第三章 抗体
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免疫学导论于善谦 第3章 抗体
(2)亚类
IgG：IgG1, IgG2, IgG3, IgG4 IgA：IgA1, IgA2 IgM: IgM1, IgM2
2.型和亚型(根据轻链C区抗原特异性不同分型) (1)型 κ(kappa)型 λ(lambda)型 (2)亚型(λ链)： OZ(+) (或λ1) ：第190位(亮氨酸) OZ(-) (或λ2) ：第190位(精氨酸) Kern(+)(或λ3) ：第154位(甘氨酸) Kern(-)(或λ4) ：第154位(丝氨酸)
☆结合细胞表面的Fc受体发挥调理作用、 ADCC作用、介导I型超敏反应 IgG、IgM的Fc段与吞噬细胞表面的FcγR、 FcμR结合，增强其吞噬能力，通常将抗体促 进吞噬细胞吞噬功能的作用称为抗体的调理 作用 (opsonization)。
当IgG与带有相应抗原的靶细胞结合后， 其Fc段可与NK细胞、Mф细胞、单核细胞 的FcγR结合，促使细胞毒颗粒的释放，发 挥抗体依赖的细胞介导的细胞毒作用 (antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity，ADCC)，导致靶细胞溶解。
pathway）和以次黄嘌呤（H）和胸腺嘧啶脱氧核苷（T）为原料进行补救
（亦称替代或称中间）合成（salvage pathway）2个途径。由于氨基蝶呤可 阻碍起始合成途径，所以培养基中含有它时，细胞便只有补救合成途径可以
利用，如果培养基中额外提供或补充H和T，正常细胞就可以通过补救合成途
径合成DNA的核酸原料。用于细胞融合的骨髓瘤是的在遗传上缺失中间合成 途径的永生化细胞系，在HAT培养基中将失去增殖能力趋于死亡，而产生特 异性抗体的脾细胞是正常细胞，不能长期传代。融合后的杂交瘤细胞不仅具 有了永生化和抗体分泌的特性，同时还由于补充了替代合成途径，因此可以 在HAT筛选培养基中生存并增殖，未融合的脾细胞增殖数代后逐渐死亡，而 骨髓瘤细胞因补救合成途径缺陷而全部死亡。据此，把混存于细胞群中的杂 交瘤细胞与正常脾细胞和骨髓瘤细胞通过筛选培养进行自动选择。
第三章中和试验(Neutralization)及中和抗体
实验仪器和材料：
小鼠 L929 细胞 RPMI-1640 培养液 细胞因子--重组大鼠 TNF-α，产品标号：400-14，规格：20ug，生产商：Peprotech 中和抗体--兔抗大鼠 TNF-α，产品标号：500-P72，规格：50ug，生产商：Peprotech 培养板 离心机 培养箱
实验方法：
全国免费电话8008571184联科杭州057188226558联科上海02164511079联科北京01051805911联科苏州051268666623联科厦门059253222277联科广州02083506317联科武汉13995511341联科南京0258660929418抗体名称种属humanhuman产品编号500p195500p85规格50ug100ug50ug100ugbmp2bngf抗体名称种属rathuman产品编号500p180g500p21b规格50ug100ug50ug100ugil1alphail1beta联科生物技术有限公司wwwgotofcmcom全国免费电话8008571184全国免费电话8008571184联科杭州057188226558联科上海02164511079联科北京01051805911联科苏州051268666623联科厦门059253222277联科广州02083506317联科武汉13995511341联科南京0258660929