｌ ｓｇ ｏ Ｓ Ｒ—Ｐ ｄ ＣＲ
酸 蛋 白仪 检 测 Ｄ ＮＡ 溶 液 的纯 度 ， ＯＤ ０。值 均 在 其 ／。 ２ １ ８ ２ ０ 满足 Ｉ Ｓ ．～ ． ， Ｓ Ｒ—Ｐ Ｒ反 应对 Ｄ Ｃ ＮＡ 模板 质 量 的
第 ２ Ｏ卷 第 ５期
草 业 学 报 ２ １ 年 ０１
１３ ４
１ 材 料 与 方 法
１ １ 材 料 ．
表 １ ＩＳ 反 应 体 系 因素 水 平表 ＳＲ
Ｔａ ｌ Ｆａ ｔ ｒ ｎｄ ｌｖ ｌ ｆＩ Ｒ — ＰＣＲ ｅ ｃ ｉ ｎ ｂｅ１ ｃ ｏ ｓ ａ ｅ ｅｓ ｏ ＳＳ ｒ ａ ｔｏ
中 图分 类 号 ： ４ — ３ Ｑ９ ９ ７ ２ １ Ｑ９ ６３ ； ４ ． ５ ． 文 献标 识码 ： Ａ 文 章 编 号 ： ０ ４ ５ ５ （ ０ １ ０ — １ ２０ １ ０ — ７ ９ ２ １ ） ５０ ４ — ９
三 角紫 叶酢浆 草 （ ｘ ｌ ｉｎ ｕａ ｉ） Ｏ ａ ｉ ｔ ａ ｇ ｌｒｓ 是酢浆 草 科 （ ｘ ｌ ａｅ ｅ 酢 浆草 属 （ ｘ ｌｓ 多年 生 草本 植 物 。其 叶 ｓｒ ０ ａｉ ｃａ ） ｄ Ｏ ａｉ）
展， 涉及 亲缘 关 系分析 和 系统分 类ｌ ］ 遗 传 多样 性 分 析＿ ］ 遗 传退 化 ＿。 ＿ 、 ４ ６、 ＿ 和种 质 资 源保 护分 析 “ 等 方 面 。我 】 。
紫叶酢浆草的组织培养与快速繁殖
当增殖丛生芽苗不断长大，待长至 ２—３ ｅ ａ高时， ｒ 切取
达到快速繁殖 的 目的。在 国内采用成熟 叶片 、叶柄和鳞茎进行 较大 的苗接 人生根培养基进行生根培养 ，１ ５ ｄ 后在小苗基部开
离体培 养的文献 偶有报道 ［ ２ － ３ １ ０笔者 以新抽 幼叶 的叶柄 为外植 始生根 ，平均单株 生根数为 ７ ． ５ ，生根率为 ９ ４ ． ５ ％。 体开展 了紫 叶酢浆草 的组培快繁试验 ，并培养 出了一批高质量 ２ ． ２ 驯 化 与移 栽
酢浆草 属多年生球茎革本植物 ［ １ 】 。原产美洲热带地 区，其 叶色 从 芽基 部再分化 出丛芽 ，平均增殖 系数为 ６ ． ６ 。在增 殖培养 阶 艳丽奇特 ，叶片仿佛一 只只翩翩起舞 的紫蝴蝶 ，灵动而富有情 段愈伤组织、白化苗很少，小苗叶色为紫红色。随着继代次数 趣 。是一种优 良的彩色地被植物 ，也可作为室 内盆栽观赏 ，花 增 ，分化率不断提高。 叶俱佳 ，近年来颇爱人们 的喜受 。紫 叶酢浆草一般多采用分株 ２ ． １ ． ３生根培养 法繁殖 ，繁殖系数低 ，不能满足市场 的需要 。采用组织培养可
Ｂ Ａ １ ． ５ ｍ ｇ ／ Ｌ ＋ ２ ， ４ 一 Ｄ Ｏ ． ３ ｍ ｇ ／ Ｌ为诱 导培养基 诱导 外植体 产生丛 生芽，分化 率为 ７ ５ ％；丛生 芽增 殖以 ＭＳ ＋ ６ 一 Ｂ Ａ ０ ． ５ ｍ ｇ ／ Ｌ ＋ Ｎ Ａ Ａ ０ ． ０ ５ ｍ ｇ ／ Ｌ
为培养基 ，每 ２ ０ ｄ 转接 １ 次 ，平均 增殖倍数为 ６ ． ６ ；１ ／ ２ ＭＳ ＋ ＮＡ Ａ ０ ． ３ ｍｇ ／ Ｌ 作 为生根 培养基 ，生根 时间只需 １ ５ ｄ ，平均生根率 ９ ４ ． ５ ％。
紫叶酢浆草的组织培养与快速繁殖 耿开友 张 祥
三角紫叶酢浆草培育技术及园林中的应用
境 ! 盆栽时一定要选择合适的位置摆放 $ 其畏寒冷 ! 温度低 于$! ! 则叶 " 花等会受冻 ! 所以冬季要移入温室养护 $ 温度
收稿日期 !+--("-’"+#
+ , 成丛栽植 + 园林中布置有 许多 园 林 小 品 ! 如 亭 子 "
假山 " 石桌 " 石凳等 ! 在它们四周可丛 植 作 点 缀 ! 有 彩 叶 又
/%
从 选 择 的 两 种 育 苗 容 器 比 较 !无 纺 纤 维 容 器 比
塑 料 袋 容 器 好 !它 透 水 透 气 !更 有 利 于 苗 木 根 系 的 生 长 !
