超滤管使用方法和注意事项
超滤管使用方法和注意事项

超滤管使用方法和注意事项蛋白浓缩和换Buffer通常使用的超滤管,常用Millipore的Amicon-Ultra-15超滤管(MWCO10kD)。
也有其它型号 的、不同体积大小和MWCO超滤管可选,视目的蛋白的分子量与浓缩前体积、浓缩目标体积而定。
可重复使用,使用一次就扔掉太浪费。
以下是个人总结的使用方法和注意事项。
1、选择合适的超滤管,主要考虑MWCO和浓缩体积,最常见的是Ultra-15(10kD)。
到底选择多大截留分子量比较合适呢?10kDa、 5kDa、还是30kDa?通常应截留分子量不应大于目的蛋白分子量的1/3,比如目的蛋白分子量为35kDa,就可以选择10kDa截留分子量的超滤 管。
若目的蛋白分子量为10kD左右,则可以用截留分子量3kD的超滤管。
认真阅读使用说明书,注意超滤膜对各种化学物质的耐受程度有所不同,表格中有。
2、新买来的超滤是干燥的,使用前加入MilliQ水,水量完全过膜,冰浴或冰箱里预冷几分钟。
然后将水倒出,即可加入蛋白液,加入的多少,以不超过管顶的白线为准。
操作要轻,加入蛋白液前,超滤管需要插在冰上预冷。
3、平衡。
质量和重心二者都要达到平衡。
注意转速和加速度不可太快,否则直接损坏超滤膜。
开始离心超滤(离心机预冷至4度)。
不同离心机的转速 rpm换算成g之后,有所不同。
具体可参阅附件里的说明书。
离心机的加速度调至最低档,减小对膜的压力。
注意,一定要等离心机达到目的转速之后,方可离开离心机,否则离心机出问题时,无法第一时间处理,后果不可预测!膜与转轴的方向根据说明书调整(角转离心机的情况是膜与轴垂直)。
在实际使用中,一般转速开的比说明书里的要低,这样可以延长离心管的使用寿命。
4、当浓缩到剩下1ml时,【取50ul国产Bradford溶液,加入10ul流穿,看有没变蓝色,以此判断超滤管是否漏掉蛋白。
如果管漏了,将上层和流穿重新倒入新管中开始超滤。
要精确判断是否漏管,用5mg/ml的BSA离心10min,再取流穿,跑蛋白胶或Bradford粗测】,继续加入剩下的蛋白液浓缩(在冰上操作,防止蛋白受热),直到所有浓缩液都加完为止。
超滤管使用方法和注意事项

超滤管使用方法和注意事项超滤管使用方法和注意事项一、超滤管概述超滤管是一种过滤装置,通过超滤膜将液体中的悬浮物、胶体颗粒和高分子物质分离出来,达到纯净化液的目的。
本文将详细介绍超滤管的使用方法和注意事项。
二、超滤管的安装⒈在安装超滤管之前,需要进行必要的准备工作,包括选择合适尺寸的超滤管、清洁使用环境等。
⒉将超滤管垂直插入滤芯安装座,确保密封紧密。
⒊将进水管和出水管连接至超滤管的进水口和出水口,确保连接牢固。
三、超滤管的使用方法⒈打开进水阀,允许液体进入超滤管。
⒉根据需要调节进水流量和超滤管的工作压力,可通过调节进水阀和调压阀来实现。
⒊当进水液体经过超滤膜时,超滤膜会阻止悬浮物、胶体颗粒和高分子物质通过,而纯净液体将通过超滤膜进入滤芯并流出。
⒋当液位达到一定高度时,关闭进水阀和出水阀,停止超滤管的工作。
四、超滤管的清洗和维护⒈使用超滤管一段时间后,滤芯内会积累一定量的悬浮物和颗粒,需要进行定期清洗。
⒉关闭进水阀和出水阀,打开排污阀,排出液体和滤芯内的积累物。
⒊使用清洁剂对超滤膜和滤芯进行清洗,去除附着在上面的污物。
⒋定期更换超滤管的滤芯,以保证其过滤效果。
