2.2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
一.研究思路
㈠.筛选菌株
㈡.统计菌落数目 ㈢.设置对照
㈠.筛选菌株
1、实例： DNA多聚酶链式反应是 一种在体外将少量DNA 大量复制的技术，此项 技术要求使用耐高温 （930C）的DNA聚合酶， 怎样在自然界中找到这 样的酶呢、、、、、 原因：因为热泉温度70～800C，淘汰了绝大多 数微生物只有Taq细菌被筛选出来。 启示：寻找目的菌种时要根据它对生存环境的 要求，到相应的环境中去寻找。
保证获得菌落 数在30～300 之间、适于计 数的平板
思考：为什么分离不同的微生物要采用 不同的稀释度？ 因为土壤中各类微生物的数量是不同的。
㈤.微生物的培养与观察 培养不同微生物往往需要不同培养温度。 细菌：30～37℃培养1～2d 放线菌：25～28℃培养5～7d 霉菌：25～28℃的温度下培养3～4d。
2、实验室中微生物的筛选原理：
人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括 营养、温度、pH等)，同时抑制或阻止其他微 生物生长。
3、选择培养基：在微生物学中，将允许 特定种类的微生物生长，同时抑制或阻 止其他种类微生物生长的培养基。目的 是从众多微海导航》P21左下角
实例：在做分解尿素的细菌的筛选与统计菌 落数目的实验时，A同学从对应的106 倍稀释的培养基中筛选出大约150个菌 落，但是其他同学在同样的稀释度下 只选择出大约50个菌落。分析其原因。
原因：⑴土样不同， ⑵培养基被杂菌污染或者培养基 中混入了其他的含氮物质)
方案一：由其他同学用与A同学相同土样进行实验 结果预测：如果结果与A同学一致，则证明A无 误；如果结果不同，则证明A同学的培养基被污 染或混入了其他含氮物质。 方案二：将A同学配制的培养基在不加土样的情 况下进行培养，作为空白对照，以证明培养基是 否受到污染。
注意事项
①为了保证结果准确，一般选择菌落数在 30—300的平板上进行计数。 ②为使结果接近真实值可将同一稀释度加 到三个或三个以上的平皿中，经涂布，培 养计算出菌落平均数。 ③统计的菌落往往比活菌的实际数目低。
㈢.设置对照：
对照实验：见书P23右上角
设置对照的主要目的：排除实验组中非 测试因素对实验结果的影响，提高实验 结果的可信度。
微生物的培养与观察
三.结果分析与评价
1.通过对照实验，若培养物有杂菌污染， 菌落数偏高；若培养物混入其他氮源，则 菌落形态多样，菌落数偏高，难以选择出 分解尿素的微生物。 2.提示：选择每个平板上长有30—300个 菌落的稀释倍计算每克样品的菌数最合适。 同一稀释倍数的三个重复的菌落数不能相 差悬殊，如相差较大，表示实验不精确。
小结：通过这个事例可以看出，实验结果 要有说服力，对照的设置是必不可少的。
二.实验的具体操作
㈠.土壤取样
从肥沃、湿润的土壤中取样。先铲去表层 土3cm左右，再取样，将样品装入事先准备好的
信封中。
◆取土样用的小铁铲和盛土样的的信封在使用
前都要灭菌。
㈡.制备培养基：
制备以尿素为唯一氮源的选择培养基。
[三]样品的稀释
大肠杆菌在伊红美蓝琼脂(EMB)上典型特征
大肠杆菌呈 黑色中心 ,有或无金属光泽
4、土壤中分解尿素的细菌的分离所用的选择培养基：
KH2PO4 NaH2PO4 MgSO4`7H2O 葡萄糖 尿素 琼脂
1.4g 2.1g 0.2g 10.0g 1.0g 15.0g
①从物理性质看此培养基属于哪类？ 固体培养基
②在此培养基中哪些作为碳源、氮源？
碳源：葡萄糖、尿素 氮源：尿素
③见教材P22问题2 培养基选择分解尿素的微生物的原理 培养基的氮源为尿素，只有能合成脲酶 的微生物才能分解尿素，以尿素作为氮 源。缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿 素，缺乏氮源而不能生长发育繁殖，而 受到抑制，所以用此培养基就能够选择 出分解尿素的微生物。
2.间接计数法（活菌计数法） ⑴原理：在稀释度足够高时，微生物在固 体培养基上所形成的一个菌落来源于样品 稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的 菌落数就能推测样品中大约有多少个活菌。
⑵常用方法：稀释涂布平板法。
每克样品中的菌落数＝(C÷V)×M
其中，C代表某一稀释度下平板上生长的平 均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液 的体积(ml)，M代表稀释倍数。
在菌落计数时，每隔24h统计一次菌落数目。 选取菌落数目稳定时的记录作为结果，以 防止因培养时间不足而导致遗漏菌落的数 目。
