QIAGEN 核酸提取仪

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QIGEN DNA提取步骤

QIGEN DNA提取步骤

QIAamp DNA Blood Mini Kit简介:QIAGEN公司出品的QIAamp DNA Blood Mini Kit适用于使用微型离心机或真空处理从全血、血浆、血清、血沉、淋巴细胞以及体液样品中提取总(基因、线粒体和病毒)DNA。

该试剂盒可处理带有EDTA、柠檬酸盐和肝素等常规抗凝剂的新鲜或冷冻的全血样本,样品量可达200μl。

整套基因组的操作时间约为20–40分钟,一般可从200μl健康全血中获得4–12 μg DNA,洗脱体积可在50–200μl范围。

抽提原理:样品中的DNA可以特异性结合到QIAamp的硅胶膜上,通过两次洗涤可以将PCR抑制剂,如:二价阳离子和蛋白完全去除,最后结合在离心柱上的纯核酸可用水或试剂盒中的缓冲液进行洗脱收集。

开始前的注意事项:1. 所以的离心步骤需要在室温(15-25℃)进行2. 如果样品中含有的基因组当量少于10000,请添加载体DNA(carrier DNA)3. 200μl全血样品可以得到约3-12μgDNA开始前的准备工作:1. 将样品平衡到室温(15-25℃)2. 将水浴或是金属浴加热到56℃,以备第4步使用3. 将Buffer AE或蒸馏水平衡到室温,用于第11步的洗脱4. 确保Buffer AW1、AW2以及QIAGEN蛋白酶已经按照说明配置完毕5. 如果在Buffer AL中出现沉淀物,请在56℃孵育使其溶解操作步骤:以下为整个基因组提取操作的流程图,由于真空装置并非所有的实验室都配置,所以这里介绍的是离心法(流程图左侧)。

