为什么转入病毒外壳蛋白基因或病毒复制酶基因就具备抗病毒的能力
病毒蛋白毒力机制的研究

病毒蛋白毒力机制的研究病毒是一种微生物,它能够侵入人体内部并传播疾病。
病毒靠着它复杂的生命周期来攻击和感染宿主细胞,这就是病毒蛋白毒力机制的研究。
这个领域的研究旨在揭示病毒如何感染宿主细胞以及如何逃避免疫系统,以便开发更有效的疫苗和治疗方法。
第一步:病毒的复制和扩散病毒复制和扩散是感染过程中最重要的一部分。
病毒需要侵入宿主细胞并将其操纵以自我复制。
在这个过程中,病毒蛋白发挥了关键的作用。
病毒蛋白是在感染过程中由病毒基因组编码的蛋白质,可以执行多种功能。
在感染初期,病毒蛋白浓度升高,这个过程被称为病毒感染过程的早期阶段。
当病毒蛋白被合成和翻译之后,它扮演着一系列关键的角色。
其中之一是通过与宿主细胞膜互动,病毒蛋白可以帮助病毒进入宿主细胞。
例如,HIV-1的病毒蛋白gp120和CD4细胞的膜蛋白结合,然后再与CXCR4或CCR5受体相结合。
这个互动导致了病毒的内部核酸(DNA或RNA)的释放,它是感染的下一个重要步骤。
病毒蛋白不仅带有攻击和感染宿主细胞的功能,还可以促进病毒早期活动、向下寄生和及早扩散。
而且,病毒蛋白还能够由不同类型的病毒和宿主细胞产生多种表达形式。
这就需要研究人员认真研究病毒蛋白在感染过程中的具体机制,以便开发更有效的治疗和预防措施。
第二步:病毒蛋白的抵抗性和逃避机制当病毒侵入宿主细胞后,它需要对抗宿主细胞的免疫反应,以便成功复制和扩散。
在这个过程中,病毒蛋白还需要执行抗宿主防御和逃避机制。
例如,HSV(单纯疱疹病毒)能够通过其蛋白质VP22来保护其DNA免受宿主细胞的DNA酶和结构蛋白的攻击。
还有其他病毒,它们能够通过多种机制来逃避宿主细胞的免疫反应。
了解这些逃避机制对确保抗病毒治疗的成功至关重要。
病毒蛋白抵抗宿主细胞的途径使得宿主免疫系统难以消除病毒,从而使病毒依然存在于宿主体内。
在研究中,研究人员使用各种技术和工具来探究这些病毒蛋白抵抗机制的复杂性,以帮助开发更有效的抗病毒药物。
高中生物选修3教案 第1章 基因工程

专题一 1.1 DNA重组技术的基本工具1、教材分析《DNA重组技术的基本工具》是人教版生物选修三专题一《基因工程》的第一节,本节内容主要是介绍了DNA重组技术的三种基本工具,是学习《基因工程的基本操作程序》的基础和前提。
2、教学目标1.知识目标:(1)简述基础理论研究和技术进步催生了基因工程。
(2)简述DNA重组技术所需的三种基本工具。
2.能力目标:运用所学DNA重组技术的知识,模拟制作重组DNA模型。
3.情感、态度和价值观目标:(1)关注基因工程的发展。
(2)认同基因工程的诞生和发展离不开理论研究和技术创新。
3、教学重点和难点1、教学重点DNA重组技术所需的三种基本工具的作用。
2、教学难点基因工程载体需要具备的条件。
4、学情分析学生在必修课中已经学习过关于基因工程的基础知识,对于本部分内容已经有了初步了解,所以学习起来应该不会有太大的困难。
5、教学方法1、学案导学:见学案。
2、新授课教学基本环节:预习检查、总结疑惑→情境导入、展示目标→合作探究、精讲点拨→反思总结、当堂检测→发导学案、布置预习6、课前准备1.学生的学习准备:预习《DNA重组技术的基本工具》,初步把握DNA重组技术所需的三种基本工具的作用。
2.教师的教学准备:多媒体课件制作,课前预习学案,课内探究学案,课后延伸拓展学案。
七、课时安排:1课时一、教学过程(一) 预习检查、总结疑惑。
