兔子染色体的制备与观察
动物骨髓细胞染色体标本的制备实验报告
动物骨髓细胞染色体标本的制备实验报告
实验目的：
本实验的目的是利用正常小鼠的骨髓细胞制备染色体标本，并通过显微镜观察染色体的形态和数量，并了解染色体的组成和结构。
实验原理：
染色体是细胞核中最大的有组织结构，由DNA和蛋白质组成。
染色体的数量和形态是每个物种独特的标志之一。
在有丝分裂过程中，染色体的形态和数量的变化可以反映出细胞的分裂状态。
为了制备染色体标本，需要通过细胞的裂解，释放和固定染色体，然后在显微镜下观察染色体的形态和数量。
实验步骤：
1. 取出小鼠的股骨，并在无菌条件下对其进行消毒。
2. 使用消毒的剪刀剪下股骨两端，将骨髓剪下，加入RPMI-1640培养液中，使髓液悬浮，然后用细胞培养器将其孵育2-3天，使骨髓细胞增殖。
3. 用离心机将骨髓细胞离心，去除培养液，用磷酸盐缓冲液进行细胞裂解。
4. 将制备好的染色体悬液滴在预先涂上盐酸聚赖氨酸溶液的载玻片上，让其固定，然后通过染色体芝士和琼脂糖溶液对细胞进行染色。
5. 用显微镜观察染色体标本，记录染色体的数量和形态，并观察细胞的分裂状态。
实验结果：
制备的染色体标本在显微镜下观察。
通过对标本的观察，我们可以看到染色体形态和数量的变化，以及细胞分裂状态的变化。
同时，我们可以从染色体上观察到细胞的遗传信息，包括基因序列和调控因子等。
结论：
本实验成功制备了小鼠骨髓细胞染色体标本。
观察染色体形态和数量的变化，可以从中了解细胞的遗传信息和分裂状态变化。
同时，该实验也展示了染色体的重要性和组成结构，加深了对细胞生物学的理解。
实验动物染色体标本的制备
5.吸走固定液，换入无水乙醇，蒸汽固定10-20分钟。 6.取出载玻片，缓缓倒去低渗液，用吸管将
固定液II(无水乙醇:冰醋酸=1:2)自载玻片 的一端缓慢滴下形成水幕，固定3-4次，直 立载玻片空气干燥。
Giemsa染色
改良苯酚品红染色
2020体标本的制备成败决定于取材， 若抽取的骨髓太少或太稀，细胞数目过少， 不易获得较多的中期分裂相。
2.低渗处理极为重要，低渗不够，则染 色体聚在一起，分散不好。太过，则造成细 胞破碎，染色体丢失。
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五、实验结果
取前肢1：找到关节所在。
四、实验步骤
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取前肢2：剪开肌肉，顺着关节外围剪开。
四、实验步骤
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四、实验步骤
注意，每组做2片 蒸汽固定法
3.在载玻片上滴1滴蒸馏水，然后滴加2滴第2步获得的骨髓细胞悬液。轻 轻晃动载玻片，使液体混匀，并在载玻片上铺展开。18-20℃下静置， 低渗处理20-30分钟。注意防止水分蒸发。
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人外周血淋巴细胞染色体（Giemse 染色）
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三、实验用品
• 试剂：0.65％生理盐水，甲醇—冰醋酸(3:1)固 定液, 蒸馏水，Giemsa染液。
• 器材：显微镜，离心机，搪瓷盘，剪刀，骨剪， 离心管，注射器，染色缸。
实验七动物染色体标本的制备与观察
