医学检验技能操作
医学检验实习工作流程及操作规范

医学检验实习工作流程及操作规范医学检验实习工作流程及操作规范随着科技的发展,医学检验也逐渐成为医疗领域中不可或缺的重要环节。
医学检验是一种通过实验室检测人体生理和生化指标来评估身体状况、诊断疾病和指导治疗的技术。
作为医学领域中最基本的技术之一,医学检验实习工作流程及操作规范非常重要。
一、医学检验实习工作流程医学检验实习工作流程包括样本采集、样本运输、样本处理、实验室测试、结果输出和质量控制。
这些环节是医学检验的基本流程,也是医学检验实习生必须掌握的基本技能。
1、样本采集样本采集是医学检验的第一步。
样本的采集方法和技术对于检测结果的准确性和可靠性至关重要。
实习生在实际操作中需要掌握各种样本的采集方法、不同部位的取样方法及其注意事项等。
2、样本运输样本运输是将采集好的样本送回实验室进行检测的重要步骤。
在样本运输过程中,实习生需要遵循国家规定的医疗废物管理相关法规,确保样品的质量和安全。
3、样本处理样本处理是样本进入实验室后的重要环节。
实习生需要根据实验室规定的操作规程进行样本的分类、分装和标识等操作。
4、实验室测试实验室测试是医学检验的核心环节之一。
实习生需要学习并掌握各种实验室检测方法的原理、操作技巧及其诊断意义等,以便准确地完成检测任务。
5、结果输出结果输出是医学检验的最后一步。
实习生需要对检测结果进行质量评估、统计分析和诊断判读等。
6、质量控制质量控制是医学检验中必不可少的一环,是保证检验结果准确、可靠和一致性的重要手段。
实习生需要掌握外部质控和内部质控的相关知识和技能,以提高检验质量。
二、操作规范医学检验实习工作中操作规范是确保检验质量的关键。
实习生需要严格遵守以下操作规范:1、安全操作实习生在工作中需要时刻关注自身安全,遵守实验室安全操作规程,使用防护用品,保证个人和他人的安全。
2、标本标识规范在对样本进行采集、处理和运输时,实习生需要掌握严格的标本标识规范,确保样本来源的准确性和可靠性。
7210医学检验技术专业技能操作考试大纲

本考试大纲适用于中等职业学校医学检验技术专业。
.教学内容及实施建议
(1)考纲对应教学内容,全面考核中等职业学校医学检验技术专业学生在细菌染色的能力、固体和液体培养基接 种能力、正确使用显微镜对微生物或寄生虫形态及特殊结构观察能力、AB。血型鉴定能力、规范使用半自动生化分 析仪或721/722分光光度计测定血清成分的能力,考试范围及难易程度合理,适用于选拔技术技能人才。
.教育部《普通高等学校高等职业教育(专科)专业设置管理办法》(教职成(2015)10号)。
.医学检验技术专业对口涵盖专业范围,如表1所示。
表1医学检验技术专业对口涵盖专业范围
二、考试方式
2024年黑龙江省职业教育春季高考医学检验技术专业技能考试为实际操作考试方式,考试总分为200分,实操 项目随机抽取,考试时间根据项目为15-20分钟。
(4)正确处理操作中出现的废弃物。 (5)操作结束后清洁工作台,摆放物品到指定位置。 技能模块2固体和液体培养基接种技术 1.知识与技能 (1)掌握固体和液体培养基的用途。 (2)能够独立进行固体和液体培养基接种。 (3)能够正确培养细菌。 2.设备与材料 (I)9cm普通琼脂平板、液体培养基。 (2)表皮葡萄球菌或大肠埃希菌(7Cm血平板)培养物。 (3)恒温箱。 (4)接种环、打火机、酒精灯、试管架、标记笔、消毒洗手液、洗面盆、抹布、锐器盒、污物缸、废液缸等。 3.操作规范要求 (1)遵守职业要求正确着装。
