中药鉴定指纹图谱技术的应用
指纹图谱技术在中药材质量控制中的意义与作用
中药的质量是其疗效的关键所在.长期以来，人们多是凭借经验，从药材的外观形态、气味以及一些简单的物理、化学现象来判断其真伪。
虽然起到一定的作用，但常常有很大的主观性和片面性.随着现代分子生物学技术的发展，中药材指纹图谱技术在中药材质量控制中显示了越来越广阔的应用前景。
(1)中药指纹图谱的概念和分类“指纹”(fingerpint）鉴定来源于法医学,每个人的指纹在微小的细节构造中各有不同，依据这些差异，通过“比对”方式，可以确定鉴别每个人的特征。
随着生物技术的发展,提出了DNA指纹图谱分析，主要是通过DNA指纹图谱，对人、动物、植物等生命体进行鉴别鉴定，乃至亲子鉴定等，扩大了指纹分析的含义，其意义主要表现在两个方面：一是成为指纹图谱。
指纹是以图像形式表现，而DNA指纹图谱是一些DNA片段所构成的条带图谱。
二是分析目的有所扩展,既可以像指纹分析一样作个体“唯一性”的鉴定，又可以鉴别确定整个物种的“唯一性”（多个个体之间的共性），还可以用作亲子鉴定,即判断个体之间的亲缘关系等。
中药指纹图谱则和DNA指纹图谱又有所不同。
1）中药指纹图谱的概念：中药指纹图谱（fingerprinting)借用DNA 指纹图谱发展而来，最先发展起来的是中药化学成分色谱指纹图谱，特别是高效液相色谱（HPLC）指纹图谱。
HPLC具有很高的分离度，可把复杂的化学成分进行分离而形成高低不同的峰组成一张色谱图,这些色谱峰的出峰位置和高度（或峰面积)分别代表了不同的化学成分和及其含量，整个色谱图表征了该样品所含化学成分的多少和量的大小。
如前所述，中药指纹图谱不同于法医学中的DNA指纹图谱。
常规意义下的指纹强调的是绝对的“个体特异性”，据此可对任何犯罪嫌疑人指证和控罪。
恰恰相反,中药指纹图谱赖以鉴别中药的药材真伪和质量优劣所要强调的却是作为药用植物物种的“共有特征性”.更值得指出的是，常规意义的“指纹”分析的依据主要是来源于先天的遗传，而中药药用化学成分的指纹图谱分析依据却主要来源于该植物物种后天的代谢产物，且大多为植物的次生代谢物。
中药指纹图谱的原理与应用
气相色谱(GC)以气体为流动相，对于含挥发性 成分中药的鉴别具有一定优势。由于裂解气相 色谱具有操作简便、样品无须化学前处理、提 供信息量大等优点而格外引人注目。该方法将 样品故人裂解器内，在一定的条件下将样品加 热使其瞬间裂解，生成可挥发性的小分子物质， 立即被载气带人气相色谱系统的分析柱上，分 离后得到具有指纹性质的裂解气相色谱图。如 果将气相色谱与质谱、傅立叶变换红外光谱联 用，则不但可以知道不同中药中挥发性成分的 差别，而且可以对这些成分进行鉴定。
高速逆流色谱指纹图谱(HSCCC fingerprintspectrum， 即调整逆流色谱法) HSCCC利用动态液-液分配原理分 离样品，其分离度和重现性与HPLC类似，但样品前处 理简单。具体地说它是一种基于液-液多级逆流萃取建 立的色谱体系，以轻巧的聚四氟乙烯螺旋管作分离柱，
在行星式运动中连续地完成整个分配、传递、分离过
中药指纹图谱，即中药身份证，主要指中 药化学指纹图谱，实际上是一种保证中药质量 的措施，是指对某种中药材或中成药等运用现 代分离分析科学的手段，得到能够标示该中药 的色谱或光谱的图谱，最终用来对中药质量评 价的科学性方式。它有两个显著特点，一是通 过指纹图谱的特征性，能有效鉴别样品的真伪 或产地。二是通过指纹图谱主要特征峰的面积 或比例的制定，能有效控制产品的质量，确保 产品质量的相对一致。
对这种中药材的分子遗传标记的研究，找到具有该种高度特异性
