20170915XXXX游离核酸提取试剂盒(货号:LS-R-N-004-05-3-0)测试报告

******外周血游离核酸提取试剂盒
货号:LS-R-N-004-05-3-0
测试报告
测试人员:
测试时间:
一、主要内容:
测试广东南芯医疗外周血游离核酸提取试剂盒游离核酸提取得率和质量。

实验过程中使用的是两个样本。

对实验过程中的cfDNA纯化产物进行质控(浓度及4200目的条带)。

二、实验结论
1、Qubit测定1号样本、2号样本浓度均低于0.5ng/mL。

溶解体系为50μL,1号样本、2号样本均无法计算cfDNA的提取量。

2、4200检测:HSD1000,
1号样本在185bp处有主峰,2号样本在182bp处有主峰。

3、实验过程遇到的问题及解决方法
(1)问题:试剂盒说明书上适用于3mL的血浆,本次实验使用1mL血浆进行,并且蛋白酶K、BufferBEO用量根据倍数减少。

疑问: 1mL血浆的蛋白酶K用量为20uL,对裂解效果是否有影响?
建议联系该试剂盒技术支持进行咨询,关于提取条带中500bp以上条带的来源。

除上述问题外,其余实验步骤完全依照试剂盒要求进行。

三、实验结果
1、测试样本2个,实验步骤完全依照试剂盒要求进行,具体信息见下表:
样本名称样本编号cDNA浓度
李万才1<0.5ng/mL
陈秀英2<0.5ng/mL 4200检测图谱如下
1号样本的图谱:
2号样本的图谱:
结果分析:
Qubit测定1号样本、2号样本浓度均低于0.5ng/mL。

溶解体系为50μL,1号样本、2号样本均无法计算cfDNA的提取量。

1号样本在185bp处有主峰,2号样本在182bp处有主峰。

四、实验方案
cfDNA的提取:
1、实验前准备:往BufferBEE中加入异丙醇;往BufferBEZ1和Buffer BEZ2中加入无水乙醇;加入体积参照试剂瓶上的标签。

2、准备血浆样品:从-80℃冰箱中取出样品1号李万才和样品2号陈秀英,置于室温水槽中溶解。

3、选择10ml的离心管,依次加入20μLProteinase K、1mL血浆。

4、再加入0.8mL Buffer BEO,涡旋震荡混匀30s。

5、在60℃孵育30min。

6、向裂解物中加入1.8mL Buffer BEE,涡旋震荡混匀15-30s。

7、冰上孵育5min。

8、取出吸附柱,做好标志。

分多次将步骤7得到的裂解物加到吸附柱上,10000rpm,1min离心,去除废液。

直至裂解物完全过柱。

9、向吸附柱中加入600μL Buffer BEZ1,12000rpm离心1min,倒掉废液,将吸附柱放回收集管上。

10、向吸附柱中加入750μL Buffer BEZ2,12000rpm离心1min,倒掉废液,将吸附柱放回收集管上。

11、向吸附柱中加入750μL无水乙醇,12000rpm离心1min,倒掉废液,将吸附柱放回收集管上。

12、12000rpm离心2miin,以去除吸附柱中残余液体。

13、将吸附柱放入新的1.5mL离心管中,打开盖子,室温静置10min,以完全干燥膜。

14、往吸附柱膜中间加入20-100μL的Buffer BXH(65℃预热),室温静置2min。

15、12000rpm离心2min,洗脱核酸。

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BIOG核酸提取试剂盒操作步骤说明

BIOG核酸提取试剂盒操作步骤说明

BIOG 游离DNA 提取试剂盒操作步骤说明运输条件:常温运输 货 号:51019:50次反应51020:100次反应 储存条件:室温(15-25℃),消化液、DNA Carrier 请于-20℃存放产品特点 试剂盒组成 组分 50次 100次 吸附柱和收集管各50个 各100个 裂解液 18mL 36 mL 洗涤液A 21mL 42 mL 洗涤液B 9 mL 18 mL 洗脱液 3mL 6 mL 消化液 1.2 mL 2.4 mL DNA Carrier 0.24 mL 0.48 mL 说明书1份1份产品介绍BIOG cfDNA Easy Kit 是常州百代生物科技股份有限公司研制的专门用于提取血清、血浆等游离DNA 的试剂盒。

