核酸提取试剂盒介绍
核酸试剂盒 组成
核酸试剂盒组成
核酸试剂盒是用于核酸提取、纯化、放大或检测的一种化学试剂盒。
核酸试剂盒通常包括以下常见组成部分：
1. 缓冲液：用于维持试剂盒中的化学环境稳定，在DNA 或RNA提取纯化过程中起到调节pH值、维持离子平衡等作用。
2. 蛋白酶及其抑制剂：蛋白酶是DNA或RNA提取过程中的一种常见污染源，因此调理酶在核酸提取试剂盒中起到去除蛋白质的功能。
3. 离心柱：核酸提纯通常需要离心柱来分离核酸。
4. 硅胶磁珠：用于吸附DNA或RNA，帮助其在提取纯化过程中得以分离。
5. 洗涤液：用于清洗离心柱或硅胶磁珠，去除携带的其他杂质。
6. Elution Buffer：用于溶解和纯化后的DNA或RNA，
使其易于收集和保存。
7. 反应混合液：用于核酸的扩增、检测等过程中所需的反应试剂。
包括PCR试剂、RT-PCR试剂、核酸检测酶切酶等。
这些是核酸试剂盒中可能包含的一些基本组成部分，不同类型的核酸试剂盒可能还包括其他特定组分，具体组成会因商家、产品和应用而有所不同。
因此，在使用核酸试剂盒时应严格按照产品说明书进行操作。
Roche病毒核酸提取
Roche病毒核酸提取试剂盒当使用全血提取核酸时，提取物中将包括细胞和病毒基因组。
1．样品准备200μl样品✧血清✧血浆✧全血样品存在沉淀物时需通过离心去除。
2．试剂盒准备✧蛋白酶K：使用5ml Elution Buffer溶解、混匀，置于－20℃保存（12m）。
✧Poly[A]：使用0.5ml Elution Buffer溶解，分装成50μl等份，置于－20℃保存（12m）。
每次使用时，每50μl与2.5ml Binding Buffer混匀。
✧Inhibitor Removal Buffer：加入20ml 纯乙醇，混匀，常温储存。
✧Wash Buffer：加入40ml 纯乙醇，混匀，常温储存。
3．提取方法（1）200μl经预处理的样本使用1.5ml无核酸EP管装载，加入200μl Binding Buffer（已加入poly[A]）和50μl蛋白酶K，混匀。
（2）72℃孵育10min，再加入100μl Binding Buffer。
（3）装好纯化株和收集管，将上述处理样品加入纯化柱。
（3）8000g×1min，弃收集管中的液体。
（4）每管加入500μl Inhibitor removal buffer，8000g×1min，弃收集管中的液体。
（5）每管加入450μl Wash buffer，8000g×1min，弃收集管中的液体。
（6）每管加入450μl Wash buffer，8000g×1min＋13000g×10s，弃收集管中的液体。
（7）使用无核酸EP管替代收集管，每只纯化柱加入50μl Elution buffer，8000g×1min。
*如果起始样本量为300μl，每步的缓冲液也适当增加使用体积。
*从全血中提取核酸，洗脱缓冲液提前余热至70℃。
*进行PCR试验时，使用10μl～20μl反应；RT-PCR时3.5μl。
核酸检测试剂盒原理
核酸检测试剂盒原理首先是核酸提取试剂。
核酸通常嵌入在细胞或病毒颗粒中，因此需要使用核酸提取试剂将核酸从样本中提取出来。
核酸提取试剂通常包含一个蛋白酶，它能够分解蛋白质，使得核酸从蛋白质的包裹中释放出来。
此外，核酸提取试剂还包含一些溶剂，如盐和酒精，用于使细胞或病毒颗粒破裂和沉淀，从而获得含有核酸的上清液。
接下来是核酸扩增试剂。
核酸检测通常需要扩增核酸的数量，以达到检测的灵敏度。
