第八章 动物实验的基本方法
小鼠实验的基本技术和方法
小鼠实验的基本技术和方法小鼠实验是生物实验中常用的实验方法之一，主要用于研究生物学、药理学、毒理学等领域。
以下将介绍小鼠实验的基本技术和方法。
一、小鼠的选材与饲养1.小鼠的选材：选取体重相近、同龄、同性的小鼠作为实验对象，并确保其健康状态。
2.小鼠的饲养：小鼠应在洁净、无臭、适温的实验动物房进行饲养。
提供适宜的饲料和清洁的饮水，保持适定的饲养环境，有规律地进行日常护理，确保小鼠的健康和舒适。
二、小鼠实验的基本技术1.注射技术：常用的小鼠注射技术包括静脉注射、皮下注射、腹腔注射等。
操作时应注意选用适当的注射器和针头，避免伤害到小鼠的内脏和组织。
2.静脉采血技术：静脉采血是获取小鼠血液样本的一种常用技术。
通常采用静脉穿刺的方式，先选定采血部位，再使用适当的器具（如针管）进行采血。
3.取脏器技术：小鼠解剖和取脏器是许多实验研究的必要步骤。
这包括心脏、肺、肝脏、脾脏等器官的解剖和获取。
操作时应尽量避免伤害到脏器，确保获取到完整可用的样本。
4.外周血细胞计数：通过采集小鼠的血液样本，使用血细胞计数仪进行细胞计数。
这是评估小鼠免疫功能、全血红细胞计数和血红蛋白浓度的重要方法，有助于评估一些疾病或药物对血液系统的影响。
三、小鼠实验的常用方法1.急性毒性实验：通过给小鼠灌胃或注射一定量的物质来观察其毒性反应，包括死亡率、体重变化、行为异常等。
根据实验设计的需要，可以使用LD50（半数致死量）等指标来评估物质的毒性。
2.慢性毒性实验：将小鼠长期接触一定浓度的物质，观察其对小鼠生理和行为的长期影响。
常用的实验方法包括饮水或饮食添加剂量法、慢性面毒研究等。
3.细胞培养和移植：通过培养小鼠的细胞，观察其在体外的生长和变化。
可以进行细胞增殖、凋亡、分化等方面的研究。
此外，还可以将小鼠的细胞或组织移植到其他物种中，进行异种移植实验。
4.基因改良和基因敲除：通过基因工程技术，改变小鼠基因组的特定基因，观察其对小鼠生理和行为的影响。
8.第八章 动物实验基本操作方法
动物实验的基本操作方法，包括实验动
物的抓取、固定、编号、标记、麻醉、去
毛、给药、采血、采集体液、常见手术操 作、处死等操作方法。
第一节
实验动物的抓取、固定、编号、标记方法
一、小鼠的抓取与固定
二、大鼠的抓取与固定
抓取与固定方法同小鼠,但要防止被大鼠咬伤.
三、豚鼠的抓取与固定
小鼠3cm大鼠或豚鼠5cm大鼠小鼠的灌胃法用左手固定鼠右手持灌胃器安好灌胃针并已吸好药物将灌胃针从鼠的嘴角插入口腔压迫鼠的头部使口腔和食管成一直线轻轻转动针头刺激鼠的吞咽将灌胃针沿咽后壁慢慢插入食管如动物挣扎厉害退出灌胃针待动物安静下来重新插入灌胃针前端达到膈肌水平即可慢慢推灌药液如很通畅则说明已进入胃内
常用实验动物全身麻醉药用法及剂量
药品 动物 给药 途径 剂量
（mg/kg）
浓度
(%) 3 3 2 2
用药量
(mL/kg) 1.0 1.4~1.7 2.0~2.5 2.3 3~4 7.0 7.0 1.3~25 5.0~10.0
麻醉时间
戊巴比妥钠
犬、猫、兔 iv ip ip 豚鼠 大鼠、小鼠 Ip
30 40~50 40~50 45
三、动物麻醉的注意事项 1．有些麻醉药物，如乙醚，是挥发性很强的液体，易燃易 爆，使用时应远离火源。平时应装在棕色玻璃瓶中，储存阴 凉处，不宜放在冰箱中，以免遇电火花而引起爆炸。
2．所有麻醉药使用过量均可引起中毒，应特别注意各种麻 醉药的剂量和给药途径，应准确按体重计算麻醉剂量。由于 动物存在个体差异，文献介绍的剂量仅能作参考使用。 3．注射时，一般要求缓慢，并随时观察动物的肌张力、 角膜反射、呼吸频率、夹痛反射射等指标。
（三）肌肉注射 肌肉注射比皮下和腹腔注射用得较少，但当给动物注射 不溶于水而混悬于油或其他溶剂中的药物时，常采用肌肉注 射。动物肌肉注射时，应选用肌肉发达，无大血管经过的部 位，如兔、猫、犬、猴的两侧臀部或股部。 （四）腹腔注射 大鼠、小鼠腹腔注射时，左手抓取并固定好动物，将腹部 朝上。右手持注射器将针头在下腹部腹白线稍左或偏右的位置， 从下腹部朝头方向几乎平行地刺入皮下，进针3~5mm，再使 针头与皮肤呈45°角斜穿过腹肌，当针尖穿过腹肌进入腹腔时， 有落空感，然后固定针头，保持针尖不动，回抽，无回血，无 肠液、尿液，便可缓缓推入药液。小鼠的一次注射量为 0.1~0.2ml/10g体重。大鼠一次注射量为：1~2ml/100g体重。 兔的注射部位在腹部近腹白线lcm处，犬在脐后腹白线侧边 1~2cm处。
