各级菌种制作方法
菌种怎么制作,菌种保藏方法
菌种怎么制作，菌种保藏方法1、将土豆切成块，放入烧杯中煮半个多小时，煮好后过滤溶液备用。
2、将琼脂放入溶液中，然后重新将其烧开，琼脂完全溶化后继续煮一段时间。
3、煮好后将汁液分放至试管内，并用高压锅消毒杀菌，消毒后斜放试管，待凝固后开始接种。
4、用酒精对嫩蘑菇进行杀菌，并在无菌箱内将其切成小块，切好后可接种至琼脂基质上。
5、堵上试管口，将琼脂基质放入培养箱，长满菌丝后便可形成一级菌种。
一、菌种怎么制作1、一级菌种（1）向烧杯内放入切成块的土豆，然后煮30多分钟，煮好后过滤溶液备用。
（2）向溶液内放入琼脂，再将其烧开，待琼脂完全溶化后继续煮一段时间。
（3）煮好后，将汁液分放至试管，再用高压锅消毒杀菌。
消毒后将试管斜放，直到冷凉凝固后即可开始接种。
（4）用酒精对嫩蘑菇做杀菌处理，然后在无菌箱内切成小块，接种至琼脂基质上面。
（5）用塞子堵上试管口，再将琼脂基质放入培养箱内，待长满菌丝后即可形成一级菌种。
2、二级菌种（1）将煮熟的大豆和谷粒置于无菌的条件下晾干，再装入经过高温杀菌的玻璃瓶内。
（2）将瓶子封口，放入高压锅中，经高压灭菌后放在无菌室冷凉。
（3）将培养瓶放至无菌箱内，再放入一级菌种，用的小匙挖出黄豆大小的菌种接种入玻璃瓶。
（4）接种后要封口，再将玻璃瓶放到培养室中，待长满菌丝后即可备用。
3、三级菌种（1）制备方法与二级菌种基本一致，培养基可使用煮熟的麦粒、玉米粒及棉籽。
（2）三级菌种的菌丝长满后即可取出来培育，经历三级菌种的培育后可完全制成平菇菌。
二、菌种保藏方法1、斜面低温保藏法将菌种接种至适宜的固体斜面培养基上，待菌种充分生长后用油纸将棉塞部分包扎好，然后放入冰箱，温度控制在2-8°C即可。
2、甘油管保存法（1）将80%甘油用高压蒸汽做灭菌处理，再将菌种放置在斜面培养基上培养，用无菌水制成高浓度的菌悬液。
（2）将1毫升甘油与菌液混匀，使甘油的浓度达到10-30%，然后放在-70°C的环境中冻存。
食用菌菌种分类和固液菌种制作方法
食用菌菌种分类和固液菌种制作方法一、固体菌种母种→原种→栽培种1、母种母种：在试管或平皿琼脂培养基上生长的纯菌种称为母种，因为是用试管制作的，也称之为试管种，因为是最早一级的菌种，也称之为一级种。
试管的规格一般为22mm×220mm、20mm×200mm、18mm×180mm三种，如果采用液体菌种建议使用18mm×180mm，封口用棉花或硅胶塞。
平皿的规格为直径90mm，封口用Parafilm封口膜。
为了扩大生产，母种可以转接成更多的母种，叫做母种的扩繁。
在各级菌种中，母种的纯度最高，决不允许有杂菌污染。
衰老和退化的母种也不能投入生产，出现不纯或者退化的母种要进行提纯和复壮，提纯和复壮不能达到效果就应该淘汰。
母种的来源有两种，一种是从科研单位及菌种生产机构购买的，一种是组织或孢子分离后经出菇试验确认遗传稳定和高产的母种。
母种培养时间：7-10天，不同品种有差异。
食用菌菌种分类和固液菌种制作方法2、原种原种：原种是母种的菌丝体转接到棉籽壳、玉米芯、木屑或高粱粒、麦粒、枝条等固体培养基上培养而成的食用菌菌种，也叫做二级种。
原种制作的容器有：500ml罐头瓶、750ml罐头瓶、点滴瓶、专用菌种瓶等，罐头瓶封口用菌袋裁成见方封口，点滴瓶用棉花封口。
