安捷伦110高效液相色谱仪验证记录
Agilent1100series安捷伦高效液相色谱仪操作规程
Agilent1100series安捷伦⾼效液相⾊谱仪操作规程Agilent1100⾼效液相⾊谱仪操作规程1.仪器组成及开机1.1仪器组成：Agilent1100⾼效液相⾊谱系统主要由⼯作站、在线脱⽓机、柱温箱、输液泵、⾃动进样器、检测器等部件组成。
1.2开机：1.2.1接通电源，打开计算机及⼯作站其它各部件开关，约30秒钟后，各部件进⼊待机状态，指⽰灯为黄⾊或⽆⾊。
1.2.2打开HP ChemStations,进⼊Instrument 1 online状态，约30秒钟后，计算机进⼊⼯作站的操作页⾯。
该页⾯主要由以下⼏部分组成：最上⽅为命令栏，依次为File,Run Control,Instrument等；命令栏下⽅为快捷操作图标，由多个样品连续进⾏分析、单个样品进样分析、调⽤⽂件、保存⽂件等；左边为样品信息栏；中部为⼯作站各部件的⼯作流程⽰意图，依次为进样器→输液泵→柱温箱→检测器→数据处理→报告；中下部为动态监测信号；右下部为⾊谱⼯作参数：进样体积、流速、分析停⽌时间、流动相⽐例、柱温、检测波长等。
2.⾊谱条件的设定(⾊谱条件的设定可以通过下列⼏种⽅法实现2.1直接设定在操作页⾯的右下部⼀⾊谱⼯作参数中设定。
将⿏标移移⾄要设定的参数如进样体积、流速、分析停⽌时间、流动相⽐例、柱温、检测波长等，单击⼀下，即可显⽰该参数的设置页⾯，键⼊设定值后，单击“OK”，即完成。
2.2 调⽤已设置好的⽂件在命令栏“Method”下，选择“Load Method”,或直接单击快捷键操作的“Load Method”图标，选定⽂件名，单击“OK”，此时，⼯作站即调⽤所选⽤⽂件中设定的参数。
如欲进⾏修改，则可同2.1项下，在⾊谱⼯作参数中作修改；亦可在命令栏“Method”下，选择“Edit Entire Method”，在每个页⾯中键⼊设定值，单击“OK”。
即完成。
2.3 编辑新⽂件先在命令栏“Method”下，选择“New Method”, 之后再在命令栏“Method”下，选择“Edit Entire Method”，在每个页⾯中键⼊设定值，完成后，Save Method”, 先在命令栏“Method”下选择“Save Method”，给新⽂件命名，单击“OK”。
安捷伦高效液相色谱操作程序(校正曲线制作和样品测定)
安捷伦高效液相色谱操作程序（校正曲线制作和样品测定）安捷伦高效液相色谱操作程序(校正曲线制作和样品测定) 1. 将手动进样阀放置至Load状态，微量注射器吸取所需量的溶液后插入手动进样阀的进样口。
2. 切换手动进样阀，由Load状态改变为Inject状态进样。
3. 当实时色谱图中的色谱峰完全出现后，点击RunControl，在下拉菜单中点击Stop Run/Inject/Sequence，结束一次进样的测定。
打印色谱图。
4. 按1~3的步骤，注射浓度不同的标准溶液获得相应的色谱图。
5. 点击View，下拉后点击Data Analysis。
6. 点击图标，将标准定量方法确定为外标法ESTD。
7. 点击欲进行校正曲线制作所需色谱图的第一张图号。
8. 点击Calibration，下拉后点击Add Peaks。
9. 在Default Amount框中输入相应的含量(浓度)后点击OK。
10. 将不准备定量的信号峰浓度均改为0。
11. 点击Calibration Table中的OK，从表格中删去这些峰信号。
返回CalibrationTable，进行待测峰确认。
