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选修1《生物技术实践》知识点归纳实验1 大肠杆菌的培养和分离 1.微生物是指结构简单、形体微小的单细胞、多细胞或没有细胞结构的低等生物，包括病毒、原核生物、原生生物和某些真菌。
细菌是单细胞的原核生物，有细胞壁（肽聚糖）、细胞膜、细胞质，无成型的细胞核,只有一环状DMA分子(拟核)。
以分裂(二分裂)的方式繁殖,分裂速度很快。
用革兰氏染色法将细菌分为革兰氏阳性菌(革兰氏染液染色后,再脱色处理,细菌仍保留染色液的颜色)和革兰氏阴性菌两大类,区别在细胞壁的成分不同。
大肠杆菌是革兰氏阴性(细胞壁薄,有荚膜)、兼性厌氧的肠道杆菌。
2.细菌的分离方法有两种:划线分离法和涂布分离法。
是消除污染杂菌的通用方法,也是用于筛选高表达量菌株的最简便方法之一。
划线分离就是用接种环蘸菌液后在含有固体培养基的培养皿平板上划线,在划线的过程中菌液逐渐减少,细菌也逐渐减少,。
划线最后,可使细菌间的距离加大。
将接种后的固体培养基培养10~20小时后,一个细菌细胞就会繁殖成许多细菌细胞,形成菌落,不会重叠。
在斜面上划线,则每个斜面的菌群就是有一个细菌产生的后代。
用于基因工程的大肠杆菌的工程菌,可以用划线分离法获得产物表达能力高的菌株。
由于工程菌的质粒中通常有抗性基因(如抗氨苄青霉素基因),如在培养基中加入一定量的氨苄青霉素,由于非工程菌的其他杂菌都没有抗性基因,所以在划线后只有存在抗性基因的工程菌能生存下来。
涂布分离时,需要先将培养的菌液稀释,通常稀释10-5~10-7倍之间,然后取0.1mL不同稀释度的稀释菌液放在培养皿的固体培养基上，用玻璃刮刀涂布在培养基平面上进行培养,在适当的稀释度下,可产生相互分开的菌落，每个培养基里有20个以内的单菌落为最合适。
优点：划线分离法，方法简单；涂布分离法，单菌落更易分开，但操作复杂。
在培养微生物时,必须进行无菌操作。
其首要条件是各种器皿必须是无菌的,各种培养基也必须是无菌的,转移培养基、倒平板、接种、平板划线、平板稀释涂布等操作中的每一步都要做到无菌(防止杂菌污染)。
人教版 高中生物选修一默写(含答案)
专题一传统发酵技术的应用课题1 果酒和果醋的制作1．果酒制作的原理（1）人类利用微生物发酵制作果酒，该过程用到的微生物是，它的代谢类型是，其大量繁殖时的方程。
进行发酵的方式式是。
（2）果酒制作条件传统发酵技术所使用的酵母菌的来源是。
酵母菌生长的最适温度是； PH呈；（3）红色葡萄酒呈现颜色的原因是：酒精发酵过程中，随着的提高，红色葡萄皮的进入发酵液，使葡萄酒呈色。
（4）在、的发酵液中，酵母菌可以生长繁殖，而绝大多数其它微生物都因无法适应这一环境而受到抑制。
2．果醋的制作原理（1）果醋发酵菌种是，新陈代谢类型。
（2）当氧气和糖源充足时醋酸菌将糖分解成，当糖源不足时醋酸菌将变为再变成醋酸，其反应式。
3．操作过程应注意的问题（1）为防止发酵液被污染，发酵瓶要用消毒。
（2）葡萄汁装入发酵瓶时，要留出大约的空间，为什么。
（3）制作葡萄酒时将温度严格控制在。
制葡萄醋的过程中，将温度严格控制在，并注意适时充气，为什么。
4．酒精的检验（1）试剂：。
（2）条件及现象：在条件下，反应呈现。
5.制作果酒、果醋的实验流程挑选葡萄→→→→↓↓果酒果醋6．你认为应该先洗葡萄还是先除去枝梗，为什么？。
7.每次排气时只需拧松瓶盖，不要完全揭开瓶盖；制醋时，再将瓶盖打开，盖上一层纱布，进行葡萄醋的发酵，其目的是。
8.排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身连接，其目的是。
