α-酮戊二酸脱氢酶(α-KGDH)活性检测试剂盒说明书 紫外分光光度法
α-羟丁酸脱氢酶(HBDH)测定试剂盒(α-酮丁酸底物法)产品技术要求百奥泰康
α-羟丁酸脱氢酶（HBDH）测定试剂盒（α-酮丁酸底物法）适用范围：该试剂盒用于体外定量测定人血清中α-羟丁酸脱氢酶的活性。
1.1 产品规格试剂1:60mL×5，试剂2:12mL×5；试剂1:60mL×5，试剂2:60mL×1；试剂1:60mL×2，试剂2:12mL×2；试剂1:60mL×2，试剂2:24mL×1；试剂1:80mL×4，试剂2:16mL×4；试剂1:80mL×4，试剂2:64mL×1；试剂1:80mL×2，试剂2:16mL×2；试剂1:80mL×2，试剂2:32mL×1；试剂1:50mL×3，试剂2:10mL×3；试剂1:50mL×3，试剂2:30mL×1；试剂1:40mL×3，试剂2:24mL×1；试剂1:50mL×4，试剂2:20mL×2；试剂1:50mL×4，试剂2:40mL×1；试剂1:60mL×1，试剂2:12mL×1；试剂1:50mL×1，试剂2:10mL×1；试剂1:40mL×1，试剂2:8mL×1；试剂1:500mL×1，试剂2:100mL×1；试剂1:5000mL×1，试剂2:1000mL×1；1.2 组成成分该试剂盒由试剂1（R1）和试剂2（R2）组成。
1.2.1试剂组成试剂1: Tris缓冲溶液≥20.0mmol/Lα-酮丁酸≥3.0mmol/L试剂2：烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NADH）≥1.0mmol/L2.1 外观a) R1应为无色溶液，无混浊，无未溶解物。
b) R2应为无色溶液，无混浊，无未溶解物。
2.2 净含量液体组分不少于标示值。
α—羟丁酸脱氢酶(HBDH)测定试剂盒(α—酮丁酸底物法)产品技术要求derui
α-羟丁酸脱氢酶（HBDH）测定试剂盒
（α-酮丁酸底物法）
2.1外观和性状
外观和性状应符合表2要求。
表2 试剂盒内各组分的外观性状
2.2试剂空白
2.2.1试剂空白吸光度
试剂以生理盐水为空白时，在温度37℃、波长340nm，光径1.0 cm 条件下，吸光度≥ 1.1。
2.2.2试剂空白吸光度变化率
试剂以生理盐水为空白时，在温度37℃、波长340nm，光径1.0 cm 条件下，吸光度变化率≤0.002。
2.3分析灵敏度
试剂盒测试浓度为100U/L被测物时，吸光度变化率≥0.003。
2.4线性范围
2.4.1试剂盒在25 ~750U/L区间（范围）内，其回归系数r≥0.990。
2.4.2相对偏差或绝对偏差应符合表3 要求。
表3 相对偏差或绝对偏差
2.5精密度
2.5.1试剂盒重复性CV 值应≤5.0%。
1
2.5.2试剂盒批间相对极差（R）应≤10.0%。
2.6准确度
采用比对试验，相关系数r2≥0.95，相对偏差应在±10%范围内。
2.7液体装量
试剂盒不同规格的净含量应不少于其标示量。
2。
α-HBDH,α-羟丁酸脱氢酶测定试剂盒(α-HBDH)检测标准操作规程
1、方法依据：深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司α-羟丁酸脱氢酶(α-HBDH)测定试剂盒（DGKC法）测定方法2、适用范围：适用于人血清或血浆α-羟丁酸脱氢酶(α-HBDH)的测定。
3、试剂仪器：3.1 试剂：深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司原装试剂盒。
3.2未开启的试剂盒避光保存于2℃～8℃有效期为一年。
试剂开瓶后应避光保存，在2℃～8℃可稳定28天。
试剂不可冰冻。
3.3 仪器：迈瑞BS-2000M全自动生化分析仪.4、操作程序4.1方法原理在α-HBDH催化作用下，α-酮丁酸被还原为α-羟丁酸，同时NADH被氧化为NAD+。
NAD+的生成引起340 nm处吸光度下降，下降速率与样品中α-HBDH的活性成正比。
α-HBDHα-酮丁酸 + NADH + H+ α-羟丁酸 + NAD+4.2样本要求新鲜血清、肝素抗凝或EDTA抗凝血浆，采集后及时测定，应避免溶血和污染。