医学实验动物学教程
医学实验动物学教程第一章引言医学实验动物学是一门研究在医学实验中使用的动物的学科，它对于医学研究的发展和进步起着重要的作用。
本教程旨在介绍医学实验动物学的基本知识和技术，帮助读者理解和掌握医学实验动物学的原理和方法。
第二章医学实验动物的选择在医学实验中，选择合适的动物模型是非常重要的。
本章将介绍如何根据研究目的和需求选择合适的动物模型，包括常用的实验动物种类、动物的生理特征和生活习性等。
第三章动物的饲养与管理动物的饲养和管理对于保证实验结果的准确性和可靠性至关重要。
本章将介绍动物的饲养环境要求、饲料配制、饲养密度、疾病防控等方面的内容，帮助读者建立良好的动物饲养和管理体系。
第四章动物实验的伦理与法律在进行动物实验时，必须遵守伦理和法律的规定。
本章将介绍动物实验的伦理原则、动物福利法律法规等内容，帮助读者了解并遵守相关规定，确保实验的合法性和道德性。
第五章动物实验的技术方法医学实验动物学涉及到多种技术方法的应用。
本章将介绍常用的动物实验技术，包括动物的体内注射、手术操作、采血、组织取样、动物行为观察等方法，帮助读者掌握实验技术的操作要点和注意事项。
第六章数据的收集与分析医学实验的数据收集和分析是实验结果解读和科学论证的基础。
本章将介绍数据的收集方法、常用的统计学分析方法，以及如何正确解读和呈现实验结果。
第七章实验设计与实验方案编写良好的实验设计和实验方案编写对于实验的顺利进行至关重要。
本章将介绍实验设计的原则和方法，以及如何撰写规范的实验方案，帮助读者提高实验设计和方案编写的能力。
第八章实验结果的报告与论文写作实验结果的报告和论文写作是科学研究的重要环节。
本章将介绍实验结果的报告方式和论文写作的基本要求，包括实验报告的结构、论文的撰写规范等内容，帮助读者提高实验结果的呈现和论文写作的能力。
结语医学实验动物学作为医学研究的重要组成部分，对于推动医学科学的发展和进步具有重要意义。
通过本教程的学习，相信读者能够深入了解医学实验动物学的基本知识和技术，提高医学实验的质量和效果。
开展动物实验过程中
开展动物实验过程中动物实验是在科学研究中广泛使用的一种手段。
它主要用于研究动物行为、生理、药物毒性和疾病等方面。
动物实验在其中一种程度上可以补充和替代人体实验，为人类健康和安全提供重要的科学支持。
然而，由于动物实验涉及到动物的伦理和福利问题，一直以来都备受争议。
动物实验的一般过程可以概括为以下几个步骤：实验策划、实验动物选择、实验操作、数据收集和分析、实验结果报告。
实验策划是动物实验的第一步。
在这个阶段，研究者需要明确研究目的、问题和假设，并确定实验设计和实验中所需的动物种类和数量。
为了保证实验的科学性和可靠性，实验策划还需要考虑到实验的可重复性、对照组的设置以及实验的统计学分析等因素。
实验动物的选择是动物实验过程中的关键环节之一、在选择实验动物时，需要权衡动物的特性、生理特征和实验研究的要求。
常见的实验动物包括小鼠、大鼠、兔子、猪等。
选择适当的实验动物对于实验结果的有效性至关重要。
在实验操作阶段，研究者需要根据实验设计的要求进行具体的操作。
这可能包括给动物注射药物、进行手术操作、观察动物行为等。
在操作过程中，研究者需要遵循实验室内的操作规范和伦理准则，确保实验的科学性和动物的安全。
数据的收集和分析是动物实验中的另一个重要环节。
研究者需要记录实验中所观察到的数据并进行统计学分析。
这能够帮助研究人员得出结论并验证实验假设的有效性。
数据的收集和分析过程需要严谨和科学，以确保实验结果的可靠性和可重复性。
最后，研究者需要将实验结果进行报告和分享。
这可能包括撰写科学论文、参加学术会议或者向有关部门提交报告。