核酸扩增试剂通常包含一个DNA聚合酶，它能够在一定的温度下，将核酸模板作为引物，合成新的DNA链。
核酸扩增试剂还包含了核酸模板的引物和适当的缓冲液，以调节反应的条件。
在核酸扩增的过程中，还需要考虑PCR（聚合酶链式反应）或RT-PCR （逆转录聚合酶链式反应）的选择。
PCR是一种将DNA扩增到指数级别的技术，它利用DNA聚合酶在高温下对DNA模板进行连续扩增。
而RT-PCR则是先将RNA逆转录成DNA，再进行扩增。
RT-PCR广泛应用于病毒检测和基因表达分析等领域。
最后是核酸标记试剂。
核酸检测通常需要通过标记物来检测核酸的存在和数量。
核酸标记试剂通常包含了一种标记物，如荧光染料或放射性同位素。
对于荧光染料标记，核酸标记试剂中通常含有可与核酸结合的一对引物，其中一对引物上带有荧光染料，另一对引物标记有Quencher。
引物与核酸结合后，荧光染料和Quencher之间的距离很近，因此无荧光信号。
在核酸扩增的过程中，当核酸扩增到引物位点时，荧光染料和Quencher被分离，发出荧光信号。
对于放射性同位素标记，核酸标记试剂中通常含有一种放射性同位素，如32P或35S，它能够与核酸结合。
标记的核酸通过放射性示踪仪来检测。
最后，核酸检测的结果可以通过聚合酶链式反应仪（PCR仪）或放射性示踪仪来记录和测量。
PCR仪可以记录PCR反应的温度变化和荧光信号，从而得到核酸的扩增曲线和定量结果。
放射性示踪仪可以测量核酸标记物的辐射量，从而得到核酸的数量。
新冠核酸检测试剂盒产品说明书
新冠核酸检测试剂盒产品说明书1. 引言新冠病毒（COVID-19）自2019年末在全球范围内爆发以来，已经造成了严重的公共卫生危机。
为了及时、准确地检测新冠病毒的感染情况，本公司开发了新冠核酸检测试剂盒产品，并特此出具本产品说明书。
2. 产品概述新冠核酸检测试剂盒是一种用于检测新冠病毒感染的重要工具。
该产品基于核酸检测技术，通过检测样本中的病毒核酸片段来确定是否感染了新冠病毒。
该产品具有以下特点： - 高灵敏度：能够在感染初期及时发现新冠病毒感染。
- 高特异性：能够准确识别新冠病毒并排除其他相关病毒感染。
- 快速检测：样本处理简便，检测时间短，结果快速可靠。
3. 适用范围本产品适用于医疗机构、公共卫生部门以及相关科研机构等场所进行新冠病毒感染的检测。
它可以用于急诊筛查、病例诊断、流行病学调查等用途。
4. 产品组成新冠核酸检测试剂盒由以下组成部分组成： 1. 核酸提取试剂盒：用于从样本中提取病毒核酸。
2. 核酸扩增试剂盒：用于扩增提取到的病毒核酸片段。
3. 荧光染料：用于标记扩增产物，并进行荧光信号检测。
4. 标准控制品：用于质控和检测结果的验证。
5. 检测步骤5.1 样本采集：采集患者咽拭子、鼻拭子或痰液样本，并将样本置于采集管中。
5.2 核酸提取：使用核酸提取试剂盒，按照说明书中的步骤进行核酸提取。
5.3 核酸扩增：将提取到的核酸样本加入核酸扩增试剂盒中，放入PCR仪中进行扩增反应。
5.4 荧光信号检测：将扩增产物与荧光染料混合，放入荧光检测仪中，测量样品中的荧光信号。
5.5 结果分析：根据荧光信号的强度判断样品中是否存在新冠病毒。
6. 结果解读本产品根据荧光信号的强度来判断样品中是否存在新冠病毒，具体结果如下： - 阳性结果：荧光信号强烈，说明样品中存在新冠病毒感染。
- 阴性结果：荧光信号弱或未检测到，说明样品中不存在新冠病毒感染。
- 无效结果：无论荧光信号强弱，均无法判断样品中是否存在新冠病毒感染，需重新检测。
核酸提取试剂盒国标