检查学生落实预习情况并了解学生的疑惑,使教学具有针对性。
(二)情景导入、展示目标。
教师首先提问:A.我们以前在哪部分学习过基因工程?(必修二从杂交育种到基因工程)B.回想一下,转基因抗虫棉是怎样培育出来的?经过了哪些主要步骤?(实质是基因工程的基本操作程序:目的基因的获取,基因表达载体的构建,将目的基因导入受体细胞,目的基因的检测与鉴定)从这节课开始,我们将深入学习基因工程,今天我们来学习DNA重组技术的基本工具。
我们来看本节课的学习目标。
(多媒体展示学习目标,强调重难点)(三)合作探究、精讲点拨。
高中生物课本笔记 选修三

高中生物课本笔记选修三♦选修3:现代生物科技专题1.大多数限制酶的识别序列由6个核苷酸组成(例如EcoRⅠ、SmaⅠ限制酶),也有少数限制酶的识别序列由4、5、8个核苷酸组成。
2.根据你所掌握的知识,你能推测限制酶存在于原核生物中的作用是什么吗?【解析】原核生物容易受到自然界外源DNA的入侵,但是生物在长期的进化过程中形成了一套完善的防御机制,以防止外来病原物的侵害。
限制酶就是细菌的一种防御性工具,当外源DNA侵入时,限制酶会将外源DNA切割掉,以保证自身的安全。
所以,限制酶在原核生物中主要起到切割外源DNA,使之失效,从而达到保护自身的目的。
3.天然的DNA分子可以直接用做基因工程载体吗?为什么?【解析】作为基因工程使用的载体必需满足以下条件:(1)有一个或多个限制酶的切割位点。
(2)能在受体细胞中复制并稳定遗传。
(3)载体DNA 必需带有标记基因。
(4)必需是安全的(不会对受体细胞有害,或不能进入到除受体细胞外的其他生物细胞中去)。
(5)大小应适合(以便提取和在体外进行操作,太大就不便操作)。
自然存在的质粒DNA 分子并不完全具备上述条件,都要进行人工改造后才能用于基因工程操作。
双链复制。
加入引物(小段DNA,如dCTP、dATP、dGTP、dTTP),是因为Taq(热稳定DNA聚合)酶仅仅可以把新的核苷酸加到已有的DNA链上,即引物作为DNA复制的起始点。
加热至90~95℃,DNA解旋→冷却至55~60℃,引物与模板DNA结合→加热至70~75℃,Taq酶从引物开始进行互补链的合成。
6.DNA合成仪——无需模板、引物、DNA,通过化学反应合成单链DNA分子。
目的——造出DNA,类似写书。
7.将生物的所有DNA直接导入受体细胞不是更简便吗?如果这么做,结果会怎样?【答案】DNA会被降解,即使存在也不能表达。
8.农杆菌是一种生活在土壤中的微生物,能感染双子叶植物、裸子植物,不能感染单子叶植物。
2020高中生物 专题1 基因工程 1. 基因工程的应用练习(含解析)

基因工程的应用[基础全练]1.下列哪一项不是动物基因工程的应用前景( )A.转入外源生长激素基因的鲤鱼B.将肠乳糖酶基因导入奶牛基因组C.乳腺生物反应器表达医药产品D.利用工程菌生产干扰素解析:转入外源生长激素基因的鲤鱼是动物基因工程在提高动物生长速度方面的应用,选项A正确;将肠乳糖酶基因导入奶牛基因组是动物基因工程在改善畜产品品质方面的应用,选项B正确;乳腺生物反应器表达医药产品是动物基因工程在药物生产上的应用,选项C正确;利用工程菌生产干扰素是基因工程制药的代表,属于微生物基因工程的应用,不属于动物基因工程的应用,选项D错误。
答案:D2.下列转基因植物与所选用的目的基因对应错误的是( )A.抗虫棉-—Bt毒蛋白基因B.抗病转基因烟草——几丁质酶基因C.抗盐碱和抗旱植物——调节细胞渗透压的基因D.耐寒的番茄——抗冻基因解析:抗病转基因植物常使用病毒外壳蛋白基因和病毒的复制酶基因。