的片段，便可以此为基础，制备出对该种高度特异性的寡核苷酸 探针，再经分子杂交进行指纹分析，即可达到鉴别目的。DNA指 纹图具有高度的个体特异性。DNA指纹图谱技术包括AP-PCR(arb itrary primer PCR，任意引物聚合酶链式反应)和RAPD(随机扩增 多态性DNA，randomly amplified polymorphic DNA)两种指纹图谱 技术。RFLP (限制性[内切酶]片段长度多态性，restriction fragment length polymorphism)是最常用的构建DNA指纹图的方法，但该法 费时费力，使应用受到限制。随机扩增多态DNA(RAPD)标记，可 以在特异DNA序列尚不清楚的情况下，检测DNA的多态性，这是
中药指纹图谱技术在药品质量控制中的应用
中药指纹图谱技术在药品质量控制中的应用摘要】中药指纹图谱技术是中药质量控制的核心技术，中药指纹图谱技术分为化学（成分）指纹图谱、生物指纹图谱及代谢指纹图谱，将中药指纹图谱技术应用于药品质量控制中，可以更好地鉴别炮制品种，优化炮制工艺，控制中药提取物质量，体现中成药成分的复杂性，从多方面控制中药质量，保证中药质量的稳定性，促进中药现代化发展。
【关键词】中药指纹图谱技术；发展现状；药品质量控制；应用【中图分类号】R28 【文献标识码】B 【文章编号】2095-1752（2018）07-0354-02前言中药材由于种类较多且较杂，产地分布较广，且同时受到种植环境、炮制方法及生产工艺等多个因素的影响，使得中药的化学成分存在一定的差异，影响临床用药时的有效性及安全性，为此，如何选择一种有效的中药质量控制技术，一直以来都是中药学关注的热点与难点[1]。
中药的质量控制涉及到多个环节，虽然目前我国具有多种中药质量控制技术，但因中药特别是中成药的有效成分较复杂，现阶段大多检验技术还不能对中药的每种成分进行有效鉴别，而中药指纹图谱技术的研究及应用，能有效地鉴别出中药中的有效成分及数量，不但控制了中药质量，且更有利于中药的理论研究，提高新药研发的有效率，成为中药质量控制的核心技术[2]。
本次研究，主要查阅近年来相关的中药指纹图谱资料，从中药指纹图谱技术的发展现状进行闸述，并对中药指纹图谱技术在药品质量控制中的应用进行整理、归纳，现总结如下。
1.中药指纹图谱技术的发展现状中药指纹图谱技术主要是通过相关技术取得中药化学成分的特征图谱，再利用计算机技术对所取得的图谱进行分析、数据处理，简化图谱，最终得到一组专属数据，以便对中药的真伪进行判断，进而有效控制中药质量[3]。
根据测定方式的不同将中药指纹图谱技术分为化学（成分）指纹图谱（色谱法、光谱法）、生物指纹图谱（DNA指纹图谱法、蛋白质组学指纹图谱）及代谢指纹图谱（质谱法），其中化学（成分）指纹图谱主要是通过各种仪器及检验方式对中药中的化学成分种类及数量进行检验所获得的指纹图谱，而色谱法是化学领域中发展最为迅速，应用最为广泛的一种图谱技术，比较符合我国的国情；代谢指纹图谱技术主要以质谱法为主，其灵敏度及选择性较高，将其与分离技术相结合，可以有效降低离子抑制效应，是目前中药指纹图谱研究的热点，可以更直接地反映出中药的质量，将其与化学（成分）指纹图谱技术联用，可以有效地提高中药测定的准确性，使得中药指纹图谱技术更具多维化，对中药质量控制具有重要意义[4]。
指纹图谱在中药中的应用
指纹图谱在中药中的应用张传力扬州大学医学院摘要：本文通过对文献的研究、整理,总结了中药指纹图谱的近年来研究进展,为中药指纹图谱的进一步深入研究提供了线索和依据。
关键词：指纹图谱、GC、TLC、HPLC、NMR中药成分复杂，以某一成分作为控制指标已经不适合中药质量控制的要求中药指纹图谱[1]是中药材经适当处理后，采用一定的分析手段和仪器检测得到的，能够显示该中药及其制剂中的各种组分群体特性的共有峰的图谱它可以评判中药材的真伪与优劣，也可以判断中成药的质量及制备工艺的合理性与单一成分作为控制指标的质量方法相比，指纹图谱具有全面性，可以很好地适应目前中药有效成分大多不明确这一特点。
中药指纹图谱是运用现代分析技术对中药化学信息以图形的方式进行表征并加以描述[2]，是一种综合分析多种成分的有效手段。
