细胞工程总结
细胞工程的应用知识点总结

细胞工程的应用知识点总结一、医学领域1. 细胞治疗细胞工程在医学领域最为重要的应用之一是细胞治疗(Cell Therapy)。
通过细胞工程技术,科学家可以利用干细胞或其他类型的细胞来修复受损的组织或器官。
这种治疗方法在一些疾病的治疗中已经取得了一定的成功,比如心脏病、糖尿病、关节炎等。
而且,在未来,细胞治疗还有望成为一种治疗癌症等严重疾病的有效手段。
2. 人工器官细胞工程技术还可以用于生产人工器官,比如人工心脏、人工肾脏等。
这些人工器官的特点是可以与人体的细胞和组织兼容,因此可以在一定程度上代替受损的器官。
目前,人工器官技术还处于研发阶段,但有望在未来成为一种解决器官移植短缺问题的有效手段。
3. 疾病诊断细胞工程技术还可以用于疾病的诊断。
通过对细胞的分析和改造,科学家可以开发出一些新的生物标志物或生物传感器,以便用于疾病的早期诊断。
此外,利用细胞工程技术还可以研发出一些新的治疗方法,比如靶向治疗、基因治疗等。
二、生物技术领域1. 新药研发细胞工程技术在新药研发中有着不可替代的作用。
利用细胞工程技术,科学家可以在实验室中构建出一些疾病模型细胞,从而可以更好地研究疾病的发病机制和药物的作用机制。
此外,细胞工程技术还可以用于生产重组蛋白和抗体等生物药物。
2. 生物材料生产细胞工程技术还可以用于生产一些生物材料,比如纤维素、色素、维生素等。
这些生物材料的特点是能够在一定程度上取代化学合成的材料,因此有望成为未来替代石油化工产品的重要来源。
3. 基因编辑近年来,基因编辑技术的突破使得细胞工程领域发生了天翻地覆的变化。
利用基因编辑技术,科学家可以通过改变细胞的基因组,实现对细胞性状的精确调控。
这种技术在植物基因改良、动物基因改造以及人类基因疾病的治疗等方面都有着广泛的应用前景。
三、食品生产领域1. 细胞培养肉细胞工程技术可以用于生产细胞培养肉(Cultured Meat)。
利用细胞工程技术,科学家可以从动物干细胞中培养出肉类细胞,从而实现无需屠宰动物就可以生产出肉制品的目的。
细胞工程知识点总结

细胞工程知识点总结细胞工程,是一门涉及生命科学和工程学的交叉学科,它关注的是利用细胞和分子技术来实现生物医学和生物工程的应用。
细胞工程的发展不仅对医学诊疗和疾病治疗领域有着重要的意义,也对生物工程的发展起到了推动作用。
在这篇文章中,我们将对细胞工程的一些重要知识点进行总结。
1. 细胞培养技术细胞培养技术是细胞工程的基础,它是指将细胞从体内或体外分离出来,在适当的环境条件下进行培养、增殖或分化。
细胞培养技术涉及到细胞培养基的配制、细胞传代方法、培养条件的调控等。
对于细胞工程的实验研究以及细胞药物的生产和培养,细胞培养技术都起到了至关重要的作用。
2. 细胞凋亡与细胞增殖细胞凋亡和细胞增殖是细胞工程中两个重要的生物学过程。
细胞凋亡是指受到内部或外部刺激后,细胞通过一系列的生化反应主动死亡。
细胞凋亡在细胞工程中有着广泛的应用,例如用于肿瘤治疗和组织工程的构建。
而细胞增殖则是指细胞的数量增加,通过细胞的分裂和增生来实现。
细胞增殖在组织修复和再生医学方面具有重要的意义。
3. 基因工程技术基因工程技术是一种将外源基因导入目标细胞中的方法,以实现特定功能或表达特定蛋白质的技术。
基因工程技术在细胞工程中被广泛应用,例如用于基因治疗和基因表达的研究。
基因工程技术的主要方法有转染法、电穿孔法、病毒介导转导等。
4. 细胞信号传导与细胞外基质细胞信号传导是细胞与细胞之间或细胞与环境之间进行信息传递的过程。
细胞信号传导是细胞工程领域研究的重点之一,它对细胞内信号传递路径的研究以及细胞外基质的调控具有重要意义。
细胞外基质是细胞外环境中的一种复杂的生物大分子结构,它不仅对身体组织的结构和功能有着重要的影响,同时也对细胞外基质中的信号传导起到了调控作用。
