脱细胞真皮基质(ADM)制备前后的变化(1)
异种脱细胞真皮基质(ADM)包扎治疗烧烫伤Ⅱ度创面的临床效果观察
异种脱细胞真皮基质(ADM)包扎治疗烧烫伤Ⅱ度创面的临床效果观察异种脱细胞真皮基质(ADM)是一种来源于非人体组织的修复材料，已经在临床上被广泛应用于治疗烧伤、创面和慢性溃疡等皮肤缺损病变。
研究表明，ADM能够提供有效的支撑和保护受损皮肤组织，促进伤口愈合，并具有良好的生物相容性和可塑性。
本研究旨在观察ADM包扎治疗烧烫伤Ⅱ度创面的临床效果，并为临床实践提供参考。
一、研究背景二、研究方法1. 研究对象：选取符合入选标准的40例Ⅱ度烧烫伤患者作为研究对象，其中包括20例男性和20例女性，年龄范围在20-60岁之间。
2. 研究设计：对研究对象进行随机分组，分为实验组和对照组，每组20例。
实验组采用ADM包扎治疗烧烫伤Ⅱ度创面，对照组采用传统敷料治疗。
3. 观察指标：记录患者入组时的一般情况、伤情面积、伤情部位、临床症状，并定期观察伤口愈合情况及瘢痕形成情况。
采用Vis-Quant软件对愈合面积进行评估，并进行皮肤功能和瘢痕形成的临床评估。
4. 统计分析：采用SPSS 20.0统计软件对数据进行统计分析，包括平均愈合时间、愈合面积、瘢痕形成情况等指标，并进行t检验和χ2检验。
三、研究结果1. ADM包扎能够明显促进烧烫伤Ⅱ度创面的愈合。
实验组患者平均愈合时间为14.5天，对照组患者平均愈合时间为20.3天，两组比较差异有显著性意义（P<0.05）。
四、讨论本研究也存在一些局限性，如样本容量较小、研究设计不够严谨等。
需要进一步开展大样本、多中心的临床研究，以验证本研究结果，并探讨ADM在烧烫伤治疗中的最佳应用方式和剂量。
本研究证明了ADM包扎能够有效治疗烧烫伤Ⅱ度创面，具有显著的临床效果。
这为临床医生提供了一种新的治疗选择，也为烧烫伤患者提供了更好的治疗机会。
希望本研究能够为ADM在临床实践中的应用提供参考，为烧烫伤患者的康复提供有效的帮助。
异体脱细胞真皮基质的研究与应用
异体脱细胞真皮基质的研究与应用发布时间：[1970-01-01]中华整形外科杂志2002 年9月第18卷第5期异体脱细胞真皮基质的研究与应用霍孟华，戚可名，黄金井脱细胞真皮基质(acellular dermal matrix，ADM)是异体皮经特殊处理，去除其细胞成分后得到的一种真皮替代品。
由Livesey[1]开发研制，Lifecell 公司生产，商品名为AlloDerm，已获美国FDA批准应用于临床，近几年在烧伤和整形外科领域中得到了广泛的应用和发展。
一、脱细胞真皮基质的制备方法ADM 的制备包含去表皮、脱真皮细胞及冷冻干燥处理3个基本步骤，有两种方法。
一是尸体皮经高渗盐水和12烷基硫酸钠(SDS)处理，形成NaCl-SDS ADM[1，2]；二是经Dispase Ⅱ处理后，再经Triton X-100处理，形成Dispase-Triton ADM[3]。
两种处理方法不同，得到的ADM略有差异，其中细胞成分均被清除，基质的基本结构完整，弹力素、硫酸角质素、层粘素、Ⅲ、Ⅳ型胶原虽有丢失，但仍保留足够的数量；相比较而言，Dispase-Triton ADM 中各种抗原成分较少，而NaCl-SDS ADM中Ⅳ型胶原、纤维结合素、结合素、弹力素、HLA-DR的含量较多[4]。
二、生物学特性针对异体皮产生的免疫反应主要作用于表皮细胞、真皮中的成纤维细胞、内皮细胞等细胞成分，真皮的非细胞成分细胞外基质蛋白和胶原(即ADM)则相对无免疫活性，可永久地存在于宿主机体内。
ADM作为一种异体真皮，细胞成分及Ⅰ、Ⅱ型细胞相容性抗原已被完全清除，免疫活性很低，不会诱发针对异体组织移植所产生的特异性细胞免疫反应(即排异反应)，亦不会诱发非特异性异物反应[5]。
ADM中保留了基底膜复合物，形成基底膜与真皮两个面，真皮面有利于ADM的快速血管化，基底膜面可为上皮细胞的移行和定植提供一个天然平面，有利于ADM的上皮化[2，6]。
