基因工程习题集
基因工程原理习题与答案
基因工程原理习题集1、DNA分子克隆技术：克隆，指含有单一的DNA重组体的无性繁殖系,或指将DNA重组体引入宿主细胞建立无性繁殖系的过程。
DNA分子克隆技术也称基因克隆技术，是在体外将DNA分子片段与载体DNA 片段连接,转入细胞获得大量拷贝的过程。
其基本步骤包括：制备目的基因→将目的基因与载体用限制性内切酶切割和连接,制成DNA重组→导入宿主细胞→筛选、鉴定→扩增和表达.载体在细胞内自我复制，并带动重组的分子片段共同增殖，从而产生大量的DNA分子片段.主要目的是获得某一基因或DNA片段的大量拷贝,有了这些与亲本分子完全相同的分子克隆，就可以深入分析基因的结构与功能，随着引入的DNA片段不同，有两种DNA库,一种是基因组文库，另一种是cDNA库。
2、分子杂交：两条不同来源的DNA(或RNA）链或DNA与RNA之间存在互补顺序时，在一定条件下可以发生互补配对形成双螺旋分子,这种分子称为杂交分子。
形成杂交分子的过程称为分子杂交。
3、限制性片段长度多态性：从不同个体制备的DNA，使用同一种限制性内切酶酶切，切得的片段长度各不相同。
酶切片段的长度可以作为物理图谱或者连接图谱中的标记子。
通常是在酶切位点处发生突变而引发的。
4、报告基因：一种编码可被检测的蛋白质或酶的基因,也就是说,是一个表达产物非常容易被鉴定的基因、5、多聚酶链式反应（PCR）:一种体外扩增DNA的方法.PCR使用一种耐热的多聚酶,以及两个单链引物。
以过高温变性将模板DNA分离成两条链。
低温退火使得引物和一条模板单链结合，然后是中温延伸，反应液的游离核苷酸紧接着引物从5/端到3/端合成一条互补的新链。
而新合成的DNA又可以继续进行上述循环,因此DNA的数目不断倍增。
6、核酸的凝胶电泳：将某种分子放到特定的电场中，它就会以一定的速度向适当的电极移动.某物质在电场作用下的迁移速度叫做电泳的迁移率，它与电场强度成正比，与该分子所携带的净电荷数成正比，而与分子的摩擦系数成反比（分子大小、极性、介质的粘度系数等）。
基因工程试题库答案
基因工程试题库答案基因工程练习题一、单项选择题1．在基因工程中，切割载体和含有目的基因的DNA片段中，一般需使用A.同种限制酶B.两种限制酶C.同种连接酶D.两种连接酶2．基因工程常用的受体有①大肠杆菌②枯草杆菌③结核杆菌④动植物细胞A.①②③④B.①②③C.②③④D.①②④3．有关基因工程的叙述正确的是A.限制酶只在获得目的基因时才用B.重组质粒的形成是在细胞内完成的C.质粒都可作为载体D.蛋白质的结构成分为合成目的基因提供资料4．下列哪项不是基因工程中经常使用的用来运载目的基因的载体A.细菌质粒B.噬菌体C.动植物病毒D.细菌核区的DNA5．基因工程是在DNA分子水平上进行设计施工的。
在基因操作的基本步骤中，不进行碱基互补配对的是A.人工合成目的基因B.目的基因与运载体结合C.将目的基因导入受体细胞D.目的基因的检测表达6．不是基因工程方法生产的药物是A.干扰素B.白细胞介素C.青霉素D.乙肝疫苗7．在基因工程中用来修饰改造基因的工具是A.限制酶和连接酶B.限制酶和水解酶C.限制酶和运载酶D.连接酶和运载酶8．下列哪项叙述不是运载体必须具备的条件A.具有某些标记基因B.决定宿主细胞的生存C.能够在宿主细胞中复制D.有一个或多个限制酶切点9．水母发光蛋白由236个氨基酸构成，其中有三种氨基酸构成发光环，现已将这种蛋白质的基因作为生物转基因的标记。
在转基因技术中，这种蛋白质的作用A.促使目的基因导入宿主细胞中B.促使目的基因在宿主细胞中复制C.使目的基因容易被检测和选择D.使目的基因容易成功表达10．应用基因工程技术诊断疾病的过程中必须使用基因探针才能达到检测疾病的目的。
这里的基因探针是指A.用于检测疾病的医疗器械B.用放射性同位素或荧光分子等标记的DNA分子C.合成β—球蛋白的DNA上一页下一页D.合成苯丙氨酸羟化酶的DNA片段11．基因工程第一步的一种方法是把所需的基因从供体细胞内分离出来，这要利用限制性内切酶。
基因工程习题及答案
第二章习题一、单选题1.在基因操作中所用的限制性核酸内切酶是指（ B ）A．I类限制酶 B. II类限制酶 C. III类限制酶 D.核酸内切酶E. RNAase2.下列关于同裂酶的叙述错误的是( B )A. 是从不同菌种分离到的不同的酶,也称异源同工酶。
B. 它们的识别序列完全相同。
C. 它们的切割方式可以相同，也可以不同。
