微生物实验

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微生物实验工作总结5篇

微生物实验工作总结5篇

微生物实验工作总结5篇篇1一、引言在过去的一段时间里,我参与了多项微生物实验项目,这些项目涵盖了多个领域,包括医学、农业和环境保护等。

通过这些实验,我不仅积累了丰富的实践经验,还对微生物的多样性和应用有了更深入的了解。

本文将对我参与的微生物实验项目进行总结,并阐述我的工作心得和收获。

二、实验项目概述1. 医学领域:我参与了一项关于病原微生物的研究项目,旨在探索某种新型病毒的基因组结构及其致病机制。

通过基因测序和生物信息学分析,我们成功揭示了该病毒的遗传特征,为后续的疫苗研发提供了重要依据。

2. 农业领域:我还参与了一项关于植物病害的研究项目,通过分离和鉴定植物病原菌,我们筛选出了一批具有较强致病力的菌株,并对其致病机制进行了深入研究,为农业生产中的病害防治提供了科学依据。

3. 环境保护领域:此外,我还参与了一项关于环境微生物的研究项目,通过富集和分离环境中的微生物,我们筛选出了一批能够高效降解有机污染物的菌株,并对其降解机制进行了研究,为环境保护提供了新的技术手段。

三、工作心得与收获1. 实验技能的提升:通过参与这些微生物实验项目,我不仅掌握了多种实验技能,如微生物培养、分离、鉴定和基因测序等,还熟悉了相关实验仪器的操作和维护。

这些技能的提升为我的后续工作奠定了坚实的基础。

2. 对微生物的深入理解:通过实验和研究,我对微生物的多样性和应用有了更深入的了解。

微生物在各个领域都有着广泛的应用价值,如医学、农业和环境保护等。

同时,我也意识到了微生物的潜在风险和挑战,如病原微生物的传播和污染等。

因此,在未来的工作中,我会更加注重微生物的安全管理和风险控制。

3. 团队合作与沟通能力:微生物实验项目通常需要多人协作完成,这锻炼了我的团队合作和沟通能力。

在与团队成员的交流中,我学会了倾听他人的意见和建议,并善于将自己的想法与团队目标相结合。

这种团队合作的精神不仅提高了实验效率和质量,还增强了我的团队协作能力和凝聚力。

微生物试验

微生物试验

四、名词解释1. 消毒(disinfection):指杀死物体上病原微生物的方法,并不一定能杀死含芽胞的细菌或非病原微生物。

2. 灭菌(sterilization):杀灭物体上所有微生物的方法,包括杀灭细菌芽胞在内的全部病原微生物和非病原微生物。

3. 无菌(asepsis):指不存在活菌的意思。

防止细菌进入人体或其他物品的操作技术,称为无菌操作。

4. 防腐(antisepsis):防止或抑制体外细菌生长繁殖的方法。

细菌一般不死亡。

使用同一种化学药品在高浓度时为消毒剂,低浓度时常为防腐剂。

5. 抑菌(bacteriostasis):抑制体内或体外细菌的生长繁殖。

常用的抑菌剂为各种抗生素,可在体内抑制细菌的繁殖,或在体外用于抑菌试验以检测细菌对抗生素的敏感性。

8. 抗链球菌溶血素O试验(antistreptolysin O test, ASO test):是用已知的链球菌“O”溶血毒素抗原检测患者血清中是否有相应链球菌溶血素O抗体的中和试验。

它常用于辅助诊断急性风湿热的风湿活动期。

其效价大于1:400以上有参考意义。

9. 肥达试验(Widal test):利用已知的伤寒沙门菌菌体(O)抗原和鞭毛(H)抗原以及甲型、乙型、丙型副伤寒沙门菌鞭毛(H)抗原分别与不同稀释度的患者血清做定量凝集试验。