BIOG cfDNA Easy Kit 采用了最新的优质进口离子膜,裂解液和洗脱液经过多次优化,能高效地分离DNA 。

提取得到的DNA 较其它品牌的同类试剂盒产量更大,纯度更高,最大限度地去除了蛋白、色素、脂类等杂质污染,可以直接应用于PCR 、荧光定量PCR 和各种酶切试验等。

操作步骤1. 请自行准备:无水乙醇、1.5mL 离心管。

2. 取出洗涤液,按以下操作:a) 洗涤液A :21mL 加入9mL 无水乙醇;42mL 加入18mL 无水乙醇。

b) 洗涤液B :9mL 加入21mL 无水乙醇;18mL 加入42mL 无水乙醇。

c) 配制好的洗涤液如出现沉淀,可在37℃溶解,摇匀后使用。

3. 取1.5mL 离心管,加入200μL 样本,4μL DNA Carrier 混合均匀,加入300μL 裂解液及20μL 消化液,振荡混匀,56℃水浴10 分钟。

4. 加入1000μL 无水乙醇,轻轻颠倒混匀,如有半透明悬浮物,不影响DNA 的提取与后续实验。

5. 将吸附柱放入收集管内,将760μL 上述溶液转入吸附柱内,静置2分钟,12,000 rpm 4℃离心1 分钟,弃收集管内废液; 6. 将吸附柱放回收集管内,将剩余760μL 溶液转移至吸附柱内,重复步骤5。

爱德基游离DNA提取试剂盒使用说明书

爱德基游离DNA提取试剂盒使用说明书

游离DNA提取试剂盒使用说明书【产品名称】通用名称:游离DNA提取试剂盒英文名称:Cell Free DNA Extraction Kit【包装规格】24人份/盒、48人份/盒、96人份/盒【预期用途】用于核酸的提取、富集、纯化等步骤。

其处理后的产物用于临床体外检测使用。

【实验原理】本试剂盒采用具有分离作用的磁珠和独特的缓冲液系统,在特定的盐离子浓度和pH值条件下,磁珠特异的吸附小片段的游离DNA,不吸附基因组DNA。

能够更好的适用于产前无创诊断和癌症基因分析诊断。

【主要组成成分】另需要准备的试剂及注意事项无水乙醇(分析纯)、超纯水或去离子水。

【储存条件及有效期】试剂盒储存在常温,有效期12个月。

【适用仪器】高速冷冻离心机、真空负压装置及真空泵【样品要求】1用装有EDTA抗凝剂的采血管取病人或孕妇(孕12-24周)5 mL全血,上下颠倒混匀,4℃运输。

2 在离心机中3000 rpm 的转速下,离心10min 分离血清。

按2mL/支收集血清,直接进入下一步实验或-20℃储存。

●使用前用无水乙醇稀释漂洗液,做好标记√。

●现配制80%乙醇:取20mL超纯水,加入80mL的无水乙醇,上下颠倒混匀。

【实验步骤】1. 血清/血浆样本预处理取1mL血清/血浆12000rpm 离心10 min,收集上清,用于游离核酸的提取。

注意:也可将血清/血浆样本在6000×g下离心30min以去除剩余的血细胞和细胞碎片。

2.蛋白酶K处理2.1 按照下表指示顺序,添加试剂到15mL离心管:试剂体积血浆/血清体积1mL 2mL 4mL 10ml蛋白酶K(20mg/mL) 20μL 40μL 80μL 200µL20%SDS 130μL 260μL 520μL 1040µLtotal 1.15mL 2.30mL 4.60mL 11.24 ml注意:不要将SDS直接加到蛋白酶K中,以避免蛋白酶K失去活性。