核酸提取试剂盒国标1. 简介核酸提取试剂盒是一种用于从生物样本中提取核酸（包括DNA和RNA）的试剂盒。
它在医学、生命科学研究、法医学等领域具有广泛的应用，可以用于分析基因组、检测病原体、进行遗传性疾病筛查等。
核酸提取试剂盒国标是对核酸提取试剂盒的相关技术规范和质量要求进行统一制定的标准。
它旨在确保核酸提取试剂盒的质量稳定，使不同厂家生产的产品能够具有相同的标准，以便用户能够获得可靠、准确和重复性好的实验结果。
2. 国标制定背景核酸提取试剂盒作为一种常见的实验工具，在实验室中被广泛使用。
然而，由于不同厂家生产的产品存在差异，导致实验结果可能会出现偏差。
为了解决这个问题，制定核酸提取试剂盒国标成为必要。
制定国标可以统一各个厂家的产品质量要求，规范产品的生产工艺和质量控制流程，提高核酸提取试剂盒的质量稳定性和可靠性。
此外，国标还可以帮助用户选择合适的试剂盒，并提供标准操作流程，以确保实验结果的准确性和可重复性。
3. 国标内容核酸提取试剂盒国标主要包括以下内容：3.1 产品分类与命名根据不同的核酸提取方法和应用领域，将核酸提取试剂盒分为不同的分类，并对每个分类进行命名规范。
例如，可以根据核酸来源将其分为DNA提取试剂盒和RNA提取试剂盒；或者根据应用领域将其分为医学用途和科研用途等。
3.2 技术规范对核酸提取试剂盒的技术规范进行详细说明，包括但不限于以下方面： - 样本处理：要求对不同类型的样本（如血液、组织、细胞等）进行适当处理，以保证样本中核酸的完整性和纯度。
- 提取原理：介绍核酸提取的基本原理和方法，以及各个步骤的操作要点。
- 试剂配方：对试剂盒中各种试剂的成分和浓度进行规定，确保产品质量的稳定性和一致性。
- 实验步骤：提供标准的实验操作步骤，包括样本处理、溶解、洗涤、洗脱等过程，并给出相应的注意事项和操作要点。
3.3 质量控制对核酸提取试剂盒的质量控制要求进行明确，包括但不限于以下方面： - 质量检测方法：规定核酸提取试剂盒的质量检测方法，如纯度检测、完整性检测等。
核酸提取试剂说明书
说明书【产品名称】【预期用途】本产品主要原理如下：1．使用裂解液实现细胞裂解、DNA 的释放。
2．磁珠可以特异地吸附DNA ，通过洗涤，去除DNA 以外的杂质。
3．洗脱液解离吸附在磁珠上的DNA ，得到纯度和浓度均很高的DNA 。
【检验原理】100次/盒； 400次/盒【包装规格】核酸提取或纯化试剂版本号：12/2021用于核酸的提取、富集、纯化等步骤。
其处理后的产物用于临床体外检测使用。
核酸提取或纯化试剂【主要组成成分】100次/盒400次/盒试剂名称规格数量规格数量裂解缓冲液24ml/瓶1瓶96ml/瓶1瓶漂洗缓冲液1（浓缩液）80ml/瓶1瓶80ml/瓶4瓶漂洗缓冲液2（浓缩液）50ml/瓶1瓶50ml/瓶4瓶漂洗缓冲液396 ml/瓶1瓶192ml/瓶2瓶洗脱缓冲液30ml/瓶1瓶96ml/瓶1瓶蛋白酶K25mg/支2支180mg/瓶1瓶蛋白酶K保存液 1.25 ml/支2支5ml/支2支磁珠悬浮液1ml/瓶2瓶8ml/瓶1瓶【自备仪器、试剂】1．手动单管提取：1）恒温混匀仪——货号：CW25932）2/15 ml磁力架——货号：CW25943）异丙醇、无水乙醇2．手动96孔深孔板提取：1）恒温混匀仪——货号：CW25932）废液抽吸系统——推荐品牌台湾洛科3）手动连续分液器——推荐品牌Eppendorf4）电动连续分液器——推荐品牌Eppendorf5）手动连续分液器分液管（25 ml）——推荐品牌Eppendorf6）96孔板磁力架——货号：CW25957）异丙醇、无水乙醇3．磁棒法磁珠自动提取系统：1）磁棒法磁珠自动提取系统——建议品牌Thermo Fisher2）异丙醇、无水乙醇【储存条件及有效期】4-30℃保存，有效期12个月。
