实验六淀粉酶的专一性和温度pH激动剂抑制剂对酶活性的影响

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实验五激活剂、抑制剂、温度及PH对酶活性的影响

实验五激活剂、抑制剂、温度及PH对酶活性的影响

实验五激活剂、抑制剂、温度及PH对酶活性的影响一、目的要求通过实验加深对酶性质的认识,了解测定α-淀粉酶活力的方法。

二、实验原理酶是生物体内具有催化作用的蛋白质,通常称为生物催化剂。

酶催化的反应称为酶促反应。

生物催化剂催化生化反应时具有:催化效率好、有高度的专一性、反应条件温和、催化活力与辅基,辅酶,金属离子有关等特点。

能提高酶活力的物质,称为激活剂。

激活剂对酶的作用有一定的选择性,其种类多为无机离子和简单的有机化合物。

使酶的活力中心的化学性质发生变化,导致酶的催化作用受抑制或丧失的物质称为酶抑制剂。

氯离子为唾液淀粉酶的激活剂,铜离子为其抑制剂。

应注意的是激活剂和抑制剂不是绝对的,有些物质在低浓度时为某种酶的激活剂,而在高浓度时则为该酶的抑制剂。

如氯化钠达到约30%浓度时可抑制唾液淀粉酶的活性。

酶促反应中,反应速度达到最大值时的温度和PH值称为某种酶作用时的最适温度和PH值。

温度对酶反应的影响是双重的:一方面随着温度的增加,反应速度也增加,直至最大反应速度为止;另一方面随着温度的不断升高,而使酶逐步变性从而使反应速度降低。

同样,反应中某一PH范围内酶活力可达最高,在最适PH的两侧活性骤然下降,其变化趋势呈钟形曲线变化。

食品级α-淀粉酶是一种由微生物发酵生产而制备的微生物酶制剂,主要由枯草芽孢杆菌、黑曲霉、米曲霉等微生物产生。

但不同菌株产生的酶在耐热性、酶促反应的最适温度、PH、对淀粉的水解程度,以及产物的性质等均有差异。

α-淀粉酶属水解酶,作为生物催化剂可随机作用于直链淀粉分子内部的α-1,4糖苷键,迅速地将直链淀粉分子切割为短链的糊精或寡糖,使淀粉的粘度迅速下降,淀粉与碘的反应逐渐消失,这种作用称为液化作用,生产上又称α-淀粉酶为液化淀粉酶。

α-淀粉酶不能水解淀粉支链的α-1,6糖苷键,因此最终水解产物是麦芽糖、葡萄糖和α-1,6键的寡糖。

本实验通过淀粉遇碘显蓝色,糊精按其分子量的大小遇碘显紫蓝、紫红、红棕色,较小的糊精(少于6个葡萄糖单位)遇碘不显色的呈色反应,来追踪α-淀粉酶作用于淀粉基质的水解过程,从而了解酶的性质以及动力学参数。

实验二_温度、PH、激活剂和抑制剂对酶活性的影响_预习

实验二_温度、PH、激活剂和抑制剂对酶活性的影响_预习

实验二温度、pH、激活剂和抑制剂对酶活性的影响温度、p H 对酶活性的影响一、实验目的了解温度对酶活性的影响。

了解酶活性的最适pH 及掌握种检测最适pH 的方法。

二、实验原理(请同学们自已补充)三、实验步骤1、温度对酶活性的影响取 3 支试管,编号后按下表加入试剂试管编号试剂1230.2%淀粉溶液(d) 1.5 1.5 1.5稀释唾液/ml11无煮沸过的稀释唾液/ml无无1摇匀后,将1、3号两试管放入37摄氏度恒温水浴中,2号试管放入冰水中。