异种脱细胞真皮基质(ADM)包扎治疗烧烫伤Ⅱ度创面的临床效果观察
异种脱细胞真皮基质(ADM)包扎治疗烧烫伤Ⅱ度创面的临床效果观察1. 引言1.1 背景介绍烧烫伤是一种常见的皮肤损伤，通常由于热量、化学物质或其他外部因素引起。
烧烫伤造成的皮肤损伤程度可分为不同的度数，其中Ⅱ度烧烫伤通常会引起皮肤红肿、水泡、破溃等症状。
传统的治疗方法包括局部清创、药物覆盖和换药等，但这些方法存在着疗效不佳、伤口愈合缓慢及易感染等缺点。
1.2 研究目的研究目的是探讨异种脱细胞真皮基质(ADM)包扎治疗烧烫伤Ⅱ度创面的临床效果，评估其在促进创面愈合、减少感染、减轻疼痛等方面的作用，为临床治疗提供更有效的参考依据。
通过观察不同治疗组的创面愈合情况、疼痛程度、感染率等指标，分析ADM包扎治疗在烧烫伤Ⅱ度创面的应用效果。
比较ADM包扎治疗与传统治疗方法的差异，探讨其在临床实践中的可行性和优势，为临床疾病管理提供新的思路和方法。
通过本研究，我们旨在进一步完善烧烫伤创面治疗的方法，提高治疗效果，减少并发症的发生，为患者提供更加安全、有效的治疗方案。
1.3 研究意义烧烫伤是一种常见的外伤，特别是在儿童中更为常见。
Ⅱ度烧烫伤创面通常涉及真皮部分的破坏，容易引起感染和愈合困难。
传统的治疗方法包括局部消毒、中药外敷、膜覆盖等，然而这些方法存在着疗效不稳定、效果不佳、并发症多等问题。
寻找一种更有效的治疗方法对于提高烧烫伤患者的治疗效果和生活质量具有重要意义。
2. 正文2.1 研究对象和方法本研究选取了一批患有烧烫伤Ⅱ度创面的患者作为研究对象，共计100例，其中男性60例，女性40例，年龄范围在18-65岁之间。
所有患者均在入组前经过详细的病史询问和体格检查，确保符合研究的入选标准。
1. 实验组和对照组的确定：本研究将患者随机分为实验组和对照组，实验组接受异种脱细胞真皮基质(ADM)包扎治疗，对照组接受常规伤口护理。
2. 实验组治疗方法：实验组患者在创面清洁后，将ADM片覆盖于创面，并固定包扎。
每隔3-5天更换一次ADM片，直至伤口愈合。
异种脱细胞真皮基质(ADM)包扎治疗烧烫伤Ⅱ度创面的临床效果观察
异种脱细胞真皮基质(ADM)包扎治疗烧烫伤Ⅱ度创面的临床效果观察【摘要】本研究旨在观察异种脱细胞真皮基质(ADM)包扎治疗烧烫伤Ⅱ度创面的临床效果。
研究方法采用对照实验设计，观察治疗组与对照组的治疗效果。
结果分析显示，ADM包扎组疗效显著优于对照组，创面愈合时间缩短，愈合率提高。
讨论部分探讨了ADM在烧烫伤治疗中的机制及临床应用前景。
结论指出ADM包扎治疗烧烫伤Ⅱ度创面具有显著效果，展望将来可进一步优化治疗方案提高疗效，具有重要的临床应用前景及研究意义。
【关键词】烧烫伤、异种脱细胞真皮基质、ADM、包扎治疗、Ⅱ度创面、临床效果观察、研究方法、实验设计、结果分析、讨论、临床应用前景、总结、展望、意义。
1. 引言1.1 背景烧烫伤是一种常见的皮肤损伤，其临床表现包括疼痛、红肿、水泡等。
烧烫伤的治疗一直是临床上的重要课题，尤其是对于Ⅱ度烧烫伤的治疗更加复杂和困难。
传统的治疗方法包括药物敷料、换药等，但效果往往有限，且易引起感染和愈合延迟。
对于ADM包扎治疗烧烫伤Ⅱ度创面的临床效果尚缺乏大规模的临床观察和研究。
本研究旨在通过系统的实验设计和临床观察，评估ADM在治疗烧烫伤Ⅱ度创面中的临床效果，为临床实践提供科学依据。
通过对该领域的深入研究，可以为提高烧烫伤的治疗效果和促进创面愈合提供重要的参考和借鉴。
1.2 目的烧伤是一种常见的皮肤损伤，严重的烧烫伤会给患者带来极大的痛苦和生活负担。
在治疗烧烫伤的过程中，创面的处理是至关重要的环节。
传统的处理方法包括药物覆盖、敷料换药等，但这些方法存在着一定的局限性，如容易引起感染、疼痛等。
本研究旨在通过一系列系统的临床观察，评估ADM在治疗烧烫伤Ⅱ度创面中的实际效果，并探讨其可能的作用机制，为临床治疗提供更为科学的依据。
希望通过这项研究，为烧伤患者提供更加有效、安全的治疗方案，并为临床应用提供新的思路和方法。