几丁质酶基因及抗毒素合成基因一般用作抗真菌转基因植物的目的基因,故选项B错.答案:B3.我国转基因技术发展态势良好,农业部依法批准发放了转植酸酶基因玉米、转基因抗虫水稻的生产应用安全证书。
下列关于转基因玉米和转基因水稻的叙述,不正确的是()A.转植酸酶基因玉米的外源基因是植酸酶基因B.转基因抗虫水稻减少了化学农药的使用,减轻了环境污染C.转基因抗虫水稻是否具有抗虫性,可通过饲养卷叶螟进行检测D.转基因抗虫水稻的外源基因是几丁质酶基因解析:转植酸酶基因玉米的外源基因是植酸酶基因,转基因抗虫水稻的外源基因是Bt毒蛋白基因,而几丁质酶基因是抗真菌转基因植物常用的基因,A正确,D错误;转基因抗虫水稻减少了农药的使用,减轻了环境污染,同时降低了农业生产的成本,B正确;检测目的基因是否表达最简便的方法是进行个体水平的检测,C正确。
答案:D4.运用基因工程技术,可让羊合成并由乳腺分泌抗体.相关叙述正确的是( )①该技术将定向改造生物的性状②限制酶和DNA聚合酶是构建基因表达载体必需的工具酶③受精卵是理想的受体细胞④目的基因与运载体混合后,只能得到一种重组DNA分子A.①③B.①④C.③④ D.①②解析:基因工程可以定向改造生物的性状,①正确;限制酶和DNA 连接酶是构建基因表达载体必需的工具酶,②错误;转基因动物中常用的受体细胞是受精卵,③正确;目的基因与运载体混合后,可能得到三种DNA分子:外源DNA自连、重组DNA、运载体DNA自连,④错误。
抗病毒药作用机理有哪些

抗病毒药作用机理有哪些病毒是一种侵入生物细胞并利用细胞内部资源复制自身的微生物。
在人类历史上,许多致命疾病都是由病毒感染引起的,如流感、艾滋病、乙肝等。
为了控制这些病毒引发的疾病,科学家们开发出了各种抗病毒药物。
这些药物能够干扰病毒的复制、传播和侵入机制,从而发挥抗病毒的作用。
抗病毒药物的作用机理1. 抑制病毒复制大多数抗病毒药物的作用机理是通过抑制病毒的复制。
病毒在感染宿主细胞后,会利用细胞内部的代谢机制复制自身。
抗病毒药物可以干扰病毒复制所需的蛋白质合成、核酸合成等过程,从而阻止病毒的复制和扩散。
2. 阻断病毒侵入宿主细胞有些抗病毒药物的作用机理是阻断病毒侵入宿主细胞。
病毒侵入宿主细胞是感染过程的第一步,许多病毒依赖于宿主细胞表面的受体结合进入细胞内部。
抗病毒药物可以结合病毒表面蛋白或阻断病毒与细胞受体的结合,从而阻止病毒侵入宿主细胞。
3. 加强宿主免疫系统有些抗病毒药物的作用机理是通过增强宿主免疫系统的抗病毒能力来抵抗病毒感染。
宿主免疫系统是人体内部的天然防御系统,可以识别并消灭病毒。
抗病毒药物可以通过激活免疫细胞、增强抗体产生等方式增强宿主免疫系统的功能,帮助宿主体内消灭病毒。
4. 抑制病毒蛋白质功能还有一些抗病毒药物的作用机理是通过抑制病毒蛋白质的功能来达到抗病毒的效果。
病毒在宿主细胞内复制和感染依赖于病毒自身蛋白质的功能。
抗病毒药物可以干扰病毒蛋白质的生物活性、抑制其在宿主细胞内的功能,从而抑制病毒的复制和侵害作用。
结语总的来说,抗病毒药物有多种作用机理,包括抑制病毒复制、阻断病毒侵入宿主细胞、加强宿主免疫系统和抑制病毒蛋白质功能等。
这些作用机理共同协同作用,帮助人类抵抗病毒感染,保护人类健康。
随着科学技术的不断进步,相信未来会有更多更有效的抗病毒药物被研发出来,为人类健康事业做出更大的贡献。
高中生物《DNA是主要的遗传物质》知识点