样本于2℃～8℃保存可稳定3天。
4.3上机操作4.3.1试剂装载、校准、样品和质控血清分析操作详见“《迈瑞BS-2000M全自动生化分析仪标准操作、维护、保养规程》”。
4.3.2 校准：4.3.2.1 标准液的准备：校准品使用深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司配套冻干品，按说明书要求稀释后分装，-20℃冷冻保存，用前提前15分钟从冰箱中取出，复溶到室温后上机检测。
4.3.2.2 校准程序：首次使用校准。
当有以下情况时需重新校准：1）换试剂批号或出现质控漂移时；2）当仪器做完保养后；3）仪器进行零件更换时。
每次试验前用准备好的校准品进行校准，校准通过后进行检测。
4.3.2.3 质控：在标本开始之前做质控，质控通过后方能进行标本的检测。
4.3.3 测试基本参数4.4参考范围72～182 U/L（注：各实验室应有自己的参考范围。
）4.5 方法评价线性范围：10～1000U/L。
当样本测定值超过上限时，应将样本用生理盐水稀释，重新测定，结果乘以稀释倍数。
α-羟丁酸脱氢酶(HBDH)测定试剂盒(α-酮丁酸底物法)产品技术要求kemei
α-羟丁酸脱氢酶（HBDH）测定试剂盒（α-酮丁酸底物法）适用范围：本试剂盒用于体外定量测定人血清中α-羟丁酸脱氢酶（HBDH）的活性。
1.1包装规格试剂1:2×60ml 试剂2:2×15ml试剂1:5×60ml 试剂2:5×15ml1.2主要组成成分试剂1主要组分：α-酮丁酸钠 4.5mmol/L试剂2主要组分：NADH 1.45 mmol/L2.1外观2.1.1试剂1应为无色溶液，无混浊，无未溶解物。
2.1.2试剂2应为无色溶液，无混浊，无未溶解物。
2.2装量液体试剂的净含量应不少于标示值。
2.3试剂空白2.3.1试剂空白吸光度：α-HBDH试剂盒在波长340nm处测定试剂的吸光度值，应不小于1.1000。
2.3.2试剂空白吸光度变化率：α-HBDH试剂盒在波长340nm处测定试剂的空白吸光度变化率，每分钟的变化值应不大于0.002。
2.4分析灵敏度测试120U/L α-羟丁酸脱氢酶时，吸光度变化率应不小于0.01。
2.5准确度用本公司α-HBDH试剂盒和已上市公司α-HBDH试剂盒同时测定40个临床样本，用线性回归方法计算两组结果的线性相关系数（r2）应不小于0.95，在[25，1000]U/L区间内，线性相对偏差应不超过±10%。
2.6精密度2.6.1重复性重复测试（180±18）U/L的样本，所得结果的变异系数CV应不大于5%；2.6.2批间差测试（180±18）U/L的样本，所得结果的批间相对极差应不大于10%。
2.7线性范围α-HBDH试剂盒在[25,1000]U/L范围内，线性相关系数（r）应不小于0.990；a)在[25,100]U/L区间内，线性绝对偏差应不超过±10U/L；b)在（100,1000]U/L区间内，线性相对偏差应不超过±10%。
2.8稳定性原包装的试剂盒在2℃～8℃避光保存，有效期为12个月。
谷氨酸脱氢酶(GLDH)测定试剂盒(α-酮戊二酸底物法)产品技术要求百奥泰康
谷氨酸脱氢酶（GLDH）测定试剂盒(α-酮戊二酸底物法)适用范围：该产品用于体外定量测定人血清或血浆中谷氨酸脱氢酶的活性。
1.1 产品规格试剂1:60mL×2，试剂2:20mL×2 ；试剂1:60mL×1，试剂2:20mL×1；试剂1:45mL×2，试剂2:15mL×2；试剂1:45mL×1，试剂2:15mL×1；试剂1:30mL×1，试剂2:10mL×3；试剂1:30mL×2，试剂2:10mL×6；试剂1:300mL×1，试剂2:100mL×1；试剂1:15mL×1，试剂2:5mL×1；试剂1:3000mL×1，试剂2:1000mL×1；192人份(试剂1:51mL，试剂2:17mL)；1.2组成成分2.1 外观试剂R1为无色澄清液体；试剂R2为无色或淡黄色澄清液体.2.2 净含量液体试剂的净含量应不少于标称量。
2.3 试剂空白2.3.1试剂空白吸光度空白吸光度应≥0.8000。
