从层析荧光到微流控生物芯片
poct 微流控
poct 微流控随着科技的发展，医疗检测技术也在不断革新。
作为一种新兴技术，微流控技术在临床检测领域备受关注。
它与便携式临床检测（POCT）的结合，为患者和医护人员提供了更加便捷、高效的检测手段。
1.微流控技术简介微流控技术是一种利用微流控芯片进行生物化学反应和细胞检测的技术。
它通过控制微小通道内的流体，实现对生物样品进行快速、精确的检测。
微流控芯片上的通道尺寸一般在微米级别，因此，样品在通道内的流速较快，大大缩短了检测时间。
2.POCT与微流控技术的结合便携式临床检测（POCT）是指在病人床旁或基层医疗机构进行的即时检测。
将微流控技术应用于POCT，可以实现样品的快速处理和检测，为临床医生提供及时、准确的诊断依据。
这种结合有助于提高医疗服务的质量和效率，尤其对于急诊和远程医疗场景具有重要意义。
3.微流控技术在POCT中的应用案例微流控技术在POCT中的应用案例包括：免疫层析法、酶联免疫吸附法、化学发光法等。
以免疫层析法为例，通过将抗原和抗体固定在微流控芯片上，实现对患者样本中的目标物质的检测。
这种方法具有灵敏度高、特异性强、检测速度快等优点。
4.微流控技术在POCT中的优势微流控技术在POCT中具有以下优势：（1）微流控芯片体积小、重量轻，便于携带和使用。
（2）检测速度快，一般可在数分钟内出结果。
（3）集成度高，一台设备可实现多种指标的检测。
（4）样品用量少，降低了对患者的侵入性。
（5）准确度高，有助于提高临床诊断的可靠性。
5.我国POCT微流控技术的发展现状与展望我国在POCT微流控技术领域取得了一定的成果，部分产品已达到国际先进水平。
然而，与国际领先企业相比，我国在POCT微流控技术研发、产业链完善、市场推广等方面仍有一定差距。
未来，我国应加大政策扶持力度，推动POCT微流控技术的发展，促进产业创新和升级。
总之，微流控技术在POCT中的应用为患者和医护人员带来了便捷和效益。
微生物检测技术的发展趋势是什么
微生物检测技术的发展趋势是什么在当今的科技时代，微生物检测技术正经历着日新月异的变革，这些变革不仅影响着我们对微生物世界的理解，也在医疗、食品、环境等众多领域发挥着至关重要的作用。
那么，微生物检测技术的发展趋势究竟是什么呢？首先，快速检测成为了一个关键的发展方向。
在过去，传统的微生物检测方法往往需要耗费大量的时间，从样本采集到培养、鉴定，整个过程可能需要数天甚至更长时间。
这对于一些紧急情况，如传染病爆发、食品安全突发事件等，显然是远远不够的。
因此，快速检测技术的需求日益迫切。
目前，基于免疫学和分子生物学的快速检测方法正逐渐崭露头角。
例如，免疫层析技术可以在短时间内检测出特定的微生物抗原或抗体，操作简便，结果直观。
还有聚合酶链式反应（PCR）技术，它能够快速扩增微生物的特定基因片段，从而实现对微生物的快速鉴定。
这些技术的应用大大缩短了检测时间，从过去的几天缩短到几个小时甚至更短，为及时采取应对措施赢得了宝贵的时间。
其次，高灵敏度和高特异性的检测技术也是发展的重点。
随着对微生物检测要求的不断提高，不仅要能够快速检测出微生物的存在，还要能够准确地鉴定到种甚至菌株水平，并且能够检测到极低浓度的微生物。
新一代的测序技术在这方面展现出了巨大的潜力。
通过对微生物的基因组进行测序，可以获得极其详细的遗传信息，从而实现对微生物的精准鉴定和分型。
此外，微流控芯片技术的发展也为提高检测的灵敏度和特异性提供了新的途径。
微流控芯片能够将复杂的检测过程集成在一个微小的芯片上，实现对微量样本的精确处理和检测。
再者，多技术融合是微生物检测技术发展的一个显著趋势。
单一的检测技术往往存在一定的局限性，而将多种技术结合起来，可以发挥各自的优势，实现更全面、更准确的检测。