419抗体名称cardiotrophin1humancntfcsfegfena78eotaxineotaxineotaxineotaxin2eotaxin3eotaxin3exodus2exodus2fgf9fgf10fgf17fgfacidicfgfbasicflt3ligandgcp2gcsfgcsfgmcsfgmcsfgromgsahumangrobmip2ratgrobetagrogammaifnalphaifngammaifngammaigfiigfiigfiiil1alphail1alpha种属产品编号500p101500p79500p44500p45500p91500p41500p67500p175g500p103g500m32500p156g500p109500p114500p66500p151g500p152500p17500p18500p42500p120500p43500p69500p33500p65500p92500p75500p104500p105500p32a500p32500p122g500p11500p157g500p12500p21a500p51a规格50ug100ug50ug100ug50ug100ug50ug100ug50ug100ug50ug100ug50ug100ug50ug100ug50ug1
4-1第三章第三节免疫球蛋白与抗体
单克隆抗体制备示意图
PEG:聚乙二醇
三、基因工程抗体
五类免疫球蛋白
二、免疫球蛋白的结构和功能
• 3．免疫球蛋白的水解片段
二、免疫球蛋白的结构和功能
（二）生物学功能（特异 性结合抗原）
• • • • 1．Fab段 （1）结合的部位：V区 （2）结合有特异性 （3）结合的力学特点：氢键、 静电、范德化力 • （4）可逆性 • （5）影响因素：pH值、温 度、电解质等 • （6）价位
二、免疫球蛋白的结构和功能
• ②抗体依赖的细胞介导的细胞毒作用（ADCC）
• antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity
二、免疫球蛋白的结构和功能
• ③介导Ⅰ型变态反应
二、免疫球蛋白的结构和功能
• （3）穿过胎盘与黏膜（IgG、SIgA）
三、各类免疫球蛋白的特性和功能
第三节 免疫球蛋白
第三节 免疫球蛋白
• 抗体（antibody，Ab）是B细胞接受抗原刺激后 增殖分化为浆细胞，由浆细胞产生的一类能与相 应抗原特异性结合的球蛋白。 • 免疫球蛋白（immunoglobulin，Ig）：具有抗体 活性或化学结构与抗体相似的球蛋白。 • 抗体都是免疫球蛋白，免疫球蛋白不一定都具有 抗体活性。 • Ig分泌型：存在血液、组织液中，抗体功能 • Ig膜型：构成B细胞膜上的抗原受体。
• • • •
2．Fc段： （1）激活补体 （2）结合细胞 （3）穿过胎盘和黏膜
二、免疫球蛋白的结构和功能
• • • • • （1）激活补体 能激活补体的免疫球蛋白： IgG1～IgG3、IgM的CH区——补体C1q IgA1、IgG4旁路 IgD、IgE不能
二、免疫球蛋白的结构和功能
PEG:聚乙二醇
三、基因工程抗体
五类免疫球蛋白
二、免疫球蛋白的结构和功能
• 3．免疫球蛋白的水解片段
二、免疫球蛋白的结构和功能
（二）生物学功能（特异 性结合抗原）
• • • • 1．Fab段 （1）结合的部位：V区 （2）结合有特异性 （3）结合的力学特点：氢键、 静电、范德化力 • （4）可逆性 • （5）影响因素：pH值、温 度、电解质等 • （6）价位
二、免疫球蛋白的结构和功能
• ②抗体依赖的细胞介导的细胞毒作用（ADCC）
• antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity
二、免疫球蛋白的结构和功能
• ③介导Ⅰ型变态反应
二、免疫球蛋白的结构和功能
• （3）穿过胎盘与黏膜（IgG、SIgA）
三、各类免疫球蛋白的特性和功能
第三节 免疫球蛋白
第三节 免疫球蛋白
• 抗体（antibody，Ab）是B细胞接受抗原刺激后 增殖分化为浆细胞，由浆细胞产生的一类能与相 应抗原特异性结合的球蛋白。 • 免疫球蛋白（immunoglobulin，Ig）：具有抗体 活性或化学结构与抗体相似的球蛋白。 • 抗体都是免疫球蛋白，免疫球蛋白不一定都具有 抗体活性。 • Ig分泌型：存在血液、组织液中，抗体功能 • Ig膜型：构成B细胞膜上的抗原受体。
• • • •
2．Fc段： （1）激活补体 （2）结合细胞 （3）穿过胎盘和黏膜
二、免疫球蛋白的结构和功能
• • • • • （1）激活补体 能激活补体的免疫球蛋白： IgG1～IgG3、IgM的CH区——补体C1q IgA1、IgG4旁路 IgD、IgE不能
二、免疫球蛋白的结构和功能
第3章 免疫球蛋白
三、免疫球蛋白的水解片断
1、水解作用
Ig 木瓜蛋白酶 2Fab＋Fc Ig 胃蛋白酶 F(ab´)2+pFc´
2、 水解意义
阐明Ig的结构和生物活性， 指导生物制品的生产和临床应用
第二节 五类免疫球蛋白 的特点和功能
一、Ig分类 1、类：根据同种系所有个体的Ig重链C区的抗原性 分为五类 IgM()、IgG()、IgA()、IgD()、IgE() 2、亚类：同一类Ig内的aa序列及二硫键的数目和位 置 IgG—IgG1、IgG2、IgG3和IgG4 ； IgA—IgA1和IgA2； IgM—IgM1和IgM2。 3、型：根据Ig轻链C区的抗原性分为链和链。 ：约2：1. 4、亚型： 链有多种亚型。（轻链抗原决定簇在CL区， 分κ 和λ 。1个Ig分子轻链只有一个型，不是κ 型就 是λ 型。）
10,530
320 X 10,530 = 3,369,600
The potential diversity generated by V(D)J recombination is virtually infinite. >Total lymphocytes in a human ~1012 >Genome size ~3X109 bp
四、选择性传递
（主要借助胎盘滋养层细胞表面的FcR进行的。 ）
五、具有免疫原性
1、同种型（isotype）
2、同种异型（allotype）
3、独特型（idiotype）
将Ig作为抗原在异种、同种异体或自身体 内进行免疫，均能诱导机体发生免疫应答， 产生相应的抗体，这些抗体可用血清学方 法进行检测，因此称为Ig的血清型
（二）重链类型转换 （成熟B细胞，抗原刺激后） 即class switch，又称S-S转换。
第03章抗体制备
3.刺激淋巴细胞的增殖分化，增强和扩大免疫应答。
第三节 多克隆抗体的制备及应用
一、免疫动物的选择
抗原与动物种属之间的关系 动物的个体因素 抗原的性质与动物种类 抗体的用量和要求
IgY有如下几方面的优点
无需采血，只需收集免疫母禽产下的禽蛋即可提取 抗体；
使用少量的抗原免疫禽类既可获得大量的质量均一 的特异性IgY；
噬菌体抗体库主要工作流程
从外周血或其他免疫组织器官克隆出全套抗体基因菌体表达，构建全部Ig cDNA的噬菌体抗体库。
筛选含有目的Ig表达的噬菌体。 建立目的Ig表达的噬菌体抗体库。 扩增制备噬菌体抗体。 纯化抗体。
噬菌体抗体库技术的主要特点
IgY抗体耐酸、耐热，经巴氏消毒后活性依然存在， 因此容易保存和运输；
由于种系发生距离相差很大，禽类IgY与哺乳动物免 疫球蛋白之间不会发生交叉反应；
