生物物理技术(1)
物理实验技术中的生物物理实验操作

物理实验技术中的生物物理实验操作近年来,生物物理学在科学研究领域越来越受到重视。
生物物理实验操作作为该学科的重要组成部分,起着举足轻重的作用。
本文将介绍一些常见的生物物理实验操作技术,并探讨其在研究和应用中的重要意义。
1. 显微镜技术显微镜是生物物理实验中最常用的仪器之一。
它可以放大和观察微观世界中的生物细胞和分子结构。
在生物物理实验中,常用的显微镜有光学显微镜和电子显微镜。
光学显微镜具有较低的分辨率,适合观察较大的细胞结构,而电子显微镜具有较高的分辨率,适合观察更小的分子结构。
通过显微镜技术,研究人员可以观察到生物组织的形态结构,为更深入的研究提供了基础数据。
2. 蛋白质电泳技术蛋白质电泳是一种常用的生物物理实验方法,可以对蛋白质分子进行分离和分析。
常见的电泳方法有SDS-PAGE和二维电泳。
在SDS-PAGE中,通过一系列电泳处理步骤,可以将样品中的蛋白质分离成不同大小的带状条带。
二维电泳进一步提高了分离效果,可以在水平和垂直两个维度上对蛋白质进行分离。
蛋白质电泳技术为研究人员提供了蛋白质的分子质量和电荷信息,为了解蛋白质的结构和功能奠定了基础。
3. 核磁共振技术核磁共振(NMR)技术在生物物理研究中发挥着重要作用。
通过NMR技术,研究人员可以了解分子的结构和动态行为。
NMR技术利用原子核在磁场中的行为进行分析,可以获得关于分子结构、分子间相互作用和分子动力学等方面的信息。
在生物物理实验中,NMR技术常用于研究蛋白质和核酸的结构和功能,为了解生物分子的相互作用提供了重要的数据。
4. 生物循环技术生物循环技术是一种通过对生物体内循环系统进行操作和观察的方法。
在生物物理实验中,常用的生物循环技术包括注射、输液和心电图等。
通过注射技术,研究人员可以将试验物质直接注射到生物体内,观察其对生物体的影响。
输液技术可以通过给予生物体液体药物或营养物质,在一定时间内使其持续吸收。
心电图技术可以记录生物体的心电活动,用于观察心脏功能和研究心血管系统。
生物物理学中的单分子测量技术

生物物理学中的单分子测量技术生物物理学是关于探究生命的基本物理规律的学科。
单分子测量技术正是生物物理学在探究生命过程中一项重要的技术手段。
通过单分子测量技术,研究者可以在亚微观尺寸下,监测、分析分子之间的交互作用、反应过程等生物学事件。
近年来,单分子测量技术已经成为了许多领域研究中的核心手段。
一、技术原理单分子测量技术的基本原理是利用高分辨率的显微镜、敏感的检测器和设计精密的实验系统,观察、记录单个分子在水相或固相中的性质、运动以及反应等过程。
这项技术旨在揭示分子水平上的行为和动力学过程,无需对相互作用进行均化,相对于传统的差谱和平均技术,单分子技术可以提供更精确的信息。
二、主要技术方法介绍1. 荧光单分子成像技术荧光单分子成像技术(Fluorescence single molecule imaging)让研究者们能够在单个分子水平下观察和记录其行为。
技术的原理是将荧光标记物标记到生物大分子上,然后在显微镜下对它们进行照射,通过检测这些荧光标签的发光,就可以测量这些分子在空间和时间上的精确位置。
这种技术被广泛应用于细胞分子动态行为、跨膜信号传导、重要酶类反应体系等生命科学研究中。
2. 原子力显微镜技术原子力显微镜技术(Atomic force microscopy,AFM)是一种基于探针的扫描隧道显微镜技术。