12. 在Calibration Table框中的Compound下方输入化合物的英文名称，在RT下方根据色谱图中的保留时间数据输入相应的值。
13. 点击欲进行校正曲线制作所需色谱图的第二张图号。
14. 点击Calibration，下拉后点击Add Levels，在Default Amount框中输入相应的含量(浓度)后点击OK。
15. 重复8.和9.的步骤，直到输入完成所需制作校正曲线的相应色谱图数据，完成多点校正曲线的制作。
点击Calibration Table框中的OK，存储校正曲线数据。
16. 按1~3的步骤，注射样品溶液，获得的色谱图由校正曲线自动给出相应成分的含量。
打印色谱图。
安捷伦高效液相色谱仪操作流程及注意事项
安捷伦高效液相色谱仪操作流程及注意事项下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。
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安捷伦高效液相色谱仪最新验证方案
Agilent1200高效液相色谱仪验证方案类别：编号：部门：验证委员会页码：共16页，第1页版次：☐新订☐替代：起草部门：年月日审核：年月日审阅会签：（验证委员会）批准：年月日实施日期：年月日复印数：批准：分发至：目录1．概述 (3)2．验证目的 (3)3．验证依据及验证范围 (3)4．验证工作小组 (3)5．验证方案审批 (3)5.1验证方案起草 (3)5.2验证方案会签 (3)5.3验证方案批准 (3)5.4验证方案实施 (3)6．验证的准备 (4)6.1文件资料的确认 (4)6.2售后服务 (4)6.3关键性仪表及消耗性备品备件 (4)6.4安装检查 (4)6.5计算机的安装情况检查 (5)6.6安装确认结论及批准 (5)7．安装验证内容 (5)7.1评价设备性能、质量、适用性是否符合采购质量标准要求 (5)7.1.1评价仪器的安装条件是否符合GMP及供应商提议的要求 (5)7.1.2起草标准操作规程 (5)7.1.3仪器校正 (5)7.2 运行确认（也即功能试验） (5)7.2.1 测试项目和认可标准 (5)7.2.2 验证所需的材料 (5)7.2.2.1 玻璃仪器设备 (5)7.2.2.2 试剂、标准溶液 (5)7.2.2.3 其它辅助设备 (5)7.2.3 软件系统安全性确认(必要时) (5)7.2.4 运行确认的实施 (6)7.2.5 运行确认评价及结论 (7)8.性能确认(适用性预试验) (7)9.拟订再验证项目及周期 (7)10.验证结论 (7)1.概述高效液相色谱法系采用高压输液泵将规定的流动相泵入装有填充剂的色谱柱，对供试品进行分离测定的色谱法。
注入供试品，由流动相带入柱内，各组分在柱内被分离，并依次进入检测器，由积分仪或数据处理系统记录和处理色谱信号，得到测定结果。
由于应用了各种特性的微粒填料和加压的液体流动相，本法具有分离性能高、分析速度快的特点。
高效液相色谱仪是根据质量控制的目的和要求，在调研的基础上，公司于年月购置的精密仪器，其生产厂为，主要用于样品的分析测试。
安捷伦高效液相色谱仪的规范操作
安捷伦高效液相色谱仪的规范操作安捷伦高效液相色谱仪 (Agilent High Performance Liquid Chromatography，简称HPLC) 是一种常用的色谱分析仪器，广泛应用于化学、生物、药学等领域中的分析和研究工作。
为了确保正确、可靠地操作 HPLC 仪器，以下是一些规范操作的步骤和注意事项。
1.仪器准备-开启仪器电源，并等待仪器自检完成。
-检查仪器的梯度系统、进样系统、柱温控制系统、检测系统等是否正常。