6. 加完固定液后，立即用吸管将细胞轻轻吸打均匀, 静置固定10min， 1500r/min离心10 min ，弃 上清液。如此反复固定1次，离心10 min。 7. 固定的细胞经离心后，吸去上层固定液，视管底 细胞多寡加入1--2ml新配制的固定液，将细胞团 块轻轻吸打成悬液。 8. ★ 在干净、湿、冷的载玻片上滴 2--3 滴上层细 胞悬液，自然干燥（滴片）。 9. 将玻片标本插入吉姆萨染液中，染色5 min。 10. 用小烧杯盛蒸馏水略洗，再用吸水纸擦干玻片标 本底面和四周，显微镜观察和分析。
进行染色体观察、分析，需要选择处于 分裂中期的细胞。给动物注射一定量的 秋水仙素即可使许多处于早期分裂相的 细胞停滞于中期。
三、实验步骤
1. 动物按30µg/g体重的剂量经腹腔注射 秋水仙素，7—8小时后杀死蛙，取后 肢股骨和胫骨，剥掉全部肌肉，剪去 股骨和胫骨两端。
2. ★ 用注射器将 6ml 1%柠檬酸钠溶液通过针头注 入骨髓腔，冲出骨髓细胞至小碟内，直至股骨变 为白色为止。摘掉针头，用注射器轻轻反复吸打， 使分散成单个细胞。 3. 将 骨 髓 细 胞 转 入 离 心 管 ， 以 1500r/min 离 心 8 min，弃上清。 4. ★在离心管中加入事先预热至 30℃的0.4% KCL 溶液5ml，将沉淀轻轻吹散，置30℃水浴中低渗 30min。 5. 以 1500r/min 离心 8 min 。弃上清液，沿离心管 壁缓慢加入新配制的甲醇:冰醋酸(3:1)固定液5ml， 加固定液时注意不要冲动细胞团块。
青 蛙 骨 髓 细 胞 染 色 体 核 型 （
2n=26
）
四、作业
绘制染色体图并作简要分数量情况， 染色体形态、数目、有否重叠等。
滴片的制作
1m
实验七 植物染色体标本的制备与观察实验报告(1)
细胞及遗传学实验报告陈香燕201008030103 生科1班实验七植物染色体标本的制备与观察(一实验目的学习植物染色体标本的制备技术,掌握染色体的技术方法,了解染色体的生物学意义。
(二实验原理植物染色体标本的制备,常用分生组织,如根尖、茎尖和嫩叶做材料。
常规压片法仍是当今观察植物染色体常用的方法,其程序包括取材、预处理、固定、解离、染色和压片等步骤。
由于秋水仙素可以阻断细胞在分裂中期纺锤体(微管二聚体的形成,以至于不能拉动染色体分开向细胞两极,因此可以使细胞分裂停止在分裂中期,再经过染色,压片,镜检之后便可观察到细胞的染色体形态。
(三实验用品一、材料:蚕豆二、试剂1.Carnoy固定液2.0.1%秋水仙素溶液3.1mol/L HCl4.Schiff试剂5.亚硫酸水溶液(漂洗液6.Carbor fuchsin (卡宝品红染液(四实验方法步骤1.取材:将蚕豆种子培养在培养皿内的湿滤纸上,室温或28°C下发芽,待胚根长达1~2cm时,切取0.5cm长的根尖部分。
2.预处理:将切下的根尖浸入0.1%秋水仙素液中,室温下处理3~4h。
3.水解:把根尖投入预热的58~60°C 1mol/L热HCl中,恒温条件下水解14~15min4.染色:倒去热HCl,滴加卡宝品红少许,染色5~10分钟。
5.洗涤:吸去卡宝品红试剂,用蒸馏水换洗2~3次,每次1~2min。
除去残留染色液后加几滴45%醋酸。
6.压片:用吸管从醋酸中吸取材料,置干净载玻片上,材料周围保留半滴45%醋酸,盖上盖玻片,其上放一片吸水纸。
左手指压住吸水纸的左边,右手指从吸水纸的左端向右方轻轻抹去,再用铅笔擦头从盖玻片上轻轻敲打,使细胞均用散开。
7.镜检:把压好的片子放在显微镜下,先观察细胞分散状况和中期分裂相的多少,再检查分裂中期细胞中染色体是否完全散开。
如若染色体分散不好而难以分辨和计数,可取下片子,平放桌面上,用手指隔着吸水纸在盖玻片上稍施压力,如果操作细心,用力适度,便可很容易得到染色体分散良好的压片标本,供观察,计数和照相用。
