核酸提取试剂盒

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BIOG核酸提取试剂盒操作步骤说明

BIOG核酸提取试剂盒操作步骤说明

BIOG 游离DNA 提取试剂盒操作步骤说明运输条件:常温运输 货 号:51019:50次反应51020:100次反应 储存条件:室温(15-25℃),消化液、DNA Carrier 请于-20℃存放产品特点 试剂盒组成 组分 50次 100次 吸附柱和收集管各50个 各100个 裂解液 18mL 36 mL 洗涤液A 21mL 42 mL 洗涤液B 9 mL 18 mL 洗脱液 3mL 6 mL 消化液 1.2 mL 2.4 mL DNA Carrier 0.24 mL 0.48 mL 说明书1份1份产品介绍BIOG cfDNA Easy Kit 是常州百代生物科技股份有限公司研制的专门用于提取血清、血浆等游离DNA 的试剂盒。

BIOG cfDNA Easy Kit 采用了最新的优质进口离子膜,裂解液和洗脱液经过多次优化,能高效地分离DNA 。

提取得到的DNA 较其它品牌的同类试剂盒产量更大,纯度更高,最大限度地去除了蛋白、色素、脂类等杂质污染,可以直接应用于PCR 、荧光定量PCR 和各种酶切试验等。

操作步骤1. 请自行准备:无水乙醇、1.5mL 离心管。

2. 取出洗涤液,按以下操作:a) 洗涤液A :21mL 加入9mL 无水乙醇;42mL 加入18mL 无水乙醇。

b) 洗涤液B :9mL 加入21mL 无水乙醇;18mL 加入42mL 无水乙醇。

c) 配制好的洗涤液如出现沉淀,可在37℃溶解,摇匀后使用。

3. 取1.5mL 离心管,加入200μL 样本,4μL DNA Carrier 混合均匀,加入300μL 裂解液及20μL 消化液,振荡混匀,56℃水浴10 分钟。

4. 加入1000μL 无水乙醇,轻轻颠倒混匀,如有半透明悬浮物,不影响DNA 的提取与后续实验。

5. 将吸附柱放入收集管内,将760μL 上述溶液转入吸附柱内,静置2分钟,12,000 rpm 4℃离心1 分钟,弃收集管内废液; 6. 将吸附柱放回收集管内,将剩余760μL 溶液转移至吸附柱内,重复步骤5。

从ffpe样本中提取核酸的试剂、试剂盒及其应用的制作方法 概述及说明

从ffpe样本中提取核酸的试剂、试剂盒及其应用的制作方法 概述及说明

从ffpe样本中提取核酸的试剂、试剂盒及其应用的制作方法概述及说明1. 引言1.1 概述随着科技的不断进步和医学研究的深入,从固定、包埋和切片的组织样本中提取核酸已成为一项重要的技术。

其中,FFPE(固定、石蜡包埋)样本是最常见的病理组织样本,具有保存较久和丰富的临床信息等优点。

因此,从FFPE样本中提取核酸并应用于癌症研究、遗传性疾病诊断等领域具有重要意义。

1.2 文章结构本文将全面介绍从FFPE样本中提取核酸所需的试剂和试剂盒,并详细描述其制作方法。

接着,我们将阐述选择合适的核酸提取方法以及各个步骤的具体操作步骤。

此外,文章还会探讨在癌症研究、遗传性疾病诊断以及其他医学领域中应用这一技术所取得的结果和发展趋势。

最后,我们将总结已有研究成果,并提出未来发展方向,并对FFPE样本提取核酸技术的意义进行思考。

1.3 目的本文的目的是向读者介绍从FFPE样本中提取核酸所需的试剂、试剂盒及其制作方法。

通过详细描述核酸提取步骤和应用领域,使读者能够全面了解并掌握该技术的操作流程以及在临床医学研究中的重要性。

此外,我们希望通过分析已有研究成果和未来发展方向,进一步促进该技术在临床诊断和治疗中的应用,并为相关领域的科学家和医生提供指导。

2. ffpe样本提取核酸的试剂和试剂盒2.1 试剂概述在从FFPE(Formalin-Fixed Paraffin-Embedded)样本中提取核酸时,需要使用一系列试剂来实现。