"#$%&$’ (&)*+,-#&% ./ 0.+12,+&$ 3&&45,+6% ./ 3&7&$25 826+.5,2)&2& 39&),&%
)%*
#
在园林绿化中的应用
三角紫叶酢浆草生长快 ! 繁殖力强 ! 用于绿化见效
快 !作为地被植物三角紫叶酢浆草可用于以下几方面 +
"
生态学特性及培育技术要点
三角紫叶酢浆草喜半阴 " 凉爽 " 湿润且通风良好的环
% , 盆花 + 将三角紫叶酢浆草 盆花 置 于 案 头 " 阳 台 " 厅
堂等处观赏 ! 可给您营造出愉悦 " 轻松 " 活泼的气氛 (
参考文献 !
_!‘ 龙金花 , 彩蝶纷飞的三角紫叶酢浆草 _8‘, 植物杂志 !/""" !(/ %+!".!!, _/‘ 邓 小 梅 ! 况 小 宝 ! 孙 婷 , 三 角 紫 叶 酢 浆 草 的 组 培 快 繁 技 术 研 究 _8‘, 江
紫叶山酢浆草繁殖管理
紫叶山酢浆草繁殖管理
繁殖方法：主要采用分株和播种繁殖。
分株可全年进行，以春季4~5月份分株最好，掰开球茎直接盆栽，球茎上布满芽眼，也可将球茎切成3-4厘米长小块，放进沙床中，待生根展叶后盆栽。
播种在春季进行，发芽适温15～18℃，播后约15天发芽，实生苗当年能开花供观赏。
栽培管理：紫叶山酢浆草喜温暖、湿润和半阴环境，在肥沃而排水良好的腐殖质土壤中生长尤为旺盛，叶片肥大。
较耐寒，冬季温度不低于０℃。
怕烈日曝晒，耐干旱。
生长期要求光照不宜过强，否则叶片色彩黯淡，如光线过于阴暗，则叶片紫色变淡，绿色加深，叶柄抽长，影响观赏效果。
保持较高的空气湿度，浇水时应注意避免土壤沾污叶片，影响观赏效果。
茎叶生长迅速，叶丛展开很快，生长期保持盆土湿润。
每月施肥一次，加施2—3次磷、钾肥。
叶片向光性较强，盆栽时应注意经常移换位置。
每年需重新栽植更新。
冬季放室内养护，叶片仍鲜艳夺目。
病害有根腐病和叶斑病，可用５０％托布津可湿性粉剂５００倍液喷酒。
虫害有蚜虫，用４０％乐果乳油２０００倍液喷杀。
紫叶酢浆草的组织培养
紫叶酢浆草的组织培养李霖宋宜颖鲁润龙陈曦尹路明(中国科学技术大学生命科学学院,合肥230027)Tissue Culture of Oxalis violaceaL I L in,SO NG Y-i Ying,L U Run-L ong,CHEN Xi,Y IN L u-M ing(School of Lif e Sciences,Univer sity of Science and T echnolo-gy of China,H e f ei230027)1植物名称紫叶酢浆草(Ox alis violacea)。
2材料类别叶片、叶柄。
3培养条件培养基有:(1)MS+NAA0.5mg# L-1(单位下同);(2)M S+IBA1.0+NAA0.5;(3)M S+IBA1.0+NAA0.5+KT 1.0;(4)M S+ IBA0.5+NAA0.5+KT1.0。
以上培养基含蔗糖25g#L-1、琼脂0.5%,pH5.8。
培养温度为22 ~25e,照光12h#d-1,光照度为2000lx。
4生长与分化情况4.1叶柄的分化情况取盆栽紫叶酢浆草叶片与叶柄,流水洗净,用70%酒精浸洗30s,无菌水冲洗1遍,再用0.1%H gCl2溶液浸泡3min,无菌水冲洗6次。
将叶柄切成小段后接种在初代培养基(1)上,30d后叶柄渐透明,两端膨大,60d后,以膨大处为中心,生出大量的根,呈放射状分布,根的表面有白色绒毛覆盖,此白色绒毛组织即为组培途径中伴随小苗形成过程出现的愈伤组织。
由放射状根部的中心可长出小苗。
每个外植体约生出6~7支新的叶柄,顶端着生紫色小叶,呈3小片轮生。
4个月后,苗高平均3cm,最高5~6cm,叶宽平均0.5~1.5cm,最宽1.5cm。
第1代酢浆草出芽率为60%。
将第1代酢浆草无菌苗的叶柄切成小段分别接种在(1)和(3)上。
在(1)上的生长情况和第1代类似,出芽率为75%。
在(3)上的叶柄10d 后两端开始膨大,由膨大处生出根的分支。
紫叶酢浆草组培工厂化生产与栽培管理技术
佳 ，近 年来 颇 受 人 们 的 喜 受 。 紫 叶 酢浆 草 一 般 多 采用 分 株 法 繁 殖 ，繁 殖 系数 低 ，生 长 速 度 慢 ，不 能满 足市 场 的 需要 。采 用 组 织 培 养 可 达 到 快 速 繁 殖 的 目的 Ｉ 。组 培 快 繁 技 术 有 速 度快 ，变 异 率 低 ，不 受 季 节 限 制 等 特 点 ，可 根 据 市 场需 求 量 进 行 调 控 ， 随时 满 足 市 场 的需 要 。