兔子杂交定律实验报告(3篇)
第1篇实验目的：通过本实验，验证兔子颜色和毛长度的遗传规律，观察并分析基因的显性和隐性关系，以及基因的自由组合定律。
实验材料：1. 长毛灰兔（基因型：AABB）2. 短毛白兔（基因型：aabb）3. 实验箱4. 实验记录表5. 显微镜（观察胚胎发育）实验步骤：1. 杂交组合：将长毛灰兔和短毛白兔进行杂交，得到F1代。
2. 观察F1代：记录F1代兔子的颜色和毛长度，预期结果为灰兔（AaBb）。
3. F1代自交：将F1代兔子进行自交，得到F2代。
4. 观察F2代：记录F2代兔子的颜色和毛长度，预期结果应符合基因的自由组合定律，即9：3：3：1的比例。
5. 基因型分析：通过显微镜观察胚胎发育，分析F2代兔子的基因型。
6. 数据统计与分析：统计F2代兔子的基因型比例，分析基因的显性和隐性关系。
1. F1代观察结果：F1代兔子均为灰兔，毛长度为短毛，符合预期结果。
2. F2代观察结果：F2代兔子颜色和毛长度的比例符合9：3：3：1的规律。
- 灰短毛：9只- 灰长毛：3只- 白短毛：3只- 白长毛：1只3. 基因型分析：通过显微镜观察胚胎发育，分析F2代兔子的基因型：- 灰短毛：AABB、AABb、AaBB、AaBb- 灰长毛：AAbb、Aabb- 白短毛：aaBB、aaBb- 白长毛：aabb实验结论：1. 家兔的颜色和毛长度遗传符合基因的自由组合定律。
2. 灰色对白色为显性，短毛对长毛为显性。
3. F2代兔子的基因型比例为9：3：3：1，符合预期结果。
实验讨论：1. 实验结果表明，基因的显性和隐性关系可以通过杂交实验进行验证。
2. 基因的自由组合定律在遗传学中具有重要意义，有助于解释生物体的遗传多样性。
3. 实验过程中，观察胚胎发育有助于分析兔子的基因型，为遗传学研究提供依据。
1. 在实验过程中，注意观察并记录实验现象，确保实验数据的准确性。
2. 实验材料的选择要符合实验要求，以保证实验结果的可靠性。
3. 实验步骤要规范，确保实验操作的准确性。
实验四 植物染色体标本的制备与观察
实验四植物染色体标本的制备与观察一、实验目的1、掌握常规压片法制备植物染色体标本。
2、了解中期染色体的形态和结构以及染色体的生物学意义。
二、实验原理染色体是细胞分裂时期遗传物质存在的特定形式，是染色质紧密包装的结果，对染色体的观察在研究生物进化、发育、遗传和异变中有十分重要的作用。
植物染色体标本的制备，常用分生组织如根尖、茎尖和嫩叶做材料。
常规压片法仍是当今观察植物染色体常见的方法，其程序包括取材、预处理、固定、解离、染色和压片等步骤，简单易操作，但是染色体易变形、难分散开。
三、实验仪器、材料和试剂（一）仪器、用具：显微镜、剪刀、镊子、刀片、培养皿、滤纸、吸水纸、青霉素瓶、染色缸、载玻片、盖玻片、玻璃板、酒精灯。
（二）材料：蚕豆(Vicia faba, 2n=2x=12)、黑麦(Secale cereale, 2n=2x=14)、大麦(Hordeum sativum, 2n=2x=14)、普通小麦(Triticum aestivum, 2n=2x=42)、玉米(Zea mays, 2n=2x=20)、豌豆(Pisum sativum, 2n=2x=14)、洋葱（Aillum cepa，2n＝16）等根尖。
（三）试剂1、Carnoy固定液、1%秋水仙素(或对二氯苯)。
2、苯酚品红染色液。
四、实验方法与步骤压片法制备染色体标本：(1) 取材：把蚕豆种子预先浸泡12h，然后转入垫有湿润滤纸的培养皿中上面蒙上湿纱布，置25℃温箱中暗培养发根，经过48h后幼根长至1—2cm左右，于上午9—11时剪下根尖。