在生物物理学中,AFM被广泛用于纤维、膜、蛋白质、DNA、RNA或其他生物大分子的单分子测量。
AFM技术能够在原子级别下区分样品的不同特性,提供各种样品的形态、力学性质、亲和性、表面反应速率等信息。
三、应用领域单分子测量技术已经成为了许多领域研究中的核心手段,包括生命科学、物理学、化学、材料科学、电子信息等领域。
其中,生物酶学、分子医学、分子生物学等领域正是单分子技术的主要应用领域。
通过单分子技术,科学家们可以对大分子的结构和功能进行深入的研究,从而促进生物技术的发展和创新,为疾病的提前预防、诊断和治疗提供了新的思路和途径。
生物物理知识点总结

生物物理知识点总结一、生物分子的结构与功能1. 蛋白质结构与功能在生物物理学中,蛋白质是研究的重点之一。
蛋白质在生物体内扮演着重要的角色,包括酶的催化作用、细胞信号传导、结构支持等。
通过X射线晶体学、核磁共振等技术,科学家可以解析蛋白质的三维结构,从而揭示其功能原理。
2. DNA和RNA的结构和功能DNA和RNA是生物体内负责储存和传递遗传信息的核酸分子。
它们的结构特点及功能机理对于生物体的生长、发育和遗传变异至关重要。
生物物理学家通过研究DNA和RNA的空间结构、分子间相互作用等信息,揭示了它们在DNA复制、转录和翻译过程中的作用机制。
3. 脂质的结构与生物功能脂质是构成生物膜的重要组成成分,它在细胞膜的形成、细胞信号传导等生物过程中发挥着重要作用。
生物物理学家研究了脂质分子的结构与性质,深入揭示了脂质在细胞膜形成和功能调控中的重要作用。
二、生物膜的物理性质1. 细胞膜的结构和功能细胞膜是生物体内细胞的保护膜,同时也是细胞与外界环境之间传递物质的界面。
生物物理学研究了细胞膜的结构特点、物理性质和功能机理,从而揭示了细胞膜在物质交换、细胞信号传导等方面的作用原理。
2. 膜蛋白的结构和功能膜蛋白是生物膜上的重要蛋白质成分,它在细胞内外物质传递、细胞信号传导等生物过程中发挥着重要作用。
生物物理学家研究了膜蛋白的结构特点、与脂质分子的相互作用等信息,揭示了膜蛋白在细胞膜功能中的重要作用。
3. 离子通道的结构和功能离子通道是细胞膜上的一类膜蛋白,它在细胞内外离子传递过程中发挥着重要作用。
生物物理学家研究了离子通道的结构特点、离子选择性和通道开关机制等信息,深入揭示了离子通道在细胞内外物质传递中的重要作用。
三、生物能量转换和传递过程1. ATP合成机制ATP是生物体内细胞内能量储存和转移的重要分子,它在细胞内能量转化过程中发挥着重要作用。
生物物理学研究了ATP合成酶的结构与机制,揭示了ATP合成机制中化学能量与机械能的转换原理。
生物物理学中的光合作用

生物物理学中的光合作用光合作用是生物学中非常重要的一种生命活动过程,它是自然界中光合生物得以存活的根本条件,也是地球上生命的重要基础。
光合作用的发现和研究历经了一个漫长的过程,其研究一直是生物学、物理学、化学等多个学科共同发展的结果。
本文将展开介绍光合作用在生物物理学中的研究现状、涉及到的实验方法以及光合作用相关的一系列问题。
一、光合作用的概念和作用光合作用是指植物、藻类等绿色生物利用光能将无机物合成为有机物的过程。
在这个过程中,光能被转换成化学能,其化学反应的主要过程是将水和二氧化碳转化成氧气和葡萄糖等有机物。
光合作用在人类社会中有着非常重要的作用。