２ 栽 培 管 理 技 术 ２ ． １生 态 习性
紫 叶 酢浆 草 喜 温 暖 湿润 、 半 阴 且 通 风 良好 的 环境 ， 较耐 阴， 但 不 能 过 阴 ，如 果 环 境 环 境 过 于 阴 暗 ，叶 片 会 出现 紫 色 变 淡 、 绿 色 加 深 、叶柄 细 长 、株 形 散乱 等 情 形 ，影 响 其观 赏 效 果 忌 烈 日暴 晒 ，夏 季 必须 遮 荫 ，否 则 易 导致 植 株 叶 色 变浅 ，缺 乏 光 泽
力 强 ，生 长 期 无 需 特 殊 管理 ，保 持 土 壤 湿润 ，但 不 要 积水 ，雨 季 注 意排 水 ，以免 因水 大造 成 地 下 鳞 茎 腐烂 ，每 月 施 一 次 肥 ， 会 使 其 景 观 效 果 更 好 。冬 季 若 不 低 于 ５ 可 保 持 叶片 “ 常绿”
三角紫叶酢浆草组培及碳源效应的研究
图版说明：１计片诱导形成的愈伤组织；２叶片分化出芽；３叶柄诱导彤成的愈伤组织；４．叶柄分化出芽５．继代培养出的芽茁；６试管苗的生根；７．无糖培养基中叶外植体分化出的试管苗｝８．１％蔗糖浓度培养基中叶外植体再生出的绿色试管苗；９，３％蔗糖浓度培养基中叶外植体分化出的紫色试管苗；ｌＯ．５％蔗糖浓度培养基中叶外齄体分化出豹试管苗；ｕ，疆蔗鞲浓度培养基中植株开花：Ｌ２．正常紫色试管苗转入无糖培养基中叶色变绿：１３．３％蔗糖浓度培养基中的组培苗；１４．无糖培养基中的组培苗Ｅｘｐｌａｎａｔｉｏｎｏｆｐｂ，ｔｅｓ：１．．Ｆｏｔ＇ｍ毗｛ｏｎｏｆｃａｌｌｕｓｆｒｏｍＩｅａｖｅｓ：２．Ａｄｖｅｎｔｉｔｉｏｕｓｓｈｏｏｔｓｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｅｄｆｒｏｍｌｅａｖｅｓ；３Ｆｏｒｍａｔｉｏｎｏｆｃａｌｌｕｓｆｒｏｍｌｅａｆｓｔａｌｋｓ；４．Ａｄｖｅｎｔｉｔｉｏｕｓｓｈｏｏｔｓｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｅｄｆｒｏｍｌｅａｆｓｔａｌｋｓ：５Ｓｕｂｃｕｌｔｕｒｅｄｓｈｏｏｔｓ；６．Ｒｏｏｔｉｎｇｐｌａｎｔｓ７．Ｒｅｇｅｎｅｒａｔｅｄｐｌａｎｔｌｅｂｆｒｏｍｌｅａｆｅｘｐｌａｎｔｓｉｎｔｈｅｍｅｄｉｕｍｗｉｔｈｏｕｔｓｕｃｒｏｓｅ：８．Ｇｒｅｅｎｐｌａｎｔｌｅｂｒｅｇｅｎｅｒａｔｅｄｉｎｓｕｃｒｏｓｅ－ｆｒｅｃｍｅｄｉｕｍ９．Ｐｕｒｐｌｅｐｌａｎｆｌｅｔｓｒｅｇｅｎｅｒａｔｅｄｆｒｏｍｌｅａｆｅｘｐｌａｎｔｓｉｎｔｈｅｍｅｄｉｕｍｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ３％ＳＵＣｒＯＳｅ１０．Ｐｌａｎｔｌｅｒｓｒｅｇｅｎｅｒａｔｅｄｆｒｏｍｌｅａｆｅｘｐｌａｎｔｓｉｎｔｈｅｍｅｄｉｕｍｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ５％ｓｕｃｒｏｓｅ１１Ｐｌａｎｔｌｅ乜ｗｉｔｈｆｌｏｗｃｎｉｎｔｈｅｍｅｄｉｕｍｃｏｍａｉｎｉｎｇ５％ｓｕｃｒｏｓｅ；１２Ｇｒｅｅｎｐｌａｎｔｌｅｔｓｒｅｓｕｌｔｅｄｆｉ＇ｏｍｎｏｒｍａｌｐｕｒｐｌｅｐｌａｎｆｌｅｔｓａｆｔｅｒｂｅｉｎｇｔｒａｎｓｆｅｒｒｅｄｉｎｔｏｔｈｅｍｅｄｉｕｍｗｉｔｈｏｕｔｓｕｃｒｏｓｅ；１３．Ｎｏｒｍａｌｐｕｒｐｌｅｐｌａｎｔｌｅｔｓｉｎｔｈｅｍｅｄｉｕｍｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ３％ｓｕｃｒｏｓｅ；１４Ｇｒｅｅｎｐｌａｎｔｌｅｔｓｉｎｔｈｅｍｅｄｉｕｍｗｉｔｈｏｕｔｓｕｃｒｏｓｏ。
紫叶酢浆草生物学特性及其栽培技术