通过这种方式，研究人员能够促进科学界对该领域的认识和理解，并为相关研究提供参考。
总之，动物实验是科学研究中重要的手段之一、在动物实验过程中，研究者需要进行实验策划、实验动物选择、实验操作、数据收集和分析以及实验结果报告等环节。
这些步骤都需要遵循实验伦理准则，以确保实验的科学性和动物的福利。
动物实验基本操作技术
动物实验基本操作技术动物实验作为一种科学研究手段，常用于医学、生物学等领域的实验研究。
为了确保实验的可靠性和安全性，研究人员需要正确掌握基本的动物实验操作技术。
下面将介绍一些常用的动物实验基本操作技术。
首先，动物实验前，需要对动物进行适当的饲养管理，确保其健康状态。
这包括提供适宜的饲料和饮水，保持合适的环境温度和湿度，以及定期清洁和消毒动物饲养环境。
此外，研究人员还需对动物进行身体检查，以排除可能影响实验结果的健康问题。
其次，对于需要进行手术的实验，研究人员需要具备相关的手术技术。
例如，动物麻醉技术是必不可少的，可以采用静脉注射麻药、局部麻醉或气管插管麻醉等方法。
在动物手术过程中，需要准确切割皮肤或组织，处理血管、神经和器官，以及进行缝合和止血等操作。
因此，研究人员需要熟练掌握相关手术技术，确保手术过程的顺利进行。
此外，动物实验中还常使用动物注射技术。
注射技术包括口服给药、皮下注射、肌肉注射和静脉注射等。
研究人员需要准确计量给药剂量，选择合适的注射部位和注射器具，并注意注射速度和注射途径的选择。
在实验中，研究人员还需要掌握注射后的观察和记录技巧，及时发现和处理可能的不良反应。
另外，动物实验还涉及到采集和处理生物样本的技术。
例如，研究人员需要采集血液、组织或其他体液样本，以进行生化分析、细胞培养或组织学检查等。
采样时需要注意卫生与无菌操作，避免交叉污染。
采样后，研究人员需要合理保存和处理样本，以保证实验结果的可靠性。
此外，动物实验中的数据记录与分析也是十分重要的。
研究人员需要仔细记录实验过程的各种参数，包括实验开始时间、操作步骤、药物剂量、实验结果等。
此外，研究人员还需要进行数据分析，以得出科学合理的结论。
在数据分析过程中，研究人员可以使用统计学方法，如平均值、标准差、方差分析等。
最后，动物实验的伦理与法规也是非常重要的。
研究人员需要遵守相关的伦理规范和动物保护法律法规，保证动物实验的道德性和合法性。
第八章 动物的学习行为
玩耍行为的意义
❖ 有助于提高动物的力量、耐力和肌肉协调 能力。
❖ 玩耍是各种社会技能的演练，以及各方面 社会关系的建立和维持。
❖ 可以学会特殊的技能或改善整体感知能力。
8. 印记学习
是指初生的幼小动物对首先看到的移 动体所形成的依附性和跟随反应。
动物生命早期的印记学习对于其后的 社会行为具有长期影响。
先天性行为类型：
1. 动物的攻击行为 2. 动物的防御行为 3. 动物的采食行为 4. 动物的繁殖行为 5. 动物的求偶行为
动物的攻击行为
动物的防御行为
动物的采食行为
动物的繁殖行为
动物的求偶行为
❖ 有些行为是天生的，不需要学习，但有些 行为必须经过学习获得。一般来说，动物 的一段活动时期，是天然反应与学习行为 结合的现象，将学习行为单独考虑，有助 于我们了解和控制行为的过程。
北极旅鼠
第一大奥秘是，繁殖能力惊人，为动物世界 之最。一对旅鼠，一年就有成千上万只后代。
第二大奥秘是，旅鼠的繁殖并非年年如此，一旦繁殖 过多，就有种种奇怪的自杀行为，或停止进食，或在 天敌面前主动挑衅，或改变毛色，吸引天敌。
毛色变成橘红色的旅鼠
第三大奥秘是，死亡大迁 移，数百万旅鼠汇成浩 浩荡荡的队伍，奔向大 海，葬身大海。
用竹竿取苹果和香蕉
动使用工具
❖ 动物使用工具是：为了获得眼前利益而使用 一个外界物体作为自己身体功能的延伸。
❖ 大多数动物对工具的使用都是极为特化的， 像很多本能一样是为了解决某些特定的问题， 如射水鱼。
❖ 有一些动物使用工具有明显的适应性，认为 是智力的一种表现，如啄木地雀。
使用工具行为的起源和改进
6. 模仿学习
动物实验研究方法
动物实验研究方法动物实验是科学研究领域中常用的一种方法，它可以帮助科学家们了解动物行为、生理功能、疾病机制等方面的知识。