其具有系统性、特征性和重复性，显示中药质量控制标准的整体性与模糊性[2]，更具有科学性，因而受到国际上的认可。
从中药材到中成药的生产过程中，每一步都有明确的控制指标，而指纹图谱就是将这些指标图形化、信息化，为生产者提供一双明亮的“眼睛”，保证中药生产各环节的质量，为中药现代化保驾护航。
DNA指纹图谱DNA 指纹图谱多运用聚合酶链反应（PCR）从不同生物样品中人工合成DNA 片断，这种DNA 片断大小数目因不同生物而异，因而称之为DNA 指纹图谱由于DNA 分子标记技术直接分析的是生物遗传因子而非表现型，所以结果可不受环境因素样品状态和材料来源等外界条件的影响，因此为中药品种鉴定中极为可靠的手段其中随机扩增多态DNA（RAPD）标记可在特异DNA 序列不是很清楚的情况下检测DNA 的多态性，近年来得到广泛应用于燕莉[3]等应用RAPD 标记方法对金银花两品系（大毛花鸡爪花）的DNA 指纹图谱进行分析，从DNA 分子水平上为两品系的中药材鉴别提供依据实验随机选了10-mer Opcron Primer 35 个，对两个金银花品种的DNA 进行PCR 扩增后，产生RAPD 扩增引物，有 3 个引物扩增出谱带大花金银花共扩增DNA 谱带24 条：OPJ 14 为9 条、OPJ 16 为9 条OPJ 20 为 6 条；小花金银花共扩增金银花谱带26 条：OPJ 14 为8 条OPJ 16 为12 条OPJ20 为 6 条结果表明，RAPD 技术可有效用于中药材的分类与鉴别。
中药指纹图谱的应用_吕春平
释放,且对周围正常组织无毒副作用的给药系统。
近几年,我国在磁性微粒研究方面开展了一些工作,余艺华等[15]制备了壳聚糖磁性微球,并用于蛋白质吸附的研究。
刘利萍等[16]用超声混匀-乳化-化学交联技术制备了具有肺靶向作用的利福平壳聚糖微球,粒径为12.36±4.68 m,可利用磁场引导微球定位于靶区,有效地提高了肺部的药物浓度。
周永国等[17]先制备了载有阿司匹林的壳聚糖微球,然后在其表面吸附一层Fe3O4制得磁性壳聚糖微球,体外测试表明,该微球明显减缓了阿司匹林的释放,且具有较强的磁性,在外磁场下可实现靶向给药。
壳聚糖属于生物可降解高分子化合物,其优越的医药性能使其成为药学工作者关注的热点。
但是壳聚糖作为高分子物质,质量标准难以建立,其医药应用及相应产品的开发仍处于初始阶段。
靶向制剂的研究也是药剂学的前沿领域,近年来在靶向给药的研究中取得了令人鼓舞的进展,如前体药物靶向、载体靶向给药等,其应用前景十分广阔。
但该研究也存在稳定性差等问题,相信随着检测手段的日益先进与靶向制剂工艺手段的发展,壳聚糖在靶向制剂中的应用势必会越来越广,会有更多更有价值的壳聚糖靶向制剂产生,靶向制剂才会真正地造福人类。
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指纹图谱技术在中药制剂研究中的应用
指纹图谱技术在中药制剂研究中的应用【摘要】概述了中药指纹图谱技术在中药制剂研究中对于投料药材甄别、炮制工艺优化、监控生产工艺、质量控制等方面的应用，以及制剂谱效结合、指导新药研发方面的应用，展望了指纹图谱技术在中药制剂研究开发应用中的前景。
【关键词】中药指纹图谱技术制剂研究Abstract：This article reviewed the applications of fingerprint technology in preparation research of Chinese medicine, such as screening of the materia medica, optimization of processing technology, monitoring the production technology and quality control of the finished product. The combination of effect and