10min 后取出,将 2 号试管内的液体分为两半,用碘化钾-碘溶液来检验1、2、3 号试管内淀粉被唾液淀粉酶水解的程度。

将 2 号试管剩下的一半溶液放入37摄氏度水浴中继续保温10min 后,再用碘液检验,结果如何?记录并解释结果。

注意事项:唾液制备时,先用蒸馏水漱口,以清除食物残渣,再含一小口蒸馏水,0.5~1min 后,使其流入量筒,并稀释到50ml。

2、pH对酶活性的影响取 4 个标有号码的20ml 试管。

用吸管按下表添加0.2mol/L 磷酸氢二钠溶液和0.1mol/L 柠檬酸溶液以制备pH=5.0~8.0 的 4 种缓冲液试管编号试剂12345.16.07.79.70.2mol/L 磷酸氢二钠/ml55224.8 3.9 2.20.20.1mol/L 柠檬酸/ml5588pH5 5.8 6.88从 4 个试管中各取缓3ml,分别注入 4 支带有号码的试管中,每个试管中添加0.5%淀粉溶液2ml 和稀释唾液2ml。

向各试管中加入稀释唾液的时间间隔分别为1min。

将各试管内容物混匀,并依次置于37 摄氏度恒温水浴中保温。

第 4 管加入唾液2min 后,每隔1min 由第 2 管取出一滴混合液,置于白瓷板上,加 1 滴碘化钾-碘溶液,检验淀粉的水解程度。

待混合液变为棕黄色时,向所有试管中依次添加1或2滴碘化钾-碘溶液。

添加碘化钾-碘溶液的时间间隔从第 1 管起,均为1min。

实验6 影响酶活性的因素

实验6  影响酶活性的因素

2
步骤
取三只试管,按下表加入试剂。
试 管 号 0.1% 硫 酸 铜 1%氯化钠 氯化钠 蒸 馏 水 0.1% 淀 粉 淀粉酶 碘—碘化钾溶液 碘化钾溶液 8 \ 1ml \ 3ml 1ml 2—3d \ \ 3ml 1ml 2—3d 9 1ml 10 \ \ 1ml 3ml 1ml 2—3d
混匀37 保温10—15min冷却。 冷却。 混匀 ℃保温 冷却
六思考题
1. 激动剂和抑制剂有哪几种类型?其作用原理是什么? 2.温度和pH影响酶活性的原理是什么? 3.联系实验结果及所学理论,说明pH对酶活性的影响有什么规 律和实际意义? 4. 酶作为生物催化剂具有哪些特征? 5. 进行酶学实验必须注意控制哪些条件?为什么?
向各试管中加入淀粉酶的时间尽量保持一致。 向各试管中加入淀粉酶的时间尽量保持一致。将各 试管内容物混匀,并依次置于37 恒温水浴中保温。 37ºC 试管内容物混匀,并依次置于37 C恒温水浴中保温。
2
步骤
第8管加入淀粉酶2min后,每隔1min由第7管 取出一滴混合液,置于白瓷板上,加1小 滴碘 化钾—碘溶液,检验淀粉的水解程度。待混合 液变为黄色时,向所有试管依次添加1—2滴碘 化钾—碘溶液。添加碘化钾—碘溶液的时间尽 量保持一致.
混匀,37℃保温15min. ℃
Benedict 2ml 2ml
混匀,沸水浴中煮2 3min。观察有无黄色沉淀产生。 黄色沉淀产生 混匀,沸水浴中煮2—3min。观察有无黄色沉淀产生。
二 温度对酶活力的影响
1 原理
酶的催化作用受温度的影响,在最适温度下,酶的 反应速度最高。大多数动物酶的最适温度37—40℃ ,植 物酶的最适温度为50—60℃ 。酶对温度的稳定性与其存 在形式有关。有些酶的干燥制剂,虽加热到100℃ ,其活 性并无明显变化,但在100℃的溶液中却容易失活。低温 能降低或抑制酶的活性,但不能使酶失活。