然而，动物实验也存在一些争议，因为它涉及到动物的使用和伦理问题。
为了确保动物实验的合理性和可靠性，科学家们必须遵循一系列的研究方法和道德准则。
在进行动物实验之前，科学家需要先制定研究目标和问题。
他们需要明确自己想要研究的内容，例如动物的行为特征、生理功能、药物疗效等等。
然后，科学家需要选择适合的动物模型。
动物模型是指科学家在研究中选择的动物物种，它在一些方面具有与人类相似的特点。
例如，用小鼠作为研究模型可以帮助科学家了解很多与人类相关的生理机制。
接下来，科学家需要设计实验方案。
在设计实验方案时，科学家需要考虑多个因素。
首先，他们需要确定实验所需的动物数量。
科学家应该根据实验的目的和方法来评估所需的动物数量，并且尽量减少动物数量以避免不必要的伤害。
其次，科学家需要确定实验的时间安排。
他们应该考虑到动物的生理特点和实验的时间限制，以确保实验的准确性和可靠性。
在动物实验中，科学家还需要选择合适的实验材料和设备。
例如，他们需要选择适合大鼠或小鼠的笼子和喂食器，并提供适当的饮食和水源。
此外，科学家还需要选择合适的实验仪器和设备，并确保其正常运作。
实验过程中，科学家需要准确记录实验数据。
他们应该使用标准化的方法和工具，如观察记录、测量仪器等，来确保数据的准确性和可比性。
此外，科学家还需要保留样本和数据，以备将来的分析和验证。
在进行动物实验时，科学家还必须遵循伦理准则和法律法规。
例如，他们需要确保动物的福利和权益得到充分保护，防止任何不必要的伤害。
科学家应该尽量减少动物的痛苦和困扰，并尽可能提供适当的麻醉和镇痛药物。
此外，科学家的实验也要符合相关法律法规和伦理审查的要求。
总结起来，动物实验是一种常用的科研方法，它可以帮助科学家们了解动物行为、生理功能和疾病机制等方面的知识。
在进行动物实验之前，科学家需要明确研究目标和问题，并选择合适的动物模型。
实验动物学基础 第八章 实验动物福利
专题6：规划实验动物设施参观策略 1、为参观实验动物设施制定计划 2、制定实验动物房巡视计划的企业监管
专题7： 3R原则在国际范围内的推广 在国际范围内倡导3R原则 ——培养中英伙伴关系的一条切实之路
根据《实验动物饲养管理和使用手册》（Guide for the Care and Use of Laboratory Animals）的规定：每所研究机构的最高负责人必须成立一个 研究机构动物使用与管理委员会（IACUC，Institutional Animal Care and Use Committee），由其监督和评定研究机构有关动物的计划、操作 程序和设施条件，确保研究机构在执行各项实验动物项目时，以人道的方式 来管理及使用实验动物，保证其符合《手册》《联邦动物福利法规》和《公 共卫生服务政策》的各项规定，当然也是要符合地方动物福利保护规范的。
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第三节 动物实验的伦理审查
动物保护主义者们通过各种手段来表达他们保护动物的意愿，其中不乏 激进的行为。然而,对于国人来说，大多对动物权利、动物保护缺乏了解。 究其原因则很简单，人权为中国社会所普遍接受也不过是近几年的事情， 因此，在动物权利的问题上，更加需要了解和思考。
一、“3R”原则的伦理论证
二、我国“3R”研究的现状
政府开始关注“3R”研究。 1997年，由国家科技部、卫生部、农业部、国家医药管理局联合发布的《关于
“九五”期间实验动物发展的若干意见》中，第一次完整地把“3R”的基本含 义写入正式文件； 把“实验动物替代研究”列为“实验动物基础性研究”的重要内容，并予以重 点资助； 2001 年科学技术部发布的《科研条件建设“十五”发展纲要》中，明确指出要 “推动建立与国际接轨的动物福利保障制度”。
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第六节 动物血液的采集方法
1.大小鼠的血液采集方法
眶静脉丛（窦）采血（多次重复）：轻压颈部两 侧，眼球充分外突 眶动脉和眶静脉取血（大量采血）：尽量使动物 眼周围皮肤往眼后压，眼球突出充血，弯头镊迅