(3)能正确观察凝集现象并准确进行结果报告。 (4)如需使用显微镜,能规范操作并正确进行结果判断。 (5)能根据考试要求,规范填写相关内容。 .试剂与器材 (1)载玻片或有凹槽的玻璃板。 (2)标准抗A、抗B血清(商品)。 (3)被检者5%红细胞生理盐水悬液。 (4)标记笔、蜡笔、滴管、医用纱布 (5)显微镜。 (6)锐器盒、污物缸、废液缸。 .操作规范要求 (1)遵守AB。血型鉴定操作规范和生物安全,医疗垃圾分类放置。 (2)正确穿着佩戴个人防护用品,包括白服、帽子、口罩、手套。 (3)工作台面器材齐全,放置整齐。
医学检验科技能操作内容有哪些方面

医学检验科技能操作内容有哪些方面医学检验科技能操作内容包括以下几个方面:
1. 标本采集与处理
- 静脉血采集
- 毛细血采集
- 尿液采集
- 体液采集(如胸腔积液、腹腔积液等)
- 标本预处理(离心、分离等)
2. 实验室仪器操作
- 生化分析仪
- 血液分析仪
- 免疫分析仪
- 分子生物学仪器(PCR、基因测序仪等)
- 显微镜操作
3. 实验操作技能
- 生化实验操作(如血糖、血脂、肝肾功能等检测)
- 免疫实验操作(如各种病毒抗体检测)
- 血液学实验操作(如血常规、血型等)
- 分子生物学实验操作(如基因检测)
- 微生物学实验操作(如细菌培养、药敏试验等)
4. 质量控制
- 内部质量控制
- 外部质量评价
- 仪器校准与维护
- 生物安全防护
5. 结果分析与报告
- 检验结果判读
- 结果解释与临床参考
- 检验报告书写
医学检验科技能操作内容广泛、专业性强,需要具备扎实的理论知识基础和熟练的实操技能,对于确保检验结果准确性、指导临床诊疗具有重要意义。
医学生临床技能操作指南

医学生临床技能操作指南公司内部编号:(GOOD-TMMT-MMUT-UUPTY-UUYY-DTTI-腰椎穿刺Lumbar Puncture一、目的常用于检查脑脊液的性质,对诊断脑膜炎、脑炎、脑血管病变、脑瘤等神经系统疾病有重要意义。
也可测定颅内压力和了解蛛网膜下腔是否阻塞等,有时也用于鞘内注射药物。
二、适应证1.在下列情况下需进行脑脊液分析以协助诊断:脑膜炎、脑炎、吉兰.巴雷综合征、淋巴瘤及其他情况。
2.脑脊液压力及脑脊液动力学检查。
3.注射造影剂及药物:脊髓造影时注射造影剂;注射抗肿瘤药、镇痛药及抗生素。
三、禁忌证1.颅内压增高。
2.穿刺点附近感染。
3.准备进行脊髓造影或气脑造影。
4.凝血障碍。
5.休克、衰竭或濒危状态。
6.后颅窝有占位性病变。
注意:明显视乳头水肿或有脑疝先兆者禁忌穿刺。
四、术前准备’1.患者准备1)向患者交代腰椎穿刺目的、操作过程和可能的风险。
2)检查患者眼底,判断是否存在眼底水肿,查看患者头颅CT 及MRI 影像。
3)签署知情同意书。
注意:术前沟通,确认知情同意。
2.材料准备1)消毒腰穿包,内含弯盘、腰穿针、洞巾、止血钳、巾钳、小消毒杯、纱布、标本容器。
2)无菌手套。