它是维持地球生态平衡、控制二氧化碳的浓度等环境因素的重要手段。
此外,光合作用还是植物生长的重要基础,也是食物链的起点。
二、光合作用研究的历程光合作用的研究可以追溯到18世纪,当时,Joseph Priestley观察了许多植物释放的氧气,后来发现这些氧气是来自植物在光照下的呼吸作用。
到了19世纪,Julius von Sachs提出了光合作用的概念,并研究了光合作用的特征。
到了20世纪,Melvin Calvin等人通过同位素追踪实验首次揭示了CO2固定反应的物质基础,为光合作用的深入研究做出了重要贡献。
随着科学技术的不断进步,生物物理学家们开发了一系列验证光合作用的方法和技术,从而对光合作用进行进一步了解。
三、光合作用研究的实验方法1. 光谱学方法通过对生物体内各种荧光分子的发光和吸收光谱进行实验来研究光合作用的机理。
2. 光电子能谱技术通过观察物质电子能量的变化来研究光合作用的电子转移和电子传递过程。
3. 活体荧光技术通过注射、转化等手段将线粒体、叶绿体等标记的荧光物质注入生物体内,观察其发光特性,了解光合作用的机理和过程。
另外,现在还有许多其他的实验方法如融合技术、单分子操纵技术、电生理技术等等,都可以用于光合作用的研究。
这些实验方法不仅给生物物理学家提供了研究光合作用的工具,也为人们了解光合作用的特性和机理提供了更详细更准确的数据和证据。
生物物理学在医学中的应用

生物物理学在医学中的应用生物物理学是研究生命系统的物理性质和规律的学科,它涉及生物体各种层次的结构和功能,包括分子、细胞、组织和器官等。
随着现代医学技术的不断发展,生物物理学日益成为了医学研究和临床实践的重要支撑。
一、生物物理学在疾病诊断中的应用1.电生理学的应用电生理学是研究神经系统、心血管系统等生物系统的电生理现象的学科。
通过电生理学的研究,可以了解到某些疾病的病因及其发病机制,并能为其诊断提供有力依据。
例如,心电图就是一种通过电生理学手段记录心脏电活动的方法。
通过心电图可以对心脏的生理功能及其不同状态进行诊断判断,如检测心律失常、心肌缺血、传导阻滞等。
此外,脑电图、视觉诱发电位等电生理检查方法也已应用于临床诊断。
2.超声诊断的应用超声诊断技术是利用超声波在人体内部产生的反射及传播特性,对体内组织、器官进行成像诊断的技术。
它具有无创伤、无痛苦、成像清晰等优点,广泛用于临床诊断。
超声特别适合用于婴儿、孕妇等无法进行放射线检查的人群,并且对部分疾病具有一定的敏感性,如子宫、乳腺、甲状腺等的肿块、囊肿、结石等疾病的诊断。
3.磁共振成像的应用磁共振成像(MRI)是一种使用强磁场和无线电波产生高清晰度影像的成像技术。
它可以有效地检测和诊断各种疾病。
MRI成像技术对人体无辐射、无创伤、无副作用,可以帮助医生对神经系统、心血管系统、骨骼关节等人体内部器官进行三维重建,使用中也越来越广泛。
二、生物物理学在疾病治疗中的应用1.激光疗法的应用激光治疗是指利用激光产生的光能,对人体进行治疗的一种技术。
它对许多疾病有显著的治疗效果,包括眼科、口腔科、皮肤科、肿瘤科等领域。
例如,激光手术可以开展眼科的近视、白内障等手术,也可以用于口腔科的口腔溃疡、牙周病的治疗等。
2.放射治疗的应用放射治疗是利用放射性物质或高能射线杀死恶性肿瘤细胞、控制肿瘤生长的技术。
它是现代肿瘤治疗的一种重要手段,在减少肿瘤患者死亡率、缓解疼痛、提高生存质量等方面发挥了重要作用。