5. 组织工程与再生医学组织工程是一门将细胞、材料科学和工程学相结合的学科,它旨在通过构建人工组织和器官来替代或修复受损的组织和器官。
组织工程在细胞工程领域具有重要的地位,它涉及到细胞培养、支架材料的设计与构建、组织的生物学特性等。
生物专业细胞工程重点总结

细胞学说:一切细胞从单细胞到高等动植物都是由细胞组成的,细胞是生物体结构和功能组成单位。
细胞周期:从一次分裂结束到下一次分裂结束所经历的过程Go期细胞:暂时脱离细胞周期,不进行增殖,在适当刺激下可以重新进入细胞周期终端分化细胞:不可逆的脱离细胞周期,丧失分裂能力,但保持生理机械活动的细胞连续分裂细胞:在细胞周期中连续运转的细胞细胞分化:细胞在形态、结构和功能上发生差异的过程。
持家基因:微生物生存所必须的基因组织特异性基因:组织中专一性表达的基因脱分化:细胞脱离原状态,恢复到分生状态再分化:脱分化细胞在特定条件下再次开始新的分化发育过程,最终形成组织器官个体胚状体:体细胞胚离体条件下,没有经过受精过程,但经过胚胎发育过程所形成的胚的离似物植物体细胞杂交:又称植物原生质体杂交,是指将不同来源的原生质体相融合并使之分化再生形成新的物种的技术贴壁细胞:是机体细胞在体内生存和生长发育的基本方式,有机体的多数细胞在体外培养时必须贴附在培养瓶等支持物上才能生长悬浮性细胞:血液中的淋巴细胞、白细胞及某些肿瘤细胞等在体外培养时不需要贴附在支持物上,而需要悬浮状态原代培养:从供体获得细胞后的首次培养传代培养:由原培养瓶中分离稀释后传到新的培养瓶的过程接触抑制:在体外培养的贴壁细胞中,当两个细胞由于移动而相互靠近发生接触时由细胞接触而抑制细胞运动的现象密度抑制:细胞接触汇合后,虽发生接触抑制,但只要营养充足,仍然能够进行增殖分裂,但当细胞密度进一步增大,培养液中营养成分减少代谢产物增多时,则发生密度抑制导致细胞分裂停止细胞株:经单细胞增殖而成的,具有特殊性质和标志物的细胞群细胞系:原代培养物开始第一次传代培养后的细胞群体干细胞:一类能自我更新和有分化潜能的细胞多克隆抗体:由同一抗原的多种抗原决定簇刺激机体产生多种混杂在一起的单克隆抗体单克隆抗体:由一种抗原决定簇刺激机体,由一个B淋巴细胞接受该刺激产生的抗体胞质体:去除了细胞核后的由膜包裹的无核细胞微细胞:由一条或几条染色体,外裹一薄层细胞质,由完整细胞包被的微小细胞1、粗面内质网:结合核糖体光面内质网:合成脂类3、细胞分化的基本特征:①分化过程不可逆②分化水平决定其生理状态③分化水平越高,其分化潜力越窄4、细胞分化的原因:①基因的选择性表达②细胞质的决定作用③细胞间的相互作用④环境对细胞分化的影响5、细胞全能性:①每个植物细胞都有其母体的全部遗传特性②每个细胞都可在特定条件下发育成与母体一样的植株6、多倍体育种:优点:根茎叶花果实较大,抗逆性强,产量高,代谢旺盛缺点:高度不育→减数分裂紊乱7、克隆方式:①胚胎细胞核移植②胚胎干细胞移植③胎儿成纤维细胞核移植④体细胞核移植8植物组织快速无性繁殖:①优势:快、无性②定义:利用离体培养技术,将来自优良植株的茎尖,叶芽、叶片、鳞片等器官组织和细胞进行离体培养在短期内获得大量遗传性状一致的植株③植物组织快速无性繁殖的途径:a、芽途径:顶芽或腋芽→完整植株b、器官发生途径:直接:外植体→不定芽或根→完整植株间接:外植体→愈伤组织→不定芽或根→完整植株c、胚状体途径:经过分化阶段区别:①区别于自然情况下所形成的无融合生殖胚,利于胚囊中的反足细胞,助细胞,珠心细胞形成的不定胚②区别于没有经过离体培养的合子胚,没有经过受精过程③一定经过胚胎发育过程,区别于器官发生途径直接途径:外植体→胚状体→完整植株间接途径:外植体→愈伤组织→胚状体→完整植株d、原球茎途径:外植体→兰球径→完整植株④快速无性繁殖的优势:a、保持杂合植株的优良特性b、可挽救濒临植物c、加速濒危植物的繁衍d、便于优秀种质材料的交换和贮运e、和植物脱病毒技术结