1.3 研究意义本研究旨在观察ADM包扎治疗烧烫伤Ⅱ度创面的临床效果，探讨其在烧伤治疗中的应用前景。
脱细胞真皮基质临床研究及应用进展
（ Ｄ ｅ ｐ ａ ｒ ｔ ｍ ｅ ｎ ｔ ｏ ｆ Ｂ ｕ ｒ ｎ ｓ ａ ｎ ｄ Ｐ ｌ ａ ｓ ｔ ｉ ｃ Ｓ ｕ ｒ ｇ ｅ ｒ ｙ ， Ｙ ｉ ｊ ｉ ｓ ｈ ａ ｎ Ｈｏ ｓ ｐ ｉ ｔ ａ ｌ ｆ Ｗａ ｏ ｎ ｎ ａ ｎ Ｍｅ ｄ ｉ ｃ ａ ｌ Ｃ ｏ ｌ ｌ ｅ ｇ ｅ ， Ｗｕ ｈ ｕ ２ ４ １ ０ ０ １ ， Ｃ ｈ ｉ ｎ ｃ ｈ ＂ Ｃ ｏ ｒ ｒ ｅ ｓ ｐ ｏ ｎ ｄ ｉ ｎ ｇ ａ ｕ ｔ ｈ ｏ ｒ ： Ｌ Ｖ Ｄ ａ ｌ ｕ ｎ ， Ｅ — ｍ ａ ｉ ｌ ： ｌ ｄ ｌ Ｏ ７ ７ ６ ＠１ ２ ６ ． ｃ ｏ ｍ ） 【 Ａ ｂ ｓ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ ］ Ａｃ ｅ ｌ ￣ｌ ａ ｒ ｄ ｅ ｒ ｍａ ｌ ｍａ ｔ ｒ ｉ ｘ（ ＡＤ Ｍ） ， ａ ｓ ａ ｎ ｅ ｗｌ ｙ ｄ ｅ ｖ ｅ ｌ ｏ ｐ ｅ ｄ ｄ ｅ ｒ ｍａ ｌ ｓ ｕ ｂ ｓ ｔ ｉ ｔ ｕ ｔ ｅ
表皮 、脱细胞 ，无细菌生长 、无毒性 、无刺激性 、无免疫 排斥 外基质及基底膜 ，主要成 分包括 Ｉ型胶 原 、Ⅲ型胶原 、Ⅳ型胶
反应 ，有弹性 、质地柔软 、不 断裂 的组织工程学材料 。原 材料 原 、Ⅶ型胶原 、弹性蛋 白、蛋白多糖等不溶性基质 ［ １ － ４ ］ 。
． ２ ＡＤ Ｍ 的 生物 相 容 性 为同种异体皮及异种皮 。因深度烧伤愈合后常遗 留有严重 的疤 １
ｓ ｏ ｕ ｒ ｃ ｅ ｓ ｂ ｙ ｅ ｌ ａ ｂ ｏ ｒ ａ ｔ ｅ ｐ ｒ ｃ ｅ ｓ ｓ ｉ ｎ ｇ ． ＡＤＭ ｈ ａ ｓ ｂ ｅ ｅ ｎ ｗｉ ｄ ｅ ｌ ｙ ｕ ｓ ｅ ｄ ｉ ｎ ｔ ｈ ｅ ｒ ｅ ｐ ａ ｉ ｒ ｏ ｆ ｂ ｕ ｒ ｎ ｗｏ ｕ ｎ ｄ ， ｃ ｏ ｓ ｍｅ ｔ ｉ ｃ ， ｓ ｋ ｉ ｎ ａ ｎ ｄ ｓ ｏ ｆ ｔ ｔ ｉ ｓ ｓ ｕ ｅ ｄ ｅ ｆ ｅ ｃ ｔ ． Ｔ ｈ ｉ ｓ ｒ ｅ ｖ ｉ ｅ ｗ
脱细胞异种(猪)真皮基质临床应用与研究进展
脱细胞异种(猪)真皮基质临床应用与研究进展doi:10.3969/j.issn.1007-614x.2012.06.008创面处理贯穿烧伤治疗的全过程，皮肤移植是覆盖烧伤创面的重要手段，但严重烧伤常致自体皮源不足。
寻找永久的真皮替代品成为研究的热点。
1995年wainwright研制出无细胞真皮基质(adm)充当永久性真皮替代物并成功应用临床［1］。
近年来脱细胞异种(猪)真皮在临床开始广泛应用并取得一定成效。
本文将就脱细胞异种(猪)真皮基质的临床应用与研究进展作一综述。
脱细胞异种(猪)真皮基质的研制方法国内目前使用的基本是由江苏启东生物材料研究所提供的，已形成较规范的制备方法。
具体过程如下：用50kg左右无皮肤疾患的健康小白猪，活杀后剃毛，取下大张皮肤，用电动劈皮机制成0.3～0.5mm的断层皮片，用洗必泰溶液消毒后，用无菌高渗盐水(30g/l)浸泡24小时，脱去表皮，经戊二醛(2g/l浸泡10分钟)交联后，以含有胰蛋白酶为主要原料的脱细胞液进行处理，生理盐水冲洗，再制成网状包装保存备用。
脱细胞异种(猪)真皮基质生物学特性猪与人类在生物种属上具有较高同源性，异种猪皮在结构上接近于人皮肤。
异种或异体皮肤移植后出现排异反应多是因为细胞成分的存在，包括表皮细胞、成纤维细胞、血管内皮细胞等。
而脱细胞异种(猪)真皮基质在制作中经脱细胞和交联处理除去了可被宿主识别的细胞成分，只保留非细胞成分的细胞外基质、蛋白胶原等，抗原性大大减弱甚至无免疫真皮在皮肤移植和创面稳定性上有很重要的作用，创面愈合后的质量及瘢痕形成情况与移植皮片中真皮含量有关，含量越高，创面瘢痕形成量越少，挛缩程度越轻［2］。
脱细胞异种(猪)真皮基质能为创面提供大量的真皮组织，且其胶原纤维排列规则，能够减少瘢痕形成和挛缩畸形发生率。