-检查注射器、柱、检测器等是否清洁干净，并按需更换柱筒。
2.试剂准备-准备所需的溶剂、标准品和样品，并确保其纯度和浓度符合实验要求。
-制备规范的稀释液或内标溶液，以便进行质量控制和校准。
3.方法设置-设置流速、梯度、柱温、检测器波长等实验参数。
-设定样品进样量、进样方式和柱温控制方式。
-根据实验要求选择合适的检测器（如紫外检测器、荧光检测器等）。
4.柱的装置和平衡-根据实验需求选取合适的柱，并将柱安装在柱底座上。
-将导线连接到柱温控制系统，并设置柱温。
-选择适当的流动相溶剂，用它们预平衡柱，以确保柱达到稳定状态。
5.校正与质控-使用标准品进行系统灵敏度和线性范围的校正。
-定期进行质控分析，以检验仪器的准确性和精确性。
-根据需要，进行合适的质量控制和校正操作。
6.样品进样-根据实验要求选择合适的进样方式（如自动进样器、手动进样器等）。
-通过进样器吸取样品，并确保进样量准确无误。
-进行一定的进样准备，如过滤、稀释等。
7.开始分析-确保所有仪器参数正确设置，样品进样准备完毕，并进行柱的平衡。
-点击“开始”按钮，启动分析程序。
-监测分离曲线或结果，确保分析结果的准确性与可靠性。
8.数据分析与存储-持续监测和记录实时分析结果。
-对结果进行后处理和数据分析，如绘制色谱图、峰面积计算等。
-存储数据，以备后续分析和查阅。
9.仪器维护与清洁-使用完毕后，关闭仪器并断开电源。
-清洗注射器和柱等关键部位，以防止残留的样品引起交叉污染。
高效液相色谱法测定盐酸利多卡因注射液的含量
高效液相色谱法测定盐酸利多卡因注射液的含量作者：刘伟霞来源：《科学与财富》2015年第02期摘要：建立反相高效液相色谱法测定盐酸利多卡因注射液中盐酸利多卡因的含量。
方法：采用安捷伦 C18色谱柱（218mm×4.6mm，5μm），甲醇-乙腈-磷酸盐缓冲液（20：20：60，pH8.0），检测波长为254nm，流速为1.0ml/min，柱温为30℃。
盐酸利多卡因在0.128～0.64mg·mL-1范围内呈良好的线性关系（r=0.99997）。
盐酸利多卡因平均回收率分别为99.5%。
结论：本法简便、准确，可用于盐酸利多卡因注射液中盐酸利多卡因的含量测定。
关键词：盐酸利多卡因注射液；含量；测定盐酸利多卡因注射液（LidocaineHydrochlorideInjECTion）为无色的澄明液体。
盐酸利多卡因注射液为酰胺类局麻药及抗心律失常药。
盐酸利多卡因注射液主要用于硬膜外麻醉、浸润麻醉、表面麻醉及神经传导阻滞。
盐酸利多卡因注射液可用于急性心肌梗塞后室性早搏和室性心动过速及心脏外科手术及心导管引起的室性心律失常。
主要生产盐酸利多卡因注射液的厂家有济南永宁制药股份有限公司、上海旭东海普药业有限公司、西安秦巴药业有限公司、湖南古汉集团股份有限公司、西安长城制药厂、山东华鲁制药有限公司、湖北大华制药有限公司、浙江诚意药业有限公司等。
本实验采用高效液相色谱法对盐酸利多卡因注射液中的盐酸利多卡因的进行了含量测定。
1 仪器与试药1.1 仪器：安捷伦1100高效液相色谱仪；安捷伦1100紫外检测器；Alliance柱温箱；HU 数控系列超声波清洗器（天津市恒奥科技发展有限公司）；HH-4A数显电子恒温搅拌水浴锅（江苏省金坛市宏华仪器厂）；瑞士梅特勒-托利多MS精密天平（梅特勒-托利多中国公司）；ELGA超纯水器（上海澜锐仪器科技有限公司）；TU-1901双光束紫外可见分光光度计（北京普析通用仪器有限责任公司）。
安捷伦液相色谱上的化合物匹配结果
安捷伦液相色谱上的化合物匹配结果
安捷伦液相色谱系统通过高效液相色谱法（HPLC）对化合物进行分离和分析。
