胚胎干细胞治疗脊髓损伤的实验研究
兔脊髓实验实验报告
一、实验背景脊髓损伤是一种严重的伤病，其致残率与致死率非常高。
脊髓损伤后，由于损伤部位神经纤维的断裂和神经细胞损伤，导致脊髓功能丧失，严重影响患者的日常生活。
近年来，神经组织细胞移植逐渐应用于脊髓损伤的治疗并取得了肯定的效果。
本研究旨在通过兔脊髓损伤修复实验，探讨骨髓基质细胞源性神经干细胞在脊髓损伤修复中的作用。
二、实验材料与方法1. 实验动物：选择健康成年兔30只，体重2.5-3.0kg，随机分为三组：对照组、损伤组、移植组。
2. 实验材料：骨髓基质细胞、神经干细胞、兔脊髓损伤修复试剂盒等。
3. 实验方法：（1）损伤组：采用手术方法制作兔脊髓损伤模型。
（2）移植组：在损伤组的基础上，将骨髓基质细胞源性神经干细胞移植到损伤部位。
（3）对照组：仅进行手术操作，不进行神经干细胞移植。
4. 实验观察指标：（1）脊髓损伤评分：观察兔脊髓损伤程度，评分标准如下：0分，无损伤；1分，脊髓部分损伤；2分，脊髓完全损伤。
（2）神经功能评分：观察兔脊髓损伤后的神经功能恢复情况，评分标准如下：0分，无神经功能；1分，部分神经功能；2分，完全神经功能。
（3）脊髓组织学观察：采用HE染色方法观察脊髓组织学变化。
三、实验结果1. 脊髓损伤评分：损伤组脊髓损伤评分为2分，移植组脊髓损伤评分为1分，对照组脊髓损伤评分为0分。
2. 神经功能评分：损伤组神经功能评分为0分，移植组神经功能评分为1分，对照组神经功能评分为2分。
3. 脊髓组织学观察：损伤组脊髓组织学观察可见大量神经元丢失、神经纤维断裂、神经胶质细胞增多等病理变化；移植组脊髓组织学观察可见神经元数量增加、神经纤维生长、神经胶质细胞减少等病理变化；对照组脊髓组织学观察无明显病理变化。
四、实验结论本研究结果表明，骨髓基质细胞源性神经干细胞移植可以显著改善兔脊髓损伤程度，促进神经功能恢复。
这为脊髓损伤的治疗提供了新的思路和方法。
五、实验讨论1. 骨髓基质细胞源性神经干细胞具有多向分化潜能，能够分化为神经元、神经胶质细胞等细胞类型，为脊髓损伤修复提供了细胞来源。
胚胎干细胞技术在再生医学中的应用
胚胎干细胞技术在再生医学中的应用胚胎干细胞技术是一个非常前沿的技术，在医学界中被广泛应用。
由于胚胎干细胞具有很强的分化能力，可以分化为各种不同类型的细胞，因此被视为再生医学领域中具有重大潜力的工具。
胚胎干细胞技术的发展，为治疗许多疾病带来了新的希望，包括因伤害或疾病损坏的组织的再生、器官移植和疾病模型的开发。
本文将详细介绍胚胎干细胞技术在再生医学中的应用。
1. 胚胎干细胞在再生医学中的基础研究胚胎干细胞可以再生多种细胞类型，包括肝细胞、神经元、心脏细胞、肌肉细胞等等。
这些细胞类型的再生为疾病治疗提供了全新的可能。
通过对胚胎干细胞分化机制的深入研究，可以了解人体器官的形成和分化过程，以便实现体外培养和操纵特定细胞类型的技术。
例如，在心脏病治疗中，胚胎干细胞可用于再生新的心脏细胞，这些细胞可以被用来代替死去或损伤的心肌细胞。
而在神经退行性疾病治疗中，胚胎干细胞可用于再生神经元，以恢复受损的神经组织，并帮助患者复原他们失去的功能。