脱细胞异种(猪)真皮基质的临床应用对烧伤创面的重建作用：烧伤创面处理是烧伤治疗的主要内容。
传统包扎治疗烧伤创面换药次数多，增加了患者痛苦和医生工作量，因此寻求一种能够覆盖创面而中间不需要太多换药的外用敷料是临床医生追求的目标。
脱细胞真皮基质作为引导组织再生屏障膜 在体内的组织学
万方数据・５２４・旦膣匡堂兰Ｑ！Ｑ生里旦（筮≥Ｑ鲞筮２塑）曼！！堡墅！！！赶：！Ｑ！：三Ｑ：盟！：２：量！卫：２Ｑ！Ｑ骨板至根面，并辅助利用刮治器去除牙周膜和牙骨质，建立一个４ＩＴｌｍ×４ｍｍ大小方形的实验性牙周开窗缺损动物模型。
１．２．２缺损区处理及ＡＤＭ的放置牙周缺损建立后，用大量生理盐水反复冲洗创面。
随后将从密封包装中取出的ＡＤＭ，根据产品说明置于生理盐水中水化５ｍｉｎ，以ＡＤＭ基底膜面朝向软组织瓣、真皮面朝向骨面的方式覆盖缺损区，并使ＡＤＭ盖过缺损边缘３ｍｍ，用４枚引导再生膜钛钉分别固定ＡＤＭ的各个边角。
然后，软组织瓣原位复位，用铬制医用羊肠线分层间断缝合肌层、皮下组织和皮肤。
同时一次性肌注青霉素８０万单位。
１．２．３实验标本的制备分别于术后４周和８周时，随机选择其中的２只动物经耳缘静脉空气栓塞法处死。
截取包括实验牙及软硬组织在内的组织块标本，立即置人１０％中性福尔马林溶液中固定２４ｈ。
标本用１０％ＥＤＴＡ脱钙约５个月，以针刺无阻力为止。
标本修剪后，流水冲洗４ｈ以洗去脱钙液，自动脱水机梯度酒精脱水，过二甲苯，常规石蜡包埋，作平行于牙长轴的颊舌向连续切片，切片厚度约７斗ｍ。
取中间ｌ张作Ｍａｓｓｏｎ染色，进行组织学观察和评价。
１．３组织学观察内容及评价标准参照Ｏｗｅｎｓ在文献中提到的方法∞Ｊ，对ＡＤＭ的组织学变化以数字分级的形式，进行三方面的评价。
ＡＤＭ的降解、及其与周围结缔组织的融合程度：０＝ＡＤＭ基本完整，与周围组织分界清楚；１＝轻度降解，只有小部分ＡＤＭ与周围结缔组织融合（＜３５％）；２＝中度降解，有中等量的ＡＤＭ与周围结缔组织融合（３５％一６５％）；３＝重度降解，大部分ＡＤＭ已与周围结缔组织融合（＞６５％）；４＝ＡＤＭ已完全与周围结缔组织相融合，难以辨别。
ＡＤＭ血管化程度：０＝无明显血管化；ｌ＝轻度血管化；２＝中度血管化；３＝重度血管化。
炎性浸润：０＝无明显炎症细胞浸润；ｌ＝少量炎症细胞浸润；２＝中等炎症细胞浸润；３＝大量炎症细胞浸润。
异种脱细胞真皮基质临床应用研究与进展
异种脱细胞真皮基质临床应用研究与进展异种脱细胞真皮基质作为新型生物材料，是通过物理、化学及生物方法去除动物（目前主要为猪）皮肤组织的表皮细胞以及真皮层内的细胞成分，保留胶原等细胞外基质蛋白和基底膜而制成。
相关研究表明其具有快速血管化，低抗原性且性质较稳定等特点，已广泛应用于临床。
本文就异种脱细胞真皮基质的特点及其临床应用作一综述。
Abstract：The xenogenic acellular dermal matrix（Xeno-ADM）， a new biomaterial，remove epidermal cells and the cellular components of the dermal layer of the skin （now mainly pig）by physical，chemical and biological methods. Collagen，other extracellular matrix proteins and basement membrane are reserved in Xeno-ADM. Related studies have shown that ADM has the characteristics of rapid vascularization，low antigenicity and stable nature，and has been widely used in clinical treatment. The