当化合物在液相色谱仪上运行时，它们会根据在固定相和流动相之间的分配系数差异进行分离。
分离后的化合物依次通过检测器，如紫外可见光检测器、荧光检测器或质谱检测器等，产生相应的信号。
为了确定这些信号所代表的化合物，通常需要进行化合物匹配。
化合物匹配是将检测到的信号与已知化合物的标准谱图或数据库中的谱图进行比较，以确定未知化合物的身份。
在安捷伦液相色谱系统中，化合物匹配可以通过使用安捷伦提供的软件工具来完成。
这些软件工具可以帮助用户将检测到的信号与标准谱图或数据库中的谱图进行比对，从而确定未知化合物的身份。
匹配结果通常以列表的形式呈现，包括化合物的名称、保留时间、峰面积等信息。
用户可以根据匹配结果对化合物进行定性和定量分析，了解样品中化合物的种类和浓度。
高效液相色谱检验记录
℃
） * cm
粒径：
预柱：
um
□紫外检测器： □流动相组成： □恒比例 □梯度洗脱 □流速： mL/min
□其他检测器：
进样量：
uL
其他说明：
t 5.54 * R 理论板数（n） ：n= Wh 2
系统 适用性
（□符合 □不符合）
2(t R1 t R 2 ) 分离度（R） ：R= W W 1 2
（□符合 □不符合）
( X n X ) n 1 X
重复性 RSD：RSD=
（□符合 □不符合） 拖尾因子（T） ：T=
W0.05h = 2d 1
（□符合 □不符合） 分析方法 □外标法
□其他（ □内标法 ） □归一化法
对照品名称： 称量数据： 对照品 溶液 的制备 制备过程：
来源：
批号：
称量数据： 供试品 溶液 的制备 制备过程:
计算公式 实测结果 标准规定 结 论
注：如部分参数未用到，请在相应栏目内划“/”
ห้องสมุดไป่ตู้
检验人： 日 期：
复核人： 日 期：
高效液相色谱检验记录
温度（℃） ： 相对湿度（%） ：
产品名称 检验日期 □鉴别 检验项目 □含量测定 检验依据 仪器型号 天平型号 □中国药典 2010 年版
批
号
物料编码 □检查（项目名称： □其他 □其他 ）
编 编 色谱柱固定相类型：
号 号
色谱条件 □C18□C8□TMS□CN□NH2□Si□其他（
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附录1文件检查
目的：确认文件资料已经完备，并且是当前最新版本。
测试方法：检查开箱单、使用说明书、标准操作规程及其他相关资料。
可接受标准：文件资料已经完备，并且是最终批准版本。
将检查结果记录在《文件检查表》内。
文件检查表
附录2培训检查和签字确认
目的：确认参与验证的人员都经过此方案的培训，和识别所有签字和草签本方案任何数据表的人员。
测试方法：检查培训记录。
可接受标准：参与验证的人员进行此方案前已经完成此方案的培训。
将检查结果记录在《培训检查和签字确认表》内。
培训检查和签字确认表
附录3确认用仪器仪表校验检查
目的：确认测试用仪器、仪表是否已经校准并且在有效期内。
测试方法：检查仪表参数和校准报告。
可接受标准：测试用仪器、仪表已经校准并且在校准有效期内。
将检查结果记录在《确认用仪器仪表校验检查表》内。
确认用仪器仪表校验检查表
附录4设备基本信息确认
目的：确认铭牌信息与说明书一致。
测试方法：根据说明书和合同的信息，现场核对设备铭牌信息。
接受标准：设备铭牌的基本信息与说明书一致。
将检查结果记录在《设备基本信息确认表》内。
设备基本信息确认表
目的：确认设备的安装是否符合原设计的条件。
测试方法：室内使用温湿度计测量，目测地面，检查室内空气。
接受标准：室内温度应在5～40℃；相对湿度≦85%；地面平滑，不易起尘；室内无腐蚀性气体存在或产生。