生物物理学

生物物理学生物物理学是研究生物体结构、功能、发展和互动过程中的物理学原理及其应用的学科领域。
它将物理学的理论和技术手段应用于生物学领域,旨在揭示生物系统的奥秘并推动生物医学和生物工程等领域的进步。
1. 生物物理学的起源与发展生物物理学的历史可以追溯至19世纪,当时科学家们开始意识到生物学和物理学之间存在着密切的联系。
随着科学技术的进步,生物物理学逐渐成为一个独立的学科领域。
20世纪以来,生物物理学的发展取得了巨大的进展,涌现出许多重要的理论和技术。
2. 生物物理学的研究对象生物物理学主要研究生物体内各种生物分子、细胞结构与功能、生物体的运动与形态变化等现象。
通过研究生物体内的物理过程,生物物理学试图解释生物体内发生的各种生物学现象,并探索生物系统的规律性和普适性。
3. 生物物理学的研究方法生物物理学采用了许多物理学的理论和技术手段,如光学显微镜、电子显微镜、核磁共振、X射线衍射等。
这些技术手段可以帮助科学家们观察和测量生物体内的微观结构和运动过程,从而揭示生物体内的物理规律。
4. 生物物理学在生物医学和生物工程中的应用生物物理学为生物医学和生物工程领域的发展提供了重要的理论和技术支持。
通过生物物理学的研究,科学家们可以更好地理解生物体的结构与功能,从而研发新的医疗技术和生物工程产品,为人类的健康和生活质量带来更多的好处。
5. 生物物理学的未来发展趋势随着科学技术的不断进步,生物物理学领域面临着更多挑战和机遇。
未来,生物物理学将继续发展新的理论和方法,努力揭示生物系统的奥秘,推动生物医学和生物工程等领域的进步,为人类社会的可持续发展做出更大的贡献。
生物物理学作为生物学和物理学的交叉学科,在科学研究和应用领域中发挥着重要作用。
我们有理由相信,生物物理学将在未来的科学研究中继续发挥重要作用,为人类社会的发展带来更多的惊喜和贡献。
生物物理学

生物物理学一生物物理学的定义生物物理学(Biological Physics)是物理学与生物学相结合的一门交叉学科,是生命科学的重要分支学科和领域之一。
生物物理学是应用物理学的概念和方法研究生物各层次结构与功能的关系、生命活动的物理、物理化学过程和物质在生命活动过程中表现的物理特性的生物学分支学科。
生物物理学旨在阐明生物在一定的空间、时间内有关物质、能量与信息的运动规律。
关于生物物理学属于生物学的分支还是物理学的分支,一些生物学家认为他们研究生命现象时只是引入了物理学的理论和方法,属于生物学的一个分支。
但有些物理学家认为,研究生命的物质运动,只是物理学研究对象由非生命物质扩展到生命物质。
应该属于物理学的分支。
不同研究领域的学者处于不同的角度,也就有了不同的定义二生物物理学的研究内容和现状(一) 生物物理学的研究内容生物物理学研究的内容十分广泛,涉及的问题则几乎包括生物学的所有基本问题。
由于生物物理学是一门正在成长着的边缘学科,其具体内容和发展方向也在不断变化和完善,它和一些关系特别密切的学科(生化、生理等)的界限也不是很明确。
现阶段,生物物理的研究领域主要有以下几个方面:1 分子生物物理。
分子生物物理是本学科中最基本、最重要的一个分支。
它运用物理学的基本理论与技术研究生物大分子、小分子及分子聚集体的结构、动力学,相互作用和其生物学性质在功能过程中的变化,目的在于从分子水平阐述生命的基本过程,进而通过修饰、重建和改造生物分子,为实践服务。
