蛋白溶解度的测定
蛋白质溶解度
分析结果计算
15/75=x/1.5g=0.3gx ps%=0.3g原样中粗蛋白含量/原样中粗蛋 白含量×100%
注意事项
不同样品的粒度应相同。 不同样品在氢氧化钾溶液中的搅拌时间应 一致 。
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试剂
a) 氢氧化钾（分析纯），无水硫酸钾、五 水硫酸铜、氢氧化钠、硼酸、甲基红、溴甲 酚绿、硫酸铵； b) 浓硫酸、盐酸（分析纯）、95%乙醇、 蒸馏水。
仪器和设备
a) 感量为0.0001 g分析天平； b) 磁力搅拌器； c) 离心机； d) 样品粉碎机； e) 60目分析筛； f) 电炉； g) 100 mL或250 mL凯氏烧瓶； h) 凯氏蒸馏装置； i) 250 mL锥形瓶； j) 1000 mL容量瓶； k) 微量滴定管。
试样处理
称取试样1.5 g（准确至0.0002 g）置于 250 mL烧杯中，准确移入 0.042 M氢氧化 钾溶液75 mL，磁力搅拌20 min，然后将 试样转移至离心管中，以2700 r/min的速 度离心10 min。
测定
吸取上清液 15 mL, 放入消化管中, 按照 GB/T 6432-1994凯氏定氮法测定试样中 可溶性蛋白质的含量。同时，按照GB/T 6432-1994凯氏定氮法测定试样中粗蛋白 质的含量。
蛋白质溶解度
在一定的氢氧化钾溶液中溶解的蛋白 质质量占试样中总蛋白质量的百分数。 NSI 通常采用氮溶解指数（NSI）和蛋白 通常采用氮溶解指数（NSI）和蛋白 质分散指数（(PDI)来表示。 质分散指数（(PDI)来表示。
原理
用一定浓度的氢氧化钾溶液提取试样中的可 溶性蛋白质，在催化剂作用下用浓硫酸将提 取液中可溶性蛋白质的氮转化为硫酸铵。加 出试样中可溶性蛋白质含量； 同时，测定原始试样中粗蛋白质含量，计算 出试样的蛋白溶解度。
蛋白质的起泡性测定方法
一．蛋白质的起泡性测定方法1.配制l0ml 1%蛋白分散液（pH 8. 05的0.05mo1/L Tris-HC1缓冲液），在室温的条件下，利用高速分散机均质l min，快速转移到25m1的量筒中，，每30min记录一次泡沫体积。
每个样品重复三次，取平均值。
2.采用搅打发泡测定法[29]：将蛋清蛋白溶于pH7.0的磷酸盐缓冲溶液中，配成3%的蛋清蛋白溶液。
取200ml3%的蛋清蛋白溶液，在A-88组织捣碎匀浆机中，以8000r/min的转速打泡3min,测其泡沫体积，记录为V0，按下式计算起泡度（FAI）： FAI(%)=(V0-200/200) ×100静置30分钟后，测泡沫体积，记录为V1，按下式计算泡沫稳定性（FS）：FS(%)= (V1-200/200 )×1003.参照Hammershoj 等介绍的方法[36]。
首先将全蛋液稀释到5%（v/v），然后取100mL的稀释液，10000r/min速度搅拌1min。
记录均质停止时和停止后30min的泡沫体积与液体体积，起泡力与泡沫稳定性分别用OR与FS表示，计算公式如下：起泡性（OR）=Vf0 /Vli 2-3泡沫稳定性（FS）=Vf30/Vf0 2-4式2-3 与2-4中：Vf0—零时刻时泡沫的体积（mL）；Vli—初始阶段的液体体积（100mL）；Vf30—静置 30min后的泡沫体积。