根据抗体的动态变化,用于辅助诊断伤寒和副伤寒。

10. 外斐试验(Weil-Felix test):是指某些普通变形杆菌X19、X2和Xk菌株含有的菌体(O)抗原,可与斑疹伤寒立克次体和恙虫病立克次体的部分抗原发生交叉反应,故可用以代替立克次体作为抗原与患者的血清进行凝集反应,此称为外斐试验,用以辅助诊断有关的立克次体病。

11. 锡克试验(Schick test):用少量毒素测定机体内有无抗毒素免疫的一种方法。

在一侧皮内注射白喉毒素0.1ml,若无任何反应,表示机体对白喉有免疫力;若24h-48h注射部位开始出现红肿,直径1cm-2cm,表示机体对白喉易感,无免疫力,血液中无抗毒素中和毒素。

微生物实验

微生物实验

①标 本
③ 孔径 光栏
⑤ 光轴中心调节 螺钉
③ 视场 光栏
N.A聚=(0.6-0.8)N.A物
操作步骤如下: (1)可变光栏的中心对准聚光镜的中心。如果可变光栏的水
平是固定的,则装配时已保证它与聚光镜合轴,不必调整;如果可 变光栏的水平位置可以移动,则应把可变光栏关到最小,使它的 中心孔对准聚光镜下方的透镜中心。
实验一培养基的配置、灭菌与无菌操 作技术
1、明确培养基的配制原则,掌握配制培养基的一般方法 和步骤; 2、掌握玻璃器皿的洗涤和包扎方法,了解玻璃器皿的灭 菌方法和原理; 3、了解几种常用灭菌方法的基本原理及应用范围; 4、掌握高压蒸汽灭菌技术,。
微生物学实验所用的器皿,大多要进行消毒、灭 菌和用来培养微生物,因此对其质量、洗涤和包 装方法均有一定的要求。清洁的玻璃器皿是实验 得到正确结果的先决条件,包扎方法要能保证防 止污染杂菌。空的玻璃器皿一般用干热灭菌,若 用湿热灭菌,则要多用几层报纸包扎。
为什么要将培养基倒置培养?
显微镜概述 微生物的个体微小,必须借助显微镜才能观察到。因
此,显微镜就成为微生物学研究工作者不可缺少的基本工 具。所以,了解显微镜的种类、结构、功能和正确地掌握 不同显微镜的使用方法是很有必要的。
显微镜可分为光学显微镜和电子显微镜两大类。光学 显微镜有普通光学显微镜、相差显微镜、微分干涉差显微 镜、暗视野显微镜、紫外光显微镜、偏光显微镜和荧光显 微镜。下面主要介绍普通光学显微镜。
一、目的要求 1.学习显微镜的结构、功能和使用方法。 2.学习并掌握油镜的原理和使用方法。 3.学习微生物涂片、染色的操作技术;
4.掌握细菌单染色和革兰氏染色的方法;
5.掌握革兰氏染色反应原理、操作步骤和意义。