生物大分子及其复合物的空间结构与功能的关系是分子生物物理的核心问题。
自从50年代X射线衍射晶体分析法应用于核酸与蛋白质获得成功,奠定了分子生物学发展的基础,至今已有40余年历史。
在这段时期中,有关结构的研究大体上经历了3个主要阶段:①晶体结构的研究;②溶液中生物分子构象的研究;③分子动力学的研究。
分子构象随时间变化的动力学,分子问的特异相互作用,生物水的确切作用等是分子生物物理今后的重要课题。
生物物理学中的原位成像技术

生物物理学中的原位成像技术生物物理学是研究生命现象的物理学科,主要研究生物分子的结构与功能、生物能量转换和生命过程的物理机制等方面。
在这个领域中,原位成像技术是一项非常重要的技术,在这篇文章中我们将更深入地探讨这一技术的原理和应用。
一、原位拍摄技术的原理原位成像技术是指在生物体中直接进行拍摄和图像处理的技术,因为生物体通常具有复杂的内部结构和家族形态,因此需要一种能够在不改变样品结构的情况下,对生物体内部进行精细成像的技术。
其中,最常见的原位成像技术是共聚焦显微镜技术(CLSM)。
CLS是将两个或多个激光束通过一个双光栅来重合,在被研究样品上聚焦,形成高分辨率图像的技术。
它基于荧光显微镜,具有高分辨率、高灵敏度和非侵入性等优点。
二、原位拍摄技术的应用在分子生物学和细胞生物学领域,原位成像技术正在被广泛应用。
它可以用于研究生命过程中的各种机制、信号传递的动态过程和互作的多维关系。
例如,在细胞分化和形态发生研究中,CLS可以体现出不同细胞类型和种类之间的不同形态和分子表达差异。
在生物医学领域,CLS还用于研究肿瘤的发生和发展。
CLS可以观察活细胞和活动,通过荧光标记来跟踪和分析恶性肿瘤的形成、生长和侵袭过程。
同时,CLS还可以被用来探寻肿瘤细胞内的生化反应和分子活性。
此外,在神经科学领域,CLS可以用于研究大脑神经元的结构和功能。
它可以检测活动神经元的位置和互动方式,并提供钙信号和神经元活性轨迹,不仅有助于理解神经科学的基本问题,同时也有助于开发新的药物和治疗方法。
三、原位拍摄技术的前景及展望原位成像技术无疑是生物物理学领域中具有巨大潜力的新兴技术。
现今,尽管该技术还存在许多挑战,例如高质量图像的制作、信号噪声比(RSN)低和兼容性问题等,但仍在持续不断地被改进和发展。
随着技术的发展,原位成像技术将会在现有的领域上有更广泛的应用。
例如,在个体化医疗上,该技术有望应用于诊断和治疗,以及预测疾病进展的过程。
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易损动脉粥样硬化动物模型的建立前言:目前心血管疾病已经跃居发达国家死亡率第一的病因.而动脉粥样硬化是心血管最常见的病变,易损斑块又是最危险的死亡原因,斑块破裂造成血管断裂,血液溢出.疾病的研究离不开动物模型的建立.在动物模型的建立过程中将用到大量的生物物理技术.如用于破坏血管内皮细胞的介入导管技术等.摘要:本文为大家介绍了几种最常见的易损动脉粥样硬化的动物模型,并对各自的优缺点作出了对比.还简单介绍了后期模型建立后血管观察的手段,重点介绍了目前先进且热门的OCT技术.心血管疾病是发达国家导致死亡的首要原因和诱因。
心脏病和血管的结合是多种病理的复杂结合,因为无论基因还是环境都必须要考虑,这使得心血管疾病难以阻止。