chromatographic fingerprint, guidance in research and development of new drugwere also reviewed. It gives a good prospect of application of fingerprint technology in preparation research of Chinese medicine.Key words：Fingerprint of traditional Chinese medicine; Preparation research随着近年来“回归自然”的潮流在世界各国日益盛行，中药与天然药物受到国际医药界的广泛关注，成为研究开发的热点。
虽然我国有几千年应用中药的历史，但中药产业总体上仍处于较初级的发展阶段，中成药类贸易逆差显着，缺乏高附加值产品和优势品种。
中药指纹图谱质控技术的意义和作用
中药指纹图谱质控技术的意义和作用中药指纹图谱质控技术的意义和作用中药指纹图谱质控技术的意义和作用中药业发展到今天，中成药指纹图谱质控技术已是牵动行业全面进步的关键技术。
其应用研究，对保证中成药功效，提高中药工业整体水平，带动中药农业现代化，推进中药走向世界，具有非常重要的现实意义。
一、采用指纹图谱质控技术是保证中成药功效实现中药现代化的必需自晋代葛洪在<肘后备急要方)首次提出“成药”概念以来，中成药已有一千七百年历史。
受科学技术条件的限制，中成药在成品内在质量的控制上缺乏检验的方法手段，可谓“丸散膏丹，神仙难辨”。
中成药功效，主要依靠原料药材的地道性和药工制作的经验性予以保证。
同仁堂“炮制虽繁，必不敢省人力；品味虽贵，必不敢减物力”的古训，集中反映了传统中成药生产保证质量的基点。
虽然这种缺乏事后内在质量检验方法的状况，直到二十世纪六十年代徐国钧先生提出显微鉴别方法才发生变化。
但由于传统中成药蜜丸、水丸、散剂等主要剂型都以药材饮片粉末为制剂主料，又是小生产状态，所以中药材的地道性、老药工的经验性，基本尚可保证成药功效。
从二十世纪五十年代中叶起到现在，中成药从剂型工艺到生产方式发生了根本的变化。
片剂、颗粒剂、口服液等现代剂型已取代“丸、散、膏、丹”占主体地位。
制剂主料也由提取物取代原料粉。
已有上百个中成药工业企业规模化、机械化，年产亿元以上，前三名达十亿元以上。
与此同时，从一九五八年起，各地为解决需求供应短缺，广泛引种药材，许多药材地道性显著淡化。
所有这些巨大变化都表明中成药生产质量稳定性的传统基础基本已不适应。
中成药业和世界上一切产业发展过程一样，在由手工业小生产向工业大生产过渡的同时，其产品质量也必须实现由凭过程经验控制到事后检验控制的过渡。
中药指纹图谱技术及应用研究进展
2010 年第 1 期
中药指纹图谱技术及应用研究进展
张丁华, 王艳丰
( 河南农业职业学院动物科学系 , 河南中牟 中图分类号 : S853 7 文献标 识码 : A 451450) 文章编号 : 1000- 6354( 2010) 01- 0026- 03 磁共振法 ( NM R ) 、 质谱法、 DNA 指纹图谱等。方法虽多 , 但每 种方法均有一定特 点及 适用 范围 [ 1] 。其中 色谱 法是 主流 方 法 , 特别是 TCL 、 HPLC 和 GC 色谱技术 , 已成为公认的 3 种常 规分析手段 , 是目前研究中药指纹图谱应优先考虑的方法。 一种中药制剂指纹 图谱 可同时 采用 两种 或多种 方法 来 研究 , 在实际应用时可根据需要选 用。现行的 单一测定方 法 给出信息少 , 无法建立较完 善的指纹图 谱。从 20 世 纪 90 年 代始 , 人们开始尝试 建立多 维指 纹图谱 来解 决这 一问题 [ 2] 。 所谓多维即采用多种分析仪器联用的模 式来测定指 纹图谱 , 各图谱间相互补充 , 可对 复杂 供识品 有更 清晰完 整的 认识。 