IgY不激活哺乳动物的补体系统，不与类风湿因子或 Fc受体相结合，避免在免疫检测过程中产生假阴性或假阳 性结果；
IgY对哺乳动物抗原的敏感性高。
二、抗原剂量的选择
四、采血方法
颈动脉放血法 静脉采血法 心脏采血法
五、抗血清鉴定及保存
抗体效价和纯度的测定 抗体特异性的鉴定 抗体亲和力的鉴定 抗血清的保存
六、抗体的纯化
IgG类抗体的纯化：盐析法粗提γ-球蛋白、离子交换 层析提取IgG、亲和层析法。
特异性抗体的纯化：亲和层析法、吸附法
七、多克隆抗体的特性和应用
用于某些疾病的紧急预防，例如破伤风和Rh不合的 新生儿溶血症等。
用于某些感染性疾病和移植排斥反应等的治疗。 应用于某些疾病的临床检验。 在科研中常用于免疫印迹和免疫组化等。
第四节 单克隆抗体的制备及应用
第三节 多克隆抗体的制备及应用
一、免疫动物的选择
抗原与动物种属之间的关系 动物的个体因素 抗原的性质与动物种类 抗体的用量和要求
IgY有如下几方面的优点
无需采血，只需收集免疫母禽产下的禽蛋即可提取 抗体；
使用少量的抗原免疫禽类既可获得大量的质量均一 的特异性IgY；
噬菌体抗体库主要工作流程
从外周血或其他免疫组织器官克隆出全套抗体基因菌体表达，构建全部Ig cDNA的噬菌体抗体库。
筛选含有目的Ig表达的噬菌体。 建立目的Ig表达的噬菌体抗体库。 扩增制备噬菌体抗体。 纯化抗体。
噬菌体抗体库技术的主要特点
IgY抗体耐酸、耐热，经巴氏消毒后活性依然存在， 因此容易保存和运输；
由于种系发生距离相差很大，禽类IgY与哺乳动物免 疫球蛋白之间不会发生交叉反应；
IgY不激活哺乳动物的补体系统，不与类风湿因子或 Fc受体相结合，避免在免疫检测过程中产生假阴性或假阳 性结果；
IgY对哺乳动物抗原的敏感性高。
二、抗原剂量的选择
四、采血方法
颈动脉放血法 静脉采血法 心脏采血法
五、抗血清鉴定及保存
抗体效价和纯度的测定 抗体特异性的鉴定 抗体亲和力的鉴定 抗血清的保存
六、抗体的纯化
IgG类抗体的纯化：盐析法粗提γ-球蛋白、离子交换 层析提取IgG、亲和层析法。
特异性抗体的纯化：亲和层析法、吸附法
七、多克隆抗体的特性和应用
用于某些疾病的紧急预防，例如破伤风和Rh不合的 新生儿溶血症等。
用于某些感染性疾病和移植排斥反应等的治疗。 应用于某些疾病的临床检验。 在科研中常用于免疫印迹和免疫组化等。
第四节 单克隆抗体的制备及应用
南开大学免疫学讲义-第三章 抗体
第三章免疫球蛋白分子—抗体第一节抗体的发展及其特征一、抗体的发现血清中存在一种能特异性中和外毒素的组分称为抗毒素，使细菌发生特异性凝集的组分称之为凝集素。
其后将其称为抗体（antibody，Ab），将能刺激机体产生抗体的物质称为抗原（antigen）。
二、抗体的理化性质40年代初期Tiselius和Kabat用肺炎球菌多糖免疫家兔，证实了抗体活性与血清丙种球蛋白组分相关。
图1. 兔血清电泳分离图2.不同类免疫球蛋白的电泳分离离心常数7Sγ(16, IgG) ; 19S,β2(β2M,90,IgM); β2A(IgA)三、抗体的生物学活性1．抗体与抗原的特异性结合。
2．抗体与补体的结合。
3．抗体的调理作用。
第二节免疫球蛋白的分子结构与功能一、免疫球蛋白的基本结构Porter对血清IgG抗体的研究证明，Ig分子基本结构是由四个肽链组成的，二条较小的轻链和二条较的重链，轻链与重链是由二硫键连接形成，分为氨基端（N端），羧基端（C端）。
（一）轻链和重链1．轻链（light chain，L链）214氨基酸残基组成，通常不含碳水化合物，分子量为24KD，有两个由链内二硫键组成的环肽，可分为：Kappa（κ）与lambda（λ）2个亚型。