将检查结果记录在附录5《外部环境确认》内
外部环境确认表
目的：确认设备各部件的型号，保证与其订单和装箱单所描述的一致。
测试方法：检查设备的输液泵、脱气机、自动进样器、柱温箱、DAD检测器是否与设备订单或装箱单一致。
接受标准：设备的输液泵、脱气机、自动进样器、柱温箱、DAD检测器应与设备订单或装箱单一致。
将检查结果记录在附录6《安装环境确认》内。
设备型号确认表
附录7公用系统安装确认
目的：确认公用系统安装正确，符合设备使用要求。
测试方法：用万用表测量电源、接地电阻是否符合设备使用要求。
可接受标准：电源220V，50Hz，接地电阻小于4Ω。
将检查结果记录在《公用系统安装确认表》内。
公用系统安装确认表
目的：根据生产商硬件和系统设计规格标准，确认仪器安装符合要求。
测试方法：按安装要求，检查设备连接安装是否正确。
可接受标准：打开计算机电源开关，指示灯亮，机器运行；打开打印机，指示灯亮；打开仪器及工作站，有信号出现。
将检查结果记录在附录8《设备安装确认》内。
设备安装确认表
目的：确认安装的应用软件符合计算机系统和外围设备的要求。
测试方法：打开电源开关，打开计算机，确认计算机运行系统；打开仪器各部件电源，确认仪器运行系统及软件。
可接受标准：计算机使用Windows XP系统；计算机桌面上有仪器联机图标；确认仪器跟Agilent ChemStation软件连接；进入Agilent ChemStation 主画面。
将检查结果记录在附录9《软件配置确认》内。
软件配置确认表
附录10噪音和漂移的确认
目的：保证设备稳定。
测试方法：检查条件：选用C18柱，以100%甲醇为流动相，流速1.0ml/min，DAD检测器的波长选在254nm。
开机预热，按色谱条件编好方法并保存后待仪器稳定后记运行，测定30min内基线波动振幅作为基线噪音，用检测器自身的物理量（Au）作单位表示，基线漂移用60min内基线偏离原点的值（Au/60min）作单位表示，运行方法，根据色谱图计算结果。
可接受标准：基线漂移：＜±5.0×10-4Au/60min；基线噪音：＜±1.0×10-4Au(250nm)。
将检查结果记录在附录10《噪音和漂移确认表》内。
噪音和漂移确认表
附录11 流速确认
目的：证明液相色谱仪的软硬件功能运行正常，并且达到设计要求及检测要求。
测试方法：以水为流动相，将流速分别设定在0.5ml/min 、1.0ml/min 和2.0ml/min ，待流速稳定后，用一校正过的10ml 量瓶接收流动相并开始记时，当流动相接收至量瓶刻度时立即停止计时并计算流速。
每种流速做三次，按以下公式计算流速的设定值误差，流速的稳定性误差。
%
100%
100⨯-=⨯-=
平均流速
最小流速
最大流速稳定性误差设定流速
设定流速
平均流速设定值误差
可接受标准：设定值误差：±2%；稳定性误差：≤2%。
将检查结果记录在附录11《流速确认表》内。
流速确认表
附录12 梯度比例确认
目的：证明液相色谱仪的软硬件功能运行正常，并且达到设计要求及检测要求。
测试方法：使用一根阻尼管（2000×0.12mm ）代替柱子，检测波长调至265nm ，流速1.0ml/min ，流动相A ：水，流动相B ：0.5%丙酮，按色谱条件编好方法并保存后，待仪器预热稳定后运行梯度程序，程序完成后，按下式计算： 100
H H V X
X
，式中， Vx 为单元B 的梯度；Hx 为每梯度的响应值。
D=Vx-G ，式中，D 为梯度准确性的偏差；G 为设置的流动相B 的比例。
可接受标准：≤±1%。
将检查结果记录在附录11《梯度比例确认表》内。
