超滤管使用指南

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3kd超滤管使用方法和注意事项

3kd超滤管使用方法和注意事项

3kd超滤管使用方法和注意事项以3kd超滤管使用方法和注意事项为标题的文章一、3kd超滤管的使用方法:1. 准备工作:在使用3kd超滤管之前,首先需要准备好一套完整的实验设备。

包括3kd超滤管本身、离心机、离心管、滤膜、滤液和所需的实验溶液等。

2. 安装滤膜:将滤膜放入3kd超滤管的滤膜座中,确保滤膜与座位紧密贴合,并且没有明显的气泡存在。

然后将滤膜座固定在3kd超滤管的上部。

3. 连接设备:将3kd超滤管的上部与离心管连接,确保连接紧密,避免滤液泄漏。

然后将装有滤液的容器与3kd超滤管的下部连接,确保连接紧密,避免滤液溢出。

4. 装填滤液:将待处理的滤液缓慢地倒入3kd超滤管的上部,直至液面超过滤膜座。

注意不要过度装填滤液,以免超过3kd超滤管的容量。

5. 开始离心:将连接好的3kd超滤管放入离心机中,并按照设备要求设置好离心速度和离心时间。

启动离心机,开始离心过程。

6. 收集上清液:离心结束后,将上清液从离心管中取出,注意不要将离心管中的沉淀物和滤液混合在一起。

7. 清洗和保养:使用完毕后,及时清洗和保养3kd超滤管。

将滤膜座取下,用纯水冲洗滤膜,并清洗其他部分。

然后将滤膜座重新安装好,保持干燥。

二、3kd超滤管的注意事项:1. 操作注意安全:在使用3kd超滤管时,要注意个人防护,避免接触滤液和有害物质。

同时,要按照实验室安全操作规范进行操作,确保实验室的安全。

2. 滤液选择:根据实验需要选择合适的滤液。

3kd超滤管适用于蛋白质、核酸等大分子物质的分离和浓缩,因此滤液的选择应根据实验目的进行合理搭配。

3. 控制离心条件:在使用3kd超滤管进行离心时,要根据实验要求控制好离心速度和离心时间。

过高的离心速度可能导致滤膜破裂,过长的离心时间可能降低分离效果。

4. 避免堵塞:在装填滤液时要注意避免滤液中的颗粒物或大量蛋白质等物质堵塞滤膜。

如果滤膜出现堵塞,可以尝试调整离心条件或更换滤膜。

5. 注意滤液浓度:使用3kd超滤管进行滤液浓缩时,要注意滤液浓度的控制。

超滤管使用方法和注意事项

超滤管使用方法和注意事项

超滤管使用方法和注意事项超滤管使用方法和注意事项一、超滤管概述超滤管是一种过滤装置,通过超滤膜将液体中的悬浮物、胶体颗粒和高分子物质分离出来,达到纯净化液的目的。