2．重链（heavy chain，H链）450-550氨基酸残基组成，分子量55或75KD，含糖数量不同，4-5个链内二硫键，可分为5类，μ、γ、α、δ、ε链，不同的H链与L链（κ或λ）组成完整的Ig分子。
分别称为：IgM，IgG，IgA，IgD和IgE。
（二）可变区和恒定区1．可变区（Variable region，V区）L链N端1/2处（V L）108-111个氨基酸残基，H链N端1/5-1/4处（V H）118个氨基酸残基，V区有一个肽环65-75个氨基酸残基。
高变区（hypervariable region, HVR）可变区骨架区（framework region, FR）V L的HVR在24-34，50-56，89-97氨基酸位置。
第三章抗体习题
免疫球蛋白（仅掌握单选题、填空题及标※的名词解释和问答题即可，其余内容为了解内容）※名词解释：1．抗体(antibody)2．Fab(fragment antigen binding)3．Fc(fragment crytallizable)4．免疫球蛋白(Immunoglobulin Ig)5．超变区(hypervariable region，HVR)6．可变区(variable region，V区)7．单克隆抗体（Monoclonal antibody， mAb）8．ADCC(Antibody –dependent cell-mediatedcytotoxicity)9．调理作用(opsonization)10．J链（joining chain）11．分泌片（secretory piece）12．Ig功能区（Ig domain）13．CDR(complementary-determining region)问答题※1．简述抗体与免疫球蛋白的区别和联系。
※2．试述免疫球蛋白的主要生物学功能。
※3．简述免疫球蛋白的结构、功能区及其功能。
4．简述单克隆抗体技术的基本原理。
参考答案名词解释1．抗体(Antibody) ：是B 细胞特异性识别Ag后，增殖分化成为浆细胞，所合成分泌的一类能与相应抗原特异性结合的、具有免疫功能的球蛋白。
2．Fab(Fragment antigen binding)：即抗原结合片段，每个Fab段由一条完整的轻链和重链的VH和CH1功能区构成，可以与抗原表位发生特异性结合。
3．Fc片段(fragment crytallizable)：即可结晶片段，相当于IgG的CH2和CH3功能区，无抗原结合活性，是抗体分子与效应分子和细胞相互作用的部位。
4. 免疫球蛋白(Immunoglobulin，Ig)：是指具有抗体活性或化学结构与抗体相似的球蛋白。
可分为分泌型和膜型两类。
5．高变区（hypervariable region ，HVR）：在Ig分子VL和VH内，某些区域的氨基酸组成、排列顺序与构型更易变化，这些区域为超变区。
免疫学第三章抗体
❖ 同种型特异性因种而 异，如人类有五类 Ig、大鼠有七类Ig、 家兔有四类 Ig。
IgG1 (kappa)
IgM (kappa)
（2）同种异型（allotype）
❖ 同种系的不同个体之 间,同一类、亚类、型、 亚型的免疫球蛋白， 在结构上可能会有一 个或数个氨基酸的差 异, 称为同种异型。
❖ 由同一基因座位上不 同等位基因编码。
排列顺序以及结构是随 抗体分子的特异性不同而 有所变化，决定了抗体的 特异性。
重链的可变区和恒定区
❖ 恒定区(constant region， C区)：可变区外其余 的氨基酸分子。(占重 链的3/4)。
数量、种类、排列 顺序及含糖量都比较 稳定，称为稳(恒)定 区。
轻链的可变区和恒定区
❖ 可变区(V区)：氨基
❖ 免疫球蛋白的存在形式：
免疫球蛋白除分布于体液中之外，还可 存在于B细胞膜上。