微生物常用实验3篇

微生物常用实验3篇

微生物常用实验第一篇:细菌涂片染色实验细菌涂片染色实验是微生物学中最基本的实验之一。

通过染色方法,使细菌变得可见,便于观察形态、结构、数量等特征,有利于研究其生长、代谢、致病性等方面。

下面,我们来介绍细菌涂片染色实验的具体步骤:一、制备细菌涂片1.取出培养基上生长良好的细菌菌落,用不锈钢嵌片环沿中心点轻压一下。

2.将嵌片环中的菌落涂匀于无菌载玻片上,制备成直径约1厘米的薄片。

3.待载玻片上的细菌涂片晾干,并用火焰消毒。

二、涂片染色1.用火焰将铺有细菌涂片的玻片烤干。

2.将烤干的玻片浸入甲醇中,固定一分钟,再用水漱洗。

3.将玻片浸入碘酒中,固定一分钟,再用水漱洗。

4.将玻片浸入乙醇中,使背景颜色褪去,再用水漱洗。

5.将玻片浸入洋红染色液中,染色时间不超过1分钟。

6.用水冲洗干净,晾干后可以在显微镜下观察。

通过细菌涂片染色实验,我们可以直观地观察到细菌的形态、大小、聚集情况、颜色等,有助于鉴定细菌种类,并进一步深入研究其生物学特性。

第二篇:厌氧培养实验厌氧菌是一类生长需要在完全无氧条件下进行的微生物。

在许多疾病的发病机制中,厌氧菌都发挥着重要作用,因此,研究厌氧菌对于认识疾病的发病机制具有极其重要的意义。

下面,我们来介绍厌氧培养实验的具体步骤:一、制备厌氧培养基制备厌氧培养基是进行厌氧菌培养的关键。

具体操作步骤如下:1.准备培养基,并在其中加入培养菌株所需的配方和其他适宜的添加剂。

2.将培养基分装到无菌针筒或暗口瓶中。

3.在体积的一半至三分之二处加入去氧剂(一般为Thioglycolate或Dithiothreitol)。

二、厌氧细菌接种与培养1.准备厌氧细菌培养物的接种种子。

一般情况下,把生长适应在厌氧条件下的细菌进行分生处理来获得设计数量的细胞,并将其重新悬浮在与培养基相同的缓冲液中。

2.在无氧条件下接种厌氧菌,避免暴露于空气中。

可以通过使用瓶盖和橡胶塞的局部替代或全封闭气密容器的方法来实现无氧条件。

微生物培养实验方法_

微生物培养实验方法_

微生物培养实验方法_一、选材和操作环境1.选材:根据实验目的,选择适当的微生物进行培养。

可以选择广谱微生物培养基来适应多种微生物的生长,或者选用特定的微生物培养基来培养其中一种特定的微生物。

2.操作环境:为了避免实验污染和交叉感染,实验室应该严格执行无菌操作,使用无菌操作台进行培养实验。

二、无菌技术1.灭菌:使用高压蒸汽灭菌器或者乙醇灭菌器将培养器具、培养基和植物培养基灭菌,以杀灭存在的菌种。

2.无菌操作:将培养器具放在无菌操作台上,进行接种、移植以及采样等操作,确保操作过程中不受外界菌种污染。

三、液体培养实验1.静态培养:在无菌培养基中接种微生物,放入试管或培养瓶中,静置培养。

根据需求,可以在静态培养过程中添加适量的养分补充剂。

2.摇床培养:将含有微生物的培养基放在摇床上进行培养,设置合适的温度和摇动速度,可以促进微生物的生长和代谢。

3.发酵罐培养:将含有微生物的培养基放入发酵罐中进行大规模培养。

控制发酵罐内的温度、pH值、氧气供应等条件,可以实现微生物的高密度培养。

四、固体培养实验1.平板培养:将含有微生物的培养基倒入培养皿中,使其均匀分布在培养皿表面,待其凝固后,将微生物接种于其上。

培养过程中可以观察到微生物的孤悬、菌落的形成和生长情况。

2.涂布法:将含有微生物的培养基均匀涂布在玻璃片、培养皿或者培养瓶内壁上,形成薄膜状,待其凝固后,进行微生物的接种。

3.动植物体内培养:将微生物接种在动植物的体内,如动物的腹腔、皮肤或者植物的叶片、根系等,利用动植体提供的养分来满足微生物的生长需求。

五、检测微生物生长和代谢特性1.可视方法:通过观察培养基上微生物的生长情况、菌落的形态和颜色等,判断微生物的生长情况。

2.双抗法:使用特定的抗体和染料来染色微生物,使其表现出不同的颜色或者形态,以便于鉴别和分析微生物。

3.生化检测方法:通过检测微生物在培养基上产生的特定代谢产物,如酶活性、气体产生等,来评估微生物的生长情况和代谢特性。

