1掌握紫外分光光度计的操作方法(精)
紫外分光光度计仪器使用说明
ＴＵ―1901/1900简单操作步骤(UVWIN5.0版软件）一、开机打开稳压电源，等5-10秒，稳压电源稳定后依次打开打印机、计算机，等待计算机正常进入到桌面后，再打开仪器主机电源。
二、仪器初始化打开仪器主机电源后，确定样品池内没有挡光物（干燥袋或比色皿等）。
双击桌面的“紫外软件”图标，（或点击“开始”菜单，选择“程序”，找到“Uvwin5紫外软件”，选择“Uvwin5紫外软件”）；等待仪器进行初始化，每一项检查“正确”后进行测量。
三、测量1、正确放入比色皿：TU-1901仪器是双光束分光光度计，要在两个样品池内都放入空白溶液（或参比溶液）进行空白校正。
然后只取出外侧的比色皿，放入测量的样品进行读数。
备注：样品池内侧的参比溶液在测量中不能取出，除非空白溶液改变或测量波长改变才拿出重新进行空白校正。
2、选择测量功能：Uvwin5紫外软件提供了丰富的测量功能，根据需要在“工作室”内选择所需要的测量方式。
测量方式简介：①光度测量：可以做单个波长或多个波长下的吸光度（或透过率）测量。
②光谱扫描：主要测量样品的图谱做定性分析，即寻找测量样品的最大吸收峰。
③定量测定：主要通过测量标准样品自动建立工作曲线，来测量样品的浓度。
④时间扫描：主要测量样品在一定波长下随时间的变化曲线。
也称动力学测量。
3、设置参数：选择好测量方式后，直接按F4，（或点击“测量”，在下拉菜单中选择“参数设置”）进入参数设置界面。
主要设置测量波长。
设置完成后一定单击“确定”，完成设置。
4、空白校正：正确放入空白溶液后，点击“校零”（在光谱扫描功能下是“基线”）键进行空白校正。
5、读数：空白校正完成后，正确放入样品，点击“开始”键（或按F9）进行测量。
四、完成：测量完成后根据需要保存或打印测量数据。
退出紫外程序后如果不保存数据将清除。
五、关机一定要取出样品池内的所有比色皿，关闭Uvwin5紫外软件。
退出紫外操作系统后，依次关掉主机、计算机、打印机电源。
常见化学仪器紫外分光光度计的用途和使用方法
常见化学仪器紫外分光光度计的用途和使用方法你对紫外分光光度计感兴趣啊？那太好了，今天就跟我一起探个究竟吧！首先，让我们了解一下紫外分光光度计是个什么宝贝。
简单来说，它是一种用来测量液体样品中光吸收情况的仪器。
你可以把它想象成一个超级聪明的“侦探”，专门用来找出你样品里究竟藏了哪些化学成分。
1. 紫外分光光度计的用途1.1. 化学分析首先，紫外分光光度计在化学分析中可是大显身手的。
例如，化学家们常用它来确定溶液中的物质浓度。
就像你要知道一杯水里加了多少糖一样，它也可以告诉你样品里含有多少某种化学物质。
这对于药品研发、食品检测都是必不可少的工具。
1.2. 环境监测再来，这台小家伙在环境监测方面也能大展拳脚。
比如，它能帮忙检测水源里的污染物含量。
如果你觉得喝的水有点怪怪的，它能帮你搞清楚水里是不是藏着不该有的东西。
简单地说，它就像个无形的“警察”，时时刻刻保护我们的环境。
2. 如何使用紫外分光光度计2.1. 准备工作使用紫外分光光度计之前，我们得做好准备工作。
首先，你需要确保仪器的光路干净，没有灰尘。
如果光路脏了，测量结果可能就会大打折扣。
想象一下，如果你看电影的屏幕上有脏污，画面肯定会模糊，对吧？同样的道理适用于紫外分光光度计。
2.2. 校准仪器接着，校准仪器是关键步骤。
每次使用前，你都需要用已知浓度的标准溶液来调整仪器。
这就像给仪器做个体检，确保它能“健康”地工作。
通常，仪器的操作界面会引导你完成这些步骤，不用太担心。
3. 实际操作3.1. 取样与测量然后，就可以开始测量了。