D. 有些同裂酶识别的完整序列不完全一样，但切割位点间的序列一样。
E. 两种同裂酶的切割产物连接后，可能会丢失这两个同裂酶的识别位点。
3. 多数限制酶消化DNA的最佳温度是（ A ）A. 37℃B.30℃C.25℃D.16℃E.33℃4. 下列关于限制酶的叙述错误的是( B )A. I类限制酶反应需要 Mg2+、ATP和S-腺苷蛋氨酸。
B. II类限制酶反应需要Mg2+、ATP。
C. III类限制酶反应需要Mg2+、ATP，S-腺苷蛋氨酸能促进反应，但不是绝对需要。
D. I、III类限制酶对DNA有切割和甲基化活性，II类限制酶对DNA只有切割活性而无甲基化活性。
E. II类限制酶要求严格的识别序列和切割点，具有高度精确性。
5. 如果一个限制酶识别长度为6bp ,则其在DNA上识别6bp的切割概率为( D )A. 1/44B. 1/66C. 1/64D.1/46E. 1/1066. 多数II类限制酶反应最适PH是 ( C )A. PH:2-4B. PH:4-6C. PH:6-8D. PH:8-10E. PH:4-107. 下列关于限制酶反应的说法错误的是 ( D )A. 限制酶识别序列内或其邻近的胞嘧啶、腺嘌呤或尿嘧啶被甲基化后，可能会阻碍限制酶的酶解活性。
B. 许多限制酶对线性DNA和超螺旋DNA底物的切割活性是有明显差异的。
C. 有些限制酶对同一DNA底物上不同酶切位点的切割速率会有差异。
D. 限制酶反应缓冲系统一般不用磷酸缓冲液，是由于磷酸根会抑制限制酶反应。
E. BSA对许多限制酶的切割活性都有促进作用，所以酶切反应中常加入一定量的BSA。
基因工程习题集
基因⼯程习题集基因⼯程习题集⼀、名词解释Southern blotting；Cosmid；cDNA library；RACE；RT-PCR；MCS ；cDNA；插⼊失活；反义RNA；PCR，mRNA差异显⽰技术；巢式PCR；实时荧光定量PCR；基因⽂库；星号活性；载体；转化；转染⼆、填空题1.基因⼯程的四⼤要素是、、、2.在基因⼯程中，切割载体和含有⽬的基因的DNA⽚段中，⼀般需使⽤酶3.⽤冷的氯化钙处理对数⽣长期的⼤肠杆菌细胞，可以诱导细胞进⼊称为态的⽣理状态进⾏遗传转化。
4.写出在质粒载体图谱上下列符号表⽰的含义：Amp , LacZ , ori ,MCS 。
5.PCR包括三个步骤_ ，，。
6.限制性内切酶酶切DNA⽚断后通常有两类末端：、。
7.⽬的基因与噬菌体DNA进⾏重组时，可采⽤重组⽅式，也可采⽤重组⽅式。
8.柯斯质粒是⼀类⼈⼯构建的质粒-噬菌体杂合载体，它的复制⼦来⾃，cos 位点序列来⾃分离⽬的基因常采⽤从基因组⽤分⼦杂交等⽅法从构建的或中获得含⽬的基因的克隆⼦。
10.在的作⽤下，将含⽬的基因的DNA⽚断与克隆载体连接成为重组DNA分⼦11.载体根据功能可以分为和12.常⽤的DNA连接酶有和，前者即可以连接粘性末端⼜可以连接平末端，后者只可以连接粘性末端。
13.据图回答：①图中基因组⽂库（填“⼩于”、“等于”或“⼤于”）cDNA ⽂库。
②B过程需要的酶是；A、C过程中（填“可以”或“不可以”）使⽤同⼀种探针筛选含⽬的基因的菌株。
③⽬的基因Ⅰ和Ⅱ除从构建的⽂库中分离外，还可以分别利⽤图中和为模板直接进⾏PCR扩增，该过程中所⽤酶的显著特点是。
⼆、选择题1.基因⼯程的设计操作是在什么⽔平进⾏的（）A.细胞B.分⼦C.细胞器D.原⼦2.基因⼯程的单元操作顺序是（）A 增，转，检，切，接B 切，接，转，增，检C 接，转，增，检，切D 切，接，增，转，检3.分离纯化基因组DNA应保证核酸⼀级结构的完整性，下列哪些因素可能导致⼀级结构被破坏（）A. PH 8.0B.EDTAC.PH 14D.70%⼄醇4.分离纯化基因组DNA应尽量去除蛋⽩质的污染，实验过程中我们通常采⽤什么⽅法去除与DNA结合的蛋⽩质（）A.等电点沉淀法B.盐析法C.有机溶剂变性法D.强酸强碱法5.分离纯化基因组DNA时，我们通常选⽤以下哪种试剂来沉淀基因组DNA（）A.⽔B.⼄醇C.氯仿D.苯酚6.关于不同构象的质粒DNA的电泳速率，下列排列顺序正确的是 ( )A ocDNA >lDNA>scDNAB scDNA >ocDNA> lDNAC ocDNA >scDNA > lDNAD scDNA >lDNA>ocDNA7.PCR技术的操作步骤依次是（）A．⾼温变性、中温延伸、低温复性B．⾼温变性、低温复性、中温延伸C．中温延伸、⾼温变性、低温复性D．