❖ 膜型（membrane immunoglobulin, mIg）
--- B细胞膜上的抗原受体；
❖ 分泌型(secreted immunoglobulin, sIg)
---分泌进入体液, 介导体液免疫应答。
2、免疫球蛋白的基本结构
即抗原结合片段。
Fc 片段（fragment crystallizable，Fc）：在
低温或低离子强度下可形成结晶，故称为可 结晶片段。
❖ Fab 片段：
每一个含有一条 完整的 L 链和 H 链近 N 端侧 的 1／2 。
❖ Fc 片段：
含有两条 H 链 羧基端（C 端） 的一半。
❖ Fab 片段：
❖ 五 类 免 疫 球 蛋 白 IgG ， IgM ， IgA ， IgE ， IgD的单体分子结构都是相似的，即是由 两条相同 H 链和两条相同 L 链共四条肽 链构成的“Y”字形的分子。
IgG1 (kappa)
IgM (kappa)
（2）同种异型（allotype）
❖ 同种系的不同个体之 间,同一类、亚类、型、 亚型的免疫球蛋白， 在结构上可能会有一 个或数个氨基酸的差 异, 称为同种异型。
❖ 由同一基因座位上不 同等位基因编码。
排列顺序以及结构是随 抗体分子的特异性不同而 有所变化，决定了抗体的 特异性。
重链的可变区和恒定区
❖ 恒定区(constant region， C区)：可变区外其余 的氨基酸分子。(占重 链的3/4)。
数量、种类、排列 顺序及含糖量都比较 稳定，称为稳(恒)定 区。
轻链的可变区和恒定区
❖ 可变区(V区)：氨基
❖ 免疫球蛋白的存在形式：
免疫球蛋白除分布于体液中之外，还可 存在于B细胞膜上。
❖ 膜型（membrane immunoglobulin, mIg）
--- B细胞膜上的抗原受体；
❖ 分泌型(secreted immunoglobulin, sIg)
---分泌进入体液, 介导体液免疫应答。
2、免疫球蛋白的基本结构
即抗原结合片段。
Fc 片段（fragment crystallizable，Fc）：在
低温或低离子强度下可形成结晶，故称为可 结晶片段。
❖ Fab 片段：
每一个含有一条 完整的 L 链和 H 链近 N 端侧 的 1／2 。
❖ Fc 片段：
含有两条 H 链 羧基端（C 端） 的一半。
❖ Fab 片段：
❖ 五 类 免 疫 球 蛋 白 IgG ， IgM ， IgA ， IgE ， IgD的单体分子结构都是相似的，即是由 两条相同 H 链和两条相同 L 链共四条肽 链构成的“Y”字形的分子。
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2.分泌片（Secretory Piece， SP) （1）来源：黏膜上皮细胞合成 分泌。
SIgA
（2）化学组成：糖肽链。
（3）作用：只存在于粘膜分泌 型IgA中 a.帮助SIgA穿越黏膜 b.保护SIgA免受蛋白酶的水 解作用
J chain SP
其他成分
J链（jioning chain ） 分泌片（secretory piece, SP） 含糖 粘膜上皮细胞 使IgA分泌到粘膜表面发 挥免疫作用；保护SIgA 铰链区
VL
CL
CH1
CL
CH2
CH3 COO－
（一）H链与L链
H链：约450~550个氨基酸
根据H链结构和抗原性分为5类：
IgG IgM IgA IgD IgE
L链：约214个氨基酸
根据L链结构和抗原性分为2种 κ:λ ≈2:1
（二）可变区和恒定区Fra bibliotek可变区：抗体分子中轻链
和重链靠近N端的氨基酸序 列变化较大，形成的结构域 称为可变区（V区），分别 占重链和轻链的1/4、1/2。 重链和轻链的V区分别称为 VH和VL.