心血管疾病动物模型的发展,包括心脏病和动脉粥样硬化疾病,为今天的我们从生理病理学的角度研究疾病提供了非常重大的便利。
并且它们也被认为是评价预测和阻止并发症的新型治疗手段水平的必要工具。
其中涉及多种生物物理技术,如基因操作,CT,MR,X,超声等多种成像技术,介入操作,显微镜观察,生物组织切片观察等。
生物物理技术在动物模型的培养和观察,鉴定过程包括后期药物性反应实验,预期性评估实验,生理学药理学力学变化的分析,组织病变的特点的观察等等一系列实验中发挥了至关重要的作用。
图一显微镜下动脉粥样硬化斑块作者根据所参照文献总结了大多数常用的心血管疾病的模型,包括那些应用的大的或者小型的动物,为了更准确更好的理解每一个单独的方面与人类病理方面的关系。
特别是,我们将描述一些动脉粥样硬化疾病的动物模型,包括扩大的腹主动脉瘤,胸动脉瘤和闭塞的动脉粥样硬化疾病和一些心脏衰竭的模型。
这些方法具有非常重大的意义,因为预测家将要评估早期的监测并且预测生理水平的治愈过程,尽管它们正在被艰难探索。
动脉粥样硬化是一种由促进损害协同发展的各种病因所引起的复杂的多因素疾病。
鼠模型的建立被用于动脉粥样硬化损害的发展和过程的研究,并且几种评论广泛地讨论了不同的可用模型。
特别是敲除和转基因动脉粥样硬化鼠模型的建立在从分子和细胞机能的水平理解动脉粥样硬化的形成具有重大的意义,包括在评估新型火势已存在的动脉粥样硬化药物的有效性方面。
野生型鼠对损害的发展是有抵抗力的,现在的动脉粥样硬化的鼠模型都是建立在基因水平上的脂蛋白的新陈代谢包括附加一些饮食的改变。
它们之中,低密度的脂蛋白受体缺陷型鼠和载脂蛋白E基因缺陷型鼠是应用最广泛的。
这些模型中观测出的动脉粥样硬化的损害在附加其他风险因素的情况下可能会恶化,例如高血压和糖尿病。
老鼠之所以被广泛应用于动脉粥样硬化模型是因为它与其他的动物相比有许多的优势。
图二试验用清洁级白鼠高胆固醇饮食饲养的兔模型被广泛应用于动脉粥样硬化的实验。
回溯到1913年,胆固醇被发现能够使兔的动脉内膜动脉粥样硬化,与人类的动脉粥样硬化非常类似。
通过内在的动脉聚乙烯导管,血管成形术的球囊或是暴露的氮的重复的持续的内在伤害,正常脂血的兔也会受到动脉粥样硬化的伤害。
因此,许多研究使用高胆固醇饮食喂养的兔模型,动脉伤害的兔模型或是最普遍的两种方法的结合使用。
在这些模型中,可观察到的伤害看起来像,至少是部分像,人类的斑块,主要是发炎的部分,尽管血管平滑肌细胞增生造成了很大的损害。
兔模型被广泛应用于脂类降低(通过饮食或降脂类药物)对斑块形成和稳定性的影响的研究。
这些研究揭示了脂类的降低减少巨噬细胞的堆积和粥样斑发炎其他方面的机制。
图三实验用新西兰大白兔兔子的斑块破裂的模型也在发展。
Shimizu和他的同事建立了一个易损动脉粥样硬化的简单的兔模型,用高脂质的饮食喂养结合侵犯性的血管伤害。
组织学的发现显示大动脉的斑块有易损斑块的三个特点,脂质丰富,巨噬细胞的积累和薄的纤维帽。
另外,低密度脂蛋白受体缺陷动物模型(WHHL兔)也在进一步发展。
这种模型与人类家族性高胆固醇血症类似并且显示了先进的伴有双折射脂类在内壁伤害和斑块和从出生到一岁的血管中层的累积大动脉疾病的证据。
尽管,兔的动脉血管直径比人类的颈动脉要小,但是它仍适用于血管内的治疗疾病的研究。
另外,兔模型还被用于样硬化大动脉由MRI图像的成份的量化。
这项技术准确的量化模型中的纤维和脂质成分并且能够对动脉粥样硬化斑块的稳定性的治疗阶段做一系列的分析。