合起来,可为生产上提供健康无毒植株9、植物脱病毒技术:脱毒方式原则:既能杀毒,又不损伤植物材料生物法:a、茎尖分生组织培养法①茎尖无维管素,胞间连丝不发达②茎尖组织进行细胞分裂,抑制病毒复制③植物激素的存在,抑制病毒复制b、珠心胚法:珠心胚不属于体细胞胚,不在离体条件下10、植物细胞的大规模培养:①培养方式:1悬浮细胞:成批培养、连续培养、半连续培养2固体培养:易将细胞核培养基分离(包埋法、吸附法)②意义:a、次生代谢产物的生产:药物、香料、色素中的酚类、生物碱、甾类、例如人参皂苷、长春花碱、紫草宁b、转基因植物细胞大规模培养以得药用蛋白质表皮生长因子、生长激素、干扰素11、原生质体的融合:①化学法:a、盐融合法b高钙高PH值法c、PEG法②物理法:电融合法12、多倍体育种方法:①生物法:a、远缘杂交b、体细胞杂交②物理法:a、温度休克法:略高于冷致死温度或略低于热致死温度处理材料,诱导产生多倍体的方法b、水静压法:较高水静压处理材料,抑制第一次或第二次卵裂中第二极体的放出c、化学法:秋水仙素抑制纺锤体的形成13、同源多倍体:无籽西瓜二倍体西瓜→(秋水仙素)四倍体*二倍体→三倍体14、为什么单倍体育种(单倍体优势):单倍体育种优点:①单倍体植物只有一套染色体,染色体上的每个基因都能显示相应的形状,是进行遗传分析的理想材料②单倍体植物细胞只有一套染色体,如将其染色体加倍即可获得纯合二倍体,可代替杂交育种过程中多次自交产生纯合品系过程,缩短育种年限缺点:①较二倍体植株各方面小②高度不育15、孤雄生殖:由精核在卵细胞内单独发育成单倍体①方式:a、花粉培养b、花药培养②过程:外植体的选择和消毒→组织培养单倍体植株→植株的鉴定→人工染色体加倍→组织培养→鉴定③花粉培养:优点:所得植株为单倍体植株缺点:组织培养难度大④花药培养:优点组织培养难度小缺点:花药壁、花丝干扰单倍体植株形成16、孤雌生殖:雌雄配子未经融合,由雌配子单独发育成种子的无性融合生殖①方式:a、物理法:高温、低温、射线b、化学法:马来酰肼苯乙酸二甲基亚砜c、生物法:延迟受粉异源花粉授粉②过程:外植体的选择消毒→组织培养单倍体植株→植物的鉴定→人工染色体加倍→组织培养→鉴定③单倍体鉴定:标记性状鉴定法标记在雄配子上没有标记17、外源基因导入受体方式:载体①农杆菌转化法:根瘤农杆菌的细胞中含有Ti质粒,Ti质粒上有一段DNA。
细胞工程精华总结

细胞工程精华总结(共22页)--本页仅作为文档封面,使用时请直接删除即可----内页可以根据需求调整合适字体及大小--细胞全能性:在多细胞生物中每个体细胞的细胞核具有个体发育的全部基因,只要条件许可,都可发育成完整的个体。
胚胎干细胞 (Embryonic stem cell)是指受精卵分裂发育成囊胚时,内层细胞团的细胞经分裂培养,即得到胚胎干细胞。
胚胎干细胞具有全能性,可以自我复制(或更新)并具有分化为体内所有组织的能力。
它是一种高度未分化细胞,具有发育的全能性,能分化出成体动物的所有组织和器官,括生殖细胞。
细胞工程 (cell engineering):是以细胞生物学和分子生物学为基础理论,采用原生质体、细胞或组织培养等试验方法或技术,在细胞水平上研究改造生物遗传特性,以获得具有新的性状的细胞系或生物体以及生物的次生代谢产物,并发展有关理论和技术方法的学科。
外植体(explant):把由活植物体上切取下来以进行培养的那部分组织或器官。
细胞系 (cell line): 原代培养物经首次传代成功后即成细胞系。
如果细胞系不能继续传代或传代次数有限,称为有限细胞系,它由原代培养中的许多细胞系列组成;如细胞系可连续传代,则称为连续细胞系,即已建成的细胞系。
细胞株 (cell strain):通过筛选或克隆化,且有特异标记的细胞,这些特性在以后的培养中必须持续存在。
这些特性包括具有一定的标记染色体,对某种病毒的敏感性或抗性及具有特殊的抗原性等。