3)操作盘。
4) Sml 注射器。
5) -次性测压管。
6) 2%利多卡因。
7)碘伏、纱布、胶布。
五、操作步骤1.体位:患者侧卧,靠近床沿,头向前胸部屈曲,双手抱膝,使其紧贴腹部,这种体位使脊柱尽量后突以增宽脊椎间隙(图2-1)。
对于肥胖、关节炎或脊柱侧弯的患者也可取坐位腰穿。
2.确定穿刺点:一般以双侧髂嵴最高点连线与后正中线交汇处为穿刺点(相当于L3-L4椎间隙)。
有时也可在上一或下一腰椎间隙穿刺。
注意:一般以双侧髂嵴最高点连线与后正中线交汇处为穿刺点。
3.打开腰穿包,戴上无菌手套,用碘伏消毒穿刺区,覆盖数个椎间隙,盖洞巾。
4.于L3—L4 椎间隙皮下注射利多卡因,产生皮丘:然后麻醉深部结构。
注意:麻醉也可用普鲁卡因,普鲁卡因需皮试。
各医学专业基本技能操作项目

各医学专业基本技能操作项目一、急诊基本技能考试操作项目1、心肺复苏2、气管插管术3、洗胃术4、中心静脉穿刺术5、有/无创呼吸机使用6、除颤仪的使用7、脊柱损伤颈髓损伤胸腰椎骨折情况的搬运8.开放性伤口的止血方法和包扎方法9、胸腔穿刺闭式引流术、心包穿刺术10、腹穿腰穿环甲膜穿刺术11、传染病的防护与应对正确的洗手法与穿脱隔离衣方法注:每项操作后都会有2—3项提问。
二、内科基本技能考试操作项目1、心肺复苏2、穿脱隔离衣3、插胃管4、胸腔穿刺腹穿腰穿骨髓穿刺5、除颤仪的使用6、呼吸机使用7、心电图判读三、外科基本技能考试操作项目1、心肺复苏2、穿手术衣。
3、换药4、插胃管5、导尿6、胸腔穿刺、腹穿、腰穿7、中心静脉穿刺术8、开放性伤口的止血包扎9、脊柱损伤颈髓损伤胸腰椎骨折情况的搬运10、呼吸机使用11、气管插管四、妇产科基本技能考试操作项目1、心肺复苏2、穿手术衣3、换药4、插胃管5、导尿6、胸腔穿刺、腹穿、腰穿、中心静脉穿刺术(股静脉途径、下肢静脉切开)7、有/无创呼吸机使用8、气管插管术9、妇科盆腔检查10、四步触诊11、骨盆外侧量12、妇产科常见激素化验判读五、儿科基本技能考试操作项目1、心肺复苏2、穿脱隔离衣3、胸腔穿刺腹穿腰穿骨髓穿刺4、除颤仪的使用5、呼吸机使用6、气管插管7、水电解质平衡判读六、麻醉基本技能考试操作项目1、心肺复苏2、全身麻醉与气管插管术3、腰椎硬膜外联合麻醉术4、问题七、医学检验基本技能考试操作项目1、心肺复苏2、白细胞计数3. 尿沉渣有形成分显微镜检查4. 脑脊液细胞计数5. 骨髓涂片铁染色6、细菌革兰氏染色及形态识别7、血涂片细胞识别八、病理基本技能考试操作项目1、心肺复苏2、病理标本大体观察及取材3、病理标本接收、登记及处理4、常规病理切片诊断九、临床药学基本技能考试操作项目(一)心肺复苏(二)处方审核与发药交代1、处方调剂操作规程2、处方审核3、处方调剂判断4、药品采购入库5、问题:A型—16(三)咨询服务与用药宣传1、操作2、问题:B型—15(四)处方点评与医嘱用药分析1、操作2、问题:C型—121、操作2、问题:型—15十、医学影像专业基本技能考试操作项目(一)心肺复苏(二)X线报告描写内容及规范1、胸部X线报告2、心脏平片X线诊断报告3、腹部平片X线诊断报告4、立位片腹平片5、骨与关节外伤X线诊断报告6、关节病变X线诊断报告7、四肢长骨病变X线诊断报告8、脊柱病变X