比如，将免疫检测技术与PCR技术相结合，可以先通过免疫检测初步筛选样本，再对阳性样本进行PCR确认，这样既提高了检测效率，又保证了检测的准确性。
还有将微生物培养技术与现代分析技术相结合，在培养微生物的同时，实时监测其代谢产物或生理指标的变化，从而更深入地了解微生物的特性。
生物芯片原理与技术
生物芯片原理与技术生物芯片是将生物学和微电子学相结合的一种先进技术，通过微型化的电子装置实现对生物样本的检测、分析和操作。
生物芯片的核心部分是微型芯片，上面布满了生物传感器、微通道和微反应室。
生物芯片的工作原理主要是通过生物传感器对生物样本中的靶分子进行识别和检测，然后将检测结果通过微电子装置进行信号放大和转换。
其主要的技术包括微流控技术、免疫传感技术、DNA芯片技术和微电极技术等。
微流控技术是生物芯片的基础技术之一，通过微型通道的设计和控制，实现对生物样本的精确控制和分析。
微流控技术可以将样本分为微小的部分，使每个部分的浓度和反应时间得到精确控制，从而提高检测的准确性和灵敏度。
免疫传感技术是生物芯片中常用的一种检测技术，通过生物材料和抗体的特异性反应，实现对靶分子的检测和定量分析。
DNA芯片技术则是利用DNA序列的互补性进行靶分子的检测和识别，可以实现高通量的基因检测和表达分析。
微电极技术则是通过微小的电极和光电二极管等检测装置，将生物样本的信号转化为电信号，进而进行分析和检测。
生物芯片技术的应用非常广泛，可以应用于医学诊断、药物筛选、环境监测等领域。
在医学诊断方面，生物芯片可以实现对病原体的快速检测，提高临床诊断的准确性和敏感性。
在药物筛选方面，生物芯片可以用于筛选药物靶点、评价药物效果，实现个体化的医疗治疗。
在环境监测方面，生物芯片可以检测水质、空气质量等各种环境污染物，对环境保护和生态安全具有重要意义。
与传统的生物学实验方法相比，生物芯片技术具有许多优势。
首先，生物芯片可以实现对大样本数量的高通量分析，提高检测的效率和速度。
其次，生物芯片可以进行实时监测和连续测量，实现对样本的快速响应和跟踪。
此外，生物芯片减小了实验的体积和成本，并降低了实验操作的难度和复杂性。
然而，生物芯片技术也存在一些挑战和难点。
首先，生物芯片的制备和加工工艺相对复杂，需要精细的加工和装配技术，制造成本相对较高。
其次，对于复杂样本的检测和分析，生物芯片可能需要多个传感器和反应室，增加了系统的复杂性和难度。
微流控芯片技术的原理及其应用
微流控芯片技术的原理及其应用随着生物医学技术的逐步发展，微流控芯片技术逐渐成为研究生物科学领域的重要工具。
微流控芯片技术是一种将液体微小化的技术，通过微通道和微结构控制液体的流动，从而实现对微小的流体样本的操控和分析。
本文将详细介绍微流控芯片技术的原理和应用。
一、微流控芯片技术的原理微流控芯片技术是一种基于微纳米尺度结构和微通道的流体控制技术。
它通过制造微通道和微结构，将液体分割成非常微小的体积，从而控制和操作微小的流体体系。
微流控芯片可以分为两个部分：微通道和微结构。
微通道是用于控制微小液滴和海绵多孔的通道系统。
海绵多孔是指微通道中的特殊结构，可以用来创建离散液滴或分隔通道。
微流控芯片通过这些微通道和微结构来控制微小液滴或微小的液体分散体系。
对于微流控芯片来说，微小液滴是非常重要的元素。
微小液滴是由小于100微米的液体球体组成的。
由于它们是液体，所以微小液滴之间可以互相合并，而且通过电极可以控制液滴的聚合和分离状态。
在微流控芯片中，微小液滴通常是由吸头和压力控制系统产生的。
微流控芯片技术的原理一般分为三个步骤：样品输入、反应和检测。
首先，将样品输入到微流控芯片上。
其次，样品会经过一系列的反应过程，例如混合、稀释、分隔等等。
最后，对反应后的产物进行检测。
二、微流控芯片技术的应用微流控芯片技术在生物医学领域中有着广泛的应用。