细胞融合(cell fusion):又称体细胞杂交(somatic hybridiazation),是指两个或更多个相同或不同细胞通过膜融合形成单个细胞的过程。
转基因动物(transgenetic animal):指借助基因工程技术将外源基因导入受体动物染色体内,外源基因与动物基因整合后随细胞的分裂而扩增,在体内表达并能稳定地遗传给后代的动物。
单克隆抗体:只针对某一抗原决定簇的抗体分子称为单克隆抗体。
细胞工程的生物知识点总结

细胞工程的生物知识点总结1. 细胞结构与功能细胞是生命的基本单位,由细胞膜、质壁、细胞核、细胞质和细胞器等部分组成。
不同类型的细胞具有不同的结构和功能,请研究人员通过细胞工程技术对细胞的结构和功能进行深入研究,包括细胞的形态特征、生物化学特性、信号传导机制等。
2. 细胞培养技术细胞培养技术是细胞工程中的重要内容,主要包括细胞的分离、培养、传代、冻存和复苏等技术。
通过细胞培养技术,研究人员可以获取大量的同种或异种细胞用于实验研究和临床应用。
3. 细胞信号传导细胞信号传导是细胞与环境之间相互作用的过程,包括细胞对外界刺激的感知、传导和反应等。
研究人员通过细胞工程技术可以揭示细胞信号传导的机制,以及调控信号传导过程的方法和技术。
4. 细胞分化和再生细胞分化是指未分化的细胞在外部刺激下发生形态和功能上的改变,进而组成不同类型的成熟细胞。
细胞再生是指受损细胞的修复和更新过程,是细胞工程领域的研究热点之一。
5. 干细胞研究干细胞是一类具有自我更新和多向分化潜能的细胞,对于细胞工程和再生医学有着重要的意义。
研究人员可以通过细胞工程技术对干细胞的生物学特性和应用潜力进行深入研究。
6. 细胞治疗和再生医学细胞治疗是指利用细胞工程技术治疗疾病的方法,包括干细胞移植、细胞基因治疗、组织工程等。
再生医学是利用细胞工程技术再生、修复和替代受损或疾病组织器官的医学领域。
7. 细胞生物传感器细胞生物传感器是一类利用细胞作为传感元件来检测生物学和化学变化的传感器,具有灵敏度高、选择性好、动态范围广等特点,对于环境监测和疾病诊断有着重要的意义。
8. 细胞克隆技术细胞克隆是人工复制和培育大量相同细胞的技术,包括植物细胞克隆、动物细胞克隆和人类细胞克隆等。
研究人员可以通过细胞工程技术研究细胞克隆的机制和方法,以及开发新的克隆技术。
总之,细胞工程是一门富有挑战和前景的学科,涉及多个学科和领域,将为人类健康、环境保护和生物制造等领域带来新的科技突破和应用。
细胞工程知识点总结

细胞工程知识点总结细胞工程的知识点主要涵盖细胞生物学、生物医学工程、材料科学、化学等多个领域的内容,下面将对一些重要的知识点进行总结和介绍。
一、细胞生物学1. 细胞结构和功能:细胞是生物体的基本单位,包括细胞质、细胞核、细胞膜等结构组成,具有营养吸收、代谢、生长繁殖、分化等功能。
2. 细胞信号传导:细胞通过受体、信号分子等进行信号传导,调控生物功能和代谢活动。
3. 细胞分化:在不同环境条件下,细胞可以分化成不同类型的细胞,如干细胞可以分化成心肌细胞、神经细胞等。
4. 细胞凋亡和增殖:细胞在受到损伤或者环境刺激时,会发生凋亡或者增殖,维持细胞组织的稳态。
二、生物医学工程1. 细胞培养技术:包括细胞分离、培养基配制、细胞传代、细胞冻存等技术,用于大规模的生物制品的生产。
2. 细胞毒性和安全性评价:评估材料或者药物对细胞的毒性和安全性,保证产品的安全性和有效性。
3. 细胞治疗和干细胞技术:通过干细胞移植、基因修复等技术,用于治疗各种疾病和损伤。
4. 人工器官和组织工程:将细胞和生物材料结合,构建人工器官和组织,用于替代受损的组织和器官。
三、材料科学1. 生物材料的设计和制备:设计和制备适合细胞生长的生物材料,如生物降解材料、生物亲和材料等。
2. 生物材料的表征和评价:通过表面形貌、力学性能、生物相容性等评价生物材料的性能。