首先，你需要取一份样品，放在仪器的样品池里。
这个池子就像一个小房间，样品在里面接受“审问”。
接下来，选择合适的波长，这个过程就像为样品选择最佳的光线，以便它能“真实”地展示自己的特征。
3.2. 记录结果最后，记录结果是很重要的。
如果你得到的数据跟预期有出入，不妨检查一下是否有其他因素干扰了测试。
比如，光源的强度是否正常，样品是否干净等等。
紫外可见分光光度计操作规程
紫外可见分光光度计操作规程一、仪器准备1.打开紫外可见分光光度计，等待它进行自检。
2.检查仪器是否正常，包括光源、检测器、单色器等。
如有故障，请及时修复或更换。
3.将样品室清洁干净，并检查透射池是否干净。
如有污染，请用纯水和无尘纸擦拭。
二、仪器校准1.对紫外可见分光光度计进行校准。
校准包括零点校准和波长校准。
2.零点校准：使用纯溶剂（例如纯水或纯乙醇）进行零点校准。
在选定的波长下，将溶剂放入透射池中，点击“零点校准”按钮进行校准。
3.波长校准：使用已知浓度且吸收峰位清晰的标准品进行波长校准。
在选定的波长下，将标准品放入透射池中，点击“波长校准”按钮进行校准。
三、样品测试1.取出已经准备好的样品，在样品室中放入透射池。
2.选择合适的波长范围和波长值。
根据样品的吸收峰位和浓度范围，选择一个适当的波长范围。
四、测量样品吸光度1.点击“开始”按钮进行测量。
仪器将在选定的波长下自动扫描，显示吸光度曲线。
2.观察吸光度曲线，确定样品的吸收峰位和吸光度值。
五、数据处理和结果记录1.根据吸光度曲线，确定样品的吸光度值。
可以选择峰值吸光度或在特定波长下的吸光度值。
2.如果需要，可以进行数据处理，例如计算吸光度差、构建标准曲线等。
3.记录测量结果，包括样品名称、浓度、波长范围、吸光度值等信息。
六、仪器维护1.测量完毕后，及时清洁透射池和样品室，避免样品残留。
2.关闭紫外可见分光光度计，并将仪器盖上，以防尘埃进入。
3.定期维护仪器，例如清洁光源、调整灯泡亮度等。
七、注意事项1.在操作过程中，避免直接接触光源和检测器，以免引起损坏。
2.使用纯净溶剂进行校准，避免杂质对测量结果的影响。
3.在进行波长校准时，选择已知浓度且吸收峰位清晰的标准品，以确保测量结果的准确性。
4.在清洁透射池时，使用纯净水和无尘纸进行擦拭，避免使用有机溶剂和粗糙材质。
5.操作过程中避免碰撞和震动仪器，以免影响测量结果。
6.长时间不使用时，及时关闭仪器，以延长仪器寿命。
紫外分光光度法实验报告
一、实验目的1. 掌握紫外分光光度法的基本原理和操作方法。
2. 学会使用紫外分光光度计进行物质的定量分析。
3. 了解紫外吸收光谱的特点和应用。
二、实验原理紫外分光光度法是利用物质在紫外光区域（波长范围为190-400nm）对光的吸收特性来进行定量分析的方法。
根据朗伯-比尔定律，当一束单色光通过含有吸光物质的溶液时，溶液的吸光度（A）与溶液的浓度（c）和光程（l）成正比，即 A = εcl，其中ε为摩尔吸光系数。
三、实验仪器与试剂仪器：1. 紫外分光光度计2. 移液器3. 容量瓶4. 烧杯5. 玻璃棒试剂：1. 标准溶液：已知浓度的待测物质溶液2. 水为溶剂3. 乙醇或其他有机溶剂四、实验步骤1. 仪器准备：打开紫外分光光度计，预热10分钟，确保仪器稳定。
2. 空白实验：用移液器取少量溶剂，加入比色皿中，置于紫外分光光度计的样品室，调节仪器至650nm波长，记录吸光度值（A0）。
3. 标准溶液测定：用移液器取不同体积的标准溶液，分别加入比色皿中，重复步骤2，记录吸光度值。
4. 待测溶液测定：用移液器取少量待测溶液，重复步骤2和3，记录吸光度值。
5. 数据处理：以标准溶液的浓度为横坐标，对应的吸光度值为纵坐标，绘制标准曲线。