梯度比例确认表
附录13 前后进样带入量的确认
目的：证明液相色谱仪的软硬件功能运行正常，并且达到设计要求及检测要求。
测试方法：选用4.6mm×250mm的C18柱，用甲醇为流动相，检测器波长为254nm，流速为1.0ml/min,进样量20ul，按色谱条件编好方法并保存后，待仪器预热稳定后使用下列样品溶液进样。
样品溶液(a):萘的甲醇溶液200ug/ml；
样品溶液(b):萘的甲醇溶液2ug/ml；
空白溶液:甲醇。
按以下顺序进样：样品溶液(a)，1针、空白溶液，1针、—溶液溶液(b)，1针；
记录色谱图并对萘峰进行积分。
可接受标准：空白溶液中相应的峰面积百分比不超过样品溶液(a)中萘峰峰面积的0.1%；样品溶液(b)中萘峰峰面积是样品溶液(a)中萘峰峰面积的0.9%~1.1%。
将测试结果记录在附录13《前后进样带入量确认表》内。
前后进样带入量确认表
附录14 定量环准确度确认
目的：证明液相色谱仪的软硬件功能运行正常，并且达到设计要求及检测要求。
测试方法：样品准备：用脱气纯化水冲洗自动进样器，在一个2mL样品瓶中装入1.0mL纯
化水，盖上盖子，用万分之一天平称量重量（W
1
），放入样品盘中。
样品运行：设置流速为1.0mL/min，进样体积为50μL，运行时间为0.1分钟，连续
进样6次。
运行自动进样器，结束后，称量样品瓶重量（W
2
），用公式计算进样体积（μL）：
（W
1-W
2
）/6×1000。
（注：水的密度:25℃时0.99707g/mL，20℃时0.99823g/mL。
）
可接受标准：实际进样体积50±0.1%μL。
（根据实际情况待定）将测试结果记录在附录14《定量环准确度确认表》内。
定量环准确度确认表
附录15 样品盘定位确认
目的：证明液相色谱仪的软硬件功能运行正常，并且达到设计要求及检测要求。
测试方法：随机放置6个样品瓶在不同的位置，用完好的瓶垫封装，设置好进样程序，运行自动进样器。
可接受标准：每个瓶垫都必须有小孔。
将测试结果记录在附录15《样品盘定位确认表》内。
样品盘定位确认表
目的：仪器的运行确认完成以后，在其功能试验符合要求的情况下，应用标准品或对照品、或检测的样品进行性能确认，以确认仪器符合使用要求。
测试方法：选用4.6mm×250mm的C18柱，用甲醇为流动相，检测器波长为254nm，流速为1.0ml/min,进样量20ul，按色谱条件编好方法并保存后，待仪器预热稳定后,进萘溶液200ug/ml，连续进样五次。
可接受标准：定性测量重现性（RSD）：≤1.0%；定量测量重现性（RSD）：≤1.0%。
将测量结果记录在附录16《重现性确认表》内。
重现性确认表
目的：仪器的运行确认完成以后，在其功能试验符合要求的情况下，应用标准品或对照品、或检测的样品进行性能确认，以确认仪器符合使用要求。
测试方法：选用4.6mm×250mm的C18柱，用甲醇为流动相，检测器波长为254nm，流速为1.0ml/min,进样量20ul，按色谱条件编好方法并保存后，待仪器预热稳定后,进萘溶液200ug/ml，100ug/ml，25ug/ml，5ug/ml，1ug/ml每个样进样1次。
可接受标准：相关系数R2＞0.999。
将测量结果记录在附录17《线性确认表》内。
线性确认表
11.1 偏差处理
将Agilent 11000型液相色谱仪安装/运行/性能确认方案确认中发现的所有的偏差记录在下表中，经公司审核、批准偏差解决方案后实施。
11.2 变更处理
将Agilent 11000型液相色谱仪安装/运行/性能确认方案确认中发现的所有的变更记录在下表中，变更实施前需经过审核、批准。