2.3.2 空白吸光度变化率试剂空白吸光度变化率（ΔA/min）应≤0.02。
2.4 分析灵敏度浓度为30 U/L时，其吸光度变化率应≥0.00502.5线性在[1,120] U/L范围内，线性相关系数r≥0.990，在[1,40] U/L范围内绝对偏差应不超过4 U/L，在(40,120] U/L范围内相对偏差应不超过±10%。
2.6精密度变异系数（CV％）应≤8％。
2.7 批间差不同批号之间测定结果的相对极差应≤10%。
2.8准确度回收试验：回收率90%-110%。
2.9稳定性原包装试剂，在2℃～8℃下有效期为12个月，取失效期的试剂盒检测其试剂空白、分析灵敏度、线性、精密度、准确度应分别符合2.3、2.4、2.5、2.6、2.8的要求。
谷氨酸脱氢酶测定试剂盒(α-酮戊二酸底物法)产品技术要求baiding
谷氨酸脱氢酶测定试剂盒（α-酮戊二酸底物法）适用范围：用于体外定量测定人血清中谷氨酸脱氢酶的含量。
1.1 规格1.2 组成：2.1 外观2.1.1试剂1：无色液体，无浑浊，无不溶物。
2.1.2试剂2：无色至淡黄色液体。
2.1.3包装外观应整洁，标签字迹清晰，不易脱落。
2.2 净含量液体试剂的净含量不低于标示体积。
2.3 试剂空白2.3.1试剂空白吸光度试剂空白吸光度≥0.8。
2.3.2试剂空白吸光度变化率试剂空白吸光度变化率（ΔA/分）≤0.02。
2.4 分析灵敏度样本浓度为30U/L时，吸光度变化率（ΔA/分）≥0.0030。
2.5 线性在[4，120] U/L的范围内，线性相关系数r≥0.990。
测试浓度在[4，40] U/L时，绝对偏差应不超过±4 U/L；测试浓度在（40，120] U/L时，相对偏差应不超过±10%。
2.6 精密度2.6.1重复性用高、低2个浓度的样本测试试剂盒，各重复测试10次，其变异系数（CV）应不大于10%。
2.6.2批间差用样本分别测试3个不同批次的试剂盒，每个批次测试3次，其相对极差（R）应不大于10%。
2.7 准确度与已上市产品进行对比试验，在[4，120] U/L的范围内，线性相关系数r≥0.975。
测试浓度在[4，40] U/L时，绝对偏差应不超过±4 U/L；测试浓度在（40，120] U/L时，相对偏差应不超过±10%。
2.8 效期稳定性原包装试剂盒在2℃～8℃密封避光保存条件下有效期为12个月。
有效期满后3个月内测试，应满足2.3、2.4、2.5、2.6.1、2.7的要求。
转氢酶-2活性检测试剂盒说明书 紫外分光光度法
转氢酶-2活性检测试剂盒说明书紫外分光光度法注意：正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定。
货号：BC3260规格：50T/24S产品内容：提取液：液体50mL×1瓶，4℃保存；试剂一：粉剂×2瓶，-20℃保存；临用前加入6mL试剂三备用，可分装后-20℃保存，但避免反复冻融。
试剂二：粉剂×2瓶，4℃保存；临用前加入10mL试剂三备用。
试剂三：液体50mL×1瓶，4℃保存；产品说明：转氢酶位于线粒体的内膜上，又称为线粒体复合体六，催化NADH+NADP+和NAD++NADPH相互转化，调节线粒体NAD(H)和NADP(H)平衡。
把逆向反应称为TH-2，催化NADPH和NAD+生成NADP+和NADH。
NADH和NADPH均在340nm有特征吸收，因此TH催化的转氢反应不能导致340nm吸光度发生变化。
用人工合成底物3-乙酰吡啶腺嘌呤二核苷酸（APAD+）替代NAD+，TH-2催化APAD+还原生成APADH，APADH在375nm有特征光吸收，测定375nm光吸收的增加速率，来计算TH-2活性。
需自备的仪器和用品：紫外分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL石英比色皿、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。
操作步骤：一、转氢酶-2的提取(1)称取约0.1g组织或收集500万细胞，加入1.0mL提取液，用匀浆器或研钵于冰上匀浆。