五、注意事项⒈使用超滤管时,需确保进水液体的温度不超过规定范围,避免对超滤膜造成损坏。
⒉在清洗和维护超滤管时,需使用合适的清洁剂和工具,避免对超滤膜和滤芯造成损坏。
⒊使用过程中,若发现超滤管存在漏水等异常现象,应立即停止使用,并进行维修或更换。
⒋在长时间不使用超滤管时,需将超滤管拆解清洗,并储存在干燥通风的环境中,以防滤芯受潮和细菌滋生。
附件:超滤管示意图法律名词及注释:⒈过滤装置:指用于分离液体中固体颗粒、胶体和高分子物质的设备。
⒉超滤膜:一种具有特定孔径的膜,能够将悬浮物、胶体颗粒和高分子物质通过阻止,将纯净液体分离出来。
⒊悬浮物:指液体中的固体颗粒,在液体中悬浮着不沉降的物质。
⒋胶体颗粒:指液体中的微小颗粒状物质,具有较高的分散性和稳定性。
超滤管使用方法和注意事项

超滤管使用方法和注意事项一、超滤管的介绍超滤管是一种常用于分离、浓缩和纯化溶液中大分子物质的实验室工具。
它通过孔径较小的滤膜,将较大分子的溶质通过压力推动,使其被滤下,从而实现分离的目的。
超滤管广泛应用于生物化学、生物工程、环境监测等领域,具有操作简单、分离效果好等特点。
二、超滤管的使用方法在使用超滤管之前,我们需要准备以下材料和设备:1. 超滤管:选择适合实验需要的超滤管,根据需要选择不同的孔径和材质。
2. 手套和护目镜:保护自己的安全。
3. 准备待处理的溶液:将待处理的溶液加入超滤管中。
接下来,我们可以按照以下步骤使用超滤管:1. 将超滤管的滤膜端插入固定装置中,确保它能够垂直地悬挂在待处理溶液中。
2. 将待处理溶液缓慢注入超滤管中,注入速度要适中,以免造成溶液溢出或者损坏滤膜。
3. 等待一段时间,让溶液在超滤管中进行分离,大分子会被滤下,而小分子则可以通过滤膜。
4. 当溶液中的大分子富集到一定的浓度时,可以通过改变压力的方式,将富集的大分子溶液从超滤管中收集出来。
5. 完成实验后,将超滤管及时清洗干净,并进行好保存。
三、超滤管的注意事项1. 在使用超滤管时,要注意佩戴手套和护目镜,确保个人的安全。
2. 使用超滤管时,要根据实验需要选择适当的孔径和材质。
3. 在超滤过程中,要注意缓慢注入溶液,以免造成溶液溢出或者损坏滤膜。
4. 超滤过程中的压力要适中,过大的压力可能导致滤膜损坏。
5. 操作结束后,要及时清洗超滤管,并进行好保存。
,使用超滤管需要注意个人安全和正确操作,能够有效地实现溶液中大分子的分离、浓缩和纯化。
希望以上介绍能对您有所帮助。
超滤管使用指南(一)

超滤管使用指南(一)引言概述:超滤管是一种常用的水处理设备,能够有效去除水中的悬浮物、微生物和有机物质。
本文将为您介绍超滤管的使用指南,包括使用前的准备工作、操作步骤、注意事项等。
正文:1. 准备工作:a. 清洗超滤管:在第一次使用超滤管前,需要进行清洗以去除管道内的杂质和污垢。
可使用清洗剂和清水进行清洗,确保管道干净。
b. 连接管路:将超滤管与水源和出水管路连接好,确保管道的连接牢固,避免漏水或破裂的情况发生。
2. 操作步骤:a. 打开水源:打开水源阀门,让水缓慢地通过超滤管进入系统。
b. 观察滤水效果:观察超滤管的滤水效果,如果水呈混浊状态或有气泡冒出,可能是管道连接不牢或超滤膜受损,需要及时排查和修复。
c. 调节进水压力:根据超滤管的要求,调节进水压力。
过高的压力可能导致超滤管损坏,过低的压力则会影响过滤效果。
d. 控制出水质量:根据需要,调节出水阀门以控制出水质量。
可以根据不同需求选择不同的出水模式,如高纯水模式、饮用水模式等。