２０１４年５月防 护 林 科 技Ｍａｙ，２０１４第５期（总１２８期）Ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ Ｆｏｒｅｓｔ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｎｏ．５（Ｓｕｍ Ｎｏ．１２８）文章编号：１００５－５２１５（２０１４）０５－０１１４－０２ 收稿日期：２０１４－０１－２１ 作者简介：焦磊（１９８４－），女，山东人，大学，助理工程师，现从事森林调查工作．紫叶酢浆草生物学特性及其栽培技术焦磊１，朱红慧２（１．黑龙江省林业监测规划院，黑龙江哈尔滨１５００８０；２．内蒙古巴彦淖尔市封育飞播管理站，内蒙古巴彦淖尔０１５０００）摘 要：紫叶酢浆草露地栽培采用低畦，株行距为２０ｃｍ×２０ｃｍ穴栽定植，适时间苗、补苗、中耕、除草；夏季采取降温措施，冬季挖出鳞茎在室内储藏；紫叶酢浆草在１５～３０℃均可良好生长，春秋两季可接受全光照，保持土壤湿润，雨季注意排水；紫叶酢浆草在富含腐殖质、疏松肥沃、排水性良好的中性或微酸性土壤生长为宜，施肥应多种营养成分配合使用。
关键词：紫叶酢浆草；生物学特性；露地栽培中图分类号：Ｓ６８８ 文献标识码：Ａ ｄｏｉ：１０．１３６０１／ｊ．ｉｓｓｎ．１００５－５２１５．２０１４．０５．０４９ 紫叶酢浆草（Ｏｘａｌｉｓ ｔｒｉａｎｇｕｌａｒｉｓ）是酢浆草科（Ｏｘａｌｉｄａｃｅａｅ Ｒ．Ｂｒ）酢浆草属（Ｏｘａｌｉｓ Ｌ．）多年生彩叶草本植物，又名堇花酢浆草、紫蝴蝶。
此种最早出现于阿根廷、玻利维亚和巴拉圭，美国于１９３０年首先引种栽培，最初由上海园林专家薛麒麟女士于１９９７年引入我国，后经中国工程院资深院士、北京林业大学教授陈俊愉先生鉴定，并根据其独特的叶色定名为“紫叶酢浆草”，是本属植物中最具观赏价值的品种之一。
在２００１年９月第五届中国花卉博览会上引起轰动。
在国内，对紫叶酢浆草的研究主要集中在栽培条件和繁殖方法（组织培养）两个方面，对其生物学特性的研究尚未见报道。
所以，对紫叶酢浆草进行生物学特性的研究具有重要的现实意义，可为其在东北地区的规模化、专业化、标准化、品牌化、产业化生产与大面积应用提供切实可行的理论依据。
一种紫叶酢浆草的组培快繁方法[发明专利]
专利名称：一种紫叶酢浆草的组培快繁方法专利类型：发明专利
发明人：赵玲
申请号：CN201511026447.7
申请日：20151230
公开号：CN105475140A
公开日：
20160413
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明公开一种紫叶酢浆草的组培快繁方法，包括以下步骤：(1)外植体选取及灭菌：切取紫叶酢浆草的叶片或叶柄，采用酒精和升汞灭菌处理后，得外植体；(2)初代培养：将步骤(1)所得外植体接种到初代培养基中培养5—6周，幼苗生成；(3)增殖培养：切取步骤(2)所得幼苗，接种到增殖培养基中培养5—6周，丛生芽生成；(4)生根培养：将步骤(3)所得丛生芽幼苗分离成单株，接种到生根培养基中培养2—4周即得紫叶酢浆草无菌苗；(5)炼苗移栽：将步骤(4)所得紫叶酢浆草无菌苗转移到室外，闭瓶炼苗3—5天，松口炼苗1—2天，即可移栽；所用培养基配方简单，培养时间短，增殖频率高，变异率低，易于操作，可进行产业化生产。
申请人：四川禾木本业农林科技有限公司
地址：610041 四川省成都市高新区科园三路4号1栋8层2号
国籍：CN
代理机构：北京集佳知识产权代理有限公司
更多信息请下载全文后查看。
紫叶酢浆草组织培养研究进展方 馨 吴海
基金项目:黑龙江省教育厅项目(SJGY20180525);黑龙江省教育厅科研项目面上(12541834);牡丹江师范学院博士科研启动基金项目(8241006)㊂∗第一作者简介:方馨(1993-),女,研究生㊂研究方向为遗传育种与生物技术㊂∗通信作者:宗宪春(1966-),女,博士,教授㊂研究方向为遗传育种与生物技术㊂紫叶酢浆草组织培养研究进展方㊀馨1∗㊀吴海悦1㊀朱碧莹1㊀刘钰涵1㊀宗宪春1∗㊀宗灿华2(1.牡丹江师范学院生命科学与技术学院,黑龙江牡丹江157011;2.