Hammershoj, M., Qvist, K. B. Importance of hen age and egg storage time for egg albumen foaming [J]. Lebensmittel-Wissenschaft-Technologie, 2001, 34: 118–120.4.二．乳化性及乳化稳定性的测定方法用0.05 mol/L Tris-HCl缓冲液（pH 7.5）配制1%的蛋白样品，取1 mL色拉油与3 mL待测溶液于均质机中均质剪切1min，分别于0min和10min时从底部取50 μL用0.1% SDS 25 mL稀释后测OD500乳化活性指数(EA I)=(2.303 × 2 × OD500)/(C × Φ ×L)乳状液稳定指数(ES)=OD500× Δt/ΔOD500式中：EAl ——每克蛋白质的乳化面积，m2/g；Φ——油相所占的分数，在本实验中油相占1/4；C——蛋白质的浓度，1%；L——比色池光径，10mm。
蛋白质在盐溶液中的溶解度曲线
蛋白质在盐溶液中的溶解度曲线
蛋白质是生物体内非常重要的有机分子，它们在细胞代谢、信号传递、免疫系统等多个生物学过程中发挥着至关重要的作用。
然而，蛋白质在盐溶液中的溶解度问题一直是制约其应用的重要因素之一。
蛋白质在盐溶液中的溶解度通常会受到多种因素的影响，其中最主要的因素之一就是盐的种类和浓度。
一些盐比如硫酸铵和硫酸钠，可以增加蛋白质的溶解度，而另一些盐比如氯化钠则会降低蛋白质的溶解度。
为了研究蛋白质在盐溶液中的溶解度变化规律，科学家们通常会制作蛋白质在不同盐浓度下的溶解度曲线。
这些曲线能够反映蛋白质在不同盐浓度下的相对溶解度，从而帮助科学家更好地理解蛋白质的化学性质和生物学特性。
通过对不同种类、不同浓度的盐对蛋白质溶解度的影响进行研究和分析，科学家们可以为蛋白质的应用和开发提供更加可靠和有效的技术支持，从而推动生物技术和医学领域的发展。
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豆粕蛋白溶解度和尿酶值
大豆蛋白是家禽日粮中最为重要的，也是质量最好的植物蛋白饲料，除蛋氨酸略缺乏外，其它各种氨基酸都接近理想平衡。
如同其它蛋白质饲料一样，豆粕质量受各种营养素含量的影响，如能量、蛋白质、纤维素和氨基酸等，例如普通豆粕与去皮豆粕间在以上指标方面就有很大的差别（见表1）。
去皮豆粕由于纤维素含量低而有较高的能量水平。
但是蛋白质水平高的豆粕不一定保证低纤维和高能量水平，例如某些未去皮中国豆粕的蛋白质含量可高达48%甚至50%，而仍然含有6%至7%的纤维素。
因此高蛋白水平豆粕的代谢能水平仍然可能因纤维素含量高而下降，尚未见到这些高蛋白质“高纤维素”豆粕的代谢能测定值。
但一般可以估计：在去皮豆粕纤维素正常含量3.5%以上时，每增加1%纤维素使每公斤猪饲料的代谢能下降32至42大卡，而每公斤禽饲料则下降将近60大卡。
另一方面，豆粕质量在很大程度上受加工方面问题的影响而使它的氨基酸含量和氨基酸消化率以致于能量受到影响。
本文主要讨论由加工不足或加热过度所引起的豆粕质量变异以及对生产性能的影响，同时介绍目前可行的鉴定豆粕质量的方法—尿酶活性（pH变化值）与0.2%氢氧化钾蛋白溶解度，并加以评估。
一、生大豆——抗胰蛋白酶与尿酶众所周知，豆粕必须经过适度热加工以破坏大豆中所含的数种抗营养物质。
其中对畜禽影响最大者为抗胰蛋白酶（Tripsin Inhibitor），有幸的是这些抗营养因子在加热后都会遭到破坏。
适度加热是豆粕加工的关键，因为加热不足或过度都会降低豆粕的营养价值。
抗胰蛋白酶是生大豆中的一种蛋白酶抑制物，它在消化道内能使胰蛋白酶和凝乳酶失活，从而降低蛋白质的消化率，并引起胰脏代偿性增大，由于胰酶富含硫氨基酸，因此，大量分泌消化酶可能加剧大豆蛋白含硫氨基酸的缺乏现象。