原种的用途是扩繁栽培种用的，即母种→原种→栽培种→栽培袋，也可以用原种直接转接到栽培袋中，即：母种→原种→栽培袋，这样不仅能够缩短菌种制作周期，也能更好的保证菌种纯度。
原种培养时间：20-30天，根据制作容器和品种不同而有差异。
3、栽培种栽培种：原种经过转接扩大繁殖后称之为栽培种，栽培种用于转接栽培袋，是生产中使用量最大的食用菌菌种，也叫做三级种。
三级种制作的容器有：500ml罐头瓶、750ml罐头瓶、点滴瓶、专用菌种瓶等，除了这些和原种一样的容器，栽培种使用最多的是15cm×30cm、17cm×33cm的折角袋，封口用棉花或者专用的无棉盖体。
菌种生产类型及生产流程
菌种生产类型及生产流程—菌种生产类型
一、菌种生产类型 食用菌菌种是通过三级逐步扩大培养的方式来 生产的，所以通常把菌种分为一级菌种、二级菌种 和三级菌种。 1．一级菌种 从孢子分离培养或组织分离培养获得的纯菌丝 体，在生产上称一级菌种菌丝体或一级菌种或试管 种或母种。一级菌种是在实验室内经分离提纯后获 得的菌种，培育技术较复杂，对制种设备要求较高， 通常由专门的育种单位来培养。
菌种生产类型及生产流程—制种设备、器材、药品
（二）基本器具 玻璃器皿：试管、三角瓶、培养皿、漏 斗、烧杯、酒精灯、菌种瓶、试剂瓶等 衡量器具：天平、杆秤、磅秤、量杯、 量筒、移液管等 基础设备：药品橱、玻璃器皿橱、一级 种配料工作台……
菌种生产类型及生产流程—制种设
备、器材、药品
（三）基本药品 一级菌种常用化学药剂：化学纯的葡萄 糖、蔗糖、蛋白胨、KH2PO4、K2HPO4、MgSO4、 NaOH、HCl、麦芽浸出膏、酵母浸出膏、广泛 或精密pH试纸等。 二、三级菌种常用化学药品：工业级的 石膏、碳酸钙、石灰、MgSO4、过磷酸钙、 KH2PO4、K2HPO4等。
菌种生产类型及生产流程—菌种生产类型
2．二级菌种 由一级菌种扩大繁殖成的菌丝体，有的称为原 种，它是一级菌种和三级菌种之间的过度种。 3、三级菌种 由二级菌种扩大繁殖成的菌丝体，是直接用于 栽培的菌种，又称栽培种或生产种。 二、三级菌种的培养基及其制种过程大同小异。
不同类型平菇菌种制作方法
不同类型平菇菌种制作方法
棉籽壳菌种、麦粒菌种、枝条菌种、液体菌种在发菌、出菇以及接种成本、效率等方面都具有很大的差异，为提高种植户的经济效益，相关专家整理出了不同类型平菇菌种制作的方法，供广大种植朋友们参考。
1.麦粒种制备
配方：麦粒99%，石膏1%，麦粒先用温水加1%石灰浸泡至无白心，然后捞出加石膏拌匀装瓶(350g/瓶)，126°C灭菌120min，冷却后无菌接种(每瓶接种量为四分之一平板母种)，接种后25°C恒温培养至菌丝满瓶。
2.棉籽壳种制备
配方：棉籽壳85%，麸皮13%，石灰1%，石膏1%，原料预湿后拌料装袋(17cmX35cm聚丙烯袋，每袋装湿料0.9kg)，料含水量为62%，料装袋后于126°C灭菌120min，两头接种，每个平板菌种接2袋。
接种后25°C恒温培养至菌丝满袋。
3.枝条种制备
杨木枝条（规格12cmx0.4cmx0.7cm）扎捆后放入桶内，再加1%石灰水浸泡24h以上，捞出沥水撒麸皮，使每根枝条均匀粘上麸皮后装袋。
枝条装袋前后各在袋底部和顶部铺一层棉籽壳种培养基。