(2)4℃600g离心10min。
(3)将上清液移至另一离心管中，4℃11000g离心15min。
(4)上清液即胞浆提取物，可用于测定从线粒体泄漏的转氢酶-2（此步可选做，可以判断线粒体提取效果）。
(5)在沉淀中加入800μL提取液，超声波破碎（功率20％，超声5秒，间隔10秒，重复15次），用于转氢酶-2酶活性测定，并且用于蛋白含量测定。
二、测定步骤：1、分光光度计预热30min以上，调节波长至375nm，蒸馏水调零。
2、样品测定：在1mL石英比色皿中分别加入试剂名称测定管对照管试剂一400-试剂二400400样品100100试剂三100500将上述试剂分别加入1mL石英比色皿后充分混匀，于375nm处测定初始吸光值A1，迅速将比色皿连同反应液放入37℃（哺乳动物）或25℃（其他物种）水浴锅中水浴3min，然后迅速拿出擦干测定3min后的吸光度A2，计算△A测定=A2测定-A1测定，△A对照=A2对照-A1对照，△A=△A测定-△A对照。
人酮戊二酸脱氢酶(-KGDHC)酶联免疫吸附测定试剂盒
人α酮戊二酸脱氢酶（α-KGDHC）酶联免疫吸附测定试剂盒使用说明书本试剂盒仅供体外研究使用!预期应用ELISA法定量测定人尿液或其它相关生物液体中α-KGDHC含量。
实验原理用纯化的抗体包被微孔板，制成固相载体，往包被抗α-KGDHC抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗α-KGDHC抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB 显色。
TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的α-KGDHC呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。
试剂盒组成及试剂配制1.酶联板：一块（96孔）2.标准品（冻干品）：2瓶，每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml，盖好后静置10分钟以上，然后反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为100ug/ml，做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释）后，分别稀释成100ug/ml，50ug/ml，25ug/ml，12.5ug/ml，6.25ug/ml，3.12 ug/ml，1.56ug/ml，样品稀释液直接作为标准浓度0ug/ml，临用前15分钟内配制。
如配制50 ug/ml标准品：取0.5ml（不要少于0.5ml）100ug/ml的上述标准品加入含有0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3.样品稀释液：1×20ml。
4.检测稀释液A：1×10ml。
5.检测稀释液B：1×10ml。
6.检测溶液A：1×120μl（1:100）临用前以检测稀释液A1:100稀释，稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制（100μl/孔），实际配制时应多配制0.1-0.2ml。
如10μl检测溶液A加990μl检测稀释液A的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制。
7.检测溶液B：1×120μl/瓶（1:100）临用前以检测稀释液B1:100稀释。
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α-酮戊二酸脱氢酶（α-KGDH）活性检测试剂盒说明书紫外分光光度法
注意：正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定。
货号：BC0710
规格：50T/48S
产品内容：
试剂一：液体60mL×1瓶，4℃保存；