3. 细胞-材料相互作用:研究细胞和材料之间的相互作用机制,改善生物材料的生物相容性和使用性能。
四、化学1. 细胞药物递送系统:设计纳米级的载体或者纳米颗粒,用于细胞内的靶向递送和释放药物。
2. 细胞标记和成像技术:利用高灵敏度的成像设备和生物标记物,在活细胞和组织中进行细胞成像和追踪。
3. 细胞信号调控:通过合成化学的方法来调控和干预细胞信号传导系统,研究细胞功能和代谢途径。
细胞工程的发展趋势主要包括以下几个方向:1. “定制化医疗”:根据个体的基因组信息和生理状态,设计和生产个性化的治疗产品和医疗器械,提高治疗效果。
高三生物细胞工程知识点总结笔记

高三生物细胞工程知识点总结笔记细胞工程作为生物学领域的一个新兴学科,研究的是如何利用生物体内的微生物、细胞等进行工程化的技术应用。
本文将从细胞工程的基本概念入手,介绍一些常见的细胞工程技术和应用,以及细胞工程带来的发展前景。
一、细胞工程的基本概念细胞工程是指将细胞作为工程器具,利用现代生物技术改造和利用细胞的过程。
它包括三个方面的内容:细胞培养技术、细胞操作技术和细胞提取技术。
细胞工程的基本原理是通过对细胞的处理和加工,改变其性能和功能,使其在生产、医学和环境等方面发挥重要作用。
二、常见的细胞工程技术1. 基因工程技术基因工程技术是指对细胞的遗传物质进行改造的技术。
常见的基因工程技术有基因克隆、基因转导、基因敲除等。
通过这些技术,可以改变细胞内的基因组成,进而改变细胞的性状和功能。
2. 细胞培养技术细胞培养技术是指利用人工培养基和特定条件,使细胞在体外进行繁殖和增殖的技术。
细胞培养技术主要包括细胞的分离、培养和保存等步骤。
通过细胞培养技术,可以大量生产细胞用于药物研究或生物制品的生产。
3. 细胞信号转导技术细胞信号转导技术是指利用细胞内信号传递分子进行细胞功能调控的技术。
常见的细胞信号转导技术有蛋白激酶酶活性检测、细胞凋亡检测和细胞周期分析等。
通过这些技术,可以研究细胞内的信号传递机制,进一步了解细胞的生命周期和功能。
三、细胞工程的应用1. 医学领域细胞工程在医学领域的应用非常广泛。
通过细胞工程技术,可以培育人工皮肤、修复组织和器官等。
此外,细胞工程还能用于肿瘤的诊断和治疗,例如通过基因工程技术制备靶向抗肿瘤药物。
2. 环境领域细胞工程在环境领域的应用主要包括环境污染物的检测和处理。
例如,利用细胞工程技术可以研究水体中的微生物污染和细菌降解污染物的能力,进而制定相应的环境保护政策和措施。
3. 生物制药领域细胞工程在生物制药领域的应用非常重要。
通过基因工程技术,可以将目标基因导入细胞中,使其产生特定的蛋白质,进而用于药物的生产。
细胞工程知识点总结

《细胞工程》知识点总结一、细胞工程(Cell Engineering):在体外对生物的细胞进行生长与分化的调控、遗传重组与改良,使其生产出人类所需要的产品。
包括:细胞培养、细胞融合、细胞器移植、核质移植、染色体移植、转基因等产品:生物的组织、器官、个体;抗体、多肽药物、蛋白质、酶;天然药物、色素、香精;等二、生物工程包括:发酵工程、酶工程、细胞工程、基因工程、蛋白质工程.三、1996年Dolly羊的克隆是通过核移植技术,最后在体内生长、分化、发育而成的。
四、植物组织培养:在人工培养基上无菌培养整株植物或植物的器官、组织、细胞或原生质体。
又称为无菌培养(aseptic culture)、离体培养(in vitro culture)。
五、植物组织培养的类型:1、植株培养(Plant Culture):在容器(玻璃瓶、透明塑料瓶等)中无菌培养完整的植株。
植株来源:由种子无菌萌发而来;通过植物器官、组织、细胞再生而来。
在快速繁殖中,后期的成苗和壮苗阶段属于植株培养。