2. 胚胎干细胞在疾病治疗中的应用纵观世界，胚胎干细胞技术被应用于众多的临床治疗模式。
在中国，脊髓损伤、视网膜疾病和自闭症的胚胎干细胞疗法已经有了长足的发展。
在其他国家，胚胎干细胞疗法在胎儿生长的早期阶段，也被用作预防血液疾病的方法。
通过胚胎干细胞技术，人们可以生产出大量单独的细胞，并来安置到体内。
例如，在糖尿病治疗领域，胚胎干细胞可用于生成胰岛素生产细胞，以替代受损的胰岛素生产细胞，从而达到血糖控制的目的。
而对于各种骨骼系统疾病，胚胎干细胞可用于再生骨组织，从而使骨折、退化性骨病等疾病得到治疗。
3. 胚胎干细胞技术的风险和伦理问题在胚胎干细胞技术研究中，有一些重要的伦理和安全性问题也是必须参考的。
其中最明显的是使用胚胎作为胚胎干细胞来源，这一点引发了出许多道伦理争议。
因为，胚胎的使用引发了人们对人类生命的尊重问题，因此很多人不赞成将胚胎实验用于医学研究。
此外，胚胎干细胞也存在着肿瘤和骨骼生成不完全等风险问题。
干细胞治疗脊髓损伤的研究进展
细 胞 ） 及 畸 胎 瘤 干 细 胞 （ ｍ ｒ ｎｃ ｃｒｎｍ ｅ ｂ ｏｉ ａｃ ｏ ａ ｙ ｉ ｃｌ ，Ｅ ｅｓ Ｃ细胞 ） ｌ 。成 体 的许 多组 织 和器官 ，如 表皮 和造 血 系统 ，具 有 修 复 和 再 生 的能 力 ，未 分 化 的
不断 深入 ，干 细胞 已经 逐 步 应 用 到 了 Ｓ Ｉ 治 疗 Ｃ 的
理 性屏 障也 为轴 突再 生提供 了环境 Ｊ 。 因此 ，干 细胞 治 疗 Ｓ Ｉ 能 有 必 要 在 短 暂 治 Ｃ可 疗窗 （ 急性 炎 症 和前 胶 质 瘢 痕 形 成 ） 内移 植 才 能
有 效 。 ２ 干细 胞 的来源 和分 类
治疗 Ｓ Ｉ Ｃ 的研 究进 展综 述如 下 。
根 据干 细 胞 的来 源 和 基本 特 征 的 不 同 ，主要
可 分 为两 种 类 型 ：胚 胎 干 细 胞 和组 织 干 细 胞 。胚
胎 干 细胞 是 指 来 源 于 早 期 胚 胎 组 织 ，具 有 高 度 自
我 更新 和 多 向 分 化 潜 能 的 未 分 化 细 胞 。包 括 ３种
［ 关键词 ］干细胞 ；脊髓损伤 ；治疗
［ 中图分类号 ］ Ｒ ２ ． ３９２ ［ 文献标识码 ］ Ａ ［ 文章编号 ］ １０ ２ ４ （０ ０ ０ — ０ ２— ３ ０ ８— ３４ ２ １ ） １ ０ ４ ０
目前 对 于 脊 髓 损 伤 （ｐｎｌ ｏｄｉｊｒ，Ｓ Ｉ ｓｉａ ｃｒ ｎｕｙ Ｃ ） 的临 床治疗 主要 是 通过 手 术 稳定 当前 的受 损 部 位 ，
大剂 量 的皮 质 类 固 醇 能够 帮助 限 制继 发 性 损 伤 和
细胞移植治疗脊髓损伤的研究进展
细胞移植治疗脊髓损伤的研究进展
徐帆;陈建敏;张晓
【期刊名称】《成都医学院学报》
【年(卷),期】2006(1)1
【摘要】细胞移植治疗脊髓损伤是近年来脊髓损伤修复研究的热点之一.本文综述了采用细胞移植治疗脊髓损伤的研究现状,并提出了笔者的一些见解.本文着重综述了嗅鞘细胞、雪旺细胞和骨髓基质干细胞移植应用于脊髓损伤修复的实验研究,评价了三种细胞移植各自的优缺点,期望为脊髓损伤及其修复的相关研究提供较全面的综合参考资料.