装袋后126°C灭菌120min，冷却后一头接种（袋接种量为四分之一平板母种）。
接种后于25°C恒温培养至菌丝满袋。
4.液体种制备
培养基配方：葡萄糖20g、蛋白胨2g、硫酸镁0.5g、氯化钙0.1g、磷酸二氢钾0.5g、B族维生素100ug、蒸馏水100ml。
准确称量原料后煮沸定容，分装三角瓶后每瓶加玻璃珠10粒，121℃灭菌30min，冷却后接种，每瓶接打孔母种块10块，接种后置于转速160r/min、25°C的恒温振荡培养箱中培养7天。
食用菌原种的制作方法
食用菌原种的制作方法食用菌原种是培育高品质食用菌的开始，其制作方法关系到菌种的品质和生长效果。
下面将介绍10种关于食用菌原种的制作方法，并详细讲解每种方法的具体操作步骤、注意事项和优缺点。
1. 伏击法制种法伏击法制种法是一种常见的食用菌原种制作方法，其操作简单，适用于多种食用菌的原种制作。
具体方法如下：步骤一：准备原料。
选一定数量的食用菌菌盖和菌蒂，尽量选用种粒外形完整、表面干净、无病害的菌盖和菌蒂。
步骤二：将菌盖和菌蒂归并，放到70%酒精中清洗30秒，然后取出沥干。
步骤三：将菌盖和菌蒂放到滤纸上，擦干表面水分，放到蒸汽锅中蒸10分钟，杀灭病菌和杂菌。
步骤四：将蒸好的菌盖和菌蒂拿出来，再次擦干表面水分，放到培养基上。
步骤五：放到恒温摇床上培养，震荡180rpm，28℃，恒温培养7-14天，即可获得食用菌原种。
优点：操作简单，适用范围广，菌株易保存。
缺点：成活率较低，制作时间较长。
2. 含砂蒸法制种法含砂蒸法制种法是应用含石英砂的菌种培养基来制作食用菌原种，能提高种粒触蒸面积，提高出菌率和菌株的品质。
具体方法如下：步骤一：准备含砂菌种培养基。
将玉米粉、蔗糖、石英砂和蒸馏水按一定比例混合，制作含砂菌种培养基。
步骤二：准备原料。
选一定数量的食用菌菌盖和菌蒂，按照比例加入含砂菌种培养基中。
步骤三：将含菌培养基放在琼脂板上，在30℃下反复震动震荡搅拌。
步骤四：将培养好的固体菌种放在75%-80%的相对湿度内，保持湿润并置于通风且恒温保持在22℃下。
步骤五：待菌体生长到一定大小时，再将其移植到适宜的菌床中。
优点：出菌率高，菌株品质好。
缺点：制备过程中需掌握好配方和稠度。
3. 傅里叶红外辐射制种法傅里叶红外辐射制种法是利用电极辐射灯产生的热量来使制种容器内的培养液升降温，低温使菌体沉积在液表面，高温则使其下沉到液底，实现制种的目的。
具体方法如下：步骤一：将食用菌种子与蔓茎切片、米糠混合后，加入到恒温恒湿的发酵箱内。
生产菌种制备工艺流程
不合格需排查原因并改进。
7
生产菌种制备完成
经检测合格的二级种子作为生产菌种备用。
-
做好菌种的保存和记录。
生产菌种制备工艺流程
序号
工艺流程步骤
详细描述
所需设备
注意事项
1
菌种选择
从保藏的菌种库中挑选性能优良、符合生产需求的菌种。
菌种保藏设备
确保菌种的活性和纯度。
2
活化培养
将挑选的菌种接种到适宜的培养基中，在特定条件下进行培养，使其恢复生长活力。
培养箱
控制培养温度、湿度和时间。
3
一级种子培养发酵罐
严格无菌操作，防止染菌。
4
质量检测
对一级种子进行质量检测，包括菌液浓度、纯度、活性等指标。
检测仪器
不达标的种子需重新培养。
5
二级种子培养
合格的一级种子接入二级种子培养基，进一步扩大培养规模。