3. 注意事项:a. 使用环境:超滤管一般适用于自来水、井水等水源。
避免将其用于含有大量悬浮物、酸碱度较高或温度过高的水源中。
b. 定期检查:定期检查超滤管的运行状态,如滤膜是否有损伤、水流是否正常等。
如发现异常情况,及时进行维修或更换相应部件。
c. 清洗维护:定期清洗超滤管以保持其过滤性能,具体频率根据水源的情况而定。
一般情况下,可每3个月进行一次清洗。
4. 使用注意事项:a. 避免迫击炮效应:水源的进水压力不宜过高,以免超滤管因水压巨大而受损。
b. 避免冻结:超滤管在寒冷地区使用时,需要采取保温措施,避免管道因冻结而出现开裂破损的情况。
c. 禁止拆卸:使用过程中,严禁随意拆卸超滤管的部件,以免损坏管道结构或影响过滤效果。
5. 总结:超滤管是一种重要的水处理设备,使用前的准备工作和正确的操作步骤非常重要。
在使用过程中,需注意使用环境、定期检查和维护以及遵循相关的注意事项,以保证超滤管的正常运行和滤水效果。
超滤管使用方法和注意事项

超滤管使用方法和注意事项超滤管使用方法和注意事项1. 超滤管简介超滤管是一种常见的水处理设备,通过超滤膜的微孔来完成水的过滤和分离,能有效去除水中的悬浮物、细菌、等有害物质,提供清洁健康的饮用水。
2. 使用方法使用超滤管进行水处理时,需要按照以下步骤进行操作:2.1. 准备工作检查超滤管的材料是否完好无损,确保超滤膜没有破损或者老化。
清洁超滤管的外表面,避免灰尘和污垢进入系统。
2.2. 连接超滤管将超滤管连接到水源或者水处理设备的进水口,确保连接密切可靠,避免漏水或者渗水现象。
2.3. 启动超滤管打开进水阀门,让水缓慢进入超滤管。
水流进入的速度应逐渐增加,避免冲击超滤膜,影响使用寿命。
建议初始使用时水流速度不超过设计流量的50%。
2.4. 检查水质使用超滤管处理水后,可以通过对出水进行水质检测来确定过滤效果。
确保出水合格后,即可正常使用。
2.5. 定期清洗超滤管在长期使用后,会因为滤孔的阻塞而降低过滤效果。
建议定期进行清洗,可根据使用情况选择适当的清洗方法,如物理清洗、化学清洗等。
3. 注意事项在使用超滤管时,需要注意以下事项,以确保正常运行和延长使用寿命:3.1. 避免污水反渗透超滤管的用途是过滤净化水,不适合于处理污水。
避免将含有高浓度污染物的水进入超滤管,以避免超滤膜受损。
3.2. 避免干燥超滤管在不使用时,应保持湿润状态,避免超滤膜干燥。
如果长期不使用,建议拆卸超滤管并储存于水中,以保持滤膜的良好状态。
3.3. 防止冻裂在寒冷季节,超滤管需要采取防冻措施,避免超滤管因冻裂而损坏。
如果超滤管未受到寒冷天气的保护,可能会发生泄漏或者无法正常使用。
3.4. 防止化学腐蚀超滤管的材料通常对普通水质和化学品有较好的耐腐蚀性,但某些特殊化学物质可能对超滤膜有伤害。
在处理特殊水质时,需参考厂家提供的使用说明或者进行特殊预处理。
3.5. 定期维护和更换定期进行设备维护和超滤膜更换,是保证超滤管长期稳定运行的关键。
超滤管使用方法和注意事项

超滤管使用方法和注意事项超滤管使用方法和注意事项蛋白浓缩和换Buffer通常使用的超滤管,常用Millipore的Amicon-Ultra-15超滤管(MWCO10kD)。
也有其它型号的、不同体积大小和MWCO超滤管可选,视目的蛋白的分子量与浓缩前体积、浓缩目标体积而定。
可重复使用,使用一次就扔掉太浪费。
以下是个人总结的使用方法和注意事项。