它能够用于细胞分数、免疫分析、基因测序等方面的研究。
下面将具体介绍微流控芯片技术的应用。
1、细胞分数微流控芯片技术可以用于隔离细胞并分析细胞中的生物大分子。
这种技术通过一个海绵多孔来将细胞定位在特定位置，并将细胞从其他细胞中隔离出来。
这种技术对于医学研究很有价值，可以用来研究细胞的分子成分和机制，在探索生物性能和疾病诊断方面具有广阔的应用前景。
2、免疫分析免疫分析是一种常用的免疫学方法。
在传统的免疫分析中，技术人员需要进行样本的制备和处理，这个过程常常需要耗费大量的样品和试剂。
微流控与生物芯片技术的应用
微流控与生物芯片技术的应用在当今信息化的世界中，生物科技的发展已经成为了人们关注的焦点。
其中，微流控与生物芯片技术正是在生物科技领域中占据着重要的地位。
微流控技术微流控技术是指通过微小的管道内制造细微的流体控制系统，在微观尺度下控制毫升、微升甚至纳升级别的微小流体。
由于微流体的各个方面的特性，如流动性、混合性、传热性等都有很大优势，巨大地推进了生物科技的发展。
微流控技术有许多应用场景，例如基础研究、医疗、环保和食品安全等。
其中，生命科学领域的应用已比较成熟，包括细胞生长、药物筛选、疾病诊断和基因测序等。
在基因测序方面，微流控芯片可以利用基因突变及细胞癌变等方面的差异来对癌症患者进行个性化治疗，具有重要的临床应用价值。
生物芯片技术生物芯片技术是指将生物样本制成芯片格式，通过芯片上的微小反应池进行生化反应，分析分子生物学、基因表达、蛋白质功能等信息。
与传统的磁珠、离心和共沉淀等技术相比，生物芯片技术具有精准性和高通量性等优点，因此，在快速便捷的分析和检测方面具有广泛的应用。
生物芯片技术应用于人类许多疾病的研究，如癌症、心血管疾病等，能够识别疾病的基因突变或者病毒感染，并预测治疗效果以及治疗方案。
在医学诊断领域，生物芯片被广泛应用于病毒感染的检测、指纹识别等方面，具有极大的潜力和广泛的市场需求。
生物芯片技术通过集成各种生物传感器和智能算法，可以将分析速度提高到惊人的程度，比如在同一时间内，可以检测上万个基因在一个样品的表达水平，并从中找出与该疾病相关的基因。
这种高通量性的特点，使生物芯片技术可以实现快速精准的病毒检测、基因测序分析等，对临床医学等领域的发展具有重要意义。
生命科学已成为当今世界中高速发展的领域之一，由微流控技术和生物芯片技术的发展为其提供了强大的技术支撑。
微流控技术和生物芯片技术的不断完善与创新，有望为基础研究、疾病预测和治疗等方面提供更为可靠、准确和高效的技术支持，推动益人类健康和高质量生命的发展。
微流控生物芯片技术在临床检测中的应用
微流控生物芯片技术在临床检测中的应用随着人们健康意识的提高，医疗技术也在不断地发展。
现在，生物芯片技术已经被广泛地应用于医疗领域中，而微流控生物芯片技术更是在临床检测中发挥着越来越重要的作用。
微流控生物芯片技术是一种将生物样品以微小的体积通过微型管道进行运动、混合、分离、检测等生化过程的技术。
相比传统的生化分析方法，微流控生物芯片技术具有分析速度快、精度高、消耗样品少、自动化程度高等优点。
因此，这种技术在生物医学领域中的应用前景非常广阔。
首先，微流控生物芯片技术在临床药物研发中能够起到很大的作用。
传统的药物研发流程相对较慢，而且需要大量的实验验证。
但是，采用微流控生物芯片技术，可以用更快的速度进行药物筛选，极大地缩短药物研发时间，同时也能够提高研究的精度和准确性。
其次，微流控生物芯片技术在临床诊断中也有着广泛的应用。
以传统的PCR技术为例，需要多次繁琐的手工操作，而且往往需要较长时间。
采用微流控生物芯片技术，能够将PCR反应过程压缩到微型反应室中进行，不仅能够节约时间和成本，而且可以提高结果的准确性。
此外，微流控生物芯片技术还可以用于检测肿瘤标志物、病原菌、基因突变、蛋白质组等方面。