核酸提取试剂说明书

核酸提取试剂说明书

说明书【产品名称】【预期用途】本产品主要原理如下:1.使用裂解液实现细胞裂解、DNA 的释放。

2.磁珠可以特异地吸附DNA ,通过洗涤,去除DNA 以外的杂质。

3.洗脱液解离吸附在磁珠上的DNA ,得到纯度和浓度均很高的DNA 。

【检验原理】100次/盒; 400次/盒【包装规格】核酸提取或纯化试剂版本号:12/2021用于核酸的提取、富集、纯化等步骤。

其处理后的产物用于临床体外检测使用。

核酸提取或纯化试剂【主要组成成分】100次/盒400次/盒试剂名称规格数量规格数量裂解缓冲液24ml/瓶1瓶96ml/瓶1瓶漂洗缓冲液1(浓缩液)80ml/瓶1瓶80ml/瓶4瓶漂洗缓冲液2(浓缩液)50ml/瓶1瓶50ml/瓶4瓶漂洗缓冲液396 ml/瓶1瓶192ml/瓶2瓶洗脱缓冲液30ml/瓶1瓶96ml/瓶1瓶蛋白酶K25mg/支2支180mg/瓶1瓶蛋白酶K保存液 1.25 ml/支2支5ml/支2支磁珠悬浮液1ml/瓶2瓶8ml/瓶1瓶【自备仪器、试剂】1.手动单管提取:1)恒温混匀仪——货号:CW25932)2/15 ml磁力架——货号:CW25943)异丙醇、无水乙醇2.手动96孔深孔板提取:1)恒温混匀仪——货号:CW25932)废液抽吸系统——推荐品牌台湾洛科3)手动连续分液器——推荐品牌Eppendorf4)电动连续分液器——推荐品牌Eppendorf5)手动连续分液器分液管(25 ml)——推荐品牌Eppendorf6)96孔板磁力架——货号:CW25957)异丙醇、无水乙醇3.磁棒法磁珠自动提取系统:1)磁棒法磁珠自动提取系统——建议品牌Thermo Fisher2)异丙醇、无水乙醇【储存条件及有效期】4-30℃保存,有效期12个月。

可在4-37℃运输,运输时间建议不超过7天。

【样本要求】1.适用样本类型:抗凝全血、唾液、细胞。

2.样本处理与保存:新鲜样本应尽快处理或-70℃冻存,避免反复冻融。

核酸提取试剂实验报告

核酸提取试剂实验报告

一、实验目的1. 熟悉核酸提取试剂的使用方法。

2. 掌握核酸提取的原理和操作步骤。

3. 了解不同核酸提取试剂的优缺点。

二、实验原理核酸是生物体内重要的生物大分子,包括脱氧核糖核酸(DNA)和核糖核酸(RNA)。

DNA主要存在于细胞核中,负责储存遗传信息;RNA主要存在于细胞质中,参与蛋白质的合成。

核酸提取是将核酸从生物样本中分离出来的过程,常用的提取方法有酚-氯仿法、磁珠法等。

本实验采用酚-氯仿法提取DNA,该方法利用酚和氯仿的变性作用,将蛋白质与DNA 分离,然后通过离心、沉淀等步骤,获得纯化的DNA。

三、实验材料1. 样本:细菌、真菌、植物、动物组织等。

2. 试剂:酚-氯仿、氯仿、无水乙醇、NaCl溶液、TE缓冲液等。

3. 仪器:离心机、电子天平、移液器、离心管等。

四、实验步骤1. 样本处理:将样本剪碎,加入适量TE缓冲液,充分研磨,制成匀浆。

2. 混合:将匀浆液加入等体积的酚-氯仿,充分振荡,静置10分钟。

3. 离心:将混合液以12,000 rpm离心10分钟,取上清液。

4. 沉淀:在上清液中加入等体积的氯仿,充分振荡,静置10分钟。

5. 离心:将混合液以12,000 rpm离心10分钟,取上清液。

6. 沉淀:在上清液中加入1/10体积的3mol/L NaCl溶液和2.5倍体积的无水乙醇,充分混匀,静置2小时。

7. 离心:将混合液以12,000 rpm离心10分钟,弃上清液。

8. 洗涤:用75%乙醇洗涤沉淀,以12,000 rpm离心5分钟,弃上清液。

9. 洗涤:用无水乙醇洗涤沉淀,以12,000 rpm离心5分钟,弃上清液。

10. 溶解:将沉淀溶于适量TE缓冲液,混匀,即为提取的DNA。

五、实验结果与分析1. 实验结果:通过酚-氯仿法提取的DNA呈白色絮状沉淀,溶解于TE缓冲液后,在紫外分光光度计下,A260/A280比值在1.8-2.0之间,表明DNA纯度较高。