(一般时间较短)2、胚培养(Embryo Culture):无菌培养植物的成熟胚或未成熟胚,使其形成正常的植株.目的:错误!促进胚的提早萌发,缩短育苗时间;错误!克服远源杂种胚的夭折,以获得新的育种材料;错误!在科学研究中,用胚培养所得到的幼苗作为其它试验的材料。
3、器官培养(Organ Culture):无菌培养植物的根、茎、叶、芽、花、果等器官,使其增殖或形成其它的组织或器官等。
4、组织培养(Tissue Culture):指无菌培养植物各种组织(如分生组织、形成层、木质部、韧皮部、皮层、薄壁组织、胚乳等),或由外植体分化形成的愈伤组织(callus),使其增殖或者分化。
注:Callus(愈伤组织):具有旺盛分裂能力,但没有组织和器官分化的细胞群。
5、花药与花粉培养:无菌培养植物的花药(带花粉)或花粉,形成单倍体植株。
补充:有效的育种辅助手段:单倍体植株获得以后,通过染色体加倍,即得到可以稳定遗传的纯和二倍体,缩短植物育种年限。
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细胞工程总结题名词解释,并简要说明它们间关系:基因组学(Genomics):是指在研究表型时不是针对单个基因开展工作而是对与其可能存在关系的多个基因组成的群体进行研究的学科。
基因工程(Genetic engineering):是指人为有目的地改变基因以生产产品并服务于人类的技术方法和工程。
关系:基因技术理论与实践运用。
基因组学(Genomics):是指在研究表型时不是针对单个基因开展工作而是对与其可能存在关系的多个基因组成的群体进行研究的学科。
基因工程(Genetic engineering):是指人为有目的地改变基因以生产产品并服务于人类的技术方法和工程。
关系:基因技术理论与实践运用。
蛋白质组学(Proteomics):是指以基因组所表达的全部蛋白质为研究对象的科学。
蛋白质工程(Protein engineering):是指依据基因原理设计或改变已有蛋白质结构来构建新型蛋白质分子的过程。
关系:蛋白质技术理论与实践运用。
遗传图:是指通过计算连锁遗传标志间的重组率确定它们距离的作图法(单位厘摩)。
物理图:是指确定各遗传标志间实际物理距离的作图法(单位碱基对或Mb)。
关系:物理图是连锁图的前提和基础,人类基因组转录图(或基因图)是连锁图雏形。
TCR:是指T细胞表面抗原受体,具有高度特异性和多样性。
MHC:是指人类白细胞抗原HLA体系,即主要组织相容性复合体,具有多态性。
关系:均为高度复杂的免疫分子体系。
悬浮培养(suspension culture):是指细胞自由地悬浮于培养液内生长增殖的一种培养方法;适用于悬浮培养的生产细胞有杂交瘤与骨髓瘤细胞(SP2/0,NSO),不适用于正常细胞培养贴壁培养(anchorage-dependent culture):是指让细胞贴附在某种基质上进行增殖的培养方法。
主要适用于贴壁细胞或兼性贴壁细胞,如CHO、BHK、Vero 等,流加工艺:是指批式或半连续式增加种子细胞和培养液或排放收集产物使生物反应器内保持一定浓度比例的种子细胞、培养液和产物的细胞规模化培养工艺,类似恒化培养。
灌流工艺:是指连续式增加种子细胞和培养液或排放收集产物使生物反应器内保持相对恒定种子细胞、培养液和产物浓度比例的细胞规模化培养工艺,类似恒浊培养。
关系:是动物细胞规模化培养的两种常用工艺。
基因治疗(gene therapy):是指把外界的正常基因或治疗基因通过载体转入特定靶细胞,以最终预防或改变特殊疾病状态的治疗方法。
细胞治疗(cell therapy):是指把改造细胞(造血干细胞、成纤维细胞、骨髓肌细胞、肝细胞、神经细胞)转入靶组织,以最终预防或改变特殊疾病状态的治疗方法。
关系:基因的转移可通过物理或化学的方法,也可通过各种病毒或非病毒载体的介导,还可通过改造细胞进行细胞治疗。
平行传播:是指病原体在物种间进行的传播方式或发生途径。