本文将详细介绍超滤管的使用方法和注意事项。

二、超滤管的安装⒈在安装超滤管之前,需要进行必要的准备工作,包括选择合适尺寸的超滤管、清洁使用环境等。

⒉将超滤管垂直插入滤芯安装座,确保密封紧密。

⒊将进水管和出水管连接至超滤管的进水口和出水口,确保连接牢固。

三、超滤管的使用方法⒈打开进水阀,允许液体进入超滤管。

⒉根据需要调节进水流量和超滤管的工作压力,可通过调节进水阀和调压阀来实现。

⒊当进水液体经过超滤膜时,超滤膜会阻止悬浮物、胶体颗粒和高分子物质通过,而纯净液体将通过超滤膜进入滤芯并流出。

⒋当液位达到一定高度时,关闭进水阀和出水阀,停止超滤管的工作。

四、超滤管的清洗和维护⒈使用超滤管一段时间后,滤芯内会积累一定量的悬浮物和颗粒,需要进行定期清洗。

⒉关闭进水阀和出水阀,打开排污阀,排出液体和滤芯内的积累物。

⒊使用清洁剂对超滤膜和滤芯进行清洗,去除附着在上面的污物。

⒋定期更换超滤管的滤芯,以保证其过滤效果。

五、注意事项⒈使用超滤管时,需确保进水液体的温度不超过规定范围,避免对超滤膜造成损坏。

⒉在清洗和维护超滤管时,需使用合适的清洁剂和工具,避免对超滤膜和滤芯造成损坏。

⒊使用过程中,若发现超滤管存在漏水等异常现象,应立即停止使用,并进行维修或更换。

⒋在长时间不使用超滤管时,需将超滤管拆解清洗,并储存在干燥通风的环境中,以防滤芯受潮和细菌滋生。

附件:超滤管示意图法律名词及注释:⒈过滤装置:指用于分离液体中固体颗粒、胶体和高分子物质的设备。

⒉超滤膜:一种具有特定孔径的膜,能够将悬浮物、胶体颗粒和高分子物质通过阻止,将纯净液体分离出来。

⒊悬浮物:指液体中的固体颗粒,在液体中悬浮着不沉降的物质。

⒋胶体颗粒:指液体中的微小颗粒状物质,具有较高的分散性和稳定性。

超滤管使用指南(一)

超滤管使用指南(一)

超滤管使用指南(一)引言概述:超滤管是一种常用的水处理设备,能够有效去除水中的悬浮物、微生物和有机物质。

本文将为您介绍超滤管的使用指南,包括使用前的准备工作、操作步骤、注意事项等。

正文:1. 准备工作:a. 清洗超滤管:在第一次使用超滤管前,需要进行清洗以去除管道内的杂质和污垢。

可使用清洗剂和清水进行清洗,确保管道干净。

b. 连接管路:将超滤管与水源和出水管路连接好,确保管道的连接牢固,避免漏水或破裂的情况发生。

2. 操作步骤:a. 打开水源:打开水源阀门,让水缓慢地通过超滤管进入系统。

b. 观察滤水效果:观察超滤管的滤水效果,如果水呈混浊状态或有气泡冒出,可能是管道连接不牢或超滤膜受损,需要及时排查和修复。

c. 调节进水压力:根据超滤管的要求,调节进水压力。

过高的压力可能导致超滤管损坏,过低的压力则会影响过滤效果。

d. 控制出水质量:根据需要,调节出水阀门以控制出水质量。

可以根据不同需求选择不同的出水模式,如高纯水模式、饮用水模式等。

3. 注意事项:a. 使用环境:超滤管一般适用于自来水、井水等水源。

避免将其用于含有大量悬浮物、酸碱度较高或温度过高的水源中。

b. 定期检查:定期检查超滤管的运行状态,如滤膜是否有损伤、水流是否正常等。

如发现异常情况,及时进行维修或更换相应部件。

c. 清洗维护:定期清洗超滤管以保持其过滤性能,具体频率根据水源的情况而定。

一般情况下,可每3个月进行一次清洗。

4. 使用注意事项:a. 避免迫击炮效应:水源的进水压力不宜过高,以免超滤管因水压巨大而受损。

b. 避免冻结:超滤管在寒冷地区使用时,需要采取保温措施,避免管道因冻结而出现开裂破损的情况。

c. 禁止拆卸:使用过程中,严禁随意拆卸超滤管的部件,以免损坏管道结构或影响过滤效果。

5. 总结:超滤管是一种重要的水处理设备,使用前的准备工作和正确的操作步骤非常重要。

在使用过程中,需注意使用环境、定期检查和维护以及遵循相关的注意事项,以保证超滤管的正常运行和滤水效果。

超滤管使用方法和注意事项

超滤管使用方法和注意事项

超滤管使用方法和注意事项超滤管使用方法和注意事项1. 超滤管简介超滤管是一种常见的水处理设备,通过超滤膜的微孔来完成水的过滤和分离,能有效去除水中的悬浮物、细菌、等有害物质,提供清洁健康的饮用水。