温度、pH、活化剂和抑制剂对酶活性的影响

温度、pH、活化剂和抑制剂对酶活性的影响

实验题目:温度、pH、激活剂和抑制剂对酶活性的影响实验原理:1.唾液淀粉酶作用的底物--淀粉,可以被分解成各种糊精、麦芽糖等水解产物。

2.淀粉被酶水解速度的变化,可以利用其产物遇碘呈不同颜色来观察。

3.淀粉遇碘呈蓝色;糊精按分子从大到小的顺序,遇碘可呈蓝色、紫色、暗褐色和红色;最小的糊精和麦芽糖遇碘不呈颜色反应(棕黄色)。

实验步骤:⒈收集唾液:用少量蒸馏水漱口。

取小漏斗一支,垫以小块脱脂棉,过滤唾液,收集约2毫升,用蒸馏水稀释 10 倍左右,混合后备用。

⒉取试管2支,各加稀释唾液约3毫升,一管直接加热煮沸,另一管置冷浴中预冷10分钟。

⒊另取试管4支编号按下表操作:步骤、编号 1 2 3 4一1%淀粉20滴1%淀粉20滴1%淀粉20滴1%淀粉20滴二置于0-4℃冰浴5分钟置于0-4℃冰浴5分钟置于37℃水浴5分钟置于37℃水浴5分钟三遇冷唾液10滴,混匀遇冷唾液10滴,混匀唾液10滴,混匀煮沸唾液10滴,混匀四置于0-4℃冰浴10分钟置于0-4℃冰浴5分钟移至37℃水浴5分钟置于37℃水浴10分钟置于37℃水浴10分钟五碘液2滴摇匀碘液2滴摇匀碘液2滴摇匀碘液2滴摇匀比较各管溶液的颜色,判断淀粉被唾液淀粉酶水解的程度,并说明温度对唾液淀粉酶活性的影响。

4.取试管3支编号,按下表操作:编号 1 2 3磷酸盐缓冲液(ml)2(pH5.0)2(pH6.8) 2(pH8.0)1%淀粉液(ml)2 2 2稀释的唾液(滴)10 10 105. 将各管混合,取瓷比色皿一个,预先在各比色池分别加入1-2滴碘液,每隔 30 秒从第二管吸取水解液一滴加到已有碘液的比色皿小池中,检验淀粉的水解程度,直至此管不与碘液呈色(即只显碘液本身的浅棕色)时,立即向各管加碘液2滴摇匀观察。

比较各管溶液颜色,说明 pH 对唾液淀粉酶活性的影响。

6. 取清洁试管4支,编号,按下表操作:编号 1 2 3 41%淀粉液(滴)20 20 20 201%NaCl(滴) 2 0 0 01%CuSO4(滴)0 2 0 01%Na2SO4(滴)0 0 2 0蒸馏水(滴)0 0 0 2稀释唾液(滴)10 10 10 107. 将各管混合,取瓷比色皿一个,预先在各比色池分别加入1-2滴碘液,每隔 30秒从第一管吸取水解液一滴加到比色皿中,检验淀粉的水解程度,直至第一管不与碘液呈色(即只显碘的浅棕色)时,立即向各管加碘液2滴摇匀观察。