可在4-37℃运输，运输时间建议不超过7天。
【样本要求】1．适用样本类型：抗凝全血、唾液、细胞。
2．样本处理与保存：新鲜样本应尽快处理或-70℃冻存，避免反复冻融。
莫纳（武汉）生物科技核酸提取试剂盒说明书
Version 1.0核酸提取试剂磁珠法病毒核酸提取试剂盒操作手册货号：MI30301S（50次/盒） MI30301M（100次/盒）MI35301S（32次/盒） MI35301M（96次/盒）莫纳（武汉）生物科技有限公司400-928-3698核酸提取试剂说明书【产品名称】通用名称：核酸提取试剂商品名称：磁珠法病毒核酸提取试剂盒【包装规格及适配仪器】预封装：32次/盒、96次/盒（适配Auto-Ex 32全自动核酸提取仪）非预封装：50次/盒、100次/盒（手工提取和其他自动核酸提取仪）【预期用途】用于核酸的提取、富集、纯化等步骤。
其处理后的产物用于临床体外检测使用。
【样本要求】拭子、组织匀浆液、血浆、血清、细胞培养上清液或各种病毒保存液等。
【检验原理】独特分离作用的磁珠和优化的试剂配方保证磁珠在一定条件下与核酸高效结合，而当条件改变时，磁珠释放吸附的核酸，能够达到快速分离纯化核酸的目的。
【主要组成成分】序号组分预封装非预封装列位32次/盒96次/盒50次/盒100次/盒1裂解液VPL第2、8列600μL/孔600μL/孔30 mL60 mL2洗涤液VPA第3、9列700μL/孔700μL/孔18 mL36 mL3磁珠MB1第4、10列30μL/孔30μL/孔2*1 mL3*1 mL475%乙醇700μL/孔700μL/孔// 575%乙醇第5、11列700μL/孔700μL/孔6无核酸酶水第6、12列100μL/孔100μL/孔 5 mL10 mL 组件数量96孔预封装板/2*16T6*16T/8连磁棒套2*2T6*2T【储存条件及有效期】室温（15~25℃）保存，非预封装试剂盒中磁珠MB1建议于2~8℃保存。
试剂盒有效期12个月。
【检验方法】方法一：自动法1. 试剂板准备1）预封装板：取出深孔板，颠倒数次使磁珠重悬，孔板离心机500 rpm离心1 min，使试剂及磁珠集中在孔板底部，使用前小心撕去铝箔封口膜，避免液体溅出。
核酸提取试剂盒说明书
核酸提取试剂盒说明书标题：核酸提取试剂盒说明书一、产品概述本产品是一款适用于各种生物样本的核酸提取试剂盒，能够高效、快速地从各种类型的样本中提取出高质量的DNA/RNA。
广泛应用于基因检测、分子生物学研究、疾病诊断等领域。
二、产品组成1. 核酸提取液A：用于裂解细胞和溶解核酸。
2. 核酸提取液B：用于去除蛋白质等杂质。
3. 洗涤液：用于洗涤核酸。
4. 乙醇溶液：用于沉淀核酸。
5. RNA酶抑制剂：防止RNA降解。
6. DNA/RNA分离柱：用于核酸的吸附和洗脱。
三、操作步骤1. 样本处理：根据样本类型进行相应的前处理。
2. 核酸提取：将处理后的样本加入到核酸提取液A中，涡旋混合后静置，然后加入核酸提取液B，再次涡旋混合并静置。
3. 细胞破碎与核酸释放：将混合液离心，取上清液转移到新的离心管中。
4. 去除杂质：向上述上清液中加入洗涤液，涡旋混合后离心。
5. 核酸吸附：将上清液转移到DNA/RNA分离柱中，离心吸附核酸。
6. 洗涤核酸：使用洗涤液对DNA/RNA分离柱进行洗涤，以去除剩余的杂质。