以下译介自QIAGEN官方出品的说明部分,黑粗体为实验操作的主体部分。

1. 吸取20μl QIAGEN蛋白酶(或者蛋白酶K)至1.5ml离心管的底部。

2. 加入200μl待提取基因组的样品至离心管中。

可以加入不超过200μl的全血、血浆、血清、血沉棕黄层,或者溶于200μl PBS中不超过5*106的淋巴细胞。

如果样品体积不足200μl,请使用PBS补足。

核酸提取仪工作原理

核酸提取仪工作原理

核酸提取仪工作原理
核酸提取仪的工作原理是通过配备了酶解剂和离心机的自动化设备,将样本中的细胞壁、细胞膜和细胞核等物质破坏并分离出细胞内的核酸分子。

具体步骤如下:
1. 样本制备:将待提取的样本(例如血液、组织等)进行初步处理,去除污染物和非核酸物质,获得纯净的细胞样本。

2. 细胞破坏:将样本中的细胞进行破碎,常见的方法包括冻融破碎、化学溶解、超声波破碎等。

这样可以使细胞壁、细胞膜和核酸相互分离。

3. 蛋白质去除:加入蛋白酶等酶解剂,用于降解和去除样本中的蛋白质。

这样可以使核酸从其他核酸结合蛋白中解离出来。

4. 细胞核分离:离心加速度可使细胞核沉淀到管底,与其他杂质分离开来。

离心过程可以根据不同细胞类型的大小和密度进行调整,以获得较高纯度的核酸。

5. 核酸沉淀:将离心分离后的上清液去除,留下纯化后的核酸沉淀。

加入适量的乙醇或异丙醇等溶剂,使核酸沉淀下来。

6. 核酸洗涤:将核酸沉淀用乙醇或异丙醇溶液进行洗涤,以去除残留的盐、酶和杂质。

7. 核酸溶解:使用适宜的缓冲液溶解核酸沉淀,获得纯净的核酸溶液。

核酸提取仪可以根据提取的核酸种类和实验需求,采用不同的自动化提取方法和试剂盒,但其基本原理大致相同。

通过自动化操作,能够提高提取效率、节省时间,并提供较高的核酸纯度,满足科研、诊断和实验室应用的需求。

核酸纯化提取仪工作原理

核酸纯化提取仪工作原理

核酸纯化提取仪工作原理
嘿,朋友们!今天咱们来聊聊那个神奇的核酸纯化提取仪的工作原理!这玩意儿就像是一个超级魔法师,能把复杂的核酸从各种物质中精准地变出来。

你想啊,就好比我们在一堆乱七八糟的杂物里找一颗特别的宝石。

核酸纯化提取仪就是那个厉害的“寻宝专家”!它先施展魔法,把样本放进去,然后就开始一步步地分离啦!
它用一些特别的方法,比如像一个细心的工匠一样,把样本中的杂质一点点地剔除掉。

这过程就好像是筛沙子,把细沙留下,把大的石子筛出去。

然后呢,通过一系列神奇的操作,核酸就被单独拎出来啦!
咱就说啊,如果没有这个核酸纯化提取仪,那我们要想得到纯净的核酸得多难呀!就好像没有指南针在茫茫大海中航行一样。

它的存在可太重要啦,难道不是吗?
再想想看,医生和科学家们要研究病毒、疾病什么的,没它可不行!没有它提取出准确的核酸,怎么能搞清楚那些神秘的病菌呢?就好比战士上战场没有好武器,那能打赢吗?
总之啊,这核酸纯化提取仪绝对是个了不起的发明!它让我们在探索生命奥秘的道路上越走越远,越走越顺!它就是我们的好帮手,让我们能更清楚地了解这个世界的微小之处。

所以说啊,我们真得好好感谢它呢!
我的观点就是:核酸纯化提取仪是现代科学研究和医疗领域中不可或缺的重要工具,它的作用至关重要!为我们打开了探索生命奥秘的大门!。

核酸自动提取仪

核酸自动提取仪

核算提取仪北京贝尔生物工程有限公司PCR室一.核酸提取技术随着近年来分子生物学技术的高速发展,核酸扩增,核酸杂交将成为进行病原菌微生物检测,物种鉴定,物种起源、多样性评估及其亲缘关系、系统计划等常用研究手段之一。

这样的分子检测和分子诊断技术在人体健康体检、视频法医等领域中具有至关重要的作用。

而在所有的现代分子生物学检测技术首先面临的问题就是如何从样品中快速有效的分离提取所需的基因组核酸,并且大规模高质量的提取核酸分子也成为了一个挑战。

自1869年人类首次发现核酸分为脱氧核当核酸(DNA)和核糖核酸(RNA),核酸的提取方法包括各种实验材料和试剂都一直在进行着改进,柠檬酸钠、RNase、SDS、硫氰酸胍等先后应用于核酸的提取。

现今核酸的提取方法中主要有一些传统的方法比如CTAB法、Trizol法、氯化锂法、以及一些新兴的方法比如旋转离心柱提取法、玻璃粉吸附法、二氧化硅基质法、阴离子交换法、纳米磁珠提取法。

总的来讲,不管采用什么样的方式方法进行核酸的提取以及纯化,主要可以分为以下三步:第一步为利用物理或化学的方式促进细胞破裂,使细胞中的核酸释放出来。

第二步是初步的将核酸与细胞内部的蛋白质、多糖、脂类分离。

新兴的方法比如旋转离心柱提取法是利用特定的载体,将释放的核酸吸附在特定的载体上,这种载体有且仅对于核酸具有较强的亲和力和吸附力。

第三步则是将核酸进行最后的洗脱与富集。

虽然具有相通的原理,对比传统的核酸提取法与新兴的核酸提取法,传统的核酸提取技术中包含的沉淀和离心等操作需要用到大量的生物样本,而且传统提取步骤较为繁杂,费时长,效率低下,很难实现自动化以及规模化,大部分方法涉及到有机试剂的使用,对于操作人员具有潜在的威胁,其应用的范围受到了明显的局限。