◆如果得到了2个或2个以上菌落数目在30— —300的平板，则说明稀释操作比较成功， 并能够进行菌落的计数，如果同一稀释倍数 的三个重复的菌落数相差较大，表明试验不 精确，需要重新实验。
四、操作提示
无菌操作 做好标记 规划时间
五.课外延伸
在以尿素为唯一氮源的培养基中加入 酚红指示剂。培养某种细菌后，如果PH 升高，指示剂将变红，说明该细菌能够 分解尿素。
测定饮水中大肠杆菌数量的方法是将一定体积的水 用细菌过滤器过滤后，将滤膜放到 伊红美蓝 培养 基上培养，大肠杆菌菌落呈现黑色，通过记述得出 水样中大肠杆菌的数量。
④怎样证明此培养基具有选择性呢？
培养基类型
是否 接种 结果
以尿素为 实验组 唯一氮源 的培养基
是
只生长能 分解尿素 的细菌
牛肉膏 对照组 蛋白胨 培养基
是
生长多 种微生 物
（二）.统计菌落数目： 1、显微镜直接计数 先将待测样品制成悬液，然后取一定 量的悬液放在显微镜下进行计数。根据在显 微镜下观察到的微生物数目来计算出单位体 积内的微生物总数。 优点：设备简单、能观察微生物的形态特征。 缺点：不能区分死菌和活菌； 难以计数微小的细菌。 一般用于纯培养悬浮液中各种单细胞菌体的 计数。
◆应在火焰旁称取土壤10g。 ◆在稀释土壤溶液的过程中，每一步都要在 火焰旁进行
（四）.取样涂布
◆实验时要对培养皿作好标记。注明培 养基类型、培养时间、稀释度、培养物 等。
（四）.取样涂布 ◆分离不同的微生物采用不同的稀释度
稀释倍数 目的
细菌
放线菌 真菌
104、105、106
103、104、105 102、103、104
课题2 土壤中分解尿素的细菌的 分离与计数
一、课题背景
1、尿素的利用 尿素是一种重要的农业氮肥。尿素不能直接 被农作物吸收。土壤中的细菌将尿素分解成氨之 后才能被植物利用。 2、细菌能利用尿素的原因 土壤中的细菌分解尿素是因为它们能合成脲酶
3、课题目的 ①从土壤中分离出能够分解尿素的细菌
②统计每克土壤样品中究竟含有多少这样 的细菌
“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”的教学设计与实施-
“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”的教学设计与实施1教材分析与课时安排“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”是人教版高中生物（选修1）专题2“微生物的培养与应用”的第二个课题，学生已学习了有关培养基和无菌技术的基本知识，在掌握使用平板划线法和稀释涂布法、分离和纯化微生物的实验操作的基础上，研究培养基对微生物的选择作用，并测定其数量。
其中既有关于特定菌株的选择策略等知识性内容，又有土壤溶液的稀释、菌落数量统计等操作性内容，难度较大、探究性较强，是培养学生设计实验、动手操作等科学探究能力，提高生物科学素养的好素材。
本课题教学实施中的关键在于两点：①教师要处理好知识性内容与操作性内容的关系，要让学生理解特定菌株的选择策略，并学习有关的实验方法和操作程序;②处理好课常与课后的关系。
本课题的实验操作时间不长，但是操作前要制备培养基、对培养基和其他操作用具进行灭菌，操作后的培养时间和对微生物进行观察则需要较长时间，因此需要教师精心设计教学程序，统筹安排教学时间。
根据这一教材特点，本课题教学可分2个课时进行，2个课时之间应留有2 d左右的间隔，以便进行微生物的培养与观察。
2教学目标2.1知识目标简述稀释涂布平板法分离微生物和进行微生物计数的实验原理;说出选择性培养基和鉴别性培养基的用途;归纳分离纯化微生物的原理和方法。
2.2能力目标学会制备土壤样本稀释液，学会用稀释涂布法将菌样液接种到固体培养基平板;学会用稀释涂布平板法进行微生物数量测定的方法。
2.3情感、态度与价值观目标体验科学知识的形成过程，加深对科学本质的理解;体会在实验活动中合作学习的有效性，养成严谨的科学态度。
3教学准备3.1土壤样品的采集以及土壤溶液的配制为保证实验取得预期效果，应选择经常施用尿素的农田，铲去表土后采集3～8 cm深度范围内的土壤;回实验室后，去除土壤中的植物枯枝败叶及其他杂物，用托盘天平称取样品10 g，加入到盛有90g无菌水的锥形瓶中，震荡10min，即制得101土壤溶液;制备完成后可置于冰箱冷藏室内备用（1～2 d）。
高考生物复习_2.2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
练一练 测定土壤中细菌数量一般选 10 10 10 倍的稀释液进行平板培养；而真菌的 10 倍稀释， 数量，一般选用100、1000、 其原因是（ ） A 细菌个体小，真菌个体大 B 细菌易稀释真菌不易稀释 C 细菌在土壤中含量比真菌高 D 随机的，没有原因
4
5
6
4