高中生物《DNA是主要的遗传物质》知识点正确理解DNA是主要的遗传物质,应注意弄清以下问题:1.19世纪末叶,生物学家通过对细胞的有丝分裂、减数分裂和受精过程的研究,认识到染色体在生物的遗传中具有重要的作用。
染色体的化学组成如何?到底哪种成分才是遗传物质? 染色体主要由DNA和蛋白质组成,还含有少量的RNA。
由于染色体不是单一物质组成,因而,遗传物质到底是DNA,还是蛋白质的争论相当激烈,随着噬菌体侵染大肠杆菌实验的进行,使人们普遍接受了DNA才是遗传物质的结论。
2.你认为作为遗传物质应该具有怎样的特点? 一是分子结构具有相对的稳定性;二是能够进行自我复制,使前后代具有一定的连续性;三是能够指导蛋白质的合成,从而控制新陈代谢的过程和性状;四是能够产生可遗传的变异。
3.在遗传物质的发现过程中,一批批科学家前赴后继,作出了巨大贡献,他们的创造性地进行了一系列实验。
这些经典实验的创新之处及其他们的结论怎样? 格里菲思在肺炎双球菌转化实验中,将加热杀死的S型肺炎双球菌与R型肺炎双球菌一起注入到小鼠体内,导致小鼠死亡并分离得到了能够稳定遗传的S型肺炎双球菌。
据此,他得到了:加热杀死的S型肺炎双球菌中含有促进R型肺炎双球菌转化的“转化因子”。
艾弗里及其同将组成S型肺炎双球菌的各种成分分离开来,将它们分别加入到已培养了R型肺炎双球菌的培养基中,并创造性的将S型肺炎双球菌的DNA经DNA酶处理后加入,发现只有加入DNA才能促使R型肺炎双球菌的转化。
他们首次提出了:DNA是遗传物质,蛋白质不是遗传物质。
让人们普遍接受“DNA是遗传物质,蛋白质不是遗传物质”结论的科学家是赫尔希和蔡斯,在于他们找到一种特殊的实验材料——大肠杆菌T2噬菌体(蛋白质与DNA可以有效分离),并借助于同位素标记的方法进行了噬菌体侵染细菌的实验,通过实验,他们发现噬菌体侵入到细菌的成分是DNA而不是蛋白质,从而证明了亲子代间具有连续性的物质是DNA而不是蛋白质。
高中生物学选择性必修3基因工程的应用

知识点一 基因工程在农牧业方面的应用
梳理教材
新教材·生物(RJ) 选择性必修3
1.转基因抗虫植物 (1)方法:从某些生物中分离出具有____抗__虫___功__能__的__基__因______,将其导入作物中。 (2)成果:______转__基__因__抗__虫__棉___花_______、玉米、水稻等。 (3)意义:减少____化__学__杀__虫__剂_____的使用,降低生产成本,减少环境污染。 2.转基因抗病植物 (1)方法:将来源于某些病毒、真菌等的___抗__病__基__因____导入植物中。 (2)成果:转基因抗病毒甜椒、番木瓜等。 (3)意义:能获得用常规育种方法很难培育出的_________抗__病__的__新__品__种___________。
新教材·生物(RJ) 选择性必修3
解析:将抗逆性基因导入农作物体内,可用于提高农作物的抗逆能力, A 正确;我国转基因抗虫棉是转入了苏云金芽孢杆菌的抗虫基因培育出来的, B 错误;因为盐碱和干旱对农作物的危害与细胞内调节渗透压有关,所以科 学家可以调节细胞渗透压的基因,来提高作物抗盐碱、抗干旱的能力,这在 烟草等植物中已获得了比较明显的成果,C 正确;外源生长激素基因表达可 以使转基因动物生长更快,D 正确。
(4)用基因工程的方法,使外源基因得到高效表达的菌类一般称为基因工 程菌。( √ )
互动探究
新教材·生物(RJ) 选择性必修3
1.(科学思维)用乳腺生物反应器或乳房生物反应器可大量生产药物,构 建这种药物基因的表达载体时,需要怎样的启动子?