2. 使用方法使用超滤管进行水处理时,需要按照以下步骤进行操作:2.1. 准备工作检查超滤管的材料是否完好无损,确保超滤膜没有破损或者老化。

清洁超滤管的外表面,避免灰尘和污垢进入系统。

2.2. 连接超滤管将超滤管连接到水源或者水处理设备的进水口,确保连接密切可靠,避免漏水或者渗水现象。

2.3. 启动超滤管打开进水阀门,让水缓慢进入超滤管。

水流进入的速度应逐渐增加,避免冲击超滤膜,影响使用寿命。

建议初始使用时水流速度不超过设计流量的50%。

2.4. 检查水质使用超滤管处理水后,可以通过对出水进行水质检测来确定过滤效果。

确保出水合格后,即可正常使用。

2.5. 定期清洗超滤管在长期使用后,会因为滤孔的阻塞而降低过滤效果。

建议定期进行清洗,可根据使用情况选择适当的清洗方法,如物理清洗、化学清洗等。

3. 注意事项在使用超滤管时,需要注意以下事项,以确保正常运行和延长使用寿命:3.1. 避免污水反渗透超滤管的用途是过滤净化水,不适合于处理污水。

避免将含有高浓度污染物的水进入超滤管,以避免超滤膜受损。

3.2. 避免干燥超滤管在不使用时,应保持湿润状态,避免超滤膜干燥。

如果长期不使用,建议拆卸超滤管并储存于水中,以保持滤膜的良好状态。

3.3. 防止冻裂在寒冷季节,超滤管需要采取防冻措施,避免超滤管因冻裂而损坏。

如果超滤管未受到寒冷天气的保护,可能会发生泄漏或者无法正常使用。

3.4. 防止化学腐蚀超滤管的材料通常对普通水质和化学品有较好的耐腐蚀性,但某些特殊化学物质可能对超滤膜有伤害。

在处理特殊水质时,需参考厂家提供的使用说明或者进行特殊预处理。

3.5. 定期维护和更换定期进行设备维护和超滤膜更换,是保证超滤管长期稳定运行的关键。

超滤管使用方法和注意事项

超滤管使用方法和注意事项

超滤管使用方法和注意事项超滤管使用方法和注意事项1.超滤管简介超滤管是一种常用于水处理和膜分离过程中的设备,其通过使用特殊的膜材料来过滤掉水中的微小颗粒和溶解物质。