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下列能选择出分解尿素的细菌的培养基是( ) A. KH2PO4、NA2HPO4、MgSO4.7H2O、 葡萄糖、尿素、琼脂、水 B. KH2PO4、NA2HPO4、MgSO4.7H2O、 葡萄糖、琼脂、水 C. KH2PO4、NA2HPO4、MgSO4.7H2O、 尿素、琼脂、水 D. KH2PO4、NA2HPO4、MgSO4.7H2O、 点此播放教学视频 牛肉膏、蛋白胨、琼脂、水
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练一练
用稀释涂布平板法来统计样品中活菌的 数目，其结果际值一致 D.比实际值可能高也可能低
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2.土壤中分解尿素细菌的计数
有些细菌含有尿素分解酶，能将尿素琼脂培养基中的尿素分 解生成氨，氨溶于水变成氢氧化铵，导致培养基变成碱性， 使酚红指示剂呈现红色。
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2、间接计数法：最常用稀释平板计数法。 含菌数较少的情形下，也可以完成计数。
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实践案例
土壤中好气性细菌的计数
测定土壤中的含菌量可以作为判定土壤肥力的一个 重要指标。 活动程序： 1、制备土壤稀释液 ①取土壤表层土样 ②称取1g土样，放入99ml无菌水锥形瓶中，振荡 20min，即成100倍稀释液。 ③移液、稀释 用同样方法可制成 104 105倍的系列稀释菌液。
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课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
【土壤中分解尿素的细菌的分离和计数】一、研究思路1．筛选菌株尿素是一种重要的肥，农作物不能直接吸收利用，而是首先通过土壤中的细菌将尿素分解为和CO2，才能被植物利用，土壤中的这些细菌之所以能分解尿素，是因为它们能合成。
可以利用这一特点，将其从土壤中筛选出来。
(1)实验室中微生物筛选的原理：人为提供有利于_____ _生长的条件(包括营养、、pH等)，同时____ _或其他微生物生长。
(2)选择培养基：在微生物学中，将允许的微生物生长，同时和其他种类微生物生长的培养基，称作选择培养基。
2．统计菌落数目(1)常用来统计样品中数目的方法是__________ _______。
即当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中。
通过统计平板上的，就能推测出样品中大约含有多少活菌。
为了保证结果准确，一般选择菌落数在的平板进行计数。
例如每克样品中的菌株数= ,C代表 ,V代表 ,M代表。
通常统计出的菌落数比活菌的实际数目。
这是因为。
因此，统计结果一般用而不是活菌数来表示。
(2) 也是测定微生物数量的常用方法。
(3)细菌的数目还可以通过法来测定。
例如，测定饮水中大肠杆菌的数量，可将的水用细菌过滤器过滤后，将滤膜放到培养基上培养，大肠杆菌菌落呈现色，可以根据培养基上的数目，计算出水样中大肠杆菌的数量。
在该实验中至少应取___个水样。
3．设置对照(1)设置对照的主要目的是排除实验组中___________对实验结果的影响，提高实验结果的。
例如为了排除培养基是否被杂菌污染了，需用______________________________ 作为空白对照。
(2)对照实验是指除了的条件外，其他条件都的实验，其作用是比照实验组，排除任何其他可能原因的干扰，证明确实是所测试的条件引起相应的结果。
二、实验设计实验设计包括对实验方案，所需仪器、材料，用具和药品，具体的以及时间安排等的综合考虑和安排。
关于土壤中某样品细菌的分离与计数的实验操作步骤如下：1．土壤取样土壤微生物约70%～80%为，主要分布在距地表的近性土壤中。
土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
一、研究思路
自然界中目的菌株筛选的依据： 根据目的菌株对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找。
为什么Taq细菌能从泉中被筛选出来呢？ 热泉70-80℃的高温条件淘汰了绝大多数微生物，而使耐热的 Taq细菌脱颖而出。
实验室中微生物的筛选原理：
人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度、pH 等)，同时抑制或阻止其他微生物生长。
【选择培养基】