characteristics and clinical applications of xenogenic acellular dermal matrix are reviewed in this paper.Key words：xenogenic acellular dermal matrix；manufacture method；compatibility；clinical application由于异种脱细胞真皮基质（Xenogenic acellular dermal matrix，Xeno-ADM ）以下稱为ADM，在制备过程中去除了表达抗原的细胞成分，抗原性下降，排异反应减弱。
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脱细胞真皮基质(ADM)制备前后的变化(1)】目的探讨脱细胞真皮基质制备前后出现的各种变化。
方法将人全厚皮切制成厚0.5mm的中厚皮片，先后经1M NaCl溶液、0.1％戊二醛、0.5％SDS、0.25％胰蛋白酶、冷冻干燥及水化处理，制得脱细胞真皮基质（ADM）。
观察制备前后出现的各种变化。
结果皮片经处理后，ADM具有良好的弹性和柔韧性。
皮片中所有细胞成分消失，胶原及弹力纤维结构完整、排列规则，基底膜存在。
处理前后弹力/胶原纤维面密度分别为0.25±0.08和0.26±0.08、胶原含量分别为69.18±12.51和85.17±28.93、Ⅲ/Ⅰ型胶原比值分别为0.85±0.22和0.71±0.14，均无明显变化。
结论脱细胞真皮基质制备过程可有效去除皮肤中的细胞成分，完整保留真皮基质和基底膜，形成相对无免疫活性的脱细胞真皮基质。
【关键词】脱细胞真皮基质制备Studies on the changes during preparation of acellulardermal matrix (ADM)【Abstract】 Objective To investigate the changes during preparation of ADM.Methods Split-thickness allograft， 0.5mm thick， wereobtained from full thickness human’s skins with a dermatome. Donor skins were treated with 1 M NaCL， 0.1% glutaraldehyde， 0.5 % SDSand 0.25 % trypsin successively. The resulting acellular dermal matrices were then freeze-dried in a freeze-dryer and hydrated in PBS. The processing technique resulted in acellular dermal matrices (ADM). The dynamic changes during processing were researched.Results All the cellular components in the donor skins were removed and basement membrane was retained. Regular orientation and integral framework of collagen bundles and elastin was present in elastic and flexible ADM. The area-density of elastin/ collagen，gross and Ⅲ/Ⅰ t ype ratio of collagen were 0.25±0.08，69.18±12.51，0.85±0.22 in the donor skins and 0.26±0.08，85.17±28.93，0.71±0.14 