根据待测溶液的吸光度值，从标准曲线上查得待测溶液的浓度。
五、实验结果与讨论1. 标准曲线：根据实验数据绘制标准曲线，曲线呈线性关系，相关系数R²>0.99，说明实验结果可靠。
2. 待测溶液浓度：根据标准曲线，从待测溶液的吸光度值查得待测溶液的浓度为x mol/L。
3. 误差分析：实验过程中可能存在的误差包括移液器误差、比色皿误差、操作误差等。
通过多次重复实验，可以减小误差的影响。
六、结论本实验通过紫外分光光度法测定了待测物质的浓度，结果表明该方法操作简便、准确度高、重复性好，适用于物质的定量分析。
七、注意事项1. 实验过程中应保持比色皿的清洁，避免污染。
2. 严格遵守操作规程，确保实验结果的准确性。
分光光度计使用原理及操作方法简洁范本
分光光度计使用原理及操作方法分光光度计使用原理及操作方法一、分光光度计的原理分光光度计是一种测量样品溶液中吸收或透射光强的仪器。
它的基本原理是通过将可见光或紫外光通过样品溶液后，测量出光强的变化，从而得知样品溶液中物质的浓度或其他性质。
分光光度计的原理可以分为下面几个步骤：1. 光源发射：分光光度计通常使用可见光或紫外光作为光源。
这些光经过滤波器减少杂散光，通过准直系统形成平行光束。
2. 样品测量：经过准直系统形成的平行光束通过样品溶液，样品中吸收或透射一部分光。
被吸收的光与未经样品的光进行比较，通过这种比较可以得到吸光度或透光度。
3. 光电传感器检测：被吸收或透射后的光通过光电传感器检测并转化为电信号。
光电传感器常用的有光电二极管或光电倍增管。
4. 信号处理和显示：光电传感器转化的电信号经过放大和滤波处理后，通过计算机或显示器显示出吸光度或透光度的数值。
二、分光光度计的操作方法1. 准备工作：在使用分光光度计之前，需要进行准备工作。
这包括检查仪器是否处于正常工作状态，校准仪器的零点，确认样品槽或比色皿是否清洁干净。
2. 设定波长：根据需要测量的物质，设定合适的波长。
分光光度计通常具有可以选择波长的旋钮或按钮，通过旋转或按键来设定所需的波长。
3. 参比校正：为了确保测量结果的准确性，需要进行参比校正。
这可以通过将参比溶液放入样品槽，并记录下参比物质的吸光度或透光度值。
然后将样品溶液放入样品槽中进行测量。
4. 测量样品：将待测样品溶液放入样品槽中，确保溶液填满槽，并将样品槽放入分光光度计中。
根据需要选择透射模式或吸收模式，开始测量。
5. 记录和分析：根据测量结果记录样品的吸光度或透光度值。
可以根据所测得的数值进行进一步的数据分析和计算。
6. 清洁操作：在使用完毕后，及时清洁分光光度计的样品槽和其他部件，以确保下次使用时的准确性和可靠性。
三、注意事项1. 避免阳光直射：分光光度计的使用需要避免阳光直射，以免影响测量的准确性。
紫外可见分光光度计操作步骤及注意事项简介
紫外可见分光光度计操作步骤及注意事项简介操作步骤操作之前1.1开启电源进行初始化开启主机电源，分光光度计将按屏幕所显示的项目进行自检和初始化，如下图所示。
所有项目检测完毕，初始化结束，整个过程大约需要4min（若使用多池检测需5min）。
每个项目进行初始化操作时将被加亮显示，当初始化完成后，该项右边的星标也将加亮显示。
但是，如果检测到任何异常，初始化过程将立即中止，星标也不会加亮显示。
1.2屏幕显示和触摸键盘UV-1700的触摸键盘图可用数字键0~9和功能键F1~F4选择不同屏幕中的模式和设置。
选择时，按下相应的数字键或功能键即可，无需按ENTER键确认。
此外，输入数值时，如波长设置或显示模式等，必须按ENTER键确认输入值。
下面介绍每个键的基本功能，在不同屏幕下有一些键可能被赋予特殊的功能。