这些试剂主要包括脱水剂、消除固定物的溶解剂、核酸分离和纯化的缓冲液等。

2.2 试剂盒分类及特点为了方便操作和提高提取效率,市场上有许多不同种类的FFPE样本提取核酸的专用试剂盒可供选择。

这些试剂盒根据其工作原理和应用领域,可以分为以下几种类型:a) 磁珠法:通过表面修饰的磁性微珠吸附并纯化核酸。

具有操作简便、快速高效等特点,适用于小样本量或高通量处理。

b) 柱式纯化法:利用离心柱内填充物对DNA/RNA进行特异性吸附和洗脱。

核酸提取试剂说明书

核酸提取试剂说明书

说明书【产品名称】【预期用途】本产品主要原理如下:1.使用裂解液实现细胞裂解、DNA 的释放。

2.磁珠可以特异地吸附DNA ,通过洗涤,去除DNA 以外的杂质。

3.洗脱液解离吸附在磁珠上的DNA ,得到纯度和浓度均很高的DNA 。

【检验原理】100次/盒; 400次/盒【包装规格】核酸提取或纯化试剂版本号:12/2021用于核酸的提取、富集、纯化等步骤。

其处理后的产物用于临床体外检测使用。

核酸提取或纯化试剂【主要组成成分】100次/盒400次/盒试剂名称规格数量规格数量裂解缓冲液24ml/瓶1瓶96ml/瓶1瓶漂洗缓冲液1(浓缩液)80ml/瓶1瓶80ml/瓶4瓶漂洗缓冲液2(浓缩液)50ml/瓶1瓶50ml/瓶4瓶漂洗缓冲液396 ml/瓶1瓶192ml/瓶2瓶洗脱缓冲液30ml/瓶1瓶96ml/瓶1瓶蛋白酶K25mg/支2支180mg/瓶1瓶蛋白酶K保存液 1.25 ml/支2支5ml/支2支磁珠悬浮液1ml/瓶2瓶8ml/瓶1瓶【自备仪器、试剂】1.手动单管提取:1)恒温混匀仪——货号:CW25932)2/15 ml磁力架——货号:CW25943)异丙醇、无水乙醇2.手动96孔深孔板提取:1)恒温混匀仪——货号:CW25932)废液抽吸系统——推荐品牌台湾洛科3)手动连续分液器——推荐品牌Eppendorf4)电动连续分液器——推荐品牌Eppendorf5)手动连续分液器分液管(25 ml)——推荐品牌Eppendorf6)96孔板磁力架——货号:CW25957)异丙醇、无水乙醇3.磁棒法磁珠自动提取系统:1)磁棒法磁珠自动提取系统——建议品牌Thermo Fisher2)异丙醇、无水乙醇【储存条件及有效期】4-30℃保存,有效期12个月。