抗胰蛋白酶的测定方法很耗时也很昂贵，因此需要寻找一种简易而快速的测定方法。
生大豆中含不等量尿酶（Urease）。
尿酶本身无营养意义，但它与抗胰蛋白酶的含量接近，而且遇热变性失活的程度与抗胰蛋白酶相似（图1），因此可用尿酶活性作为豆粕加工适宜度的间接估测指标。
可溶性蛋白质质谱分析
百泰派克生物科技
可溶性蛋白质质谱分析
可溶性蛋白质质谱分析，指的是利用质谱技术对特定条件下的生物细胞或组织中的可溶性蛋白质进行分析。
百泰派克生物科技提供质谱分析可溶性蛋白质的服务。
可溶性蛋白质
蛋白溶解度是指样品中溶解到溶液中的蛋白质含量。
蛋白质的溶解度通常是蛋白质新成分开发和测试过程中首先要确定的功能性质。
在一定的溶液中，根据溶解性，可以把蛋白质分为可溶性的和非可溶性的。
对于可溶性蛋白质，没有一定的标准，因为蛋白质的生化特性非常不同，在一定条件下溶于特定溶剂中的蛋白质都可以叫可溶性蛋白质。
可溶性蛋白质质谱分析
可溶性蛋白质质谱分析，指的是利用质谱技术对特定条件下的生物细胞或组织中的可溶性蛋白质进行分析。
在提取时，注意将可溶性蛋白与非可溶性蛋白分开即可。
分析可溶性蛋白质主要是对其种类、含量和功能等进行分析。
质谱可以测定蛋白质的含量，并通过测定蛋白质的一级结构来实现蛋白质种类和功能的分析。
不同细胞中的可溶性蛋白有所不同，例如衰老细胞分泌的可溶性蛋白包括炎性细胞因子、趋化因子、生长因子和基质修饰酶，分析它们有助于了解衰老相关的分泌表型。
蛋白质溶解度的测定
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浅谈凯氏定氮法测定豆粕中氢氧化钾蛋白质溶解度的不确定度评定
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98 食品安全导刊 2021年5月 Copyright©博看网 . All Rights Reserved.
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浅谈凯氏定氮法测定定豆豆粕粕中中氢氢氧氧化化钾钾蛋蛋白白质质溶溶解解 度度的的不不确确定定度度评评定定
□ 高高敬敬芳芳 刘刘 广广 刘刘 云云 中中粮粮东东海海粮粮油油工工业业（（张张家家港港））有有限限公公司司
摘摘 要要：：凯凯氏氏定定氮氮法法测测定定豆豆粕粕中中氢氢氧氧化化钾钾蛋蛋白白质溶质解溶度解，度会，受会到受不到同不因同素因的素影的响影导响致检导测致结检果测存结在果误存差在，误为了差提，为高了检 提测高结果检的测可结靠果性的和可准靠确性性和，本准文确依性据，本相关文标依准据对相豆关粕标中准氢对氧豆化钾粕蛋中白氢质氧溶化解钾度蛋进白行质不确溶定解度度评进定行。不确定度评定 。
（ 感量 0.000 1 g）；滴定管，50 mL 数显 偏差表示标准不确定度为 u（c1），则 u
滴定仪（A 级）；离心机，奥豪斯 FC5714； （c1）的计算公式见式（3）。
移液管：15 mL。
1.3 数学模型 粗蛋白质含量 W2 =
（V1 - V0） × c × 0.014 × K × 100 m （1）
∑ u(c1) =
n i=1
(ci - cˉ)2
n(n - 1)
= （3）
0.27 × 10-4 mol /L 式中：n-测定次数；c-每次测定的盐 酸标液的结果，mol/L；cˉ 为盐酸标液检
豆粕蛋白溶解度测定方法的研究_刘桂宾
. 37 .