课题2 腐乳的制作1.制作原理（1）．经过微生物的发酵，豆腐中的蛋白质被分解成小分子的和，脂肪被分解成和，因而更利于消化吸收。
（2）．腐乳的制作过程中起主要作用的微生物是。
它是一种丝状。
（3）．现代的腐乳生产是在严格的条件下，将优良菌种直接接种在豆腐上，这样可以避免其他菌种的，保证产品的质量。
2. 腐乳制作的实验流程：让豆腐长出→→→密封腌制。
3.实验注意事项（1）在豆腐上长出毛霉时，温度控制在，自然条件下毛霉的菌种来自空气中的。
（2）将长满毛霉的豆腐块分层加盐，加盐量要随着摆放层数的加高而，近瓶口的表层要。
高中生物选修知识点总结word
高中生物选修知识点总结word一、细胞生物学基础1. 细胞的结构与功能- 细胞膜：控制物质进出，细胞内外环境的分隔。
- 细胞核：包含遗传物质，控制细胞活动。
- 细胞质：包含细胞器，是生命活动的场所。
- 细胞器：如线粒体、内质网、高尔基体等，各自具有特定功能。
2. 细胞的分裂与增殖- 有丝分裂：细胞核分裂，形成两个遗传信息相同的子细胞。
- 减数分裂：生殖细胞分裂，形成四个遗传信息不同的子细胞。
3. 细胞的代谢- 光合作用：植物细胞利用光能合成有机物。
- 呼吸作用：细胞分解有机物，释放能量。
二、遗传与进化1. 遗传的分子基础- DNA结构：双螺旋结构，遗传信息的载体。
- RNA功能：作为DNA和蛋白质之间的信息桥梁。
- 蛋白质合成：转录和翻译过程。
2. 遗传的细胞基础- 染色体：遗传物质的载体，决定遗传特性。
- 基因：DNA上的特定片段，控制生物性状。
3. 遗传的变异- 基因突变：基因序列发生改变，可能导致性状变化。
- 基因重组：有性生殖过程中，父母基因重新组合。
4. 进化论- 自然选择：适者生存，不适应者淘汰。
- 物种形成：生物种群分化为不同物种的过程。
三、生态与环境1. 生态系统的组成- 生产者：通过光合作用制造有机物的生物。
- 消费者：以其他生物为食的生物。
- 分解者：分解有机物，循环物质的生物。
2. 生态系统的能流与物质循环- 食物链与食物网：生物间能量与物质的转移关系。
- 物质循环：水循环、碳循环、氮循环等。
3. 人类活动与生态环境- 环境污染：水污染、空气污染、土壤污染等。
- 生物多样性：物种丰富度和生态系统的稳定性。
四、人体健康与疾病1. 人体结构与功能- 组织与器官：构成人体的基本单位。
- 系统：如循环系统、消化系统、神经系统等。
2. 疾病与健康- 传染病：病原体引起的疾病，如流感、肺结核等。
- 非传染性疾病：如心血管疾病、糖尿病等。
3. 免疫与疾病防治- 免疫系统：保护身体免受病原体侵害的系统。
高中生物选修一复习
高中生物选修一复习选修一生物复习资料1、酵母菌：（1）代谢类型：异养兼性厌氧型（2）应用：食品加工：酿酒、面包、饼干、豆腐乳、酱油等医药保健品：干扰素、核糖核酸、胰岛素等化工原料：生产食用菌、生产有机酸、生产酵母蛋白、生产沼气、生产生物塑料等环境保护：污水处理、垃圾资源化、制作生物肥料等（3）酵母菌的生殖方式：出芽生殖2、霉菌：代谢类型：异养需氧型或异养厌氧型；生殖方式：孢子生殖；典型代表：曲霉、青霉、毛霉（注意：青霉素是由青霉产生的，与毛霉无关）21、细菌：代谢类型：异养需氧型或自养需氧型；生殖方式：二分裂；典型代表：硝化细菌（自养需氧型）、大肠杆菌（异养需氧型）等211、放线菌：代谢类型：异养需氧型；生殖方式：二分裂；典型代表：链霉菌等2111、蓝藻：代谢类型：自养需氧型；生殖方式：分裂生殖；典型代表：颤藻、念珠藻、发菜等（注意：蓝藻不具有细胞结构，属于原核生物）乳酸菌：代谢类型：异养厌氧型；生殖方式：二分裂；典型代表：乳酸链球菌、乳酸杆菌等。