线诊断报告9、上胃肠道造影诊断报告(三)CT或MRI诊断报告1、颅脑与五官2、颈部CT或MRI诊断报告3、胸部CT诊断报告4、心脏CT或MRI诊断报告5、腹部CT或MRI诊断报告6、盆腔CT或MRI诊断报告7、脊柱、脊椎CT或MRI诊断报告:8、四肢关节、骨骼CT或MRI诊断报告:(四)上消化道气钡双对比造影技术造影方法与步骤1、一般准备2、检查步骤3、造影的具体要求十一、耳鼻喉专业基本技能考试操作项目1、心肺复苏2、气管切开3、鼓膜穿刺4、口咽部检查5、上颌窦穿刺十二、眼科专业基本技能考试操作项目1、泪道冲洗2、球后注射3、压陷或眼压计4、泪液破裂时间分泌实验5、房角镜检测6、心肺复苏十三、口腔专业基本技能考试操作项目1、后牙铸造全冠牙体预备(仿头模上)2、口腔一般检查(在口腔治疗椅上相互进行)3、磨牙复面洞制备术(在离体牙上)4、下颌磨牙拔除术(包括麻醉)5、牙列印模制取(考生相互在口腔治疗椅上制取)6、心肺复苏十四、精神专业基本技能考试操作项目1、心肺复苏(单人)2、精神检查(合作病人)。
各医学专业基本技能操作项目

各医学专业基本技能操作项目一、急诊基本技能考试操作项目1、心肺复苏2、气管插管术3、洗胃术4、中心静脉穿刺术5、有/无创呼吸机使用6、除颤仪的使用7、脊柱损伤颈髓损伤胸腰椎骨折情况的搬运8.开放性伤口的止血方法和包扎方法9、胸腔穿刺闭式引流术、心包穿刺术10、腹穿腰穿环甲膜穿刺术11、传染病的防护与应对正确的洗手法与穿脱隔离衣方法注:每项操作后都会有2—3项提问。
二、内科基本技能考试操作项目1、心肺复苏2、穿脱隔离衣3、插胃管4、胸腔穿刺腹穿腰穿骨髓穿刺5、除颤仪的使用6、呼吸机使用7、心电图判读三、外科基本技能考试操作项目1、心肺复苏2、穿手术衣。
3、换药4、插胃管5、导尿6、胸腔穿刺、腹穿、腰穿7、中心静脉穿刺术8、开放性伤口的止血包扎9、脊柱损伤颈髓损伤胸腰椎骨折情况的搬运10、呼吸机使用11、气管插管四、妇产科基本技能考试操作项目1、心肺复苏2、穿手术衣3、换药4、插胃管5、导尿6、胸腔穿刺、腹穿、腰穿、中心静脉穿刺术(股静脉途径、下肢静脉切开)7、有/无创呼吸机使用8、气管插管术9、妇科盆腔检查10、四步触诊11、骨盆外侧量12、妇产科常见激素化验判读五、儿科基本技能考试操作项目1、心肺复苏2、穿脱隔离衣3、胸腔穿刺腹穿腰穿骨髓穿刺4、除颤仪的使用5、呼吸机使用6、气管插管7、水电解质平衡判读六、麻醉基本技能考试操作项目1、心肺复苏2、全身麻醉与气管插管术3、腰椎硬膜外联合麻醉术4、问题七、医学检验基本技能考试操作项目1、心肺复苏2、白细胞计数3. 尿沉渣有形成分显微镜检查4. 脑脊液细胞计数5. 骨髓涂片铁染色6、细菌革兰氏染色及形态识别7、血涂片细胞识别八、病理基本技能考试操作项目1、心肺复苏2、病理标本大体观察及取材3、病理标本接收、登记及处理4、常规病理切片诊断九、临床药学基本技能考试操作项目(一)心肺复苏(二)处方审核与发药交代1、处方调剂操作规程2、处方审核3、处方调剂判断4、药品采购入库5、问题:A型—16(三)咨询服务与用药宣传1、操作2、问题:B型—15(四)处方点评与医嘱用药分析1、操作2、问题:C型—121、操作2、问题:型—15十、医学影像专业