叠成数个环形结构。每个结构域一般具有相应
的功能。
VL+VH功能区： 抗原结合部位
V区
CL和CH 区：具有同种 异型抗体的遗传标记。 CH2区：IgG的补体结 合点和通过胎盘的部位 CH3功能区：是Ig与 其Fc受体结合的部位
C区
(固定细胞）
第二节 抗体主要生物学功能
一、特异性抗原结合
V区与抗原表位特异性结合 1、中和毒素 2、结合病毒 3、阻止细菌粘附
骨架区：V区中CDR之外区域的氨基酸组
成和排列顺序相对变化不大，称为骨架区 (FR)．VH或VL各有4个骨架区，分别用 FR1、FR2、FR3和FR4表示。
V区
FR1 CDR1 FR2 CDR2 FR3 CDR3 FR4
表位
抗 原
抗体 CDR
Ag
（三）铰链区
铰链区
位于CH1与CH2之间， 含有丰富的脯氨酸，因 此易伸展弯曲，能改变 两个结合抗原的Y形臂 之间的距离，有利于两 臂同时结合两个抗原表 位。而且易被木瓜蛋白 酶、胃蛋白酶等水解， 产生不同的水解片段。
交叉反应，制备成本低。
制备原理：杂交瘤细胞和单克隆抗体技术。
应用：作为诊断试剂用于血清学检查；治疗自身
免疫病和抑制移植排斥反应；治疗肿瘤的生物导弹。
多克隆抗体与单克隆抗体的比较
多克隆抗体 来源 动物免疫血清、恢复期病人血 清或免疫接种人群 单克隆抗体 多为鼠源性
特点 来源广泛、制备容易
组成 针对不同抗原表位的抗体的混 合物 应用 疾病的被动免疫治疗
第三章 抗体
课程目标
1.掌握抗体和免疫球蛋白的概念，免疫球蛋白 的结构及其与功能的关系；
2.掌握五类免疫球蛋白的特性和功能特点； 3.掌握抗体的生物学活性； 4.了解单克隆抗体；
抗体的发现
1890年，Behring 和北里在德 国Koch实验室从豚鼠体内发现了 第一种抗体：白喉抗毒素，从而 挽救了成千上万的白喉患儿，死 亡率从60%降到26%。
（三）介导I型超敏反应
四、穿过胎盘和粘膜
IgG placenta fetus, SIgA milk baby
IgA胞吞转运过程
二、 C区的功能
1.激活补体系统 Ab + Ag → 补体经典途径 2.介导免疫细胞活性 (1)调理作用(opsonization)：IgG + 抗原(颗粒性 ) → FcγR（单核、巨噬细胞及中性粒细胞） →促吞噬细胞吞噬； (2)ADCC：IgG + 抗原(靶细胞) → Fc γR（NK 细 胞）→ 杀伤靶细胞； (3)介导超敏反应：Ⅰ型、Ⅱ型和Ⅲ型超敏反应。 3.穿越胎盘和粘膜
Ag
抗原 带有多个表位 刺激小鼠
针对不同表位 的B细胞
克隆增殖
多种抗体的混合物
（多克隆抗体）
二、单克隆抗体（monoclonal antibody，mAb） Kohler 和 Milstein 于1975年建立体外细胞 融合技术，获得针对单一抗原表位的高特异性抗 体。
Georeges Kohler (1946-1995)
纯度高、特异性强、效价高、少 或无血清交叉反应、制备成本低
针对单一表位，结构和组成高度 均一，抗原特异性及同种型一致 广泛用于疾病诊断、特异性抗原 或蛋白的检测和鉴定、疾病的被 动免疫治疗和生物导向药物制备 人体应用后可导致人鼠抗体反应
缺点 特异性不高、易发生交叉反应 ，不易大量制备
三、基因工程抗体 (genetic engineering
获1901年的第一届诺贝尔奖。
20世纪获得诺贝尔医学生理学奖的免疫学家
年代 学者姓名 1901 E.A.Behring 1908 P.Ehrlich 1960 F.M.Burnet 1972 G.M.Edelman 1984 N.Jerne G.Kohler stein 1987 Tonegawa 国家 德国 德国 澳大利亚 美国 丹麦 德国 阿根廷 日本 获奖成就 发现抗毒素，开创免疫血清疗法 提出体液免疫理论和抗体生成的侧链学说 提出抗体生成的克隆选择学说 阐明抗体的本质 提出天然抗体选择学说和免疫网络学说 建立杂交瘤技术制备单克隆抗体 单克隆抗体技术及免疫球蛋白基因表达的遗传调控 阐明抗体多样性的遗传基础