(2) 预处理：将剪下的根尖置于对二氯苯饱和水溶液或0.1％秋水仙素溶液中，浸泡处理2-4 h。
(3) 固定：用水洗净处理过的根尖，经Carnoy固定液中固定2-4h，转入70％乙醇中，4℃保存备用。
(4) 解离：取出根尖，用蒸馏水洗净，放入l M HCl中60℃解离8－10min，再用蒸馏水洗净。
(5) 染色：改良苯酚品红染色5—10min。
动物染色体标本的制备
动物染色体标本的制备
一、实验目的
1. 了解染色体标本制备的基本原理
2. 掌握滴片法制备染色体标本的一般步骤
二、实验原理
每一物种的细胞一般都具有一定数目、形状和大小的染色体，在秋水仙素的作用下可使分裂细胞阻断在中期，此时染色体形态最典型，然后通过低渗、固定、染色等步骤，便可在显微镜下呈现出其形态。
三、实验用品
器具：显微镜、培养皿、手术剪、镊子、冷冻载片、滴管
试剂：秋水仙素、生理盐水、甲醇、冰醋酸、低渗液、PH6.8磷酸缓冲液、Giemsa染色液
材料：蟾蜍
四、实验方法步骤
1. 前处理实验前3－4小时，按每克体重3ug剂量给蟾蜍的腹腔注射秋水仙素；
2. 取材打开蟾蜍腹腔，截取1－2cm长的一段小肠（以十二直肠为好），用见到剖开成片状，在生理盐水中洗净；
3. 低渗将洗净的小肠投入到盛有5mL低渗液的小试管中，在37℃水浴下处理30分钟以上；
4. 固定弃去低渗液，加入新配制的甲醇（3）：冰乙酸（1）固定液约5ml，静止固定40分钟左右；
5. 解离弃去固定液，加入约2ml60％的冰乙酸，轻轻摇动，使解离的细胞充分散开，5分钟后弃去小肠，即得细胞悬浮液；
6. 滴片吸取少许细胞悬浮液，在适当的高度滴3－4滴于冰冷的载片上，迅速吹斜气；
7. 干燥滴片自然风干或吹风机吹干；
8. 染色在载片上滴十滴磷酸缓冲液，再滴一滴Giemsa染液，橡皮球轻轻吹均匀，染色30分钟左右；
9. 观察吹干后在显微镜下观察。
染色体的标本制作实验
实验六染色体的标本制作及其组型实验在真核生物中染色体的数量和形态具有物种的特异性一直可以作为此物种分类的基本依据之一。
染色体作为遗传物质-DNA 的载体对生物的遗传、变异、进化和个体发生以及细胞的增殖和生理过程的平衡控制等都具有十分重要的意义。
每一个物种的细胞一般都有一定数目、形状和大小的染色体。
将体细胞核中全部染色体按照其大小、着丝粒位置以至带型有序地排列起来此模式图象排列即为核型karyotype或染色体组型。
核型分析均是以中期染色体为标准对制作出的染色体标本进行照相以获得染色体的显微图象并将其剪裁排列即成。
华裔学者庄有兴Joe Hin Tjio腿鸬溲д逜.Levan合作利用低渗法研究胎儿肺组织的染色体标本制做方法终于在1956年首次确定了人类的染色体数目是46条而不是前人所主张的48条这为后来的人类核型研究奠定了基础。
1.实验目的 1.1 初步掌握动物骨髓染色体标本制备基本过程了解操作步骤的原理。
1.2了解常用实验动物染色体的数目及特点。
通过组型实验掌握染色体组型的基本方法2.实验原理凡细胞处于活跃增殖状态或者经过各种处理后细胞就可进入分裂的任何动物组织均可用于染色体分析。
在正常动物体内精巢和骨髓均为是活跃分裂的组织。
给动物注射一定剂量的秋水仙碱即可使许多处于分裂的细胞停滞于中期然后采用常规空气干燥法制备染色体即可得到大量可分析的染色体标本。
本方法简便、可靠不需要经体外培养和无菌操作易于推广。
骨髓细胞是用于动物细胞遗传学研究很好的材料。
但在取材方面精巢又比骨髓要简易一些故本实验也选用小鼠的精巢为实验材料。
