灰分

5)对于含糖分、淀粉、蛋白质较高的样品，为防止其发泡溢出，炭化前可加数滴纯植物油。
6)新坩埚在使用前须在体积分数为20﹪的盐酸溶液中煮沸1~2h，然后用自来水和蒸馏水分别冲洗干净并烘干。用过的旧坩埚经初步清洗后，可用废盐酸浸泡20min左右，再用水冲洗干净。
7)反复灼烧至恒重是判断灰化是否完全最可靠的方法。因为有些样品即使灰化完全，残留不一定是白色或灰白色。例如铁含量高的食品，残灰呈褐色；锰、铜含量高的食品，残灰呈蓝绿色；而有时即使灰的表面呈白色或灰白色，但内部仍有碳粒存留。
现象:当加入邻二氮菲，溶液就变成了红色的溶液。
实验数据：
灰分的测定：
奶粉：坩埚的重量：28.1900g
坩埚和灰分的重量：28.2495g
坩埚和样品的重量：29.1945g
木耳：坩埚的重量：21.1430g
坩埚和灰分的重量：21.1675g
坩埚和样品的重量：22.1525g
铁含量的测定:（空白试验为0）
另外奶粉和木耳的铁的含量还是比较的接近的，但是X奶粉铁含量＜X木耳铁含量。
讨论分析：
1．经网上搜查资料发现，普通乳粉的灰分含量是5~5.7g/100g，而本实验，所测得的结果稍微有点偏高了，但是测验的结果还是比较理想的，有稍微的偏高的原因可以是灰化没有完全，又或者是由于试样在加工过程受到了污染，也就是自身产品的原因。
而奶粉的铁含量的测定结果是偏高的，根据文献数据可得：
就是在500-600℃，奶粉的铁的含量就是在71.8到72.7左右。我们所测的结果是正常含量的两倍多，因此误差较多。
可能是因为试样液加入盐酸羟胺溶液还原三价铁，时间过长可能会影响吸光度的值。
2．根据所查文献的结果表明，黑木耳中的铁含量是99.41mg/kg，所测的结果还是比较偏高。两次不同物料的测定，所测的数据还是偏高的，可能方法和一起的误差比较大，致使所测的数据难以接近正常的数据，另外一个很重要的原因就是木耳的种类，不同的物种的木耳，铁的含量的结果都是不一样的。
m--称取试样的质量（g）
结果保留三位有效字。
仪器试剂：
灰分测定：马弗炉、天平、石英干锅或者是瓷坩埚、干燥器、电热板、水浴锅、移液管、洗耳球、奶粉、木耳、硝酸、25ml比色管、蒸馏水
铁含量测定：移液管、25ml的比色管、洗耳球、分光光度计、25ml的容量瓶、盐酸羟胺溶液、酒石酸溶液、乙酸钠溶液、邻二氮菲、蒸馏水
样品中的灰分含量≥10g/100g时，就保留三位有效数字，若是＜10g/100g，就保留两位有效数字。
铁含量的测定（邻二氮菲比色法）：
Fe3+盐酸羟胺Fe2+邻二氮菲、pH=3-9红色络合物
如上述的反应流程所示，试样经过干法灰化或者是湿法消化后所制成的稀硝酸溶液，使用盐酸羟胺将Fe3+还原成Fe2+，Fe3+和邻二氮菲在pH=2-9的条件下，形成的稳定存在的红色络合物，可以在510nm的分光光度计测定吸光度，再利用标准曲线算出铁含量。
奶粉吸光度
0.252
0.254
0.250
0.252
木耳吸光度
0.275
0.270
0.275
0.273
结果计算：
灰分的测定:
奶粉：X（灰分的含量）=(28.2495-28.1900)*100/（29.1945-28.1900）=5.92 g/kg
木耳：X（灰分的含量）=(21.1675-21.1430)*100/（22.1525-21.1430）=2.43g/kg
2)样品炭化时要注意热源强度，防止产生大量泡沫溢出坩埚；只有炭化完全，即不冒烟后才能放入高温电炉中。灼烧空坩埚与灼烧样品的条件应尽量一致，以消除系统误差。
3)把坩埚放入高温炉或从炉中取出时，要在炉口停留片刻，使坩埚预热或冷却。防止因温度剧变而使坩埚破裂。
4)灼烧后的坩埚应冷却到200℃以下再移入干燥器中，否则因过热产生对流作用，易造成残灰飞散；且冷却速度慢，冷却后干燥器内形成较大真空，盖子不易打开。
2)空白液制备（目的是为了使分光光度计为标定0）：取1.25ml 1:1硝酸溶液于25ml比色管，用水稀释至刻度线，摇匀，此溶液为空白液溶液。
3)标准工作曲线的绘制：精确的吸取铁标准使用液0.00ml、1.00ml、2.00ml、3.00ml、4.00ml、5.00ml，分别置于25ml容量瓶中，加2.5ml盐酸羟胺溶液，摇匀，盖上盖子静置反应10min，之后加入1ml酒石酸溶液，2.5ml乙酸钠，5ml邻二氮菲，用水稀释至刻度，摇匀，此事的容量瓶中溶液铁的浓度分别是0.001μg/ml、0.40μg/ml、0.80μg/ml、1.2μg/ml、1.6μg/ml、2.0μg/ml。在510nm处测定其吸光值，以标准工作曲线液中铁的质量为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线（求出的线性回归方程如下）。