可在4-37℃运输,运输时间建议不超过7天。

【样本要求】1.适用样本类型:抗凝全血、唾液、细胞。

2.样本处理与保存:新鲜样本应尽快处理或-70℃冻存,避免反复冻融。

磁珠法核酸提取试剂盒说明书

磁珠法核酸提取试剂盒说明书

磁珠法核酸提取试剂盒说明书磁珠法核酸提取试剂盒说明书在科学研究和临床诊断中,核酸提取是至关重要的一步。

随着技术的不断发展,磁珠法核酸提取试剂盒逐渐成为了研究人员和临床医生们的首选。

那么,什么是磁珠法核酸提取试剂盒?它的工作原理是什么?在使用过程中需要注意哪些事项?本文将从广度和深度两方面进行全面评估,带你深入了解磁珠法核酸提取试剂盒。

一、磁珠法核酸提取试剂盒的工作原理磁珠法核酸提取试剂盒是利用磁珠的磁性特性,结合核酸和其他杂质的不同特性,通过磁场的作用将目标核酸分离提取出来的一种试剂盒。

具体步骤包括细胞裂解、磁珠与核酸结合、洗涤和最终洗脱等过程。

通过这一系列步骤,能够快速、高效地从样本中提取出纯度较高的核酸,为后续的分子生物学实验和临床检测打下基础。

磁珠法核酸提取试剂盒本质上是一种高度精密的技术产品,涉及到多方面的知识和技术。

在使用过程中需要严格按照说明书上的操作步骤进行,以确保提取的核酸具有良好的质量。

二、磁珠法核酸提取试剂盒的使用注意事项在使用磁珠法核酸提取试剂盒时,有一些注意事项是需要特别关注的。

首先是样本的处理和裂解步骤,不同样本的裂解条件可能会有所不同,需要根据具体情况进行调整。

其次是磁珠的使用,需要注意磁珠的悬浮情况和使用量,以确保能够有效地结合目标核酸。

在洗涤和洗脱步骤中,也需要注意洗涤缓冲液的温度和使用次数,以及洗脱缓冲液的使用量和温度等细节。

只有严格按照说明书上的要求进行操作,才能够得到高质量的核酸提取物。

三、磁珠法核酸提取试剂盒的个人观点和理解从个人角度来看,磁珠法核酸提取试剂盒无疑是一种高效、便捷的核酸提取工具。

相比传统的有机溶剂提取法和硅基膜法,磁珠法核酸提取试剂盒具有操作简便、提取效率高、纯度好等优点。

在日常的科研工作或临床诊断中,使用磁珠法核酸提取试剂盒能够大大提高工作效率,节约时间和成本。

总结回顾通过本文对磁珠法核酸提取试剂盒的深度评估,相信读者已经对这一产品有了更全面、深刻的理解。

莫纳(武汉)生物科技核酸提取试剂盒说明书

莫纳(武汉)生物科技核酸提取试剂盒说明书

Version 1.0核酸提取试剂磁珠法病毒核酸提取试剂盒操作手册货号:MI30301S(50次/盒) MI30301M(100次/盒)MI35301S(32次/盒) MI35301M(96次/盒)莫纳(武汉)生物科技有限公司400-928-3698核酸提取试剂说明书【产品名称】通用名称:核酸提取试剂商品名称:磁珠法病毒核酸提取试剂盒【包装规格及适配仪器】预封装:32次/盒、96次/盒(适配Auto-Ex 32全自动核酸提取仪)非预封装:50次/盒、100次/盒(手工提取和其他自动核酸提取仪)【预期用途】用于核酸的提取、富集、纯化等步骤。

其处理后的产物用于临床体外检测使用。

【样本要求】拭子、组织匀浆液、血浆、血清、细胞培养上清液或各种病毒保存液等。

【检验原理】独特分离作用的磁珠和优化的试剂配方保证磁珠在一定条件下与核酸高效结合,而当条件改变时,磁珠释放吸附的核酸,能够达到快速分离纯化核酸的目的。

【主要组成成分】序号组分预封装非预封装列位32次/盒96次/盒50次/盒100次/盒1裂解液VPL第2、8列600μL/孔600μL/孔30 mL60 mL2洗涤液VPA第3、9列700μL/孔700μL/孔18 mL36 mL3磁珠MB1第4、10列30μL/孔30μL/孔2*1 mL3*1 mL475%乙醇700μL/孔700μL/孔// 575%乙醇第5、11列700μL/孔700μL/孔6无核酸酶水第6、12列100μL/孔100μL/孔 5 mL10 mL 组件数量96孔预封装板/2*16T6*16T/8连磁棒套2*2T6*2T【储存条件及有效期】室温(15~25℃)保存,非预封装试剂盒中磁珠MB1建议于2~8℃保存。