牡丹江医学院,黑龙江牡丹江157011)[摘㊀要]㊀对紫叶酢浆草组织培养过程中外植体的选择和处理,培养基及植物生长调节剂的选择(愈伤组织和丛生芽的诱导,丛生芽增殖㊁生根㊁炼苗以及移栽)㊁目前组织培养中存在的问题进行了综述,并对今后的发展进行了展望,旨在为紫叶酢浆草组培苗快速繁殖和规模化生产及种质资源的保护提供理论依据和技术基础㊂[关键词]㊀紫叶酢浆草;组织培养;外植体中图分类号:S682㊀㊀㊀㊀㊀㊀文献标识码:A㊀㊀㊀㊀㊀㊀文章编号:1009-3303(2023)02-0001-04Study on Advances Tissue Culture of Oxalis TriangularisFang Xin 1∗㊀Wu Haiyue 1㊀Zhu Biying 1㊀Liu Yuhan 1㊀Zong Xianchun 1∗㊀Zong Canhua 2(1.College of Life Science and Technology,Mudanjiang Normal University,Mudanjiang 157011,Heilongjiang,China ;2.Mudanjiang Medical College,Mudanjiang 157011,Heilongjiang,China)Abstract :It summarized the selection and sterilization of explant of Oxalis triangularis in tissue culture,the selections for the culturemedium and plant growth regulator (callus induction,bud differentiation,multiplication,rooting and transplanting culture)and themain problems existed at present,and the future development was prospected.The aim was to provide theoretical and technical basisfor rapid propagation and factory scale of Oxalis triangularis .Key words :Oxalis triangularis ;tissue culture;explants紫叶酢浆草(Oxalis triangularis )为酢浆草科,酢浆草属,多年生宿根草本植物,别名三角叶酢浆草㊁紫叶酢浆草㊁紫蝴蝶等,原产于热带美洲[1],根肉质,半透明,地下部分生长呈莲座状排列的鳞茎;掌状三出复叶,小叶倒三角形,初生嫩叶为玫瑰红,成熟叶为紫红色,叶型奇特,叶在白天舒展开,似翩翩起舞的紫色蝴蝶,在夜晚或强光照射下,三叶片相互紧靠,独具特色;花期长达数月,伞形花序,花朵白色点缀于紫叶之上别致醒目,是一种极具观赏价值的彩叶植物[2]㊂其艳丽的色彩及奇特叶形,适作盆花及布置花坛㊁花台㊁草坪等,在家庭装饰以及城市绿化中具有较为广阔的应用前景㊂紫叶酢浆草多采用分株或播种的繁殖方法,分株时多采用切分块茎,利用块茎突起的芽或茎叶,带土扦插,通常繁殖速度较慢;也可以用种子直接进行繁殖,但紫叶酢浆草的结实率低㊁周期长,种质资源严重制约着紫叶酢浆草的生产[3]㊂经查阅大量相关的文献资料,结合对紫叶酢浆草组织培养技术的探索,对其组织培养技术及其发展进行综述,为今后紫叶酢浆草组培苗快速繁殖和规模化生产及种质资源的保护提供理论依据和技术基础㊂1㊀外植体的选择和处理1.1㊀外植体的选择植物组织培养时,外植体的选择是非常关键的㊂影响外植体选择的因素有,选取部位,采集时间,发育经历及外界因素等,以上因素都对植物快繁起着决定性因素㊂采用较嫩的,生长健壮的,无病虫害的叶片㊁叶柄或鳞茎可诱导出愈伤组织和不定芽㊂酢浆草外植体的选择在叶片和叶柄间尤为常见,也有人选择以鳞茎为外植体㊂蔡丽琼㊁高贵珍㊁胡国富等采用三角紫叶酢浆草的叶片㊁叶柄为外植体材料进行组织培养,并诱导出了完整的植株,故认为叶片是三角紫叶酢浆草组织培养的最佳外植体[5-8]㊂耿开友[9]等以新抽幼叶的叶柄为外植体诱导产生丛生芽㊂李霖等[10]认为作为外植体材料叶片与叶柄的诱导效果类似,邓小梅㊁余朝秀㊁蔡奇英等[11-13]用三角紫叶酢浆草的鳞茎作为外植体,诱导出了完整的三角紫叶酢浆草植株,他们认为鳞茎是最佳的外植体材料㊂李耀婷[14]㊁姚玉敏[15]在进行最佳外植体材料选择研究中,把叶片㊁叶柄和鳞茎三种外植体放在一起进行,认为叶柄是最佳的选择㊂1.2㊀外植体的消毒在诱导愈伤组织的过程中对外植体消毒非常重要㊂蔡丽琼[5]从盆中取出生长状况较好的成熟叶片和叶柄,用自来水冲洗去除表面污垢后,用浓度70%酒精浸泡30s,再用0.1%升汞溶液浸泡2min,取出用无菌水冲洗4~5次㊂酢浆草外