高中生物选修一练习题一、选择题1、在光合作用的光反应阶段，哪种物质被光解，并释放出氧气？A.叶绿素B.叶绿体C.水分子D.氧气分子2、在细胞呼吸过程中，哪个过程需要氧气参与？A.糖酵解B.柠檬酸循环C.电子传递链D.以上都不是3、下列哪种物质是人体内主要的能源物质？A.糖原B.脂肪C.蛋白质D.葡萄糖4、在人体的三羧酸循环中，下列哪个物质不参与循环？A.柠檬酸B.草酰乙酸C.谷氨酸D.硫酸二、简答题5、请简述光合作用的过程，以及这个过程在生物圈中的重要性。
51、请描述细胞呼吸的主要过程，以及这个过程在人体中的必要性。
511、请阐述糖原、脂肪和蛋白质在人体内的主要功能和储存方式。
5111、请简述ATP在生物体内的生成过程和主要功能。
请描述DNA和RNA在细胞中的主要功能和区别。
请简述蛋白质合成的步骤，以及这个过程在生命延续中的重要性。
高中生物选修一教案一、教学目标1、知识目标：掌握选修一中的基本概念和原理，了解生物技术的基本应用。
2023年高考生物总复习选修1基础知识点背诵(精华版)
2021年高考生物总复习选修1基础知识点背诵（精华版）专题一《果酒和果醋和制作》一、果酒制作1．原理：菌种 ，属于 核生物，新陈代谢类型 ，有氧时，呼吸的反应式为： ；无氧时，呼吸的反应式为：2．条件：繁殖最适温度 ，酒精发酵一般控制在 。
（传统发酵技术所使用的酵母菌的来源）3．菌种来源：现在工厂化生产果酒，为提高果酒的品质，更好地抑制其它微生物的生长，采取的措施是 。
4．实验设计流程图挑选葡萄冲洗____________________________________________果酒 果醋5．根据教材P4操作提示设计实验步骤及装置。
充气口作用 ； 排气口作用 ；出料口作用 。
排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身连接，其目的是 。
使用该装置制酒时，应该关闭 ；制醋时，应将充气口 。
⎩⎨⎧。
：。
：菌菌种分离获得得纯净的酵母人工培养型酵母菌附着于葡萄皮上的野生自然发酵→→→→↓↓6．实验结果分析与评价：可通过嗅觉和品尝初步鉴定，并用______________检验酒精存在。
可观察到的现象为二、果醋的制作：1．原理：菌种：___________，属于___________核生物，新陈代谢类为_________ 醋酸生成反应式是___________________ _________ 。
2．条件：最适合温度为__________，需要充足的______________。
3．菌种来源：到________或_________购买。
4．设计实验流程及操作步骤：果酒制成以后，在发酵液中加入______________或醋曲，然后将装置转移至______________0C条件下发酵，适时向发酵液中______________。
如果没有充气装置，可以将瓶盖打开，在瓶盖上纱布，以减少空气中尘土污染。
三、操作过程应注意的问题（1）为防止发酵液被污染，发酵瓶要用 消毒。
（2）葡萄汁装入发酵瓶时，要留出大约 的空间。
生物人教版高二选修1素材：教材梳理_专题2课题2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数_word版含解析
庖丁巧解牛知识•巧学一、筛选菌株1.PCR技术是一种在体外将少量DNA大量复制的技术，PCR技术的原理是：如果DNA片段两端的序列是已知的，那么采用PCR就可以很容易地将此DNA片段从整个DNA分子中扩增出来。
进行PCR需要一段寡聚核苷酸链作为引物，它们各自与要扩增的靶DNA片段末端互补，引物与模板DNA相结合并沿模板DNA延伸，以扩增靶DNA序列。