(完整版)微生物学实验指导书

(完整版)微生物学实验指导书

03微生物在自然界和人类生活中的作用阐述微生物在生态系统、工业生产、医疗卫生等领域的重要性。

01微生物的定义与分类包括细菌、真菌、病毒等微生物的基本概念和分类方法。

02微生物的生物学特性介绍微生物的形态、结构、生理生化特性等。

微生物学概述01实验室安全制度包括实验室安全守则、危险标识识别、紧急情况下的应对措施等。

02实验操作规范介绍实验前准备、实验过程中的操作规范、实验后清理等注意事项。

03生物安全阐述生物安全的概念、生物安全级别的划分及相应防护措施。

实验室安全与规范介绍显微镜的种类、使用方法和维护保养。

显微镜介绍离心机的类型、使用方法和维护保养。

离心机阐述培养箱和摇床的工作原理、使用方法和注意事项。

培养箱与摇床包括分光光度计、电泳仪、PCR 仪等设备的简要介绍和使用方法。

其他常用设备常用仪器与设备实验报告格式包括标题、作者、摘要、正文、结论、参考文献等部分的撰写要求。

数据处理与图表制作介绍数据处理的方法、图表的制作规范及注意事项。

实验结果分析与讨论阐述实验结果的分析方法、讨论实验结果的合理性及可能存在的问题。

实验报告提交与评审说明实验报告的提交方式、评审标准及相关注意事项。

实验报告撰写要求03根据实验需求,选择适当的培养基类型,如营养琼脂、马丁氏琼脂等。

选择合适的培养基按照培养基配方准确称量各成分,加入蒸馏水或去离子水,加热溶解后调整pH 值。

配制培养基将配制好的培养基分装到试管、培养皿等容器中,采用高压蒸汽灭菌法或干热灭菌法进行灭菌处理。

培养基分装与灭菌培养基制备与灭菌微生物接种与培养接种前准备准备好无菌操作台、无菌接种环、酒精灯等接种工具,确保无菌操作环境。

微生物接种采用划线法、倾注法等方法将待测微生物接种到培养基上。

培养条件设置根据微生物的生长需求,设置好培养温度、湿度和光照等条件。

观察前准备准备好显微镜、载玻片、盖玻片等观察工具,确保无菌操作环境。

微生物形态观察通过显微镜观察微生物的形态、大小、排列方式等特征,记录并描述观察结果。

微生物实验

微生物实验

实验一光学显微镜的操作及细菌、放线菌和蓝细菌个体形态的观察一、实验目的(1)掌握光学显微镜的结构、原理,学习显微镜的操作方法和保养。

(2)观察细菌、放线菌和蓝细菌的个体形态,学会生物图的绘制。

二、显微镜的结构、光学原理及其操作方法(一)显微镜的结构和光学原理显微镜是观察微观世界的重要工具。

随着现代科学技术的发展,显微镜的种类越来越多,用途也越来越广泛。

微生物学实验中最常用的是普通光学显微镜,其结构分为机械装置和光学系统两部分。

显微镜的结构如图-1所示。

A B图-1 显微镜的结构1.机械装置(1)镜筒:镜简上端装目镜,下端接转换器。

镜筒分单筒和双筒两种。

单筒有直立式(长度为160mm)和后倾斜式(倾斜45°)。

双筒全是倾斜式的,其中一个筒有屈光度调节装置,以备两眼视力不同者调节使用。

两筒之间可调距离,以适应两眼宽度不同者调节使用!(2)转换器:转换器装在镜筒的下方,其上有3个孔,有的有4个或5个孔。

不向规格的物镜分别安装在各孔上。

(3)载物台:载物台为方形(多数)和圆形的平台,中央有一光孔,孔的两侧各装1个夹片.载物台上还有移动器(其上有刻度标尺),可纵向和横向移动。

移动器的作用是夹住和移动标本用。

(4)镜臂:镜臂支撑镜筒、载物台、聚光器和调节器。

镜臂有固定式和活动式(可改变倾斜度)两种。

(5)镜座:镜座为马蹄形,支撑整台显微镜,其上有反光镜。

(6)调节器:调节器包括大、小螺旋调节器(调焦距)各一个。

可调节物镜和所需观察的物体之间的距离。

调节器有装在镜臂上方或下方的两种。

装在镜臂上方的是通过升降镜臂来调焦距,装在镜镜下方的是通过升降载物台来调焦距,新式显微镜多半装在镜臂的下方。

2.光学系统及其光学原理(1)目镜:一般的光学显微镜均备有2~3个(对)不同规格的目镜,例如,5倍(5×)、10倍(10×)和15倍(15×),高级显微镜除了上述3种外,还有20倍(20×) 。