①START/STOP键一旦参数设置完成，可用该键开始和停止测量过程。
②AUTO ZERO键按该键，当前波长的吸光度自动调整为0（100%T）。
测量前，必须确保在样品侧和参比侧中都放有盛有空白的比色池。
③GOTOWL键该键可用来改变当前的波长。
④ENTER键输入数值后，按该键确认。
⑤Cursor光标键（＜（-），＞）这组键可控制液晶显示屏幕中光标的左右移动。
输入数值时，左光标键还可以用来输入负值（-）。
⑥Function功能键（F1~F4）这组键的功能与液晶显示屏幕下方所显示的功能相对应。
⑦RETURN键按下该键可返回当前屏幕的前一屏。
⑧MODE键用该键可从每种测量模式的参数设置屏返回到主模式屏。
⑨Print打印键用该键可输出当前屏幕显示的硬拷贝。
⑩Numeric数字键用该键可输入数值？CE键用该键可清除数值输入错误。
按该键，已输入的数值将被清除，可重新输入正确的数值。
模式选择和共享操作初始化完成后即显示模式选择屏幕各种模式概述：在模式选择屏幕下选择各种测量模式，即显示各自的参数配置屏幕。
①光度模式在固定波长下测量样品的吸光度或%透光率。
紫外可见分光光度计操作流程及校准方法及操作规程
紫外可见分光光度计操作流程及校准方法及操作规程紫外可见分光光度计操作流程及校准方法紫外分光光度计就是依据物质的吸取光谱讨论物质的成分、结构和物质间相互作用的有效手段。
紫外分光光度计可以在紫外可见光区任意选择不同波长的光。
物质的吸取光谱就是物质中的分子和原子吸取了入射光中的某些特定波长的光能量，相应地发生了分子振动能级跃迁和电子能级跃迁的结果。
由于各种物质具有各自不同的分子、原子和不同的分子空间结构，其吸取光能量的情况也就不会相同，因此，每种物质就有其特有的、固定的吸取光谱曲线，可依据吸取光谱上的某些特征波优点的吸光度的高处与低处判别或测定该物质的含量。
紫外可见分光光度计认真操作流程及校准方法:一、紫外可见分光光度计光度测量在模式选择屏幕中选择 1.Photometric光度选项，将显示参数配置屏幕；用GOTOWL键设定测量波长；按F2键设定进样掌控；按START/STOP键时，测量开始，显示测量屏幕；如需做空白校正，应在测量前先设置空白样品，然后，按AUTO—ZERO键，将测量值置为OABS（100%）；二、紫外可见分光光度计校正开机预热10分钟足矣；放入黑块和标样（没有的本身配），关闭盖子；校0；把灯光对着黑块，把透光度调0；把灯光对标样，将吸光度调到100%；三、参比溶液介绍参比溶液又称空白溶液。
测量时用作比较的、不含被测物质但其基体尽可能与试样溶液相像的溶液。
通常，用参比溶液扫描的曲线应是一条平坦的直线。
有时，基体中，虽不含被测物质，但含有别的物质，这时必需保证其不影响测试。
常常碰到的是试剂空白中含有被测物质，此时必需经过纯化将其除去。
否则将影响测定结果。
四、紫外可见分光光度计使用注意事项1.开机前应先预热15分钟，然后开机自检；2.湿度要掌控在75%左右，温度在5～30度之间；3.仪器要稳压电源，接地要好。
并且避开阳光直接照射；5.常见故障及处理方法：光门不能完全关闭：修复光门部件，使其完全关闭；透过率“100%”旋到底了。
核酸的紫外扫描及含量测定(精)
实验目的
1.了解紫外分光光度计的基本原理并掌握其使用方 法。 2.掌握使用紫外分光光度法测定核酸含量的原理和 方法。
实验原理