【总页数】4页(P77-80)
【作者】徐帆;陈建敏;张晓
【作者单位】成都医学院03级药学本科班,成都,610083;成都医学院实验技术教研室,成都,610083;成都医学院实验技术教研室,成都,610083
【正文语种】中文
【中图分类】Q813.R651.2
【相关文献】
1.脂肪干细胞移植治疗脊髓损伤研究进展 [J], 丛培芳;金红旭;侯明晓;柳云恩;张玉彪;佟昌慈;史秀云;刘颖;毛舜;佟周;施琳
2.间充质干细胞移植治疗脊髓损伤的研究进展 [J], 卓毅;卢明
3.人脐带间充质干细胞移植治疗脊髓损伤的研究进展 [J],
4.神经干细胞移植治疗脊髓损伤研究进展 [J], 王希;王锐英
5.诱导多能干细胞移植治疗脊髓损伤的研究进展 [J], 范佳俊;王君杰;陈烽;陈哲因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
脊髓损伤的干细胞治疗-文献汇报
治疗方式及细胞选择
嗅鞘细胞 （Olfactory Ensheathing Cells）
施旺细胞 （Schwann Cells）
成人神经前体细胞 （Adult Neural Progenitor Cells）
间充质干细胞 （Mesenchymal stem cells, MSCs）
诱导性多能干细胞 （Induced pluripotent stem cells, iPSCs）
04
讨论及参考文献
讨论及参考文献
间充质干细胞（Mesenchymal stem cells, MSCs），易获得，可从骨髓中 收集到的最为常见的干细胞，在脊髓损伤患者体内进行MSCs移植实现的功能性恢 复比较复杂，它能够阻止导致细胞死亡的炎性反应激活，但不具备直接替代神经细 胞的能力。
周围神经系统干细胞（Peripheral nervous system stem cells），主要包括： 施旺细胞和嗅鞘细胞，它们能够分泌神经生长因子来辅助细胞生长和临时地发挥着 替补细胞（replacement cell）的作用。之前的研究表明有一定的前景，其中一项 研究证实感觉评分取得显著改善，但运动功能仍然没有改善。
治疗效果评价
[1] Schroeder GD1, Kepler CK, Vaccaro AR. The Use of Cell Transplantation in Spinal Cord Injuries . Journal of the American Academy of Orthopedic Surgeons（JAAOS） 2016 Apr;24 (4):266-275
治疗效果评价
[1] Schroeder GD1, Kepler CK, Vaccaro AR. The Use of Cell Transplantation in Spinal Cord Injuries . Journal of the American Academy of Orthopedic Surgeons（JAAOS） 2016 Apr;24 (4):266-275