实验六酶活性影响因素的测定-温度、pH对酶活性的影响-精品文档

实验六酶活性影响因素的测定-温度、pH对酶活性的影响-精品文档

以1分钟的间隔,依次向第1至第8号试管 中加入稀释100倍的唾液2毫升,摇匀,并以1 分钟的间隔依次将8支试管放入37℃恒温水 浴中保温.然后,按照第9 号试管的保温时间, 依次将各管迅速取出,并立即加入碘化钾-碘 溶液2滴,充分摇匀.观察各管呈现的颜色,判 断在不同pH值下淀粉被水解的程度,可以看 出PH对唾液淀粉酶活性的影响,并确定其最 适pH.
本实验分别以不同温度及不同pH条件下让淀粉 酶作用于淀粉,并用碘液检查酶促淀粉的水解程度, 来说明温度及pH对酶活力的影响。 实验中以稀释的唾液作为淀粉酶液。唾液内的 淀粉酶可将淀粉逐步水解成各种不同大小的糊精分 子,最终产物为麦芽糖ห้องสมุดไป่ตู้少量的葡萄糖。它们遇碘 呈不同的颜色。直链淀粉(即可溶性淀粉)遇碘呈 蓝色;糊精按分子从大到小的顺序,遇碘可呈蓝色、 紫色、暗褐色和红色,最小的糊精和麦芽糖遇碘不 显颜色。由于在不同温度,不同pH条件下唾液淀粉 酶的活性高低不同,则淀粉被水解的程度不同,所 以,可由酶反应混合物遇碘所呈现的颜色来判断上 述诸因素对酶活性的影响。
操作步骤
1.稀释的新鲜唾液:
取唾液适量,量取 倍。 一定体积,用蒸馏水稀释20
2. 温度对酶活力的影响
取3支试管,编号后各加入淀粉溶液2毫升。将第 1,2号试管放入37℃恒温水浴中保温,第3号试管放 入冰水中冷却,5分钟后,向第1号试管中加入煮沸5 -15分钟的稀释唾液1毫升,向第2,3号试管加稀释 唾液各1毫升。摇匀,20分钟后取出3支试管,各加 碘化钾-碘溶液2滴,混匀,比较各管溶液的颜色。 判断淀粉被唾液酶水解的程度,并说明温度对唾液 酶活性的影响。
思考题:将乳清蛋白、淀粉、胃蛋白酶、唾液淀粉酶和适量 水混合装入一个容器内,调整pH至2.0 ,保存于37℃的水溶 锅中,过一段时间后,容器内剩余的物质是什么?为什么?

温度、PH、激活剂和抑制剂对酶活性的影响

温度、PH、激活剂和抑制剂对酶活性的影响

(一)、温度、PH对酶活性的影响【1】一、实验目的了解温度对酶活性的影响。

了解酶活性的最适PH及掌握一种检测最适PH的方法。

二、实验原理三、实验步骤1、温度对酶活性的影响取3支试管,编号后按下表加入试剂试剂试管编号1 2 30.2%淀粉溶液 1.5 1.5 1.5稀释唾液/ml 1 1 无煮沸过的稀释唾液/ml 无无 1摇匀后,将1、3号两试管放入37摄氏度恒温水浴中,2号试管放入冰水中。

10min后取出,将2号试管内的液体分为两半,用碘化钾-碘溶液来检验1、2、3号试管内淀粉被唾液淀粉酶水解的程度。

将2号试管剩下的一半溶液放入37摄氏度水浴中继续保温10min 后,再用碘液检验,结果如何?记录并解释结果。

注意事项:1、唾液制备时,先用蒸馏水漱口,以清除食物残渣,再含一小口蒸馏水,0.5~1min后,使其流入量筒,并稀释到50ml。

2、PH对酶活性的影响取4个标有号码的20ml试管。

用吸管按下表添加0.2mol/L磷酸氢二钠溶液和0.1mol/L柠檬酸溶液以制备PH=5.0~8.0的4种缓冲液。

试剂试管编号1 2 3 40.2mol/L磷酸氢二钠/ml 5.15 6.05 7.72 9.720.1mol/L柠檬酸/ml 4.85 3.95 2.28 0.28PH 5 5.8 6.8 8 从4个试管中各取缓冲液3ml,分别注入到4支带有号码的试管中,随后于每个试管中添加0.5%淀粉溶液2ml和稀释唾液2ml。