中温延伸、低温复性、⾼温变性8.PCR的主要步骤不包括（）A.设计⼀对特异性引物B.⾼温使模板DNA变性C.降温到合适的温度使模板DNA与引物杂交D.加热使DNA聚合酶失活9.PCR反应体系不包括（ )A.DNA模板B.引物C.dNTPD.NTP10.核酸分⼦杂交实验不能⽤于（）A.单链DNA分⼦之间杂交B.单链RNA分⼦之间杂交C.单链DNA分⼦与RNA之间的杂交D.抗原与抗体分⼦之间的杂交11.⽤作探针的DNA分⼦必须（）A.在杂交前变性B.在杂交前复性C.是双链分⼦D.能形成颈环结构12.Southern blotting是（）A.将DNA转移到膜上所进⾏的杂交B.将RNA转移到膜上所进⾏的杂交C.将蛋⽩质转移到膜上所进⾏的杂交D.将多糖转移到膜上所进⾏的杂交13.确切地讲，cDNA⽂库包含（）A.⼀个物种的全部基因信息B.⼀个物种的全部RNA信息C.⼀个⽣物体组织或细胞的全部基因信息D.⼀个⽣物体组织或细胞所表达的mRNA信息14.要了解某⼀基因在某组织细胞中的mRNA表达⽔平时，采⽤哪种⽅法最合适A.Southern blottinB.Northern blottingC.Western blottingD.Eastern blotting15.DNA序列⾃动化测序中不正确的描述是（）A.测序原理与⼿⼯测序基本相同B.不需要引物C.需要模板D.需要四种荧光染料标记的ddNTP16.Sanger双脱氧末端终⽌法中不需要（）A.dNTPB.ddNTPC.DNA聚合酶D.DNA连接酶17.cDNA⽂库的建⽴不需要（）A.逆转录酶B.DNA模板C.mRNA模板D.依赖于RNA的DNA聚合酶18.下列哪项不是基因⼯程中经常使⽤的⽤来运载⽬的基因的载体A.细菌质粒B.噬菌体C.动植物病毒D.细菌核区的DNA19.下列哪项叙述不是运载体必须具备的条件A.具有某些标记基因B.决定宿主细胞的⽣存C.能够在宿主细胞中复制D.有⼀个或多个限制酶切点20.下列有关基因的叙述，错误的是（）A蛋⽩质是基因表达的唯⼀产物B 基因是 DNA 链上具有编码功能的⽚段C 基因也可以是 RNAD 基因突变不⼀定导致其表达产物改变结构21.下列各组专业术语中，含义最为接近的是（）A 终⽌⼦与终⽌密码⼦B 基因表达与基因转译C DNA 退⽕与 DNA 复性D 重组⼦与转化⼦22.下列有关连接反应的叙述，错误的是（）A 连接反应的最佳温度为 37 ℃B 连接反应缓冲体系的⽢油浓度应低于 10%C 连接反应缓冲体系的 ATP 浓度不能⾼于 1mMD 连接酶通常应过量 2-5 倍23.下列各常⽤载体的装载量排列顺序，正确的是（）A Cosmid >λ-DNA > PlasmidB λ -DNA > Cosmid > PlasmidC Plasmid >λ -DNA > CosmidD Cosmid > Plasmid >λ-DNA24.质粒是基因⼯程最常⽤的运载体，它的主要特点是：①能⾃主复制②不能⾃主复制③结构很⼩④蛋⽩质⑤环状RNA⑥环状DNA⑦能“友好”地“借居”A ：①③⑤⑦B ：②④⑥C ：①③⑥⑦D ：②③⑥⑦25下列黏性末端属于同⼀种限制酶切割⽽成的是：A．①② B．①③ C．①④ D．②③26下列平末端属于同⼀种限制酶切割⽽成的是A.①③B.①④C.②③D.②④27．作为基因的运输⼯具——运载体，必须具备的条件之⼀及理由是A.能够在宿主细胞中稳定地保存下来并⼤量复制，以便提供⼤量的⽬的基因B.具有多个限制酶切点，以便于⽬的基因的表达C.具有某些标记基因，以使⽬的基因能够与其结合D.对宿主细胞⽆伤害，以便于重组DNA的鉴定和选择28.限制性内切核酸酶的星活性是指：A 在⾮常规条件下，识别和切割序列也不发⽣变化的活性。
基因工程试题及答案解析
基因工程试题及答案解析一、选择题1. 基因工程中常用的限制酶是：A. 蛋白酶B. DNA聚合酶C. 核糖核酸酶D. 限制性核酸内切酶答案：D2. 基因工程中，用于将目的基因导入植物细胞的方法是：A. 电穿孔法B. 显微注射法C. 农杆菌转化法D. 脂质体介导法答案：C3. 下列哪项不是基因工程的基本步骤？A. 目的基因的获取B. 基因表达载体的构建C. 目的基因的扩增D. 目的基因的检测与鉴定答案：C二、填空题1. 基因工程中，常用的运载体有____、____和____。
答案：质粒、噬菌体、动植物病毒2. 基因工程中，常用的筛选标记基因有____、____和____。