干细胞临床实验研究
干细胞临床实验研究干细胞临床实验研究是近年来科学界备受关注的热门话题。
干细胞具有自我更新和分化为多种细胞类型的能力，因此被认为具有巨大的潜力用于治疗各种疾病。
本文将介绍干细胞的概念、分类以及临床实验研究的进展和挑战。
一、干细胞概念和分类干细胞是指具有自我更新能力和分化为不同类型细胞的特殊细胞。
根据来源和潜能的不同，干细胞可以分为胚胎干细胞和成体干细胞。
1. 胚胎干细胞：来自胚胎早期发育阶段的干细胞，可以分化为几乎所有细胞类型。
2. 成体干细胞：存在于已分化组织或器官中的干细胞，具有较弱的分化潜能，只能分化为特定细胞类型。
二、干细胞临床实验研究进展干细胞在医学领域中的应用前景广阔。
以下是一些干细胞临床实验研究的进展：1. 小儿骨髓移植：干细胞移植已成为治疗小儿血液系统疾病的有效方法，如再生障碍性贫血和白血病等。
2. 心脏再生：研究人员成功地将干细胞注入心脏患者的受损组织，促进了心脏再生和修复。
3. 神经系统疾病：干细胞可以分化为神经细胞，因此被广泛应用于治疗神经退行性疾病，如帕金森病和脊髓损伤等。
4. 结缔组织再生：干细胞在修复组织缺损和创伤方面具有潜力，可以用于修复皮肤、骨骼和软骨等组织。
三、干细胞临床实验研究挑战干细胞临床实验研究仍面临许多挑战和争议：1. 伦理道德问题：胚胎干细胞的获取涉及胚胎状态的改变和使用，引发了伦理道德争议。
2. 免疫排斥反应：干细胞移植可能引起免疫排斥反应，需要寻找有效的免疫抑制剂。
3. 肿瘤形成风险：干细胞增殖能力强，存在潜在的肿瘤形成风险，需要严格控制干细胞的分化。
4. 大规模制备困难：目前，大规模制备干细胞仍存在许多技术问题，限制了其临床应用的推广。
四、结语干细胞临床实验研究是一个充满希望和挑战的领域。
尽管存在一些限制和难题，但干细胞仍然被认为是未来医学领域的重要突破口。
通过不断的研究和技术进步，相信干细胞在治疗疾病方面的应用将会越来越广泛，给患者带来更多福音。
胚胎干细胞移植治疗脊髓损伤的研究进展
ｏ Ｓ ｎ ｆ ｐｉｅ，Ｌｏ ｇ ｕ ｏｐｉ ｌ ｈ ｎ ｈ ｉＵｎ ｖ ｒｉｙ ｏ ｉｅｅＴｒ ｄ ｔｏ ａ ｅ ｉｉｅ，Ｓ ａ ｇｈ ｉ２ ０ ３ ｎ ｈ ａＨ ｓ ｔ ，Ｓ ａ ｇ ａ ｉｅ ｓｔ ｆ Ｃｈ ｎ ｓ ａ ｉｉｎ ｌＭ ｄ ｃｎ ａ ｈ ｎ ａ ０ ０ ２，Ｃｈ ｎ ｉａ
Ａｂ ｔ ａ ｔ Ｔｒ ｎ ｐ ａ ｔ ｔｏ ｆｅ ｒ ｏ ｉ ｓ ｅ ｃ ｌ ｏ ｌ ｒ ｍｏ ｅ ｎ ｒ ｅ ｒ ｐ ｉ ｙ ｐ ｏ ｉ ｉ ｇ ｎ ｔｉ ｎ ｓｔ ｈ ｎ ｕ ｅ ｐ ｎ ｌ ｏ ｄ ｓｒ ｃ ： ａ ｓ １ ｎ ａ ｉ ｎ ｏ ｍｂ ｙ ｎ ｃ ｔ ｍ ｅ ｌ ｃ ｕ ｄ ｐ ｏ ｔ ｅ ｖ ｅ ａｒ ｂ ｒ ｖ ｄ ｎ ｕ ｒｅ ｔ ｏ ｔ ｅｉ ｊ ｒ ｄ ｓ ｉ ａ ｃ ｒ ， ｓ
Ｅｍｂ ｙ ｎｃＳｅ Ｃｅｌ ｒ ｎ ｐａ ｔｔ ｎｆｒＳ ｉ ａ Ｃ ｒ ｎ ｕ ｙ（ ｅ ｉｗ） ｒ ｏ ｉ ｔｍ ｌＴ ａ ｓ ｌｎ ａｉ ｏ ｐｎ ｌ ｏ ｄＩｊ ｒ ｒ ｖｅ ｏ ＸＵ Ｌｅｑ ｎ，ＤＩ Ｇ Ｄａ 一 ｎ —ｉ Ｎ ｏ ｇ，Ｌ Ｘｉｏｆｅ ｇ，ｅ ａ ．Ｉ ｓｉｕｅ ａ ｎ ｔ １ ｎ ｔｔｔ