基本技能考试操作项目(一)心肺复苏(二)X线报告描写内容及规范1、胸部X线报告2、心脏平片X线诊断报告3、腹部平片X线诊断报告4、立位片腹平片5、骨与关节外伤X线诊断报告6、关节病变X线诊断报告7、四肢长骨病变X线诊断报告8、脊柱病变X线诊断报告9、上胃肠道造影诊断报告(三)CT或MRI诊断报告1、颅脑与五官2、颈部CT或MRI诊断报告3、胸部CT诊断报告4、心脏CT或MRI诊断报告5、腹部CT或MRI诊断报告6、盆腔CT或MRI诊断报告7、脊柱、脊椎CT或MRI诊断报告:8、四肢关节、骨骼CT或MRI诊断报告:(四)上消化道气钡双对比造影技术造影方法与步骤1、一般准备2、检查步骤3、造影的具体要求十一、耳鼻喉专业基本技能考试操作项目1、心肺复苏2、气管切开3、鼓膜穿刺4、口咽部检查5、上颌窦穿刺十二、眼科专业基本技能考试操作项目1、泪道冲洗2、球后注射3、压陷或眼压计4、泪液破裂时间分泌实验5、房角镜检测6、心肺复苏十三、口腔专业基本技能考试操作项目1、后牙铸造全冠牙体预备(仿头模上)2、口腔一般检查(在口腔治疗椅上相互进行)3、磨牙复面洞制备术(在离体牙上)4、下颌磨牙拔除术(包括麻醉)5、牙列印模制取(考生相互在口腔治疗椅上制取)6、心肺复苏十四、精神专业基本技能考试操作项目1、心肺复苏(单人)2、精神检查(合作病人)。
医学检验专业实验基本技能操作重要性

医学检验专业实验基本技能操作重要性在医学检验专业中,实验基本技能操作是非常关键的。
实验基本技能操作能够帮助医学检验专业的学生掌握实验方法和实验技能,是医学检验专业学生在接受实验教育过程中必须掌握的一项基本技能。
本文将介绍医学检验专业实验基本技能操作的重要性,并探讨几个实验基本技能操作的实践意义。
实验基本技能操作的重要性实验基本技能操作是医学检验专业学生学习实验技能的基础。
通过实验基本技能操作,医学检验专业学生能够了解实验的基本操作流程和操作规范,从而掌握实验技术和实验方法。
实验基本技能操作还能够提高医学检验专业学生的实验能力和实验品质,使其能够更加准确地进行实验操作和判断实验结果。
实验基本技能操作在医学检验专业的实验教学中具有非常重要的意义。
医学检验专业的实验教学非常注重实践,实战经验越丰富的学生才能在实际的医学检验工作中更快更好地适应其中。
因此,实验基本技能操作是医学检验专业中实验教学的重点。
只有掌握了实验基本技能操作,并用实践经验加以练习和巩固,才能更好地理解和掌握医学检验专业的实验技术和实验方法。
实验基本技能操作的实践意义安全操作技能安全操作技能是实验基本技能操作中非常重要的一项。
在医学检验专业的实验工作中,安全始终是第一位的。
通过实验基本技能操作的学习,医学检验专业学生能够掌握实验室的安全规范和操作流程,减少实验中的安全事故发生,并在紧急情况下做出妥善处理。
掌握安全操作技能还能让医学检验专业学生在实验中减少浪费和错误,降低实验成本。
实验设备操作技能在医学检验专业中,实验设备的操作是实验基本技能操作中另一个非常重要的方面。
不同的实验设备需要不同的操作技能。
通过实验基本技能操作的学习,医学检验专业学生能够了解主要实验设备的基本操作方法,掌握实验设备的使用效果和使用效率,并为实验结果的准确性提供保证。