因此,随着时间的推移,传统的从液相系统中分离提取核酸的方式逐步的被以固相吸附物载体为基础的新方法所取代。

二、磁珠核酸提取法20世纪90年代,磁珠提取核酸的方法是为了适应现代分子生物学检测实验高通量、高灵敏度、自动化的操作需要所打造的方法。

自动核酸提取仪原理PCR(新)

自动核酸提取仪原理PCR(新)
samples Low to high throughput (4,000 samples/d) 96 rod head for parallel separating and
resuspending in 96 well plates 12 rod head for parallel separating and
BioRobot M48 Workstation
Qiagen M48 原理示意图
Roche MagNA Pure LC原理示意图
其他生产商产品
厦门百维信 Lab-Aid 820 厦门欧达科 MP-120 博日 Gene-pure
Gene-puorkstation BioRobot M48 workstation BioRobot EZ1
Roche
MagNA Pure LC 1.0,2.0
resuspending in 15 ml or 50 ml Falcon tubes
Fig. 1 Schematic illustration of the chemagic Magnetic Separation Module I for semi-automated extraction of viral nucleic acids from up to 12 minipools in one batch. (a) Separation head containing 12 metal rods. (b) Plastic disposables. (c) Tubes containing samples. (d) and (e) Tubes containing wash buffers. (f) Tubes containing elution buffer.

核酸提取仪的原理、分类及几种核酸提取仪的比较-科邦实验室

核酸提取仪的原理、分类及几种核酸提取仪的比较-科邦实验室
核酸提取仪的原理、分类及几种核酸提取仪的比较
核酸提取仪(Nucleic Acid Extraction System)是应用配套的核酸提取试剂来自动完成样本核酸提取工作的仪器。广泛应用在疾病 控制中心、临床疾病诊断、输血安全、法医学鉴定、环境微生物检测、食品安全检测、畜牧业和分子生物学研究等多种领域。
只配套 QIAGEN 离心柱相关试剂
盒,成本高
震荡加热模块
离心柱法,粘 稠样品和组织
容易堵柱子
组织需要预 先研磨过夜
消化
20-30 元
预消化 5 小时 或者过

分类: 1. 根据仪器型号大小不同划分
1) 自动液体工作站 自动液体工作站是功能非常强大的设备,液体分液、吸液等自动完成,甚至能通过整合扩增、检测等功能,实现标本提取、扩增、 检测全自动化。提取核酸只是其功能的一个应用,不太适合常规实验室提取核酸,一般都应用在单一类标本并且一次提取标本量非常 大(至少 96 个,一般几百个)的实验需求上。自动工作站的平台建立及平台的运作,需要比较大的资金。 2) 小型自动核酸提取仪 小型的自动化仪器是通过运行结构的特殊性来达到自动提取核酸的目的,可以在任何实验室得到应用。 2. 根据提取原理不同划分 1) 采用离心柱法的仪器 离心柱法核酸提取仪主要采用离心机和自动移液装置相结合的方法,通量一般在 1-12 个样本,操作时间和手工提取差不多,并不 能提高实际工作效率,且价格昂贵,不同型号仪器的耗材也不能通用,仅适合经费充足的大型实验室使用。 2) 采用磁珠法的仪器 以磁珠为载体,利用磁珠在高盐低 PH 值下吸附核酸,在低盐高 PH 值下与核酸分离的原理,再通过移动磁珠或转移液体来实现核 酸的整个提取纯化过程。由于其原理的独特性,所以可设计成很多种通量,既可以单管提取,也可以提取 8-96 个样本,且其操作简单 快捷,提取 96 个样本仅需 30-45min,大大提高了实验效率,且成本低廉,因而可以在不同实验室使用,是目前市场上的主流仪器。