［ 要 ］ 胚 胎 干 细 胞 移 植 具 有 为 损 伤 的脊 髓 提 供 营 养 ， 分 化 成 少 突 胶 质 细 胞 使 脱 髓 鞘 的神 经 再 髓 鞘 化 ， 分 化 成 神 经 元 并 与 摘 或 或
宿 主 神 经 元 建 立 突 触 连 接 等 作 用 ， 而修 复 受 损 的 神 经 功 能 ， 从 在脊 髓 损 伤 的 治 疗 中具 有 良好 的应 用 前 景 。 ［ 键 词 ］ 胚 胎 干 细 胞 ； 髓 损 伤 ； 植 ； 生 ； 复 ； 述 关 ’ 脊 移 再 修 综
干细胞治疗脊髓损伤的实验及临床研究进展
交 通 、工 矿事 故 及 运 动 意 外 中 常见 的身 体 分 化 潜 能 ，在 特定 的环 境 中 对神 经 系 统 缺 段 。美 国 科 学 家 ＭｃＤ ｎｌ ｏａｄ等 。 次 通 首 损 伤 。在 中 国 ，据 不 完 全 统计 ，现 有 脊 髓 血 、损 伤 、变 性 等 原 因造 成 的功 能障 碍 有 过 移 植 小 鼠胚 胎 干细 胞 治疗 脊 髓 损 伤 ，他 损伤患者约 ４ ０万 ，每 年 新 增病 例约 １ 。 明 显 的 治疗 作 用 ，并 且 具 有 来源 广 泛 、可 们先将小鼠胚胎干细胞体外增殖形成拟胚 万 目前 脊髓 损伤 治 疗 主 要集 中在 以下 几 个 方 在 体 外 扩增 及 定 向诱 导 分 化 、在 神 经 组 织 体 ，再 移植 到大 鼠胸 段脊 髓 挫 伤 处 ，发现 面 ： （ ） 控 制 继 发 性 损 伤 ，包 括 手 术 减 中长 期 生存 并 进 行 整 合 等特 点 。干 细 胞 在 这 些 细胞 至少 存 活 ５周 ，并 向头 端 和尾 端 １ 压 、激 素 冲击 疗 法 、 自由 基 清 除 等 。 （ ） ２
Ｐ ｈ ｅ ｅｅ ｌｒｃｃ Ｃ ｉ ｓＧｎｒ ａｔｅ ｎｅ ａＰ ｉ
Ｉ月 第１ Ｂ ． １ 稍蟹 第１ｊ 辘
・
２ ７・ １
骨髓基质干细胞移植治疗脑和脊髓损伤的研究进展
Ｓ Ｃ ｓ 在体 内或体外 都可分化为神经细胞 ， Ｂ ＭＳ Ｃ ｓ向神 经细胞 分化 可 能 与 ｃ Ａ ＭＰ的 增 加 激 活 Ｐ Ｋ Ａ 和 ＭＥ Ｋ —Ｅ Ｒ Ｋ 信 号
通 路 。
１ ． １ 骨髓基质 干细胞 移植 治疗脑损伤 的实验研究 １ ９ ９ ９年 Ｋ ｏ ｐ ｅ ｎ等… 将骨 髓基 质 干细 胞 （ Ｂ Ｍ Ｓ Ｃ ｓ ）注 射到 新 生小 鼠
分评价神经 功能。所有 大 鼠的神经 功能 缺损症 状 随时 间的 推移 而减轻 ，且 移植 组 明显好 于对 照组 。Ｂ Ｍ Ｓ Ｃ ｓ 表达 了神 经元和少 突胶质 细胞 蛋 白标记物 。Ｈｏ ｆ ｓ ｔ ｅ ｔ ｔ ｅ ｒ 等 移植 Ｂ Ｍ—