金宏等 [ 3] 用 GC- M S 法建立的草豆蔻挥发油共有图 谱 , 可 作 为评价其质量和鉴定 的依据。曹进等 [ 4] 用 LC /M S 法对桂 枝 汤 A 部分及组成桂枝汤的五味 单味药 的 A 部分进 行了多 维 全息化学特征谱指认 , 通过质谱的质 荷比值及 高效液相色 谱 中峰保留时间的相互对照 , 将桂枝 汤 A 部分中的主要成分 进 行归属。孙明谦等 [ 5] 应用 LC - ESI /M S 技 术对 血府 逐瘀 汤 中成分进行分析 , 并对其中的 10 种化学成分进 行确认 , 为 控 制血府逐瘀汤的质量、 稳定其疗效 等提供科学依据。 20 世纪 90 年代后期 , 液相色谱 - 核磁共振联用以 及液相色谱 - 核磁 共振 - 质谱联用技术相继出现 , 使得 液相色谱 的高分辨能 力 和核磁、 质谱等高鉴定能力相结合 , 对复 杂样品体系 , 特别 是 药物代谢的研究提供了更进一步的有效方法 [ 6] 。 2 指纹图谱技术在中医药方面的应用 中药指纹图谱可 用于中 药材 鉴定、 中药 炮制 方法 研究、 药材采收季节研究、 中药 制剂及 生产 工艺 研究、 药效 物质 成 分鉴定及中药活性成分测定等。 2. 1 在单味药中的应用 2. 1. 1 H PLC 法 刘婷娜等 [ 7] 利用 R P- HPLC 方法 , 分析了 12 批市售和 8 批采 自不同 产地的野 菊花药 材 , 在 45 m in 内 建立了野菊花 H PLC 指纹 图谱 , 确 定 了野 菊 花药 材中 的 22 个共有峰 , 归属了其 中的 黄酮类 化合 物 , 并对 其中黄 酮类 成 分进行主成分分析。黎琼 红等 [ 8] 利 用该 法以乙 腈 - 水梯 度 洗脱 , 以人参皂苷 Rg1 为参照物 , 通过对 11 批 云南省 3 个 地 区不同规格的三七样品 的测定 , 标 定了 15 个共 有峰 , 其相 似 度均在 0 . 99 以上。 黄月 纯等 [ 9] 通 过 对广 藿香 不同 部位 的 甲醇提取物成分进行 HPLC 指纹图谱 研究 , 重点考 察其不 同 部位有效成分含量的差异性 , 建立的 HPLC 指纹图 谱对广 藿
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中药鉴定指纹图谱技术的应用
摘要】目的：对中药鉴定指纹在图谱技术中的应用进行分析。
方法：通过资料
的收集与整理，分析指纹图谱技术的概念与分类，并重点论述我国医学界在当前
的中药鉴定对指纹图谱技术的具体应用。
结果：目前所应用的指纹图谱技术主要
有光谱指纹图谱、色谱指纹图谱、DNA指纹图谱、蛋白学指纹图谱等等。
通过指
纹图谱技术在中药鉴定中的合理、有效应用，可以快速、准确地分辨出中药的真伪、优劣，质量等，进而为临床中药应用的安全性与可靠性奠定坚实地基础。
结论：将指纹图谱技术应用于中药鉴定工作中，具有十分深远的意义，通过中药鉴
定中指纹图谱技术的科学、合理应用，全面、准确地反映出中的优劣性、化学与
生物学特征、以及中药的整体质量，进而有效促进中成药的标准化与质量，并为
临床中药的合理、安全应用打好基础。
【关键词】中药鉴定指纹图谱技术应用
【中图分类号】R24 【文献标识码】A 【文章编号】1672-5085（2014）16-0086-02
在我国医学的快速发展下，中药、中成药在临床上的应用也越来广泛，这也
进一步地推动了我国中医学的健康、稳定发展。
但是，从我国中药应用的实际情
况来看，其中也存在诸多的假冒伪劣中药的应用现象，这对我国中药的可持续发
展自然就带来了一定程度的阻碍。
基于这种因素，加强对中药的鉴定工作便显得
十分重要，而本文就基于中药鉴定中指纹图谱技术应用的有效性，作出如下报道。
1.指纹图谱技术的概述
1.1指纹图谱技术的概念
指纹最早来源于法医学，主要是根据每个人指纹结构的细微差别，来区分与
鉴别不同的人。