微生物学实验

微生物学实验

微生物学实验微生物学实验是研究微生物的生长、活动和相互作用的一种科学实验。

通过实验可以了解微生物的生理特性和遗传特性,探究微生物与环境的关系,以及微生物对人类健康和环境的影响。

本文将介绍微生物学实验的常见内容和方法,并举例说明其应用。

1. 常见(1)微生物的培养与分离:将微生物样品接种于培养基上,提供适宜的环境因素使其生长繁殖。

利用孵育箱或培养皿进行培养,观察微生物的孢子、菌丝和菌落等形态特征,通过分离与鉴定,确定微生物的种类和数量。

(2)微生物的生长曲线:利用培养皿或发酵罐等装置,监测微生物在不同时间内的生长情况,绘制生长曲线。

通过分析曲线上的不同阶段,了解微生物的生长特性,包括潜时期、对数期、平稳期和死亡期等。

(3)微生物的代谢分析:通过测定微生物培养过程中的代谢产物,如酸、气体、酶等,分析微生物的代谢途径和代谢产物对生物工艺和环境的影响。

常用的方法包括气相色谱、质谱和高效液相色谱等技术。

(4)微生物的遗传分析:通过构建基因工程菌株或利用遗传标记技术,研究微生物的基因表达、突变和遗传传递等现象。

例如,利用PCR技术检测微生物的特定基因序列,分析其在不同环境条件下的表达水平。

2. 微生物学实验方法(1)杀菌与消毒:在进行微生物实验前,需要对实验器材、培养基和试剂等进行杀菌和消毒处理,以防止外源菌的污染。

常用的方法有高温高压灭菌、酒精喷雾消毒和过滤器材消毒等。

(2)无菌技术:在进行微生物的培养和分离实验时,需要避免外界细菌的污染。

常用的无菌技术包括细菌装液的操作在无菌台上进行,采用无菌培养皿、培养基和工具,以及穿戴无菌手套等措施。

(3)微量液体处理:有些微生物实验需要处理微量的液体,如微生物菌液的接种、稀释和移液等。

在这种情况下,需要使用微量吸管、微量移液器和微量离心机等微量操作工具,保证实验的准确性和可重复性。

(4)统计分析:微生物学实验的数据分析通常需要进行统计处理,以确定实验数据的可靠性和显著性差异。

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实验一细菌涂片的制备及革兰氏染色1、制备细菌染色标本时应注意什么?涂片不要太厚,要均匀,固定的时候一定按照要求,快速,染色脱色时间要控制好2涂片2、固定的意义何在?固定时应注意什么问题?固定目的是杀死细菌并使细菌粘附在玻片上,便于染料着色,常用加热法,即将细菌涂片膜向上,通过火焰3次,以热而不烫为宜,防止菌体烧焦、变形。

此制片可用于染色。

3、革兰氏染色的原理及染色成败的关键?机制:结果为阳性(紫色)和阴性(红色)两大类,与细菌细胞壁的结构组成有关。

细菌经结晶紫初染和碘液媒染之后,所有细菌都染上不溶于水的结晶紫与碘的复合物,呈深紫色;阴菌的细胞壁含脂类较多,当以95%乙醇脱色时,脂类被乙醇溶去,而肽聚糖少,且交联疏松,不易收缩,在细胞壁中形成的孔隙较大,复合物极易被乙醇溶解洗脱,最后被红色的染料复染成红色;阳菌与阴菌相反,复合物不能脱出,经红色染料复染后仍为紫色。