答案：抗性基因、荧光蛋白基因、酶基因三、简答题1. 简述基因工程的应用领域。
答案：基因工程的应用领域包括农业、医学、工业、环境保护等。
在农业中，基因工程可以用于培育抗病、抗虫、抗旱等性状的作物；在医学领域，基因工程可以用于生产重组蛋白药物、基因治疗等；在工业上，基因工程可以用于生产酶、疫苗等；在环境保护方面，基因工程可以用于生物修复、污染物降解等。
2. 基因工程中，如何确保目的基因在宿主细胞中正确表达？答案：确保目的基因在宿主细胞中正确表达需要考虑以下几个方面：首先，目的基因需要有合适的启动子和终止子，以确保其在宿主细胞中得到正确转录和终止；其次，需要考虑目的基因的密码子偏好性，以确保其在宿主细胞中能被高效翻译；再次，需要考虑目的基因的稳定性，避免其在宿主细胞中被降解；最后，还需要考虑目的基因产物的后翻译修饰和定位。
四、论述题1. 论述基因工程在医学领域的应用及其可能带来的伦理问题。
答案：基因工程在医学领域的应用主要包括生产重组蛋白药物、基因治疗、疾病诊断和基因疫苗等。
重组蛋白药物可以用于治疗糖尿病、侏儒症等疾病；基因治疗可以用于治疗遗传性疾病；疾病诊断可以通过基因检测来实现；基因疫苗可以用于预防某些遗传性疾病。
然而，基因工程的应用也带来了伦理问题，如基因隐私权、基因歧视、基因治疗的安全性和有效性等。
《基因工程》习题及参考答案
《基因工程》习题及参考答案一、习题：1. What are biotechnology and genetic engineering?2. What is a gene?3. What are genetically engineered medicines?4. What do genome research and human genetics deal with?5. What potentials are held out by genetic diagnosis?6. What options are given by gene therapy?7. What is an embryo - and what is a fetus?8 What is a genetic fingerprint?9 What does the term "therapeutic cloning" mean?10 What are stem cells?11 What is a transgenic organism?12 What does xenotransplantation mean?13 How will genetic engineering be used in agriculture?14 How are genetically modified organisms assessed?15 What does the German Embryo Protection Act regulate?16. What is a genome?17. Is there a risk of bioterrorism?18. How does genetic engineering affect the environment?19. Are genetically engineered crops good for farmers?20.What is the difference between restriction digestion and restriction mapping?21.Can you combine two different restriction enzymes in the same reaction tubes todigest the DNA molecules?22.Why should we need to generate restriction mapping data?23.How many restriction enzymes available now on the market?24.Why do you consider mutagenesis in vitro as one of the most critical techniquesfor us to understand in genetic engineering class?25.How do we choose the methods for DNA modification?26.How