而指纹图谱技术作为指纹这一概念的衍生，是指一些中药或中药
制剂经过相应的处理之后，采取该技术对中药进行分析，获得能够标示化学特征
的光谱或是色谱图，并根据图谱评价中药的优劣、质量与稳定性。
1.2指纹图谱技术的分类
通过对我目前所用指纹图谱技术的分析，可将该技术主要分为两大类，一类
是中药化学成分指纹图谱，该类中包含有色谱指纹图谱、光谱指纹图谱等。
一类
是中药生物技术指纹图谱，该类中包含有：中药DNA指纹图谱、中药电泳指纹图谱，以及目前尚在研究阶段的中药基因组学指纹图谱。
而从应用的频率来看，目
前在中药鉴定与较常应用的属于中药化学成分指纹图谱。
2.中药鉴定指纹图谱技术的具体应用
笔者就根据指纹图谱技术类型的不同，以目前较常用的几种指纹图谱技术作
为研究对象，具体分析其在中药鉴定中的应用，如下：
2.1中药光谱指纹图谱技术的应用分析
中药光谱指纹图说技术包括诸多，目前常见的主要有X射线衍射指纹图谱、
紫外光谱指纹图谱、红外光谱指纹图谱以及核磁共振指纹图谱四种。
其中，X射
线衍射指纹图谱是通过不同程度的衍射现象，作为中药混合物的特征图谱，以此
来分析中药及中药制剂中的定量与定性，进而起到有效保障中药的质量的作用。
而紫外光谱与红外光谱指纹图谱技术，主要是指利用紫外、红外光谱作为基础，
来鉴定中药及中药制剂的真伪，由于此两种指纹图谱技术具有操作快捷方便、鉴
别准确性高、鉴别意义明显等特征，在中药鉴定中的应用也十分广泛。
最后的核
磁共振指纹图谱多是应用在纯中药化合物的结构鉴定当中，由于核磁共振指纹图
谱技术具有独特的重现性、全面性、易辨性、定量性等特征，对鉴别中药真伪的
效果十分显著，因此其在中药鉴定中的应用也非常广泛[1]。
2.2中药色谱指纹图谱技术的应用分析
中药色谱指纹图谱技术包括有气相色谱指纹图谱、高效液相色谱指纹图谱以
及薄层色谱指纹图谱等技术。
其中，气相色谱指纹图谱技术较常应用于挥发性成
分较多的中药及中药制剂当中，将此技术与质谱检测技术联合应用，可有效地提
高中药鉴定的效率、分析速度与选择性，进而为中药的质量评价提供坚实地基础。
高效液相色谱指纹图谱技术在实际的应用中，具有灵敏度高、分离效果佳、检测
方法多、分析速度快等诸多优势，因此，较常应用于不容易分离、成分复杂的中
药鉴定当中。
薄层色谱指纹图谱技术主要是应用于对中药各种成分的鉴定当中，
例如，可采用该技术对中药白芍中的白芍总苷进行鉴定。
由于该技术具有操作简单、鉴定速度快、鉴定范围广、一次性分析样品多、信息量大等特征，其在当前
中药鉴定中的应用也越来越广泛。
2.3中药生物技术指纹图谱技术的应用分析
目前常用的中药生物技术指纹图谱技术主要包括有DNA指纹图谱技术与电泳指纹图谱技术两种。
其中，中药DNA指纹图谱技术是指应用PCR技术，将中药
样本中的DNA提取出来，再通过人工合成的方法，将DNA样本合成为新的DNA
片段。
之后，再依照生物DNA片段的遗传性与特异性特征，分析中药成分含量，从而达到鉴别中药优劣、质量、品种的作用。
采用中药DNA指纹图谱技术，具有简单、快速、不受外界环境影响等多种优点。
而中药电泳指纹图谱技术主要是指，将存在于中药植物细胞中，且受遗传因子所控制的蛋白质分子作为指标，通过氧
化同工酶与蛋白质的聚丙烯酰胺凝胶电泳指纹图谱技术，从分子学角度出发，对
中药植物基因的单一性、遗传性等特别进行鉴别。
由于中药电泳指纹图谱技术具
有污染小、灵敏度高、样品处理简单、操作方便快捷、鉴别准确等诸多优势，因
此在中药鉴定中的应用也比较常见[2]。
3.讨论
将指纹图谱技术应用于中药鉴定工作中，具有十分深远的意义，通过中药鉴
定中指纹图谱技术的科学、合理应用，全面、准确地反映出中的优劣性、化学与
生物学特征、以及中药的整体质量，进而有效促进中成药的标准化与质量，并为
临床中药的合理、安全应用打好基础。
参考文献
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