本文将介绍超滤管的使用方法和需要注意的事项。

2.超滤管的安装2.1 准备工作在安装超滤管之前,需要先确保以下准备工作已完成:●检查超滤管是否完好无损。

●检查超滤管的连接件是否齐全。

●清洗超滤管及其连接件,确保其表面干净无污染。

●确保超滤管的连接口与管道连接口的尺寸符合要求。

2.2 安装步骤按照以下步骤安装超滤管:1.将超滤管的连接件与管道连接口对接,确保密封良好。

2.固定超滤管的连接件,确保超滤管稳固地安装在管道上。

3.进一步检查超滤管的连接件是否牢固,无松动或渗漏。

4.如果超滤管需要连接多个管道,重复上述步骤,确保每个连接口都安装正确。

3.超滤管的使用3.1 操作步骤按照以下步骤使用超滤管:1.打开进水阀门,将待处理的水流入超滤管。

2.观察超滤管的压力显示器,确保设定的运行压力不超过规定范围。

3.当超滤管的污水排放口出现较大压力时,表示滤芯可能需要清洗或更换。

4.根据需要,及时清洗或更换超滤管的滤芯。

3.2 清洗滤芯根据超滤管使用情况,定期清洗滤芯以保证其最佳性能:1.关闭进水阀门,将超滤管停机。

2.打开排污阀门,将滤芯内的污水排放干净。

3.用清水冲洗滤芯,直到排出的水变得清澈。

4.关闭排污阀门,重新开启进水阀门,使超滤管恢复正常工作。

4.注意事项在使用超滤管时需要注意以下事项:●确保超滤管的工作压力不超过其承受范围。

●定期检查超滤管的连接件是否紧固,无渗漏。

●避免在超滤管处于运行状态下进行拆卸或维修。

●定期检查超滤管的滤芯状态,及时清洗或更换。

●遵循超滤管的使用、维护和保养手册中的指导。

本文档涉及附件:●超滤管使用、维护和保养手册●超滤管清洗及更换滤芯的操作视频本文所涉及的法律名词及注释:●安全技术规范:指国家制定的有关某项技术的安全要求和规范。

超滤管使用指南范文

超滤管使用指南范文

超滤管使用指南范文超滤管(Ultrafiltration Membrane)是一种常用的膜分离技术,在水处理、食品饮料加工、药品制造和生物工程等领域得到广泛应用。