速夹去眼球
尾静脉采血：
剪尾或切开尾静脉：将尾巴在热水中浸泡数分钟
或用酒精/二甲苯反复擦试
Apply same procedure as collecting blood from ear vein for blood collection from ear artery
Restrain the anesthetized rabbit on the surgical table
Remove the hair around the neck area
Sexing mice - The distance between the anal and genital orifices is greater in the male (left) compared to the female (right).
Sexing Rat- the distance between the anal and genital orifices is greater in the male (left) compared to the female (right)
肌肉注射（i.m）：较少应用
腹腔注射（i.p） 静脉注射（i.v）：一般采用尾静脉注射。小鼠尾 部背腹各有一根动脉，两侧各有一根静脉。
2.大鼠的给药途径和方法
灌胃 : 左手按徒手固定方式固定大鼠 , 使大鼠伸开 两前肢,手掌握住大鼠背。方法与小鼠相同。
皮下注射：常选在左侧下腹部或后腿皮肤处，方 法同小鼠。
Push the mouse into the restrainer
Leave the tail of the mouse outside the cover of the restrainer
Let the rat relaxes on the top of the lid.
Stretch the body of the rat by pulling up it’s tail and then cover the rat with a towel by your left hand
左前肢记为1号，左侧腹部为2号，
左后肢3号，头顶部为4号，腰背部5
号，尾基部6号，右前肢7号，右侧
腹部8号，右后肢9号。编号超过10
时，可使用两种不同颜色的溶液，
把一种颜色作为个位数，另一种为
十位数。
穿耳孔法
用专用耳空器在动物耳朵不同部位打一小孔或
缺口表示一定号码的方法，原则是：左耳代表
十位，右耳代表个位。实验动物：兔、犬、猪
第八章
动物实验的基本操作技术
遵循动物保护、保证动物福利的原则 不造成动物的应激反应和伤害
不造成动物实验人员自身的伤害
确保实验结果的准确可靠
第一节 实验动物的抓取和固定
一、大、小鼠的抓取和固定 抓取方法 徒手固定 固定方法 固定板固定 固定架固定 简易固定
Placing a mouse on a cage lid and grasping the loose skin behind the ears by the thumb and forefinger
Fold the skirts of towel under the rat from all directions
Grasp up the left hindlimb of the rat to expose the abdomen
固 定
方
法
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二、豚鼠的抓取与固定
抓取方法
Pinch the skin up and insert the needle in for injection
Keep the needle tip in skin for a while after injection to prevent leakage of substance from the needle which due to imbalance pressure of emulsion inside the syringe.