PCR技术需要使用耐高温的DNA聚合酶，这种酶要能够忍受93 ℃左右的高温。
深化升华PCR的过程由三个基本反应组成：（热）变性、复性、延伸，这样构成一个循环的复制，新合成的DNA链又可以作为模板进行下一轮复制，重复3步操作。
DNA片段呈2的指数增长，在1～2小时内可完成25～30次的循环，扩增的DNA片段数可增至106～10倍。
2.选择培养基是指允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基。
二、统计菌落数目1.直接计数法这种方法是指利用特定的细菌计数板或者血细胞计数板，在显微镜下计算一定容积样品中微生物的数量。
计数板是一块特制的载玻片，上面有一个面积为1 mm和高0.1 mm的计数室，该计数室又均分成400个小格。
测量时将稀释的样品滴加在计数板上，盖上盖玻片，然后在显微镜下数出每个小格所含的细菌的平均数，再按下面的公式求出每毫升样品所含的细菌数。
每毫升原液所含的细菌数＝每小格平均细菌数×400×1 000×稀释倍数要点提示此方法的缺点是分不清活菌和死菌。
2.间接计数法稀释涂布平板法，常用来统计样品中的活菌数，此法是根据微生物在固体培养基上所形成的一个菌落是由一个细菌繁殖而成的现象进行的，也就是说一个菌落就代表一个细菌。
计数时先将待测样品进行一系列的稀释，再取一定量的稀释菌液接种在固体培养基上，使其较均匀地分布，经过一段时间的培养后，统计菌落数目，即可求出原液中的细菌数。
疑点突破这种方法计算出的为活菌数目，但是该数目往往比实际数目要小，原因是如果稀释的倍数不够大，很可能出现两个或者更多的细菌在一起共同形成一个菌落的情况，在最后计算时，我们却是按照一个细菌来计算的。
人教版生物选修一知识点
人教版生物选修一知识点人教版生物选修一知识点：基因工程基因工程是一种现代生物技术，通过改变生物体遗传物质的组成和性状，用于改良农作物、培育优良品种、治疗遗传疾病等。
基因工程技术的发展和应用，对人类社会和生态环境都产生了巨大的影响。
基因工程的主要目的是通过改变生物的遗传物质，来获得我们所需要的性状。
其实现的具体步骤包括基因的定位、分离、克隆和转移等。
通过基因工程，我们可以在植物和动物细胞中引入外源基因，从而改善其性状。
基因工程的最大特点就是可以突破物种界限，实现外源基因的转移和表达。
通过基因工程，我们可以在植物中引入抗虫基因或抗病基因，使得植物具有抗虫或抗病的能力。
此外，还可以通过基因工程在植物中引入抗性基因，从而提高植物对病毒、真菌等外界环境压力的抵抗能力，实现对传统育种方法的补充和完善。
基因工程技术还可以在动物领域得到应用，通过基因工程，我们可以在动物体内引入外源基因，使得动物具有某种特定的性状。
比如，我们可以通过基因工程使家畜具有更高的生长速度，更好的肉质品质等。
此外，基因工程还被应用于医学领域。
利用基因工程技术，我们可以制备一些重组蛋白药物，用于治疗各种遗传性疾病、瘤细胞、病毒感染等。
另外，基因工程技术也可以应用于干细胞疗法、基因治疗等领域。
尽管基因工程技术有着广阔的应用前景，但是在实际操作中也存在一些潜在的风险和争议。
比如，基因工程技术的应用可能会导致生物多样性的减少，影响生态平衡。
此外，在食品安全等领域的应用也存在一定的风险和争议，需要进行严格的监管和管理。
总之，基因工程技术是一种具有广泛应用前景的生物技术，其应用领域涵盖了农业、医学、动物领域等多个领域。
通过基因工程技术的应用，可以有效地改良生物的性状，提高生物的适生性和生产力，从而为人类社会的发展和进步做出重要的贡献。
然而，基因工程技术的应用也需要充分考虑其风险和争议，采取相应的管理措施，以确保其安全有效地应用。