试剂盒有效期12个月。

【检验方法】方法一:自动法1. 试剂板准备1)预封装板:取出深孔板,颠倒数次使磁珠重悬,孔板离心机500 rpm离心1 min,使试剂及磁珠集中在孔板底部,使用前小心撕去铝箔封口膜,避免液体溅出。

核酸提取试剂盒说明书

核酸提取试剂盒说明书

核酸提取试剂盒说明书标题:核酸提取试剂盒说明书一、产品概述本产品是一款适用于各种生物样本的核酸提取试剂盒,能够高效、快速地从各种类型的样本中提取出高质量的DNA/RNA。

广泛应用于基因检测、分子生物学研究、疾病诊断等领域。

二、产品组成1. 核酸提取液A:用于裂解细胞和溶解核酸。

2. 核酸提取液B:用于去除蛋白质等杂质。

3. 洗涤液:用于洗涤核酸。

4. 乙醇溶液:用于沉淀核酸。

5. RNA酶抑制剂:防止RNA降解。

6. DNA/RNA分离柱:用于核酸的吸附和洗脱。

三、操作步骤1. 样本处理:根据样本类型进行相应的前处理。

2. 核酸提取:将处理后的样本加入到核酸提取液A中,涡旋混合后静置,然后加入核酸提取液B,再次涡旋混合并静置。

3. 细胞破碎与核酸释放:将混合液离心,取上清液转移到新的离心管中。

4. 去除杂质:向上述上清液中加入洗涤液,涡旋混合后离心。

5. 核酸吸附:将上清液转移到DNA/RNA分离柱中,离心吸附核酸。

6. 洗涤核酸:使用洗涤液对DNA/RNA分离柱进行洗涤,以去除剩余的杂质。

7. 核酸洗脱:加入适量的无菌水或TE缓冲液到DNA/RNA分离柱中,离心洗脱核酸。

8. 核酸保存:将提取出的核酸立即使用或-20℃保存。

四、注意事项1. 所有操作应严格遵守实验室生物安全规定。

2. 核酸提取过程中应避免产生气溶胶,以防交叉污染。

3. 提取后的核酸应尽快使用,长期保存时要避免反复冻融。

4. 试剂盒中的所有成分都应在室温下回温至室温后再使用。

五、质量保证我们承诺该产品经过严格的质量控制,如有任何质量问题,请联系我们的客户服务部。

六、联系方式感谢您选择我们的产品,如有任何问题或需要进一步的信息,请随时联系我们。

核酸提取试剂盒评判标准

核酸提取试剂盒评判标准

核酸提取试剂盒评判标准一、核酸提取试剂盒概述核酸提取试剂盒是应用于分子生物学实验中的一种重要试剂,主要用于从各种样本(如血液、唾液、组织等)中提取核酸。

核酸提取质量直接影响到后续的基因检测、基因编辑等实验,因此选择一款性能优越的核酸提取试剂盒至关重要。