ＩＮＳＰＥＣＴＩＯＮ ＡＮＤ ＱＵＡＲＡＮＴＩＮＥ ＳＣＩＥＮＣＥ 检验检疫科学
美国大豆协会提供的方法，要求ＫＯＨ溶液的浓度 为０ ． ２ ％ ，相当于０ ． ０ ４ ２ 当量、ｐ Ｈ 值为１ ２ ． ５ 。以配制 １０００ｍＬ ０．２％ＫＯＨ溶液为例， 应称取ＫＯＨ２．３５６ｇ，但 市售的分析纯的ＫＯＨ一般纯度为≥８２％，如以８２％为 基准，则折算纯度后实际应该称取ＫＯＨ ２．８７３ｇ，故在 称量Ｋ Ｏ Ｈ 时应先对其纯度进行折算。
碱溶蛋白Ｐ１的平行试验允许误差参照粗蛋白的要 求（ＳＮ／Ｔ ０８００·３－１９９９）。
碱溶蛋白Ｐ 及粗蛋白Ｐ均取平行试验结果的算术 １
平均值作为结果，保留三位小数，最终蛋白溶解度Ｐｓ 的结果保留两位小数。 ３ 结果与讨论
在测定豆粕蛋白质溶解度的过程中，有一些因素 会对其测定结果产生较大影响，注意对这些关键点 加以控制，可获得较好的准确度和精密度。 ３．１ 制样粒度
ＩＮＳＰＥＣＴＩＯＮ ＡＮＤ ＱＵＡＲＡＮＴＩＮＥ ＳＣＩＥＮＣＥ 检验检疫科学
Ｖｏｌ．１７ Ｎｏ．１－２ ２００７年第１－２期
豆粕蛋白溶解度测定方法的研究
刘桂宾 张 璐 李 元 郝永忱
（秦皇岛出入境检验检疫局，河北秦皇岛，０６６００２）
摘 要：［目的］摸索影响豆粕蛋白质溶解度测定中的关键因素及其控制方法，建立正确评价豆粕加工质量的测 定方法。［方法］参考美国大豆协会提供的蛋白质溶解度测定方法，测定蛋白质溶解度，同时测定尿酶活性。［结果］制 样粒度及其称量准确性、２％ＫＯＨ溶液浓度准确度及其放置时间、豆粕溶解时的振荡器转速、振荡时间、温度等都会 影响测定结果，１０次平行测定的标准偏差为０．０６５，相对标准偏差为０．１７％ 。［结论］该方法精密度好，准确度高，能满 足进出口检验的需要。
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蛋白溶解度的测定
一、定义
蛋白溶解度是根据蛋白质在一定含量的KOH溶解PRO的质量。
二、分析结果
生大豆的PS达100%，在日常分析中，当PS大于85%则认为大豆粕过生。
当PS小于75%则认为大豆粕过熟。
PS在80%左右时大豆粕加工适度。
三、试剂
2g/l氢氧化钾：2g氢氧化钾溶于1000ml水中。
四、测定方法
称取粉细（防止过热）后的豆粕1.5g与250ml烧杯中。
加75ml氢氧化钾，在磁力搅拌器上搅拌20min，将溶液转至离心管中，用2700r·min速度离心10min后过滤。
吸取滤液15ml，放入消化管中，用凯氏定氮法测定其中的PRO的含量，此含量相当于0.3g试样中溶解的蛋白质量。
加入12ml硫酸和催化剂进行消化。
（后面的步骤与粗蛋白的方法一样）
五、公式
V-空白*C*0.014*6.25
PS= ————————————
0.3/粗蛋白结果
V——消耗盐酸的体积
C——盐酸浓度
0.3——吸取15ml上清液中相当与0.3g粗蛋白75ml/15=5，1.5g/5=0.3。