Ｓ Ｃ ｓ 治疗大 鼠脊髓挫伤 ，Ｂ ＭＳ Ｃ ｓ 与非 成熟 星形细胞 （ 损 伤后 来 源于干细胞 ）紧 密整 合 ；在移 植 物与 瘢 痕组 织 交界 处 ， 发现 Ｎ Ｆ 、５一Ｈ Ｔ阳性 纤 维 ；Ｂ ＭＳ Ｃ ｓ表 达纤 维 蛋 白连 接 素 （ ｉ ｆ ｂ ｒ ｏ ｎ ｅ ｃ ｔ ｉ ｎ ）和 Ｎ ｅ ｕ Ｎ免疫活性 ；Ｂ ＭＳ Ｃ ｓ 可能引导再生 的神
３ ｄ和 ７ ｄ ，用 Ｒ Ｔ—Ｐ Ｃ Ｒ检测 Ｇ Ｄ Ｎ Ｆ（ ｇ ｌ ｉ ｏ ｃ ｙ ｔ ｅ ｄ ｅ ｉ ｒ ｖ ｅ ｄ ｎ ｅ ｕ ｒ ｏ ｔ ｒ ｏ —
森 病模型 鼠，发 现转 基 因 Ｂ ＭＳ Ｃ ｓ对黑 质 细胞 有保 护作 用 。 Ｌ ｉ 等 阻塞大 鼠大脑 中动脉 ，在纹 状体 局部 注射和 静脉 移
１ ． ２ 骨 髓 基 质 干 细 胞 移 植 治 疗 脊 髓 损 伤 的 实 验 研 究 Ｃ ｈ ｏ ｐ ｐ ｌ １ 等在大 鼠脊髓 节段 损伤模 型 ，１周后 在损 伤 中
细胞移植治疗脊髓损伤的进展
2012年12月第9卷第36期·综述·CHINA MEDICAL HERALD 中国医药导报脊髓损伤（spinal cord injury ，SCI ）是一种常见的中枢神经系统的严重创伤，大多数由车祸、高处坠落、地震等意外事故造成脊柱脱位、骨折所引起的。
根据国际SCI 信息网报道，仅美国就有30万SCI 患者，并且每年新增1万例。
目前，尚无际性SCI 发生率的资料，估计每年至少有13万SCI 患者[1]。
SCI 发生后，由于神经元缺乏再生功能；损伤后期受损部位出现胶质瘢痕增生，阻止新生的轴突通过瘢痕组织；损伤部位的慢性脱髓鞘等病理改变，导致损伤平面以下各种感觉和运动功能障碍[2]。
由于SCI 发病率、死亡率、致残率都高，病理过程十分复杂，对SCI 的治疗仍是临床面临的难题。
近年来，随着科技进步及研究的不断深入，细胞移植治疗SCI 已成为热点。
移植的细胞能替代受损细胞如神经元和少突胶质细胞，分泌促进再生的NTFs ，保护神经元减轻继发损伤；修复损伤的髓鞘；构成新的神经轴突连接；增加趋化性，减少细胞死亡及轴突枯死，从而达到修复损伤脊髓的作用[3]。
目前，用于细胞移植治疗SCI 的种子细胞包括：胚胎干细胞、神经干细胞、间充质干细胞、嗅鞘细胞、雪旺细胞、少突胶质细胞前体细胞等。
但迄今为止，尚无任何一种细胞移植后能使SCI 患者痊愈，主要由于不同的细胞具有不同的生物学特性及功能，细胞移植入损伤脊髓后，存活、生长、分化各异，脊髓损伤后的病理改变复杂多样，使得细胞移植治疗脊髓损伤的措施难得得到质的突破。
本文将近年来所取得的相关研究进展做一综述。
1胚胎干细胞（embryonic stem cells ，ESCs ）ESCs 是来源于囊胚内细胞团的一种高度未分化细胞，它在体内可以参加各种组织的发育。
ESC 具有无限增殖的能力，它在体外能持续培养，可进行反复冻存或复苏，多次传代仍能保持分化潜能及正常核型；ESC 还具有发育全能性特点，可以自发分化为来自外、中、内三个胚层的多种类型的细胞，在特定诱导条件下可定向分化成神经元或少突胶质细胞，而被认为是细胞移植治疗SCI 的理想的种子细胞来源。