国内外核酸提取仪介绍

国内外核酸提取仪介绍

核酸提取仪可以 应用于DN、RN 等核酸分子的提 取
核酸提取仪可以 提高核酸提取的 效率和纯度
核酸提取仪广泛 应用于分子生物 学、医学、生物 技术等领域
核酸提取仪的原理
核酸提取仪是一种用于从生物样品中提取核酸的仪器。
核酸提取仪的原理主要是利用物理和化学方法如离心、过滤、吸附等将核酸从生物样品 中分离出来。
性能稳定:国外核酸 提取仪的性能稳定能 够保证实验结果的准 确性和可靠性。
应用广泛:国外核酸 提取仪的应用范围广 泛包括科研、医疗、 生物技术等领域。
技术支持:国外核酸 提取仪的制造商通常 提供完善的技术支持 和售后服务确保仪器 的正常运行和使用。
国内外核酸提取仪 的比较
技术水平的比较
国内核酸提取仪:技术水平不断提升部分产品已达到国际先进水平 国外核酸提取仪:技术成熟性能稳定但价格较高 技术差距:国内核酸提取仪在某些关键技术上仍存在差距如自动化程度、检测精度等 发展趋势:国内核酸提取仪技术水平不断提升有望缩小与国外产品的差距
技术水平:国内核酸提取仪的技术水平已经达到国际先进水平 研发能力:国内核酸提取仪的研发能力不断提升已经具备自主研发能力 生产能力:国内核酸提取仪的生产能力不断提升已经具备大规模生产能力 应用领域:国内核酸提取仪的应用领域不断拓展已经广泛应用于医疗、科研等领域
国外核酸提取仪的 发展
国外核酸提取仪的历程
智能化:核酸提取仪将更加智能化实现 自动化、无人化操作
便携化:核酸提取仪将更加便携化满足 现场检测的需求
成本降低:随着技术的成熟和生产规模 的扩大核酸提取仪的成本将逐渐降低提 高普及率
应用领域拓展:核酸提取仪的应用领域 将不断拓展如环境监测、食品检测等领 域
THNK YOU

全自动核酸提取仪技术参数

全自动核酸提取仪技术参数

全自动核酸提取仪技术参数嘿,大家好!今天咱们来聊聊全自动核酸提取仪,这可是个了不起的玩意儿哦!说到核酸提取,可能有的人就开始挠头了,核酸是什么?提取干嘛?别担心,今天我就带你们轻松了解这个神奇的小机器。