预防心脏病和中风主要依靠易损斑块的监测和斑块稳定性治疗的发展。
对于测试可控制方法的机制假说动物模型是非常重要的,它们必须对人类某种疾病具有代表性同时又易于操控。
然而,易损斑块的重建是动物模型设计中最艰难的改革。
斑块破裂是已经很复杂的过程的更加复杂化,并且其中的精确机制仍然是假设的。
在不同的动物上建立动脉粥样硬化损害有许多的实验方法。
目前,没有易损斑块的简单的金标准,但是猪模型可能是重建人类非稳定斑块的最好方法。
糖尿病和家族性高胆固醇血症的结合构成了很好的快速动脉粥样硬化模型,并且它与确定生物标记的研究有关,例如LP-PLA2既然这些动物与人类有相似的血浆脂蛋白。
从这种方式来说,LP-PLA2的选择性抑制减少对高等冠状动脉动脉粥样硬化的伤害的过程并且是确定血管炎症与家族性高胆固醇脂血症并没有关系的关键性角色,在关于心肌梗死和中风的伤害发展的病理学病因中。
几种高级的似人类的冠状动脉粥样模型的猪模型已经被用于分析冠状动脉成像技术的发展和验证。
在技术发展的进步时代,动物实验模型在促进介入心脏手术技术和药物支架的发展中的可用性将变得令人质疑。
另外,冠状动脉粥样硬化的猪模型允许外膜新生血管和动脉粥样硬化的斑块的构成和血管重装方面的测试。
图四试验用小型猪可以使先天性的,即是通过不断的培养,动物的血管自行破裂,也可以是后天性的,通过注射药物来诱发斑块的破裂。
多种生物物理技术,如基因操作,CT,MR,X等多种成像技术,介入操作,显微镜观察,生物组织切片观察等。
生物物理技术在动物模型的培养及后期斑块观察过程中发挥了至关重要的作用。
病毒重组体的转染兔模型90只雄性新西兰白兔,体重〜1.5-2.5公斤,随机分为干预组(A组,n= 80)和对照组(B组,n= 10)。
A组的兔子在由血管内球囊造成大动脉壁损伤之前,先喂以高脂饮食8周含1%胆固醇(约120-140克/天)。
8周结束后,予以静脉内注射戊巴比妥钠麻醉钠(30毫克/千克)后,以4-Fr气囊导管(3.5×15平方毫米)通过右股动脉引入气囊导管到胸主动脉诱导主动脉壁损伤。
气球用生理盐水膨胀,以获得8个大气压,导管被缩回髂股动脉。
此过程再重复三次,以确保每只兔的腹主动脉血管内皮细胞的剥蚀。
这些兔子的一半的(A1组中,n= 40,随机选择)注射与含有重组p53基因的腺病毒载体,和另一半(A2组,作为对照)注射含有重组β-半乳糖苷酶的腺病毒载体,如先前所述(6)。
简言之,将10μl 重组腺病毒悬浮液(1.5×1010pfu /毫升的复制缺陷型腺病毒载体Ad5-p53和1.5×1010 pf u /毫升重组腺病毒Ad5-LacZ的)通过导管注入到atheromatic斑块丰富的腹主动脉段,这主要是位于右肾及髂总动脉之间。
临时结扎主动脉段的10分钟后,悬浮液留在原地。
注射部位的用NESIS标记,腹腔内被关闭。
这些兔子维持一个额外的2周高胆固醇饮食。
与此相反,在B组兔只喂食高脂饮食10周含1%胆固醇(约120-140克/天)。
束时10周总膳食的饲养,使用康斯坦丁尼和查克拉瓦提(8)所记载的方法以药理触发器对所有的兔子施行诱发斑块的破裂。
简单地说,0.15毫克/千克中国蝰蛇毒(广州蛇毒研究所)腹腔注射。
注射30分钟后,0.02毫克/千克的组胺(Sigma公司),静脉内给予。
以上程序24-48小时后处死兔子。
安乐死是通过静脉注射戊巴比妥过量。