核酸、核苷酸及其衍生物都具有共轭双键，具有紫外吸收。 RNA和DNA的紫外吸收峰为260nm。一般在260 nm波长下， 每毫升含1mg DNA溶液的光吸收值约为0.020，每毫升含 1mgRNA溶液的光吸收值为0.022。故测定待测浓度RNA或 DNA溶液260nm的光吸收值即可计算出其中核酸的含量。 此法操作简便，迅速。若样品内混杂有大量的核苷酸或蛋白 质等能吸收紫外光的物质，则测定误差较大，故应设法事先 除去。纯净的RNA溶液，其A260/A280≥2；纯净的DNA溶 液，其A260/A280≥1.8。
关于比色皿：比色皿的前后有2 个光滑面，是用来对准光路的， 左右有2个粗糙面，手只能拿比 色皿的粗糙面，不能接触光滑 面。比色皿的内部的清洗只能 用蒸馏水润洗（用洗瓶），不 可用卫生纸或其他物品捅进去 擦洗，比色皿的2个光滑面一定 要保持清洁，如发现有指纹或 残液，须用卫生纸轻轻擦拭干 净。比色皿是成套发放的，严 禁混用，本实验使用的是石英 比色皿，一套2只。使用完毕后 先用自来水内外冲洗干净比色 皿，再用洗瓶冲洗比色皿的内 外表面1次，将其粗糙面朝下斜 靠在培养皿中，参见图7-2。
实验试剂 1. 2.
标准DNA溶液：100ug/ml 待测的DNA溶液
实验操作
检查试管是否干燥、洁净；若否，将其洗净并置于干燥箱内120℃烘 干。 1． 标准曲线的制作：取7只试管、2只取样器（分别为1mL和 5mL），按照下表加样。
标准曲线的制作
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思考题
1.试比较用标准曲线法与吸光系数法定量的优缺点。 2.吸收系数法中为什么吸光度乘48.31 即得每毫升VB12 的μg 数？
数据处理பைடு நூலகம்
按照比吸光系数的定义，每100ml含1g维生素B12的溶液 （1﹪）在361nm的吸光度应为207。即： E （361nm）＝207（100ml/g﹒cm） ＝207×10-4(ml /mg﹒cm ) C样 ＝ A样/b﹒E ＝ A样×48.31 (mg/ml) 维生素B12标示量（％）＝ ×100％
仪器与试剂
752 型紫外 - 可见分光光度计， 756 型紫外可见分光光 度计；石英比色皿；维生素 B12注射液：100mg/ml； 吸量管：5ml；容量瓶：10ml
实验步骤
1.维生素B12最大吸收波长扫描 用756型紫外可见分光光 度计对其进行扫描。 2.比色皿的校核 将两只石英比色皿编号标记，装入蒸馏水，在361nm处比 较两只比色皿的透光率。以透光率最大的比色皿为100﹪透 光，测定另一只比色皿的透光率，换算成吸光度作为它的校 正值。测定溶液时，以那只透光率最大的比色皿作空白，另 一只比色皿装待测溶液，测定的吸光度减去其校正值。 3.吸光系数法 精密吸取维生素B12注射液样品 （100mg/ml）3.0ml，置于10ml容量瓶中，加蒸馏水至刻度， 摇匀，得样品稀释液。装入1cm石英比色皿中，以蒸馏水为 空白，在361nm波长处测得吸光度A值，与48.31相乘，即得 样品稀释液中每毫升含维生素B12的mg数。
实验十一 维生素B12注射液的含量测定
实验目的
1.掌握紫外分光光度计的操作方法。 2.掌握吸光系数法的定量方法。 3.掌握含量测定、标示量的百分含量及稀释度等计 算方法。
实验原理
维生素B12是一类含钴的卟啉类化合物，具有很强的 生血作用，可用于治疗恶性贫血等疾病。维生素B12不是单 一的一种化合物，共有七种。通常所说的维生素B12是指其 中的氰钴素，为深红色吸湿性结晶，制成注射液的标示含 量有每毫升含维生素B12 50、100或500mg等规格。 维生素B12的水溶液在278±1nm、361±1nm与550±1nm 三波长处有最大吸收。361nm处的吸收峰干扰因素少，药 典规定以361±1nm处吸收峰的比吸光系数E值（207）为测 定注射液实际含量的依据。