7. 核酸洗脱：加入适量的无菌水或TE缓冲液到DNA/RNA分离柱中，离心洗脱核酸。
8. 核酸保存：将提取出的核酸立即使用或-20℃保存。
四、注意事项1. 所有操作应严格遵守实验室生物安全规定。
2. 核酸提取过程中应避免产生气溶胶，以防交叉污染。
3. 提取后的核酸应尽快使用，长期保存时要避免反复冻融。
4. 试剂盒中的所有成分都应在室温下回温至室温后再使用。
五、质量保证我们承诺该产品经过严格的质量控制，如有任何质量问题，请联系我们的客户服务部。
六、联系方式感谢您选择我们的产品，如有任何问题或需要进一步的信息，请随时联系我们。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
步骤详解
操作步骤（植物）
1.裂解 取新鲜植物组织xxxmg，与研钵中稍加研磨。加入xxxµl Buffer A、xxx µl Buffer B、xxxµl Buffer C，研磨均匀， 然后转移至1.5ml EP管中，混合均匀（可用漩涡振荡器，xxxrpm）。然后把EP管置于恒温水箱中xxx℃温育 xxxmin。
DNA到离心管中。为了得到更多的DNA，可以再加100‐200µl洗脱液EB，室温放置2分钟后， 再次洗脱DNA。 15. 取10µlDNA进行0.8％琼脂糖电泳检测提取DNA的完整性和质量。
离心柱注意事项
1.起始菌量对DNA提取的产量和质量有很大影响。起始菌量过多会引起细菌裂解不充分，导致堵塞离心 柱。一般情况下，LB液体培养基培养的大肠杆菌细菌在对数生长期中后期时的细菌浓度约为107~108 个/ml 之间。OD600在1.0时，大肠杆菌浓度大致为109个/ml。过夜（12‐16小时）培养细菌OD600值
DNA提取方法
5.水抽提法：利用核酸溶解于水的性质,将组织细胞破碎后,用低盐溶液除去RNA，然后将沉淀溶于 水中，使DNA充分溶解于水中,离心后收集上清液.在上清中加入固体氯化钠调节至2.6M.加入2倍体 积95%乙醇,立即用搅拌法搅出.然后分别用66% ，80%和95%乙醇以及丙铜洗涤,最后在空气中干燥 ,即得DNA样品.此法提取的DNA中蛋白质含量较高,故一般不用.为除蛋白可将此法加以改良,在提取 过程中加入SDS。 6.阴离子去污剂法：用SDS或二甲苯酸钠等去污剂使蛋白质变性,可以直接从生物材料中提取DNA . 由于细胞中DNA与蛋白质之间常借静电引力或配位键结合,因为阴离子去污剂能够破坏这种价键,所 以常用阴离子去污剂提取DNA。
核酸提取试剂盒
DNA提取试剂盒 RNA提取试剂盒
DNA提取方法
DNA提取方法
1.碱裂解法：碱裂解法是基于DNA的变性与复性差异而达到分离目的。 2.煮沸法：煮沸时将样品中的DNA通过核酸裂解液的作用释放出来，离心沉淀后将杂质去 除，上清液即可用作pcr扩增。 3.浓盐法：利用RNA和DNA在电解溶液中溶解度不同，将二者分离，常用的方法是用1M 氯 化纳提取,得到的DNP粘液与含有少量辛醇的 氯仿一起摇荡,使乳化,再离心除去蛋白质,此时 蛋白质凝胶停留在水相及氯仿相中间，而DNA位于上层水相中,用2倍体积95%乙醇可将 DNA 钠盐沉淀出来。
2.结合 将EP管从温育设备中取出，xxxr离心xxxmin。取xxx µl上清，加入振荡混匀的磁珠xxxµl、xxxµl结合液(也可加入 xxxµl异丙醇，产量高于加结合液;但是提取双子叶植物种子的核酸时，异丙醇的量为上清体积的xxx倍为宜)，颠倒混 匀xxxmin。将EP管置于磁力架上进行磁分离，吸弃废液，（吸净管盖及管底残液）。
长裂解时间。