高中生物浙科版选修一知识点归纳
高中生物浙科版选修一知识点归纳选修一生物技术实践知识点总结第一部分微生物的利用一、微生物实验室培养的基本操作程序1、器具的灭菌：P20-21，灭菌前，试管加棉花塞或塑料盖、三角瓶用封口膜或6层纱布封口……最后各种用品均需用牛皮纸或报纸包好，用高压蒸汽灭菌法（121C，1kg/cm2压力）灭菌15min。
值得注意的是，实验中所需的棉花不能用脱脂棉，因脱脂棉易吸水，吸水后容易引起污染。
灭菌后，通常将实验用具放入60～80℃的烘箱中烘干，以除去灭菌时的水分。
在进行实验操作前，将需要使用的用具从烘箱中取出，放到超净台上。
在超净台工作之前，应先打开超净台的紫外灯和过滤风，工作时关闭紫外灯。
塞子制作的好坏是控制污染发生的关键。
2、培养基的配制：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。
①培养基种类尺度培养基类型固体培养基液体培养基合成培养基天然培养基鉴别培养基配制特点加入琼脂不加入琼脂由已知成分配制而成由天然身分派制而成添加某种唆使剂或化学药剂主要应用菌种分离,鉴定,计数、保存菌种的扩大培养菌种的鉴别菌种的分离按物理性质分按化学组身分按用途分②微生物培养的培养基：LB培养基。
配制培养基时需考虑营养物质的配比外，还需要考虑微生物生长对pH、氧气、渗透压等的要求。
“细菌喜荤，霉菌喜素”，通常细菌培养基要用卵白胨和酵母提取物来配制，还要加入一定量的氯化钠，以维持一定的渗透压；霉菌培养基一般用无机物配制或添加蔗糖的豆芽汁即可。
此外．细菌通常要求在中性偏碱的环境中生长，霉菌要求在中性偏酸的环境中生长。
选择培养基添加（或短少）某种化学身分3、培养基的灭菌：通常用高压蒸汽灭菌法灭菌。
但假如培养基中有葡萄糖，为防止葡萄糖分解碳化，要用500g/cm压力（90C以上）灭菌30min。
有些不能加热灭菌的化合物，如尿素（加热会分解）等，只能用G6玻璃砂漏斗过滤，但玻璃砂漏斗使用前也要在121℃下用纸包好灭菌。
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知识点总结高中生物选修一生物技术实践传统发酵技术的应用专题一果酒和果醋的制作课题一、果酒菌种：附在葡萄皮上的野生型酵母菌（真菌，兼性厌氧，主要出芽生殖还有1 孢子生殖）2、在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖。
在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。
呈酸性（酵母菌可以生长繁殖，而25～℃），发酵液缺氧 3、制酒条件：温度（18 其他微生物无法适应这一环境）。
4、葡萄酒呈现深红色的原因：红葡萄皮的色素进入发酵液。
5、果醋菌种：醋酸菌（原核生物），代谢类型异养需氧型。
都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋、有两条途径生成醋酸：当氧气、糖源6→O酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。
CHOH＋225 CHCOOH＋HO23℃。
30～35、制醋条件：①深层发酵时，短时间不通氧，醋酸菌死亡。
②温度：7 8、流程：挑选葡萄→冲洗→榨汁→酒精发酵→醋酸发酵果醋果酒、装置：充气口制酒时关闭；制醋时，连续输入氧气。
9排气口长而弯曲的胶管目的是防止空气中微生物的污染；开口向下的目的是排出酒精发酵时产生的二氧化碳。
出料口是用来取样检测。
空间的目的是让酵母菌先有氧呼葡萄汁只装2/31/3，留吸进行繁殖。