本文将介绍超滤管的基本原理、使用方法和注意事项,帮助用户正确使用超滤管,提高工作效率和产品质量。

一、超滤管的原理超滤管是一种纳米级别的膜分离技术,通过孔径大小在0.1-0.01微米之间的滤膜,将溶胶、胶体、胶束等微小颗粒从溶液中分离出来。

其工作原理基于渗透压差,通过应用压力使溶液经过膜表面,小分子通过膜孔径进入膜孔内,而大分子则被截留在膜表面上,实现了溶质的高效分离。

二、超滤管的使用方法1.准备工作:首先需要确保超滤装置安装完毕并处于正常工作状态。

安装超滤管时,需要注意将膜孔面朝外,并确保管件连接牢固。

2.清洗超滤管:为了确保超滤管的使用寿命和过滤效果,首次使用前需要对超滤管进行初次清洗。

具体步骤如下:a.将超滤管放入清水中,浸泡10-20分钟。

b.将清水排出,然后使用清水进行冲洗。

冲洗至水清为止。

c.将超滤管放入含有10%氢氧化钠或漂白粉的溶液中,浸泡30-60分钟。

d.将溶液排出,再次使用清水进行冲洗,直至水清为止。

e.最后,使用85℃左右的蒸馏水进行冲洗,直至水中氧气减少。

3.使用超滤管:使用超滤管的具体步骤如下:a.将需要处理的溶液通过管道导入超滤管的供液端。

b.调节超滤装置的操作参数,包括进水压力、流量和温度等,根据实际情况进行调整。

c.打开超滤装置的开关,开始进行过滤操作。

d.监控溶液的浓缩情况,根据需要可以适时打开或关闭排液阀门,调整流速和浓缩效果。

e.当超滤管内的溶质浓度达到设定值时,停止过滤操作,关闭超滤装置的开关。

三、超滤管的注意事项1.避免超滤管受到高温或严重压力冲击,以免损坏膜孔结构。

2.定期进行超滤管的清洗和维护,以保证其工作正常和寿命长。

3.切勿使用有机溶剂和酸碱强腐蚀性液体进行超滤操作,以免损坏超滤膜。

4.在超滤操作过程中,应密切观察管道和连接处是否存在泄漏等情况,及时处理。

超滤离心管使用方法和注意事项

超滤离心管使用方法和注意事项

超滤离心管使用方法和注意事项
使用方法:
1.预处理:新超滤管使用前需用纯水浸泡,冰箱预冷10分钟。

然后将水倒出,置于冰上预冷2-5分钟,加样。

旧超滤管倒出管内乙醇浸泡液,用纯水冲洗干净10遍,置于冰上预冷2-5分钟,加样。

2.加样:如超滤管中有少许残留水,可将超滤管内管倒置1000×g离心1分钟,移液枪移取适量样本加入超滤管中。

3.离心:配平,12000×g离心(15-30分钟),等达到目的转速后方可离开。

4.样本收集:外管滤液为除去部分蛋白的样本上清,如需取浓缩后样本用于其他实验,则另取外管,内管倒置,1000×g离心1-2分钟。

5.超滤管清洗:使用完的超滤管用纯水反复清洗5次,再用75%乙醇冲洗3次。

注意事项:
1.选择合适的超滤管。

通常应截留分子量不应大于目的蛋白分子量的1/3。

2.新买来的超滤是干燥的,使用前需加入超纯水,水量完全过膜,冰浴或冰箱里预冷几分钟。

3.注意转速和加速度不可太快,否则直接损坏超滤膜。

超滤管使用指南

超滤管使用指南

超滤管使用指南超滤管使用指南1.简介超滤管是一种常用的水处理设备,其通过滤膜对水中的杂质、微生物等进行分离和过滤,达到净化水质的目的。

本文将详细介绍超滤管的使用方法和注意事项。

2.安装2.1 准备工作在安装超滤管前,需要先确保以下几点:●确定超滤管的规格和型号,以满足实际需求;●检查管道系统是否符合超滤管的连接要求;●确保超滤管的安装位置距离供水源和出水口的距离合适。

2.2 安装步骤●将超滤管从包装中取出,检查是否有损坏;●根据超滤管连接口的类型(常见有螺纹、法兰等),选择合适的连接方式;●将超滤管连接到管道系统中,并确保连接紧固;●如果超滤管需要固定在支架上,确保支架稳固且超滤管固定牢固;●检查超滤管与管道系统的连接是否密封,排除漏水的可能性。

3.操作3.1 准备工作在启动超滤管之前,需要进行以下准备工作:●检查供水源的水质,确保水质符合超滤管的使用要求;●检查超滤管的滤膜是否干净、完好;●检查超滤管上是否有杂质、污垢。

3.2 启动操作步骤●打开供水源;●缓慢开启超滤管的进水阀门,观察水流情况;●确保水流稳定后,逐渐打开出水阀门;●根据需要,调节出水阀门的开度,控制出水流量。

4.清洗与维护4.1 清洗为保持超滤管的滤膜清洁,定期进行清洗是必要的。

具体清洗方式根据超滤管的型号和使用要求而定,一般有以下几种方式:●反冲洗:用清水倒灌超滤管,以冲洗掉滤膜上的污垢;●化学清洗:使用合适的清洗剂进行超滤管的化学清洗。

4.2 维护●定期检查超滤管的滤膜状况,如有破损或老化,及时更换;●定期清洗超滤管,保持滤膜的通透性;●定期检查管道系统的连接是否松动,如有需要,及时紧固。

附件:1.超滤管安装示意图2.超滤管清洗记录表法律名词及注释:1.水质:指水中所含的各种物质和微生物的性质及其数量。

2.滤膜:超滤管中的薄膜,用于过滤和分离水中的杂质。

3.反冲洗:一种通过向超滤管中注入逆流水来清洗滤膜的方法。

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中文引言Amicon® Ultra-15离心过滤器具有快速超过滤功能,能够达到较高的浓缩系数,易于从稀释液和复杂的样本组合进行浓缩液回收。

其竖式设计以及可用的滤膜表面积能提供快速的样本处理和较高的样本回收率(通常大于90%稀薄的初始溶液),并能进行80倍浓缩。

典型的处理时间为15至60分钟,这取决于标称分子量限值(NMWL )。

竖式设计将溶质极化和之后造成的滤膜结垢降至最低,过滤装置中的物理止滤点防止过滤器旋转过度使样本干燥和造成样本损失。

浓缩液用移液管从过滤器的样本槽中收集,而超过滤滤出液则收集到所提供的离心管中。

该装置可在摆桶或定角转子中旋转。

Amicon® Ultra-15装置未经消毒,只供一次使用。

Amicon® Ultra-15产品系列有5种不同的截留分子量(标称分子量限值,NMWL ,或截留分子量,MWCO ):●Amicon® Ultra 3K 装置 — 3,000 NMWL ●Amicon® Ultra 10K 装置 — 10,000 NMWL ●Amicon® Ultra 30K 装置 — 30,000 NMWL ●Amicon® Ultra 50K 装置 — 50,000 NMWL ●Amicon® Ultra 100K 装置 — 100,000 NMWLAmicon® Ultra-15 10K 过滤器用于体外诊断,可用来在分析之前浓缩血清、尿液、脑脊髓液和其他体液。