大型发酵罐
监控培养过程中的参数变化。
6
二级种子质量检测
重复质量检测步骤，确保二级种子符合生产要求。
各级菌种制作方法
各级菌种制作方法菌种制作是指将其中一种菌株培养并保存下来，以便于进一步研究或应用。
下面是各级菌种制作方法的详细介绍。
一、纯菌种制备方法纯菌种是指由单一菌株组成的菌种，制备纯菌种的方法有多种，下面介绍两种常见的方法。
1.1分生培养法该方法适用于无色泽的菌株。
步骤如下：1)从菌落中选取一个单一菌落，用培养棒沾取并悬浮于无菌水中。
2)取适量的悬浮液在琼脂平板上均匀涂布，待菌落分开成单个菌落后进行分离。
3)通过连续分离单个菌落的方法，分离纯菌株。
4)将纯菌株进行培养、鉴定以及保存。
1.2筛选法该方法适用于具有色泽的菌株。
步骤如下：1)从菌落中选取一个单一菌落，用培养棒沾取并悬浮于无菌水中。
2)将悬浮液均匀涂布在琼脂平板上。
3)在菌落上加覆一层深色染料，如卢戈尔液或磷酸钠溴酚蓝溶液。
4)观察菌落的颜色变化，选取与其它菌落颜色不同的菌落进一步培养、鉴定和保存。
二、菌种保存方法菌种的保存可以使用不同的方法，主要包括以下几种。
2.1低温保存法低温保存法是最常用的保存菌种的方法，其原理是通过将菌种置于低温环境中，减缓菌落的生长速度，以达到保存的目的。
常用的低温保存方法包括冷冻保存和液氮冷冻保存。
2.2干燥保存法干燥保存法是将菌种培养后的菌落通过空气干燥或冷冻干燥的方法，得到菌种粉末或冻干菌种。
该方法的优点是保存周期长、操作方便，适用于许多菌种的保存。
2.3阳离子凝胶保存法阳离子凝胶保存法是将菌液用阳离子树脂凝胶包裹，并置于低温环境中保存。
该方法适用于保存不能耐受冷冻或冷冻干燥的菌种，保存时间较长。
2.4液态保存法液态保存法是将菌液置于无菌平板或培养基中，倒入试管或培养瓶中，密封保存。
该方法适用于快速生长的菌种，操作简便，但菌种保存时间相对较短。
母菌种是指在菌种制备过程中，从纯菌种中培养得到的大量菌液。
母菌种的制备方法有多种，下面介绍两种常见的方法。
3.1瓶培法瓶培法适用于产菌量较多的菌株。
步骤如下：1)在无菌条件下，将纯菌株接种于试管中的液体培养基中。
各级菌种制作方法
1,母种:又叫一级种,用直径18-22cm的试管制备.常用配方:去皮马铃薯200克,葡萄糖20克,琼脂10-20克,水1000毫升,先把土豆去皮称重,切成小块煮至熟而不烂,过滤加水至1000毫升,再把琼脂剪成小段,放入锅内,边搅边煮,待琼脂溶化后加入葡萄糖,由于琼脂质量各有不同加入份量要看情况而定，装管前取一小勺浮在凉水中冷却观察其硬度适合然后分袋试管,用棉花塞塞住试管口,放入小高压锅内灭菌,当压力表达到个压力时,再灭菌30分钟,取出试管放成斜面,放置2-3 天后,无杂菌感染再放入接种箱内接种,接了种的试管放入培养室内进行培养,温度要求25℃左右,相对湿度75%以下.2,原种:二级种,一般采用原种瓶和罐头瓶.培养料不要装的太满,装至瓶肩.原种的制备多采用谷粒种,锯沫种和棉子壳种.①谷料种:用玉米,小麦为原料,精选后煮沸,使种子变软即成,不要煮的太熟,开花.熟后离火泡5分钟（不开盖而能吸足水份）而后装瓶,用小型或中型高压锅灭菌,放至温度25℃左右接入母种,放培养室内培养.一般25-30天即成.