二、评判标准概述1.提取效率提取效率是衡量核酸提取试剂盒性能的关键指标。

高效的核酸提取试剂盒能够在短时间内从样本中提取到大量的核酸,为后续实验提供充足的模板。

评判时可对比不同品牌试剂盒的提取效率,选择提取效果最佳的试剂盒。

2.提取纯度提取纯度是指提取到的核酸中杂质的含量。

高纯度的核酸有利于减少实验误差,保证实验结果的准确性。

评判时可通过电泳检测提取到的核酸纯度,选择纯度较高的试剂盒。

3.样本交叉污染风险核酸提取过程中,试剂盒应具备较低的交叉污染风险,确保实验结果的可靠性。

评判时可关注试剂盒的设计和生产工艺,选择具有较低交叉污染风险的试剂盒。

4.操作简便性操作简便性是衡量核酸提取试剂盒实用性的重要指标。

评判时应关注试剂盒的操作步骤、所需实验器材和实验时间等方面,选择操作简便、实验效率高的试剂盒。

5.试剂盒稳定性试剂盒稳定性是指试剂盒在储存和运输过程中的稳定性。

评判时可关注试剂盒的生产工艺、储存条件要求等方面,选择稳定性较好的试剂盒。

三、具体评判方法1.实验设计在进行评判实验时,应设计合理的实验方案,包括实验分组、样本选择、提取试剂盒品牌等。

确保实验的公正性和可比性。

2.实验操作按照实验方案进行实验操作,严格控制实验条件,确保实验过程的无菌性和准确性。

3.数据处理与分析实验结束后,对数据进行处理和分析,计算各组实验的提取效率、纯度等指标,对比各核酸提取试剂盒的性能。

四、总结与建议根据实验结果,总结各核酸提取试剂盒的优缺点,为实验室选择合适的核酸提取试剂盒提供参考建议。

核酸试剂盒使用方法

核酸试剂盒使用方法

核酸试剂盒使用方法核酸试剂盒是现代分子生物学特别是分子病毒学研究中不可缺少的仪器和耗材,其中最常用的是核酸提取试剂盒,以用于提取RNA 和DNA等核酸进行RT-PCR等实验。

它可以方便地帮助生物学家从细胞中提取所需要的核酸物质,从而为分子病毒研究实验提供重要的帮助。

本文将详细介绍核酸试剂盒的使用方法,以期使更多的生物学家在进行病毒研究时能得心应手。

一、核酸提取试剂盒的原理核酸提取试剂盒采用了多种技术,以提取和分离完整的核酸,其中最常用的是脉冲电泳(PE)技术。

PE技术是指将核酸放入一种特殊的试剂盒中,经过高压条件下的脉冲电流作用,就可以分离出单个dNTPs组成的高分子量链,脉冲电泳能够有效地将核酸从混合物中分离出来,这对于提取RNA和DNA有非常重要的意义。