Amicon® Ultra-15 3K, 30K, 50K 和100K 过滤器仅用于研究,不用于诊断程序。

用户指南Amicon ® Ultra-15离心过滤器用于体积不超过15 mL 的样本Amicon® Ultra-15 10K 装置,供体外诊断用Amicon® Ultra-15 3K, 30K, 50K 和100K 装置仅用于研究,不用于诊断程序。

应用●浓缩含有抗原、抗体、酶、核酸(单株或双株DNA/RNA样本)、微生物、洗出液和净化样本的生物样本●净化组织培养基提取液和细胞溶解液中的大分子成分,从反应混合液中去除引物、连接或分子标记,在HPLC之前去除蛋白质●除盐、更换缓冲液或渗滤所提供的材料Amicon® Ultra-15装置包括一个盖子、一个过滤器和一个离心管。

所需设备●带有摆桶式或定角式转子的离心器以及可以容纳50 mL试管的样本腔/试管座注意: 为了避免在离心过程中损坏装置,在旋转前请检查间隙。

●带有200微升(µL)尖端的移液管,用于浓缩液回收适用性为确保对预定用途的适用性,建议进行初步的回收和截留试验。

请参见“如何量化回收”部分。

装置储存与保质期储存在15–30 °C下。

保质期自生产之日起3年。

对于产品目录编号为UFC901008、UFC901024和UFC901096的产品,请参见包装标签上的失效日期。

预清洗Amicon® Ultra-15装置的超过滤薄膜含有微量甘油。

如果此材料干扰分析,可用缓冲液或Milli-Q®水预清洗。

如果干扰仍然存在,用0.1 N NaOH清洗,然后用缓冲液或Milli-Q®水再次清洗后甩干。

注意:Amicon® Ultra超过滤装置中的滤膜一旦润湿后应避免重新干燥。

若在预清洗后没有立即使用该装置,则让液体保留在滤膜上,直到使用该装置为止。

如何使用Amicon® Ultra-15离心过滤器1. 向Amicon® Ultra超过滤装置加入不超过15 mL的样本(如果使用定角转子则为12 mL)。

2. 将盖好盖子的过滤装置放入离心转子中,用一个类似的装置抵住。

3. 当使用摆桶转子时,以最大4,000 × g旋转约15–60分钟。

当使用定角转子时,装置的方向要使滤膜面板朝上,以最大5,000 × g旋转约15–60分钟。

说明: 关于典型旋转时间,请参见图1和图2以及表1和表2。

4. 如要回收浓缩后的溶质,在过滤装置底部插入一个移液管,然后左右摇摆着吸取样本,以确保完全回收。

超滤液可以保存在离心管中。

说明: 要想达到理想回收,离心后请立即取走浓缩后样本。

除盐或渗滤除盐、更换缓冲液或渗滤是去除含有生物分子的溶液中的盐分或溶剂的重要方法。

可以在Amicon® Ultra-15装置中,通过浓缩样本、然后向浓缩液加入任何所需溶剂复原至样本原始体积的方式,去除盐分或更换缓冲液。

可重复“洗出”过程,直到污染微溶质的浓度充分降低为止。

请参见下文举例。

蛋100 mM溶液200 µL蛋100 mMNaCl溶液NaCl200 µL蛋11.2 mMNaCl溶液NaCl加入14.8 mL10 mM NaCl或更换缓冲液图1.旋转条件: 4,000 × g ,室温,15 mL 起始体积。