腹主动脉解剖切除,观察斑块破裂和血栓形成的发生。
甲压力计,用于测量的长度和横截面面积的血栓。
取自重组腺病毒Ad5-LacZ的注入和Ad5-p53基因注入段和相应的B组主动脉组织样本(1厘米的长度),并在10%福尔马林固定过夜。
串行5微米厚的组织切片苏木精和曙红染色和Masson染色处理。
斑块破裂被定义为根据病理组织学观察覆血栓的纤维帽破裂。
维他命K拮抗剂转基因鼠模型雄性和雌性apoE基因敲除-/ - 小鼠均购自马斯特里赫特大学。
小鼠10周龄进入研究,所有的动物被安置在正常笼,自由获得水和食品。
辐照(0.9Mrad)维生素K缺乏的的WTD(0.25%胆固醇和15%的可可脂)是从阿瑞勃洛克,武尔登,荷兰购买。
维生素K1,溶解在玉米油中,适量加入维生素K缺乏饲料中。
VKA华法林被直接添加到食品中。
马斯特里赫特大学实验动物实验委员会批准的所有描述的动物实验方案。
VKA/维生素K1模型是建立在高剂量的维生素K拮抗剂,同时服用维生素K1管理,以克服小鼠肝脏中,而不是肝外组织如血管[23] 的维生素K拮抗剂的对立的基础上的。
因此,可以研究VKA对肝外组织的影响而使动物免于遭受大量的流血。
为了促使动脉粥样硬化,小鼠组(n =40),获得了WTD含维生素K1(1.5毫克/克食物),为期三个月。
经过12周的治疗后,8只小鼠处死作为监测动脉粥样硬化(t = 0的基准组)基线。
剩余的小鼠随机分为2个组的16只小鼠。
第一组继续在WTD+维生素K1(1.5毫克/克食物)(VK1组),第二组收到的WTD+维生素K1(1.5毫克/克食物)+华法林(3.0毫克/克食物)(VK1&W组)。
这两种饮食持续了一个星期,各组分别处死8只小鼠。
剩余的小鼠继续VK1和VK1&W的饮食并在试验日粮的开始后的4周,处死。
颈动脉结扎猪模型12只雄性尤卡坦半岛小型猪(S&S农场,Ranchita,加利福尼亚州),体重20-30公斤,被用来开发颈动脉粥样硬化使用部分手术结扎和高脂血症的结合,如previously.8所有动物喂食高脂肪和高胆固醇饲料中添加4%胆固醇,20%的饱和脂肪,1.5%的补充胆碱(试验饲料普瑞纳,圣路易斯,密苏里州)术前2周,并保持这样的饮食诱发高胆固醇血症的至少3个月。
17个颈总动脉部分结扎创造约80%的狭窄,假手术进行的其他7个动脉。
以前described.8手术细节已在动物手术后的恢复和生活的死亡3个月前。
3D旋转血管造影,颈动脉狭窄的程度和通畅的颈动脉后立即手术和死亡的时候,得到了确认。
安乐死,后立即放入导管头臂干的动物和双侧颈总动脉灌注10%福尔马林,在生理舒张压10分钟,以尽量减少这些动脉在固定的崩溃。
双侧颈动脉和RETIA mirabilia,从这些动物的收集和固定在10%福尔马林中至少24小时。
Ameroid环置入联合高脂饮食诱导致兔单侧颈总动脉粥样硬化性闭塞模型对高脂饮食喂养的新西兰大白兔联合Ameroid环置入建立新西兰大白兔单侧颈总动脉粥样硬化件闭塞模型,探讨颅外段动脉粥样硬化性闭塞所致的血流动力学改变与脑组织微血管及超微结构改变的表现.方法雄性新西兰大白兔20只,随机分为正常对照组(Ⅰ组)和高脂喂养组(Ⅱ组),每组10只.Ⅱ组经高脂喂养4周后取其中6只行右侧颈总动脉Ameroid环置入术,分别于置环后第1、2、3、4周未行颈总动脉内膜中层厚度(IMT)及血流动力学参数检测,对照组在同时间点行相同指标的检测。