此外,掌握实验设备的操作技能还能够预防实验仪器设备的损坏,并保证实验仪器设备的使用寿命。
实验操作规范在医学检验专业的实验中,实验操作规范是非常重要的一项。
医学检验技术专业优质课常见检验项目解读与操作

医学检验技术专业优质课常见检验项目解读与操作随着医学的发展和进步,医学检验技术在临床诊断中发挥了重要作用。
作为医学检验技术专业的学生,了解和掌握常见检验项目的解读与操作是必不可少的基础知识。
本文将就一些常见的医学检验项目进行解读和操作说明,帮助学生更好地理解和应用这些技术。
一、血液检验项目1. 血常规检验血常规检验是评价机体内部环境的一项重要指标,包括红细胞计数、白细胞计数、血红蛋白浓度和血小板计数等项目。
操作时,需要采集患者的静脉血样本,通过自动血细胞分析仪进行计数和测定。
学生在进行血常规检验时,需要掌握采血技巧和正确操作流程。
2. 凝血功能检测凝血功能检测主要包括凝血时间、凝血酶原时间和部分凝血活酶时间等项目。
学生在进行凝血功能检测时,需要准确测量患者的凝血时间,并根据结果判断患者是否存在出血倾向或凝血异常。
操作时应注意标本采集的无菌操作和仪器的正确使用。
二、尿液检验项目1. 尿常规检查尿常规检查是评估肾脏功能和泌尿系统疾病的重要指标,包括尿液颜色、酸碱度、比重、蛋白质、糖、白细胞和红细胞等项目。
学生在进行尿常规检查时,需要正确收集患者的尿液样本,并通过尿液分析仪器进行检测和分析。
2. 尿蛋白定性与定量检测尿蛋白定性与定量检测是判断肾功能和尿路疾病的重要手段。
学生在进行尿蛋白检测时,需要掌握正确的尿液收集方法和操作步骤,准确测定尿液中的蛋白质含量,并通过结果判断患者肾功能是否正常。
三、生化检验项目1. 肝功能检测肝功能检测是评估肝脏健康状态的重要指标,包括血清谷丙转氨酶、血清谷草转氨酶、血清总胆红素和血清白蛋白等项目。
学生在进行肝功能检测时,需要正确采集患者的静脉血样本,并通过生化分析仪器进行测定和分析。
2. 肾功能检测肾功能检测是评估肾脏健康状态和排泄功能的重要指标,包括血清肌酐、尿素氮和血清尿酸等项目。
学生在进行肾功能检测时,需要正确采集患者的静脉血样本,并通过生化分析仪器进行测定和分析。
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红细胞计数
1、加稀释液取小试管1支,加红细胞稀释液2ml。
2、加血用清洁干燥微量吸管或一次性微量吸管采集末梢血或抗凝血10ul,擦去管外余血,
轻轻加至红细胞稀释液底部,再轻吸上清液清洗吸管2-3次,立即混匀。
3、充池混匀后用微量吸管或玻璃棒将红细胞悬液充入计数池,室温下平放3-5分钟,待
细胞下沉后于显微镜下计数。
4、计数用高倍镜依次计数中央大方格内4角和正中5个中方格内的红细胞。
5、计算
红细胞/L=N/200×1012/L
N:表示5个中方格内数得的红细胞数。
白细胞计数
1、加稀释液用吸管吸取白细胞稀释液0.38ml于小试管中。
2、吸取血液用微量吸管吸取新鲜全血或末梢血20ul,擦去管尖外部余血,将吸管插入小试管中白细胞稀释液的底部,轻轻放出血液,并吸取上层白细胞稀释液清洗吸管2-3次。
3、混匀将试管中血液与稀释液混匀,待细胞悬液完全变为棕褐色。