次，目的是排二氧化碳；制醋、若用瓶子做装置：制酒时，要每天拧松瓶盖1024～时，将瓶口打开，盖上纱布。
．11、所有用具清洗后晾干或清洗后用70%的酒精消毒。
先冲洗葡萄再除去枝梗，以避免除去枝梗时引起葡萄破损，增加被杂菌污染的机会。
12、酒精检验：酸性（3mol/L的HSO）重铬酸钾→灰绿色。
醋酸检验：嗅味和品尝42（比较pH）13、从哪些方面防止发酵液被污染？榨汁机要清洗干净，并晾干。
发酵瓶要清洗干净，用体积分数70%的酒精消毒，或用洗洁精洗涤。
装入葡萄汁后，封闭充气口。
课题二腐乳的制作1、菌种：多种微生物如青霉、酵母、曲霉、毛霉等，主要是毛霉（真菌，代谢类型是异养需氧型。
孢子生殖。
）传统制作毛霉来自空气；现代生产将优质毛霉菌种直接接种在豆腐上。
2、原理：毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可将脂肪水解为甘油和脂肪酸。
3、实验流程：让豆腐上长出毛霉→加盐腌制→加卤汤装瓶→密封腌制（加盐之前为前期发酵，目的是创造条件让毛霉生长，使毛霉形成菌膜包住豆腐使腐乳成型。
后期发酵主要是酶与微生物协同作用，生成腐乳的香气。
）4、所用豆腐的含水量为70％左右，水分过多则腐乳不易成形。
豆腐生长的白毛是毛霉的白色菌丝。
5、温度：15～18℃。
6、加盐：逐层加盐，随着层数的加高而增加盐量，接近瓶口表面的盐要铺厚一些。
控制盐的用量（豆腐：盐=5:1）：盐的浓度过低，不足以抑制微生物的生长，可能导致豆腐腐败变质；盐的浓度过高会影响腐乳的口味。
食盐的作用：1.抑制微生物生长，避免腐败变质2.析出水分，是豆腐变硬 3.调味7、卤汤：由酒及各种香辛料配制而成的。
8、卤汤中酒的含量：12%左右。
作用：1.防止杂菌污染 2.赋予腐乳风味3.酒精含量过高，对蛋白酶的抑制作用也越大，使腐乳成熟期延长；酒精含量过低，不足以抑制微生物生长，导致豆腐腐败。
9、香辛料的作用：1.调味 2.杀菌10、防止杂菌污染的措施：①玻璃瓶，洗净后用沸水消毒。
②加卤汤后，用胶条将瓶口密封。
③封瓶时，将瓶口通过酒精灯的火焰。
11、影响腐乳风味的因素：盐、酒、香辛料、豆腐含水量。
、腐乳外部致密的“皮”是前期发酵时在豆腐表面上生长的毛霉菌丝，它能形成12．腐乳的“体”，使腐乳成形。
课题三制作泡菜1、菌种：乳酸菌（代谢类型异养厌氧，包括乳酸链球菌和乳酸杆菌。
乳酸杆菌常用于生产酸奶。
2、流程修整、洗条状或片原料加晾晒、切加入调料加盐泡菜盐水配制盐水并装坛发酵测定亚硝酸盐含量成品3、配制盐水：水：盐=4:1；煮沸冷却（杀菌和去除溶解氧）4、用水封闭坛口起什么作用？（保证发酵的无氧环境）不封闭有什么结果？（①有氧会抑制无氧呼吸，②杂菌污染）5、泡菜腌制过程中，要注意控制腌制时间、温度和食盐用量。
温度过高、食盐用量过低、腌制时间过短，易造成细菌大量繁殖，亚硝酸盐含量增加。
一般在腌制10 天后亚硝酸盐含量开始降低，故在10天之后食用最好。
6、亚硝酸盐：白色粉末，易溶于水，用作食品添加剂。
膳食中的绝大部分亚硝酸盐随尿排出，只有在特定的条件（适宜的pH、温度和一定的微生物作用），才会转变成致癌物――亚硝胺，它对动物还具有致畸和致突变作用。
7、测定亚硝酸盐含量的原理：在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料，与已知浓度的标准显色液目测比较，估算泡菜中亚硝酸盐含量。
提取剂：氯化镉、氯化钡。
氢氧化铝乳液：吸附泡菜汁中杂质，使泡菜汁透明澄清。
氢氧化钠：中和过多的酸，制造弱碱性环境8、含抗生素牛奶不能生产酸奶的原因是抗生素杀死乳酸菌。
9、醋瓶或啤酒瓶内形成的白膜是醋酸菌；泡菜坛内的白膜是酵母菌。