允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其
他种类微生物生长的培养基。
【 分 析 培 养 基 】
下面是本课题将用到的培养基配方，请根据下表回答下面的问题。 将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1000 mL (1)在该培养基的配方中，为微生物提供碳源的是________，提供氮源的是 ________。 (2)绝大多数微生物都能利用________，但是，只有能合成脲酶的微生物才能分 解________。 (3)分析该培养基的配方，该培养基对微生物是否具有选择作用？如果具有，又是 如何进行选择的？ 具有。以尿素为唯一氮源的培养基可以分离到产生脲酶的微生物 _______________________________________________________________ _______________________________________________________________ _______________________________。
放线菌： 25∼28℃， 5∼7 d ；
霉菌：25∼28℃， 3∼4 d。 2．观察：每24h统计一次菌落数目；以“稳定菌落”为观察对象。
实验03土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
专题03土壤中分解尿素的细菌的分离与计数一、实验原理：（1）土壤中的细菌之所以能分解尿素是因为它们能合成尿酶。
（2）配置以尿素为唯一氮源的培养基，能够在这个培养基上生长的细菌就是能分解尿素的细菌。
二、操作步骤：(1)土壤取样①土壤要求：酸碱度接近中性且潮湿。
②取样部位：距地表约3～8 cm的土壤层。
(2)样品的稀释测定土壤中细菌的数量，一般选用1×104、1×105和1×106倍稀释的稀释液进行平板培养，当第一次做这个实验时可以将稀释的范围放宽一点。
(3)微生物的培养与观察①培养：根据不同微生物的需要，控制适宜的培养温度和培养时间。
细菌一般在30～37 ℃的温度下培养1～2 d。
②观察a．观察方法：每隔24 h统计一次菌落数目，选取菌落数目稳定时的记录作为结果。
b．记录菌落的特征：包括菌落的形状、大小和颜色等。
2、灭菌培养基：高压蒸汽灭菌法3、培养皿灭菌：干热灭菌法三、操作提示(1)无菌操作①取土样的用具在使用前都需要灭菌。
②实验操作均应在酒精灯火焰旁进行。
(2)做好标记：本实验使用的平板和试管较多，为避免混淆，最好在使用前做好标记。
例如，在标记培养皿时应该注明组别、培养日期和平板上培养样品的稀释度等。
(3)制定计划：对于耗时较长的生物实验，需要事先规划时间，以便提高实验效率，在操作时有条不紊。
土壤中分解尿素的细菌的分离与计数操作中需注意的问题(1)为了保证结果准确，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数。
(2)恰当的稀释度是成功统计菌落数目的关键。
(3)为增强实验说服力与准确性，设计实验时，需要涂布至少三个平板作为重复组，目的是排除实验中偶然因素对实验结果的影响。
(4)分析实验结果时，要考虑重复组结果是否接近，如果相差太大，意味着操作有误，需重新实验。
(5)为防止培养时间不足导致菌落遗漏，在菌落计数时，每隔24 h统计一次菌落数目，选取菌落数目稳定时的记录作为结果。
土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
耐高温的酶
寻找
寻找 耐高温生物体 耐高温环境（热泉等）
小结：从自然界筛选目的菌株的原则：
根据微生物对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找。
耐盐微生物
盐碱地等高盐的环境
冰川
耐寒微生物
分解石油的细菌
油田
2、 实验室中微生物的筛选 筛选原则：人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营 养、温度、pH等)，同时抑制或阻止其他微生物生长。
（二）制备培养基
制备选择培养基（尿素为唯一氮源） 制备牛肉膏蛋白胨培养基 思考：为什么要制备牛肉膏蛋白胨培养基？ （对照作用）
相同的菌液，在牛肉膏蛋白胨培养基上生长的菌落数目应 明显多于选择培养基上的数目，因此，牛肉膏蛋白胨培养基 可以作为对照，用来判断选择培养基是否起到了选择作用。
（三）稀释涂布平板
（1）测土壤中细菌数： 一般用104、105、106稀释液
（2）测放线菌： 一般用103、104、105稀释液 （3）测真菌数： 一般用102、103、104稀释液 以保证获得菌落数在30-300之间。
思考：（P24页左侧）
原因：不同微生物在土壤中含量不同
（三）稀释涂布平板