二、核酸提取试剂盒的用途核酸提取试剂盒可用于提取核酸,是病毒研究中经常使用的试剂盒。

其主要应用包括:1.于核酸诊断:核酸提取试剂盒可以检测病毒或其他微生物,从而更准确地诊断某种疾病。

2.于生物测序:经过核酸提取,可以将核酸序列提取出来,进行基因测序分析。

3.于分子病毒学实验:核酸提取试剂盒可以用于分子病毒学实验,为病毒研究提供样品。

三、核酸提取试剂盒的使用方法1.备样品:将要提取的样品(如血液、唾液、尿液、细胞)放入容器中,搅拌均匀,加入适量的提取液,振荡均匀,再加入总液以预处理样品。

2.接管路:将样品预处理装置的出口管路连接核酸提取试剂盒的入口,调节管路压力,使提取液能够顺利进入试剂盒。

3.放电脉冲:将按照试剂盒上的指示进行脉冲设置,释放电脉冲,以将样品中的核酸分离出来。

4.却及脱水:提取试剂盒进行冷却和脱水,以终止试剂盒内的反应,使样品中的核酸得到充分提取。

5.离:将提取试剂盒内的核酸用分离清洗液冲洗,用超声波器将提取的核酸分离出来,然后完成核酸提取。

四、核酸提取试剂盒的注意事项1. 使用前,请务必仔细阅读说明书,按照说明操作,以免造成不必要的错误。

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DN0µl洗脱液EB,室温放置2分钟后, 再次洗脱DNA。 15. 取10µlDNA进行0.8%琼脂糖电泳检测提取DNA的完整性和质量。
离心柱注意事项
1.起始菌量对DNA提取的产量和质量有很大影响。起始菌量过多会引起细菌裂解不充分,导致堵塞离心 柱。一般情况下,LB液体培养基培养的大肠杆菌细菌在对数生长期中后期时的细菌浓度约为107~108 个/ml 之间。OD600在1.0时,大肠杆菌浓度大致为109个/ml。过夜(12‐16小时)培养细菌OD600值
核酸提取试剂盒
洛阳惠尔纳米科技有限公司 狄光辉
试剂盒
试剂盒分类
➢ 核酸提取
磁珠法,离心柱法,DNA和RNA,不同样本
➢ 蛋白检测
elisa试剂盒,免疫共沉淀试剂盒,化学发光试剂盒,免疫组化试剂盒,放射免疫试剂盒,免疫荧光试剂盒
➢ 重金属检测
不同重金属离子检测,不同样本中重金属离子检测
➢ 其他
PH检测,污染气体检测等等
DNA提取方法
磁珠法:生物磁珠是一种新型的功能化固体载体,其表面包被有活性基团,可以与多 种生物活性物质发生偶联,兼具有液体的流动性和固体磁性材料等特点,在外磁场的 作用下可以定向移动和集中,当撤去外磁场后,稍加振荡或抽吸又可均匀分散于液体 中,从而使固液相的分离变的十分快捷方便,通过简单的洗脱可以得到纯度很高的靶 向物质。
DNA提取方法
5.水抽提法:利用核酸溶解于水的性质,将组织细胞破碎后,用低盐溶液除去RNA,然后将沉淀溶于 水中,使DNA充分溶解于水中,离心后收集上清液.在上清中加入固体氯化钠调节至2.6M.加入2倍体 积95%乙醇,立即用搅拌法搅出.然后分别用66% ,80%和95%乙醇以及丙铜洗涤,最后在空气中干燥 ,即得DNA样品.此法提取的DNA中蛋白质含量较高,故一般不用.为除蛋白可将此法加以改良,在提取 过程中加入SDS。 6.阴离子去污剂法:用SDS或二甲苯酸钠等去污剂使蛋白质变性,可以直接从生物材料中提取DNA . 由于细胞中DNA与蛋白质之间常借静电引力或配位键结合,因为阴离子去污剂能够破坏这种价键,所 以常用阴离子去污剂提取DNA。
步骤详解
操作步骤(植物)
1.裂解 取新鲜植物组织xxxmg,与研钵中稍加研磨。加入xxxµl Buffer A、xxx µl Buffer B、xxxµl Buffer C,研磨均匀, 然后转移至1.5ml EP管中,混合均匀(可用漩涡振荡器,xxxrpm)。然后把EP管置于恒温水箱中xxx℃温育 xxxmin。
离心柱操作步骤