垂直传播:是指病原体在亲子间进行的传播方式或发生途径。
关系:两者均为较特别的传播方式或发生途径。
杂交细胞筛选:是指在融合处理后的细胞群体中筛选数量少,生长缓慢,往往受到优势生长的亲本细胞抑制的杂交细胞的过程,常用HAT选择培养液选择出DNA复制应急途径能力强的杂交细胞。
HAT选择性培养液:是指利用满足细胞DNA应急合成途径的由次黄嘌呤(H)、氨基嘌呤(A)和胸腺嘧啶核苷(T)为主要配制成分的选择性培养液。
关系:单克隆抗体生产中常用HAT选择性培养液来进行杂交细胞筛选。
抗体筛选:是指利用抗体专一性特点,从由脾细胞和癌细胞融合后产生的杂种细胞集落中筛选出只有1-2个能分泌专一性目标抗体的细胞克隆过程,常用酶联免疫吸附法(间接ELISA法)进行筛选。
ELlSA(enzyme-linked immunoadsordent assay,ELISA)法:是一种酶联免疫技术。
用于检测包被于固相板孔中的待测抗原(或抗体)。
即用酶标记抗体,并将已知的抗原或抗体吸附在固相载体表面,使抗原抗体反应在固相载体表面进行,用洗涤法将液相中的游离成分洗除,最后通过酶作用于底物后显色来判断结果。
关系:单克隆抗体生产中常用ELlSA法来进行抗体筛选和效价检测。
何谓细胞拆合技术?答:是指从活细胞中分离出细胞器及其细胞组分,在体外一定条件下将不同细胞来源的细胞器及其组分进行重组形成有生物活性的细胞或细胞器的一种细胞工程技术。
胞质体:是指通过细胞折合形成的去核细胞,有胞质遗传标志。
微核:是指通过细胞折合形成的去细胞质细胞,有核遗传标志。
微核体:是指通过细胞折合形成的包含部分核物质的微形细胞。
关系:常用来重组构建重组细胞。
嵌合体:是指由至少来源于两种不同受精卵的细胞组成的生物体个体。
胚胎小体:是指体外培养干细胞时,撤除抑制细胞分化因子,ES能自发形成多细胞结构。
关系:为检测ES分化潜能的两种直观发育形体。
饲养层培养:SIM小鼠成纤细胞耐硫代鸟嘌呤、乌苯苷亚系STO或小鼠胎儿成纤维细胞(MEF)经丝裂霉素或放射线终止分裂制成饲养层细胞能不断合成和分泌抑制ES细胞分化和促进细胞增殖因子;无饲养层培养:在DMEM等基础培养液中添加重组的白细胞抑制因子(LIF)或利用各种抑制分化因子,制备条件培养基培养ES细胞,维持ES细胞的增殖和未分化状态。
关系:ES培养的两种常用培养方式。
PS:BBS液:是指在离体细胞培养时维持细胞渗透压调节细胞酸碱平衡供应细胞各种成分的平衡盐溶液。
PBS液:是指由NaCl、KCl、Na2HPO4、KH2PO4和双蒸馏水配制的后经高压灭菌制成的一种可用于离体细胞培养的平衡盐溶液。
关系:PBS是一种BBS。
Earle液:是指一种缓冲能力强,5%CO2平衡,由KCl、NaCl、MgSO4、Na2HPO4、葡萄糖、双蒸水和酚红配制的可用于离体细胞培养的平衡盐溶液。
Hanks液:是指一种由KCl、NaCl、MgSO4、CaCl2、三蒸馏水和酚红配制,后经高压灭菌制成的三蒸馏水配制的可用于离体细胞培养的平衡盐溶液。
关系:两者都是平衡盐溶液。
HapMap计划:是指构建不同人群的高密度SNP图谱,确立SNP在人群中的常见分布和传递模式,从而揭示人类作为群体的遗传机制,为发现复杂性疾病的相关易感基因提供基础数据、研究策略和先进技术。
HIV:是指人类免疫缺陷病毒。
HTLV:是指人类嗜T细胞病毒。
关系:早期把HTLV作为HIV。
CHO:是指中国仓鼠卵巢细胞系,可生产tPA、EPO、单抗和VIII因子等重组DNA蛋白。
HNK:是指仓鼠胚肾细胞系,可生产VIII因子和兽病毒疫苗。
关系:均为动物培养工程常用的生产用细胞系。
tPA:是指组织型纤溶酶原活化剂,它是由527个氨基酸组成的单链糖蛋白,用于临床溶栓治疗。
EPO:是指促红细胞生成素,用于贫血病的临床治疗。
关系:为两种重要的动物细胞培养工程制品。