每个稀释度均用3个选择培养基和1个牛肉膏蛋白胨培养基 为保证计算结果准确 ①选择菌落数在30～300的平板上计数。 ②每个稀释度取3个或以上平板做重复组，其平均值。
三、设置对照 （三）设置对照：
（1）设置对照的目的： 是排除实验组中非测试因素对实 验结果的影响，提高实验结果的可信度。 （2）对照实验： 指除了被测试的条件外，其他条件都相同的实验。
请你通过设置对照实验，（P23页），帮助A同学排除上述两个可 能影响实验结果的因素。 可能原因 设置对照 实验结论 其他同学用与A同学 如结果与A同学一致，则证明 土样不同 相同土样进行实验 A无误；反之，则证明A同学 失误 若有菌落出现，则培养基被污染 培 养 基 污 染 或 将A同学的培养基不接种， 培 养 中 混 入 了 进行培养，作为空白对 若无菌落出现，则没污染 照 若菌落数和A同学一致，说明培养基 其他的含氮物 中混入了其他含氮物质，若菌落数 其他同学用A同学的培养 质) 与其他同学一致说明培养基中没有
土壤中分解尿素的细菌的分离和计数
专题2 微生物的培养与应用课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离和计数课题背景尿素是一种重要的农业氮肥。
但是，尿素不能直接被农作物吸收，只有当土壤中的细菌将尿素分解成之后，才能被植物吸收。
细菌为什么能分解尿素？怎样分解的？（写出化学反应式）一、基础知识（一）筛选菌株1、实验室微生物的筛选原理是什么？2、培养基（1）分析右边的培养基配方，回答：○1在该培养基的配方中，为微生物的生长提供碳源和氮源的分别是什么物质？○2分析该培养基的配方，想一想这种培养基对微生物是否有选择作用？如果具有，是如何进行选择的？（2）在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他微生物生长的培养基，称作。
（二）统计菌落数目测定微生物数目的常用方法：、1、显微镜直接计数法：（1）原理?利用特定细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下计算一定容积的样品中微生物的数量。
（2）显微镜直接计数法的缺点是什么？2、稀释涂布平板法（活菌计数法）（1）为什么通过测平板上的菌落数可以推测样品中的活菌数？（2）如何根据平板上的菌落数推测出每克样品中的菌株数？【例题】某同学在稀释倍数为106的培养基上测得平板上的菌落数的平均值为234，那么每毫升样品中菌落数是（涂布平板时所用稀释液的体积为0.1ml）（）A. 2.34X108B. 2.34X109C. 234D.23.4（3）统计的菌落数往往比活菌的实际数目高还是低？为什么？特别注意：统计结果一般用菌落数而不是活菌数来表示。
【实例分析1】两位同学用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数。
在对应稀释倍数为106的培养基中，得到以下两种统计结果。
1.第一位同学在该浓度下涂布了一个平板，统计的菌落数为230。
2.第二位同学在该浓度下涂布了三个平板。
统计的菌落数分别为21、212和256.该网学以这三个平板上菌落数的平均值163作为统计结果你认为哪位同学的结果接近真实值?你认为这两位同学的实验需要改进吗?如果需要，如何改进?【实例分析2】在做本课题的实验时，A同学从对应106倍稀释的培养基中筛选出大约150个菌落。
2.2 土壤中分解尿素的细菌的分离和计数
（一）筛选菌株
3、选择培养基
根据微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性不
同，配制的允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他
种类微生物生长的培养基。
本课题使用的选择培养基
物理特性：固体培养基 功能特性：选择培养基
例：用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数，在对应 稀释倍数为106的培养基中，得到以下几种统计结果，正确的是
(D )
A．涂布了一个平板，统计的菌落数是230
B．涂布了两个平板，统计的菌落数是215和261，取平均值238
C．涂布了三个平板，统计的菌落数分别是21、212和256，取平 均值163
【解析】稀释倍数为106，0.1 mL稀释液的菌落数的平均值为234，则每 毫升样品中菌落数就为234/0.1×106=2.34×109。
（二）统计菌落数目
2.间接计数法→活菌计数法
（1）原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一 个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。