微生物的培养与应用专题二课题一微生物的实验室培养1、培养基：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。
培养基按照物理性质可分为液体培养基半固体培养基和固体培养基（加入凝固剂琼脂，在其表面可形成菌落）。
·按照用途，可分为选择培养基和鉴定培养基。
选择培养基是指允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基。
鉴别培养基是根据微生物的特点，在培养基中加入某种指示剂或化学药品，用以鉴别不同类别的微生物。
2、培养基的化学成分：水、无机盐、碳源、氮源。
还要满足微生物生长对PH、特殊营养物质以及氧气的要求。
碳源：提供碳元素。
如CO（自养生物用）、糖类（异养微生物用）。
2+-（自养微生NH（硝化细菌）、NO、（固氮菌）、氮源：提供氮元素。
如NNH3324物）、牛肉膏、蛋白胨（异养微生物）等。
调至中pH调至酸性，培养细菌将pH特例：培养乳酸杆菌加维生素，培养霉菌须将性或微碱性，培养厌氧型微生物需提供无氧条件。
、无菌技术——获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵，有效避免操作者自3 身被微生物感染。
指使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物（不包消毒、4括芽孢和孢子）。
分为煮沸消毒法，巴氏消毒法（不耐高温的液体）、化学药剂（如酒精、氯气、石炭酸等）消毒、紫外线消毒。
是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。
分灭菌5、为灼烧灭菌（接种环、接种针等金属工具、试管口）、干热灭菌（吸管、培养皿等玻璃器皿、金属用具，所用器械是干热灭菌箱）、高压蒸汽灭菌（培养基、无菌水等，所用器械是高压蒸汽灭菌锅）。
灭菌时物品不能摆得太挤，目的是避免妨碍热气流通。
、制作牛肉膏蛋白胨固体培养基方法步骤：计算、称量、溶化（包括定容和调6 ）、灭菌、倒平板。
【培养基在锥形瓶中则是先分装再灭菌】pH、倒平板操作的步骤：拔棉塞→瓶口迅速通过火焰→将培养皿打开一条缝，倒培养7 基（培养皿的皿盖始终在手中）→冷却凝固→倒置平板（从此以后一直倒置）、平板冷凝后，为什么要将平板倒置？8答：既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。
．9、平板划线法只能得到单个的菌落，不能计数。
划线时不要将最后一区的与第一区相连。
操作的第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物；每次划线之前都要灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后，接种环上残留的菌种，使每次划线时菌种的数目逐渐减少；划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环是为了杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者。
在作第二次以及其后的划线操作时，为什么总是从上一次划线的末端开始划线？答：划线后，线条末端细菌的数目比线条起始处要少，每次从上一次划线的末端开始，能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少，最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落。