1、选择合适的超滤管,主要考虑MWCO和浓缩体积,最常见的是Ultra-15(10kD)。
到底选择多大截留分子量比较合适呢?10kDa、 5kDa、还是30kDa?通常应截留分子量不应大于目的蛋白分子量的1/3,比如目的蛋白分子量为35kDa,就可以选择10kDa截留分子量的超滤管。
若目的蛋白分子量为10kD左右,则可以用截留分子量3kD的超滤管。
认真阅读使用说明书,注意超滤膜对各种化学物质的耐受程度有所不同,表格中有。
2、新买来的超滤是干燥的,使用前加入MilliQ水,水量完全过膜,冰浴或冰箱里预冷几分钟。
然后将水倒出,即可加入蛋白液,加入的多少,以不超过管顶的白线为准。
操作要轻,加入蛋白液前,超滤管需要插在冰上预冷。
3、平衡。
质量和重心二者都要达到平衡。
注意转速和加速度不可太快,否则直接损坏超滤膜。
开始离心超滤(离心机预冷至4度)。
不同离心机的转速 rpm 换算成g之后,有所不同。
具体可参阅附件里的说明书。
离心机的加速度调至最低档,减小对膜的压力。
注意,一定要等离心机达到目的转速之后,方可离开离心机,否则离心机出问题时,无法第一时间处理,后果不可预测!膜与转轴的方向根据说明书调整(角转离心机的情况是膜与轴垂直)。
在实际使用中,一般转速开的比说明书里的要低,这样可以延长离心管的使用寿命。
4、当浓缩到剩下1ml时,【取50ul国产Bradford溶液,加入10ul流穿,看有没变蓝色,以此判断超滤管是否漏掉蛋白。
如果管漏了,将上层和流穿重新倒入新管中开始超滤。
要精确判断是否漏管,用5mg/ml的BSA离心10min,再取流穿,跑蛋白胶或Bradford粗测】,继续加入剩下的蛋白液浓缩(在冰上操作,防止蛋白受热),直到所有浓缩液都加完为止。
超滤管使用方法和注意事项

超滤管使用方法和注意事项蛋白浓缩和换Buffer通常使用的超滤管,常用Millipore的Amicon-Ultra-15超滤管(MWCO10kD)。
也有其它型号的、不同体积大小和MWCO超滤管可选,视目的蛋白的分子量与浓缩前体积、浓缩目标体积而定。
可重复使用,使用一次就扔掉太浪费。
以下是个人总结的使用方法和注意事项。
1、选择合适的超滤管,主要考虑MWCO和浓缩体积,最常见的是Ultra-15(10kD)。
到底选择多大截留分子量比较合适呢?10kDa、 5kDa、还是30kDa?通常应截留分子量不应大于目的蛋白分子量的1/3,比如目的蛋白分子量为35kDa,就可以选择10kDa截留分子量的超滤管。
若目的蛋白分子量为10kD左右,则可以用截留分子量3kD的超滤管。
认真阅读使用说明书,注意超滤膜对各种化学物质的耐受程度有所不同,表格中有。
2、新买来的超滤是干燥的,使用前加入MilliQ水,水量完全过膜,冰浴或冰箱里预冷几分钟。
然后将水倒出,即可加入蛋白液,加入的多少,以不超过管顶的白线为准。
操作要轻,加入蛋白液前,超滤管需要插在冰上预冷。
3、平衡。
质量和重心二者都要达到平衡。
注意转速和加速度不可太快,否则直接损坏超滤膜。
开始离心超滤(离心机预冷至4度)。
不同离心机的转速 rpm 换算成g之后,有所不同。
具体可参阅附件里的说明书。
离心机的加速度调至最低档,减小对膜的压力。
注意,一定要等离心机达到目的转速之后,方可离开离心机,否则离心机出问题时,无法第一时间处理,后果不可预测!膜与转轴的方向根据说明书调整(角转离心机的情况是膜与轴垂直)。