do we choose a gene expression system?27.How can we express eukaryotic gene in E.coli?28.What should we consider before we start the recombinant protein expressionexperiment?29.What is the advantage of yeast expression system?30.What is the advantage of insect expression system?31.Why there are so many different types of vectors available for cloning?32.What is the difference between cloning vector and expression vector?33.What is a genetic fingerprint?34. 基因具体分成多少种类？35. 什么叫印记基因？36．什么叫遗传漂变？37．人类基因组图谱和初步分析结果是在哪一年公布的？38．人类基因组共有多少基因?39. 克隆羊成功的技术关键是什么？40. 有人计划将两个不同物种的动植物体细胞进行融合，然后将融合体的核移植到其中一种生物的未受精卵细胞中，进行体细胞克隆。
高中生物基因工程练习题(含解析)
高中生物基因工程练习题学校:___________姓名：___________班级：___________一、单选题1．蛋白质工程中目前已成功的是( )A．对胰岛素进行改造，使其成为速效型药品B．蛋白质工程应用于微电子方面C．室温下可保存半年的干扰素D．耐储存的番茄2．下列有关限制性酶的描述，错误的是（）A．限制酶主要从原核生物中提取B．限制酶具有热稳定性C．限制酶和DNA连接酶作用的化学键相同D．一种限制酶一般只能识别一种特定的脱氧核苷酸序列3．蛋白质工程的最终目的是（）A．分析蛋白质的三维结构B．研究蛋白质的氨基酸组成C．获取编码蛋白质的基因序列信息D．改造现有蛋白质或制造新的蛋白质，满足人类的需求4．下列基因工程的基本操作程序中，属于基因工程核心步骤的是（）A．基因表达载体的构建B．目的基因的检测与鉴定C．将目的基因导入受体细胞D．目的基因的筛选与获取5．葡萄糖异构酶在工业上应用广泛，科学家将其第 138 位甘氨酸替换为脯氨酸后，其最适温度提高了 10℃左右。
相关叙述正确的是（）A．蛋白质功能是由氨基酸的种类和数量决定B．改造蛋白质结构可通过改造基因结构实现C．蛋白质工程不可以定向改变蛋白质的结构D．酶最适温度提高是因为脯氨酸比甘氨酸更耐热6．基因和表达载体相连时既可以正向连接也可以反向连接。
下图甲、乙分别表示某质粒、含目的基因和酶切位点的DNA片段，构建基因表达载体时应用酶B和酶C进行切割，不应用酶A切割运载体和DNA片段，其原因不包括（）A．防止目的基因和运载体发生反向连接B．保证构建的重组质粒中含有标记基因C．防止目的基因或运载体重新自身环化D．保证构建的重组质粒中含有启动子7．关于基因工程和下图所示黏性末端的叙述，正确的是（）A．①与③是由相同的限制酶切割产生的B．DNA连接酶可催化①与③的连接C．经酶切形成④需要脱去2分子水D．基因工程中常用的工具酶有限制性核酸内切酶、DNA连接酶和运载体8．DNA琼脂糖凝胶电泳的分子筛效应是指作为支持介质的琼脂糖，具有网络结构，使大分子物质在通过时受到较大阻力，借此分离不同大小的DNA片段。
基因工程测试题(附解析)
基因工程测试题（附解析）一、基础题点练1．(2019·徐州模拟)已知限制性内切酶Xma Ⅰ和Sma Ⅰ的识别序列分别为C CCGGG 和CCC GGG。
有关这两种酶及应用的叙述，错误的是()A．这两种酶作用的底物都是双链DNAB．DNA 中出现这两种酶识别序列的几率不同C．Xma Ⅰ切割DNA 形成的黏性末端是—GGCCD．使用这两种酶时需注意控制反应温度、时间等解析：选B 限制酶作用的底物是双链DNA 分子；这两种限制酶作用的核苷酸序列相同，所以这两种识别序列在DNA 中出现的的几率相同；根据碱基互补配对原则，CCCGGG 的互补链是GGGCCC，并根据Xma Ⅰ的切割位点可知，切割后的黏性末端是—CCGG；温度能影响酶的活性，所以使用酶时需要注意控制反应温度和时间等。