所使用的蛋白质分子量标准: 对3K 和10K 使用细胞色素c ,对30K 和50K 使用BSA ,对100K 使用IgG ,n=6。

图2.旋转条件: 5,000 × g ,室温,12 mL 起始体积。

所使用的蛋白质分子量标准: 对3K 和10K 使用细胞色素c ,对30K 和50K 使用BSA ,对100K 使用IgG ,n=6。

性能流速影响流速的因素包括样本的浓度、起始体积、溶质的化学性质、相对离心力、离心转子的角度、滤膜类型以及温度。

图1和图2以及表1和表2可用来估计对各种蛋白质分子量标准达到给定的滤出液体积或浓度所需的时间。

15 mL 样本旋转时间一般约需15至60分钟(取决于装置的标称分子量限值)。

尽管大部分样本在离心过程的前15至30分钟滤过,但一般在旋转15至60分钟之后才能达到最低浓缩液体积(150–300 µL )。

流速,续表1. 典型的浓缩液体积与旋转时间(摆桶式转子)旋转条件: 4,000 × g,室温,15 mL起始体积。

所使用的蛋白质分子量标准: 对3K和10K使用细胞色素c,对30K和50K使用BSA,对100K使用IgG,n=6(3批滤膜的平均值)。

灰色的体积是用来计算表4中蛋白质回收量的体积。

表2. 典型的浓缩液体积与旋转时间(定角转子)旋转条件: 5,000 × g,室温,12 mL起始体积。

所使用的蛋白质分子量标准: 对3K和10K使用细胞色素c,对30K和50K使用BSA,对100K使用IgG,n=6(3批滤膜的平均值)。

灰色的体积是用来计算表4中蛋白质回收量的体积。

蛋白质截留率和浓缩液回收率Amicon® Ultra超过滤装置滤膜的特征由标称分子量限值(NMWL)描述,即它们截留超过一定分子量的分子的能力。

分子量接近NMWL的溶质可能只有部分被截留。

滤膜的截留率取决于溶质的分子大小和形状。

在大多数应用中,分子量是用来评估截留特性的一个方便的参数。

Merck Millipore Ltd.建议在浓缩应用中使用NMWL至少比蛋白质分子量小两倍的滤膜。

请参见表3。

表3. 蛋白质分子量标准的典型截留率表3和表4的旋转条件: 摆桶转子(4,000 × g, 15 mL 起始体积),或者定角转子(5,000 × g, 12 mL 起始体积),室温,n=6(3批滤膜的平均值)。