7.对于革兰氏阴性菌70℃保温15分钟(革兰氏阳性菌需70℃保温30分钟)。等溶液变成清亮后,离心数秒去除管壁上的 水珠。如果溶液未变清凉,说明细菌裂解不充分,起始菌量太大,需要适当调整。
8.加入220µl的无水乙醇,剧烈振荡,充分混匀,此时可能会出现絮状沉淀。 9.将离心柱装在收集管上,然后将所得的溶液及沉淀都转移入离心柱中。12,000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的滤液。 10. 加入500µl蛋白清洗液PWB,12,000rpm离心1分钟。倒掉收集管中的滤液。并将离心柱放回收集管中。 11. 加入500µl洗涤液WB,12,000rpm离心30秒。(使用前请检查是否已经加入无水乙醇) 12. 重复步骤11的操作一次。 13. 12,000离心1分钟,去掉离心柱中的所有液体。将离心柱放在一个干净的新的1.5ml离心管中,置于37℃ 烘箱放置5‐10分钟,待管中的乙醇全部挥发为止。 14. 往离心柱中央悬空滴加经70℃水浴预热的100-200µl洗脱液EB。室温放置2分钟后,12,000rpm离心30秒,洗脱
离心柱及收集管 溶菌酶缓冲液 ELB 裂解液 GDL 缓冲液 GDB 蛋白洗涤液 PWB 洗涤液 WB 蛋白酶 K 洗脱液 EB
离心柱试剂盒组成
各 xxx个 xxxml xxxml xxxml xxxml xxxml xxxml xxxml
离心柱操作步骤
所有离心步骤皆使用台式离心机,为室温下操作。 第一次使用前请先参考试剂瓶上的标签,在洗涤液WB中加入无水乙醇。 1.取适量的细菌培养液(最多提取的细菌数量为2×109个),10,000rpm离心1分钟,弃上清,留细菌沉淀备用。 2.提取的细菌为革兰氏阴性菌,可以在菌体沉淀中加入200µl裂解液GDL。用吸头吹打几下,充分混匀。然后进入步骤4 3.提取的细菌为革兰氏阳性菌,必须要进行溶菌酶破壁处理(如不确定为何种菌属,请按处理革兰氏阳性菌的方法进行
)。具体操作如下:称20mg溶菌酶,置于1.5ml离心管中,取1ml溶菌酶缓冲液ELB,反复吹打几次将溶菌酶完全 溶解,配制成溶菌酶裂解液。向细菌沉淀中加入200µl溶菌酶裂解液(未用完的溶菌酶裂解液可保存于‐20℃,以备 下次使用),吹打重悬细菌沉淀。37℃破壁处理30分钟以上,一些较难处理的细菌可以延长处理时间。破壁处理完 成后便可以将水浴温度调至70℃备用。 4.RNA清除处理,补加5µlRNase A溶液,充分混匀。 5.加入15µl蛋白酶K,充分混匀。 6.加入220µl缓冲液GDB充分混匀。加入缓冲液GDB可能会出现白色沉淀,放置于70℃水浴时便会消失。
响使用效果。 4. 磁珠使用前一定要充分混匀。 5. 如果下游实验对RNA污染比较敏感,可在裂解时加1µl RNase A(10mg/ml)。 6. 如果是干材料,适当延长裂解时间;种子用粉碎机打成粉末状使用,样品为种子时,裂解时间为
30min。 7. 如果同等取样量下欲得到更多DNA可以增加洗脱次数(洗脱次数最好不要超过3次),也可以适当延
核酸提取试剂盒
➢核酸
核酸广泛存在于所有动物、植物细胞、微生物内、生物体内核酸常与蛋白质结合形成核蛋白。 根据化学组成不同,核酸可分为核糖核酸,简称RNA和脱氧核糖核酸,简称DNA。 DNA是储存、复制和传递遗传信息的主要物质基础。 RNA在蛋白质合成过程中起着重要作用,其中转移核糖核酸,简称tRNA。 起着携带和转移活化氨基酸的作用;信使核糖核酸,简称mRNA,是合成蛋白质的模板。 核糖体的核糖核酸,简称rRNA,是细胞合成蛋白质的主要场所。
2.结合 将EP管从温育设备中取出,xxxr离心xxxmin。取xxx µl上清,加入振荡混匀的磁珠xxxµl、xxxµl结合液(也可加入 xxxµl异丙醇,产量高于加结合液;但是提取双子叶植物种子的核酸时,异丙醇的量为上清体积的xxx倍为宜),颠倒混 匀xxxmin。将EP管置于磁力架上进行磁分离,吸弃废液,(吸净管盖及管底残液)。