10、稀释涂布平板法不仅能得到单个的菌落，还能计数。
稀释涂布的所有操作都应在火焰附近进行。
涂布器浸在酒精中，然后灼烧。
11、菌种保存频繁使用：临时保藏（接种到试管的固体斜面培养基上，4℃冰箱，每3～6个月，要重新将菌种从旧的培养基上转移到新鲜的培养基上。
）长期保存：甘油管藏（－20℃的冷冻箱中）。
课题二土壤中分解尿素的细菌的分离与计数1、尿素：只有当土壤中的细菌将尿素分解成氨之后，才能被植物利用。
土壤中的细菌之所以能分解尿素，是因为他们能合成脲酶。
2、微生物的筛选应用的原理：人为提供有利于目的菌株生长的条件（包括营养、温度、pH等），同时抑制或阻止其他微生物生长。
个平板，选择菌、测定微生物数量的常用方法：稀释涂布平板法（一般设置3～53落数在30～300的平板进行计数，并取平均值。
统计的菌落数往往比活菌的实际数目低，）和显微镜直接计数、滤膜法。
4、流程：土壤取样（在距地表约3～8cm的土壤层取样，取样用具需灭菌）→样品的稀释（稀释程度细菌>放线菌>真菌）→微生物的培养与观察（细菌30~37℃1~2天；放线菌25~28℃5~7天；霉菌25~28℃3~4天）5、菌落特征：形状、大小、隆起程度、颜色。
6、计算公式：每克样品中的菌落数=（C/V）*M 其中，C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积（ml），M代表稀释倍数升高）pH、鉴别方法：加酚红指示剂，变红（细菌合成的脲酶将尿素分解成氨，7．课题三分解纤维素的微生物的分离1、棉花是自然界中纤维素含量最高的天然产物，商品纤维素：水溶性的羧甲基纤维素钠（CMC —Na）、不溶于水的微晶纤维素（Avicel）。
2、纤维素酶是一种复合酶，包括C酶、C酶和葡萄糖苷酶，前两种酶使纤维素分X1解成纤维二糖，第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖。
3、筛选方法——刚果红（CR）染色法。
刚果红与纤维素等多糖物质形成红色复合物，但并不和纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。
当纤维素被纤维素酶分解后，刚果红－纤维素的复合物就无法形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈。
这样，我们就可以通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。
一种是先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应（先加CR，倒去CR后再加Nacl，目的是洗去结合不牢的CR）；另一种是在倒平板时就加入刚果红（在培养基中加入CR，混匀后倒平板）。
方法一缺点是操作繁琐，加入刚果红溶液会使菌落之间发生混杂；其优点是显示出的颜色反应的就是纤维素分解菌。
方法二的优点是操作简便，不存在菌落混杂问题，缺点是显示出的颜色反应的可能是纤维素分解菌或淀粉分解菌；另一缺点是：有些微生物具有降解色素的能力，它们在长时间培养过程中会降解刚果红形成明显的透明圈，使纤维素分解菌不易区分。
4、分离分解纤维素的微生物的实验流程土壤取样（可将滤纸埋在土壤）→选择培养（此步可省略）→梯度稀释→将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上→挑选产生透明圈的菌落5、对分解纤维素的微生物进行了初步的筛选后，只是分离纯化的第一步，为确定得到的是纤维素分解菌，还需要进行发酵产纤维素酶的实验，纤维素酶的发酵方法有液体发酵和固体发酵两种。