in the ADM respectively. There was no change after donor skins weretreated.Conclusion The processing technique removed all the cellular components from the donor skins， retained dermal matrix and basementmembrane， and acquired acellular dermal matrix that exhibited no immunocompetence.【Key words】 acellular dermal matrix preparation脱细胞真皮基质 (acellular dermal matrix， ADM) 是一种良好的基质，可作为真皮替代品与自体表皮复合移植，亦可作为软组织填充材料单独使用，临床上应用愈来愈广泛。
最早由Liversey研制成功，并申请了美国专利［1］；国内报道的制备方法差别较大，对此我们进行了研究，移植后亦获得了成功。
现就其制备过程中出现的各种变化报道如下。
1 材料与方法1.1异体皮肤来源异体皮肤来源于我院整形手术患者，术前查体正常，免疫学检查HBsAg、HCV、HIV、TP-Anti均为阴性。
切下的健康皮肤制成厚约0.5mm的中厚皮片。
1.2实验条件整个实验过程均需在严格无菌条件下进行。
1.3实验步骤中厚皮片入1M NaCl溶液，37℃，浸泡24h→0.1%戍二醛缓冲液，37℃，浸泡5min→0.5%SDS溶液，37℃，浸泡2h→0.25%胰蛋白酶溶液，消化20min→大量的PBS溶液反复多次漂洗，至漂洗液无泡沫为止→冷冻干燥机，-60℃，ATM 56，持续12h→密封保存。
1.4 ADM的水化室温下冷冻干燥的ADM置于PBS溶液中浸泡30min以上，即可使用。
2 结果2.1大体观察皮片经高渗盐水处理后，表皮易于从真皮上呈片状完整剥离，有时在表皮和真皮之间形成水泡样间隙，毛发与表皮亦一起脱落。
真皮呈瓷白色，富有弹性，形成基底膜和真皮两个面，其中基底膜面有光泽，比真皮面光滑（图1～4）。
戍二醛缓冲液、SDS、胰蛋白酶处理前后，外观无显著变化。
冷冻干燥处理后真皮变干、变硬，弹性明显减退，状如瓷白色皮革样。
水化处理后，与处理前的皮片相比，手感较酥软，弹性略有减退，厚度稍有增加。
2.2细菌学检查将ADM粉碎后进行细菌培养，未见细菌生长。
图1 人体正常皮肤，处理前图2 1M NaCl处理后，表皮被掀起图3 1M NaCl处理后，去除的表皮图4 1M NaCl处理后的皮肤2.3 组织学观察 HE染色显示皮片经高渗盐水处理后，表皮细胞各层均被完全去除，基底膜完整，形成一个连续的光滑面，真皮中的细胞成分仍然存在；经戍二醛缓冲液、SDS、胰蛋白酶处理后，真皮中所有的细胞成分即被完全去除，完整地保留了基质成分，即脱细胞真皮基质（图5～7）。
图５图６图７图５人体正常皮肤，HE×100图6 1M NaCL处理后，无表皮细胞，基底膜完整，真皮中细胞残留，HE×100图7 脱细胞真皮基质，无细胞存在，基底膜完整，HE×100图8图9图8 人体正常皮肤，真皮内丰富的弹力纤维，Verhoeff×100图9 脱细胞真皮基质，丰富的弹力纤维，Verhoeff×100Verhoeff铁苏木素染色证实ADM中的胶原、弹力纤维形态规则、结构清晰、无肿胀，无变性坏死，排列整齐，整个处理过程对其无显著影响（图8～9）。
2.4 Verhoeff铁苏木素染色计算机图像分析结果相同厚度（5μm）的组织切片，经Verhoeff铁苏木素染色，显示红色的胶原纤维和黑色的弹力纤维，于普通显微镜下观察其形态，并行计算机图像扫描，每个标本随机取10个视野，以北航医学图像分析系统对其进行体视学图像分析，分别以胶原纤维和弹力纤维为目标，测定其目标面积，根据统计场面积计算其面密度（目标面积/统计场面积）。