又称调理素作用，是指抗体、补体与吞 噬细胞表面结合，促进吞噬细胞吞噬细 菌等颗粒性抗原的作用。 抗体的调理作用主要是通过IgM， IgG(IgG1 和 IgG3) 的 Fc 段与中性粒细 胞、巨噬细胞表面的 IgMFcR ，IgGFcR 结合，从而增强其吞噬作用的。
（二）ADCC效应
ADCC 效应中文名称是“抗体依赖细胞介导的 细胞毒性作用”(antibody-dependent cellmediated cytotoxicity)。是指表达Fc受体的细 胞通过与抗体的Fc段结合直接杀伤被抗体结合 的靶细胞。 当IgG抗体通过Fab段与靶细胞表面抗原决定 簇特异性结合后，其Fc段可与NK细胞表面 FcγRIII结合，从而使NK细胞对靶细胞产生非 特异性杀伤作用，即ADCC作用。
四、IgD
单体，血清含量低，B细胞成熟标志， 在B细胞表面起抗原识别受体作用 (mIgD)。
五、IgE
单体，无铰链区，有CH4区。 血清中含量极少，为亲细胞抗体，与 嗜碱性粒细胞、肥大细胞上的IgEFcRI 结合，介导I型超敏反应。 介导ADCC效应、抗寄生虫感染等。
mIgM
免疫球蛋白的基本结构
“Y”型，四肽链 重链 （5种: 、、、、） 轻链 （2种: 、） 可变区 （V区）
高变区:（HVR，3个，又称 CDR 互补决定区） 骨架区: FR（4个）
恒定区 （C区） 铰链区
二、抗体的其他成分
1. J链（joining chain）
(1) 化学本质：为富含半胱氨酸的多肽链，浆细胞 合成，将单体Ig分子连接成多聚体。 (2)连接二聚体IgA和五聚体IgM。
所有的Ab都是Ig 并非所有的Ig都具有
Ab活性
第一节 抗体的结构
一、基本结构
“Y”字型的四肽链,两条 完全相同的重链(H)和 两条完全相同的轻链(L) 二硫键连接而成。
两对：一对重链(H) 一对轻链(L) 两端：氨基端(N) 羧基端(C) 两区：可变区(V) 恒定区(C)
VL
VH
-NH3+ VH
多肽链 合成细胞 主要功能
富含半胱氨酸 浆细胞 将单体Ig分子连接为 多聚体
三、抗体分子的水解片段
木瓜蛋白酶（papain）水解片段
水解部位：重链链间二硫键近N端 水解片段：2个Fab片段：结合抗原（单价） 1个Fc片段：结合补体；固定细胞；通
过胎盘 1价
木瓜蛋白酶
Fab：抗原结合片段 Fc：可结晶片段
R.R.Porter
英国
阐明抗体的化学结构
抗体(antibody，Ab)： B细胞或记忆B细胞接受抗原刺激增殖 为浆细胞，由浆细胞合成分泌的，能 与相应的抗原发生特异性结合的免疫 球蛋白。
免疫球蛋白（Ig）：具有抗体活性或化学 结构与抗体相似的球蛋白
免疫球蛋白的分类： 分泌型（SIg） 主要存在于血液及组织液中 膜型（mIg） 构成B细胞膜上的抗原受体
恒定区：靠近C端的氨基
酸序列相对恒定的区域称为 恒定区（C区）.重链和轻链 的C区分别称为CH和CL.
高变区（hypervarible region，HVR）或互补决 定区( complementary determining region, CDR)
VH和VL各有3个区域的氨 基酸组成和排列顺序高度 可变，共同组成Ig的抗原 结合部位，识别并结合抗 原。
微免教研室制作 44
第三节 各类免疫球蛋白的特征与作用
一、IgG
特性：
(主力部队)
单体，4个亚类； 再次应答的主要Ig； 血清中含量最高，约占血清总Ig的75%； 出生后3个月开始合成，分布于血液及 组织液中，半衰期为23天。
IgG的功能
1、具有抗菌、抗病毒、抗毒素作用，起主力免疫 作用。 2、激活补体 IgG1~3→激活→经典途径→溶菌、溶细胞 IgG4→激活→旁路途径→溶菌、溶细胞 3、通过胎盘（唯一） 4、结合细胞，介导调理作用和ADCC效应 5、某些自身抗体IgG可引起II、III型超敏反应
mIgD
未成熟B细胞
成熟B细胞
活化或记忆B细胞
B细胞分化发育过程中mIgD的表达
第四节