比如，在肿瘤标志物检测中，微流控生物芯片技术可以利用芯片的微小反应室以及先进的信号检测系统，从微小血样中检测出很低浓度的肿瘤标志物。
而在病原菌检测方面，这种技术可以非常准确地检测微小体积的样品中是否存在有害的微生物，从而保障医疗卫生质量，有效地防止疫病传播。
综上所述，微流控生物芯片技术在临床检测中有着广泛的应用前景。
目前，该技术仍在不断地发展和完善中，同时也带动了生物医学领域的不断创新和进步。
相信在不久的将来，这种技术将成为临床诊断和研究领域中不可或缺的重要工具。
细胞生物学实验技术的发展趋势
细胞生物学实验技术的发展趋势随着科学技术的不断进步，生物学这一学科不断发展壮大。
其中，细胞生物学作为生物学的分支学科之一，其重要性在近年来越来越得到人们的关注。
在研究细胞的过程中，实验技术的发展也起到了至关重要的作用。
在本文中，我们将探讨细胞生物学实验技术的发展趋势。
一、单细胞分离技术单细胞分离技术是指通过分离单个细胞使其成为可以被研究和操作的独立实体。
目前这种技术已经得到了广泛的应用，比如可以用于单细胞RNA测序，单细胞蛋白质测序等领域。
接下来我们将探讨几种主要的单细胞分离技术。
1. 流式细胞分选术这是一种基于细胞表面分子的特异性性质进行分选的技术。
通过流式细胞仪可使细胞按照其表面特异性标志物进行分类，完成单细胞分选。
这种技术可以处理大量的样本，并具有精细度高、操作灵活的特点。
2. 微流控芯片技术微流控芯片技术是一种利用微型通道和微流体控制技术实现单细胞操作和分选的技术。
在一个微型芯片内的通道中，可以通过诱导力、化学力、电力等手段，完成对单个细胞的分离和培养。
3. 磁珠免疫分选技术这是一种利用磁性珠子将指定表面分子标记的细胞进行筛选的技术。
该技术能够高效地分选出含有指定表面分子的单个细胞，并且比较适合于大规模的实验。
二、生物荧光技术在细胞生物学领域，生物荧光技术也是一个重要的实验技术。
它主要利用细胞内染色体、细胞器等组成部分的特性，进行捕获、探测和成像。
这种技术能够在线性、不侵入和实时的情况下，获取关于生物样本的信息。
在此方面主要有以下几种技术。
1. 荧光融合技术荧光融合技术是一种将荧光蛋白与目标蛋白进行融合的技术。
这种技术可以用于追踪靶分子在细胞中的分布和运动过程。
2. 荧光共振能量转移技术荧光共振能量转移技术是一种利用电子能级的荧光共振，使一条激发态的分子发射能量从一个分子转移到另一个分子的技术。
该技术对于测量蛋白质间的相互作用和距离的关系有着较好的应用价值。
3. 光片层析术光片层析术是一种将小颗粒物分离并进行排序的制备技术。
荧光免疫层析技术的原理与进展
荧光免疫层析技术的原理与进展荧光免疫层析技术（Fluorescence immunoassay）是一种通过利用特定抗原与抗体之间的特异性结合来检测和定量分析生物标志物的技术。
该技术结合了免疫学和荧光分析技术，具有高灵敏度、高选择性、快速性和准确性等优点。
荧光免疫层析技术的原理基于免疫体系，其中一种成分是特异性结合抗原的抗体，另一种成分是标记有荧光染料的抗体。
荧光染料发射的荧光信号与所检测的生物标志物的浓度成正比，因此可以通过测量荧光信号的强度来定量分析目标物质的浓度。
荧光免疫层析的步骤包括样品预处理、荧光标记、免疫反应和信号检测等。
首先，样品需要进行预处理，包括去除干扰物和处理样品矩阵，以提高分析的准确性和灵敏度。
然后，通过将荧光染料与特异性抗体偶联，将其标记到待测分析物上。
标记过的抗体用于与待测物质发生特异性结合。
在免疫反应中，样品和荧光标记的抗体混合反应，使待测物质与标记抗体发生结合。
最后，通过荧光检测设备检测荧光信号的强度，从而定量分析待测物质的浓度。
荧光免疫层析技术在医学、生物学、环境监测等领域得到了广泛的应用与进展。