蛋白质截留率和浓缩液回收率,续决定样本回收率的因素包括相对于所选装置的NMWL的蛋白质溶质的性质、起始浓度和浓缩 系数。

表4提供了Amicon® Ultra-15装置的典型回收率。

表4. 典型的浓缩液回收率浓缩液体积 浓缩系数 浓缩液回收率灰色列取自表1和表2。

最大化样品回收率浓缩液中的样本回收量低可能由于吸附损失、过度浓缩、或者样本穿过滤膜造成。

●吸附损失取决于溶质浓度、其疏水性、温度、与过滤装置表面的接触时间、样本成分及pH值。

为最大限度地降低损失,离心后请立即取走浓缩后样本。

●如果样本起始浓度高,请监视离心过程,以免使样本过度浓缩。

过度浓缩可导致沉淀和样本损失。

●如果样本看起来渗过了滤膜,请选用较低NMWL的Amicon® Ultra-15装置。

如何量化回收使用以下方法计算总回收量、浓缩液回收率%及滤出液回收率%。

本程序可算出浓度最高约20 mg/mL的溶液的回收量近似值。

说明: 适当的化验技术包括吸收分光光度学法、放射免疫检定法、折光率及传导性。

直接称重程序大多数稀释蛋白的密度与水的密度大致相同 (即1 g/mL)。

利用这一特性,可通过称取浓缩液与滤过液重量并将其单位从克转化成毫升的方法,对其进行量化。

本方法仅适用于浓度不超过或约为20 mg/mL的溶液。

1. 使用之前,分别称取空的过滤装置、离心管和空的浓缩液收集管的重量。

2. 在过滤装置中加入溶液,然后重新称重。

3. 按说明组装装置和离心机。

4. 用移液管收集浓缩液,然后将其注入到已经预先称重的浓缩液收集管。

5. 从离心管上取下装置,然后称取离心管和浓缩液收集管的重量。

6. 减去空的装置/试管的重量,计算初始材料、滤过液及浓缩液的重量。

7. 化验初始材料、滤出液及浓缩液,以确定溶质浓度。

8. 使用重量/体积数据及所测出的浓度来计算回收量,方法如下:直接称重程序 续浓缩液回收率% = 100 ×滤出液回收率% = 100 ×总回收率% = 浓缩液回收率% + 滤出液回收率%W c = 化验前浓缩液总重量W o = 初始材料重量W f = 滤出液重量C c = 浓缩液浓度C o = 初始材料原始浓度C f = 滤出液浓度W c × C c W o × C oW f × C fW o × C o规格最大初始样本体积摆桶式15.0 mL 定角转子12.0 mL 典型的最终浓缩液体积150–300 µL 最大相对离心力摆桶式转子4,000 × g 定角转子5,000 × g有效膜面积7.6 cm 2尺寸试管中的过滤器(已盖上盖子)长度: 122 mm 直径: 29.7 mm过滤器长度: 72.0 mm 直径: 29.6 mm装置材料过滤器苯乙烯共聚物/丁二烯滤膜Ultracel®低粘合性再生纤维素膜滤出液管聚丙烯滤出液盖子和衬里聚乙烯化学相容性Amicon® Ultra超离心装置适用于生物液体及水溶液。

使用前,请检查样本与装置的化学相容性。

表5. Amicon® Ultra超过滤器的化学相容性酸浓度浓度氨基磺酸≤ 3%三氟乙酸(TFA)≤ 30%*甲酸 ≤ 5%*三氯乙酸(TCA)≤ 10%*磷酸 ≤ 30%硝酸 ≤ 10%硫酸 ≤ 3%盐酸 ≤ 1.0 M 乳酸 ≤ 50%乙酸 ≤ 50%*碱氢氧化铵≤ 10%氢氧化钠≤ 0.5 M醇甲醇≤ 60%异丙醇≤ 70%乙醇 ≤ 70%正丁醇≤ 70%洗涤剂Alconox®洗涤剂 ≤ 1%Triton® X-100表面活性剂≤ 0.1% CHAPS洗涤剂≤ 0.1%Tween® 20表面活性剂≤ 0.1% Lubrol® PX洗涤剂≤ 0.1%十二烷基硫酸钠 (SDS)≤ 0.1% Nonidet™-P 40表面活性剂≤ 2%脱氧胆酸钠≤ 5% Tergazyme®洗涤剂 ≤ 1%有机溶剂苯不建议使用三氯甲烷不建议使用吡啶不建议使用四氯化碳不建议使用丙酮不建议使用四氢呋喃不建议使用二甲亚砜 (DMSO)≤ 5%*乙腈≤ 20%甲苯不建议使用乙酸乙酯不建议使用甲醛≤ 5%其他苯酚≤ 1%咪唑≤ 100 mM 丙三醇≤ 70%尿素 ≤ 8 M 二硫苏糖醇(DTT)≤ 0.1 M巯基乙醇≤ 0.1 M焦碳酸二乙酯≤ 0.2%三羟甲基氨基甲烷缓冲剂(pH 8.2)≤ 1 M聚乙二醇≤ 10%碳酸钠≤ 20%磷酸盐缓冲剂 (pH 8.2)≤ 1 M盐酸胍≤ 6 M 硫酸铵饱和的* 与此化学物接触可能会造成部件的材料析出。

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