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Ｔ ｈ ｅ Ａ ｉｌ ｆ ｉ ａ ｔ ｅ ｄＨ ｏ ｓ ｐ ｉ ｔ ａ ｌ ｏ ｆ Ｓ ｈ ｅ ｎ ｚ ｈ ｅ ｎＢ ａ ｏ ａ ｎ ｆＳ ｏ ｏ ｕ ｔ ｈ ｅ ｒ ｎ ｍｅ ｄ ｉ ｃ ａ ｌ ｕ ｎ ｉ ｖ ｅ ｒ ｓ ｉ ｔ ｙ ， Ｓ ｈ ｅ ｎ ｚ ｈ ｅ ｎ５ １ ８ １ ０ １ ， Ｇ ｕ ａ ｎ ｇ ｄ ｏ ｎ ｇ， Ｐ ． Ｒ ． Ｃ ｈ ｉ ｎ ａ
胶质细胞 ， 对肢体功能 的改善有一定 的促进作用 。
关键词 ： 胚胎干细胞 ； 脊髓损伤 ； 移植 ； 功能恢复
中图分类号 ： Ｒ ６ ５ １ ． ２ 文献标识码 ： Ａ 文章 编 号 ： １ ０ ０ ９ — ９ ７ ２ ７ （ ２ ０ １ ５ ） ０ ９ — １ ０ ３ １ — ０ ６ Ｄ Ｏ Ｉ ： Ｉ Ｏ ． １ ３ ６ ０ ４ ／ ｊ ． ｃ ｎ ｋ ｉ ． ４ ６ — １ ０ ６ ４ ／ ｒ ． ２ ０ １ ５ ． ０ ９ ． ０ １
摘要 ： 目的 探讨未 经诱 导 的胚胎 干细胞 （ Ｅ ｍ ｂ ｒ ｙ ｏ ｎ ｉ ｃ ｓ ｔ ｅ ｍ ｃ ｅ ｌ ｌ ｓ ， Ｅ Ｓ Ｃ ｓ ） 移植 对 Ｓ Ｄ大 鼠脊髓损 伤（ Ｓ ｐ ｉ ｎ ａ ｌ ｃ ｏ ｒ ｄ ｉ ｎ ｊ ｕ ｙ， ｒ Ｓ Ｃ Ｉ ） ￣ 功能恢 复的影响 。方 法 取受 孕昆 明系小 鼠的囊胚进行胚 胎干细胞 的提取 、 建 系， 以流式细胞仪 测试阶段特
徐进 ， 郑 碌 ， 曹玉华 。 ， 刘韬 ， 朱 肖奇
１ ． 南方 医科大学 附属深圳宝安 医院， 广 东 深圳 ５ １ ８ １ ０ １ ； ２ ． 南方 医科 大学珠 江医院 ， 广东 广州 ５ １ ０ ０ ０ ０ ３ ． 深圳市博泰生物 医学科技发展有 限公 司， 广东 深圳 ５ １ ８ ０ ０ ０
中国热 带医学 ２ Ｏ １ ５ 年第 １ ５ 卷第Ｏ ９ 期
Ｃ ｈ ｉ ｎ ａ Ｔ ｒ ｏ ｐ ｉ ｃ ａ ｌ Ｍｅ ｄ ｉ ｃ ｉ ｎ ｅ ， Ｓ ｅ ｐ ｔ ｅ ｍｂ ｅ ｒ ２ ０ １ ５ ， Ｖ ｏ １ ． １ ５ ， Ｎ ｏ ． ０ ９
・
论
著・
胚胎干细胞 治疗脊髓损伤 的实验研究
（ Ａ组 ， ８ 只） ， 只行脊髓损 伤手术而不行 特殊治疗 ； 生理盐水 治疗组 （ Ｂ 组， ９ 只） ， 于损伤 区域局 部注射只） ， 于损 伤 区域局 部注射 ２ Ｏ 标记好 的 Ｅ Ｓ Ｃ ｓ ， 总细胞数 为 ２ ｘ ｌ Ｏ 个 。术后 １ 、 ２ 、 ３ 、 ４ 、 ５ 、 ６ Ｎ 采用 Ｂ Ｂ Ｂ 后 肢运动功能评分 观察大 鼠神经功 能恢 复情况 ， 并在第 ６ Ｎ取损伤脊髓 行病理组织 Ｈ Ｅ染色和免疫组织化 学染色
Ｅ ｘ ｐ ｅ ｒ ｉ ｍｅ ｎ ｔ ａ ｌ ｓ ｔ ｕ ｄ ｙ ｏ ｎ ｔ ｒ ａ ｎ ｓ Ｄ ｌ ａ ｎ ｔ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ ｅ ｍｂ ｒ ｙ ｏ ｎ ｉ ｃ ｓ ｔ ｅ ｍ ｃ ｅ ｌ ｌ ｓ ｉ ｎ ｔ ｒ ｅ ａ ｔ ｉ ｎ ｇ ｓ ｐ ｉ ｎ ａ ｌ ｃ ｏ ｒ ｄ ｉ ｎ ｊ ｕ ｒ ｙ