标牌法
一般挂在动物的颈部、耳朵、脚上。实验动物：
犬、猴
烙印法 剪毛法
二、实验动物被毛的去除方法
1.剪毛法
2.拔毛法
3.剃毛法
4.脱毛法 常用的化学药品：硫化钡（BaS）、硫化钠 （NaS）、硫化钙（CaS）
四、动物的麻醉方法
常用的麻醉剂
1. 挥发性麻醉剂:乙醚、氯仿等 2. 非挥发性麻醉剂：苯巴比妥钠、戊巴比妥钠、 硫喷妥钠等巴比妥类的衍生物，盐酸氯胺酮、水 合氯醛等 3.中药麻醉剂：洋金花、东莨菪碱等
针刺尾静脉
其它：心脏采血、大血管采血等
采 血 方 法
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2.兔、豚鼠的血液采集方法
耳中央动脉采血：兔
耳缘静脉采血：兔 心脏采血：兔、豚鼠 颈动（静）脉采血： 背跖静脉采血：豚鼠
Fix the position of needle by your left thumb and withdraw blood from the ear vein
前应加热至动物体温水平。 ④注意保持动物的呼吸道的通畅.
五、动物的给药途径和方法 实验动物的给药方法主要分为注射法和投
入法两种，注射法又分为：皮下注射、肌肉注
射、腹腔注射、脑膜下注射、脑内注射、胸腔
内注射、腰椎内注射、静脉注射、关节腔注射
和心内注射等方法，投入法可分为：鼻腔内投
入、胃腔内投入、肠管内投入、气管内投入以
固定方法
徒手固定
固定板固定
抓豚鼠时，一般不要抓腰腹部 位，否则易造成肝破裂而引起死亡
三、家兔的抓取与固定
抓取方法
徒手固定
固定方法
盒式固定
台式固定
四、犬的抓取与固定
抓取方法 固定方法 慢性试验中犬的固定方法 急性试验中犬的固定方法 头部的固定 四肢固定
第二节 性别鉴定
一般情况下，哺乳类动物性别依据动物 的肛门与外生殖器之间的距离加以区分。雄 性要比雌性的距离更长。
Fix the position of the catheter tip by two silk suture knots
Release the bulldog clamp and collect blood from the artery though the catheter into the centrifuge tube
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注 射 给 药
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3.兔的给药途径和方法
灌胃：确保灌胃管插入胃内 药液推完后将残留在灌胃管内 的药物用水冲入胃内，确保给 药剂量的准确
皮内注射：背部脊柱两侧的皮肤
皮下注射：背部和腿部皮肤 肌肉注射 腹腔注射 静脉注射：耳缘静脉
Disinfect of skin on the top of thigh muscle
Ear vein before administering of tranquilizer
Ear vein after administering of tranquilizer
Insert needle into the ear vein with needle tip surface face up
及经口腔投入。
1.小鼠的给药途径和方法
灌胃（i.g）:动物要固定好；头颈部保持平展； 要沿着口角进针，再顺着食管方向插入胃内；决 不可进针不顺就硬向里插。
皮下注射（s.c）:常选用颈背部皮肤。
皮内注射（i.d）:观察皮肤血管的通透性变化及 观察皮内反应，多用于接种、致敏实验等。雄性 较雌性皮肤紧密，注射难度大。
Make a 5 cm opening on the middle line of the neck
Search the carotid artery with a tissue forceps and a homeostatic forceps.
Isolate the carotid artery from the vagus nerve and other connective tissue
皮内注射：常选用背部脊柱两侧的皮肤，方法同 小鼠。
肌肉注射：一般选择股二头肌注射，但应避免伤
及坐骨神经，否则会导致后肢瘫痪
腹腔注射：用左手的大拇指、食指和中指从大鼠
的前肢和头部后面抓住大鼠，同时用身体抵住大
鼠的两后肢使之固定，使腹部向上并伸展，注射
方法与小鼠相同。
静脉注射：尾静脉
经 口 给 药
Tie up the distal end of the carotid artery by silk suture
Clip the proximal end of the carotid artery with a bulldog clamp
Insert a 16 G intravenous catheter into the artery
Press a cotton ball on the top of the injection site before pull out the needle.
Apply clip on the top of the cotton ball for 2-3 minutes to stop further bleeding