提示:乳腺蛋白基因的启动子。
2.什么是干扰素?有何作用?用什么方法可大量生产干扰素? 提示:干扰素是动物或人体细胞受到病毒侵染后产生的一种糖蛋白。干 扰素几乎能抵抗所有病毒引起的感染,它是一种抗病毒的特效药。用基因工 程的方法利用大肠杆菌及酵母菌细胞大量生产干扰素。
病毒的结构和感染机理

病毒的结构和感染机理自从人类有了智慧以来,病毒就一直是我们最大的威胁之一。
病毒潜伏在我们身边,时刻准备着找寻机会入侵我们的身体,给我们的健康带来威胁。
因此,了解病毒的结构和感染机理对于我们预防和治疗病毒感染具有重要的意义。
病毒是一种非细胞性微生物,也是一种细菌之外的病原体。
相比于细菌,病毒无法自主繁殖和生存,在感染宿主之前必须依赖其宿主,这也是病毒感染宿主的基本机制。
病毒的结构主要由外壳和核酸构成。
外壳主要由蛋白质组成,其功能包括病毒粘附于宿主细胞、进入细胞、释放基因物质等。
核酸则包括了病毒所需要的遗传物质,不同的病毒具有不同的核酸成分。
病毒侵入宿主细胞的过程可以分为三个步骤:粘附、进入和释放。
在粘附阶段,病毒会利用其外壳上的一些特定蛋白质来吸附在宿主细胞表面的受体上,随后病毒和宿主细胞之间的结合就完成了。
接下来,病毒就开始进入宿主细胞。
有些病毒直接进入宿主细胞,有些病毒则会先被宿主细胞吞噬到细胞内部再释放出来。
最后,病毒会利用细胞内的物质来构建其物质基质。
病毒的核酸粘合到宿主细胞内的核糖核酸中,继而合成病毒的新的核酸和蛋白质。
整个过程一旦完成,新的病毒就会被释放出来,继续感染宿主。
不同的病毒对于宿主细胞的感染和进入方式是不同的。
例如,感冒病毒进入宿主细胞时,会利用细胞表面的一些受体引导病毒进入细胞,而艾滋病病毒则会利用一些蛋白质来将自身带进细胞中。
此外,不同的病毒由于其粘附在宿主细胞上的蛋白质不同,导致其攻击宿主细胞的特异性也不同。
全面了解各种病毒的感染机理有助于我们更好地防范疾病,为研制相关的药物和疫苗提供重要的理论支撑。
近年来,新冠病毒的突然袭来给全世界带来了极大的冲击和痛苦。
它首先在武汉爆发,随后迅速传播到全球,并迅速成为当今不可忽视的新兴传染病。
新冠病毒是一种通过直接接触、空气传播、飞沫传播等多种途径传播的病毒。
它的外壳由S蛋白、E蛋白、M蛋白和N蛋白组成。
这些蛋白质不仅是病毒进入细胞的关键,还参与病毒的免疫应答等过程。
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为什么植物转入病毒外壳蛋白基因或病毒复制酶基因就具备抗病毒的能力(1)病毒外壳蛋白(coat protein, CP)基因:在植物中表达病毒外壳蛋白基因可以阻止病毒的侵染或症状的产生。
病毒外壳蛋白的抗性机理:一种假说认为,当入侵病毒的裸露核酸进入植物细胞后,它们立即被细胞中的自由CP所重新包裹,从而阻止了入侵病毒核酸的翻译和复制。
在离体条件下,附加自由CP能够抑制末装配病毒的翻译的实验结果支持了上述假说;另一假说认为,抗性机制是在CP水平上抑制病毒脱壳,此说法最有力的证据是转基因植株可抗完整病毒的侵染.但不能抵御裸露病毒RNA的入侵;还有一种观点认为病毒外壳蛋白的抗性机制不是外壳蛋白在起作用,而可能是它的RNA转录物与入侵病毒RNA之间的相互作用
(2)病毒复制酶基因:RNA病毒(如烟草花叶病毒)的复制酶是依赖于RNA的RNA聚合酶。
病毒复制酶一般是在病毒核酸进入寄主细胞并结合到寄主核糖体之后形成的。