• 组成成分： • 裂解液 • 结合液 • 洗涤液 • 洗脱液 • 生物磁珠 • 说明书
磁珠法试剂盒
• 裂解 • 结合 • 洗涤 • 洗脱
实验步骤
四步操作，简单快速
• 裂解 • 破坏细胞，把DNA释放到溶液中 • 结合 • 把释放出的DNA吸附到磁珠上 • 洗涤 • 把结合过程中吸附的杂质除去 • 洗脱 • 把纯净的DNA从磁珠上解离下来
离心柱注意事项
3. 革兰氏阳性细菌主要包含细菌中的厚壁菌门(Firmicutes)（低G+C革兰氏阳性细菌）和放线菌门 (Actinobacteria)（高G+C革兰氏阳性细菌）。厚壁菌门包括的常见菌属：归类于芽孢杆菌纲 (Bacilli)的芽孢杆菌(Bacillus)、李斯特氏菌(Listeria)、葡萄球菌(Staphylococcus)、链球菌 (Streptococcus)和肠球菌(Enterococcus)；归类于梭菌纲(Clostridia)的常见属梭菌(Clostridium) 和归类于柔膜菌(Mollicutes) 的支原体(Mycoplasma)。放线菌门常见菌属如放线菌 (Actinobacteria)和双歧杆菌 (Bifidobacterium)。
大约为2.0。不同细菌因菌株特性和培养条件差异会有很大差异，为了获得准确的计数，可以通过 测定OD600值和稀释法测定克隆形成单位(CFU)相结合的方法来确定。
2.确定所提细菌的归属关系也是一个重要的影响因素。革兰氏染色（Gram stain）是细菌分类和鉴定的 重要性状。它不仅能观察到细菌的形态，而且还可将所有细菌区分为两大类：染色反应呈蓝紫色的称 为革兰氏阳性细菌，用G+表示；染色反应呈红色的称为革兰氏阴性细菌，用G‐表示。细胞壁成分和结 构的差异造成两类细菌对革兰氏染色的不同反应。G+菌的细胞壁主要是由肽聚糖形成的网状结构组成 的，在染色过程中，当用乙醇处理时，由于脱水而引起网状结构中的孔径变小，通透性降低，使结晶 紫‐碘复合物被保留在细胞内而不易脱色，故呈蓝紫色；G‐细菌的细胞壁中肽聚糖含量低，而脂类物质 含量高，当用乙醇处理时，脂类物质溶解，细胞壁的通透性增加，使结晶紫‐碘复合物易被乙醇抽出而 脱色，然后又被染上了复染液（番红）的颜色，故呈红色。
核酸提取试剂盒
洛阳惠尔纳米科技有限公司 狄光辉
试剂盒
试剂盒分类
核酸提取
磁珠法，离心柱法，DNA和RNA，不同样本
蛋白检测
elisa试剂盒，免疫共沉淀试剂盒，化学发光试剂盒，免疫组化试剂盒，放射免疫试剂盒，免疫荧光试剂盒
重金属检测
不同重金属离子检测，不同样本中重金属离子检测
其他
PH检测，污染气体检测等等
DNA提取方法
4.苯酚抽提法： 苯酚作为蛋白变性剂,同时抑制了DNase的降解作用.用苯酚处理匀浆液 时,由于蛋白与DNA 联结键已断,蛋白分子表面又含有很多极性基团与苯酚相似相溶。 蛋白分子溶于酚相，而DNA溶于水相。离心分层后取出水层，多次重复操作，再合并 含DNA 的水相，利用核酸不溶于醇的性质，用乙醇沉淀DNA 。此时DNA是十分粘稠的 物质，可用玻璃漫漫绕成一团，取出。此法的特点是使提取的DNA保持天然状态 。
磁珠法试剂盒概述
磁珠法核酸提取试剂盒采用具有独特分离作用的磁珠和缓冲液系统，从样品中分离纯 化高质量基因组DNA，特殊包被的磁珠，在一定条件下对目的DNA具有很强的亲和力 ，而当条件改变时，磁珠释放吸附的DNA，能够达到快速分离纯化DNA的目的。整个 过程不涉及有毒试剂，安全、便捷、提取的DNA纯度高。使用本试剂盒纯化的基因组 DNA (OD260-OD320)/(OD280-OD320)均在1.7～2.0之间，可以应用到各类下游分子 生物学实验。