对于小鼠精巢染色体标本的制作一般包括以下几个要点: 1. 用一定剂量的秋水仙素破坏纺锤丝的形成使细胞分裂停滞在中期使中期染色体停留在赤道面处2. 用低渗法使将细胞膨胀以至于在滴片时细胞被胀破使细胞的染色体铺展到载玻片上3. 空气干燥法可使使细胞的染色体在载片上展平经Giemsa染色后便可观察到染色体的显微图象。
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兔子染色体的制备与观察
（1）原理：血液中含有红、白两类细胞，它们均是处于未分裂的间期细胞。
红细胞没有核，无分裂能力；白细胞类虽有细胞核存在，但是外周血中处于休止期。
植物血球凝集素（简称PHA）能促使淋巴细胞和单核细胞转化为具有分裂作用的母细胞。
染色体只有在细胞分裂中期时最典型。
秋水仙素类药的药物能抑制纺锤丝的形成，使细胞分裂停止于中期，低渗处理使细胞膨胀，细胞膜破裂，染色体分散，这样就可便于分析。
（2）准备：
1、实验仪器及用具
A 玻璃仪器：烧杯培养瓶胶头滴管离心管移液管吸管载玻片玻璃棒容量瓶酒精灯等
B 其他：恒温箱分离机显微镜分析天平清洗桶贮水瓶试管架橡皮塞坩埚钳吸球火柴等
2、实验所需试液
A 秋水仙素浓度为0.01
B KCl 低渗溶液浓度为0.01
C 固定剂冰醋酸：甲醇1：3 （一定要现配）
D Giemsa 染液。
其中Giemsa 原液：磷酸缓冲溶液1：9
E 蒸馏水
F 肝抗凝素
G 小牛血清
H 1 PHA I RPMI 1640
（3）操作过程
1、采血：无菌干针筒从静脉取血1～2ml，用肝素抗凝（约每毫升全血内含肝素100 单位）。
2、培养液配制：RPMI 1640 4ml 小牛血清1ml 1PHA（自制）0.2ml 调节pH 为7.4 后置于-20℃冰箱
3、标本接种：每5ml 培养液加入抗凝全血0.5ml。
4、培养细胞：将接种好的培养瓶置于37℃恒温箱中培养66-68h。
5、阻止分裂：加秋水仙素，摇匀后置于37℃恒温箱中继续培养4-6h。
6、收获：培养物混合后，置于10ml 离心管内，离心10min（1000 转/min），去上清液。
留下培养物。
7、低渗处理：低渗液可用0.56的KCl（或0.075mol/l KCl）5～7ml，用吸管打散沉淀物，置于37℃水浴箱中保温20min，然后加入固定液（3 份甲醇：1 份冰乙酸）1ml 用吸管打匀，预固定1～2min。
8、离心：1000 转/min 离心10min。
9、固定：吸去上清液，留下沉淀加上述固定液6～8ml，用吸管将沉淀物打散，固定30min 后离心，1000 转/min 离心10min，取出吸去上清液留下沉淀。
10、重复上述固定离心3 次。
11、标本制作：最后1 次固定、离心后吸去上清液，留下沉淀再加少量新鲜固定液约0.3ml 打散细胞悬浮液即可进行制片。
制片之前先将载玻片经清洁液洗净处理后，置于冰箱内制成冰片。
取冰片 1 张滴上2～3 滴细胞悬液。
利用
冰片的表面张力关系使液体迅速向玻片四周散开，与此同时用嘴轻轻吹向滴片处，以助其更快散开，然后在酒精灯火上通过7～8 次后，自然干燥或烤干均可。
12、染色：Giemsa 染液1 份和pH7.4 磷酸缓冲液9 份，混合后，染色20min，蒸馏水洗去余下染液，晾干，镜检观察。
注意事项：
1、无菌操作是关键。
培养液不得污染。
2、所用药品不得失效，特别是PHA，既要使淋巴细胞转化，又不能过量。
3、小牛血清优质、无菌。
4、秋水仙清素低浓度4～6h 效果最佳，过量则染色体易收缩。
5、固定液和Giemsa 染液要求新鲜配用。
6、培养总时间72h 较好。