观察 。结 果 Ｅ Ｓ Ｃ ｓ 经体外培养 ， 呈典 型的“ 鸟巢 ” 状生长 ， 碱性磷酸酶 （ ａ ｌ ｋ ａ ｌ ｉ ｎ ｅ — ｐ ｈ ｏ ｓ ｐ ｈ ａ ｔ ａ ｓ ｅ ， ＡＫ Ｐ ） 染色 阳性 ， Ｓ Ｓ Ｅ Ａ 一 １ 表
达 阳性 ， 并成功标记上 ５ － Ｂ ｒ ｄ Ｕ。大 鼠实验 ， Ｂ Ｂ Ｂ运动功能评分显示 脊髓 损伤开始 ０～１ 周内， 三组 大鼠运动功能恢复情
蛋 白（ Ｎ ｅ ｕ ｒ ａ ｌ ｎ ｅ ｓ ｔ ｐ ｒ ｏ ｔ ｅ ｉ ｎ ， Ｎ ｅ ｓ ｔ ｉ ｎ ） 、 神 经元特异 性蛋 白（ Ｎ ｅ ｕ ｒ ｏ ｎ — ｓ ｐ ｅ ｃ ｉ ｉ ｆ ｃ ｎ ｕ ｃ ｌ ｅ ａ ｒ ｐ ｒ ｏ ｔ ｅ ｉ ｎ ， Ｎ ｅ ｕ Ｎ） 及 神经胶质纤 维酸性 蛋 白 （ Ｇ ｌ ｉ ａ ｌ ｉ ｆ ｂ ｒ ｉ ｌ ｌ ａ ｙａ ｒ ｅ ｉ ｄ ｉ ｅ ｐ ｒ ｏ ｔ ｅ ｉ ｎ ， Ｇ Ｆ Ａ Ｐ ） 。结论 将未 分化 的 Ｅ Ｓ Ｃ ｓ 局部 移植入 Ｓ Ｃ Ｉ 大 鼠体 内后 ， 能够分化成 神经元及 神经
异性胚胎干细胞表 面抗原 （ ｓ ｔ ａ ｇ ｅ － ｓ ｐ ｅ ｃ ｉ ｉ ｆ ｃ ｅ ｍ ｂ ｙｏ ｒ ｎ ｉ ｃ ａ ｎ ｔ ｉ ｇ ｅ ｎ ｓ １ ， Ｓ Ｓ Ｅ Ａ 一 １ ） ， 进行干性鉴定并进行 ５ 一 溴脱氧尿嘧啶核苷 （ ５ 一
ｂ ｍｍｏ ｄ ｅ ｏ ｘ ｙ ｕ ｒ ｉ ｄ ｉ ｎ ｅ ， ５ 一 Ｂ ｒ ｄ ｕ） 染色示踪 。将 ３ ０ 只ｓ Ｄ大 鼠制备为 Ｔ １ ０ 脊髓损伤模 型 ， 将存活 的 ２ ６ 只大 鼠随机 分为对照组
况差别无统计学意义 （ ０ ． ０ ５ ） 。第 ２～６ Ｎ， Ｃ组与 Ａ、 Ｂ 组 比较差异 有统计学意义 （ Ｒ０ ． ０ ５ ） 。Ｈ Ｅ染色观察 ： 三组皆有损
伤区域 内空洞形成及局部细胞坏死 ， 但 Ｃ组明显较 Ａ、 Ｂ 两组小 。免疫组 化染 色观察 Ｃ 组 在损 伤区域表达双染的神经巢
Ｃ ｏ ｒ ｒ ｅ ｓ ｐ ｏ ｎ ｄ ｉ ｎ ｇ ａ ｕ ｔ ｈ ｏ ｒ ： ＺＨＵ Ｘｉ ａ ｏ — ｑ ｉ ， Ｅ— ｍａ ｉ ｈ ５ １ ６ ２ ８ ９ ５ ６ ５ ＠ｑ ｑ ． ｃ ｏ ｎ ｒ
Ａｂ ｓ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ ： Ｏｂ ｊ ｅ ｃ ｔ ｉ ｖ ｅ Ｔ ｏ ｅ ｘ ｐ ｌ ｏ ｒ ｅ ｔ ｈ ｅ ｅ ｆ ｆ ｅ ｃ ｔ ｏ ｆ ｔ ｒ ａ ｎ ｓ ｐ ｌ ａ ｎ ｔ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ ｅ ｍｂ ｙｏ ｒ ｎ ｉ ｃ ｓ ｔ ｅ ｍ ｃ ｅ ｌ ｌ ｓ （ Ｅ Ｓ Ｃ ｓ ） ｏ ｎ ｎ ｅ ｕ ｒ ｏ ｌ ｏ ｇ ｉ ｃ ａ ｌ ｆ ｕ ｎ ｃ ｔ ｉ ｏ ｎ ａ ｌ