在植物中表达不完整的病毒复制酶基因可以显著提高植物对病毒的抗性,作用机制还不十分清楚,可能与基因转录后沉默有关。
植物抗病毒基因工程
植物病毒病难以防治已成为植物界的“癌症”,给全球农业生产造成巨大的损失。
有效地防治植物病毒病,减少经济损失,满足日益增长的世界人口需求。
是农业生产当务之急。
病毒分子生物学,植物基因工程的迅速发展,为筛选培育抗病、优质、丰产的新植物开辟了广阔的前景。
自1986年,全球范围内兴起了多种利用分子生物学及基因工程研究成果防治植物病毒病害的策略,并成功地培育筛选出多种抗病毒的工程植物。
1.病毒外壳蛋白介导的基因工程抗病性
外壳蛋白是形成病毒颗粒的结构蛋白,它的功能是将病毒基因组核酸包被起来,保护核酸;与宿主互相识别,决定宿主范围;参与病毒的长距离运输等。
1986年,美国的Beachy 实验室的Powell-Abel等第一次将烟草花叶病毒外壳蛋白(TMV-Cp)基因插入修饰过的农杆菌质粒中,并置于花椰菜花叶病毒(CaMV)35S启动子下,经农杆菌侵染而将TMV -Cp基因转入烟草,并在烟草中表达TMV-Cp,分子生物学检测表明TMV-Cp基因已整合到烟草的基因组中,并能稳定地遗传给子代,在转基因烟草中TMV-Cp表达量占叶蛋白0.1%左右。
攻毒试验表明:转基因烟草能够抑制TMV的复制,在一定程度上降低或阻止TMV的系统侵染;并延迟发病12~30天。
这一突破性的研究成果标志着植物抗病毒基因工程的诞生。
自此科学家继续用黄瓜花叶病毒(CMV),马铃薯病毒X和Y,大豆花叶病毒(SMV),苜蓿花叶病毒(AiMV)等病毒的外壳蛋白基因导入植物体后,均得到类似的实验结果,使转基因植物获得对该病毒的抗性。
至今世界各地科学家已在15个病毒组中的30多种病毒中,证实了由病毒外壳蛋白介导的抗病性,许多抗性工程植物相继进入大田试验。
目前认为外壳蛋白介导的抗病性是比较成熟的植物抗病毒基因工程策略,有人认为其机制是外壳蛋白在转基因植物中的积累干扰了病毒脱衣壳,从而抑制了病毒在植物体中的复制,转运与积累,但许多实验结果预示其机制的复杂性。
2.复制酶介导的抗病性
复制酶即特异性依赖于病毒RNA的RNA多聚酶。
是病毒基因组编码的自身复制不可缺少的部分,特异地合成病毒的正负链RNA。
1990年Golemboski等报道他们将TMVU1株编码的复制酶的一部分基因序列,即54kD蛋白基因转入烟草中得到的工程植株用很高浓度的TMVU1(500μg/mL)及TMV RNA(300μg/mL)接种时,均表现出很高的抗性,比一般转外壳蛋白基因的植物介导的植物抗病性高得多。
后来豌豆早枯病毒54kD的蛋白基因和CMVFny RNA2编码的切去活性中心部位GDD(Gly-Asp-Asp)的复制酶部分基因片段转入烟草,均获得了高抗的工程植物。
此外在马铃薯病毒X和Y中也报道了同样成功的研
究结果。
转入的这些基因均为切除了复制酶活性中心部位GDD核苷酸序列,大多数人认为表达的这些不稳定蛋白产物会干扰病毒复制过程中复制酶复合体的形成及其功能的行使,从而使工程植株具有抗病性。
复制酶策略很有应用前景。
3.卫星RNA介导的抗病性
卫星RNA是独立于病毒基因组之外,依赖于其辅助病毒复制的小分子RNA,是病毒分子寄生物。
我国田波实验室自1981年首次在国际上开展了利用卫星RNA防治病毒病害的研究工作,结果表明黄瓜花叶病毒(CMV)卫星RNA作为生物防治因子能有效地防治由强毒株系CMV引起的严重病害。