植体鳞茎的消毒普遍采用洗涤灵液或洗衣粉液中浸泡,乙醇与次氯酸钠和升汞联合使用或乙醇与升汞联合使用的方式处理,如王志[16]㊁余朝秀[12]用软毛刷及洗涤灵液轻刷洗鳞片与小鳞茎表面,并在洗涤灵水中浸泡20min,然后用流水冲洗20min后,在75%酒精中浸泡30s,用次氯酸钠溶液漂洗10min,再用无菌水清洗3~4遍,然后用每升0.1%的汞溶液处理10min,最后用无菌水清洗3~4遍㊂蔡奇英[13]挖取鳞茎,剥取鳞片,用流水洗净泥沙后,再用洗衣粉液浸泡15-20min,流水冲洗10min,吸干水分,用70%的酒精处理30s,用0.1%的升汞消毒5min,无菌水冲洗4~5次㊂杜金龙[17]从母株上取下鳞茎,去泥沙和腐烂部位,自来水充分冲洗,洗衣粉浸泡2h,流水冲洗1h,75%酒精浸泡1min, 0.1%升汞处理10min,无菌水冲洗4次㊂在实验过程中发现,利用70%乙醇对外植体(叶片㊁叶柄)浸泡10~30s,再在0.1%升汞中浸泡处理2min㊂这种处理方式既可以提高外植体的灭菌效果也不会使外植体经历过度消毒引起死亡可使灭菌效果达到最理想状态,这种方法较适合紫叶酢浆草叶片㊁叶柄外植体的消毒㊂1.3㊀外植体的培养条件本实验均采用光照培养,培养的温度控制在22~25ʃ1ħ,光照强度1500~3000lx左右,光照时间为12~14h/d㊂光照时间对植物生长有着直接影响,在三角子叶酢浆草的研究过程中发现,当光照时间ɤ10h每天时,三角子叶酢浆草出现花芽分化现象,后续在试管内开花,每从芽可开花2~5朵,当光照时间大于12h每天时,则无试管开花现象㊂2㊀培养基及植物生长调节剂的选择2.1㊀培养基在植物离体组织培养中,培养基是植物生长所需要营养成分的全部来源,故合适的培养基是组织培养必要条件[18]㊂根据报导,适合酢浆草组织培养的基本培养基有MS㊁LS和1/2MS㊂多数研究者认为,MS基本培养基适用于愈伤组织的诱导㊁不定芽的诱导以及增殖培养[6,11,17,19];大多数学者认为1/ 2MS基本培养基往往用于生根培养,也有学者认为MS基本培养基依然适用于生根培养[6,11,19]㊂王志等人[16]认为LS培养基亦可用于愈伤组织和不定芽的诱导㊁增殖培养以及生根培养㊂2.2㊀植物生长调节剂植物生长调节剂是对植物生长有调节作用的人工合成物质其包括化学物质和来自生物中的天然植物激素㊂植物生长调节剂是植物组织培养过程中不可缺少的关键物质,其与细胞分裂素的配比决定着愈伤组织的分化与试管开花㊂2.2.1㊀愈伤组织和不定芽诱导的培养基成分据现有文献分析,多数学者认为三角紫叶酢浆草愈伤组织诱导和不定芽的分化需要生长素和细胞分裂素配合使用才能达到较好效果,文献报道的愈伤组织诱导的培养基成分见表1㊂表1㊀培养基成分外植体类型愈伤组织和不定芽诱导的培养基成分文献来源叶片MS+6-BA1-1.5mg/L+NAA0.2-0.5mg/L(单位下同)[6]㊁[7]㊁[20]叶片MS+6-BA1.0+KT0.5+NAA0.5+IBA0.05[21]叶片MS+6-BA0.5+2,4-D2.0+NAA0.2[17]叶片MS+6-BA1.5+NAA0.5[5]叶片/叶柄MS+KT1.0+NAA0.5+IBA0.5[21]㊁[8]叶柄MS+6-BA1.5+2,4-D0.3[9]叶柄MS+6-BA0.5+2,4-D+NAA0.2[17]叶柄MS+6-BA1.0+NAA0.5[22]鳞茎LS+BA2+NAA0.5[16]鳞茎MS+KT0.5mg/L+2,4-D0.5[11]鳞茎MS+6-BA2+NAA0.5[12]鳞茎MS+6-BA0.5+2,4-D2.5+NAA0.2[17]鳞茎MS+6-BA2.0+2,4-D0.1+NAA0.5[13]㊀㊀由表1可见,不相同的培养基使酸浆草愈伤组织和不定芽的诱导的结果不同㊂激素种类和浓度配比非常关键㊂生长素主要使用的是NAA,也有附加2,4-D和IBA配合使用的例子;细胞分裂素主要使用6-BA㊁KT㊂不同培养基与不同外植体对愈伤组织和不定芽诱导有影响㊂即使选择相同的外植体,诱导的愈伤组织和不定芽的培养基也不尽相同㊂这可能与采集酢浆草的季节㊁外植体的生理状态和发育年龄有关,也可能与生长调节物质类型组合不同和浓度比例不同而有关㊂本研究采用的外植体(叶片和叶柄)取自牡丹江师范学院校园,研究发现采用MS培养基添加适当浓度6-BA和NAA效果较好㊂培养基MS+6-BA0.5-2mg/L+NAA0.1-0.3mg/L均可诱导出酢浆草的愈伤组织和丛生芽,并且丛生芽长出的叶片呈紫色,芽粗壮,生长旺盛㊂与文献报道的基本一致㊂2.2.2㊀丛生芽增殖的培养基成分根据现有文献看,酢浆草丛生芽增殖多以MS 