{(碱)结晶染色→碘媒染→酒精脱色→①可脱为G+②不脱为G—}关键:革兰氏染色四大基本步骤:结晶紫初染碘液媒染乙醇脱色沙黄复染其中乙醇脱色是关键因为如果脱色过度,有可能会使革兰氏阳性菌呈假阴性如果脱色不够,有可能使革兰氏阴性菌呈假阳性实验二培养基的制备1、为什么在校正培养基pH时,少量培养基时用0.1摩尔每升氢氧化钠,而大量时用1摩尔每升氢氧化钠?少量培养基在校正时,需要的氢氧化钠少,所以用浓度底的校正的结果会更准确。

而大量的就需要大量的,如果还用浓度低得话,结果会准确,但是工作量极大,而换1mol/L的话,结果误差不会很大,综合考虑:在校正大量的培养基时,应使用浓度高的。

2、为什么肉汤培养基在高压灭菌之前ph要略调高些?牛肉膏中有些物质在加热后会分解出酸性物质导致pH下降。

因此初始pH应比需要值高0.2左右。

3、试述普通肉汤和琼脂培养基的主要用途?琼脂培养基是在实验室做实验时专门配置的,一般植物源琼脂培养基适用于培养真菌一类的微生物;动物源琼脂培养基适用于细菌类微生物培养。

动物源琼脂培养基主要成分与肉汤差不多,只是培养基可以根据实验的要求进行调整营养成分,以适应实验要求。

琼脂培养基一定会成“冻”,肉汤不一定。

实验三细菌分离培养、移植及培养特性观察五、注意事项1、接种环必须做得圆整平滑,使用前后须烧灼灭菌。

2、接种培养基时应严格无菌操作,要尽一切可能防止外界微生物的进入。

3、选择适宜的培养基,如果培养基选择不当,则材料中的细菌就可能难以分离。

4、要注意记录好接种名称及时间。

六、思考题1、分离培养的目的是什么?何谓纯培养?分离培养的目的是:主要是在含多种细菌的病料或培养物中挑选出某种细菌。

在分离培养时应注意:选择适合于所分离细菌生长的培养基、培养温度、气体条件等。

纯培养:把从一个细胞或一群相同的细胞经过培养繁殖而得到的后代,称纯培养。

2、在挑取固体培养物上的细菌作平板分区划线时,为什么在每区之间都要将接种环上剩余的细菌烧掉?在对下一个区划线之前灼烧接种环,可以杀死接种环上剩余的细菌,这样,当接种环再从上个区拉出一条线的时候,环上的细菌数目就少了很多,经过这样的灼烧、划线,环上的细菌数目逐渐减少,最终达到分离出单菌落的目的。

3、培养皿培养时为什么要倒置?原因1:防止凝结在皿盖上的水蒸气流到培养基表面导致染菌!2:有利于菌种利用培养基营养,加快生长速度!实验四细菌的生化实验1.解释所做生化试验的原理(1)细菌生化试验各种细菌所具有的酶系统不尽相同,对营养基质的分解能力也不一样,因而代谢产物或多或少地各有区别,可供鉴别细菌之用。

用生化试验的方法检测细菌对各种基质的代谢作用及其代谢产物,从而鉴别细菌的种属,称之为细菌的生化反应。

(2)糖(醇)类发酵试验不同的细菌含有发酵不同糖(醇)的酶,因而发酵糖(醇)的能力各不相同。

其产生的代谢产物亦不相同,如有的产酸产气,有的产酸不产气。

酸的产生可利用指示剂来判定。

在配制培养基时预先加入溟甲酚紫[P HS . 2 (黄色)一6 . 8 (紫色)] ,当发酵产酸时,可使培养基由紫色变为黄色。

气体产生可由发酵管中倒置的杜氏小管中有无气泡来证明。

(3)甲基红试验(该试验简称MR 试验)很多细菌,如大肠杆菌等分解葡萄糖产生丙酮酸,丙酮酸再被分解,产生甲酸、乙酸、乳酸等,使培养基的pH 降低到4 . 2 以下,这时若加甲基红指示剂呈现红色。