2．如图表示的是三种黏性末端，下列说法正确的是( ) ↓↓A．图中所示黏性末端是由同种限制酶切割形成B．若图甲中的G 碱基处发生突变，限制酶可能无法识别该切割位点C．图中所示黏性末端是限制酶断开氢键形成D．目前常用的运载体有质粒、噬菌体和动植物病毒等几类原核生物GAATTC 解析：选B 产生甲黏性末端的限制酶的识别序列为CTTAAG =====，产生乙黏性末端的限制酶CAATTG CTTAAG 的识别序列为GTTAAC =====，产生丙黏性末端的限制酶的识别序列为GAATTC =====，可见甲、乙、丙黏性末端是由3种限制酶作用产生的；限制酶具有专一性，能够识别双链DNA 分子的某种特定核苷酸序列，如果甲中的G 发生突变，限制酶可能无法识别该切割位点；图中所示黏性末端是限制酶断开磷酸二酯键形成的；质粒是环状DNA 分子，噬菌体和动植物病毒都没有细胞结构，它们都不属于原核生物。
3．下列关于蛋白质工程的叙述，错误的是()A．蛋白质工程的基础是基因工程B．蛋白质工程遵循的原理包括中心法则C．蛋白质工程是在分子水平上对蛋白质分子直接进行操作，定向改变分子的结构D．蛋白质工程能产生出自然界中不曾存在过的新型蛋白质分子解析：选C 蛋白质工程是通过基因修饰或基因合成对现有蛋白质进行改造，或合成新的蛋白质，故蛋白质工程的基础是基因工程；蛋白质工程遵循的原理包括中心法则；蛋白质工程是通过改造基因来实现对蛋白质分子的改造的；蛋白质工程能产生出自然界中不曾存在过的新型蛋白质分子。
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基因工程习题集一、名词解释Southern blotting；Cosmid；cDNA library；RACE；RT-PCR；MCS ；cDNA；插入失活；反义RNA；PCR，mRNA差异显示技术；巢式PCR；实时荧光定量PCR；基因文库；星号活性；载体；转化；转染二、填空题1.基因工程的四大要素是、、、2.在基因工程中，切割载体和含有目的基因的DNA片段中，一般需使用酶3.用冷的氯化钙处理对数生长期的大肠杆菌细胞，可以诱导细胞进入称为态的生理状态进行遗传转化。
4.写出在质粒载体图谱上下列符号表示的含义：Amp , LacZ , ori ,MCS 。
5.PCR包括三个步骤_ ，，。
6.限制性内切酶酶切DNA片断后通常有两类末端：、。
7.目的基因与噬菌体DNA进行重组时，可采用重组方式，也可采用重组方式。
8.柯斯质粒是一类人工构建的质粒-噬菌体杂合载体，它的复制子来自，cos 位点序列来自分离目的基因常采用从基因组用分子杂交等方法从构建的或中获得含目的基因的克隆子。
10.在的作用下，将含目的基因的DNA片断与克隆载体连接成为重组DNA分子11.载体根据功能可以分为和12.常用的DNA连接酶有和，前者即可以连接粘性末端又可以连接平末端，后者只可以连接粘性末端。
13.据图回答：①图中基因组文库（填“小于”、“等于”或“大于”）cDNA 文库。
②B过程需要的酶是；A、C过程中（填“可以”或“不可以”）使用同一种探针筛选含目的基因的菌株。
③目的基因Ⅰ和Ⅱ除从构建的文库中分离外，还可以分别利用图中和为模板直接进行PCR扩增，该过程中所用酶的显著特点是。
二、选择题1.基因工程的设计操作是在什么水平进行的（）A.细胞B.分子C.细胞器D.原子2.基因工程的单元操作顺序是（）A 增，转，检，切，接B 切，接，转，增，检C 接，转，增，检，切D 切，接，增，转，检3.分离纯化基因组DNA应保证核酸一级结构的完整性，下列哪些因素可能导致一级结构被破坏（）A. PH 8.0B.EDTAC.PH 14D.70%乙醇4.分离纯化基因组DNA应尽量去除蛋白质的污染，实验过程中我们通常采用什么方法去除与DNA结合的蛋白质（）A.等电点沉淀法B.盐析法C.有机溶剂变性法D.强酸强碱法5.分离纯化基因组DNA时，我们通常选用以下哪种试剂来沉淀基因组DNA（）A.水B.乙醇C.氯仿D.苯酚6.关于不同构象的质粒DNA的电泳速率，下列排列顺序正确的是 ( )A ocDNA >lDNA>scDNAB scDNA >ocDNA> lDNAC ocDNA >scDNA > lDNAD scDNA >lDNA>ocDNA7.PCR技术的操作步骤依次是（）A．高温变性、中温延伸、低温复性B．高温变性、低温复性、中温延伸C．中温延伸、高温变性、低温复性D．中温延伸、低温复性、高温变性8.PCR的主要步骤不包括（）A.