为基本培养基,附加不同浓度的NAA,IBA,2,4-D, 6-BA,KT,进而观察不同植物生长调节剂对酢浆草丛生芽增殖的影响㊂研究结果表明丛生芽增殖的最佳培养基因激素种类和浓度配比不同而不同㊂任杰等[23]研究结果表明MS+6-BA0.5mg/L+KT 1.0mg/L+NAA0.5mg/L+2,4-D0.1mg/L为丛生芽增殖的最佳培养基㊂多数学者研究了6-BA和NAA对丛生芽增殖的影响,普遍认为MS+6-BA0.5-2mg/L+NAA0.05-0.3mg/L均可不同程度地诱导紫叶酢浆草丛生芽的增殖[5,6,24]㊂如肖文艳等[22]将丛生芽转接于不同浓度的增殖培养基中进行增殖培养,研究结果表明,当NAA的浓度的升高时,丛生芽增殖率也随之升高,当NAA为0.2mg/L 时增殖率达到峰值为229%㊂当NAA的浓度高于0.5mg/L时增殖率随之下降,且出现大量畸形叶片㊂在单因素6-BA实验中,植株长势普遍较弱,因此说明6-BA不利于增殖㊂丛生芽生长的最佳培养基为MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.2mg/L,在此培养基上成苗率最高,且芽苗粗壮,长势好㊂孟月娥等[19]认为最适宜的增殖培养基是MS+6-BA0.5mg/L+ NAA0.1mg/L㊂耿开友[9]在无菌条件下分割丛生芽,接种在MS十6-BA0.5mg/L+N A A0.05mg/L的增殖培养基上,20d后,从芽基部再分化出丛芽,平均增殖系数为6.6㊂经研究发现MS+6-BA0.5-2mg/L+NAA 0.1-0.2mg/L均可不同程度地诱导丛生芽增殖,但以MS+6-BA2mg/L+NAA0.1mg/L为最佳增殖培养基,与文献报道的基本一致㊂2.2.3㊀生根培养的培养基成分根据现有文献看,根的发生可被生长素类调节物质2,4-D,NAA,IBA等促进,普遍使用NAA配合1/2MS培养基,也有使用IBA和2,4-D的,但需配合的是完整的MS培养基㊂张兴桃,高贵珍,方雪梅[20]从培养基中选取3cm以上的壮苗,移入生根培养基中,结果发现在不添加激素的基本培养基中也可生根,但生根数目少且生长较弱,若添加NAA,则生根数量增多且根粗壮,用1/2MS+0.2mg/L NAA培养基,生根效果较好,生根快且生根率高,在日后发育移栽后更易成活㊂因此,最佳生根培养基是1/2MS+NAA0.2mg/L,胡国富㊁王利等也认为1/2MS+NAA0.2mg/L最适合酢浆草试管苗生根[7,21]㊂而耿开友㊁杜金龙等认为1/2MS+NAA0.3mg/L最适合酢浆草试管苗生根[9,17]㊂邓小梅等[11]研究发现MS+IBA0.2mg/L培养基上的发根比1/2MS+ NAA0.1mg/和MS+NAA0.1mg/L较快;生根率可达100%;王志等[16]认为LS+NAA0.2mg/L为最佳生根培养基㊂蔡丽琼等[5]研究发现试管苗在MS+ 2.4-D0.5mg/L上生根较好,而且优于NAA㊂王利等[24]在文献中指出低浓度生长调节剂较易诱导三角紫叶醉浆草生根,且高浓度生长调节剂对三角紫叶醉浆草生根有抑制作用㊂生根时间上,NAA的生根时间早于IBA,且诱导的不定根质量最好,须根发达㊂经研究发现采用培养基1/2MS+NAA0.1-0.2mg/L 即可诱导生根,与文献报道的基本一致㊂3㊀炼苗与移栽在市场生产中能否批量生产组培苗,关键取决于组培苗能否适应实验室以外的环境,在大田中快速恢复长势㊂待试管苗长到3~5cm时打开一半封口膜,练苗2~3d后取出小苗,用自来水清洗根部残留培养基,移栽至不同基质中㊂不同移栽介质对酢浆草试管苗的成活率有明显影响㊂移植到以河砂为主的基质中,浇透水,成活率可达95%以上[11];移植到已消毒的腐叶土㊁红土㊁珍珠岩(3ʒ1ʒ0.5)混合的基质中,成活率可达96%以上[9];移植到粗砂+营养土中成活率可达98%以上[7];移植到以森林腐殖质土,移栽成活率可达100%[15]㊂4㊀组织培养中存在的问题对三角紫叶酢浆草组织培养的研究中,通常所采用较多的外植体有叶片㊁叶柄和地下