全自动核酸提取仪就像厨房里的搅拌机,能把原材料变成你想要的东西。

想象一下,咱们在实验室里,需要从样本中提取DNA或者RNA,传统的方法那可真是麻烦得很,手动操作还得小心翼翼,搞得像是在玩高难度的魔方。

可是,有了这个全自动的小家伙,整个过程简直就像开了挂!它能把繁琐的步骤统统自动化,让科研人员省时省力,心情也跟着好起来。

这仪器的技术参数,别说,还真是让人眼前一亮。

它的提取效率高得惊人,样本处理量大,像流水线一样,一下子就能搞定好多样本。

操作界面友好得很,像是在玩游戏一样,轻轻一点,仪器就乖乖开始工作。

它不仅速度快,而且提取的结果也特别纯净,基本上可以说是高质量的保证。

要知道,在科学研究中,质量可是一条命啊,差一点都不行。

这仪器的体积也挺小巧的,放在实验室里简直不占地方,关键是颜值也不低,简直就是实验室的“高颜值”代表。

它有各种模式可以选择,适应不同的实验需求。

简直是科研工作者的好帮手。

嘿,有时候我都想,它是不是有自己的小情绪,感觉它在帮我们加油,努力工作呢!说到安全性,大家可能会担心这些高科技的东西会不会出错。

放心吧,这个全自动核酸提取仪可是经过多重测试的,稳定性杠杠的。

就像你信任的老朋友一样,虽然长得比较复杂,但绝对不会给你添麻烦。

而且它的清洗和维护也很简单,简直不费吹灰之力。

真心觉得,这机器就像是个勤劳的小蜜蜂,工作再忙也不怕。

当然了,使用全自动核酸提取仪的好处可不仅仅是提取效率高、操作简单。

它还能减少人为操作带来的误差,这在科研领域可是个大大的加分项。

大家都知道,科研就是一个对数据精益求精的过程,哪怕是一点小差错,都可能影响整个实验的结果。

有了这台仪器,简直就像是为科研保驾护航,心里踏实多了。

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Qiagen BioRobot System
主要硬件和功能模块简介(续):
ִ96-well Magnet:当使用Magnet技术时配合使用,主 要为BR8000。 ִRobotic Handling:机械臂移取系统,可方便移动各种 Plates,BR3000和BR8000有。 ִAutomated Vacuum System:BR8000独有 ִMultiFlow(HSDS):高速分液系统,BR8000独有
Qiagen BioRobot System
主要硬件和功能模块简介:
ִLabhand:工作臂,所有型号均有 ִHSPS ִHSPS:高速加样系统,所有型号均有 ִTip Adaptors & Probes:
BR9600:2 Probes/Tip Adaptor BR9604:4 Tip Adaptor BR3000:4 Tip Adaptor/Probes BR8000:8 Tip Adaptor/Probes+8 Channel HSDS
Qiagen BioRobot System
-全自动核酸和蛋白纯化系统
-分子生物学的标准工作站
Qiagen BioRobot System
发展史:
ִ1996:BioRobot 9600(科研标准型) ִ1998:BioRobot 9604(临床标准型) 9604 ִ1999:BioRobot 3000(用户定制型) ִ2000:BioRobot 8000(高通量标准与定制型) ִ2001:BioRobot RapidPlate ִ2001:The BioRobot Twister I and Twister I I
BioRobot 9604
Qiagen BioRobot System
BioRobot 9604的亚型:
ִA(“Viral RNA”):Viral RNA, ִB(“Blood”):Viral RNA/DNA,Genomic DNA,Amplification Setup
Attention:QIAamp 96 Swab
BioRobot 9604 特点
满足分子诊断所需核酸标准的、自动纯化操作过程 满意的得率和可信的结果 自动的样品跟踪和过程控制系统(条形码扫描) 可同时进行96样品,且有很好的可重复性 一次性枪头可安全处理有传染性的样品 配套的高质量试剂 简单易学的软件操作系统
BioRobot 3000
ִVariSpan:加样头间距调节系统,BR9604独 有,BR3000可选,配合血样收集管使用
Qiagen BioRobot System
主要硬件和功能模块简介(续):
ִSamTrak:固定式条形码读取系统,BR9604独有 ִLabTrak:手持式条形码读取系统,BR3000和BR8000 可选 ִTip-tray Holder:Tip保存模块,全有 ִTube Holder:试管保存模块,BR9604独有,BR3000 可选 ִReagent Holder:试剂保存模块 ִBuffer Roter and BufferTrak System:自动缓冲液保 存和条形码读取系统,BR8000独有
High capacity robotic arm system for storage and handling of microlplates The BioRobot Twister II robotic arm allows integration of external instruments with BioRobot 8000 workstations and provides fast plate handling and transfer of labware for molecular biology applications. It can be integrated with a wide variety of instruments, including the BioRobot 8000 and BioRobot RapidPlate workstations, spectrophotometers, thermal cyclers, and plate sealers.