设计一对特异性引物B.高温使模板DNA变性C.降温到合适的温度使模板DNA与引物杂交D.加热使DNA聚合酶失活9.PCR反应体系不包括（ )A.DNA模板B.引物C.dNTPD.NTP10.核酸分子杂交实验不能用于（）A.单链DNA分子之间杂交B.单链RNA分子之间杂交C.单链DNA分子与RNA之间的杂交D.抗原与抗体分子之间的杂交11.用作探针的DNA分子必须（）A.在杂交前变性B.在杂交前复性C.是双链分子D.能形成颈环结构12.Southern blotting是（）A.将DNA转移到膜上所进行的杂交B.将RNA转移到膜上所进行的杂交C.将蛋白质转移到膜上所进行的杂交D.将多糖转移到膜上所进行的杂交13.确切地讲，cDNA文库包含（）A.一个物种的全部基因信息B.一个物种的全部RNA信息C.一个生物体组织或细胞的全部基因信息D.一个生物体组织或细胞所表达的mRNA信息14.要了解某一基因在某组织细胞中的mRNA表达水平时，采用哪种方法最合适A.Southern blottinB.Northern blottingC.Western blottingD.Eastern blotting15.DNA序列自动化测序中不正确的描述是（）A.测序原理与手工测序基本相同B.不需要引物C.需要模板D.需要四种荧光染料标记的ddNTP16.Sanger双脱氧末端终止法中不需要（）A.dNTPB.ddNTPC.DNA聚合酶D.DNA连接酶17.cDNA文库的建立不需要（）A.逆转录酶B.DNA模板C.mRNA模板D.依赖于RNA的DNA聚合酶18.下列哪项不是基因工程中经常使用的用来运载目的基因的载体A.细菌质粒B.噬菌体C.动植物病毒D.细菌核区的DNA19.下列哪项叙述不是运载体必须具备的条件A.具有某些标记基因B.决定宿主细胞的生存C.能够在宿主细胞中复制D.有一个或多个限制酶切点20.下列有关基因的叙述，错误的是（）A蛋白质是基因表达的唯一产物B 基因是 DNA 链上具有编码功能的片段C 基因也可以是 RNAD 基因突变不一定导致其表达产物改变结构21.下列各组专业术语中，含义最为接近的是（）A 终止子与终止密码子B 基因表达与基因转译C DNA 退火与 DNA 复性D 重组子与转化子22.下列有关连接反应的叙述，错误的是（）A 连接反应的最佳温度为 37 ℃B 连接反应缓冲体系的甘油浓度应低于 10%C 连接反应缓冲体系的 ATP 浓度不能高于 1mMD 连接酶通常应过量 2-5 倍23.下列各常用载体的装载量排列顺序，正确的是（）A Cosmid >λ-DNA > PlasmidB λ -DNA > Cosmid > PlasmidC Plasmid >λ -DNA > CosmidD Cosmid > Plasmid >λ-DNA24.质粒是基因工程最常用的运载体，它的主要特点是：①能自主复制②不能自主复制③结构很小④蛋白质⑤环状RNA⑥环状DNA⑦能“友好”地“借居”A ：①③⑤⑦B ：②④⑥C ：①③⑥⑦D ：②③⑥⑦25下列黏性末端属于同一种限制酶切割而成的是：A．①② B．①③ C．①④ D．②③26下列平末端属于同一种限制酶切割而成的是A.①③B.①④C.②③D.②④27．作为基因的运输工具——运载体，必须具备的条件之一及理由是A.能够在宿主细胞中稳定地保存下来并大量复制，以便提供大量的目的基因B.具有多个限制酶切点，以便于目的基因的表达C.具有某些标记基因，以使目的基因能够与其结合D.对宿主细胞无伤害，以便于重组DNA的鉴定和选择28.限制性内切核酸酶的星活性是指：A 在非常规条件下，识别和切割序列也不发生变化的活性。
B 活性大大提高C 切割速度大大加快D识别序列与原来的完全不同29.下列五个 DNA 片段中含有回文结构的是A. GAAACTGCTTTGACB. GAAACTGGAAACTGC. GAAACTGGTCAAAGD. GAAACTGCAGTTTC30.DNA 连接酶是通过形成磷酸二酯键将两段 DNA 片段连接在一起，其底物的关键基团是A. 2' -OH 和 5' –PB. 2' -OH 和 3' -PC. 3' -OH 和 5' –PD. 5' -OH 和 3' -P31.下列哪种克隆载体对外源DNA的容载量最大?A质粒 B黏粒 C酵母人工染色体(YAC) Dλ噬菌体32.考斯质粒（cosmid）是一种A. 容量最大的一种载体B. 由λ -DNA 的 cos 区与一质粒重组而成的载体C.