②木屑种:木屑78%,麦麸20%,石膏1%,糖1%,料:水=1:,拌匀装瓶,灭菌,接种培养.一般25-30天即成.③棉子皮:因棉子皮各种营养丰富,一般不需要加其它物质,只加1%的糖和石膏,用料倍的水拌匀即可,而后装瓶,灭菌,接种,培养即可.推荐通用配方：木屑（或秸秆粉或棉籽壳）：80斤糠夫：6斤糖：斤菇耳壮：两石膏：1斤3,生产种:三级种可用木屑,玉米,棉籽皮,菌草,麦秸等为原料,根据所栽培的品种,采用不同的配方,用聚乙烯或聚丙烯,直径15-28cm塑料袋装料,然后用常压灭菌锅灭菌,达到100℃后,再维持100℃8-10小时.待袋稍凉后出锅,使栽培袋温度降至25℃左右再用原种接种,而后放到培养室的培养架上培养.推荐配方：■地栽木耳配方锯沫（或秸秆粉或棉籽壳）：80斤糠夫：5斤豆粉：2斤菇耳壮：两白灰：1斤■平菇猴头香菇金针菇配方锯沫（或秸秆粉或棉籽壳）：80斤菇耳壮：两糠夫：5斤白灰：1斤。
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各级菌种制作方法
文稿归稿存档编号：［KKUY-KKIO69-OTM243-OLUI129-G00I-FDQS58-
1,母种:又叫一级种,用直径18-22cm的试管制备.常用配方:去皮马铃薯200克,葡萄糖20克，琼脂10-20克，水1000毫升，先把土豆去皮称重，切成小块煮至熟而不烂，过滤加水至1000毫升，再把琼脂剪成小段，放入锅内，边搅边煮，待琼脂溶化后加入葡萄糖，由于琼脂质量各有不同加入份量要看情况而定，装管前取一小勺浮在凉水中冷却观察其硬度适合然后分袋试管，用棉花塞塞住试管口，放入小高压锅内灭菌,当压力表达到1・5个
压力时，再灭菌30分钟取出试管放成斜面，放置2-3天后,无杂菌感染再
放入接种箱内接种，接了种的试管放入培养室内进行培养，温度要求25-C 左右，相对湿度75%以下.
2,原种:二级种一般釆用原种瓶和罐头瓶.培养料不要装的太满,装至瓶肩•原种的制备多采用谷粒种，锯沫种和棉子壳种.
①谷料种:用玉米，小麦为原料，精选后煮沸，使种子变软即成,不要煮的太熟，开花.熟后离火泡5分钟（不开盖而能吸足水份）而后装瓶，用小型或中型高压锅灭菌，放至温度25°C左右接入母种，放培养室内培养.一般25-30天即成.
②木屑种:木屑78%,麦鉄20%,石膏1%,糖1%,料:水二］:1. 3,拌匀装
瓶，灭菌，接种培养.一般25-30天即成.
③棉子皮:因棉子皮各种营养丰富，一般不需要加其它物质，只加1%的糖和石膏，用料1. 3-1. 5倍的水拌匀即可，而后装瓶，灭菌，接种，培养即可.
推荐通用配方：木屑（或秸秆粉或棉籽壳）：80斤糠夫：6斤糖：
0.5斤菇耳壮:1.6两石膏：1斤
3,生产种:三级种可用木屑，玉米，棉籽皮，菌草，麦秸等为原料，根据所栽培的品种，采用不同的配方，用聚乙烯或聚丙烯，直径15-28cm塑料
袋装料, 然后用常压灭菌锅灭菌，达到1009后,再维持100-C8-10小时.待袋稍凉后出锅，使栽培袋温度降至259左右再用原种接种,而后放到培养室的培养架上培养.
推荐配方：
■地栽木耳配方锯沫（或秸秆粉或棉籽壳）：80斤
糠夫：5斤
豆粉：2斤
菇耳壮：1.4两
白灰：1斤
■平菇猴头香菇金针菇配方
锯沫（或秸秆粉或棉籽壳）:80斤
菇耳壮：1.4两
糠夫：5斤
白灰：1斤。