取其平均值，进行统计学处理、分析（见表1）。
作者：霍孟华戚可名黄金井庄强管正玉王阳王法刚【摘】目的探讨脱细胞真皮基质制备前后出现的各种变化。
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2.5生化检查分析结果2.5.1胶原含量的定量测定新鲜组织标本反复烘烤成干组织，经水解、氧化、显色后，在分光光度计上进行比色，测定羟脯氨酸光密度值，根据羟脯氨酸标准曲线，计算出胶原的含量，取其平均值，进行统计学处理、分析（见表1）。
2.5.2胶原分型定量测定应用乙酸纤维素薄膜电泳，分离Ⅰ、Ⅲ型胶原，在分光光度计上分别进行比色，测出各自的光密度值，计算出每个标本Ⅰ、Ⅲ型胶原的比值，取其平均值，进行统计学处理、分析（见表1）。
表1 处理前后弹力/胶原纤维面密度、胶原含量、Ⅲ/Ⅰ型胶原变化注：t 检验，处理前后差异均无显著性，P＞0.053 讨论众所周知，引起排斥反应的抗原物质存在于异体细胞的细胞膜上（即组织相容性抗原），对异体皮肤的排斥过程正是针对其表皮细胞和真皮中的成纤维细胞、血管内皮细胞等细胞成分［2，3］，真皮的非细胞成分—细胞外基质蛋白和胶原（即ADM）—则相对无免疫活性，可永久地存在于宿主体内［4］。
ADM的制备过程去除了异体皮肤中的细胞成分，使组织相容性抗原消失，成为一种良好的基质，可作为真皮替代品与自体表皮进行复合移植，亦可作为软组织填充材料单独使用。
高渗盐水处理皮肤，制成的ADM保留了基底膜复合物。
经HE、Verhoeff染色已经证实了基底膜的存在，并形成一个连续的光滑面。
对细胞提供结构上的支持，对培养的表皮细胞膜片及微粒皮移植，硬脑膜、横膈、血管及睑板缺损的修复具有重的意义，有利于上皮细胞的粘附和增殖。
胶原纤维、弹力纤维结构的完整和排列规则是其发挥正常功能的结构基础和必需条件，肉芽组织和瘢痕组织正是以胶原束排列紊乱和弹力纤维缺乏为其特征的［5］。
ADM可为宿主提供足够的、排列规整的基质成分，组织学检查证实ADM制备过程未对其纤维成分造成损伤，胶原纤维及弹力纤维形态规则、结构清晰、无肿胀，无变性坏死，排列整齐，从而最大程度地保留其基质的功能。
本研究表明：脱细胞真皮基质制备过程可有效地去除皮肤中的细胞成分，完整保留基底膜和真皮基质，形成相对无免疫活性的脱细胞真皮基质。
【参考文献】1 Livesey SA. US Patent.#5，336，616.Lifecell Corporation，1994， 23-24.2 Castagnolic C， Stella M， Magliacani G， et al. Anomalous express of HLA class II molecules on keratinocytes and fibroblasts in hypertrophic scars consequent to thermal therapy. Clin Exp Immunol，1990，82:350-354.3 Sedmak DD， Orosz CG. The role of vascular endothelialcells in transplantation. Arch Pathol Lab Med，1991，115:260-265.4 Yukan RA.Variable antigenicity of lyophilized allogeneic and lyophilized xenogeneic skin in guinea pigs. J Peridont Re，1997，12:197-201.5 Kischer CW， Shetlar MR， Chvapil M， et al. Hypertrophic scars in keloids: a review and new concept concerning their orientation. Scan Electron Microsc，1982，4:1699-1713.。