是一种单链DNA环状载体D. 不能在受体细胞内复制，但可以表达34.细菌抗药性基因存在于A．核DNA B．质粒 C．RNA D．小的直线型DNA 35.某科学工作者把兔子的血红蛋白的信使RNA加入到大肠杆菌的提取液中，在这个细胞的合成系统中能合成兔子的血红蛋白，这个事实说明A．蛋白质合成是在核糖体上进行的 B．各种生物共用一套遗传密码C．兔子和大肠杆菌的基因发生了重组 D．兔子的基因发生了突变36.下列不属于获取目的基因的方法是A.“鸟枪法”B.转录法C.反转录法D.根据已知氨基酸序列合成法37．基因工程中常作为基因的运载体的一组结构是A．质粒、线粒体、噬菌体 B．染色体、叶绿体、线粒体C．质粒、噬菌体、动植物病毒 D．细菌、噬菌体、动植物病毒38.RT-PCR中，以Oligo(dT)为引物合成cDNA第一条链的模板是（）A.tRNAB.rRNAC.mRNAD.snRNA39下列不是Southern 印迹步骤的是（）A.用限制性内切酶消化DNAB.DNA与载体的连接C.用凝胶电泳分离DNA片段D.DNA转移到硝酸纤维素膜上40.现有一长度为1000个碱基对（bp）的DNA分子，用限制性内切酶EcoR I单独酶切后得到的DNA分子仍为1000bp，用限制性内切酶Kpn I单独酶切后得到400bp 和600bp两种长度的DNA分子，用EcoR I和Kpn I同时酶切后得到200bp和600bp 的两种长度的DNA分子，该DNA分子的酶切图谱正确的是（）41下列有关基因工程中常用的限制性内切酶的描述，错误的是（）A.有特定的识别序列B.限制性内切酶的活性受温度的影响C.限制性内切酶能识别和切割RNAD.限制性内切酶可以从原核生物中提取。
42.根据基因工程的定义，下列各名词中不能替代基因工程的是（）A.基因诱变B.分子克隆C.DNA重组D.遗传工程43.利用基因工程实现分子克隆是通过（）A.SD序列的存在B.启动子的存在C.载体自主复制D.增强子的作用44.下列五个DNA片段，最有可能含有II型限制内切酶SstI酶切位点的是（）A.GGAGAGCTCTB.GAGCACATCTCTGTGGGAD.AACCTTGGAA45.下列关于质粒的叙述，错误的是（）A.质粒是共价闭合环状的双链DNA分子。
B.质粒在宿主细胞内能独立于染色体DNA自主复制。
C.基因工程中使用的质粒载体通常是紧密控制型D.质粒在细菌内一般以超螺旋形式存在。
46. 实现基因工程必须用到的工具及其作用描述正确的是（）A．限制性内切酶-----切割DNA分子，只在获得目的基因时候用到B．DNA连接酶-----连接粘性末端或者平末端，即恢复两个核苷酸之间的磷酸二酯键C．质粒-----将目的基因运输到宿主细胞后，即解体死亡D．DNA聚合酶----分子的“缝合针”47.对解旋酶、DNA连接酶、DNA聚合酶作用的部位理解正确的是（）A．解旋酶是将DNA的双螺旋展开，但不能打开两条链碱基对之间的氢键B．DNA连接酶连接的是粘性末端或者平末端的磷酸二酯键和碱基对的氢键C．DNA聚合酶需要模板，脱氧核苷酸之间脱水后形成磷酸二酯键D．DNA连接酶和DNA聚合酶都形成磷酸二酯键，因此功能一样48.下列关于DNA连接酶叙述错误的是（）A．E．coliDNA连接酶来自大肠杆菌，只能连接粘性末端B．T4DNA连接酶来自T4噬菌体，既能连接粘性末端，也能连接平末端C．T4DNA连接酶连接平末端和粘性末端效率一样D．DNA连接酶是“分子缝合针”49.下列不可做基因进入受体细胞的运载体的是（）A．质粒B．动植物病毒C．噬菌体D．线粒体50.下列对质粒的理解正确的是（）①质粒是环状的DNA分子②质粒上的标记基因可以没有③质粒必须有一至多个限制酶切点④质粒必须能自我复制或者整合到DNA上⑤天然质粒都可直接使用⑥质粒能将目的基因运输到宿主细胞中A．①③④⑤⑥B．①③④⑤C．②③④⑤D．①③④⑥51.在目的基因和质粒结合的时候，由于使用了相同的限制酶，因此在两者结合的过程中不可能出现下列哪种情况( )A．形成环状的外源DNAB．可能形成环状的载体DNAC．可能出现重组DNAD．只出现重组DNA52．甲、乙两图表示从细菌细胞中获取目的基因的两种方法，以下说法中错误的是（）A．甲方法可建立该细菌的基因组文库 B．乙方法可建立该细菌的cDNA文库C．甲方法要以脱氧核苷酸为原料 D．乙方法需要逆转录酶参与三、判断题1.质粒的构型中，线性L型是最简单的构型，因而电泳时泳动的速度最快。