8)灼烧温度不能超过600℃，否则会造成钾、钠、氯等易挥发成分的损失。
现象；
样品逐渐的变黑色，是由于炭化的原因，当灼烧将近4h的时候，可以看到样品的灰白色的灰分出现。
铁含量的测定（邻二氮菲比色法）：
1)将已经灰化好的试样用1.25ml1:1硝酸溶液溶解。转移到25ml的比色管中，用少量水冲洗坩埚，合并洗液，定容备用。
Y=0.004A+0.001
△R2=0.992
Y--吸光度A--铁的质量
根据所求的线性回归方程，求出样品中的铁的质量。
4)测定：精确吸取10ml试样液，空白液置于25ml容量瓶中，按照步骤三处理灰分中的铁离子，测定试样液的吸光值（用空白液来调零），根据试样液的吸光度和标准线性回归方程计算对应的铁的质量。
关键词：灰分铁含量高温加热吸光度称重邻二氮菲
正文：
实验原理：
总灰分的测定：食品经灼烧后所残留的无机物质成为灰分，灰分数值用灼烧称重得出。
总灰分的计算公式：（m2-m0)*100/(m1-m0)
m0——坩埚的质量，单位为克（g);
m1——坩埚和样品的质量，单位为克（g）；
m2——坩埚灰分的质量，单位为克（g）。
所有玻璃仪器均以硝酸溶液浸泡2h以上，用去离子水冲洗后晾干或烘干，方可使用。
实验步骤及现象：
测量灰分：
1)称量干净的坩埚的重量，记录下来。称量奶粉和木耳各1g，分别置于放入坩埚中。
2)先在电热板上以小火加热炭化直至无烟产生了，再把坩埚转移到马弗炉中，控制加热温度为550±25℃下灼烧3h。
3)冷却至室温，就是200℃左右，马上转移到干燥器中冷却30min，称重，直至恒重（即前后两次称重的质量差不超过0.5mg）。
4)处理，后期的铁含量的测定做好处理。向灰分加入1.25ml的硝酸溶解，转移至25ml的刻度试管中，用少量的水冲洗坩埚，合并洗液，移入刻度试管试管，定容到25ml的刻度线。
注意事项：
1)若灼烧称量前就发现了灼烧的残渣有炭粒，应向试样中滴入少许的水湿润，使结块松散，蒸干水分再次灼烧至无炭粒那就是表示已经灰分完全，才可以去称重的。
铁含量的测定：
根据公式：Y=0.004A+0.001得出：
吸光度平均值
0.252
0.273
A（铁的质量，μg）
63.25
68
X（铁的质量，mg/kg)
157
168
结论与讨论：
结论：
灰分含量g/100g
铁含量mg/kg
奶粉
5.92
157
木耳
2.43
168
根据以上数据，X奶粉灰分＞X木耳灰分可以看出奶粉所含有的无机物的含量比木耳的多很多。
华南农业大学
综合性实验报告
实验项目名称：两种不同食品中的总灰分与铁含量较分析
实验项目性质：综合性实验
所属课程名称：食品分析B
班级：
姓名：
学号：
指导老师：沈玉栋
2014年4月24日
两种不同食品中总灰分与铁含量的比较分析
摘要：利用干法灰化得到样品中的无机盐的含量，其中需要主要的就是干法灰化的是测定方法和原理操作。另外在干法灰化所获得的灰分中测量出铁的含量，把铁离子还原成亚铁离子，在利用亚铁离子与邻二氮菲形成了络合物的稳定红色物，可以通过测定吸光度推定铁离子的含量。但是推定前需要得出的就是铁离子的标准曲线。
铁的含量的计算公式：
W=((A-A0)*10-3)/(m*(V1/V2)*10-3)
式子中：W--试样中铁的含量（mg/kg），
A,A0--分别是根据标准线性曲线回归方程计算出样液、空白液中铁的含量（μg），已知A0=0；
V1--测定用消化液的体积（ml）V1=10ml；
V2--样品测定液总体积（ml）V2=25ml；
参考文献：
［1］宋龙波,赵龙刚,赵延伟等.火焰原子吸收光谱法测定婴幼儿奶粉中铁、锌元素含量.安徽农业科学,2012,40(33):16374-16376.
［2］吕文英.黑木耳和毛木耳中无机营养元素含量的测定与研究[J].微量元素与健康研究，2007，24(4):30-31.
［3］薛云云，王小燕，何邦平，等.分光光度法测定微量金属元素铁铜锌镁钙含量的研究概况[J].微量元素与健康研究，2006，23(5):51.