在实际使用中,一般转速开的比说明书里的要低,这样可以延长离心管的使用寿命。
4、当浓缩到剩下1ml时,【取50ul国产Bradford溶液,加入10ul流穿,看有没变蓝色,以此判断超滤管是否漏掉蛋白。
如果管漏了,将上层和流穿重新倒入新管中开始超滤。
要精确判断是否漏管,用5mg/ml的BSA离心10min,再取流穿,跑蛋白胶或Bradford粗测】,继续加入剩下的蛋白液浓缩(在冰上操作,防止蛋白受热),直到所有浓缩液都加完为止。
超滤管使用方法和注意事项

超滤管使用方法和注意事项蛋白浓缩和换Buffer通常使用的超滤管,常用Millipore的Amicon-Ultra-15超滤管(MWCO10kD)。
也有其它型号的、不同体积大小和MWCO超滤管可选,视目的蛋白的分子量与浓缩前体积、浓缩目标体积而定。
可重复使用,使用一次就扔掉太浪费。
以下是个人总结的使用方法和注意事项。
1、选择合适的超滤管,主要考虑MWCO和浓缩体积,最常见的是Ultra-15(10kD)。
到底选择多大截留分子量比较合适呢?10kDa、 5kDa、还是30kDa?通常应截留分子量不应大于目的蛋白分子量的1/3,比如目的蛋白分子量为35kDa,就可以选择10kDa截留分子量的超滤管。
若目的蛋白分子量为10kD左右,则可以用截留分子量3kD的超滤管。
认真阅读使用说明书,注意超滤膜对各种化学物质的耐受程度有所不同,表格中有。
2、新买来的超滤是干燥的,使用前加入MilliQ水,水量完全过膜,冰浴或冰箱里预冷几分钟。
然后将水倒出,即可加入蛋白液,加入的多少,以不超过管顶的白线为准。
操作要轻,加入蛋白液前,超滤管需要插在冰上预冷。
3、平衡。
质量和重心二者都要达到平衡。
注意转速和加速度不可太快,否则直接损坏超滤膜。
开始离心超滤(离心机预冷至4度)。
不同离心机的转速 rpm换算成g之后,有所不同。
具体可参阅附件里的说明书。
离心机的加速度调至最低档,减小对膜的压力。
注意,一定要等离心机达到目的转速之后,方可离开离心机,否则离心机出问题时,无法第一时间处理,后果不可预测!膜与转轴的方向根据说明书调整(角转离心机的情况是膜与轴垂直)。
在实际使用中,一般转速开的比说明书里的要低,这样可以延长离心管的使用寿命。
4、当浓缩到剩下1ml时,【取50ul国产Bradford溶液,加入10ul流穿,看有没变蓝色,以此判断超滤管是否漏掉蛋白。
如果管漏了,将上层和流穿重新倒入新管中开始超滤。
要精确判断是否漏管,用5mg/ml的BSA离心10min,再取流穿,跑蛋白胶或Bradford粗测】,继续加入剩下的蛋白液浓缩(在冰上操作,防止蛋白受热),直到所有浓缩液都加完为止。
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超滤管使用方法和注意事项
蛋白浓缩和换Buffer通常使用的超滤管,常用Millipore的Amicon-Ultra-15超滤管(MWCO10kD)。
也有其它型号的、不同体积大小和MWCO超滤管可选,视目的蛋白的分子量与浓缩前体积、浓缩目标体积而定。
可重复使用,使用一次就扔掉太浪费。
以下是个人总结的使用方法和注意事项。
1、选择合适的超滤管,主要考虑MWCO和浓缩体积,最常见的是Ultra-15(10k D)。
到底选择多大截留分子量比较合适呢?10kDa、5kDa、还是30kDa?通常应截留分子量不应大于目的蛋白分子量的1/3,比如目的蛋白分子量为35kDa,就可以选择10kDa截留分子量的超滤管。