向各试管中加入稀释唾液的时间间隔分别为1min。

将各试管内容物混匀,并依次置于37摄氏度恒温水浴中保温。

第四管加入唾液2min后,每隔1min由第二管取出一滴混合液,置于白瓷板上,加1滴碘化钾-碘溶液,检验淀粉的水解程度。

待混合液变为棕黄色时,向所有试管中依次添加1或2滴碘化钾-碘溶液。

添加碘化钾-碘溶液的时间间隔从第一管起,均为1min。

观察各试管内容物呈现的颜色,分析PH对唾液淀粉酶活性的影响。

酶的特化实验报告(3篇)

酶的特化实验报告(3篇)

第1篇一、实验目的通过本实验,深入了解酶的特化现象,包括酶的专一性、温度和pH对酶活性的影响、激活剂和抑制剂对酶活性的影响,从而掌握酶催化反应的特化规律,为进一步研究酶在生物体内的作用和调控提供理论基础。

二、实验原理酶是一种生物催化剂,具有高效、专一、温和等特性。

酶的专一性是指酶只能催化特定的底物进行反应,而其他底物则不能被催化。

温度和pH是影响酶活性的重要因素,适宜的温度和pH值能提高酶的活性,而过高的温度和pH值会破坏酶的空间结构,导致酶失活。

激活剂能提高酶的活性,而抑制剂则能降低酶的活性。

三、实验材料与仪器1. 实验材料:- 唾液淀粉酶- 淀粉溶液- 蔗糖溶液- 碱性硫酸铜溶液(班氏试剂)- 磷酸氢二钠溶液- 磷酸二氢钠溶液- 硫酸铜溶液- 氢氧化钠溶液- 酒石酸钾钠溶液- 氯化铁溶液- 过氧化氢溶液- 新鲜肝脏研磨液2. 实验仪器:- 恒温水浴箱- 滴定管- 烧杯- 试管- 试管架- 移液器- 移液管- 秒表- 移液针- 玻璃棒四、实验步骤1. 酶的专一性实验:- 取两支试管,分别加入2%淀粉溶液和2%蔗糖溶液。

- 向两支试管中分别加入等量的唾液淀粉酶。

- 将两支试管放入恒温水浴箱中,在适宜的温度下保温一段时间。

- 取出试管,向其中加入适量的碱性硫酸铜溶液,观察现象。

2. 温度对酶活性的影响实验:- 取三支试管,分别加入2%淀粉溶液。

- 向三支试管中分别加入等量的唾液淀粉酶。

- 将三支试管分别放入不同温度的恒温水浴箱中保温一段时间。

- 取出试管,向其中加入适量的碱性硫酸铜溶液,观察现象。

3. pH对酶活性的影响实验:- 取三支试管,分别加入2%淀粉溶液。

- 向三支试管中分别加入等量的唾液淀粉酶。

- 将三支试管分别放入不同pH值的磷酸缓冲溶液中保温一段时间。

- 取出试管,向其中加入适量的碱性硫酸铜溶液,观察现象。

4. 激活剂和抑制剂对酶活性的影响实验:- 取两支试管,分别加入2%淀粉溶液。

酶的定性实验报告

酶的定性实验报告

摘要:本实验旨在通过一系列定性实验,探究不同酶的特性,包括酶的专一性、温度和pH值对酶活性的影响,以及酶的激活和抑制现象。

实验采用淀粉酶、蛋白酶和过氧化氢酶作为研究对象,通过观察反应产物的变化,对酶的特性进行定性分析。

关键词:酶,定性实验,专一性,温度,pH值,激活,抑制一、实验目的:1. 了解酶的专一性。

2. 探究温度和pH值对酶活性的影响。

3. 研究酶的激活和抑制现象。

二、实验原理:酶是一种生物催化剂,具有高效性、专一性和可调节性等特点。

酶的活性受温度、pH值、激活剂和抑制剂等因素的影响。

本实验通过观察不同酶在不同条件下的反应产物,对酶的特性进行定性分析。

三、实验材料与仪器:1. 实验材料:- 淀粉酶- 蛋白酶- 过氧化氢酶- 淀粉- 蛋白质- 过氧化氢- 碘液- 硫酸铜溶液- 碱性酒石酸钾钠溶液- 酚酞指示剂- 恒温水浴锅- 移液管- 试管- 试管架2. 实验仪器:四、实验步骤:1. 酶的专一性实验:- 取两个试管,分别加入淀粉和蛋白质溶液。