在临床诊断中，荧光免疫层析技术可以用于检测病毒、细菌、代谢产物等生物标志物，帮助医生进行疾病的早期筛查和诊断。
在生物学研究中，该技术可以用于定量检测蛋白质、细胞因子等生物分子，研究其功能和作用机制，为生物学研究提供重要的实验手段。
在环境监测和食品安全领域，荧光免疫层析技术可以用于检测污染物和有害物质，提高检测速度和准确性。
近年来，随着纳米技术、微流控技术和生物传感器技术的发展，荧光免疫层析技术也得到了一系列的改进和创新。
例如，通过利用纳米颗粒标记抗体，增强荧光信号的强度和稳定性，提高了荧光免疫层析技术的灵敏度和稳定性。
此外，微流控技术的应用可以实现样品的自动化处理和分析，提高了分析的速度和准确性。
生物传感器技术的引入，使荧光免疫层析技术具有更大的灵活性和可扩展性，为多种分析需求提供了解决方案。
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45.China Medical Device Information | 中国医疗器械信息现场快速检验（Point-of-Care Test ，POCT ）是体外诊断行业增长最快的领域。
被广泛使用的血糖仪即为最成功的POCT 产品，占有整个POCT 市场60%以上的份额[1]。
目前市场上最有代表性的两种便携式POCT 技术是胶体金（或荧光）免疫层析技术和荧光免疫毛细技术。
前一种以多家中国公司的产品为代表，后一种以美国Alere 公司的Triage 产品系列为代表。
免疫层析技术起始于上世纪80年代初，而Triage 产品的开发始于上世纪90年代，都已有了二三十年的历史[2]。
近两年来，随着精准力医疗的大力推进，对精准诊断关键因素之一的医疗检测仪器的性能提出了全新的要求。
在此大背景下，，生物芯片技术和微流控技术两大关键技术在医疗检测行业迅速发展。
理邦m16磁敏免疫分析系统（生产单位：深圳市理邦精密仪器股份有限公司，简称理邦）是其中一个具有代表性的产品。
它把微阵列生物芯片集成进了微流体器件里面。
其生物芯片是一从层析荧光到微流控生物芯片——现场快速检验（POCT ）技术基础概述单万水 深圳市第三人民医院 （深圳 518112）文章编号：1006-6586(2017)07-00 中图分类号：O657 文献标识码：A收稿日期：2017-02-18作者简介：单万水，教授，主任技师。
广东省临床重点专科检验科主任，深圳市第三人民医院院士工作站主任，深圳市医学会检验专委会副主任委员，深圳市医师协会检验分会副会长。
内容提要： 文章对目前现场快速检验（Point-of-Care Testing ，POCT ）市场上的各种主流技术进行概述，集中讨论POCT 市场占比最大的技术平台—免疫层析技术，根据其工作原理和制造过程，从基本的物理、化学原理出发讨论影响检测结果的主要因素，并从生产、应用层面探讨实现可靠检测的关键手段，进而针对目前精准医疗、个性化医疗的市场需求探讨POCT 技术的发展方向和最新出现的技术平台—基于生物芯片的微流控技术，最后就POCT 市场上的现有及未来技术平台进行综合分析。
关 键 词： 现场快速检验（POCT ） 免疫层析技术 微流控技术 生物芯片From Lateral Flow Immunoassay to Microfluidic Biochip ——An Overview of Key POCT TechnologiesSHAN Wan-shui The Third People’s Hospital of Shenzhen (Shenzhen 518112)Abstract:The mainstream point-of-care test (POCT) technologies are reviewed. The lateral flow immunoassay (LFIA) technology which hasthe largest market share is discussed. The key factors in LFIA’s manufacturing processes and application affecting the test results are investigated based on the physical and chemical principles governing its operation. The means to improve the manufacturing process and precautions in handling the LFIA to ensure reliable test results is explored. Two key technologies, the microfluidic device and microarray biosensor which are being adopted by new POCT assays to meet the needs for precision medicine and personalized medicine, are examined.Key words:POCT, lateral flow immunoassay, microfluidics, biochip.46中国医疗器械信息 | China Medical Device Information个多层纳米膜结构的微阵列、是通过大规模集成电路工艺制造的。
相对于传统意义上以玻璃片为基底、以荧光材料为标记物的基因芯片，m16上的生物芯片是在单晶硅片上实现的、通过量子力学现象传感的技术。
其微流控技术依赖于机械机构对被测样本和测试试剂实现精确控制。
本文对层析荧光技术、毛细荧光技术和微流控生物芯片技术进行详细分析，对3个平台的技术特点进行讨论，并对它们的发展方向和应用进行探索。
1.免疫层析技术1.1技术原理图1所示的是胶体金免疫层析测试卡的结构，由样品垫、胶体金结合垫、硝酸纤维素膜、吸水垫构成。
其中，胶体金颗粒上修饰有检测抗体，硝酸纤维素膜上有检测线和控制线。
检测时，被测样本在毛细作用下通过胶体金标记的抗体，形成抗原抗体胶体金复合物，复合物继续爬行，通过包被有捕捉抗体的检测线，形成双抗体夹心胶体金复合物，在检测线处呈现色带。
过量的胶体金抗体流过检测线，在之后的控制线上形成胶体金免疫复合物，呈现色带。
需要注意的是，控制线上色带的形成与被检测物质的存在与否无关，即使样本里没有被检测的物质，控制线也会显现。
这种“捕捉抗体-抗原-检测抗体-胶体金纳米颗粒标记物”复合结构被称为双抗体夹心结构，胶体金为指示标记。
最典型的产品是“早早孕”试纸条。
检测线上的信号强度也即测试结果可以由公式（1）计算[3]：公式（1）：R ∝kt 2[Ab][Ag]其中k 是一个和抗体-抗原之间亲和力有关的常数，t 是样本在反应区的驻留时间，Ab 是检测线上捕捉抗体的浓度，Ag 是被测样本中被测物质的浓度。
常数k 也和反应条件如pH 值、温度等有关系。
从化学反应的角度来看，温度从25˚C 降低到15˚C ，反应速度降低50%。
抗体抗原反应的最佳温度是37˚C ，一般1~2h 就可以达到峰值。
如果在4˚C 反应，达到峰值时间会长达12~24h 。
所以检测过程应该尽量保持在同一个温度下进行，否则室内温度的变化会带来很大的影响。
当样本体积一定时，样本在反应区的驻留时间t 和流速成反比。
流速增加一倍，信号值就降低75%。
样本的流动速度可以由公式（2）计算[4]：公式（2）：v(x) = κΔp/(μϕx)其中κ是所用材料（这里主要指硝酸纤维素膜）的渗透率，Δp 是和毛细作用有关的拉普拉斯压力，μ是样本黏度，ϕ是材料的孔隙度，x 是位置。