若目的蛋白分子量为10kD左右,则可以用截留分子量3kD的超滤管。
认真阅读使用说明书,注意超滤膜对各种化学物质的耐受程度有所不同,表格中有。
2、新买来的超滤是干燥的,使用前加入MilliQ水,水量完全过膜,冰浴或冰箱里预冷几分钟。
然后将水倒出,即可加入蛋白液,加入的多少,以不超过管顶的白线为准。
操作要轻,加入蛋白液前,超滤管需要插在冰上预冷。
3、平衡。
质量和重心二者都要达到平衡。
注意转速和加速度不可太快,否则直接损坏超滤膜。
开始离心超滤(离心机预冷至4度)。
不同离心机的转速rpm
换算成g之后,有所不同。
具体可参阅附件里的说明书。
离心机的加速度调至最低档,减小对膜的压力。
注意,一定要等离心机达到目的转速之后,方可离开离心机,否则离心机出问题时,无法第一时间处理,后果不可预测!膜与转轴的方向根据说明书调整(角转离心机的情况是膜与轴垂直)。
在实际使用中,一般转速开的比说明书里的要低,这样可以延长离心管的使用寿命。
4、当浓缩到剩下1ml时,【取50ul国产Bradford溶液,加入10ul流穿,看有没变蓝色,以此判断超滤管是否漏掉蛋白。
如果管漏了,将上层和流穿重新倒入新管中开始超滤。
要精确判断是否漏管,用5mg/ml的BSA离心10min,再取流穿,跑蛋白胶或Bradford粗测】,继续加入剩下的蛋白液浓缩(在冰上操作,防止蛋白受热),直到所有浓缩液都加完为止。
离心过程中注意是否发生蛋白沉淀,导致堵管。
若发生沉淀,要确定沉淀的具体原因,是蛋白浓度过高还是Buf fer不合适;前者可用多根超滤管同时超滤,降低浓度的办法解决,后者的方法是换不同的Buffer,直到蛋白不发生沉淀为止。
5、前面几步用以浓缩蛋白,如果要换Buffer,在总蛋白液浓缩至1ml左右的时候,轻轻加入新的Buffer(经0.22um超滤膜超滤),再浓缩至1ml左右,连续三次,最后一次的浓缩终体积根据需要的蛋白浓度而定,一般不多于500ul,也有浓缩至200ul以内的情况。
按照每次至少10倍左右的体积浓缩算,三次达到1000倍以上,基本上可以达到换buffer的目的。
6、取出最终蛋白浓缩液的操作在冰上操作,用黄枪头(200ul)取,轻轻顺着边缘插入枪头,轻轻吹打、混匀蛋白液,注意不要碰到超滤膜,然后吸取浓缩液,
每次吸接近200ul,直到吸完。
管底剩下的最后一点浓缩液不必吸取,否则难度太大,有可能损坏超滤膜。
最后加入MilliQ水到超滤管中,没过超滤膜,防止膜失水变干。
7、以下是处理超滤管,重复利用超滤管的步骤。
8、倒出超滤管里的水,用milliQ水轻轻润洗几次,【若管底有可见的蛋白沉淀,可以先加入水,然后用枪头吹打,注意不要碰到膜,吹打至沉淀悬起,然后倒掉,不可用自来水猛冲】然后加入0.2M的NaOH溶液,室温放置20min,期间平衡超滤管。
再离心10min。
倒出残留的NaOH溶液,将管芯浸入MilliQ水的烧杯(1
或2L)中,放置几个小时,再换新的水,放置几个小时,不断稀释NaOH浓度。
50ml 管和盖子用自来水洗,内壁再用MilliQ水洗干净。
9、取出浸没的管芯,加至接近满的MilliQ水,50ml管也加满MilliQ水,将管芯慢慢放入50ml离心管,排出部分水,然后盖上盖子,放4度保存,直到下次使用。
一般来说,按照上述步骤和注意事项,每根管用三四年不会坏。
我们的是用0.1M NaOH浸泡后,在水洗,然后在20%乙醇中保存的。