2. 结果分析:实验结果表明,酚-氯仿法能够有效提取DNA,且提取的DNA纯度较高。

核酸提取试剂盒说明书

核酸提取试剂盒说明书

核酸提取试剂盒说明书标题:核酸提取试剂盒说明书一、产品概述本产品是一款适用于各种生物样本的核酸提取试剂盒,能够高效、快速地从各种类型的样本中提取出高质量的DNA/RNA。

广泛应用于基因检测、分子生物学研究、疾病诊断等领域。

二、产品组成1. 核酸提取液A:用于裂解细胞和溶解核酸。

2. 核酸提取液B:用于去除蛋白质等杂质。

3. 洗涤液:用于洗涤核酸。

4. 乙醇溶液:用于沉淀核酸。

5. RNA酶抑制剂:防止RNA降解。

6. DNA/RNA分离柱:用于核酸的吸附和洗脱。

三、操作步骤1. 样本处理:根据样本类型进行相应的前处理。

2. 核酸提取:将处理后的样本加入到核酸提取液A中,涡旋混合后静置,然后加入核酸提取液B,再次涡旋混合并静置。

3. 细胞破碎与核酸释放:将混合液离心,取上清液转移到新的离心管中。

4. 去除杂质:向上述上清液中加入洗涤液,涡旋混合后离心。

5. 核酸吸附:将上清液转移到DNA/RNA分离柱中,离心吸附核酸。

6. 洗涤核酸:使用洗涤液对DNA/RNA分离柱进行洗涤,以去除剩余的杂质。

7. 核酸洗脱:加入适量的无菌水或TE缓冲液到DNA/RNA分离柱中,离心洗脱核酸。

8. 核酸保存:将提取出的核酸立即使用或-20℃保存。

四、注意事项1. 所有操作应严格遵守实验室生物安全规定。

2. 核酸提取过程中应避免产生气溶胶,以防交叉污染。

3. 提取后的核酸应尽快使用,长期保存时要避免反复冻融。

4. 试剂盒中的所有成分都应在室温下回温至室温后再使用。

五、质量保证我们承诺该产品经过严格的质量控制,如有任何质量问题,请联系我们的客户服务部。

六、联系方式感谢您选择我们的产品,如有任何问题或需要进一步的信息,请随时联系我们。

生物岛游离DNA提取试剂盒(柱式法) 说明书

生物岛游离DNA提取试剂盒(柱式法) 说明书

版本号:11/2020游离DNA提取试剂盒(柱式法)说明书【产品名称】通用名称:核酸提取或纯化试剂商品名称:游离DNA 提取试剂盒(柱式法)英文名称:CWhipro Circulating Nucleic Acid Kit 本试剂盒适用于从新鲜或冷冻的血清、血浆、淋巴液等无细胞体液中提取游离DNA 。

得到的游离DNA 用于PCR 、荧光定量PCR 和二代测序等分子生物学实验。

【预期用途】 本试剂盒采用可以特异性结合核酸的离心吸附柱和独特的缓冲液系统,样品裂解后,游离DNA 在高盐条件下与硅胶膜结合,在低盐、高pH 值时游离DNA 从硅胶膜上洗脱下来。

本品可以处理0.1-1 ml 的液体样本,配置的高效微量吸附柱洗脱体积可低至20 μl 。

纯化的DNA 产量高、质量好,最大限度去除蛋白、色素、脂类及其他抑制物,游离DNA 得率与样品的类型,储存条件、时间以及个体间差异有很大关系。

【检验原理】50次/盒;200次/盒【包装规格】【主要组成成分】50次/盒200次/盒试剂名称规格数量规格数量裂解缓冲液45ml/瓶1瓶200ml/瓶1瓶结合缓冲液(浓缩液)60 ml/瓶1瓶240ml/瓶1瓶漂洗缓冲液1(浓缩液)13 ml/瓶1瓶52ml/瓶1瓶漂洗缓冲液2(浓缩液)15ml/瓶1瓶60ml/瓶1瓶洗脱缓冲液10ml/瓶1瓶30ml/瓶1瓶蛋白酶K100mg/支1支400mg/瓶1瓶蛋白酶K保存液5ml/支1支20ml/瓶1瓶吸附柱50个/包1包50个/包4包收集管50个/包1包50个/包4包需要实验者自行准备的试剂:无水乙醇、异丙醇。