样本的黏度μ是影响检测物流速的重要参数。
黏度越大，流速越慢，被测物质就有更多的时间和捕捉抗体进行反应，结果就更明显。
换言之，即使不同的样本中被测物质浓度相同，但是结果会和样本的黏稠度有关系，测试结果可能有很大不同。
公式（2）中另一个重要参数是x ，也就是检测线的位置。
x 值越小，检测线离样品垫越近，流速也就越大，这样反应上的被测物质就越少。
由此可见，检测线的位置是一个非常重要的设计参数，制造过程中需要严格的控制。
值得注意的是，检测线的位置是相对于样品垫和胶体金结合垫来讲的，所以除了需要精密控制检测线在硝酸纤维素膜上的位置，对样品垫和胶体金结合垫尺寸和位置的控制同样重要。
如果样本量发生变化，则公式（1）中的驻留时间t也会发生变化。
尤其是当样本量太少时，样本很快的流出反应区，被测物质没有足够的时间和捕捉抗体进行反应、结合，导致测试结果低于正常期望值。
当样本量过多时，吸水垫可以起到一定的调节作用，饱和以后可以有效阻挡样本的继续流动。
但是，驻留在检测线上没有流走的被检测物还会继续和捕捉抗体反应，直到结合过程和分解过程达到一个平衡。
但是，这个平衡是和其他条件如温度有关系的。
在这种情况下，严格的控制检测时间和环境温度就变得非常重要。
1.2材料和制造过程对检测性能的影响图1所示的免疫层析器件看似非常简单，但实际上却是一个非常复杂的结构，影响其检测结果稳定性和重复性的因素众多，这也是多年来此项技术只用在定性判定上的原因。
技术储备雄厚的公司已经有了定量检测产品，但是批间差、卡间差仍是一个大的挑战。
如果用S表示检测结果信号强度，S可以用表达式（3）描述：表达式（3）：S = f [Y（样品垫），J（胶体金垫），Jj（胶体金颗粒），X（硝酸纤维素膜），Ab（抗体），M（制造过程）]即最后的信号强度受样品垫、胶体金垫、胶体金颗粒、硝酸纤维素膜、抗体、以及制造过程的影响。
而以上列举的每一项变量又受多个因素的影响。
举例来讲，影响样品垫特性的因素可以由表达式（4）描述：表达式（4）：Y（样品垫）= fy（材料，蛋白质，缓冲剂，洗涤液，表面活性剂，黏度调节剂，制造过程）表达式（4）中的材料可以是纤维素膜，也可以是网状织物，但它们有很大差别。
举例来讲，网状织物可以较薄、机械强度较好、耐拉、存留体积（可保留液体体积）小，但是确难以在上面加足够量的化学试剂来调节样本中的蛋白成分、pH值、离子强度、黏稠度等，也就是说表达式（4）右侧中的第2、3、4、5、6项的调节就比较困难。
纤维素滤膜的特点和网状织物几乎完全相反：较厚、存留体积大、强度小、很难操作。
因为存留体积大，所以有足够的空间来在上面修饰各种化学试剂。
组装对纤维素滤膜是一个关键的因素，必须确保和胶体金颗粒垫有良好、一致的接触，否则会严重影响被测样本向前流动，这就是表达式（4）右侧第七项（制造过程）所涉及的内容。
表达式（4）中的第二项（蛋白质）的主要作用是封闭样品垫、防止样本中的被测物质因为非特异吸附力而被吸附在样品垫上、不能被检测线检测。
另外，如果样品垫上封闭蛋白的量和配比合适的话，硝酸纤维素膜就可以不必再封闭，使成本和操作复杂性大大降低。
同一个测试卡产品可能被用来测试多种不同的样本，例如血清、血浆、全血、甚至尿液，缓冲液可以被用来调节样本的pH值，在一定程度上使不同样本中的同种被测物质在检测线上的反应性保持一致。
举例来讲，尿液的pH值可以在5~10的大范围内变化，同样浓度的被测物质在不同的pH值环境下的反应性会有很大不同，缓冲试剂可以比较有效的降低这种变化。
表达式（4）中右侧第六项（黏度调节剂）的作用非常重要。
由公式（2）可知，样本的黏度对样本流动的速度有直接影响，而由表达式（1）又可以看出样本流动的速度对检测结果的影响又进一步放大。