因甲基红指示剂变色范围是pH4 . 4 (红色)一pH6 . 2 (黄色)。

若某些细菌如产气杆菌,分解葡萄糖产生丙酮酸,但很快将丙酮酸脱梭,转化成醇等物,则培养基的pH 仍在6 . 2 以上,故此时加入甲基红指示剂,呈现黄色。

(4)大分子物质代谢实验.靛基质(口引睬)试验某些细菌,如大肠杆菌,能分解蛋白质中的色氨酸,产生靛基质(叫睬),靛基质与对二甲基氨基苯甲醛结合,形成玫瑰色靛基质(红色化合物)。

硫化氢试验某些细菌能分解含硫的氨基酸(肌氨酸、半肌氨酸等),产生硫化氢,硫化氢与培养基中的铅盐或铁盐,形成黑色沉淀硫化铅或硫化铁。

为硫化氢试验阳性,可借以鉴别细菌。

明胶液化实验某些细菌具有胶原酶,使明胶被分解,失去凝固能力,呈现液体状态,是为阳性。

淀粉水解试验(在紫外诱变中做,本实验不做)细菌对大分子的淀粉不能直接利用,须靠产生的胞外酶(淀粉酶)将淀粉水解为小分子糊精或进一步水解为葡萄糖(或麦芽糖),再被细菌吸收利用,细菌水解淀粉的过程可通过底物的变化来证明,即用碘测定不再产生蓝色。

(5)有机酸盐及氨盐利用试验柠檬酸盐利用试验柠檬酸盐培养基系一综合性培养基,其中柠檬酸钠为碳的唯一来源。

而磷酸二氢按是氮的唯一来源。

有的细菌如产气杆菌,能利用柠檬酸钠为碳源,因此能在柠檬酸盐培养基上生长,并分解柠檬酸盐后产生碳酸盐,使培养基变为碱性。

此时培养基中的溟廖香草酚蓝指示剂由绿色变为深蓝色。

不能利用柠檬酸盐为碳源的细菌,在该培养基上不生长,培养基不变色。

2、生化试验在细菌鉴定中的作用和意义生化实验在细菌的鉴定中意义很大,因为要想确定一种菌具体属于哪一种就要通过一系列的生化实验几菌落形态和显微观察来确定,生化实验是非常重要的一部分. 但其实意义不是很大,一般是根据《伯氏细菌手册》看的,不过现在基本上都是用16S RNA来鉴定,要精确一些。

实验五药物敏感试验1、圆纸片药物敏感试验操作注意事项药物不能靠的太近,应尽量均匀分布在纸片上。

2、试述药物敏感试验的意义药物敏感试验是为了对临床标本中分离的菌株选择何种药物进行治疗有效而进行的一种试验。

常用的有纸片扩散法和微量稀释法。

根据试验结果可以判断何种药物对该菌株治疗有效(即敏感),何种药物对该菌株治疗无效(即耐药)。

实验六血凝及血凝抑制试验1、病毒凝集红细胞是不是一种特异的抗原体反应?为什么?不是,有些病毒具有凝集红细胞的能力,不需要与抗体结合即可以凝集血细胞,是非特异性的。

还有一些病毒,当与抗体结合后,可以引起红细胞凝集反应,称为血凝试验,可用于特异性检查抗原或抗体。

2、HI试验是不是特异的抗原抗体反应?为什么?是,因为HI实验本身就是一种测定抗原或抗体的技术,抗原与相应抗体之间所发生的特异性结合反应。

这种反应即可在机体内进行,也可以在机体外进行。

抗原抗体反应的过程是经过一系列的化学和物理变化,包括抗原抗体特异性结合和非特异性促凝聚两个阶段,以及由亲水胶体转为疏水胶体的变化实验七凝集试验六、注意事项1、每次试验应设标准阳性血清、标准阴性血清和生理盐水对照。