试剂二：液体0.6mL×1支，-20℃保存；
试剂三：液体55mL×1瓶，4℃保存；
试剂四：粉剂×1支，4℃保存；
试剂五：粉剂×1支，4℃保存；
试剂六：粉剂×1支，-20℃保存；
试剂七：粉剂×1支，-20℃保存；
试剂八：粉剂×1支，-20℃避光保存。
临用前加入2mL双蒸水充分混匀待用，用不完的试剂仍-20℃保存。
工作液的配制：临用前把试剂四、试剂五、试剂六、试剂七转移到试剂三中混合溶解待用。
产品说明：
α-KGDH（EC1.2.4.2）广泛存在于动物、植物微生物和培养细胞的线粒体中，是三羧酸循环调控关键酶之一，催化α-酮戊二酸氧化脱羧生成琥珀酰辅酶A。
α-KGDH催化α-酮戊二酸、NAD+和辅酶A生成琥珀酰辅酶A、二氧化碳和NADH，NADH在340nm有特征吸收峰，以NADH的生成速率表示α-KGDH活性。
需自备的仪器和用品：
紫外分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1mL石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
操作步骤：
一、α-KGDH的提取
称取约0.1g组织或收集约500万细胞，加入1mL试剂一和10uL试剂二，冰浴用匀浆器或研钵充分研磨，4℃11000g离心10min，取上清，置冰上待测。
二、测定步骤
1.分光光度计预热30min以上，调节波长到340nm，蒸馏水调零
2.空白管：
取1mL工作液加入1mL石英比色皿，37℃孵育5min后取出比色皿，再依次加入40μL试剂八和60μL 蒸馏水，混匀并立即测量340nm处0s的吸光值A1，37℃准确反应2min，记录340nm处2min时的吸光值A2，计算ΔA空白=A2-A1。
3.测定管：
取1mL工作液加入1mL石英比色皿，在37℃（哺乳动物）或25℃（其它物种）孵育5min后取出比色皿，再依次加入40μL试剂八和60μL样本，混匀并立即测量340nm处0s的吸光值A3，37℃（哺乳动物）或25℃（其它物种）中准确反应2min，记录340nm处2min时的吸光值A4，计算ΔA测定=A4-A3。
三、α-KGDH活性计算
1.按样本蛋白浓度计算
单位的定义：每mg组织蛋白在反应体系中每分钟生成1nmol的NADH定义为一个酶活力单位。
α-KGDH活性（U/mg prot）＝[(ΔA测定-ΔA空白)÷（ε×d）×V反总×109]÷(Cpr×V样)÷T
=1473.7×(ΔA测定-ΔA空白)÷Cpr
2.按样本鲜重计算
单位的定义：每g组织在反应体系中每分钟生成1nmol的NADH定义为一个酶活力单位。
α-KGDH（U/g鲜重）＝[(ΔA测定-ΔA空白)÷（ε×d）×V反总×109]÷(V样÷V样总×W)÷T
=1488.5×(ΔA测定-ΔA空白)÷W
3.按细菌或细胞密度计算
单位的定义：每1万个细菌或细胞在反应体系中每分钟生成1nmol的NADH定义为一个酶活力单位。
α-KGDH活性（U/104cell）＝[(ΔA测定-ΔA空白)÷（ε×d）×V反总×109]÷(V样÷V样总×500)÷T
=2.977×(ΔA测定-ΔA空白)
V反总：反应体系总体积，1.1×10-3L；ε：NADH摩尔消光系数，6.22×103L/mol/cm；
d：比色皿光径，1cm；V样：加入样本体积，0.06mL；
V样总：加入试剂一和试剂二体积，1.01mL；T：反应时间，2min；
Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样品质量，g；
500：细菌或细胞总数，500万。
注意事项：
1、测定过程中所有试剂和样本在冰上放置，以免变性和失活。
2、比色皿中反应液的温度必须保持37℃或25℃，取小烧杯一只装入一定量的37℃或25℃蒸馏水，将此烧杯放入37℃或25℃水浴锅中。
在反应过程中把比色皿连同反应液放在此烧杯中。
3、最好两个人同时做此实验，一个人比色，一个人计时，以保证实验结果的准确性。
4、测定管的ΔA值在0.01-0.25之间，若测定管的ΔA值大于0.25，需将样本进行稀释。