鳞茎等,由于紫叶酢浆草鳞茎深埋于土中,故外植体的清洁消毒较为困难,因此外植体的清洁消毒工作十分重要[12]㊂姚玉敏[15]在研究中发现鳞茎在分化过程中自身会产生内生菌,从而导致诱导率低,且增殖数目也低于叶片和叶柄的增殖数,因此鳞茎不是三角紫叶酢浆草组织培养中最佳外植体㊂通过试验验证叶片作为外植体较为适宜,叶片取材方便,萌发快㊁诱导率高,愈伤形成多㊁分化快,由于叶片诱导愈伤组织的过程是可以长时间的进行培养,并且可以大大降低组织培养对母体植株的伤害,适于三角紫叶酢浆草大量快速的繁殖㊂高贵珍[6]在实验中发现,三角紫叶醉浆草外植体(叶片㊁叶柄)的最佳消毒时间为2min,不超过4min,4min以上会对外植体造成损伤㊂5㊀结语紫叶酢浆草不但具有较高的观赏价值,而且还有一定的药用价值,在家庭装饰和城市绿化中具有广阔的应用前景㊂但其结实率较低,繁殖速度慢㊂随着人们对环境和保健意识的增强,市场对酸浆的需求量日益增城㊂现采用植物离体快繁技术,选择合适生长激素配比,从而进行酸浆草试管苗培养研究,对今后紫叶酢浆草快速繁殖和产业化生产具有现实的意义㊂参考文献[1]龙金花.彩蝶纷飞的三角紫叶酢浆草[J].植物杂志, 2000(2):48.[2]胡甦.三角紫叶酢浆草叶色变异株系的组织培养与RAPD和ISSR标记鉴定[D].四川农业大学,2010. [3]高贵珍,张兴姚,刘小阳,等.三角紫叶酢浆草的组织培养及快速繁殖[J].植物资源与环境学报,2004,13(1): 62-63.[4]福田达男.术の生产と资源[J].现代东洋医学(日),1995,16(2):250-254.[5]蔡丽琼,金青,祝小铁.激素水平对紫叶酢浆草分化增殖的影响[J].安徽农业科学,2005,33(6):1034-1035. [6]高贵珍,张兴桃.三角紫叶酢浆草叶片外植体组织培养研究[J].宿州学院学报,2005,20(6):90-92. [7]胡国富,李凤兰,胡宝忠.三角紫叶酢浆草的组织培养[J].北方园艺,2008(6):176-178.[8]王钰,阮龙,武廷章,等.三角紫叶酢浆草组培快繁技术的研究[J].安徽农业大学学报,2006,33(2):230-233.[9]耿开友,张祥.紫叶酢浆草的组织培养与快速繁殖[J].农业与技术,2013(8):133.[10]李霖,宋宜颖,鲁润龙,等.紫叶酢浆草的组织培养[J].植物生理学通讯,2002,38(4):360.[11]邓小梅,况小宝,万小婷.三角红叶酢浆草的组培快繁技术研究[J].江西林业科技,2003(6):8-9. [12]余朝秀,李枝林,王玉英.紫叶酢浆草鳞茎离体培养及快速繁殖研究[J].云南大学学报,2004,19(4):433-435. [13]蔡奇英,罗丽萍,杨柏云,等.三角紫叶醉浆草的组织培养[J].植物组织培养与脱毒快繁技术 全国植物组培㊁脱毒快繁及工厂化生产技术学术研讨会论文集, 2001(9):55-58.[14]李耀亭,陈存武.紫叶醉浆草体细胞胚诱导和发育条件研究[J].生物学杂志,2008,25(4):55-57. [15]姚玉敏.红叶酢浆草的组织培养技术及光合特性的研究[D].安徽农业大学,2006.[16]王志,朱万琴,李风忱.紫叶酢浆草的组织培养和快速繁殖[J].农业科技通迅,2007(3):53.[17]杜金龙.紫叶酢浆草的组织培养[D].南昌大学,2007.[18]张冶围,严霄,王风仙,等.正交设计在植物组织培养基研究中的应用[J].植物生理学通讯,1985(1):46-48.[19]孟月娥,周子发.紫叶醉浆草组培快繁技术研究[J].中国农学通报,2005,21(12):290-291.[20]张兴桃,高贵珍,方雪梅.激素水平对三角紫叶酢浆草组织培养的影响[J].安庆师范学院学报(自然科学版),2006,12(2):96-98.[21]王利,王永清,张帆.三角紫叶酢浆草离体培养植株的再生研究[J].安徽农业科学,2005(2):238-239,315.[22]肖文艳,曹智.紫叶酢浆草快繁技术的研究[J].现代园艺,2009(2):10-12.[23]任杰,丁增成,刘柞军,等. 一步法 诱导三角紫叶醉浆草再生体系的形成[J].中国农学通报,2009,25(3):60-62. [24]王利.三角紫叶酢浆草组培及碳源效应的研究[D].四川农业大学,2005.来稿日期:2023-05-23。