2、抗原保存在2~8℃,用前置室温30~60min,使用前摇匀,如出现摇不散的凝块,不得使用。

3、被检血清必须新鲜,无明显的溶血和腐败现象。

4、平板凝集反应温度最好在3~5min内记录结果,如反应温度偏低,可于5~8min内判定。

5、平板凝集反应适用于普查初筛,筛选出的阳性反应血清,需做试管凝集试验,以试管凝集的结果为被检血清的最终判定.6、结果判为可疑时,隔2~3周后采血重做。

阳性畜群,重检时仍为可疑,可判为阳性。

对同群中既无临床症状又无凝集反应阳性者,马、猪重检仍为可疑,判阴性;牛、羊重检仍为可疑者,可判为阳性,或以补体结合反应核对。

七、思考题1、平板凝集试验和试管凝集试验的原理、操作方法及结果判定。

原理:1.平板凝集试验颗粒性抗原在体外一定条件下(有电解质存在,pH、温度恰当)与相应抗体相遇,二者发生特异反应,出现肉眼可见的凝集物。

参加凝集反应的抗原称为凝集原,而相应的抗体称为凝集素。

2.试管凝集试验试管法直接凝集试验是将已知的颗粒性抗原悬液定量地与一系列倍比稀释的待检血清等量混合,静置一定时间后,根据各管的凝集程度,判断待检血清中抗体的效价,常用于半定量检测。

操作方法:⑴加样每份血清用4支试管,另取1支为生理盐水对照,先加生理盐水,然后以1ml注射器吸取待检血清0.2ml加入第1管充分混匀,吸1.5mL弃之,再吸0.5mL加入第二管,混匀后加入第三管,依次至第4管,混匀后弃0.5mL。

第5管不加血清,加0.5mL生理盐水⑵加抗原各管加入以生理盐水稀释20倍的布氏杆菌试管抗原0.5mL。

⑶感作各管加完后震荡,将其置37℃恒温箱作用4小时,拿出置室温18-24小时,观察结果。

结果判定:++++: 100%菌体凝集,液体全透明、菌体伞状沉淀。

+++:75%菌体凝集,液体略混浊,菌体大部分呈伞状沉淀。

++:50%菌体凝集,液体不甚透明,管底有明显的凝集沉淀。

+:25%菌体凝集,液体不显透明,管底有少量颗粒沉淀。

-:阴性,液体不透明,管底无凝集,有时有少量沉淀摇之均匀混浊。

以出现“++”以上凝集的最高血清稀释倍数为凝集价。

人和大家畜凝集价1:100以上为阳性,猪、羊、小家畜1:50以上为阳性;大家畜1:50、小家畜1:25为可疑。

可疑的半个月后重检,仍可疑,按具体情况而定(阳性群,判阳性;阴性群,判阴性)。

2、影响凝集试验的因素主要有哪些?1 温度。

温度影响酶的活性2 时间。

随着时间的延长细胞聚集程度加大3 反应底物4 细胞类型5 反应培养板的质量6 人为因素3、凝集试验中为什么要设阳性、阴性血清及抗原对照?某此细菌或病毒当制成细菌或病毒悬液时很不稳定,在没有特异性抗体存在下,亦可发生凝集,谓之自凝。

某些理化因素亦可引起非特异性凝集,pH降至3.0以下时, 即可起抗原悬液的自凝, 称为酸凝集。

因此,试验时必须设置阳性血清、阴性血清和抗原等对照是为了排除自凝干扰。

实验八沉淀试验六、注意事项1、倒琼脂板时,要求均匀、平整、薄厚一致,无气泡。

2、琼扩试验打孔时不要把琼脂层与平皿脱离,孔的边要圆整光滑,边缘不要破裂,要补底处理。

3、滴加试剂时不能产生气泡而影响试验结果。

4、加样时每加完一个样品必须更换滴头。

七、思考题1、环状沉淀试验和琼脂扩散沉淀试验的实验原理是什么?操作时应注意事项是什么?可溶性抗原与相应抗体结合,在有适量电介质存在下,经过一定时间,形成肉眼可见的沉淀物,称为沉淀试验。

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