【储存条件及有效期】吸附柱2-8℃保存,其余组分0-35℃保存,有效期12个月。

可在0-40℃运输,运输时间建议不超过7天。

【样本要求】1.适用标本类型:新鲜或冷冻的血清、血浆、淋巴液等无细胞体液。

2.标本处理与保存:样本应避免反复冻融,否则影响提取的得率和质量。

3.样本运输:应采用冰壶或者泡沫箱加冰或干冰密封运输。

游离DNA提取试剂盒(磁珠法)说明书

游离DNA提取试剂盒(磁珠法)说明书【产品名称】通用名称:核酸提取或纯化试剂商品名称:游离DNA 提取试剂盒(磁珠法)英文名称:Magbind CFDNA Kit 该试剂盒提供了一种简单、快速、高效的游离DNA (Free circulating / Cell-free DNA)提取方法,适用于从血清、血浆、淋巴液、尿液等无细胞体液中提取游离DNA 。

纯化得到的离DNA 质量稳定、可靠,可用于下游常规实验。

 该试剂盒可与转移液体法的核酸提取仪配套使用,简单、快速地进行大规模提取,大大降低了实验者的工作量和实验中的人为误差。

【预期用途】 样品裂解后,在高盐存在时,DNA 结合于硅基包被的磁珠表面,漂洗后,高纯度DNA 被洗脱于洗脱缓冲液或去离子水中。

DNA 得率与样品的类型、储存条件、时间以及个体间差异有很大关系。

【检验原理】50次/盒;400次/盒【包装规格】版本号:11/2020【样本要求】1.适用标本类型:新鲜或冷冻的全血(用柠檬酸盐、EDTA 或肝素等抗凝剂处理过的血液样品)、血浆、血清、淋巴细胞、无细胞体液等样本。

2.标本处理与保存:血清及血浆样本按常规方法制备,新鲜样本应尽快处理或分装后于-70℃冻存,避免反复冻融。

3.样本运输:应采用冰壶或者泡沫箱加冰或干冰密封运输。

【检验方法】实验前准备:向蛋白酶K 中加入指定用量的蛋白酶K 保存液使其溶解,终浓度为20 mg/ml ,-20℃保存。

1.向1.5 ml 离心管中加入20 μl 蛋白酶K 溶液。

2.向上一步的离心管中加入200 μl 血清/血浆样品。

注意:冻存样品需提前在4℃冰箱中放置使其溶化。

溶化过程中反复颠倒样品储存管使其混匀。

3.向上一步的离心管中加入200 μl 裂解缓冲液,涡旋振荡5秒钟使其充分混匀后将离心管放于56℃、1300 rpm 的Thermomixer 上振荡裂解10分钟。

注意:1)如无Thermomixer ,需将离心管放于56℃水浴锅或金属浴中孵育10分钟,期间每隔2分钟涡旋振荡5秒钟。

游离DNA提取试剂盒

游离DNA 提取试剂盒目录1. 产品介绍 (1)2. 使用流程 (1)3. 问题及解决方案 (2)4. 订购信息及相关产品 (3)1.产品介绍游离DNA是存在于血液(血浆或血清)、脑脊液等体液中的细胞外DNA,也叫循环DNA。

其主要是由单链或双链 DNA 以及单链与双链 DNA 的混合物组成,以 DNA 和蛋白质复合物或游离 DNA 两种形式存在。

游离 DNA 提取试剂盒适用于血清及血浆中游离 DNA 片段的提取,该类型样本由于 DNA 含量低,DNA 片段小,对提取工作要求较高,产品检测多需要 PCR 扩增才能完成。

本试剂盒利用超顺磁性颗粒在特定条件下吸附核酸的原理纯化 DNA,操作过程简单、快速,不需酚、氯仿等有毒的有机溶剂抽提,无需离心、沉淀的耗时步骤。

纯化的得到的DNA 可直接用于 PCR,定量 PCR,液相芯片分析,第二代测序等运用。

1.1产品特点:•高纯度:所纯化的 DNA 样本完整且不含 RNA 污染。

•需要的样本少:只需 200µl 血浆就可获得足够量的游离 DNA.。

•操作简便:不需酚、氯仿抽提,无需离心。

•易于自动化:可配合自动化核酸提取仪,高通量提取 DNA。

•提纯的游离DNA纯度高,性能稳定:200µl 正常血浆(离心后无血细胞破损)提取 DNA 的量在 1-5ng。

1.2试剂盒组成(20 次/盒)试剂名称规格数量LSB 12ml 1蛋白酶K 500µl 1磁珠500µl 1MW1 8ml 1MW2 6ml 1Elution Buffer 8ml 1使用前:LSB 加入 6ml 异丙醇,MW1 加入 10.2ml 无水乙醇,MW2 加入 24ml 无水乙醇。