ִC(“RNA”):Total RNA,Cytoplamic RNA
最通常的选择是B型
BioRobot 9604 功能
此仪器是专为临床样品和细胞培养液设计的核酸 自动纯化的分子生物学工作站。可自动从临床诊 断样品(各种血样,体液,口腔刮离细胞及细胞 培养物等)中纯化基因组DNA、病毒DNA及RNA,还 可进行PCR产物纯化,PCR样品准备。适用于医院, 检验科分子诊断,血库,检疫,海关病毒检测, 血液分型,法医DNA指纹鉴定制药公司药物筛选 等
BioRobot 3000 功能
此系列为可根据客户的不同需求量身定做的分子 生物学平台。自动移液,软件功能强大,用途广 泛。主要可以应用于:基因组或质粒DNA,RNA纯 化病毒DNA,RNA纯化,重组蛋白纯化和检测(如 6×His),PCR产物纯化,酶切、PCR、测序及其 它反应体系准备,移液和样品制备等。
BioRobot 9600的亚型
A:QWU,QPT,M13,QQ,ERS,DTS,DPS,GL B:QWU,QPT,M13,REAL,QQ,ERS,DTS,DPS,GL C:QWU,QPT,M13,REAL,QQ D:QWU,QPT,M13,QQ,ERS,DTS,GL E:QWU,QPT,M13,QQ,ERS,DTS,GL F:QQ,ERS,DTS,GL G:QWU,QPT H:QPT,QWU,QQ,PCR,GL,Qiaamp,DPS,DTS Furthermore:NS
Qiagen BioRobot System
BioRobot 3000可选功能
ִREAL,QQ,PCR,QPT,DTS,DyeEx ִQiaamp DNA Blood 48 ִNTA Series:
Ni-NTA Superflow 96 Purification Ni-NTA Magnetic Beads Immunoassay Ni-NTA Magnetic Beads Interaction Assay Ni-NTA Magnetic Beads
BioRobot为常规分子生物学研究设计的核 酸纯化工作站。可以进行DNA、RNA纯化, PCR产物纯化,对琼脂胶进行加样,酶切、 PCR、测序及其它反应体系准备,移液处理。
BioRobot 9600 特点
分子生物学标准的、自动核酸纯化操作过程 单个Probe加样系统用于样品较少的操作 超声波清洗系统使移液过程中不会造成交叉污染 配套的高质量试剂 简单易学的软件操作系统
Qiagen BioRobot System
主要硬件和功能模块简介(续):
ִHeating and Cooling System:加热和制冷系统,除 BR9600(除H)没有加热系统外,其他所有型号均有, 但功能有不同。BR8000的VariTherm最强大。 ִQiaVac Vacuum:真空抽滤系统,所有型号均有,但 BR8000最为强大,可以不用离心机。 ִShaker:振荡器,所有型号均有,但BR8000最强。 ִTip-disposal Unit:Tip去除系统,BR9604有,BR3000 可选,用于临床样本分析时防止污染。
Qiagen BioRobot System
简写说明:
ִQWU:Qiawell QPT:Qiaprep Turbo ִQQ:Qiaquick DTS:Dye-Terminate Seq. ִPCR:PCR Setup DPS:Dye-Priming Seq. ִERS:Enzyme Reaction Setup ִGL:Gel Loading NS:Ni-NTA Superflow
BioRobot 8000特点
高通量、快速核酸和蛋白纯化。 速度快、全自动样品传送及液面监控。 高精确处理96和384孔板。 提供优质配套试剂,结果重复性好。 具有功能强大的软件处理系统。
Qiagen BioRobot System
BioRobot 8000 的新突破
ִHigh-Speed Shaker:1100rpm(Normal 800 rpm) ִHigh-Speed Dispensing System:MultiFlow in 8 channels ִBuffer Rotor & BufferTark System ִVariTherm System:Heating and Cooling from 4 to 80 C ִRobotic Handling System(BR3000也有) ִAutomated Vacuum System ִ384 Well Formated
BioRobot 8000
BioRobot 8000 功能
专为基因组实验室设计,同时也可以用于 其他分子生物学领域。高通量、快速、全 自动核酸纯化系统,功能强大的真空过柱、 振荡混匀及加热制冷装置,无需离心即可 进行核酸纯化。8通道自动移液系统可以对 384孔板进行准确、快速地移液处理。
QPT,REAL,PCR,QQ,NS,Sequencing Setup
Simultaneous pipetting through 96 channels
The 96-channel pipettor head rapidly and accurately transfers reagents
96道移液头可以同时准确的吸液和分液 对96 和 384孔板 进行快速准确的进行移液 处理 96道移液头可利用100 µl 或 200 µl 一次性 枪头,避免交叉污染。 准确的液面定位系统,结果重复性好。 可以单独作为移液系统使用,也可和3000 型联合使用,以提高3000型移液速度。
The BioRobot 3000 loading a microplate on the BioRobot RapidPlate
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