（2）常用Байду номын сангаас法：稀释涂布平板法。
葡萄糖
10.0g
不缺能乏分氮解源尿的素培，养缺基乏—氮—源分而离不固能氮生微长生物
尿素 琼脂
1.0g 15.0g
发在育无繁氧殖条，件而下受的到普抑通制培，养所基以—用—此分培离厌氧型将和上兼述性物质厌溶氧解型后微，用生蒸物馏水
养基就能够选择出分解尿素的微生物。
定容到1000mL。
例：下列能筛选出分解尿素的细菌的培养基是( A )
但A同学认为自己选用土壤样品不同导致结果不同，但是A同学没 有设计对照，拿不出让同学信服的证据。你能通过设置对照，帮助A同 学排除上述两个可能影响因素吗？
选修一 2-2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
选修一2-2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数1.选择作用。
2.用稀释涂布平板法对微生物进行计数。
一、研究思路1.筛选菌株尿素是一种重要的农业___肥,但不能直接被农作物吸收利用,只有当土壤中的细菌将尿素分解成___之后,才能被植物利用。
土壤中的细菌之所以能分解尿素,是因为它们能合成______。
反应式为：___________________________________________。
(1)实验室中微生物筛选的原理:人为提供有利于___________生长的条件(包括营养、_____、pH等),同时_____或_____其他微生物生长。
(2)选择培养基:在微生物学中,将允许__________的微生物生长,同时_____或_____其他种类微生物生长的培养基,称做____________。
思考1：分解尿素的细菌的培养基配方中，为微生物的生长提供碳源和氮源的分别是什么物质？答：碳源：______________氮源：___________。
思考2：此配方有什么特点？该培养基对微生物是否有选择作用？如果有，是如何进行选择的？答：特点：____________。
_______，_________________________________________________。
(3)选择培养基的类型：①利用培养基的特定化学成分分离特定微生物。
②通过某些特殊环境分离微生物。
③通过改变培养基的营养成分达到分离微生物的目的。
④依据某些微生物对某种物质的抗性。
【辨一辨：下列例子属于哪一种类型的选择培养基？】①当尿素是唯一氮源时,可抑制不能利用尿素的微生物生长,使能够利用尿素的微生物生存,从而分离出能分解尿素的微生物。
利用培养基的_____________________分离特定微生物。
②在高温环境中可分离得到耐高温的微生物,其他微生物在高温环境中因酶失活而无法生存。
通过某些____________________分离微生物。
2.2土壤中分解尿素的细菌的分离
尿素分子的立体结构
CO(NH2)2+H2O
CO2+NH3
（一）筛选菌株
水生耐热细菌Taq ( Thermus aquaticus ) 耐高温的Taq DNA聚合酶 美国微生物学科布鲁克（T.Brock) 1966年发现耐热细菌
一般来说，在一定的培养条件下（相同的培养 基、温度及培养时间），同种微生物表现出稳 定的菌落特征。
〖思考3〗土壤微生物种类最多、数量最大的原因 是什么？ 土壤中营养物质含量丰富，环境条件适宜等。 〖思考4〗在研究未知微生物时务必规范操作，以 防被致病微生物感染，实验后一定要洗手。
[一]无菌操作
筛选原理
科学家能从热泉中把耐热细菌筛选出来是因为 热泉的高温条件淘汰了绝大多数微生物 ，这样也适 用于实验室中微生物的筛选，原理是 人为提供有利于 目的菌株生长的条件 （包括 营养 、 温度、PH 等）， 同时 抑制或阻止 其他微生物生长 。 选择培养基 在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长， 同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基。 点评：生物适应一定环境，环境对生物具有 选择作用。 所以通过配制选择培养基、控制培养条件等 选择目的微生物。
鉴定原理：
在细菌分解尿素的化学反应中，细菌合成 的 脲酶 将尿素分解成了 氨 。氨会使培养 基的碱性 增强 ，PH 升高 。因此，我们可 以通过检测培养基 pH 变化来判断该化学 反应是否发生。
CO(NH2)2+H2O
CO2+NH3
练习：
1．从土壤中分离能分解尿素的细菌，可以利 用选择培养基，其成分中一定有 A （1）尿素 （2） 有机氮化合物 （3）无机盐 （4） 有机碳化合物 （5） 水 （6）无机碳化合物 A （1）（3）（4）（5） B （2）（3）（4）（5） C （1）（3）（5）（6） D （2）（3）（5）（6）