离心柱注意事项
3. 革兰氏阳性细菌主要包含细菌中的厚壁菌门(Firmicutes)(低G+C革兰氏阳性细菌)和放线菌门 (Actinobacteria)(高G+C革兰氏阳性细菌)。厚壁菌门包括的常见菌属:归类于芽孢杆菌纲 (Bacilli)的芽孢杆菌(Bacillus)、李斯特氏菌(Listeria)、葡萄球菌(Staphylococcus)、链球菌 (Streptococcus)和肠球菌(Enterococcus);归类于梭菌纲(Clostridia)的常见属梭菌(Clostridium) 和归类于柔膜菌(Mollicutes) 的支原体(Mycoplasma)。放线菌门常见菌属如放线菌 (Actinobacteria)和双歧杆菌 (Bifidobacterium)。
大约为2.0。不同细菌因菌株特性和培养条件差异会有很大差异,为了获得准确的计数,可以通过 测定OD600值和稀释法测定克隆形成单位(CFU)相结合的方法来确定。
2.确定所提细菌的归属关系也是一个重要的影响因素。革兰氏染色(Gram stain)是细菌分类和鉴定的 重要性状。它不仅能观察到细菌的形态,而且还可将所有细菌区分为两大类:染色反应呈蓝紫色的称 为革兰氏阳性细菌,用G+表示;染色反应呈红色的称为革兰氏阴性细菌,用G‐表示。细胞壁成分和结 构的差异造成两类细菌对革兰氏染色的不同反应。G+菌的细胞壁主要是由肽聚糖形成的网状结构组成 的,在染色过程中,当用乙醇处理时,由于脱水而引起网状结构中的孔径变小,通透性降低,使结晶 紫‐碘复合物被保留在细胞内而不易脱色,故呈蓝紫色;G‐细菌的细胞壁中肽聚糖含量低,而脂类物质 含量高,当用乙醇处理时,脂类物质溶解,细胞壁的通透性增加,使结晶紫‐碘复合物易被乙醇抽出而 脱色,然后又被染上了复染液(番红)的颜色,故呈红色。
磁珠法试剂盒概述
磁珠法核酸提取试剂盒采用具有独特分离作用的磁珠和缓冲液系统,从样品中分离纯 化高质量基因组DNA,特殊包被的磁珠,在一定条件下对目的DNA具有很强的亲和力 ,而当条件改变时,磁珠释放吸附的DNA,能够达到快速分离纯化DNA的目的。整个 过程不涉及有毒试剂,安全、便捷、提取的DNA纯度高。使用本试剂盒纯化的基因组 DNA (OD260-OD320)/(OD280-OD320)均在1.7~2.0之间,可以应用到各类下游分子 生物学实验。
长裂解时间。
• 组成成分: • 裂解液 • 结合液 • 洗涤液 • 洗脱液 • 生物磁珠 • 说明书
磁珠法试剂盒
• 裂解 • 结合 • 洗涤 • 洗脱
实验步骤
四步操作,简单快速
• 裂解 • 破坏细胞,把DNA释放到溶液中 • 结合 • 把释放出的DNA吸附到磁珠上 • 洗涤 • 把结合过程中吸附的杂质除去 • 洗脱 • 把纯净的DNA从磁珠上解离下来
磁珠法注意事项
1. Buffer B、Buffer C -20℃保存,反复冻融不超过3次。 2. Buffer B管中粉末状固体,可能会挂到瓶壁或瓶盖上,加入洗脱液溶解时,拧紧瓶盖后,充分混匀。 3. Buffer A低温储存可能会出现白色絮状漂浮物,使用前在恒温水箱中温育至白色沉淀完全溶解,不影
DNA提取方法
4.苯酚抽提法: 苯酚作为蛋白变性剂,同时抑制了DNase的降解作用.用苯酚处理匀浆液 时,由于蛋白与DNA 联结键已断,蛋白分子表面又含有很多极性基团与苯酚相似相溶。蛋 白分子溶于酚相,而DNA溶于水相。离心分层后取出水层,多次重复操作,再合并含 DNA 的水相,利用核酸不溶于醇的性质,用乙醇沉淀DNA 。此时DNA是十分粘稠的物 质,可用玻璃漫漫绕成一团,取出。此法的特点是使提取的DNA保持天然状态 。
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