1986年英国Baulcombe等首次将CMV I-17N卫星 RNA以双联体基因形式转入烟草,并得到抗CMV的工程植物。
此后陆续将烟草环斑病毒和CMV 的卫星RNA转入烟草和番茄中并得到抗病植株。
一般认为由卫星RNA介导的抗病机制是卫星RNA与病毒RNA竞争复制酶,从而干扰病毒基因组的复制,使表达卫星RNA工程植株得到保护。
因具卫星RNA的病毒数量很少,使卫星RNA介导的抗病性的应用受到限制。
4.反义RNA和核酶策略
反义RNA对基因表达具有一定的抑制作用,尤其在细菌中,与转录起始区互补的反义RNA最为有效。
在真核生物中,与3′-末端序列互补的反义RNA有一定的抑制作用。
Baulcombe等1987年和Cuozzo等1988年分别得到烟草环斑病毒的4个基因组RNA的反义序列和CMV-Cp反义序列的转基因植株。
转基因工程株未获得对病毒的抗性或只表现微弱的抗性。
Day等1991和Lindo等1992分别在双生病毒番茄金黄叶病毒和烟草蚀纹病毒上得到转反义RNA的抗性烟草。
核酶是一种高效特异的RNA内切酶,其结构包括一个几乎完全相同的17个高度保守核苷酸序列,其中有3对碱基配对形成的茎和环结构,整个结构很象一个锤头,具自我切割的活性,锤头结构是自身切割活性的结构基础。
只要已知某一RNA的序列,就可以设计出用于不同目的核酶进行特异地切割。
因为植物病毒大多数是RNA病毒,并且许多已被测序,可以设计出特定的核酶,切割病毒RNA基因,从而破坏其生存的功能,达到抗病毒的目的。
目前由核酶介导的抗病毒策略也成功的报道。
但是也存在一定的危险性,核酶也有可能将生物体内的有用的RNA作为耙子进行切割,破坏正常细胞的生理功能。
以反义RNA和核酶介导的抗性还有待于进一步的研究。
5.复合基因策略
由外壳蛋白基因,缺损复制酶基因和卫星RNA介导的抗病性是比较成熟的研究策略。
但这些工程植株抗病性有一定的局限性,例如转基因植物只抗一种病毒或抗亲缘关系较近的病毒。
自然界中往往是几种病毒复合侵染植物。
1990年Lawson将马铃薯病毒X和Y的外壳蛋白基因串联后转入马铃薯中,使转基因马铃薯表现出对这两种病毒的抗性。
而且抗性高于转单一基因的对照植株。
6.其它抗病毒策略
封闭和干扰病毒的移动蛋白。
病毒侵染植物体后,可以移动进行系统侵染,这种移动被认为是通过病毒编码的移动蛋白与胞间联丝相互作用,打开胞间联丝通道而进行的。
封闭和干扰移动蛋白就可以限制病毒的扩散侵染。
植物抗体基因策略。
1989年,Hiatt等将分泌特异性抗体的杂交瘤中得到的抗体的重链和轻链基因片段转入烟草,在转化株中表达了抗体的重链和轻链,通过表达重链和轻链的单株杂交,其后代体内得到完整的具有免疫活性的抗体。
目前许多抗体基因在转基因植物体中得到表达,并用于防治植物病毒病。
这表明动物的免疫系统同样能够在植物体内发挥抗病毒的作用。
缺陷RNA策略。
Marsh等1991年在原生质体体系中发现缺陷型的雀麦花叶病毒RNA
可以干扰野生病毒的增殖。
缺陷干扰RNA在动物病毒中普遍存在,然而植物病毒中仅存在于Tombvirus和Carmovirus两个病毒组中,能干扰辅助病毒的复制,增强或减弱辅助病毒的症状由缺陷干扰RNA介导的抗病性还在探索中。
另外植物体自身的一些抗病毒的基因也被克隆,并用于抗病毒植物基因工程中。
目前随着植物分子生物学,植物生理学,病毒分子生物学的发展以及基因工程技术的不断完善,将会出现更有效更安全的抗植物病毒的策略。