DNA提取方法
磁珠法：生物磁珠是一种新型的功能化固体载体，其表面包被有活性基团，可以与多 种生物活性物质发生偶联，兼具有液体的流动性和固体磁性材料等特点，在外磁场的 作用下可以定向移动和集中，当撤去外磁场后，稍加振荡或抽吸又可均匀分散于液体 中，从而使固液相的分离变的十分快捷方便，通过简单的洗脱可以得到纯度很高的靶 向物质。
离心柱及收集管 溶菌酶缓冲液 ELB 裂解液 GDL 缓冲液 GDB 蛋白洗涤液 PWB 洗涤液 WB 蛋白酶 K 洗脱液 EB
离心柱试剂盒组成
各 xxx个 xxxml xxxml xxxml xxxml xxxml xxxml xxxml
离心柱操作步骤
所有离心步骤皆使用台式离心机，为室温下操作。 第一次使用前请先参考试剂瓶上的标签，在洗涤液WB中加入无水乙醇。 1.取适量的细菌培养液（最多提取的细菌数量为2×109个），10,000rpm离心1分钟，弃上清，留细菌沉淀备用。 2.提取的细菌为革兰氏阴性菌，可以在菌体沉淀中加入200µl裂解液GDL。用吸头吹打几下，充分混匀。然后进入步骤4 3.提取的细菌为革兰氏阳性菌，必须要进行溶菌酶破壁处理（如不确定为何种菌属，请按处理革兰氏阳性菌的方法进行
）。具体操作如下：称20mg溶菌酶，置于1.5ml离心管中，取1ml溶菌酶缓冲液ELB，反复吹打几次将溶菌酶完全 溶解，配制成溶菌酶裂解液。向细菌沉淀中加入200µl溶菌酶裂解液（未用完的溶菌酶裂解液可保存于‐20℃，以备 下次使用），吹打重悬细菌沉淀。37℃破壁处理30分钟以上，一些较难处理的细菌可以延长处理时间。破壁处理完 成后便可以将水浴温度调至70℃备用。 4.RNA清除处理，补加5µlRNase A溶液，充分混匀。 5.加入15µl蛋白酶K，充分混匀。 6.加入220µl缓冲液GDB充分混匀。加入缓冲液GDB可能会出现白色沉淀，放置于70℃水浴时便会消失。
• 离心柱子法
•
柱子
• 磁珠法
•
生物磁珠
核酸提取试剂盒
离心柱试剂盒（细菌）概述
本试剂盒用于极大部分革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌细胞基因组DNA的提取。该试剂 盒提供的方法简单易行，通过去垢剂处理和特殊的液体系统将裂解细胞后产生的DNA 结合在柱材上，避免酚仿抽提。所获的基因组DNA具有完整性好、产量大、纯度高和 稳定性好离心柱操作步骤
7.对于革兰氏阴性菌70℃保温15分钟（革兰氏阳性菌需70℃保温30分钟）。等溶液变成清亮后，离心数秒去除管壁上的 水珠。如果溶液未变清凉，说明细菌裂解不充分，起始菌量太大，需要适当调整。
8.加入220µl的无水乙醇，剧烈振荡，充分混匀，此时可能会出现絮状沉淀。 9.将离心柱装在收集管上，然后将所得的溶液及沉淀都转移入离心柱中。12,000rpm离心1分钟，倒掉收集管中的滤液。 10. 加入500µl蛋白清洗液PWB，12,000rpm离心1分钟。倒掉收集管中的滤液。并将离心柱放回收集管中。 11. 加入500µl洗涤液WB，12,000rpm离心30秒。（使用前请检查是否已经加入无水乙醇） 12. 重复步骤11的操作一次。 13. 12,000离心1分钟，去掉离心柱中的所有液体。将离心柱放在一个干净的新的1.5ml离心管中，置于37℃ 烘箱放置5‐10分钟，待管中的乙醇全部挥发为止。 14. 往离心柱中央悬空滴加经70℃水浴预热的100-200µl洗脱液EB。室温放置2分钟后，12,000rpm离心30秒，洗脱