4、充池再次将小试管中的细胞悬液混匀。
用滴棒蘸取细胞悬液1滴,充入改良Neubauer 计数板的计数池中,室温静置2-3分钟,待白细胞完全下沉。
5、计数在低倍镜下计数四角4个大方格内的白细胞总数。
6、计算白细胞=4个大方格内白细胞数(N)/20×109/L
白细胞分类计数
1、将血涂片用瑞氏染液染色,冲洗干净,自然干燥后待用。
2、镜下观察低倍镜下观察白细胞的分布和染色情况。
3、观察选择血涂片体尾交界处细胞分布均匀、着色良好的区域,按一定的方向顺序对所见到的每1个白细胞进行分类,并用白细胞分类计数器作好记录,共计数100个白细胞。
计算求出各类细胞所占的百分比率。
血涂片的制备和瑞氏染色
1、采血:用微量吸管在距载玻片一端1cm处加1滴抗凝血。
2、推片:左手平执载波片,右手持推片从后方或前方接近血滴,使血液沿推片边缘展开成适当的宽度,立即将推片与载波片呈30度到45度角,轻压推片边缘将血液推制成厚薄适宜的血涂片,血涂片应呈舌、头、尾三部分。
3、干燥:将推好的血涂片在空气中晃动,使其迅速干燥。
4、标记:在载玻片的一端用记号笔编号。
5、染色:血涂片自然干燥后,用蜡笔在两端画线,以防染色时染液外溢。
随后将玻片平置于染色架上,滴加染液3-5滴,使其盖满血涂片,大约1分钟后,滴加等量或稍多的II液,用吸耳球轻轻混匀。
6、冲洗:1分钟后,用流水冲去染液,待干。
7、观察结果:将干燥后的血涂片置显微镜下观察。
用低倍镜观察血涂片体尾交界处的血细胞。
ABO血型鉴定
(一)正定型法
1、5%被检红细胞生理盐水悬液制备抗凝血离心或红细胞自然沉降后取下层红细胞2 滴于小试管中,加入生理盐水2 ml ,用尖滴管将红细胞与生理盐水充分混匀,2500r/min 离心3分钟后弃去上清液,重复洗涤三次后自管底吸取1滴血红细胞加入19滴生理盐水中,此即为5%的红细胞生理盐水悬液。
2、标记试管取小试管2 支,分别标记抗A、抗B。
3、加标准抗血清分别加入抗A、抗B标准血清各1滴于相应标记的试管中。
4、加入红细胞悬液分别加入被检者5%红细胞生理盐水悬液1滴于各试管中,混匀,立即以1000r/min,离心1min。
5、观察结果先观察上层液有无溶血现象,再斜持试管轻轻摇动或轻轻弹动,使管底的红细胞慢慢浮起,肉眼观察有无凝集、再用低倍镜观察凝集强弱程度,如轻微凝集或不见凝集,必须将反应物倒于玻片上,再以低倍镜观察。
6、判断结果
(1)凝集结果判断标准:红细胞呈均匀分布,无凝集颗粒,显微镜下红细胞分散存在,无凝集靠拢现象为阴性;红细胞出现凝集为阳性。
(二)反定型法
1、分离血清 2500r/min,离心3min,分离血清。
2、标记并加被检者血清取小试管3支,分别标记A、B、O 字样,于各管加入被检者血清1滴。
3、加标准红细胞按标记分别加入5%的A、B、O型标准红细胞生理盐水悬液1滴,混匀,立即以1000r/min,离心1min。
4、观察结果先观察上层液有无溶血现象,再斜持试管轻轻摇动或轻轻弹动,肉眼观察有无凝集,再用低倍镜观察。
5、判断结果
6、凝集结果判断标准:同正定型法。
网织红细胞计数
1、加染液取煌焦油蓝生理盐水溶液 2 滴,再加入新鲜全血 2 滴,立即混匀,置室温下15-20分钟。
2、制备涂片取1 小滴制成薄血涂片,自然干燥。