PcAb(PcAb,polyclonal antibody):是指病原微生物和天然抗原,往往含有多种抗原决定簇,刺激免疫系统后,可形成针对不同抗原决定簇混合抗体。
MAb:系指由一个B细胞克隆产生的,只识别某一特定抗原决定簇的均质抗体。
关系:均由B细胞(或浆细胞)产生。
简答题:1、癌发生的主要分子机制?试从细胞分子生物学角度比较白血病与艾滋病?答:(1)大多数学者认为,肿瘤有着多病因(物理、化学或生物因素)和多步骤发生机制;先后提出了肿瘤单克隆发生学说和肿瘤干细胞发生学说。
检验点CDK(主体)细胞增殖(细胞周期依赖性激酶)+癌基因(辅助)细胞数量正-负调控手段-抑癌基因(辅助)+细胞凋亡caspase家族(主体)(半胱氨酸酶家族)(2)白血病分子发生机制:① B细胞白血病:MYC基因的活化EB病毒感染;② T细胞白血病:T细胞特异性受体基因增强子附近(7q34)染色体断裂染色体重排基因重排受累转录因子被过度表达细胞恶性转化;③急性粒细胞白血病(AML):相关基因基因重排累及CBFα- CBFβ复合物(核心结合因子,正常造血干细胞发育必需);④慢性和急性白血病(CML):ABL融合基因酪氨酸激酶引起癌基因活化;⑤慢性粒单核细胞白血病(CMML):TEL-PDGFRβ融合基因。
(3)艾滋病分子发生机制:HIV gp120与T4细胞和巨噬细胞表面CD4结合入侵潜伏或繁殖装配使宿主细胞破裂和死亡。
(4)总之,从细胞角度来看,细胞数量分子调控手段的失衡尤其是辅助手段癌基因与抑癌基因互相制约的失衡将导致细胞重大疾病的发生;癌基因的强化表达或抑制弱化均可能导致肿瘤或癌的发生,如T细胞白血病患者就是因为染色体断裂导致基因重排致使转录因子癌基因附近的增强子强化而过度表达造成的;相反,抑癌基因的强化表达或抑制弱化会导致细胞急剧下降,如爱滋病患者的T4细胞感染HIV后,细胞凋亡调控机制易感,凋亡发生失常,导致免疫系统崩溃。
2、简述生产用动物细胞系的来源及特点?答:3、概述肝癌单抗片段HAB18F(ab’)2无血清流加培养工艺技术流程?答:4、从多个方面比较微生物细胞、植物细胞和动物细胞生长特点和培养方式?答:微生物细胞植物细胞动物细胞生存、生长和生产特点细胞壁的有无有无有细胞大小较小(1μm以下)较大(10-100μm)中等(10-50μm)悬浮或贴壁特性悬浮悬浮悬浮或贴壁细胞的粘度大小小中大短较短长生长速度与周期长短培养液专一性程度不强中等较强氧的需求大小小中大对光的需求小大小对生产设备的要求不苛刻苛刻特别苛刻控制参数无菌、低氧无菌、光照无毒、无菌、O2/CO2/N2生产工艺恒化或恒浊培养流加工艺流加或灌流工艺5、简述肝癌疫苗发展历程?答:肝癌疫苗发展历程如下:衣壳——衣壳表面抗原(HBsAg),核心抗原——核心抗原(HBcAg)、e抗原(HBeAg)和核酸第一代疫苗,血中提取,弱反应,10%不产生反应,81-82年,美法,85第二代疫苗,在哺乳细胞或CHO细胞表达,81年,法美,91、92年,中国;第三代疫苗,PreS抗原(重要作用),CHO细胞表达。
6、克隆技术的关键?答:(1)(胚胎或体细胞)克隆技术的关键:①供体和受体的准备——发育时间配合好;鱼类:供体——囊胚细胞或成体细胞,受体——成熟的卵细胞(人工催产、水中激活);两栖类:供体——囊胚细胞或成体细胞,受体——成熟卵细胞(人工针刺);鸟类与爬行类:未知哺乳类:供体——早期胚胎细胞、胚胎干细胞、体细胞;后用体细胞,如乳腺细胞、粘膜上皮细胞;合子核到64细胞期,0.2%链霉蛋白酶预处理,溶去胚胎胶膜及透明带,分离单个卵裂球;受体——去核卵母细胞、受精卵、2细胞胚胎(第一极体成熟时期去核);②去卵膜和卵核——用玻璃微针(尖为2-4um);鱼卵——借助第二极体标志,去核;两栖卵——紫外线去核;哺乳卵——借助第一极体;③供体细胞制备:胚胎或组织机械切割置细胞分离液(含胰蛋白酶)处理几分钟单细胞短期培养。