2.游离DNA 提取2.1样品制备及保存方法1)血浆的制备:抗凝剂:血液 = 1:9,将血液加到一定量后颠倒混匀,离心(一般为 3000rpm,离心 5~10min)后所得的上清液即为血浆。

微生物核酸提取试剂

微生物核酸提取试剂
微生物核酸提取试剂是用于从微生物样本(如细菌、真菌、病毒等)中提取核酸(如DNA或RNA)的化学试剂盒。

这些试剂盒通常包括提取核酸所需的所有试剂和材料,以及提取步骤的详细说明。

以下是一些常见的微生物核酸提取试剂:
1.酚-氯仿提取法试剂盒:这是一种传统的核酸提取方法,利用酚和氯仿对细胞进行溶解,然后通过离心分离核酸。

试剂盒通常包括酚、氯仿、等体积比例的缓冲液,以及其他必要的试剂。

2.硅胶柱提取法试剂盒:这种方法利用硅胶柱的亲合性捕获核酸,然后通过洗脱步骤提取纯净的核酸。

试剂盒通常包括裂解缓冲液、洗涤缓冲液、洗脱缓冲液等。

3.磁珠提取法试剂盒:这种方法利用磁珠的亲和性捕获核酸,然后通过磁场的作用分离核酸。

试剂盒通常包括磁珠悬浊液、洗涤缓冲液、洗脱缓冲液等。

4.离心管法提取试剂盒:这种方法直接在离心管中进行核酸提取,通常包括预填充的离心管,以及核酸提取缓冲液、洗涤缓冲液、洗脱缓冲液等。

5.化学裂解法提取试剂盒:这种方法利用化学试剂将细胞溶解,然后通过离心或其他方式分离核酸。

试剂盒通常包括裂解缓冲液、洗涤缓冲液、洗脱缓冲液等。

这些微生物核酸提取试剂盒具有不同的优缺点,可以根据实验需要和样本特性选择适合的提取方法。

值得注意的是,选择试剂盒时应考虑其提取效率、纯度、操作简便性以及成本等因素。

快速核酸提取试剂盒说明书1

快速核酸提取试剂盒
1、产品介绍
本裂解液具有样本用量少,步骤简单,不需要特殊仪器,而且能够沉淀样本血清中的杂蛋白及其他影响PCR反应的大分子有机物,是目前快速检测中较理想的选择之一。

该技术将标本直接加入到PCR 扩增管,不需振荡、无需开管盖和移液等操作,可采用与标准质控品和标本同步进行处理和扩增,实现全程监控,具有无污染、操作简单、快速、准确等独特优点。

2
3、适用范围
适用于血清,无抗凝的血浆或者全血,病毒培养液,尿液,唾液,咽拭子浸提液等标本。

4、实验步骤
(1)用200ul PCR管加入5ul Buffer1 溶液,再加入5ul样本,轻柔混匀,短离;
(2)新的200ul PCR管中,加入3ul MB裂解液,再加入3ul(1)中的混合液,10000转离心1min;
(3)将加好MB 裂解液的PCR管置于PCR仪(带热盖)中,99℃,10min;(4)取出样本后再室温平衡2-3min,10000转离心1min,PCR管底可见白色沉淀物,说明裂解完全;
(5)直接进行PCR扩增程序;
※注:若样本为血清或者无抗凝血浆,可跳过步骤(1),直接从步骤(2)开始。

其他样本(非组织),需要加Buffer1预混,从步骤(1)开始。

5、注意事项
※尽量避免多次冻融,可置于4℃保存,长期保存于-20℃。

※血浆样品不能含有任何抗凝剂,会影响后续实验。

※MB裂解液使用体积为PCR总体积的1/8。

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