- 向每个试管中加入等量的淀粉酶和蛋白酶。

- 将试管放入恒温水浴锅中,保持一定温度。

- 观察并记录反应产物(如淀粉被水解生成葡萄糖,蛋白质被水解生成氨基酸)。

2. 温度对酶活性的影响实验:- 取三个试管,分别加入淀粉酶、蛋白酶和过氧化氢酶。

- 向每个试管中加入等量的淀粉、蛋白质和过氧化氢。

- 将三个试管分别放入不同温度的水浴锅中。

- 观察并记录反应产物的变化。

3. pH值对酶活性的影响实验:- 取三个试管,分别加入淀粉酶、蛋白酶和过氧化氢酶。

- 向每个试管中加入等量的淀粉、蛋白质和过氧化氢。

- 分别用酚酞指示剂调整三个试管的pH值。

- 观察并记录反应产物的变化。

4. 酶的激活和抑制实验:- 取两个试管,分别加入淀粉酶和蛋白酶。

- 向每个试管中加入等量的淀粉和蛋白质。

- 向其中一个试管中加入适量的激活剂(如金属离子),向另一个试管中加入适量的抑制剂(如氟化钠)。

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实验六淀粉酶的专一性和温度、pH、激活剂
及抑制剂对酶活性的影响
实验类型:验证型
目的和要求
1.通过本实验观察、验证酶的专一性和温度、pH、激动剂及抑制剂对酶活性的影响。

2.熟悉淀粉及其酶解产物的特殊显色方法;电热恒温水浴的使用。

3.了解唾液淀粉酶的收集与预处理。

原理
酶具有高度专一性,一种酶只能催化一种或一类底物发生反应,如淀粉酶只能水解淀粉,不能水解蔗糖。

当淀粉被淀粉酶彻底水解为还原性麦芽糖和葡萄糖时,能使班氏试剂的Cu2+还原成Cu1+,生成砖红色Cu2O沉淀。

淀粉酶的活性受温度、pH、激动剂及抑制剂、酶浓度以及作用时间等多种因素影响,因而水解淀粉生成一系列分子大小不同的糊精。

不同程度的水解糊精可与碘反应生成紫色、棕色或红色络合物。

通过上述特征性反应,并以蔗糖等作对照,便可观察、验证淀粉酶是否具有专一性以及它的催化活性是否受到影响。

操作方法
一、唾液淀粉酶的收集与处理
1.制备唾液
实验者先将痰咳尽,用自来水漱口,以清除口腔内食物残渣,再在口腔内含蒸馏水约15ml,并作咀嚼咕漱运动,3分钟后吐入垫有两层经润湿处理的脱脂纱布的漏斗内,过滤于小烧杯中备用,为与下面稀释唾液相区别,此称制备唾液。

2.煮沸唾液
取上述唾液约2ml,盛入1中号试管中,置沸水浴煮沸5分钟备用。

3.稀释唾液
调整唾液淀粉酶活性,使之在、37℃和既无激动剂又无抑制剂条件下,作用5min,水解淀粉至红色糊精为宜。

具体做法是取12凹白瓷反应板一块,按下列步骤操作:
①第1排每凹各加1滴制备唾液,12、13、14凹分别加生理盐水1、2、3滴,用滴管采用抽吸法,由稀到浓(14→12)小心混匀各凹,勿使溅入相邻凹中。