3、观察在低倍镜下选择红细胞分布均匀的部位进行观察。
4、计数在油镜下计数至少1000个红细胞中的网织红细胞数。
5、计算网织红细胞分数数=计数的网红细胞数/1000
尿蛋白定性检查(加热乙酸法)
1、加尿液取大试管1支,各加清晰尿液5ml。
2、加热倾斜试管下端,在酒精灯上加热尿液上1/3段,煮沸即止。
3、观察轻轻直立试管,在黑色背景下观察煮沸部分有无浑浊。
4、加酸后再加热滴加5%的乙酸溶液2-4滴,再煮沸后立即观察结果。
,
5、判断结果判断阳性程度及蛋白质的含量。
革兰染色
1 制玻片用接种环挑取一环生理盐水放在载玻片中央,再挑取一环菌种放入生理盐水中涂片。
2 固定将涂片在火焰外焰上过2-3回,放凉。
3 初染滴加结晶紫染色液,染1min,冲洗,甩干。
4 媒染滴加革兰氏碘液,作用1min,冲洗,甩干。
5 脱色滴加95%酒精脱色,约30s,或将酒精滴满整个涂片,立即倾去,再用酒精滴满整个涂片,脱色10s,冲洗,甩干。
6复染滴加复染液,复染30s,冲洗,甩干,镜检。
抗酸染色
1)初染
用玻片夹夹持涂片标本,滴加石炭酸复红2-3滴,在火焰高处徐徐加热,切勿沸腾,出现蒸汽即暂时离开,若染液蒸发减少,应再加染液,以免干涸,加热3-5分钟,待标本冷却后用水冲洗。
2)脱色
3%盐酸酒精脱色30秒~1分钟;用水冲洗。
3)复染
用碱性美兰溶液复染1分钟,水洗,用吸水纸吸干后用油镜观察。
药敏实验
1在“超净台”中,用经(酒精灯)火焰灭菌的接种环挑取适量细菌培养物,以划线方式将细菌涂布到平皿培养基上。
具体方式;用灭菌接种环取适量细菌分别在平皿边缘相对四点涂菌,以每点开始划线涂菌至平皿的1/2。
然后,找到第二点划线至平皿的1/2,依次划线,直至细菌均匀密布于平皿。
(另:可挑取待试细菌于少量生理盐水中制成细菌混悬液,用灭菌棉拭子将待检细菌混悬液涂布于平皿培养基表面。
要求涂布均匀致密)
2将镊子于酒精灯火焰灭菌后略停,取药敏片贴到平皿培养基表面。
为了使药敏片与培养基紧密相贴,可用镊子轻按几下药敏片。
为了使能准确的观察结果,要求药敏片能有规律的分布于平皿培养基上;一般可在平皿中央贴一片,外周可等距离贴若干片(外周一般可贴七片),每种药敏片的名称要记住。
3将平皿培养基置于37℃温箱中培养24小时后,观察效果。
琼脂平板分区划线分离法
(1)灭菌接种环,待冷,取1环葡萄球菌和大肠埃希菌的混合菌液。
(2)琼脂平板倒放于桌面,左手抓握起平板底部,尽量直立使琼脂面靠近酒精灯火焰,以免杂菌污染。
右手持沾菌接种环在平板表面上端来回划线,涂成一薄膜(第1区,约占平板面积的1/5)。
划线时接种环与琼脂表面呈30°~45°,用指力轻轻来回滑动密集划线,切忌划破琼脂。
(3)灭菌接种环,杀死环上剩余的细菌,待冷,转动培养皿约60°~70°,将接种环通过第1区3~4次,作连续划线为第2区,约占平板面积1/4,待冷划第3、4区(图1-3-1)。
(4)划线完毕,盖好皿盖,在平板底部用记号笔注明标本(细菌)名称,接种日期及接种者,平板倒置于35℃~37℃温箱培养24h。
(5)取出平板观察菌落分布情况,注意3区和4区是否有单个菌落,并记录菌落的大小、形状、色泽、边缘、透明度等特征(图1-3-2)。