每混匀一凹便取其1滴放入同列的2排凹中,剩余稀释唾液应全部放回原凹中。

②在盛有不同稀释度唾液的第2排各凹中,均加入4滴缓冲液(),2滴1%的淀粉液和2滴蒸馏水,用①混匀法充分混匀,置37℃下5min。

③在第2排各凹中加I液一滴,混匀,观察比较各凹颜色,以浅棕-红色对应的稀释倍数,用生理盐水稀释3ml制备唾液备用。

二、唾液淀粉酶的专一性以及温度、pH、激活剂和抑制剂对唾液淀粉酶活性影响的观察
(一)取试管3支编号,按下表1操作
表1 唾液淀粉酶专一性的实验观察

剂试管
缓冲液
1%淀粉溶

1%蔗糖
溶液
制备唾

煮沸唾液
1 20滴10滴-5滴-
2 20滴10滴--5滴
3 20滴-10滴5滴-
将上述各管混匀后,置37℃水浴中保温10分钟,然后每管加入班氏试剂20滴,再放入沸水浴中煮沸约15分钟,观察各管颜色反应,并说明原因。

(二)温度影响酶促反应的实验观察
1.取试管3支编号,按下表2操作:
表2温度影响酶促反应的实验观察
2.将一、二管移入冰水浴中,待各管温度一致后速向各管加入碘液1滴,混匀后观察各管颜色的区别,并说明温度对酶促反应的影响。

四、pH影响酶促反应的实验观察
1. 取试管3支编号,按下表3操作:
表3 pH影响酶促反应的实验观察
缓冲液缓冲液缓冲液1%淀粉溶

稀释唾液试管120滴--10滴5滴
试管2-20滴-10滴5滴
试管3--20滴10滴5滴
2.将上述各管混匀后,置37℃水浴中保温10分钟,然后每管加入碘液1滴,混匀后观察各管颜色的区别,并说明pH对酶促反应的影响。

五、激动剂和抑制剂影响酶活性的实验观察
1. 取试管4支编号,按下操作:
表4激动剂和抑制剂影响酶活性的实验观察
pH
缓冲液1%淀粉
溶液
蒸馏水%NaCl1%
CuSO4
1%
Na2SO4
稀释唾

120滴10滴10滴---5滴220滴10滴-10滴--5滴320滴10滴--10滴-5滴
2. 将上述各管放入37℃水浴中保温10分钟,然后每管加入碘液1滴,混匀后观各管颜色的区别,并说明激动剂和抑制剂对酶促反应的影响。

注意事项
1.反应试管应清洗干净,不同酶液、试剂及其滴管不能交叉混用;
2.使用混合唾液,或通过预试选出合适的唾液稀释度,效果更为显著。

试剂和器材
一、器材
1.滴管、烧杯、试管(架)及试管夹。

2.恒温水浴箱与水浴锅。

3.脱脂棉、漏斗及纱布。

4.白瓷反应盘
二、试剂
%淀粉称取淀粉1g,加少量水调成糊状,加入煮沸的%NaCl溶液至100m1。

%蔗糖溶液
3.班氏试剂 A液:取柠檬酸钠173g,无水碳酸钠100g,加水600ml,加热溶解,冷却后稀释至850ml;B液:取结晶硫酸铜(CuSO4·5H2O)g溶于100ml预热的蒸馏水中,冷却后加水至150ml。

将A液缓慢倒入B液中混匀置试剂瓶备用。

4.碘液:称取碘4g、碘化钾6g溶于l000ml蒸馏水中,置棕色瓶内贮存备用。

5.各种pH缓冲液
⑴缓冲液:取LNa2HPO4溶液772ml,L柠檬酸溶液228ml混合即成。

⑵缓冲液:取LNa2HPO4溶液,L柠檬酸溶液混合即成。

⑶缓冲液:取LNa2HPO4溶液972ml,L柠檬酸溶液28ml混合即成。

6.0.9% NaCl 溶液
%CuSO4溶液
%Na2SO4溶液
思考题
1.简述温度、pH、激动剂及抑制剂、酶浓度等因素影响对淀粉酶活性的影响。

2.简述淀粉酶活性测定的原理及注意事项。

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